KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CÁC TÝP GEN cagA VÀ vacA CỦA HELICOBACTER PYLORI TRONG UNG THƯ DẠ DÀY

Nghiên cứu các tysp gen cagA VÀ vacA của Helicobacter pylori và mối liên quan đến ung thư dạ dày ở bệnh nhân khu vực miền Nam Việt Nam và thành phố Hồ Chí Minhcho thấy chủng H. pylori có hai gen cagA và vacA dương tính có nguy cơ cao gây ung thư dạ dày

KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CÁC TÝP GEN cagA VÀ vacA CỦA HELICOBACTER PYLORI TRONG UNG THƯ DẠ DÀY Trần Thiện Trung*, Lê Châu Hoàng Quốc Chương* Trần Anh Minh*, Lý Kim Hương*, Hồ Huỳnh Thùy Dương**, Nguyễn Tuấn Anh** TÓM TẮT Mục tiêu: Nghiên cứu ñịnh týp gen cagA týp gen vacA vi khuẩn Helicobacter pylori (H pylori), mối liên quan ñến ung thư dày bệnh nhân khu vực Miền nam Việt Nam thành phố Hồ Chí Minh Bệnh nhân phương pháp: Từ tháng 12/2008 ñến tháng 5/2010, Bệnh viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Trường Đại học Khoa học Tự nhiên TP Hồ Chí Minh, tiến hành nghiên cứu týp gen vi khuẩn H pylori phương pháp multiplex PCR Nghiên cứu bệnh chứng gồm 126 bệnh nhân ung thư ñược mổ cắt 2/3 dày, nạo hạch R2, số có 96 bệnh nhân ung thư dày; 93 bệnh nhân viêm dày có H pylori-dương tính ñược chẩn ñoán PCR, CLO test, Giải phẫu bệnh Kết quả: Trong 162 bệnh nhân (71 ung thư 91 viêm dày), gen cagA (+) 95,7% (150/157), bệnh nhân ung thư dày 100% so với 92,3% (84/91) viêm dày, p = 0,018, tỷ số chênh = 1,845 (KTC 95%, 1,597 – 2,133) Gen vacA s1 98,1% (156/159), ung thư dày 100% (68/68) so với 96,7% (88/91 ) viêm dày; gen vacA s2 3,3% (3/91) gặp viêm dày, với p= 0,261 Gen vacA m1 50,6% (81/160), ung thư dày 63,8% (44/69) so với 40,7% (37/91) viêm dày; Gen vacA m2 49,4% (79/160), ung thư dày 36,2% (25/69) so với 59,3% (54/91) viêm dày, p= 0,004, tỷ số chênh = 2,569 (KTC 95%, 1,348 – 4,895) Liên quan gen cagA vacA 157 bệnh nhân (66 ung thư dày, cagA (+) không xác ñịnh m, cagA (+) không xác ñịnh s; 91 viêm dày) ñã ñược xác ñịnh Ở 66 bệnh nhân ung thư dày, cagA (+) 100%, týp gen vacA s1/m1 63,6%, vacA s1/m2 36,4% Ở 91 viêm dày, cagA (+) 92,3% cagA (-) 7,7% Các týp gen vacA nhóm s1/m1 (42%), s1/m2 (55%) s2/m2 (3%) Trong trường hợp cagA (+), có khác biệt týp gen vacA s1/m1 vacA s1/m2 ung thư viêm dày, p=0,025, tỷ số chênh = 2,118 (KTC 95%, 1,094 – 4,1) Kết luận: Gen cagA (+) có tất trường hợp ung thư dày, cagA (-) gặp viêm dày Gen cagA (+) kết hợp với kiểu gen vacA m1 chủng H pylori Đặc biệt, chủng H pylori có gen cagA (+) gen vacA s1/m1 cho thấy nguy cao liên quan ñến bệnh ung thư dày Từ khóa : Gen cagA vacA; Helicobacter pylori; Ung thư dày *Bệnh viện - Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh **Trường Đại học Khoa học Tự nhiên- Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh Địa liên lạc: Trần Thiện Trung, PGS TS BS Bộ môn Ngoại, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Điện thoại: 0903645659; Email: drtranthientrung@ yahoo.com ABSTRACT RESULTS OF VACA GENOTYPES AND CAGA GENE OF HELICOBACTER PYLORI IN GASTRIC CANCERS Aim: The main objective of this study was to determine cagA and vacA genotypes of Helicobacter pylori and evaluating the relation of these genotypes to gastric cancer in patients in Ho Chi Minh city and the southern area of Vietnam Patients and methods: From December 2008 to May 2010, at University Medical Center and University of Natural Science in Ho Chi Minh city We underwent a study to investigate cagA gene and vacA genotypes of Helicobacter pylori in infected patients with gastric cancer by multiplex polymerase chain reaction assay The casecontrol study includes 126 patients with gastric cancer, operated by subtotal gastrestomy, R2 ganglion curage and 93 patients with gastritis All patients were diganosed H pylori infection by PCR, urease test (CLO test), or pathology Results: Of the 162 patients, including 71 gastric cancers and 91 gastritis, the ratio of cagA-positive was 95.7% (150/157) All patients with gastric cancer and 92.3% patients with gastritis were cagA-positive (p=0.018, OR=1.845, CI=1.597-2.133) The vacA s1 was 98.1% In gastric cancer group, allele s1 was 100%, compared to 96.7% in gastritis group; Allele s2 was 3.3% and just identified in gastritis group (p=0.261) The vacA m1 and m2 were 50.6 (81/160) and 49.4% (79/160) In gastric cancer group, allele m1 was 63.8% and allele m2 was 36.2%, while in gastritis group allele m1 was 40.7% and m2 was 59.3% (p=0.004, OR=2.569, CI=1.348-4.895) The relation between cagA gene and vacA genotypes with gastric cancer was identified 157 patients were studied Of 66 patients with gastric cancer, cagApositive was 100% within this group, vacA s1m1 and s1m2 genotypes were 63.6% and 36.4% Of 91 patients with gastritis, cagA-positive was 92.3% and cagA-negative was 7.7% In this group, there were three genotypes for vacA gene: s1m1 (42%), s1m2 (50.5%), s2m2 (3%) In patients with cagA-positive, there was a significant difference between vacA genotype s1/m1 and s1/m2 in two groups (p=0.025, OR=2.118, CI=1.094 - 4.100) Conclusion: The cagA-positive genotype existed in all gastric cancer patients and cagA-negative just appeared in gastritis The cagA-positive genotype always coexisted with vacA m1 genotype Specially, H pylori with cagA-positive and vacA s1m1 genotype showed a significant association with gastric cancer Keywords: cagA and vacA genotypes; Helicobacter pylori; Gastric cancer ĐẶT VẤN ĐỀ Vi khuẩn H pylori ñược tìm vào tháng năm 1982, kể từ ñó ñã có nhiều công trình nghiên cứu vi khuẩn gây bệnh dày-tá tràng viêm, loét ung thư dày [15] Năm 1983, Marshall hai người tìm H pylori lần ñầu tiên ñưa giả thuyết kết hợp nhiễm H pylori ung thư dày [7] Năm 1994, Cơ quan Quốc tế Nghiên cứu Ung thư (International Agency for Research on Cancer-IARC) dựa chứng dịch tễ học ñã nêu lên liên quan nhiễm H pylori với carcinom ung thư dày, Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) ñã công nhận xếp H pylori tác nhân quan trọng hàng ñầu hay nhóm tác nhân gây carcinom dày [8] Liên quan ñến bệnh sinh, yếu tố môi trường, yếu tố ký chủ có thay ñổi di truyền thay ñổi gen tác nhân có khả gây bệnh Một yếu tố quan trọng khác ñó ñộc lực vi khuẩn H pylori nhiều hay cao hay thấp tùy thuộc vào chủng H pylori liên quan ñến gen cagA gen vacA Gen cagA (cytotoxin-associated gene) gen vacA (vacuolating toxin gene) gen ñược coi yếu tố ñộc lực chủ yếu có khả gây bệnh ñặc trưng vi khuẩn H pylori [1, 6] Sự kết hợp gen cagA týp gen vacA liên quan ñến nguy với mức ñộ biểu lâm sàng khác bệnh [5] Gen cagA tất chủng H pyori [3] Protein cagA, có kích thước từ 128 ñến 140 kDa, có khả kích thích phản ứng phosphoryl hóa tyrosine tế bào ký chủ, dẫn ñến tăng sinh bất thường tế bào biểu mô dày [11] Gen vacA có chứa hai vùng biến ñổi gồm vùng tín hiệu vùng Vùng (middle) gen vacA có týp gen m1/m2 vùng tín hiệu (signal) có týp gen s1/s2 Mức ñộ ñộc tố cao hay thấp gen vacA phụ thuộc vào týp gen hai vùng Chủng H pylori với týp gen vacA s1/m1 có ñộc tố tế bào mạnh týp gen vacA s1/m2, ñó chủng H pylori với týp gen vacA s2/m2 không gây ñộc tố [1] Để hiểu rõ tính ña dạng vai trò týp gen vacA H pylori liên quan ñến bệnh dày, Rhead cs [12] ñã nêu lên vùng gen vacA có týp gen m1 m2 vùng tín hiệu có týp gen s1 s2 có vùng trung gian (intermediate) ký hiệu i Ở vùng trung gian có cặp alleles khác gồm i (vacuolating) i (nonvacuolating) Tất cặp gen vacA s1/m1 thuộc týp i 1, tất gen vacA s2/m2 thuộc týp i 2, vacA s1/m2 thuộc týp i i Việt Nam nước có tỷ lệ nhiễm H pylori cao, ung thư dày ñang vấn ñề lớn, thời bệnh ung thư ñường tiêu hoá Vì việc nghiên cứu ñể hiểu rõ bệnh sinh ung thư dày nhằm tìm chiến lược can thiệp có hiệu ñể ñiều trị phòng ngừa vấn ñề quan trọng cấp thiết Công trình nghiên cứu dựa phương pháp multiplex PCR ((Polymerase Chain Reaction) ñể xác ñịnh týp gen cagA vacA với týp gen vacA s1/s2; vacA m1/m2 H pylori, mối liên quan týp gen với ung thư dày bệnh nhân khu vực Thành phố Hồ Chí Minh Miền Nam Việt Nam Trên sở ñó nhằm mục ñích tầm soát theo dõi bệnh nhân nhiễm H pylori với týp gen mắc phải có nguy cao bệnh ung thư dày ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Trong khoảng thời gian từ tháng 12/2008 ñến tháng 5/2010, Bệnh viện Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh, tiến hành nghiên cứu týp gen vi khuẩn H pylori Thiết kế nghiên cứu bệnh chứng gồm nhóm: (1) 126 bệnh nhân ung thư dày (hang vị) ñược mổ cắt 2/3 dày, nạo hạch R2, số có 96 bệnh nhân ung thư dày có H pylori-dương tính 30 H pylori-âm tính ; (2) nhóm chứng 93 viêm dày có H pylori-dương tính ñược ñưa vào nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu Tiêu chuẩn chọn bệnh loại trừ: chọn bệnh nhân sau mổ cắt bán phần dày ung thư biểu mô tuyến (carcinoma) Loại trừ trường hợp: bệnh phẩm không ñạt yêu cầu kích thước bảo quản, thương tổn khác Limphoma, Sarcoma dày Thu thập mẫu Bệnh nhân sau mổ cắt bán phần dày ung thư Tiến hành lấy mẫu mô : Mẫu mô ung thư (mô bệnh) ñược lấy ranh giới mô lành mô ung thư, mẫu mô lành lấy cách thương tổn cm phía bờ cắt dày Hai mẫu mô (khoảng 0,5 cm) chẩn ñoán CLO test Bốn mẫu mô kích thước khoảng cm - 1,5 cm gồm : mô lành mô bệnh ñược gửi làm mô bệnh học Bộ môn Giải phẫu bệnh, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Hai mẫu mô lại ñược gửi xác ñịnh týp gen Trường Đại học Khoa học Tự nhiên TP Hồ Chí Minh Nhóm chứng bệnh nhân viêm dày có H pylori-dương tính ñược lấy từ mẫu sinh thiết dày lúc nội soi, kích thước mẫu khoảng 0,5 cm gồm : chẩn ñoán CLO test, chẩn ñoán mô bệnh học, gửi ñịnh danh týp gen H pylori Chẩn ñoán nhiễm H pylori : bệnh nhân nghiên cứu nhóm ung thư viêm dày có H pylori-dương tính ñược chẩn ñoán ñồng thời thử nghiệm : (1) thử nghiệm urease (CLO test) ; (2) Giải phẫu bệnh ; (3) Phản ứng chuỗi trùng hợp (PCR) H pylori-dương tính ñược ñịnh nghĩa có 3, thử nghiệm dương tính Xác ñịnh týp gen H pylori: Sử dụng Master mix PCR kết hợp với cặp mồi ñặc hiệu Mồi ñược tổng hợp từ công ty IDT (Hoa Kỳ) Mồi dùng cho phản ứng PCR xác ñịnh VacA cagA ñược lấy từ công trình Kumar S, Kumar A, Dixit V K cs năm 2008 [9] Chattopadhyay cs năm 2004 [5] Mồi dùng phát gene urease ñược thiết kế dựa phần mềm chuyên dụng Chúng khảo sát tính ñặc hiệu mồi ñã chọn chứng dương chủng H pylori J99 (s1m1cagA+) ; chứng âm số vi khuẩn khác mẫu không chứa H pylori DNA gen H pylori sau tách chiết ñược dùng ñể tiến hành phản ứng multiplex PCR hệ thống PCR CFX96TM Real-Time (BioRad) Mẫu DNA H pylori chứng phản ứng PCR sản phẩm nhân có týp gen cagA (+) vacA s1m1 cagA (+) vacA s1m2 ñược xác ñịnh phương pháp giải trình tự Kết ñiện di sản phẩm phản ứng multiplex PCR (hình 1) tương ứng với kiểu gen cagA (+)/(-), vacA s1/s2, vacA m1/m2 gen hGSTP từ mẫu sinh thiết chứa H pylori bệnh nhân Kết cho thấy sản phẩm PCR tạo có kích thước phù hợp với kích thước dự kiến: vacA m1/m2 (567/642 bp), cagA (349 bp), vacA s1/s2 (259/286 bp) hGSTP (192 bp) Tín hiệu thu ñược mạnh ñặc hiệu, sản phẩm ký sinh Điều cho thấy mồi gồm cặp mồi sử dụng phản ứng multiplex PCR hoạt ñộng tốt với nồng ñộ chương trình ñã xác ñịnh Các sản phẩm nhân ñược kiểm tra giải trình tự cho thấy phù hợp với trình tự gen H pylori ñã công bố Phản ứng multiplex PCR dùng phát ñịnh týp gen vi khuẩn H pylori ñạt hiệu ñộ xác cao, với cường ñộ tín hiệu ñặc trưng cho gen không chênh lệch Điều cho thấy ñiều kiện phản ứng ñã ñược tối ưu hóa phù hợp cho nhân gen Kết áp dụng quy trình số bệnh phẩm bệnh nhân viêm ung thư dày nghiên cứu cho thấy ưu týp gen cagA (+), vacA s1m1; cagA (+), vacA s1m2 Hình 1: Kết multiplex PCR phát phân týp gen cagA vacA H pylori Giếng (+), chứng dương DNA H pylori có kiểu gen cagA (+), vacA s1m2; giếng (-), chứng âm; giếng 1, cagA (-), vacA s1m2; giếng 2, cagA (+), vacA s1m2; giếng 3, cagA (+), vacA s1m1 Giếng 4, cagA (-), vacA s2m2; giếng M, thang phân tử 100-bp (Bio-Rad) Xử lý phân tích thống kê : Dữ liệu thu thập ñược nhập, xử lý phân tích phần mềm SPSS 15.0 Các phép kiểm T-test, Fisher’s exact, chi bình phương (χ2 ) ñược dùng nghiên cứu có ý nghĩa thống kê p < 0,05 Xác ñịnh yếu tố nguy tỷ số chênh (Odds Ratio) với khoảng tin cậy 95% KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Đặc ñiểm bệnh nhân xác ñịnh týp gen a 96 bệnh nhân ung thư dày có H pylori-dương tính ñược xác ñịnh týp gen, số này: • 25 trường hợp PCR kết vacA cagA • trường hợp cagA (+) không xác ñịnh ñược m • trường hợp cagA (+) không xác ñịnh ñược s b Nhóm chứng 93 viêm dày có H pylori-dương tính, số trường hợp PCR kết cagA vacA Tuổi bệnh nhân Bảng Tuổi trung bình bệnh nhân Nhóm bệnh nhân Số bệnh nhân Tuổi trung bình Ung thư dày 71 59,54 ± 12,74 Viêm dày 91 46,42 ± 12,75 Nhận xét: Tuổi trung bình bệnh nhân nhóm bệnh nhân ung thư viêm dày khác biệt có ý nghĩa với p< 0,001 (T test) Giới tính Bảng Giới tính Giới tính Nhóm bệnh nhân Tổng cộng Ung thư dày Viêm dày Nam 48 (67,6%) 43 (47,3%) 91 (56,2%) Nữ 23 (32,4%) 48 (52,7%) 71 (43,8%) Tổng cộng 71 (100%) 91 (100%) 162 (100%) Nhận xét: Có khác biệt giới nhóm bệnh nhân ung thư dày, với p = 0,01(χ2) Tỷ số chênh = 2,33 (Khoảng tin cậy 95%: 1,222 – 4,442) Đặc ñiểm thử nghiệm chẩn ñoán H pylori Tất trường hợp nghiên cứu nhóm ung thư dày (n=71) ; nhóm viêm dày (n=91) ñều có kết H pylori-dương tính với thử nghiệm : urease (CLO test) dương tính, PCR dương tính Kết giải phẫu bệnh chẩn ñoán H pylori nhóm bệnh nhân ung thư dày 57,7% (41/71), nhóm viêm dày 44% (40/91) trường hợp Giải phẫu bệnh chẩn ñoán H pylori có kết thấp so với thử nghiệm CLO test, PCR Kết ñịnh týp gen cagA H pylori Bảng : Kết ñịnh týp gen cagA H pylori Gen cagA cagA (+) Nhóm bệnh nhân Ung thư dày Viêm Tổng cộng dày 71 84 (100%) (92,3%) 155 (95,7%) cagA (-) (0%) (7,7%) (4,3%) Tổng cộng 71 91 (100%) (100%) 162 Nhận xét: cagA (+) có 100% trường hợp ung thư dày so với 92,3% viêm dày, với p = 0,018 (Fisher’s exact) Tỉ số chênh = 1,845 (Khoảng tin cậy 95%, 1,597 – 2,133) Kết ñịnh týp gen vacA s1 vacA s2 Bảng : Kết ñịnh týp gen vacA s1/ vacA s2 H pylori Gen vacA vacA Nhóm bệnh nhân Ung thư dày Viêm dày Tổng cộng 68 88 156 (98,1%) s1 (100%) (96,7%) vacA s2 (0%) (3,3%) (1,9%) 91 (100%) 159 Tổng cộng 68 (100%)* Nhận xét: * trường hợp cagA (+) không xác ñịnh ñược s nên không ñưa vào phân tích Không có khác biệt týp gen vacA s1 nhóm ung thư viêm dày, với p= 0,261 (Fisher’s exact) Týp gen vacA s2 gặp nhóm bệnh nhân viêm dày Kết ñịnh týp gen vacA m1 vacA m2 Bảng : Kết ñịnh týp gen vacA m1/ vacA m2 H pylori Gen vacA Nhóm bệnh nhân Ung thư dày Viêm dày vacA m1 44 37 (63,8%) (40,7%) vacA m2 25 54 (36,2%) (59,3%) Tổng cộng 69 (100%)* Tổng cộng 81 (50,6%) 79 (49,4%) 91 (100%) 160 Nhận xét: * trường hợp cagA (+) không xác ñịnh ñược m nên không ñưa vào phân tích Có khác biệt týp gen vacA m1 vacA m2 nhóm ung thư viêm dày, với p= 0,004 (χ2) Tỉ số chênh = 2,569 (Khoảng tin cậy 95%, 1,348 – 4,895) Kết ñịnh týp gen vacA s1/s2 vacA m1/m2 Bảng : Kết ñịnh týp gen vacA s1/m1; vacA s1/m2; vacA s2/m2 H pylori Gen vacA Nhóm bệnh nhân Ung thư Viêm Tổng cộng dày dày vacA s1/m1 42 38 (63,6%) (41,8%) vacA s1/m2 24 50 (36,4%) (54,9%) (0%) (3,3%) 66 91 (100%) (100%) vacA s2/m2 Tổng cộng 80 74 157* Nhận xét: * trường hợp cagA (+) không xác ñịnh ñược s, m nên không ñưa vào phân tích Các týp gen vacA giũa nhóm bệnh nhân ung thư viêm dày khác biệt có ý nghĩa thống kê với p= 0,014 (χ2) Týp gen vacA s2/m2 có số liệu nhỏ gặp nhóm viêm dày Khi tính gộp nhóm s1/m2 với nhóm s2/m2, kết thu ñược sau (bảng 7): Bảng : Kết ñịnh týp gen vacA s1/m1; vacA s1/m2; vacA s2/m2 H pylori Gen vacA Nhóm bệnh nhân Tổng cộng Ung thư dày Viêm dày vacA s1/m1 42 (63,6%) 38 (41,8%) 80 vacA s1/m2; s2/m2 24 (36,4%) 53 (58,2%) 77 66 (100%) 91 (100%) 157* Tổng cộng Nhận xét: Các týp gen vacA giũa nhóm bệnh nhân ung thư viêm dày khác biệt có ý nghĩa thống kê với p= 0,007 (χ2) Tỉ số chênh = 2.441 (Khoảng tin cậy 95%, 1.272 – 4,685) Liên quan týp gen vacA khác có gen cagA (+) cagA (-) Bảng : Liên quan gen cagA với týp gen vacA H pylori Nhóm bệnh nhân Gen cagA Gen vacA cagA (+)* (n=150) vacA s1/m1 cagA (-) (n=7) Tổng cộng Ung thư dày 42 (63,6%) Viêm dày 38 (42%) 46 Tổng cộng 80 (51%) vacA 24 s1/m2 (36,4%) (50,5%) vacA s1/m2 (0%) (4,5%) (2,5%) vacA s2/m2 (0%) (3%) (1,9%) 66 91 (100%) (100%) 157 (100%) 70 (44,5%) Nhận xét: * trường hợp cagA (+) không xác ñịnh ñược m, cagA (+) không xác ñịnh ñược s nên không ñưa vào phân tích Các trường hợp cagA (+), có khác biệt týp gen vacA s1/m1 vacA s1/m2 nhóm bệnh nhân ung thư viêm dày có ý nghĩa thống kê với p=0,025 (χ2) Tỉ số chênh = 2,118 (Khoảng tin cậy 95%, 1,094 – 4,1) Các trường hợp cagA (–) gặp nhóm bệnh nhân viêm dày, số lượng bệnh nhân nhỏ không phân tích thống kê BÀN LUẬN Gen cagA vi khuẩn Helicobacter pylori Tỷ lệ gen cagA chủng H pylori ñược báo cáo từ vùng khác giới từ 50-70% dân số nước phương Tây chiếm >90% nước phương Đông [4] H pylori chia hai nhóm: sinh ñộc tố không sinh ñộc tố kiểu gen biểu khác nhau, nói cách khác có gen cagA Ở cụm gen CagPAI, protein cagA ñược chuyển dời vào tế bào ñích thông qua hệ thống cấu tiết typ IV, ñược phosphoryl-hóa tác ñộng yếu tố tăng trưởng [15] Vai trò gen cagA ñược coi yếu tố với ñộc lực cao gây ung thư dày Nhiều công trình nghiên cứu cho thấy mối liên quan giũa nhiễm chủng H pylori có gen cagA (+) có nguy cao gây ung thư dày Chattopadhyay cs [5], gen cagA kết hợp với týp gen vacA gây nguy với biểu lâm sàng mức ñộ nặng nhẹ khác bệnh nhân Trong nghiên cứu Kumar cs năm 2008 [9], phương pháp multiplex PCR phát phân tích gen cagA týp gen vacA 232 trường hợp (gồm 56 người khỏe mạnh), gen cagA chiếm 63,2% Tỷ lệ gen cagA (+) nguyên nhân viêm dày, loét, người bình thường 70%, 54,3%, 17,9% ; ñặc biệt bệnh nhân ung thư dày gen cagA (+) 100% trường hợp kết hợp với gen vacA s1/m1 s1/m2 Trong nghiên cứu chúng tôi, phương pháp multiplex PCR phát phân tích gen cagA týp gen vacA 162 bệnh nhân (71 ung thư dày 91 viêm dày), tỷ lệ cagA (-) chung chiếm 4,3% (7/162), gặp nhóm bệnh viêm dày 7,7% (7/91); gen cagA (+) chiếm 95,7% trường hợp, bệnh nhân ung thư dày 100% (71/71) so với 92,3% (84/91 ) viêm dày với p = 0,018 tỷ số chênh = 1,845 (Khoảng tin cậy 95%, 1,597 – 2,133), (Bảng 3) Ở Việt Nam, Tạ Long cs [13], nghiên cứu mối liên quan ung thư dày nhiễm H pylori, thời gian từ tháng 3/2003 ñến tháng 4/2004, bệnh viện Trung ương Quân ñội 108, bệnh viện Bưu ñiện Việt Đức-Hà nội Có 208 bệnh nhân, ñược chia làm nhóm: (1) 104 ung thư dày; (2) 104 viêm dày mạn tính xác ñịnh mô bệnh học Ba mươi tám mẫu (38) ñược gửi làm PCR Đại học Fukui (Nhật Bản), cho thấy typ cagA (+) Á ñông có khả gây bệnh viêm dày chiếm tỷ lệ 82,3%, cao so với 47,6% ung thư dày Nghiên cứu Trần Ngọc Ánh [14] năm 2006, cho thấy tỷ lệ H pylori typ I ung thư dày 78,6% cao viêm dày 33,3%, tỷ lệ H pylori có cagA (+) vacA (+) nhóm bệnh nhân ung thư dày 80,9% 97,6%, cao nhóm bệnh nhân viêm dày 47,6% 52.3% (p[...]... ở nhóm viêm dạ dày Týp gen vacA s1/m2 với cagA (+) có thể gặp, và có sự khác biệt ở 2 nhóm ung thư dạ dày và viêm dạ dày nhưng gen vacA s1/m2 có cagA (-) chỉ gặp trong viêm dạ dày Týp gen vacA s2/m2 có gen cagA (-), chỉ có ở nhóm viêm 11 dạ dày Týp gen vacA s2/m1 không gặp trong nghiên cứu mặc dù gen vacA s2 có ở nhóm viêm dạ dày Gen cagA (+) kết hợp với kiểu gen vacA m1 của các chủng H pylori ở bệnh... nguy cơ loét dạ dày liên quan ñến vùng trung gian của gen vacA týp i 1 KẾT LUẬN Bằng phương pháp multiplex PCR xác ñịnh các týp gen cagA và các týp gen vacA s1/s2; vacA m1/m2 của vi khuẩn H pylori và mối liên quan ñến bệnh ung thư dạ dày Gen cagA (+) có ở tất cả các trường hợp ung thư dạ dày, týp gen vacA s1/m1 có thể gặp, nhưng có sự khác biệt giữa bệnh ung thư dạ dày và viêm dạ dày; gen cagA (-) chỉ... Tỷ lệ gen vacA s1 trong các nguyên nhân viêm dạ dày, loét, ở người bình thư ng và ung thư dạ dày lần lượt là 100%, 87,1%, 82,1% và 100% Tỷ lệ gen vacA m1 ở viêm dạ dày, loét, ở người bình thư ng và ung thư dạ dày lần lượt là 80%, 60%, 25%, và 56,8% Ở nhóm 44 ung thư dạ dày, gen cagA (+) trong 100% các trường hợp; và chỉ gặp các týp gen vacA s1/m1 ở 56,8% (25/44), và hoặc là s1/m2 ở 43,2% (19/44) Trong. .. dạ dày Để hiểu rõ hơn về tính ña dạng và vai trò của các týp gen vacA của H pylori liên quan ñến các bệnh dạ dày, Rhead và cs [12] ñã chứng minh ngoài 2 vùng giữa gen vacA có các týp gen là m1/m2 và vùng tín hiệu có các týp gen là s1/s2, còn có vùng trung gian (intermediate) ký hiệu là i Trong nghiên cứu của Basso và cs [2], trên 203 bệnh nhân nhiễm H pylori gồm 53 ung thư dạ dày, 52 loét dạ dày, và. .. loét dạ dày, và 98 viêm dạ dày Kết quả chủng H pylori có cagA (+) có liên quan ñến ung thư dạ dày (p