Nghiên cứu động thái Proline ở đậu côve (phaseolus vulgaris L.) trong điều kiện gây hạn ở các giai đoạn sinh trưởng khác nhau

1 Bộ giáo dục đào tạo Trường đại học sư phạm hà nội Ngô Thị xuyến Nghiên cứu động thái proline đậu cô ve (Phaseolus vulgaris L.) điều kiện gây hạn giai đoạn sinh trưởng khác Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60.42.30 Luận văn thạc sĩ sinh học Người hướng dẫn khoa học Pgs.ts nguyễn văn mã Hà nội, 2009 LI CM N hon thnh ti lun ny, em xin by t lũng kớnh trng v bit n sõu sc ti thy giỏo, PGS.TS Nguyn Vn Mó, ngi ó tn tỡnh hng dn v giỳp , to mi iu kin thun li cho em sut thi gian thc hin ti lun ny Em xin gi li cm n chõn thnh n Khoa Sinh KTNN v Trung tõm h tr v chuyn giao cụng ngh trng i hc S phm H Ni II, Phũng thc hnh b mụn sinh lý thc vt ó to iu kin v trang thit b tụi thc hin tt ti ny Tụi xin chõn thnh cm n gia ỡnh, bn bố ó ng viờn khớch l v giỳp tụi sut thi gian hc v thc hin lun H Ni, thỏng nm 2009 Tỏc gi Ngụ Th Xuyn PHN M U Lý chn ti u cụ ve cú tờn khoa hc l Phaseolus vulgaris (L.) l cõy h u (Fabaceae) u cụ ve c trng rng rói trờn khp th gii, cú ngun gc t Trung M v c trng cỏch õy hn 600 nm Chõu u cụ ve c s dng nhiu bi nú cú giỏ tr dinh dng cao, l mt nhng loi rau giu protein cha khong 2,5% m qu non, 0,2% cht bộo, 7% cht ng bt [26] Qu ti giu vitamin A v C, cú th dựng n ti, úng hp v ụng lnh mt vi quc gia Chõu nh n , Min in, Nepal, Sri-Lanca, Bangladesh s dng ht khụ ca u cụ ve cỏc ba n kiờng u cụ ve l mt nhng loi hoa mu thớch nghi h thng luõn canh vi lỳa Trong cỏc loi u rau thỡ u cụ ve l quan trng bc nht bi vỡ c phõn b rng khp v sn lng tng i ln cú tim nng l ngun thu nhp vi cỏc nụng h nh u cụ ve cũn l ngun cung cp vitamin v cht khoỏng phong phỳ cỏc loi thc phm hng ngy Ngoi ra, u cụ ve cũn cú tớnh cht ci to t, gúp phn tng nng sut v cht lng cỏc cõy trng khỏc u cụ ve cú c tớnh chung l cõy a khớ hu mỏt, ma ớt, nu thi tit nng núng s cho ớt qu c bit, nu gp hn vo giai on hoa, vic u qu v nng sut s gim ỏng k Hn gõy s thiu nc thc vt, cú th nhit quỏ thp hay nng dch t quỏ cao, m quỏ thp hay nhit cao, giú mnh Do ú, hn gõy tỏc ng xu n s sinh trng v phỏt trin ca cõy u cụ ve núi riờng v cõy trng núi chung, lm gim nng sut v phm cht ht Di nh hng ca hn hỏn, tip tc thớch nghi thc vt phi cú c ch bo v t bo, n nh sc trng nhm chng li s mt nc hn hỏn gõy Mt nhng c ch iu chnh ỏp lc ni ti l s tớch ly cỏc cht tan thớch hp cú kh nng to ỏp sut thm thu t bo, cỏc cht ny bao gm nhúm cỏc axit amin, cỏc hp cht amụn bc 4, hp cht sunfonium bc Theo kt qu nghiờn cu nhiu tỏc gi (Bựi Huy Thin (1979) [25] Chen T.H, Murata N (2002) [31]; Delauley A.J and Verma DPS (1993); Ketchum R.E.B et al(1991) [34]) s tớch ly proline s ng tớnh chu stress nc Proline c xem nh mt cht ch th v kh nng chu hn ca thc vt Vỡ vy, s tớch ly proline l biu hin ca phn ng thớch nghi ca thc vt b stress nc Cỏc cụng trỡnh nghiờn cu Vit Nam v trờn th gii v vai trũ ca proline tớnh chu hn u thng nht quan im cho rng proline l cht ch th v kh nng chu hn ca thc vt [7][25] [29][31][34][35][37][40] Tuy nhiờn, i sõu vo nghiờn cu s bin ng hm lng proline i tng cõy u cụ ve quỏ trỡnh gõy hn thỡ cho n cha cú ti liu no cụng b Vỡ nhng lớ trờn, chỳng tụi tin hnh ti Nghiờn cu ng thỏi hm lng proline cõy u cụ ve (Phaseolus vulgaris) iu kin gõy hn cỏc giai on sinh trng khỏc Mc ớch nghiờn cu Nghiờn cu tỏc ng ca gõy hn n s bin ng proline lỏ v r ca u cụ ve So sỏnh mc bin thiờn gia pha gõy hn v pha hi phc So sỏnh proline cỏc thi k khỏc gõy hn Nghiờn cu nh hng ca hn n mt s ch tiờu nng sut v cht lng ht Nhim v nghiờn cu Nghiờn cu s bin ng hm lng proline cỏc giai on khỏc v cỏc pha khỏc gõy hn i tng v phm vi nghiờn cu Nghiờn cu c tin hnh trờn i tng l cõy u cụ ve A Phng phỏp nghiờn cu Phng phỏp thc nghim trờn ng rung Gi thuyt khoa hc Proline c xem nh cht ch th v kh nng chu hn ca thc vt, nú cú vai trũ nh cht bo v t bo cõy b hn Vỡ vy, cõy b hn hm lng proline s bin ng theo mt quy lut nht nh Hm lng cú th t cao nht vo mt thi im no ú t bo cú kh nng trao i cht bỡnh thng cỏc giai on sinh trng khỏc b hn, s tớch ly v bin ng proline l khỏc NI DUNG Chng TNG QUAN TI LIU 1.1 c tớnh sinh hc v nhu cu v nc ca u cụ ve 1.1.1 c tớnh sinh hc u cụ ve l cõy mt nm, thõn tho, r chớnh phỏt trin tt, r ph cú nhiu nt sn trung sõu khong 20cm B r cú rt nhiu vi khun c nh m t khớ tri nuụi cõy nờn khụng yờu cu bún nhiu phõn m Cõy u cú th trng c trờn t thiu m, sau cõy cht m vi khun c nh c hon tr li cho t [11] [26] Thõn cú dng: thõn sinh trng hu hn v thõn sinh trng vụ hn Thõn sinh trng hu hn (u lựn) cao 30-60 cm, gii hn bi chựm hoa ngn, cõy ớt nhỏnh, thi gian sinh trng ngn, cho thu hoch ớt la Thõn sinh trng vụ hn (u leo): thõn tip tc mc di sau tr hoa, di 2-7m, khụng cú chựm hoa ngn, nhỏnh phỏt trin mnh nỏch lỏ, thi gian sinh trng di, thu hoch nhiu la Lỏ kộp cú lỏ ph vi cun di, mt lỏ cú ớt lụng t Chựm hoa mc nỏch lỏ trung bỡnh cú 2-8 hoa Sau trng 35-40 ngy ó cú hoa n, hoa lng tớnh t th phn khong 95% nờn vic ging rt d dng Hoa cú cỏnh ri gm cỏnh c to phớa sau v cỏnh bm bờn, cỏnh ln nh phớa trc, nh c gm dớnh v ri, nhy cỏi vi vũi nhy ngn Chựm hoa xut hin cõy cú khong 4-8 t, hoa tng t Qu n ti thu hoch t 13-15 ngy sau hoa n Qu non cú mu xanh chớn cú mu vng nõu, cú mt tõm bỡ Qu khụ khụng t m m góy thnh khỳc, mi khỳc cha mt ht Ht to, hỡnh bu dc, trng lng 1000 ht t 650-1000g 1.1.2 Nhu cu v nc Nc va l sn phm u, trung gian v cui cựng ca cỏc quỏ trỡnh chuyn húa, va l mụi trng cỏc phn ng trao i cht xy Mc thiu ht nc cng ln thỡ cng nh hng n quỏ trỡnh sinh trng v phỏt trin ca cõy: thiu nc nh lm gim tc sinh trng, thiu trm trng thỡ dn n bin i h keo nguyờn sinh cht, tng quỏ trỡnh gi húa t bo Khi b khụ kit nc nguyờn sinh cht b t v c hc dn n t bo, mụ b tn thng v cht [26] Cõy h u núi chung tiờu hao khỏ nhiu nc Thi kỡ ũi hi nc nhiu nht l lỳc ny mm, cõy hoa v cú qu non Giai on ny mm cn t 100150% so vi trng lng ht Trong thi kỡ hoa v u qu nu khụng cung cp y nc cho cõy s to iu kin hỡnh thnh tng ri cung hoa, lm cho hoa rng Thiu nc cõy cũi cc, thu hoch ớt la, qu nh nhiu x, nng sut v phm cht u kộm nhng vựng khụ hn bin phỏp ti phun ma v ti rónh vo thi kỡ ny lm tng nng sut ca cõy rt rừ Tuy nhiờn, nc t quỏ nhiu s lm cn tr quỏ trỡnh hụ hp ca h r, lm cho sc hỳt dinh dng v sc hỳt nc ca h r b cn tr, quỏ trỡnh trao i cht ca cõy gp khú khn, r b thi Nc nhiu t cũn gõy tr ngi cho hot ng ca nhúm vi sinh vt hiu khớ Tha nc lm cho hoa v qu non rng nhiu, cõy d mc bnh nh hng ca thiu nc n tng giai on sinh trng cng khỏc nhau, thiu nc giai on hoa lm gim nng sut, thiu nc giai on hỡnh thnh qu s nh hng n nng sut v phm cht ht 1.2 Hn v tỡnh hỡnh nghiờn cu tớnh chu hn cõy h u 1.2.1 Hn Hn i vi thc vt l khỏi nim ch s thiu nc ca thc vt mụi trng gõy nờn sut quỏ trỡnh hay tng giai on Do thiu nc, lng nc cõy hỳt vo khụng bự p lng nc bay hi i qua cỏc b phn trờn mt t, lm cho cõy mt cõn bng nc v b hộo [12] Mc tn thng hn gõy cng khỏc nhau: phỏt trin bỡnh thng, chm phỏt trin thm gõy cht Nhng cõy trng cú kh nng trỡ s phỏt trin v cho nng sut tng i n nh iu kin khụ hn l cõy chu hn v kh nng thc vt cú th gim thiu mc tn thng thiu ht nc gõy gi l tớnh chu hn Hn l yu t quan trng bc nht nh hng n an ton lng thc ca th gii v iu ny ó tng xy quỏ kh Ti nguyờn nc phc v cho nụng nghip khụng phi l vụ tn nhu cu nc phc v cho dõn sinh v phỏt trin cụng nghip ang ngy cng tng lờn Do ú khan him nc phc v cho nụng nghip ang c d bỏo rt cp thit trờn quy mụ ton cu Hn c xem nh l mt hu qu nghiờm trng ca s suy gim ngun nc Bt kỡ mt loi cõy trng no cng phi cn cú nc trỡ s sng, sinh trng v phỏt trin Mc cn nc ph thuc vo tng loi cõy v tng giai on khỏc s phỏt trin ca chỳng 1.2.1.1 Cỏc loi hn i vi thc vt * Hn khụng khớ xy cõy gp m khụng khớ thp di 65% lm quỏ trỡnh thoỏt hi nc ca cõy quỏ mnh dn n cõy mt cõn bng nc Hin tng ny thng gp nhng tnh Trung nc ta vo nhng t giú Lo v vựng Bc b vo cui thu u ụng, mt s nc khỏc hin tng ny cng nh hng n cỏc cõy trng nh u tng, cam, chanh, phong lan [22] Hn khụng khớ núi chung nh hng n cỏc b phn trờn mt t ca cõy, gõy hin tng hộo tm thi Hn khụng khớ gõy hi nht giai on ny mm v giai on hoa, lm cho ht phn khụng ny mm m khụ cht, quỏ trỡnh th tinh khụng xy lm cho qu khụng hỡnh thnh * Hn t xy lng nc d tr cho cõy hp thu t b cn kit nờn cõy khụng hỳt nc v mt cõn bng nc Hin tng ny thng xy vi cỏc vựng cú lng ma trung bỡnh rt thp v kộo di nhiu thỏng nm * Hn sinh lý xy trng thỏi sinh lý ca cõy khụng cho phộp cõy hỳt nc mc dự mụi trng khụng thiu nc, r khụng ly c nc nhng quỏ trỡnh bay hi nc din nờn cõy mt cõn bng nc Vớ d, t ym khớ thiu oxi cho r hụ hp nờn thiu nng lng cho cõy hỳt nc, hay nng dung dch t quỏ cao lm cho ỏp sut thm thu ca t tng lờn cao lm cho cõy khụng hỳt c nc ca t vo r Mc hn ph thuc vo s bc hi trờn b mt v kh nng gi nc ca t Loi hn ny thng gõy hin tng hộo lõu di v cú th xy bt c vựng no hay gp nhng vựng cú khớ hu, a hỡnh c thự nh sa mc Chõu Phi, t trng i trc Chõu , ớt ma v nhit thp Chõu u Hn tỏc ng trc tip vo h thng r ca cõy, gõy nh hng n quỏ trỡnh sinh trng v phỏt trin ca cõy Khi cú c hn t v hn khụng khớ xy cựng mt lỳc Do ú, cõy mt nc mnh, lm cho nng dch bo tng nhanh, dn n cõy thng b hộo vnh vin khụng cú kh nng phc hi 1.2.1.2 Tớnh chu hn thc vt Tớnh chu hn l kh nng chng chu c vi s thiu nc ca cõy, hin tng mt nc cõy cú th tỏc ng s cp thiu nc t hoc cú th s tỏc ng th cp c gõy nờn bi nhit cao hay thp, tỏc ng ca mui v nhiu yu t khỏc 10 Cng nh cỏc loi cõy trng khỏc, nhng ging u tng chu hn tt chng li hoc hn ch s mt nc bng nhng bin i v hỡnh thỏi hay nhng phn ng sinh húa phự hp C th thc vt ó s dng rt nhiu kh nng cú th tip xỳc vi nhng iu kin mụi trng khụng thun li Trong s ph thuc vo cỏc yu t tỏc ng nh thi gian tỏc ng, cng tỏc ng, thc vt cú nhiu s thớch nghi c bit nh l s to thnh mt h thng r rng ln, s chng chu khụ hn ca lỏ bng cỏch lm gim din tớch lỏ, hay gim s thoỏt hi nc qua mng cuticun, úng li ca khớ khng, tng cng dn nc, to thnh nhng kho cha nc, hỡnh thnh tuyn mui Ngoi ra, cng nhn thy cú c s bin i ca cỏc cht c th thc vt nh s trung ca cỏc cht hũa tan Cú hai c ch bo v ca thc vt chng li s mt nc l c ch trỏnh mt nc v c ch chu mt nc Trỏnh mt nc ph thuc vo s thớch nghi c bit v hỡnh thỏi v cu trỳc ca r nhm gim thiu s mt nc B r khe l mt iu kin tng tớnh chu hn ca cõy, cỏc r ph vi b mt lụng hỳt phỏt trin mnh cú kh nng gi m cho cõy lõu hn [26] Din tớch lỏ ca cõy gim gp hn l phn ng nhm gim thiu s thoỏt hi nc lỏ [36] Do vy, cng nh nhiu cõy trng khỏc, u cụ ve cựng vi nhng thay i v hỡnh thỏi, cỏc phn ng sinh lý v hụ hp, quang hp, cng thoỏt hi nc ca u cụ ve cng thay i theo hng gim thiu phự hp vi s gim th nc lỏ cõy b hn Thụng thng phn ng ca cõy gp hn l khớ khng úng li ngn chn s thoỏt hi nc ngoi Quỏ trỡnh úng m khớ khng liờn quan n hng lot cỏc quỏ trỡnh khỏc nh quang hp, hụ hp, trao i ion, hp thu 57 * Hn t xy lng nc d tr cho cõy hp thu t b cn kit nờn cõy khụng hỳt nc v mt cõn bng nc * Hn sinh lý xy trng thỏi sinh lý ca cõy khụng cho phộp cõy hỳt nc mc dự mụi trng khụng thiu nc, r khụng ly c nc nhng quỏ trỡnh bay hi nc din nờn cõy mt cõn bng nc 1.2.1.2 Tớnh chu hn thc vt C ch t iu chnh ỏp sut thm thu ni bo thụng qua tớch ly cỏc cht hũa tan, cỏc protein v axit amin, vớ d nh proline, mannitol, fructan, glyxin betain v K+, cỏc enzym phõn hy cỏc gc t nhm trỡ lng nc ti thiu t bo, c ch chu mt nc liờn quan n nhng thay i húa sinh t bo nhm sinh tng hp cỏc cht bo v hoc nhanh chúng bự li s thiu ht nc Hu ht thc vt sng iu kin bỡnh thng cú hm lng proline rt nh t bo v cỏc t chc Nhng di nh hng ca iu kin khc nghit nh hn hỏn, thc vt sng ó th hin rừ rng s bin i s trao i cht ca ca cỏc aminoaxit, c bit l cỏc aminoaxit t nh: alanin, glutamin, asparagin, proline ú proline chim trờn 50% ca hm lng tt c cỏc aminoaxit núi trờn Ngi ta cng tỡm thy s tng proline thc vt di nh hng ca thiu ht nc t, s trung proline ó c chỳ ý ti khụng ch thc vt chu mn m cũn cú th nhn thy tt c cỏc thc vt cú s mt nc 1.2.2 Tỡnh hỡnh nghiờn cu tớnh chu hn ca cỏc cõy h u Trong nhng nm qua cú nhiu cụng trỡnh nghiờn cu v tớnh chu hn ca cõy trng nh cõy lỳa, ngụ, lc, c chua, u tng, u xanh Nhng nghiờn cu trờn nhiu i tng cõy trng i sõu vo nhiu lnh vc khỏc gúp phn lm phong phỳ thờm v nhng ng dng thc tin to ging cõy trng cú bn cht chu hn tt, thớch nghi vi iu kin sinh thỏi nụng nghip a dng Cỏc nghiờn cu ó i sõu vo cỏc ni dung nh: phng tin hỡnh thỏi, di truyn chn ging, sinh hc phõn t Theo hng tuyn chn cỏc ging chu hn, Trung tõm nghiờn cu v phỏt triờn rau Chõu (AVRDC) t nm 1986 ó tin hnh vi quy mụ ln nht s kt hp iu kin nh kớnh v iu kin ng rung nhng ni xy hn t nhiờn in hỡnh nht, kt qu cho i nhiu ging u chu hn tt Vic ỏnh giỏ v tuyn chn ging u xanh cú kh nng chu hn tt tng v thớch hp cng c tin hnh bi Trung tõm nghiờn cu cõy trng Chinat (Thỏi Lan) Ti Trung tõm Nghiờn cu v Thc nghim u , Vin Khoa hc k thut Nụng nghip Vit Nam cõy u tng nhp ni v mt s ging a phng ó c ỏnh giỏ kh nng chu hn Phng phỏp ỏnh giỏ giỏn tip s b chn ging chu hn cho kt qu chu hn tt nhng nng sut khụng cao, ngc li mt s ging a phng cú nng sut cao nhng cht lng ht kộm (vớ d nh: Xanh Bc H, Khõm c) Mt s ging u tng chn to bng phng phỏp t bin cú cht lng ht tt, nng sut cao, kớch thc v mu sc ht cú giỏ tr 58 thng phm cao ó v ang c a vo sn xut i tr nh DT 84, DT 96) Bờn cnh cỏc phng phỏp chn to ging k trờn, vi s tr giỳp ca cỏc phng tin thit b hin i nhiu nghiờn cu sõu hn v tớnh chu hn ó c tin hnh Cỏc nghiờn cu v hunh quang dip lc, cng quang hp, hm lng proline cho phộp ỏnh giỏ nhanh kh nng chu hn ca cõy Trong iu kin bt li kh nng chu hn ca cỏc ging th hin qua s bin i cỏc tham s Fo, Fm, v Fv/m o hunh quang dip lc, cng quang hp ca cõy cng thay i cõy gp hn, hm lng proline bin ng cõy gp hn Da vo s thay i ca cỏc ch tiờu ny cú th ỏnh giỏ mc chu hn ca cõy trng 1.3 Proline v vai trũ ca proline i vi tớnh chu hn ca thc vt Proline hay -pirolidin cacboxylic l mt - iminoaxit a nc cú cụng thc phõn t C3H9NO2, cú mch bờn l hidrocacbua khỏc vi cỏc axit amin khỏc ch cú nhúm amin bc C liờn kt vi C mch bờn to thnh vũng pirolidin Proline c tng hp t L-glutamat bi enzym chỡa khúa -pyrrolin-cacboxylatsynthetaza (P5CS), enzym ny c iu hũa bi prụlin thụng qua c ch c ch ngc Thc vt chu stress nc, s iu hũa ngc ny ó bin mt v õy cú th l nguyờn nhõn lm tng tớch ly prụlin di cỏc iu kin stress Phõn t proline cú cu trỳc vũng, cu trỳc ny to cho proline mt hỡnh dỏng vng chc hn cỏc axit amin khỏc Nh vy, vai trũ proline chng chu stress nc thc vt th hin vic proline tham gia iu chnh ỏp sut thm thu ni bo v tham gia vo cu trỳc bo v mng t bo v protein S tớch ly proline l mt phun ng chuyn húa thụng thng thc vt iu kin thiu ht nc õy l ch c cỏc nh khoa hc nghiờn cu hn 20 nm qua Proline c tớch ly mụ lỏ, mụ phõn sinh chúp r c rốn luyn iu kin stress nc, tớch ly ht phn b lm khụ, vựng chúp r ang sinh trng ni th nng nc thp v nhng t bo thc vt nuụi cy huyn phự ó thớch nghi vi stress nc hay stress mui Chng 2: I TNG V PHNG PHP NGHIấN CU 2.1 i tng nghiờn cu Nghiờn cu c tin hnh trờn i tng l cõy u cụ ve A 2.2 B trớ thớ nghim Thớ nghim trng cõy chu: Chu cú kớch thc 30 40 cm, mi chu gieo 20 ht Ht c trng cỏc chu thớ nghim Chia cỏc chu thớ nghim lm cụng thc thớ nghim (CTTN): lụ i chng (C), lụ gõy hn thi k cõy non, lụ gõy hn thi k hoa, lụ gõy hn thi k qu non Mi CTTN c nhc li ln m bo ch chm súc ng u n ngy th 14-15 sau gieo, lỏ mm rng i, cõy thc s bt u cuc sng t dng (khi cõy cú 3-5 lỏ tht) sau ú tin hnh gõy hn Phng phỏp gõy hn: lụ i chng c ti nc bỡnh thng, lụ thớ nghim 59 khụng c ti nc v cỏch ly vi nc ma cho n ụi lỏ di cựng ca cõy cú triu chng hộo Trong quỏ trỡnh gõy hn tin hnh thu mu (ly lỏ th t nh sinh trng) vo bui sỏng 8h, õy l lỏ trng thnh ca cõy thc hin y chc nng quang hp, sinh tng hp v chuyn húa cỏc cht cho cõy Sau ú tin hnh xỏc nh hm lng proline giai on chun b hoa, tin hnh gõy hn v xỏc nh ch tiờu tng t nh giai on cõy non Khi qu chớn, thu hoch ly s liu v cỏc yu t cu thnh nng sut v ch tiờu v cht lng ht 2.3 Thi gian v a im nghiờn cu Thi gian nghiờn cu: t thỏng n thỏng nm 2009 a im nghiờn cu c tin hnh ti Trung tõm h tr nghiờn cu khoa hc v chuyn giao cụng ngh v khu nh li thớ nghim thuc khoa Sinh KTNN trng i hc S phm H Ni 2.4 Phng phỏp phõn tớch cỏc ch tiờu 2.4.1 Hm lng proline * Xỏc nh hm lng proline theo phng phỏp ca Bates v cng s (1973) v ci tin ca inh Th Phũng 2.4.2 Cỏc yu t cu thnh nng sut Trong ti ny chỳng tụi tin hnh nghiờn cu mt s yu t cu thnh nng sut l: chiu di qu; s qu/cõy; trng lng 100 ht Bng cỏch o v m trc tip, cõn trờn cõn in Satorius Mi cụng thc nhc li 10 ln 2.4.3 Hm lng nit tng s ca ht Xỏc nh hm lng nit tng s bng phng phỏp Microkjeldahl trờn mỏy ct m t ng vi h thng chng ct UDK 142 v b cụng phỏ mu DK6 ca hóng VELP-Italia Hm lng nit tng s c tớnh theo hm lng HCl dựng chun n v l mg/l (1ml HCl 0,2N = 2,803 mg N NH4 cú mu) 2.5 Phng phỏp x lý s liu thng kờ Cỏc kt qu nghiờn cu c x lý v ỏnh giỏ theo phng phỏp toỏn thng kờ sinh hc Chng KT QU NGHIấN CU V THO LUN 3.1 ng thỏi hm lng proline cõy u cụ ve iu kin gõy hn 3.1.1 S bin ng hm lng proline lỏ v r u cụ ve quỏ trỡnh gõy hn giai on cõy 3.1.1.1 S bin ng hm lng proline lỏ Kt qu xỏc nh hm lng axit proline lỏ u cụ ve c trỡnh by bng 3.1 v hỡnh 3.1 60 Bng 3.1 Hm lng proline lỏ u cụ ve quỏ trỡnh gõy hn giai on cõy n v: mg/g GY HN Pha Ngy a Lỏ thớ nghim 0.59 0.03 0.620.03 a 0.780.04 b 125.81* 0.590.04 a 1.020.04 c 172.88* 0.640.04 a 1.280.03 d 200.00* 0.580.04 a 1.480.06 d 255.17* 0.680.03 a 1.470.03 d 219.12* 0.650.05 a 1.030.05 c 158.46* 0.610.03 a 0.730.03 b 119.67 0.640.04 a 0.610.03 a 95.31 0.610.04 a 0.600.03 a 98.36 10 0.630.04 % So C a HI PHC Lỏ i chng 106.78 Kt qu cho thy iu kin cung cp nc, hm lng proline ớt bin ng, ch dao ng khong t 0,58 n 0,68 Qua x lý thng kờ cho thy s sai khỏc ny khụng cú ý ngha thng kờ Tuy nhiờn, iu kin thiu nc hm lng proline lỏ thớ nghim hu nh cao hn lỏ i chng Nhỡn chung ton b quỏ trỡnh gõy hn proline cú s thay i khỏ rừ rng, biờn dao ng ln hn lỏ i chng, giỏ tr dao ng t 0,60 n 1,48 c bit, ngy u ca quỏ trỡnh gõy hn lỏ thớ nghim proline tng lờn khụng ln, nhng n ngy th 2, 3, proline tng nhanh v t cc i vo ngy gõy hn cui (ngy th 5) t 255,17% so vi C Sau ú, ti nc tr li, cõy nhanh chúng hi phc Hm lng proline ngy th t cao (219,12%), nhng sau ú gim nhanh chúng, t ngy th sang ngy th gim t 219,12 % cũn 158,46% n ngy th t gn nh tr v ban u (119,67%) v t giỏ tr thp nht vo ngy th ca quỏ trỡnh gõy hn (95,31%) ri sau ú cng khụng tip tc gim hn na Khi yu t hn tng thỡ hm lng proline lỏ cõy cng tng, hn gim thỡ proline lỏ cng gim, cho thy kh nng tớch ly proline ca lỏ t l thun vi quỏ trỡnh gõy hn: Proline giỳp lỏ tng cng kh nng chng chu mt nc ca t bo v bo v cu trỳc b mỏy quang hp ca lỏ b hn Trong quỏ trỡnh chng chu vi iu kin thiu nc s hỡnh thnh, tớch ly v phõn gii proline lỏ ó phn ỏnh kh nng chu hn ca cõy, proline c hỡnh thnh cao nht cõy b hn nng Khi cõy hi phc, proline c phõn gii lm h thp hm lng lỏ cõy 3.1.1.2 S bin ng hm lng proline r Kt qu xỏc nh hm lng proline r ca u cụ ve tin hnh nghiờn cu 61 giai on cõy c trỡnh by bng 3.2 v hỡnh 3.2 Bng 3.2 Hm lng proline r u cụ ve quỏ trỡnh gõy hn giai on cõy n v: mg/g Pha Ngy GY HN HI PHC 10 R i chng 1.490.03 a 1.530.04 a 1.530.03 a 1.530.05 a 1.50.04 R thớ nghim a 1.490.04 a 1.560.04 a 1.480.03 a 1.510.02 a 1.520.04 a % So C 1.520.05 a 102.01 1.680.03 b 109.80* 1.810.04 c 118.30* 1.990.04 d 130.07* 2.170.03 e 144.67* 2.100.03 e 140.94* 1.850.04 c 118.59* 1.650.03 b 111.49* 1.590.05 a 105.3 1.510.05 a 99.34 Kt qu cho thy, iu kin cung cp nc hm lng proline r cú bin ng nhng khụng ln, ch dao ng t 1,49 n 1,56, thm cú nhng ngy khụng b bin i S sai khỏc v hm lng proline i chng khụng cú ý ngha thng kờ Tuy nhiờn, xột trờn r thớ nghim, hu nh tt c cỏc ngy gõy hn hm lng proline u cao hn so vi i chng, dao ng ln t 1,51 n 2,17 t giỏ tr t 99,34% n 144,67 % so vi i chng c bit quỏ trỡnh gõy hn hm lng proline tng lờn nhanh chúng vo cỏc ngy th t th n th ca quỏ trỡnh gõy hn S tng lờn ny chng t, gp hn r u cụ ve cú kh nng phn ng mnh m vi iu kin cung cp nc khú khn, s gia tng proline r thớ nghim gúp phn lm tng ỏp sut thm thu, tng cng kh nng hỳt nc ca cõy, giỳp cõy chng chu li vi stress ca mụi trng thiu nc Giỏ tr proline tng lờn v t cc i vo ngy gõy hn th 5, sau ú bt u gim xung Tuy nhiờn, ban u ngy u tiờn ca quỏ trỡnh phc hi (ngy th 6) s gim khụng nhiu, dng nh khụng cú s sai khỏc nhiu (140,94%) Nhng sau ú vo cỏc ngy 7, 8, hm lng proline ó gim nhiu v cú sai khỏc rừ rt, t ngy th n ngy th gim rt mnh sau ú gim t t vo cỏc ngy tip theo, n ngy th giỏ tr ó tr v gn nh ban u Nh vy, s bin ng v hm lng proline r din theo quy lut nh lỏ: ú l quy lut hm lng proline t l thun vi quỏ trỡnh gõy hn ng thi thi k cõy non, c r v lỏ, pha gõy hn s gia tng proline cú tc chm hn so vi s suy gim c bit, 62 nhỡn vo hỡnh 3.3 thy rng s suy gim proline lỏ din vi tc nhanh hn r Hỡnh 3.3 cũn cho thy, hm lng proline r luụn cao hn lỏ, nhng xột v tc bin ng thỡ lỏ luụn cao hn r c pha ca quỏ trỡnh gõy hn iu ny cho thy, u cụ ve b hn lỏ l c quan mn cm hn vi hn vỡ cú tc trung proline cao sau hn xy Nhng r l c quan cú kh nng chng chu vi hn tt hn lỏ vỡ hm lng proline r luụn cao hn lỏ Vic xỏc nh hm lng proline cũn tip tc c tin hnh giai on hoa v qu non 3.1.2 S bin ng hm lng proline lỏ v r u cụ ve quỏ trỡnh gõy hn giai on hoa 3.1.2.1 S bin ng hm lng proline lỏ Kt qu xỏc nh hm lng axit amin proline lỏ u cụ ve quỏ trỡnh gõy hn giai on hoa c trỡnh by bng 3.3 v hỡnh 3.4 Bng 3.3 Hm lng proline lỏ u cụ ve quỏ trỡnh gõy hn giai on hoa n v: mg/g Pha Ngy GY HN Lỏ thớ nghim % So C 0.840.02 a 0.940.03 b 0.970.03 b 0.960.05 b 0.900.05 b 0.930.05 b 0.910.04 b 0.960.03 b 1.250.03 c 1.000.04 b 0.990.03 b 99.00 0.990.05 b 0.970.05 b 97.98 HI PHC Lỏ i chng 10 0.890.03 a 105.95 0.990.02 b 105.32 1.200.03 c 123.71* 1.430.03 d 148.96* 1.680.05 e 186.67* 1.740.06 d 187.10* 1.440.03 d 158.24* 130.21* Kt qu cho thy, hm lng proline lỏ bin ng cng tng t nh giai on cõy Rừ rng thiu nc giai on hoa, u cụ ve cú phn ng tng cng tng hp proline S gia tng hm lng proline lỏ thớ nghim so vi i chng ny cho thy, hoa l giai on lỏ cõy mn cm hn vi iu kin thiu nc Proline c tng hp tng cng giai on ny giỳp cõy chng chu vi iu kin thiu nc tt hn, bo v b mỏy quang hp cho cõy Tuy nhiờn, so vi giai on cõy c i chng v thớ nghim u cú s tng mnh v hm lng proline tt c cỏc ngy ca quỏ trỡnh gõy hn Mt khỏc, tc bin ng hm lng proline hai giai on cú s khỏc nhau, ú giai on hoa cú s bin ng nh hn giai on cõy 63 3.1.2.2 S bin ng hm lng proline r Khi cõy hoa gp iu kin khụ hn s lm nh hng n vic hỡnh thnh nng sut ca cõy, bi bỡnh thng hng giai on hoa cõy cn nhiu nc hn cỏc giai on khỏc, thiu nc giai on ny r cõy khụng hỳt c nc cung cp cho ton cõy lm nh hng n quỏ trỡnh hỡnh thnh hoa, th phn th tinh v hỡnh thnh qu sau ny Do ú, b hn, s gia tng hm lng proline r vo giai on hoa khụng ch cú ý ngha vi thi im hin ti m cũn nh hng n s kin to nng sut sau ny Kt qu nghiờn cu ng thỏi proline ca r cõy giai on ny c minh bng 3.4 v hỡnh 3.5 di õy Trong bng 3.4, proline r thớ nghim hu nh cao hn so vi i chng v dao ng t 1,76 (ngy th nht b hn) n giỏ tr cao nht l ngy th v ca quỏ trỡnh gõy hn 2,44 v 2,46 S tng proline cú khỏc bit ln vo cỏc ngy 2,3,4 ca pha gõy hn ú ngy v cú s khỏc bit khụng ln v s tng proline Bng 3.4 Hm lng proline r u cụ ve quỏ trỡnh gõy hn giai on hoa n v: mg/g HI PHC GY HN Pha Ngy R i chng a R thớ nghim % So C 1.770.04 1.830.07 a 1.930.04 b 1.820.05 a 2.090.03 c 114.84* 1.820.05 a 2.250.05 d 123.63* 1.820.05 a 2.440.05 d 134.07* 1.730.04 a 2.460.04 d 142.20* 1.770.06 a 2.220.02 d 125.42* 1.770.04 a 2.020.04 c 114.12* 1.750.04 a 1.930.04 b 110.29* 1.810.05 a 1.780.04 a 98.34 10 1.760.03 a 99.44 105.46 iu ny c gii thớch l, cõy bt u b hn cho n b hn nng thỡ tng cng tng hp proline, nhng xy hn nng thỡ s tng hp proline khụng tip tc na Trong pha hi phc, cõy c ti nc tr li, hai ngy tip theo sau ú (6 v 7) s bin ng proline khụng cú sai khỏc nhiu so vi ngy trc ú, nhng sau ú ngy 8,9,10 proline cú s suy gim khỏ rừ, ngy th 10 ó tr v nh trc gõy hn Nhn thy, hm lng proline r giai on hoa luụn cao hn giai on cõy Nhng cỏc ngy thớ nghim ca quỏ trỡnh gõy hn, % so vi C giai on hoa luụn thp hn giai on cõy iu ny cho thy phn ng tng cng tng hp proline r giai on hoa thp hn giai on cõy Tim nng proline ca cõy giai on hoa ln hn giai on trc th hin kh nng chu ng vi hn ca r giai on ny ó tt hn trc 64 So sỏnh hai bng 3.3 v 3.4 ta thy, proline proline r luụn cao hn lỏ Kt qu ny ging vi ta so sỏnh bng 3.1 v 3.2 giai on cõy 3.1.3 S bin ng hm lng proline lỏ v r u cụ ve quỏ trỡnh gõy hn giai on qu non 3.1.3.1 S bin ng hm lng proline lỏ Bng 3.5 Hm lng proline lỏ u cụ ve quỏ trỡnh gõy hn giai on qu non n v: mg/g Pha Ngy 0.680.04 a 0.690.03 a 0.700.03 a 0.650.03 a 0.690.04 a 0.680.05 a 0.670.05 a 0.720.03 a 0.670.05 a 0.690.03 a 11 0.650.05 a 12 0.700.05 a GY HN HI PHC Lỏ i chng 10 Lỏ thớ nghim % So C 0.660.04 a 97.06 0.890.02 b 128.99* 1.090.04 c 155.71* 1.180.03 c 181.54* 1.410.04 d 204.35* 1.470.04 d 216.18* 1.510.07 d 225.37* 1.300.06 c 180.56* 1.140.04 c 170.15* 1.030.04 c 149.28* 0.960.04 c 147.69* 0.850.08 b 121.43* Hm lng proline lỏ vo giai on ny tt c cỏc ngy thớ nghim u thp hn giai on trc, nhng cao hn giai on cõy c cụng thc i chng v thớ nghim c bit, pha hi phc vo ngy th 12 hm lng proline ca cõy cao hn i chng rt nhiu (121%), cha tr v giỏ tr ban u Cú th gii thớch rng, l s phõn gii proline giai on ny din chm hn hai giai on trc ú Phn trm so vi C cú giỏ tr ln nht t 225,37% cao hn giai on hoa (187,10%) Nh vy, mc bin ng proline giai on ny nhiu hn giai on hoa Cho thy, tim nng chu hn ca lỏ giai on qu non cũn thp hn giai on hoa, nhng kh nng chu hn ca cõy th hin bng phn ng tng cng tng hp proline thỡ cao hn giai on hoa 3.1.3.2 S bin ng hm lng proline r Kt qu nghiờn cu tip theo v hm lng proline r vo giai on qu non cho thy, hm lng proline tng ng cỏc ngy thớ nghim u thp hn giai on hoa Kt qu ny ging vi lỏ Giỏ tr proline r giai on ny cng cao hn lỏ v biờn dao ng giỏ tr hm lng proline r li nh hn lỏ, ging vi cỏc giai on trc Phn trm so vi i 65 chng dao ng t 95,51% (ngy th 12) n 133,60 % (ngy th 7) (bng 3.6) Vo ngy th 10 ca pha hi phc proline ó tr v bỡnh thng, khụng khỏc ngy gõy hn u So vi lỏ vo ngy th 12 proline o c cao hn ngy gõy hn u Bng 3.6 Hm lng proline r u cụ ve quỏ trỡnh gõy hn giai on qu non n v: mg/g Pha Ngy 1.550.05 a 1.570.06 a 1.590.04 a 1.580.03 a GY HN R thớ nghim a 1.530.05 1.60.05 % So C 98.71 a 101.91 1.780.04 b 111.95* 2.030.13 b 128.48* 1.550.05 a 1.920.04 b 123.87* 1.560.05 a 2.080.05 b 133.33* 1.530.07 a b 136.60* 1.700.13 a 1.520.05 a 10 1.560.05 a 1.590.04 a 101.92 11 1.550.07 a 1.560.07 a 100.65 1.560.06 a 1.490.06 a 95.51 HI PHC R i chng 12 2.090.07 1.90.06 b 1.760.06 117.65* b 115.79* Nh vy, s phõn gii proline r din nhanh hn lỏ Khi cõy c ti nc tr li, cựng mt thi im ca quỏ trỡnh gõy hn m s phn ng vi hn ca cỏc b phn ca cõy khỏc cng khỏc nhau, r cú phn ng kp thi hn vi s thay i ca mụi trng, hay r l c quan cm ng vi hn trc tiờn v lỏ l c quan chu tỏc ng ca hn sau r Quan sỏt trờn hỡnh 3.6 ta thy, vo ngy th ca pha gõy hn, r thớ nghim hm lng proline t nhiờn xung thp hn ngy trc ú, nhng sau ú li tng dn lờn t cc i sut quỏ trỡnh gõu hn, sau giỏ tr cc i l sau l s gim t t theo quy lut S bt thng ny cú th gii thớch nh sau: giai on qu non, s cm ng vi iu kin hn ca r n sm hn so vi cỏc giai on trc Kh nng chu hn ca t bo r t nhiờn gim, nhng sau ú li tng lờn v din ỳng theo quy lut s tớch ly proline t l thun vi mc chu hn ca cõy 3.2 nh hng ca thiu nc n cỏc yu t cu thnh nng sut v hm lng nit tng s ca ht Bng 3.7 Cỏc ch tiờu v nng sut Ch tiờu Cụng thc thớ nghim C GH cõy GH hoa % so C GH qu TN1 TN2 TN3 66 (TN2) (TN1) non (TN3) S qu/cõy 39.52 0.39a 29.61 0.43b 22.56 0.3c 38.61 0.30a 74.92* 57.09* 97.7 16.30.13a 14.45 0.10b 12.50.08c 13.60 0.07d 88.38* 76.45* 83.18* Chiu di qu Khi lng 61.07 44.67 72.871.45a 0.81b 53.771.16c 2.13d 83.81* 73.79* 61.3* (Ghi chỳ: s liu kốm theo cỏc ch cỏi khỏc th hin sai khỏc cú ý ngha thng kờ vi tin cy 100 ht = 0,05, du * th hin s sai khỏc gia C v TN vi tin cy =0,05) 3.2.1 Cỏc yu t cu thnh nng sut 3.2.1.1 S qu trờn cõy u cụ ve cú s lng qu trờn cõy ln, thu hoch lm nhiu t v qu non thng cho hiu qu kinh t cao, s qu trờn cõy phn ỏnh quỏ trỡnh hỡnh thnh hoa, s th phn th tinh v u qu ng thi phn ỏnh nh hng ca iu kin khụ hn n s hỡnh thnh qu Bng 3.7 cho thy ch tiờu s qu/cõy gia cỏc cụng thc thớ nghim so sỏnh vi i chng v so sỏnh vi nhau, i chng c ti nc s qu trờn cõy trung bỡnh l 39,52 qu Cũn cỏc cụng thc gõy hn, s qu trờn cõy u gim hn so vi i chng, dao ng t 22,56 n 38,61 Trong ú, gim mnh nht l cụng thc gõy hn hoa, s qu gim ch cũn (22,56) ch bng 57,09% so vi i chng Sau ú n gõy hn cõy cng lm gim ỏng k s qu trờn cõy, trung bỡnh ch cũn 29,61 chim 74,92% so vi C Cũn li s sai khỏc cụng thc th (TN3) khụng ỏng k iu ny d dng gii thớch bi sau hỡnh thnh qu thỡ gõy hn s ớt lm nh hng n s qu trờn cõy Nh vy, rừ rng gõy hn hai thi k cõy v hoa lm nh hng n s sinh trng v phỏt trin ca cõy, gim kh nng th phn, th tinh ca cõy qua ú lm gim s qu trờn cõy T kt qu trờn õy gúp phn cng c thờm v vai trũ ca proline vic ỏnh giỏ tớnh chu hn ca cõy Kt qu ny phự hp vi cỏc kt qu nghiờn cu v s bin ng proline va c ch Trong c giai on, proline cõy giai on hoa l cao hn c Khi proline cao chng t s chu hn ca cõy giai on ny l ln nht ng thi vi kh nng tớch ly proline thỡ s sinh trng ca cõy cng gim, qua ú lm gim kh nng hỡnh thnh s qu trờn cõy Nh vy, s lng qu trờn cõy b gim theo th t: GH hoa < GH cõy non < GH qu non 3.2.1.2 Chiu di qu Chiu di qu theo nghiờn cu gim theo mc gõy hn nh sau: GH hoa > GH qu non > GH cõy non 67 Kt qu nghiờn cu v chiu di qu (cm) cng cho thy s phự hp vi kt qu nghiờn cu cỏc ch tiờu khỏc v nng sut Chiu di qu gim t 76,45% n 88,38% so vi i chng cỏc cụng thc gõy hn c bit, gõy hn hoa cng lm chiu di qu b gim nhiu nht v gõy hn cõy l cụng thc b gim chiu di qu ớt nht Nhỡn chung, ch tiờu ny cú s suy gim ng u hn so vi ch tiờu s lng qu Gõy hn cõy con, lm gim s lng qu mnh hn, nhng ớt nh hng n chiu di qu hn Bi chiu di qu l yu t mang tớnh di truyn sõu sc nờn kh nng suy gim gii hn ngn hn so vi tớnh trng s lng qu 3.2.1.3 Khi lng 100 ht Ch tiờu ny phn ỏnh nh hng ca iu kin bt li n s hỡnh thnh ht Kt qu nghiờn cu cho thy ging u cụ ve nghiờn cu ch tiờu ny cú s suy gim mnh nht so vi i chng cỏc cụng thc thớ nghim, ch cũn 61,3% n 83,81% so vi i chng Qu non l thi k qu ang hỡnh thnh ht, vỡ vy kt qu cho thy thi k nh hng ln nht l thi k gõy hn qu non Nú lm gim mnh lng ht qu ch cũn (61,3%), cũn gõy hn thi k cõy l ớt nh hng nht, gõy hn thi k hoa lm nh hng mc trung bỡnh so vi hai cụng thc trờn 3.2.2 Hm lng nit tng s Nit cú thnh phn ca protein v axit nucleic Nhiu nghiờn cu cho thy hm lng nit cú liờn quan mt thit n vic iu chnh sinh lý ca c th gp iu kin bt li ca mụi trng c bit cỏc cõy h u, cú hm lng protein cao nờn ch tiờu ny khụng ch phn ỏnh phm cht ht m cũn liờn quan n kh nng chng chu ca chỳng [6] Bng 3.8 cho thy, gõy hn lm gim hm lng protein ht u cụ ve xung cũn 89,45% (GH qu non) n 95,82% (GH hoa) Nh vy, gõy hn qu non khụng ch nh hng ln nht n lng 100 ht m cũn nh hng n cht lng ht, gõy hn qu non lm gim hm lng ni tng s nhiu hn giai on cõy non v hoa Hai cụng thc GH hoa v GH cõy lm gim khụng ỏng k hm lng nit tng s ht (khụng cú sai khỏc nhiu so vi C) Nh vy, gõy hn thi k qu non qu ang hỡnh thnh ht lm nh hng n vic huy ng cỏc cht vo d tr vo ht, c bit l kh nng chuyn v tớch ly protein ca ht Chớnh vỡ vy lm gim hm lng nit tng s ca ht nhiu hn gõy hn giai on cõy v gõy hn giai on hoa KT LUN V NGH Kt lun T kt qu nghiờn cu v ng thỏi hm lng proline cõy u cụ ve quỏ trỡnh gõy hn tụi xin a mt s kt lun sau 1/ Khi gõy hn cỏc giai on sinh trng khỏc nhau, hm lng proline cõy luụn tng t n mt giỏ tr cc i lỏ cui cựng ca cõy cú triu chng hộo Khi c ti nc 68 tr li proline cõy t giỏ tr cc i li gim xung dn tr v mc ban u Trong cỏc giai on nghiờn cu, giỏ tr proline c C v TN giai on hoa cao hn hn cỏc giai on khỏc 2/ Tc tng hp proline gõy hn ln hn tc phõn gii proline cõy c ti nc tr li tt c cỏc thi k Trong cựng mt giai on, tc tng v gim proline lỏ luụn cao hn r Proline lỏ tng mnh nht v gim mnh nht vo giai on cõy Cũn r, proline tng mnh nht v gim mnh nht vo giai on hoa Giai on qu non proline gim chm ti nc tr li c lỏ v r 3/ Hm lng proline r luụn cao hn lỏ c C v TN 4/ Gõy hn cỏc giai on khỏc li lm nh hng n cỏc ch tiờu v nng sut khỏc nhau: Gõy hn giai on cõy hoa lm nh hng n qu rừ rt qua vic gim cỏc ch tiờu s lng qu trờn cõy v chiu di qu Gõy hn thi k qu non thỡ li lm gim cỏc ch tiờu v lng 100 ht v hm lng nit tng s ht ngh Tip tc m rng nghiờn cu mc phõn t tỡm hiu bn cht sõu hn ca quỏ trỡnh chu hn ca u cụ ve ng thi tin hnh m rng nhiu i tng cõy trng khỏc 69 Bộ giáo dục đào tạo Trường đại học sư phạm hà nội Ngô Thị xuyến Nghiên cứu động thái proline đậu cô ve (Phaseolus vulgaris L.) điều kiện gây hạn giai đoạn sinh trưởng khác Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60.42.30 Tóm tắt Luận văn thạc sĩ sinh học Hà nội, 2009 CễNG TRèNH C HON THNH TI TRNG I HC SU PHM H NI Ngi hng dn khoa hc PGS.TS NGUYN VN M 70 Phn bin 1: Phn bin 2: Lun s c bo v ti hi ng chm lun thc s hp ti Trng i hc S phm H Ni vo hi gi ngy thỏng nm 2009 Cể TH TèM HIU LUN VN TI TH VIN TRNG I HC S PHM H NI 71