VIÊN NANG OMEPRAZOL Capsulae Omeprazoli Là viên nang chứa omeprazol Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu chuyên luận “Thuốc nang” (Phụ lục 1.13) yêu cầu sau đây: Hàm lượng omeprazol, C17H19N3O3S, từ 90,0 đến 110,0% so với hàm lượng ghi nhãn Định tính A Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silica gel G dày 0,25 mm, xử lý trước với methanol Dung môi pha loãng: Hỗn hợp methylen clorid - methanol (1:1) Dung dịch thử: Lấy thuốc viên nang, nghiền mịn trộn Cân lượng bột thuốc tương ứng với 10 mg omeprazol vào bình đựng thích hợp, thêm ml dung môi pha loãng, siêu âm phút, để yên dung dịch 20 phút trước chấm sắc ký Dung dịch đối chiếu: Hòa tan lượng omeprazol chuẩn dung môi pha loãng để dung dịch có nồng độ mg/ml Dung môi khai triển: Hỗn hợp methylen clorid bão hòa amoniac - methylen clorid - isopropanol (2 : : 1) B Trong phần định lượng, thời gian lưu pic sắc ký đồ dung dịch thử phải tương ứng với thời gian lưu pic omeprazol sắc ký đồ dung dịch chuẩn Độ hòa tan (Phụ lục 11.4) Môi trường acid Môi trường hòa tan: 500 ml dung dịch acid hydrocloric 0,1 N (TT) Thiết bị: Kiểu giỏ quay Tốc độ quay: 100 vòng/phút Thời gian: Cách tiến hành: Tiến hành phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động, dung dịch đệm phosphat điều kiện sắc ký thực mô tả phần Môi trường đệm Dung dịch chuẩn: Cân xác khoảng 50 mg omeprazol chuẩn vào bình định mức 250 ml, hòa tan 50 ml ethanol (TT), pha loãng dung dịch natri borat 0,01 M đến định mức Hút xác 10 ml dung dịch cho vào bình định mức 100 ml, thêm 20 ml ethanol (TT, pha loãng dung dịch natri borat 0,01 M đến định mức, lắc Dung dịch thử: Thử viên cho viên vào cốc thử nghiệm Sau thời gian hòa tan, lọc dung dịch môi trường qua rây có đường kính lỗ rây không 0,2 mm Lấy vi hạt rửa chúng nước, dùng khoảng 60 ml dung dịch natri borat 0,01 M (TT) để chuyển vi hạt vào bình định mức 100 ml, siêu âm khoảng 20 phút vi hạt vỡ ra, thêm 20 ml ethanol (TT), pha loãng dung dịch natri borat 0,01 M đến định mức, lắc Pha loãng lượng thích hợp dung dịch với dung dịch natri borat 0,01 M để dung dịch có nồng độ omeprazol khoảng 0,02 mg/ml Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn dung dịch thử Tính hàm lượng omeprazol, C17H19N3O3S, hòa tan môi trường acid công thức: A (mg) = T – CD (ru/rs) Trong đó: T: Hàm lượng ghi nhãn (mg) C: Nồng độ dung dịch omeprazol chuẩn (mg/ml) D: Hệ số pha loãng dung dịch thử ru, rs: Diện tích pic omeprazol dung dịch thử dung dịch chuẩn Đánh giá kết quả: Mức độ L1: Không có viên có hàm lượng omeprazol hòa tan vượt 15% Mức độ L2: Giá trị trung bình 12 viên không vượt 20% viên có hàm lượng omeprazol hòa tan lớn 35% Mức độ L3: Giá trị trung bình 24 viên không vượt 20% nhiều viên có hàm lượng omeprazol hòa tan lớn 35% viên hòa tan lớn 45% Môi trường đệm Thiết bị: Kiểu giỏ quay Pha dung dịch đệm: Dung dịch dinatri phosphat 0,235 M pH 10,4: Hòa tan 33,36 g dinatriphosphat khan (TT) 1000 ml nước, điều chỉnh đến pH 10,4 ± 0,1 dung dịch natri hydroxyd N (TT) Dung dịch đệm phosphat pH 6,8 (TT): Thêm 400 ml dung dịch acid hydrocloric 0,1 N (TT) vào 320 ml dung dịch dinatri phosphat 0,235 M pH 10,4, điều chỉnh đến pH 6,8 ± 0,05 (nếu cần) dung dịch acid hydrocloric N (TT) dung dịch natri hydroxyd N (TT) Dung dịch đệm phosphat pH 7,6 (TT): Hòa tan 0,718 g natri dihydrophosphat (TT) 4,49 g dinatri phosphat (TT) 1000 ml nước Điều chỉnh đến pH 7,6 ± 0,1 (nếu cần) dung dịch acid hydrocloric N (TT) dung dịch natri hydroxyd N (TT) Pha loãng 250 ml dung dịch thành 1000 ml nước Môi trường hòa tan: 900 ml dung dịch đệm phosphat pH 6,8 (TT) Thực giai đoạn môi trường acid với viên nang lô Sau giờ, thêm 400 ml dung dịch dinatri phosphat 0,235 M vào cốc Điều chỉnh đến pH 6,8 ± 0,05 (nếu cần) dung dịch acid hydrocloric 2N (TT) dung dịch natri hydroxyd N (TT) Tốc độ quay: 100 vòng/phút Thời gian: 30 phút Cách tiến hành: Tiến hành phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động: Acetonitril - dung dịch đệm phosphat pH 7,6 (34:66), điều chỉnh tỉ lệ cần Dung dịch chuẩn (1) (đối với viên nang 10 mg): Hòa tan xác lượng omeprazol chuẩn ethanol(TT) để dung dịch có nồng độ khoảng mg/ml Tiếp tục pha loãng dung dịch đệm phosphat pH 6,8 (TT) để dung dịch có nồng độ 0,01 mg/ml Thêm ml dung dịch natri hydroxyd 0,25 M (TT) vào 10 ml dung dịch này, lắc Dung dịch chuẩn (2) (đối với viên nang 20 mg 40 mg): Tiến hành dung dịch chuẩn (1), dung dịch thu trước thêm ml dung dịch natri hydroxyd 0,25 M (TT) phải có nồng độ 0,02 mg/ml Dung dịch thử (1) (đối với viên nang 10 mg 20 mg): Hút ml dung dịch sau hòa tan vào ống nghiệm có chứa sẵn ml dung dịch natri hydroxyd 0,25 M (TT) Lắc đều, lọc qua màng lọc 1,2 µm mịn Tránh ánh sáng Dung dịch thử (2) (đối với viên nang 40 mg): Hút ml dung dịch sau hòa tan cho vào ống nghiệm có chứa sẵn ml dung dịch natri hydroxyd 0,25 M (TT) ml dung dịch đệm phosphat pH 6,8 (TT) Lắc đều, lọc qua màng lọc 1,2 µm mịn Tránh ánh sáng Điều kiện sắc ký: Cột sắc ký: Cột thép không gỉ (12,5 cm x 4,0 mm) nhồi pha tĩnh B (5 µm) Detector quang phổ hấp thụ tử ngoại đặt bước sóng 280 nm Tốc độ dòng: ml/phút Thể tích tiêm: 20 µl Cách tiến hành: Kiểm tra khả thích hợp hệ thống sắc ký: Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn, Phép thử có giá trị hiệu lực cột xác định số đĩa lý thuyết không 2000 độ lệch chuẩn tương đối diện tích pic omeprazol sắc ký đồ thu lần tiêm nhắc lại không lớn 2% Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn dung dịch thử Tính hàm lượng omeprazol, C17H19N3O3S, hòa tan môi trường đệm theo công thức sau: B (mg) = V x CD (ru/rs) Trong đó: V: Thể tích môi trường hòa tan cốc (ml) C: Nồng độ dung dịch chuẩn (mg/ml) D: Hệ số pha loãng dung dịch thử ru, rs: Diện tích pic omeprazol dung dịch thử dung dịch chuẩn Đánh giá kết quả: Đối với viên nang 10 mg 20 mg: Không 75% lượng omeprazol, C 17H19N3O3S, so với lượng ghi nhãn hòa tan 30 phút Đối với viên nang 40 mg: Không 70% lượng omeprazol, C 17H19N3O3S, so với lượng ghi nhãn hòa tan 30 phút Tạp sắc ký Dung môi pha loãng, dung dịch A, dung dịch B, dung dịch chuẩn, dung dịch thử, pha động, điều kiện sắc ký: Như mô tả mục Định lượng Tiêm riêng biệt 10 µL dung dịch chuẩn thử, ghi lại sắc ký đồ, đo độ đáp ứng tất pic Tính phần trăm tạp chất phần viên nang lấy theo công thức: P (%) = (10C/FA)(r i/rs) Trong đó: C: Nồng độ omeprazol dung dịch chuẩn (µg/ml) F: Hệ số đáp ứng tương đối (F = 1,6 pic có thời gian lưu tương đối khoảng 0,33; F = 3,1 pic có thời gian lưu tương đối khoảng 0,64; F = tạp lại) A: Khối lượng omeprazol dùng định lượng (mg) ri: Diện tích pic tạp dung dịch thử rs: Diện tích pic dung dịch chuẩn Yêu cầu: Mỗi tạp chất không 0,5% tổng tất tạp chất không 2% Định lượng Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Dung môi pha loãng: Hòa tan 7,6 g natri borat decahydrat (TT) 800 ml nước Thêm g edetat dinatri (TT), điều chỉnh đến pH 11,0 ± 0,1 dung dịch natri hydroxyd 50% (TT) Chuyển dung dịch vào bình định mức 2000 ml, thêm 400 ml ethanol(TT, pha loãng với nước đến định mức Dung dịch A: Hòa tan g glycine 1500 ml nước, điều chỉnh đến pH 9,0 dung dịch natri hydroxyd 50% (TT) pha loãng với nước vừa đủ 2000 ml, lọc Dung dịch B: Acetonitril - metanol (85:15) Pha động: Thay đổi phần điều kiện sắc ký (điều chỉnh cần) Dung dịch chuẩn: Hòa tan (bằng cách siêu âm) lượng omeprazol chuẩn dung môi pha loãng để dung dịch có nồng độ khoảng 0,2 mg/ml Dung dịch thử: Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình nghiền thành bột mịn Cân xác lượng bột chế phẩm tương ứng với khoảng 20 mg omeprazol vào bình định mức 100 ml, thêm 50 ml dung môi pha loãng, siêu âm 15 phút, thêm dung môi đến định mức Lắc đều, lọc qua giấy lọc 0,45 µm Điều kiện sắc ký: Detector quang phổ tử ngoại bước sóng: 305 nm Cột sắc ký: Cột thép không gỉ (4,6 mm x 15 cm) nhồi pha tĩnh B (5 µm) Tốc độ dòng: 1,2 ml/phút Thời gian pha động thay đổi sau: Thời gian (phút) – 20 20 – 21 21 – 25 Dung dịch A (%) 88 – 40 40 – 88 88 Dung dịch B ( %) 12 – 60 60 – 12 12 Thể tích tiêm: 20 µl Cách tiến hành: Kiểm tra khả thích hợp hệ thống sắc ký: Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn Phép thử có giá trị hiệu lực cột xác định dung dịch chuẩn có số đĩa lý thuyết không 20 000, hệ số đuôi không lớn nhỏ 0,8 độ lệch chuẩn tương đối diện tích pic omeprazol sắc ký đồ thu lần tiêm nhắc lại không lớn 2% Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn dung dịch thử Tính hàm lượng omeprazol, C17H19N3O3S viên theo công thức: X (mg) = CD (ru/rs) Trong đó: C: Nồng độ omeprazol chuẩn dung dịch chuẩn (mg/ml) D: Hệ số pha loãng dung dịch thử ru, rs: Diện tích pic omeprazol dung dịch thử chuẩn Bảo quản Trong bao bì kín, để nơi khô mát, tránh ánh sáng Loại thuốc Thuốc chống loét dày, tá tràng, ức chế bơm proton Hàm lượng thường dùng 20 mg