DANH MỤC BIỂU ĐỒBiểu đồ 4.1: Diễn biến bệnh đốm lá lớn trên giống ngô HN88 tại các xã thuộc huyện Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016...Error: Reference source not foundBiểu đồ 4.2: Diễn biến bệ
Trang 1LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan rằng, số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này là trung thực và chưa được sử dụng để bảo vệ một học vị nào
Tôi xin cam đoan rằng, mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này
đã được cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều được chỉ rõ nguồn gốc
Hà Nội, ngày tháng năm 2016
Tác giả
PHẠM THÚY NHUNG
Trang 2LỜI CẢM ƠN
Để hoàn thành luận văn này, ngoài sự cố gắng nỗ lực của bản thân, tôi nhận được rất nhiều sự quan tâm giúp đỡ nhiệt tình của các thầy cô, bạn bè, người thân và các cơ quan đơn vị
Trước tiên tôi xin chân thành cảm ơn các thầy, cô trong khoa Nông học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã trực tiếp giảng dạy, trang bị những kiến thức bổ ích trong suốt thời gian qua Đặc biệt, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Trần Nguyễn Hà và PGS.TS Đỗ Tấn Dũng, người đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, động viên tôi trong quá trình thực hiện đề tài và hoàn thiện luận văn
Cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, bạn bè và nhân dân địa phương các xã Kim Sơn, Phú Thị, Gia Lâm đã giúp đỡ tôi tận tình trong thời gian thực hiện đề tài
Hà Nội, ngày tháng năm 2016
Tác giả
PHẠM THÚY NHUNG
Trang 3
MỤC LỤC
LỜI CAM ĐOAN i
LỜI CẢM ƠN ii
Bảng 2.1 Sản xuất, tiêu thụ và nhu cầu ngô của Việt Nam 8
4.1Thành phần bệnh trên ngô trồng tại Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016 22
Bảng 4.1 : Thành phần nấm bệnh hại ngô ở Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016 22
4.1.1 Bệnh khô vằn hại Ngô (Rhizoctonia solani) 23
4.1.2 Bệnh gỉ sắt hại ngô (Puccinia maydis) 23
4.2.1 Diễn biến bệnh đốm lá lớn, đốm lá nhỏ trên giống ngô HN88 tại Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016 27 Bệnh đốm lá lớn do nấm Exserohilum turcicum 29
32
Biểu đồ 4.3: Diễn biến bệnh đốm lá lớn trên 3 giống ngô HN88, HN68, NK4300 tại Gia Lâm vụ xuân hè 2016 32
Như vậy trong 3 giống mà chúng tôi điều tra, giống NK 4300 nhiễm bệnh đốm lá lớn nặng nhất sau đó đến giống HN88 và nhiễm nhẹ nhất là giống HN68 Bệnh đốm lá lớn đều tập trung gây hại nặng vào cuối giai đoạn cây 7-9 lá đến giai đoạn bắp 33
34
Biểu đồ 4.4: Diễn biến bệnh đốm lá nhỏ trên 3 giống ngô HN88, HN68, NK4300 tại Gia Lâm vụ xuân hè 2016 34
4.4 Diễn biến bệnh đốm lá nhỏ, đốm lá lớn trên giống ngô HN88 trồng trên các chân đất khác nhau tại Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016 35
Bảng 4.4a: Diễn biến bệnh đốm lá lớn trên giống ngô HN 88 35
trồng trên các chân đất khác nhau tại Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016 35
Bảng 4.4b: Diễn biến bệnh đốm lá nhỏ trên giống ngô HN 88 36
trồng trên các chân đất khác nhau tại Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016 36
4.5 Diễn biến bệnh đốm lá nhỏ, đốm lá lớn trên giống ngô HN88 trồng trên các mật độ khác nhau tại Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016 36
Bệnh đốm lá ngô nói chung đều phát riển mạnh trong điều kiện chân đất xấu, cây phát triển còi cọc, thiếu chăm sóc và mật độ trồng không hợp lý 37
Để tìm hiểu rõ hơn về vấn đề này chúng tôi tiến hành điều tra các bệnh đốm lá lớn, đốm lá nhỏ trên giống HN88 ở các mật độ trồng khác nhau từ đó đưa ra sơ bộ sự phát sinh phát triển của các bệnh này và là cơ sở quan trọng trong phòng trừ nấm bệnh Kết quả được thể hiện ở bảng 4.5: 37
Trang 4Bảng 4.4b: Diễn biến bệnh đốm lá nhỏ trên giống ngô HN 88 trồng trên các chân đất khác nhau tại Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016 Error: Reference source notfound
Bảng 4.5a: Diễn biến bệnh đốm lá lớn trên giống ngô HN88 tại Gia Lâm vụ xuân hè trên các mật độ khác nhau Error: Reference source not foundBảng 4.5b: Diễn biến bệnh đốm lá nhỏ trên giống ngô HN88 tại Gia Lâm vụ xuân hè trên các mật độ khác nhau Error: Reference source not found
Bảng 4.6 : Đặc điểm hình thái nấm B maydis, E.turcicum 39 Bảng 4.7: Khả năng phát triển của nấm Exserohilum turcicum ở 28,50C trên một
số môi trường nhân tạo: Error: Reference source not found
Bảng 4.8: Khả năng phát triển của nấm Bipolaris maydis ở 28,50C trên một số
môi trường nhân tạo: Error: Reference source not found
Bảng 4.10: Khả năng gây bệnh của nấm E.turcicum trên lá ngô khi lây nhiễm
nhân tạo trên giống ngô HN88 Error: Reference source not found
Trang 5Bảng 4.11: Khảo sát hiệu lực phòng trừ của thuốc Carbenda 60WP đến sự phát
sinh phát triển của nấm B.maydis Error: Reference source not found
Bảng 4.12: Khảo sát hiệu lực phòng trừ của thuốc Carbenda 60WP đến sự phát
sinh phát triển của nấm E.turcicum Error: Reference source not found
DANH MỤC HÌNH
Hình 4.1: Triệu chứng bệnh khô vằn Error: Reference source not foundHình 4.2: Triệu chứng bệnh gỉ sắt Error: Reference source not foundHình 4.3: Triệu chứng bệnh đốm lá nhỏ Error: Reference source not foundHình 4.4: Triệu chứng bệnh đốm lá nhỏ Error: Reference source not foundHình 4.5: Triệu chứng bệnh mốc hồng ngô Error: Reference source not foundHình 4.6: Triệu chứng bệnh ung thư ngô Error: Reference source not foundHình 4.7: Mật độ ngô trồng dày Error: Reference source not foundHình 4.8: Mật độ ngô trồng thưa Error: Reference source not found
Hình 4.9: Bào tử phân sinh Bipolaris maydis Error: Reference source not found
Hình 4.10: Cành bào tử phân sinh và Bào tử phân sinh Exserohilum turcicum
Error: Reference source not found
Hình 4.11: Tản nấm Bipolaris maydis nuôi cấy trên môi trường PGA Error:
Reference source not found
Hình 4.12: Tản nấm Exserohium turcicum nuôi cấy trên môi trường PGA .Error:
Reference source not found
Hình 4.13: Công thức đối chứng lây nhiễm bệnh đốm lá lớn sau 7 ngày lây nhiễm Error: Reference source not foundHình 4.14: Triệu chứng vết bệnh đốm lá lớn trên giống HN88 sau 7ngày lây nhiễm Error: Reference source not found
Hình 4.15: Nấm E.turcicum nuôi cấy trên các nồng độ thuốc Carbenda 60WP
khác nhau Error: Reference source not found
Trang 6Hình 4.16: Nấm B.maydis nuôi cấy trên các nồng độ thuốc Carbenda 60WP
khác nhau Error: Reference source not found
Trang 7DANH MỤC BIỂU ĐỒ
Biểu đồ 4.1: Diễn biến bệnh đốm lá lớn trên giống ngô HN88 tại các xã thuộc huyện Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016 Error: Reference source not foundBiểu đồ 4.2: Diễn biến bệnh đốm lá nhỏ trên giống ngô HN88 tại các xã thuộc huyện Gia Lâm vụ xuân hè 2016 Error: Reference source not foundBiểu đồ 4.3: Diễn biến bệnh đốm lá lớn trên 3 giống ngô HN88, HN68, NK4300 tại Gia Lâm vụ xuân hè 2016 Error: Reference source not foundBiểu đồ 4.4: Diễn biến bệnh đốm lá nhỏ trên 3 giống ngô HN88, HN68, NK4300 tại Gia Lâm vụ xuân hè 2016 Error: Reference source not found
Biểu đồ 4.5: Khả năng phát triển của nấm Exserohium turcicum trên một số môi
trường nhân tạo Error: Reference source not found
Biểu đồ 4.6: Khả năng phát triển của nấm Bipolaris maydis trên một số môi
trường nhân tạo Error: Reference source not found
Trang 8DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT
CSB : Chỉ số bệnh
TLB : Tỉ lệ bệnh
E.turcicum : Exserohium turcicum
Trang 9PHẦN I: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề
Cây ngô (Zea mays L) là một trong ba cây lương thực quan trọng nhất
trên thế giới ( ngô, lúa mì và lúa nước), cây ngô có phạm vi thích ứng khá rộng
từ 580vĩ độ Bắc tới 400 vĩ độ Nam Ngô được trồng ở nhiều nước, trong đó diện tích ngô được trồng nhiều chủ yếu ở các nước vùng ôn đới cũng như nhiệt đới
ẩm Diện tích trồng ngô trên thế giới hiện nay lên tới 147 triệu ha, năng suất trung bình đạt 4,8 tấn/ha và sản lượng ngô trên thế giới hiện nay là 702 triệu tấn( năm 2005) Với vai trò làm lương thực cho người (17% tổng sản lượng), thức ăn chăn nuôi (66%), nguyên liệu công nghiệp (5%) và xuất khẩu (hơn 10%), ngô đã trở thành cây trồng đảm bảo an ninh lương thực, góp phần chuyển đổi cơ cấu nông nghiệp theo hướng từ trồng trọt sang chăn nuôi, cung cấp nguyên liệu cho công nghiệp và sản phẩm hàng hoá cho xuất khẩu ở nhiều nước trên phạm vi thế giới (Ngô Hữu Tình, 2003) Ở Việt Nam Ngô và lúa nước là hai loại cây trồng chủ yếu là cơ sở đảm bảo cho an ninh lương thực của quốc gia, nhất là vùng trung du, miền núi phía bắc Với lợi thế địa hình và canh tác thuận lợi hơn so với nhiều cây trồng khác, cây ngô có đặc điểm là
dễ canh tác, phù hợp với nhiều loại đất trồng, địa hình (đất ruộng, đất màu, đất nương rẫy, đất đồi núi), dễ chăm bón, tốn ít công lao động, giá cả và thị trường tiêu thụ ổn định Ở một số tỉnh như Phú Thọ, Hà Giang, Cao Bằng, Sơn La, Lai Châu thì ngô dường như là cây trồng truyền thống số một Ngô dùng làm lương thực chủ yếu cho đồng bào các dân tộc H’Mông, Dao, Tày, Nùng mặc dù sản lượng lúa ở vùng này cũng tăng lên đáng kể nhưng một lượng lớn ngô ở đây vẫn được sử dụng làm lương thực và trong chăn nuôi
Ngô là loại cây trồng bị nhiều loại sâu bệnh Hàng năm thiệt hại do các dịch hại gây ra trên các loại hạt ở Mỹ là 1 tỷ đô la, ở các nước đang phát triển vào khoảng trên 30% Ở Ấn Độ, thiệt hại do dịch hại trong kho gây ra vào khoảng 7% tới 25%
Trang 10Những nghiên cứu về thành phần sâu bệnh hại ngô đã được tiến hành từ nhiều năm nay ở Việt Nam Theo số liệu của Viện Bảo vệ thực vật về “Kết quả điều tra Côn trùng và Bệnh cây năm 1967-1968” thì ngô ở Việt Nam ghi nhận có
63 loài côn trùng và 32 loại bệnh hại Thiệt hại do sâu bệnh hại gây ra cho các loại cây lương thực (trong đó có ngô) ước tính hàng năm từ 10-30%
Theo Lê Doãn Diên, 1990 ở Việt Nam, tổn thất do côn trùng gây ra cho ngũ cốc trong bảo quản là khoảng 10% Số liệu điều tra của TS Nguyễn Văn Liêm và CTV (Viện Bảo vệ thực vật), 2005 thì thiệt hại do các loại mọt gây ra trên ngô ở vùng Bắc Hà - Lào Cai sau 12 tháng bảo quản tới 38,95% Đây là một tổn thất rất lớn đối với đồng bào dân tộc ở vùng này vì ngô là nguồn thu nhập quan trọng của các gia đình
Các loại bệnh hại ảnh hưởng rất lớn tới năng suất cũng như phẩm chất của cây ngô Không những chúng gây ra hiện tượng mất mùa ngoài sản xuất
mà ngay trong bảo quản chúng cũng gây ra những thiệt hại vô cùng to lớn, Gây thiệt hại nghiêm trọng tới năng suất kinh tế của người dân Bệnh hại cũng
là vấn đề được quan tâm nhiều hiện nay như một số bệnh phổ biến: khô vằn
ngô (Rhizoctonia solani), ung thư ngô (Ustilago maydis), gỉ sắt ngô (Puccinia
maydis), đốm lá ngô (bao gồm bệnh đốm lá nhỏ Bipolaris maydis , bệnh đốm
lá lớn Exserohium turcicum)… vì chúng làm nông sản hao hụt rất lớn cả về
số lượng lẫn chất lượng, giảm giá trị thương phẩm, gây mùi khó chịu, mầu sắc không bình thường… Bệnh gây hại phổ biến trên hầu khắp các vùng trồng ngô trên thế giới trong đó bệnh đốm lá ngô đã được phát hiện và nghiên cứu khá
lâu Đốm lá ngô được chia làm 2 loại là đốm lá nhỏ ( Bipolaris maydis) và đốm
lá lớn (Exserohium turcicum) Bệnh gây hại chủ yếu trên lá, làm tổn thương lá và
làm giảm diện tích quang hợp dẫn đến giảm đáng kể năng suất ngô
Vì tính cấp thiết của bệnh và để góp phần nghiên cứu về nấm gây hại làm
cơ sở phòng chống bệnh trên hạt để ngăn chặn kịp thời cũng như hạn chế khả năng hình thành dịch hại nên được sự phân công của Bộ môn Bệnh cây, Khoa
Trang 11Nông học, Trường Học viện Nông nghiệp Việt Nam, dưới sự hướng dẫn của
TS.Trần Nguyễn Hà Tôi tiến hành thực hiện đề tài: “ Điều tra nghiên cứu bệnh đốm lá trên cây ngô vụ xuân hè 2016 tại huyện Gia Lâm- Hà Nội”
- Điều tra diễn biến của bệnh đốm lá ngô tại Gia Lâm-Hà Nội.
- Điều tra ảnh hưởng của các yếu tố giống, chân đất, mật độ… đến sự phát
sinh phát triển của bệnh
- Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của nấm gây bệnh.
- Khảo sát biện pháp phòng trừ bệnh bằng thuốc hóa học.
Trang 12PHẦN 2: TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU
2.1 Tình hình sản xuất ngô trên thế giới và ở Việt Nam.
2.1.1 Tình hình sản xuất ngô trên thế giới
Ngô là một loại ngũ cốc quan trọng trên thế giới, đứng thứ ba về diện tích trồng trọt sau lúa mì và lúa gạo, đứng thứ 2 về sản lượng và đứng thứ nhất về năng suất Ngày nay cây ngô đã được trồng ở tất cả các châu lục, nó
có thể thích nghi với tất cả các điều kiện sinh thái khí hậu, từ vùng ôn đới đến nhiệt đới
Ngoài mục đích cung cấp lương thực, hiện ngô còn là sản phẩm quan trọng trong nhiều ngành công nghiệp chế biến như; thức ăn chăn nuôi, rượu, cồn, bánh kẹo,vv đặc biệt trong thời gian tới ngô là một trong những sản phẩm chủ lực để chế biến xăng sinh học thay thế nguồn dầu mỏ ngày càng khan hiếm hiện nay
Trên toàn thế giới có xấp xỉ khoảng 100 nước trồng ngô bao gồm cả các nước công nghiệp và các nước đang phát triển, mỗi nước trồng ít nhất 100.000 ha ngô; tổng số diện tích đất trồng ngô là 140 triệu ha, đem lại sản lượng 600 triệu tấn ngô ngũ cốc một năm, trị giá 65 tỷ đôla (dựa trên giá bán quốc tế năm 2003 là 108 đôla/tấn) (Clive, 2003) Năng suất bình quân chung toàn thế giới 5 tấn/ha, năng suất bình quân chung của các nước phát triển > 8 tấn/ha còn các nước đang phát triển <3 tấn/ha Năng suất trung bình cả vùng nhiệt đới là 1,8 tấn/ha, của vùng ôn đới là 7 tấn/ha (CIMMYT, 2000) Nước
có diện tích trồng ngô lớn nhất là Trung Quốc với 26 triệu ha, Brazil 12 triệu
ha, Mexico 7,5 triệu ha và ấn độ 6 triệu ha Mặc dù các nước đang phát triển chiếm 68% tổng diện tích trồng ngô nhưng sản lượng chỉ chiếm 46% tổng sản lượng ngô thế giới (1999) Nước có sản lượng lớn nhất là Mỹ 299 triệu tấn, tiếp theo là các nước Trung Quốc 124 triệu tấn, Brazil 35,5 triệu tấn, Mêxico 19 triệu tấn và Pháp 16 triệu tấn(Clive, 2003) Trong đó các nước đang phát
Trang 13triển chiếm hai phần ba diện tích trồng (96/140 triệu ha), các nước công nghiệp chiếm một phần ba (CIMMYT, 2000).
Cây ngô dễ thích hợp với các điều kiện ngoại cảnh khác nhau và được trồng trên khắp thế giới Ngô có mặt ở hầu hết các châu lục, ngô mọc được ở dưới nhiều vùng khí hậu, từ vùng ôn đới đến các vùng nhiệt đới, xích đạo nóng và mưa nhiều (Nguyễn Trần Trọng) Hơn 90% diện tích trồng ngô ở trong vùng có điều kiện khí hậu ôn hoà ở các nước phát triển Ở các nước đang phát triển, khoảng 25% diện tích trồng ngô trong điều kiện khí hậu ôn hoà, diện tích này hầu hết là ở Trung Quốc và Argentina Khoảng 70 triệu ha ngô được trồng trong điều kiện khí hậu nhiệt đới, trong đó khoảng 65% diện tích được trồng ở vùng đất thấp nhiệt đới, 26% diện tích được trồng ở vùng cận nhiệt đới và đất vàn nhiệt đới và 9% trồng trên vùng đất cao nhiệt đới Khoảng 60% diện tích trồng ngô vùng đất cao thuộc Mỹ La Tinh, 45% diện tích trồng ngô ở vùng cận nhiệt đới và đất vàn nhiệt đới thuộc gần Saharan châu Phi (CIMMYT, 2000) Nói chung vùng phân bố của ngô có thể từ vĩ tuyến Nam 38o đến ví tuyến Bắc -58o (Nguyễn Trần Trọng)
Các nước trên thế giới ngày càng nhận thức vị trí của ngô trong việc giải quyết lương thực, đặc biệt là sản phẩm quan trọng trong nhiều ngành công nghiệp chế biến Do đó ngô được trồng hầu hết các nước trên thế giới, đặc biệt là nổi bật lên là các nước phát triển Năm 2003, năng suất bình quân toàn quốc đạt kết quả khá cao như: Jordan 23,26 tấn/ha, Kuwait 20 tấn/ ha, Chile 12,27 tấn/ha, Isarel 12,00 tấn/ha, Tây Ban Nha 9,11 tấn/ha, Mỹ 9,92 tấn/ha (FAO, 2003)
CIMMYT (1999-2000) dự đoán, nhu cầu về ngô ở các nước đang phát triển sẽ lớn hơn nhu cầu về lúa mỳ và lúa gạo vào những năm 2020 Toàn cầu
sẽ tăng nhu cầu về ngô khoảng 50% tính từ năm 1995 đến 2020, nếu năm
1995 thế giới có nhu cầu về ngô 558 triệu tấn thì đến năm 2020 lượng này sẽ
Trang 14tăng lên 837 triệu tấn Trong khi đó các nước đang phát triển có nhu cầu về ngô tăng từ 282 triệu tấn vào năm 1995 đến 504 triệu tấn vào năm 2020 (CIMMYT, 2000) Vậy để giải quyết được nhu cầu lớn về ngô trên toàn thế giới trong năm 2020, cần phải nâng cao năng suất và biện pháp thâm canh trong hệ thống cây trồng hàng năm (Đinh Thế Lộc, 1997).
2.1.2 Tình hình sàn xuất ngô tại Việt Nam
Ở Việt Nam, cây ngô được trồng khá phổ biến từ lâu, cách đây khoảng
300 năm, ở Bắc Bộ ngô được trồng trên ruộng một vụ mùa và trên các đất bãi ven sông; ở Trung Bộ trừ các vùng cao nguyên, ngô được trồng hai vụ trong năm; ở Nam Bộ ngô được trồng một vụ trong năm
Diện tích trồng ngô cũng tăng dần hàng năm nhất là vùng đồng bằng Bắc Bộ đã có quy hoạch vùng trồng ngô tập trung và miền núi đang mở ra nhiều triển vọng cho việc phát triển và bố trí ngành trồng ngô theo hướng sản xuất lớn Nhìn chung cây ngô luôn luôn tồn tại và ngày càng được chú ý trong nền nông nghiệp phát triển của nước ta (Nguyễn Trần Trọng, 1982) Mặc dù là cây lương thực đứng thứ hai sau cây lúa nước, nhưng do nước ta có truyền thống trồng cây lúa nước, do đó cây ngô chưa được chú trọng nên chưa phát huy được tiềm năng của nó ở Việt Nam (Ngô Hữu Tình và Trần Hồng Uy, 1977)
Trong những năm gần đây, diện tích trồng ngô ngày một tăng do chuyển đổi cơ cấy cây trồng ở chân ruộng một vụ không chủ động nước hoặc nương rẫy, cây ngô đã được chú trọng phát triển cả về diện tích, năng suất, chất lượng sản phẩm để hướng cây ngô đi vào sản xuất hàng hoá của đồng bào các dân tộc nước ta Diện tích trồng ngô đã được mở rộng và quy hoạch thành 8 vùng trồng ngô chính như: Đồng bằng sông Hồng, Đông Bắc, Tây Bắc, Bắc Trung Bộ, vùng duyên hải miền Trung, Tây Nguyên, Đông Nam Bộ đồng bằng sông Cửu Long (Niên giám thống kê, 1999)
Do áp dụng những tiến bộ kỹ thuật mới, nền thâm canh cao, các giống ngô lai của Viện nghiên cứu ngô, các giống ngô nhập khẩu từ các nước Ân
Trang 15Độ, Mexico, Thái Lan, Mỹ, Philippin có tiềm năng năng suất cao có một số
có ưu điểm chống chịu điều kiện ngoại cảnh tốt hơn các giống ngô trong nước Trong những năm từ 1990 trở lại đây diện tích, năng suất và tổng sản lượng ngô ngày càng được tăng lên rõ rệt Năm 1990, tổng sản lượng ngô nước ta đạt 671.0 nghìn tấn với diện tích ngô gieo trồng là 431,8 nghìn ha, năng suất 1.55 tấn/ha Cũng theo cục thống kê tổng diện tích trồng ngô năm
2012 của nước ta đạt 1118.33 nghìn ha tăng gấp 2.5 lần so với năm 1900, năng suất trung bình đạt 43 tạ/ha tổng sản lượng ngô nước ta năm 2012 đạt
48088 nghìn tấn Trong đó các tỉnh có diện tích trồng ngô lớn là Đồng Nai 51.2 nghìn ha, Hà Giang 52.5 nghìn ha, Sơn La 127.6 nghìn ha, Nghệ An 55.8 nghìn ha, Thanh hoá 49.1 nghìn ha, Đắc Lắc 119.8 nghìn ha, Cao Bằng 39.3 nghìn ha, Lai Châu 21,3 nghìn ha, Lào Cai 33.7 nghìn ha Nhưng năng suất lại
có phần khác biệt, nổi trội lên là tỉnh Đồng Tháp (72.4 ta/ha), Lâm Đồng (50.1 tạ/ha), An Giang (71.1 tạ/ha), Thái bình (54.4 tạ/ha), Long An (59.5
tạ/ha), Đắc Lắc (50.5 tạ/ha) (Nguồn: Tổng Cục Thống Kê niên giám 2012).
Ở nước ta hiện nay tuy ngô là cây lương thực đứng thứ hai sau lúa nước nhưng nó được trồng ở tất cả các vùng từ đồng bằng, trung du đến miền núi Mục đích chính của cây ngô cung cấp lương thực cho con người và làm thức
ăn cho gia súc Bên cạnh đó ngô còn là sản phẩm quan trọng được dùng trong nhiều ngành công nghiệp khác, ngô có một vị trí quan trọng trong an ninh lương thực quốc gia
Chính vì thế diện tích, năng suất và sản lượng ngô ở nước ta tăng một cách rõ rệt, từ 2011 đến 2013 diện tích trồng, năng suất và sản lượng ngô ở Việt Nam cũng tăng đáng kể Điều này được tổ chức MARD / Post Estimat công nhận thể hiện ở bảng sau
Trang 16Bảng 2.1 Sản xuất, tiêu thụ và nhu cầu ngô của Việt Nam
Các thông số
2011/2012(từ tháng 5/2011)
2012/2013(từ tháng 5/2012)
2013- nay (từtháng 5/2013)MARD
Cập nhật mới
MARDCập nhật
mới
MARD
Cập nhật mớiDiện tích thu hoạch (1000 ha) 1.100 1.081 1.150 1.118 1.120
Sản lượng (tấn/ha) 4.950 4.648 5.300 4.803 4.816Nhập khẩu theo niên vụ
phẩm (1000 tấn) 5.000 5.000 5.200 5.200 5.400Thực phẩm chế biến (1000 tấn) 1.200 1.000 1.200 1.100 1.200
Trang 172.2 Nghiên cứu ngoài nước về bệnh hại trên ngô
Cây ngô là cây lương thực rất quan trọng nên đã có rất nhiều nhà khoa học nghiên cứu về cây ngô Một trong những nghiên cứu quan trọng nhất mà các nhà khoa học đã và đang nghiên cứu là tình hình sâu bệnh hại trong cây ngô ngoài sản xuất và trong quá trình bảo quản
Trên thế giới , có trên 130 loại bệnh hại bắp trong đó đa số các bệnh là do nấm gây ra như: bệnh đốm lá nhỏ, bệnh đốm lá lớn, bệnh đốm nâu, bệnh khô vằn, bệnh gỉ sắt, bệnh thối thân, bệnh thối bắp và hạt… Theo Shurtlef (1993), trên ngô
có tất cả 74 bệnh do nấm gây ra bao gồm tất cả các bệnh trên lá, trên thân và trên bắp Mặt khác Shurtlef (1993) cho rằng, tất cả các bộ phận của cây ngô đều mẫn cảm với một số bệnh làm giảm năng suất và chất lượng Thiệt hại về năng suất hạt
do bệnh gây ra trên thê giới trung bình là 9,4%
Những nghiên cứu của Carlos (1994) tại Mỹ cho thấy, có tới 44 nấm bệnh hại ngô, trong đó có 20 bệnh hại lá, 12 bệnh hại thân, 12 bệnh hại bắp làm thiệt hại hàng năm từ 7-17% sản lượng
Theo Roger (1953), có khoảng 153 loại bệnh hại trên cây ngô ở vùng
xứ nóng, trong đó có 126 nấm bệnh Ở Ấn Độ, có 25 loại bệnh hại trên ngô và
ở vùng nhiệt đới bị rất nhiều tác nhân gây bệnh tấn công gây thiệt hại đáng kể
về mặt kinh tế Ở Châu Mỹ đã ghi nhận có 130 loại bệnh đối với cây ngô so với vùng ôn đới chỉ có 85 bệnh hại
Trên cây ngô có tập đoàn bệnh phong phú mà chủ yếu là do nấm bệnh gây ra như: Bệnh đốm lá lớn, đốm lá nhỏ, bệnh gỉ sắt, bệnh khô vằn… Các bệnh này gây hại phổ biến trên ngô ở hầu hết các nước trên thế giới
Đầu năm 1925, Drechsler đã xá định tác nhân gây ra bệnh đốm lá trên ngô
do nấm Ophiobolus heterostrophus dựa trên tính ký sinh dị dưỡng của nó
Khoảng 10 năm sau đó, ông ta đã chọn loại nấm này như là loại phát sinh ra từ
Cochliobolus thuộc gia đình Pleosporaceae ( Lớp Ascomycetes, Bộ Pleosporales) bao gồm những loài Helminthosporium có giai đoạn lưỡng tính
Trang 18với ascopores cùng với mô hình helicoid ở trên ascus (Drechler,1934) Tuy
nhiên, dạng quả lưỡng tính, Cochliobolus heterostrophus, không được sử dụng
rộng rãi bởi các nhà nấm học và bệnh cây cho đến khi sự đổi mới danh pháp đối với các loài nấm gây hại trên cây trồng được đề xuất (Yoder và cộng sự,1986)
Ở hầu hết các tài liệu, bao gồm một số công bố từ cuối những năm 80, nấm được
đề cập nhiều bởi khả năng tạo quả cành, Helminthosporium maydis Nisikado và Miyake, Drechslera maydis hoặc là Bipolaris maydis (Nisikado và Miyake)
Shoemaker
- Bệnh đốm lá nhỏ (Bipolaris maydis)
Theo Smith (1975) bệnh xuất hiện khắp năm châu và đã bộc phát thành dịch vào năm 1970 ở Mỹ do dòng T của nấm bệnh tấn công lên giống ngô đực bất thụ tế bào chất - giống trổng chủ lực 85% diện tích, và đã gây tổn thất được ước tính trên 1 tỷ đô la Nấm này có hai dòng gây hại đã được xác định là dòng T và dòng O (CIMMYT, 2004) Dòng C (tấn công giống ngô
có tế bào chất C) là dòng thứ ba, mới được xác định tại Trung Quốc (Wei, 1985) Theo Leonard (1988), dòng T tấn công lên cả hai giống ngô đực bất thụ
tế bào chất (Tcms = Texas male sterile cytoplasm) đó là giống ngô tự phối và giống ngô lai ở bang Texas Theo ước tính có tới 80- 85% giống ngô răng ngựa được trồng ở Mỹ năm 1970 có Tms tế bào chất Nòi T không chỉ tấn công lá mà còn tấn công cả lên lá bao bắp và thân Trong một thí nghiệm qua đông, dòng O cho thấy khả năng hoại sinh cao hơn so với dòng T, chỉ khoảng 4% trong số những bào tử được tìm thấy là của dòng T Theo Dodd and Hooker(1990), dòng T được mô tả đặc điểm như là thuốc đặc trị cho kiểu bất dục đực tế bào chất kiểu T (Texas) được sử dụng rộng rãi Kiểu P- tế bào chất
có nguồn gốc từ Nam Mỹ và vài tế bào chất được biết khác cũng dễ bị nhiễm bệnh Dòng T là một ký sinh yếu trên những cây có tính kháng ngoài đồng, trong khi những cây con thì lại dễ bị nhiễm bệnh hơn Khi nấm nhiễm vào cây, nó tiết ra độc tố tấn công lên lá, lá bi, lá bao bắp, bẹ lá, bắp và thân
Trang 19Dòng T có nhiệt độ tối ưu thấp hơn so với dòng O
Theo Smith (1975), vết bệnh hình thành tại nhiệt độ 30°c nhiều hơn so với ở nhiệt độ 15°C hay 22,5°C Bệnh lan nhanh và kích thước vết bệnh tăng dần tương ứng với những thời kỳ có sương và sự tăng dần của nhiệt độ Để phòng trừ bệnh đốm lá nhỏ thì việc sử dụng giống kháng bệnh đem lại hiệu quả kinh tế đáng kể Ngoài ra việc vệ sinh đồng ruộng, dọn sạch tàn dư đóng vai trò rất quan trọng Các biện pháp như canh tác, chọn thời vụ hợp lý, xử lý hạt giống bằng thuốc hóa học trước khi trồng cũng góp phần hạn chế bệnh, biện pháp tối ưu là kiểm soát bệnh trong suốt hai thời kỳ 14 ngày trước trỗ cờ và
21 ngày sau trỗ cờ, bởi vì đây là hai thời kỳ cây ngô mẫn cảm nhất với bệnh
- Bệnh đốm lá lớn (Exserohilum turcicum):
Những vùng có khí hậu mát và hay có sương muối bệnh hại nặng, tỷ lệ bệnh có thể tới 75% số lá như đã xảy ra ở Bang Carolina (Mỹ) vào năm 1885 Theo Berger, R.D (1973) vấn đề mất mùa của bệnh này là một ẩn số không thể
bỏ qua Bệnh này thường đi song hành với bệnh đốm lá nhỏ và gây hại với tỉ lệ thấp hơn (Smith, D.R, 1980)
Bệnh được phát hiện trên cây ngô ở vùng Paserini (Italia) năm 1876 Còn tại Mỹ, bệnh được phát hiện tại bang New Jersey từ năm 1878 Sau đó
bệnh đã bùng phát thành dịch ở Connecticut vào năm 1889 (Leonard, 1988),
bệnh phát triển thuận lợi trong điều kiện môi trường có nhiệt độ ôn hòa và ẩm
độ cao Theo Shurtleff (1992), sương nhiều, nhiệt độ mát mẻ, mưa ẩm thường xuyên cũng là điều kiện thuận lợi cho nấm bệnh phát triển, cây con dễ bị nhiễm bệnh hơn trong điều kiện nhiệt độ 20°c, vì đây là điều kiện thuận lợi nhất cho sự xâm nhiễm và số vết bệnh, chiều dài vết bệnh tăng theo chiều dài của thời kỳ có sương Nguồn bệnh và điều kiện ngoại cảnh thích hợp đều rất quan trọng trong việc xác định khả năng phát sinh dịch bệnh mà điều này phụ thuộc vào khả năng xâm nhiễm, phát triển và hình thành bào tử của nấm bệnh trên cây ngô Theo Shurtleff (1993), ở Mỹ bệnh đã được phòng trừ có
Trang 20hiệu quả bằng cách sử dụng gene Ht trội Nấm Exserohilum turcicum có hai
nòi sinh học, một nòi không gây độc mang các gen Htl5 Ht2, Ht3 và HtN, một nòi không gây độc cho ngô mang các gen Ht2, Ht3 và HtN nhưng lại độc đối với ngô mang các gen Ht2 hay Ht3 Tính kháng của các nòi được thể hiện khi mang các kiểu gen như sau: Nòi 0: Ht1, Ht2, Ht3, và HtN; Nòi 1: Ht,, Ht3, HtN/Ht^ nòi 2: Ht„ Ht3, HtN/Ht2; nòi 3: Ht1/Ht2, Ht3 HtN;,nòi 12: Ht3, HtN/ Htl5 Ht2; nòi 23: Ht2, Ht3/Htl5 HtN; nòi 23N: Ht2, Ht3, HtN/Ht1
Sự phân loại như vậy để thuận tiện cho việc xác định nòi mới có thể bắt gặp khi nghiên cứu sau này Sự xuất hiện của các gen kháng Htlf Ht2 và Ht3 làm cho vết bệnh hình thành với số lượng bào tử ít nhất
Trong khi đó gen kháng cảm ứng HtN làm cho bệnh phát triển chậm
lại tới sau khi ngô thụ phấn Nòi I của Exserohilum turcicum được Smith, D.R
phát hiện năm 1975 Ông cho rằng sự có mặt của nòi I ở bang Ohio gây độc cho ngô mang gen Ht và Htj nhưng không độc cho ngô mang gen Ht2
Những nghiên cứu gần đây đã cho thấy bệnh đốm lá lớn xuất hiện ở tất cả các
vùng trồng ngô và bệnh gây hại nặng hơn trên những vùng ẩm ướt Theo Robert W.Jugenheimer (1976), bệnh đốm lá lớn có thể phòng chống bằng cách trồng giống ngô lai kháng bệnh Xử lý hạt giống và luân canh cây trồng cũng mang lại hiệu quả đáng kể
2.3 Nghiên cứu trong nước về bệnh hại trên ngô.
Một vài dòng ngô lai (Iova, Ganga2, Ganga5, Vijay) và LVN4, LVN10, Q2 được trồng trên đất nghèo dinh dưỡng năng suất giảm 12-30%
Ở Việt Nam, đặc biệt ở vùng trung du và các tỉnh miền núi phía bắc, các dòng ngô lai như là DK-888, DK-999, LVN4, LVVN10, Bioseed 9681, P11, Q2… thường thấy có triệu chứng của bệnh đốm lá ngô
Theo kết quả điều tra cơ bản bệnh hại cây trổng ở miền Bắc (trước năm (1975) cho thấy, có 32 loại bệnh trên ngô được phát hiện, trong đó có 30 bệnh
Trang 21do nấm gây ra Ở miền Nam, kết quả điều tra trong những năm 1977 – 1980 cho thấy có trên 20 bệnh hại bắp được phát hiện, trong đó các bệnh phổ biến
và quan trọng là: héo xanh, thối thân do vi khuẩn, khô vằn, gỉ sắt, đốm lá lớn, đốm lá nhỏ (Võ Thanh Hoàng, 2000) Theo Nguyễn Công Thuật (1996), ở miền Bắc (1977 - 1979) đã xác định có 29 loại, bệnh hại ngô, trong đó có 26 bệnh do nấm Ở Miền Nam (1977 - 1979) đã xác định có 15 loại bệnh, trong
đó có 11 bệnh do nấm Cũng theo tác giả Nguyễn Công Thuật, các bệnh trên ngô thường gặp bao gồm: bệnh đốm lá nhỏ, bệnh đốm lá lớn, bệnh mốc hồng, bệnh ung thư, bệnh khô vằn Những bệnh này gây ảnh hưởng tới năng suất của ngô đặc biệt là bệnh đốm lá nhỏ và đốm lá lớn
-Bệnh đốm lá nhỏ (Bipolaris maydis ):
Theo Nguyễn Công Thuật (1996), bệnh gây hại trên lá và bẹ lá, gặp điều kiện thuận lợi có thể phát triển trên diện tích rộng và gây hại nặng Bệnh xuất
hiện ngay ở giai đoạn cây còn nhỏ và phá hại kéo dài đến khi thu hoạch.
Ở miền Bắc, bệnh phát triển nhiều trong các tháng 1, 2 và 11, 12; riêng ở vùng núi phía Bắc bệnh phát triển trong các tháng 4, 5, 6 Bệnh phát triển mạnh trong điều kiện nhiệt độ và ẩm độ cao Bệnh đốm lá nhỏ có vết bệnh nhỏ như mũi kim, hơi vàng sau đó lớn rộng ra thành hình tròn hoặc hình bầu dục nhỏ, kích thước vết bệnh khoảng 5- 6 X 1,5 mm, màu vàng nâu hoặc ở giữa hơi xám, có viền nâu đỏ, nhiều khi vết bệnh có quầng vàng (Vũ Triệu Mân, Lê Lương Tề, 2001) Biện pháp phòng trừ bệnh hiệu quả là xử lý hạt giống trước khi gieo, vệ sinh đồng ruộng sạch sẽ, tiêu hủy tàn dư cây bệnh, dùng thuốc hóa học để phòng trừ bệnh
-Bệnh đốm lá lớn (Exserohilum turcicum)
Những nghiên cứu trước đây cho thấy, ở khắp các vùng trồng ngô trong
cả nước đều bị bệnh phá hại Nấm bệnh gây hại ở trên lá và bẹ lá ngô, phát triển nhiều từ khi ngô trỗ cờ trở đi ,Bệnh có thể gây thành dịch trên diện tích rộng ở đồng bằng trung du Bắc Bộ và khu 4 cũ, bệnh phát sinh nhiều vào các tháng 2,
Trang 223, 4 và 10, 11, 12 Ở vùng núi phía Bắc, bệnh phát triển trong các tháng 5, 6,
7, 8 (Nguyễn Công Thuật, 1995) Triệu chứng vết bệnh có dạng sọc hình thoi không đều đặn, màu nâu hoặc xám bạc, không có quầng vàng Kích thước vết bệnh lớn 6 -15 X 2- 4 mm, có khi vết bệnh kéo dài tới 5- 10 cm, nhiều vết bệnh
có thể liên kết nối tiếp với nhau làm cho lá dễ khô táp, rách ở đoạn chóp lá Bệnh thường xuất hiện ở lá phía dưới rồi lan dần lên các lá phía trên Trên vết bệnh khi trời ẩm dễ mọc ra một lớp mốc đen nhọn là các cành bào tử phân sinh
và bào tử phân sinh của nấm gây bệnh (Vũ Triệu Mân, Lê Lương Tề, 1998)
Ở giai đoạn đầu sinh trưởng (2- 5 lá), bệnh ít xuất hiện, bệnh thường tập trung phá hại nhiều từ 7- 8 lá đến các giai đoạn về sau Bệnh phát triển mạnh và gây tác hại rõ rệt ở những nơi mà kĩ thuật thâm canh không tốt, đất xấu, chặt, dễ đóng váng, bón phân ít, ruộng hay bị mưa, úng trũng, cây sinh trưởng chậm Bệnh lây lan bằng bào tử phân sinh xâm nhập qua lỗ khí hoặc trực tiếp qua biểu
bì Thời kì tiềm dục dài ngắn theo tuổi cây và trạng thái lá, khoảng 3- 9 ngày (Lê Lương Tề, 1997)
Những nghiên cứu của Nguyễn Công Thuật (1997) cho thấy ẩm độ đất và không khí cao là điều kiện thuận lợi cho bệnh phát triển mạnh Trường hợp đất khô hạn nhưng ẩm độ không khí cao, tác hại của bệnh càng nặng và năng suất giảm nhiều vì cây ngô bị khô héo nhanh (Nguyễn Công Thuật, 1995)
Trang 23PHẦN 3: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.1 Đối tượng,thời gian,địa điểm và vật liệu nghiên cứu
3.1.1 Đối tượng nghiên cứu
Nấm B.maydis và nấm B.turcecum hại ngô vụ xuân hè 2016 ở Hà Nội
và vùng phụ cận như xã Kim Sơn, Phú Thị, Đặng Xá, huyện Gia Lâm, Hà nội
3.1.2 Địa điểm và thời gian nghiên cứu
- Nghiên cứu tại phòng thí nghiệm của Bộ môn Bệnh Cây – Khoa Nông Học – Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam
-Khu thí nghiệm nhà lưới Khoa Nông học – Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam
-Một số khu vực trồng ngô tại Gia Lâm – Hà Nội
-Thời gian nghiên cứu: từ tháng 1 đến tháng 6 năm 2016
3.1.3 Vật liệu nghiên cứu
- Môi trường nuôi cấy: WA, PGA
- Các mẫu hạt giống thu thập được
- Các mẫu ngô thương phẩm thu thập được ngoài thị trường
- Các giống ngô: HN88, HN68, NK4300, DK9901
3.2 Nội dung nghiên cứu
- Điều tra thành phần và mức độ phổ biến bệnh hại trên ngô tại Kim Sơn, Gia Lâm, Hà Nội
- Điều tra diễn biến của bệnh đốm lá ngô tại Kim Sơn, Gia Lâm, Hà Nội
- Điều tra ảnh hưởng của các yếu tố giống, chân đất, mật độ… đến sự phát sinh gây hại của bệnh
- Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của nấm gây bệnh
- Khảo sát biện pháp phòng trừ bệnh bằng thuốc hóa học
Trang 243.3 Phương pháp nghiên cứu
3.3.1 Phương pháp nghiên cứu ngoài đồng ruộng
Điều tra theo quy chuẩn QCVN 01-38:BNNPTNT/2010 về phương pháp điều tra phát hiện dịch hại cây ngô Điều tra 10 điểm ngẫu nhiên nằm trên đường chéo của khu vực điều tra Điểm điều tra cách bờ ít nhất 2m Điều tra theo định kỳ 7 ngày một lần trong khu vực điều tra cố định ngay từ đầu vụ
+ số mẫu điều tra của 1 điểm: 10 cây ngẫu nhiên/điểm hoặc số bắp của 10 cây/điểm
A
+Tỷ lệ bệnh (%) = - x 100
BA: Số cây bị bệnh
B: Tổng số cây điều tra
Nxn
Nnxn x
N x
N x
N: là tổng số cây điều tra
9: là cấp bệnh cao nhất trong thang phân cấp
Với: Cấp 1: < 1% diện tích lá bị hại
Trang 253.3.2 Trong phòng thí nghiệm
3.3.2.1 Môi trường nuôi cấy
*Môi trường WA (Water Agar medium)
Thành phần: Nước cất :100ml
Agar :20g
Phương pháp điều chế: Thạch được hòa tan trong nước đun sôi và hấp vô trùng trong điều kiện 121 độ C (1,5atm) trong thời gian 45 phút Môi trường sau khi hấp xong để nguội dần khoảng 60 độ C rồi đổ vào các đĩa petri 5ml/đĩa (đường kính 90mm) với lượng môi trường này thao tác cắt bào tử sẽ dễ dàng hơn.Môi trường này dùng để phân lập nấm ban đầu,ít bị lẫn tạp do nghèo dinh dưỡng và để nuôi cấy đơn bào
*Môi trường PGA (Potato glucose agar)
Cho lần lượt Agar, đường khuấy đều cho tan hết, sau đó đổ môi trường vào bình tam giác, hay ống nghiệm có đậy nút bạc (bình tam giác, ống nghiệm, hộp Petri đã được rửa sạch và sấy khô ở nhiệt độ 1800C trong vòng 2 giờ) Sau
đó đem khử trùng trong nồi hấp ở áp suất 1.5 amt (1210C) trong 30 phút
3.3.2.2.Phương pháp để ẩm
Sau khi điều tra thu thập được mẫu bệnh (bắp) ngoài đồng ruộng chọn mẫu bệnh(hạt) có triệu chứng điển hình để trong hộp petri có lót giấy ẩm, để ở
Trang 26nhiệt độ thích hợp sau 2 – 3 ngày có độ ẩm thường xuyên, đem kiểm tra dưới kính hiển vi để xác định tác nhân gây bệnh.
3.3.2.3.Phương pháp kiểm tra nấm từ vết bệnh
a Kiểm tra trực tiếp vết bệnh (thích hợp cho các mô mỏng như lá cây)
-Chuẩn bị một lam sạch
-Cắt vết bệnh cần quan sát thành các mảnh nhỏ kích thước khoảng 1-2
cm Mẫu bệnh có thể được quan sát ngay sau khi thu thập ngoài đồng hoặc để
ẩm trong hộp petri từ hôm trước
- Đặt tiêu bản lên lam sao cho phần vết bệnh hướng lên trên
- Điều chỉnh kính để có ánh sáng tối đa và quan sát ở độ phóng đại thấp (vật kính: x4, x10)
Chú ý: Không nên cắt quá nhỏ mẫu bệnh và cần quan sát nhanh vì dưới
cường độ ánh sáng mạnh, mẫu sẽ nhanh bị khô
b Kiểm tra nấm bệnh bằng cố định lam
Chuẩn bị: lam, la men, que khêu nấm, dao mổ, nước cất vô trùng, mẫu bệnh Mẫu bệnh (mẫu lá, quả, thân, cành, rễ, hạt) có thể được sử dụng ngay sau khi thu thập hoặc để ẩm
- Nhỏ một giọt nước cất lên lam
- Dùng que khêu nấm hoặc dao mổ lướt nhẹ đầu nhọn trên vết bệnh, nhúng vào trong giọt nước trên lam và khuấy nhẹ Nhẹ nhàng đậy la men lên trên giọt nước (cố gắng tránh để có bọt khí) Dùng giấy thấm hút nước thừa xung quanh la men
3.3.2.4 Phương pháp phân lập nấm
- Chọn những mẫu bệnh mới, vết bệnh điển hình sau đó rửa sạch Chuẩn
bị dụng cụ: dao, panh, giấy thấm vô trùng, cốc thủy tinh đựng cồn (ethanol), cồn (ethanol) 70%, nước cất, 3 đĩa đựng nước cất, bàn thái Khử trùng buồng cấy bằng cồn (ethanol) 70%
Trang 27- Cắt mảnh mô bệnh thích hợp sau đó khử trùng bề mặt bằng cách dùng giấy mềm đã nhúng cồn (ethanol) 70% lau mặt lá hoặc bằng cách nhúng nhanh vào cồn (ethanol, rửa lại trong nước vô trùng và để khô trên giấy thấm vô trùng.
- Dùng dụng cụ đã khử trùng cắt những miếng cấy nhỏ 1 – 3 mm (chứa cả phần mô bệnh và mô khỏe), sau đó dùng panh vô trùng đặt lên môi trường WA (để nấm phát triển bào tử) hoặc môi trường chọn lọc, đặt những miếng cấy gần mép đĩa
- Bọc đĩa lại bằng nilon gói thực phẩm và để ở điều kiện nhiệt độ và ánh sáng thích hợp để bào tử nấm hình thành Theo dõi và kiểm tra sự phát triển của sợi nấm mọc ra từ mô bệnh
- Sau khi nấm mọc, tiến hành cắt đầu sợi nấm cấy truyền sang các đĩa khác cho tới khi thu được nguồn nấm thuần khiết Quan sát đặc điểm hình thái, màu sắc sợi nấm
- Quan sát ở độ phóng đại từ thấp đến cao (vật kính: x40-x100)
x10-x20-* Phát hiện nấm gây bệnh bằng kỹ thuật lam ép
Mẫu bệnh:
-Bệnh đốm lá nhỏ: Bipolaris Maydis
-Bệnh đốm lá lớn E turcicum
Trình tự
Cố định mẫu trong nước
-Nhỏ một giọt nước cất nhỏ lên lam kính
-Đặt mẫu vào vị trí giọt nước, dưới một kính lúp soi nổi
-Đặt lamen sao cho một cạnh chạm lam kính gần mép giọt nước
-Từ từ hạ cạnh bên kia của lamen xuống sao cho lamen trùm lên trên giọt nước phương pháp này giúp đẩy các bọt khí ra khỏi mẫu lam
-Dùng một miếng giấy thấm hoặc giấy lọc để thấm đi phần nước thừa phía ngoài lamen Các bào tử từ cây bị bệnh hoặc mẫu nấm được nuôi cấy
Trang 28nhân tạo có thể được lấy ra dùng một que cấy và đặt vào vị trí giọt nước.
Các cấu trúc tạo bào tử lớn hơn cần được kiểm tra dưới kính lúp soi nổi, sau đó được đặt vào một giọt nước và làm dẹp bằng cách dùng một dụng
cụ có bề mặt phẳng ép nhẹ lên lamen
-Kiểm tra mẫu lam dưới kính hiển vi ở các vật kính 10, 40, 100
3.3.3 Một số đặc điểm chung của các loài Bipolaris sp hại ngô
- Tiến hành quan sát các đặc điểm hình thái, sinh học của nấm Bipolaris
sp trên môi trường PGA
- Chỉ tiêu theo dõi: Màu sắc của tản nấm, màu của môi trường, đặc điểm sợi, đặc điểm bào tử lớn, đặc điểm bào tử nhỏ
3.3.4 Phương pháp lây bệnh nhân tạo trên ngô
* Phương pháp lây bệnh nhân tạo nấm đốm lá lớn và đốm lá nhỏ
ngô trên ngô bằng phương pháp lây nhiễm trực tiếp.
- Chuẩn bị nguồn và ký chủ lây bệnh như phương pháp lây nhiễm bằng phương pháp phun bào tử
- Phương pháp lây nhiễm:
+ Chuẩn bị nguồn nấm cấy trên PGA và băng dính để thực hiện lây bệnh trực tiếp
+ Dùng que khêu nấm khêu lấy một phần thạch một phần sợi nấm sau đó gián vào cây ký chủ Mỗi công thức thực hiện 3 lần nhắc lại mỗi lần nhắc lại
là 10 vết lây nhiễm Sau đó dùng băng dính cố định lại và dán nhãn Công thức đối chứng không lây nhiễm nấm bệnh
+ Chỉ tiêu theo dõi: để đánh giá mức kháng nhiễm khác nhau của các giống trong mỗi công thức với đốm lá nhỏ ta xác định, bán kính quầng vết bệnh và chiều dài vết bệnh, đơn vị là mm đối với đốm lá lớn chi xác định kích thước vết bệnh (mm) qua 3 ngày, 5 ngày, 7 ngày
Trang 29Nguồn bệnh: nấm B.maydis, E.turcicum
Thuốc hóa học: Carbenda 60WP
Công thức đối chứng là cấy nấm lên đĩa môi trường không pha thuốc
Chỉ tiêu theo dõi: theo dõi sự phát triển của nấm ở các nồng độ thuốc khác nhau bằng cách đo đường kính (mm) của nấm sau 1, 2, 3, 4, 5 ngày sau cấy Từ
đó xác định nồng độ thuốc ức chế sự phát triển của nấm
Trang 30
Phần 4 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 4.1Thành phần bệnh trên ngô trồng tại Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016
Trong quá trình thực hiện đề tài chúng tôi tiến hành điều tra từ cuối tháng 1 năm 2016 đến đầu tháng 6 năm 2016 tại các xã có diện tích trồng ngô lớn của tỉnh Gia Lâm là các xã Kim Sơn, Đặng Xá, Phú Thị
Đây là những xã không những có diện tích trồng ngô lớn mà còn có diện tích trồng ngô trên các chân đất khác nhau của tỉnh Gia Lâm là đất trong bãi, đất ngoài bãi và đất ruộng
Chúng tôi đã xác định được thành phần một số nấm bệnh hại trên ngô tại Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016 Kết quả được trình bày ở bảng 4.1
Bảng 4.1 : Thành phần nấm bệnh hại ngô ở Gia Lâm vụ xuân hè năm 2016
hiện bệnh
Mức
độ phổ biến
Trang 31Từ kết quả bảng 3.1 và qua quá trình điều tra quan sát phát hiện thấy có 6 loài nấm điển hình gây hại trên ngô vụ xuân hè tại các xã điều tra thuộc huyện Gia Lâm năm 2016 với các mức độ nặng nhẹ khác nhau.
Xuất hiện phổ biến với tỷ lệ bệnh > 15% trong số các bệnh có mặt gây
hại trên ngô là 2 bệnh đốm lá lớn do nấm E.turcicum và đốm lá nhỏ do nấm
B.maydis gây ra Bệnh đốm lá nhỏ xuất hiện sớm hơn bệnh đốm lá lớn và bắt
đầu xuất hiện trên ngô ở giai đoạn ngô có từ 3 lá thật Bệnh đốm lá lớn xuất hiện muộn hơn, bắt đầu xuất hiện từ giai đoạn ngô có 3-7 lá thật Một số bệnh ít phổ
biến hơn ( với tỷ lệ bệnh 5 -15 %) là bệnh gỉ sắt hại ngô (P.maydis) và bệnh khô vằn ngô do nấm R.solani gây ra Trong quá trình điều tra chúng tôi còn
bắt gặp một số bệnh ít phổ biến ( TLB< 5%) là mốc hồng ngô và bệnh ung thư ngô
Trong quá trình điều tra và giám định bệnh hại trên ngô chúng tôi thấy Các bệnh khác nhau biểu hiện triệu chứng và giai đoạn gây bệnh trên cây ngô
là khác nhau Do vây, nhận biết từng loài bệnh gây hại trên cây ngô là rất cần thiết với mục đích đó chúng tôi giám định từng loài bệnh trên với triếu chứng
và giai đoạn gây hại chính trên cây ngô như sau:
4.1.1 Bệnh khô vằn hại Ngô (Rhizoctonia solani)
Bệnh hại trên các bộ phận phiến lá, bẹ lá, thân và bắp ngô tạo ra các vết bệnh lớn màu xám tro, loang lổ đốm vằn da hổ, hình dạng bất định như dạng đám mây Vết bệnh lan từ các bộ phận phía gốc cây lên tới áo bắp và bắp ngô, bông cờ làm cây, lá úa vàng tàn lụi, khô chết bắp thối khô
Bệnh này gây hại chủ yếu từ giai đoạn cây 7 lá thật trở đi, nhiều ruộng điều tra chúng tôi thấy bệnh gây hại nặng lên cả áo bắp
4.1.2 Bệnh gỉ sắt hại ngô (Puccinia maydis)
Bệnh hại chủ yếu ở phiến lá, có khi ở bẹ lá và áo bắp Vết bệnh lúc đầu rất nhỏ chỉ là một chấm vàng trong, xếp không có trật tự, khó phát hiện, nhưng về sau to dần, vết vàng nhạt tạo ra các vết đốm nổi (1mm), tế bào biểu