Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của hai loài khổ sâm mềm (brucea mollis wall ex kurz) và cơm rượu trái hẹp (glycosmis stenocarpa (drake) guillaum) ở việt nam
Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 20 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
20
Dung lượng
2,64 MB
Nội dung
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN KHOA HỌCVÀ CÔNG NGHỆ VIỆTNAM VIỆN HÓAHỌC MAI HÙNG THANH TÙNG NGHIÊNCỨUTHÀNHPHẦNHÓAHỌCVÀHOẠTTÍNHSINHHỌCCỦAHAILOÀIKHỔSÂMMỀM(BRUCEAMOLLISWALLEXKURZ)VÀCƠMRƯỢUTRÁIHẸP(GLYCOSMISSTENOCARPA(DRAKE)GUILLAUM)ỞVIỆTNAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓAHỌC HÀ NỘI - 2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN KHOA HỌCVÀ CÔNG NGHỆ VIỆTNAM VIỆN HÓAHỌC MAI HÙNG THANH TÙNG NGHIÊNCỨUTHÀNHPHẦNHÓAHỌCVÀHOẠTTÍNHSINHHỌCCỦAHAILOÀIKHỔSÂMMỀM(BRUCEAMOLLISWALLEXKURZ)VÀCƠMRƯỢUTRÁIHẸP(GLYCOSMISSTENOCARPA(DRAKE)GUILLAUM)ỞVIỆTNAM Chuyên ngành: Hóa Hữu Mã số : 62.44.27.01 LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓAHỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS NGUYỄN MẠNH CƯỜNG GS.TS YOUNG HO KIM HÀ NỘI - 2012 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Đây công trình nghiêncứu riêng Các số liệu kết thu luận án hoàn toàn trung thực chưa công bố công trình khác Tác giả luận án Mai Hùng Thanh Tùng LỜI CẢM ƠN Luận án hoàn thành Viện Hóa học, Viện Khoa học Công nghệ ViệtNam Với lòng biết ơn chân thành sâu sắc nhất, xin bày tỏ lòng biết ơn tới PGS.TS Nguyễn Mạnh Cường GS.TS Young Ho Kim người thầy hướng dẫn tận tình tạo điều kiện giúp đỡ thời gian thực luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn quan tâm giúp đỡ Ban lãnh đạo Viện Hóahọc Viện Hóahọc hợp chất thiên nhiên, đặc biệt PGS.TS Phạm Quốc Long, Viện trưởng Viện Hóahọc hợp chất thiên nhiên, người tạo điều kiện giúp đỡ hoàn thành luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo trường Cao đẳng công nghiệp Tuy Hòa giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho thời gian làm luận án Tôi xin chân thành cảm ơn TS Đỗ Thị Thảo anh chị Tổ Thử nghiệm sinh học, Viện Công nghệ sinh học, Viện Khoa học Công nghệ ViệtNam giúp đỡ tạo điều kiện cho hoàn thànhnghiêncứuhoạttínhsinhhọc Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới tập thể cán Phòng Hoạt chất sinh học, Viện Hóahọc hợp chất thiên nhiên giúp đỡ nhiệt tình suốt thời gian thực luận án Cuối cùng, xin chân thành cảm ơn đến gia đình bạn bè cổ vũ, động viên hoàn thành tốt luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2012 Tác giả luận án Mai Hùng Thanh Tùng MỤC LỤC Trang Danh mục hình luận án DM1 Danh mục bảng luận án DM2 Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt DM3 MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chi Brucea (Sầu đâu) 1.1.1 Sơ lược chi Brucea 1.1.2 Thànhphầnhóahọc chi Brucea 1.1.2.1 Tình hình nghiêncứu nước 1.1.2.2 Tình hình nghiêncứu giới 1.1.2.2.1 Lớp chất quassinoit 1.1.2.2.2 Lớp chất ancaloit 1.1.2.2.3 Lớp chất tritecpenoit steroit 1.1.2.2.4 Lớp chất flavonoit 1.1.2.2.5 Lớp chất axít béo loại khác 1.1.3 Hoạttínhsinhhọcloài thuộc chi Brucea 12 1.1.3.1 Hoạttính chống sốt rét 12 1.1.3.2 Hoạttính kháng u ung thư 13 1.1.3.3 Hoạttính kháng virus TMV (Tobacco Mosaic Virus) 13 1.1.3.4 Hoạttính chống tiểu đường 13 1.1.3.5 Hoạttính kháng ký sinh trùng mũi khoan 14 1.1.3.6 Hoạttính kháng amíp 14 1.1.3.7 Các hoạttính khác 14 1.1.4 Sơ lược lớp chất quassinoit 14 1.1.4.1 Giới thiệu 14 1.1.4.2 Phân lập xác định cấu trúc 15 1.1.4.3 Sinh tổng hợp quassinoit 16 1.1.4.4 Bán tổng hợp quassinoit 17 1.1.4.5 Tổng hợp toàn phần quassinoit 18 1.1.4.6 Hoạttínhsinhhọc lớp chất quassinoit 19 1.1.5 LoàiKhổsâmmềm(BruceamollisWallexKurz) 20 1.2 Chi Glycosmis 21 1.2.1 Đặc điểm hình thái phân bố 21 1.2.2 Sử dụng dân gian 22 1.2.3 Thànhphầnhóahọc chi Glycosmis 23 1.2.3.1 Tecpenoit 23 1.2.3.2 Flavonoit 24 1.2.3.3 Cumarin 25 1.2.3.4 Ancaloit 25 1.2.3.5 Các ancaloit dạng amít chứa lưu huỳnh 25 1.2.3.6 Glycosid 26 1.2.4 Hoạttínhsinhhọcloài thuộc chi Glycosmis 27 1.2.5 LoàiCơmrượutráihẹp(Glycosmisstenocarpa(Drake)Guillaum) 27 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊNCỨU 30 2.1 Đối tượng phương pháp nghiêncứu 30 2.1.1 Thu mẫu cây, xác định tên khoa học phương pháp xử lý mẫu 30 2.1.2 Phương pháp phân lập hợp chất từ dịch chiết 30 2.1.3 Các phương phương xác định cấu trúc hóahọc hợp chất 30 2.1.3.1 Xác định điểm chảy góc quay cực 31 2.1.3.2 Phổ khối lượng (ESI-MS) phổ khối phân giải cao (HR-ESI-MS) 31 2.1.3.3 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 31 2.1.4 Phương pháp thử hoạttính gây độc (ức chế) tế bào ung thư in vitro 31 2.1.4.1 Vật liệu 31 2.1.4.2 Phương pháp nuôi cấy tế bào in vitro 31 2.1.4.3 Phép thử sinhhọc xác định hoạttính gây độc tế bào (cytotoxic assay) 31 2.2 Xử lí mẫu thực vật chiết tách 32 2.3 Hằng số vật lý kiện phổ hợp chất phân lập 40 2.4 Hoạttínhsinhhọc hợp chất phân lập 46 2.4.1 Kết thử hoạttính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư KB 47 2.4.2 Kết thử hoạttính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư LU-1 47 2.4.3 Kết thử hoạttính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư LNCaP 48 2.4.4 Kết thử hoạttính gây độc tế bào dòng tế bào ung thư HL-60 48 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 50 3.1 Đánh giá tác dụng gây độc tế bào cặn chiết từ Khổsâmmềm 50 3.2 Cấu trúc hợp chất phân lập 50 3.2.1 Cấu trúc hợp chất phân lập từ Khổsâmmềm 50 3.2.2 Cấu trúc hợp chất phân lập từ thân rễ Khổsâmmềm 74 3.2.3 Xác định tên khoa học Brucea mollis 108 3.2.4 Cấu trúc hợp chất phân lập từ rễ Cơmrượutráihẹp 109 KẾT LUẬN 137 DANH MỤC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ TRONG KHUÔN KHỔ LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC DM-1 DANH MỤC CÁC HÌNH TRONG LUẬN ÁN Trang Hình 1.1 Các khung lớp chất quassinoit Hình 1.2 Quassin 117 neoquassin 118 hai quassinoit 15 phân lập từ Quassia amara 16 Hình 1.3 Con đường sinh tổng hợp quassinoit 17 Hình 1.4 Bán tổng hợp bruceantin từ bruceoside A 18 Hình 1.5 Tổng hợp toàn phần bruceantin 19 Hình 1.6 Cây Khổsâmmềm(BruceamollisWallexKurz) 21 Hình 1.7 Cây Cơmrượutráihẹp(Glycosmisstenocarpa(Drake)Guillaum) 27 Hình 2.1 Sơ đồ phân đoạn cặn chiết từ Khổsâmmềm 33 Hình 2.2 Sơ đồ phân lập chất từ Khổsâmmềm 36 Hình 2.3 Sơ đồ phân lập chất từ thân rễ Khổsâmmềm 38 Hình 2.4 Sơ đồ phân lập chất từ rễ Cơmrượutráihẹp 39 Hình 2.5 Tác dụng ức chế tế bào ung thư KB hợp chất BM.19 nồng độ 20; 4; 0,8 mg/ml…………………………………… Hình 2.6 Tác dụng ức chế tế bào ung thư LNCaP hợp chất BM.17 nồng độ 20; 4; 0,8 mg/ml………………………………… Hình 2.7 47 48 Tác dụng ức chế tế bào ung thư HL-60 hợp chất BM.19 nồng độ 20; 4; 0,8 mg/ml………………………………… 49 Hình 3.1 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.01 51 Hình 3.2 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.02 52 Hình 3.3 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.03 52 Hình 3.4 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.04 52 Hình 3.5 Phổ 1H-NMR hợp chất BM.04 54 Hình 3.6 Phổ DEPT hợp chất BM.04 54 Hình 3.7 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.05 56 DM-1 Hình 3.8 Phổ 1H-NMR hợp chất BM.05 56 Hình 3.9 Phổ DEPT hợp chất BM.05 57 Hình 3.10 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.06 57 Hình 3.11 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.07 58 Hình 3.12 Các tương tác HMBC NOESY hợp chất BM.08 60 Hình 3.13 Phổ 1H-NMR hợp chất BM.08 60 Hình 3.14 Phổ DEPT hợp chất BM.08 61 Hình 3.15 Phổ HSQC hợp chất BM.08 61 Hình 3.16 Phổ HMBC hợp chất BM.08 61 Hình 3.17 Phổ COSY hợp chất BM.08 62 Hình 3.18 Phổ NOESY hợp chất BM.08 62 Hình 3.19 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.09 63 Hình 3.20 Phổ H-NMR hợp chất BM.09 63 Hình 3.21 Phổ DEPT hợp chất BM.09 63 Hình 3.22 Các tương tác phổ HMBC, COSY NOESY hợp chất BM.10 66 Hình 3.23 Phổ H-NMR hợp chất BM.10 66 Hình 3.24 Phổ DEPT hợp chất BM.10 67 Hình 3.25 Phổ HSQC hợp chất BM.10 67 Hình 3.26 Phổ HMBC hợp chất BM.10 67 Hình 3.27 Phổ COSY hợp chất BM.10 68 Hình 3.28 Phổ NOESY hợp chất BM.10 68 Hình 3.29 Phổ khối phân giải cao HR-ESI-MS hợp chất BM.10 68 Hình 3.30 Các tương tác HMBC hợp chất BM.11 69 Hình 3.31 Phổ 1H-NMR hợp chất BM.11 69 Hình 3.32 Phổ DEPT hợp chất BM.11 70 Hình 3.33 Các tương tác HMBC hợp chất BM.12 70 Hình 3.34 Phổ H-NMR hợp chất BM.12 71 Hình 3.35 Phổ 13C-NMR hợp chất BM.12 71 DM-1 Hình 3.36 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.13 75 Hình 3.37 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.14 75 Hình 3.38 Phổ 1H-NMR hợp chất BM.14 76 Hình 3.39 Phổ 13C-NMR hợp chất BM.14 76 Hình 3.40 Các tương tác phổ HMBC, COSY NOESY hợp chất BM.15 77 Hình 3.41 Phổ 1H-NMR hợp chất BM.15 80 Hình 3.42 Phổ DEPT hợp chất BM.15 80 Hình 3.43 Phổ HSQC hợp chất BM.15 80 Hình 3.44 Phổ HMBC hợp chất BM.15 81 Hình 3.45 Phổ COSY hợp chất BM.15 81 Hình 3.46 Phổ NOESY hợp chất BM.15 81 Hình 3.47 Các tương tác NOESY hợp chất BM.16 82 Hình 3.48 Phổ 1H-NMR hợp chất BM.16 83 Hình 3.49 Phổ DEPT hợp chất BM.16 84 Hình 3.50 Phổ HSQC hợp chất BM.16 84 Hình 3.51 Phổ HMBC hợp chất BM.16 84 Hình 3.52 Phổ COSY hợp chất BM.16 85 Hình 3.53 Phổ NOESY hợp chất BM.16 85 Hình 3.54 Các tương tác HMBC COSY hợp chất BM.17 86 Hình 3.55 Phổ 1H-NMR hợp chất BM.17 87 Hình 3.56 Phổ DEPT hợp chất BM.17 88 Hình 3.57 Phổ HSQC hợp chất BM.17 88 Hình 3.58 Phổ HMBC hợp chất BM.17 88 Hình 3.59 Phổ COSY hợp chất BM.17 89 Hình 3.60 Phổ NOESY hợp chất BM.17 89 Hình 3.61 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.18 90 Hình 3.62 Phổ H-NMR hợp chất BM.18 91 Hình 3.63 Phổ DEPT hợp chất BM.18 91 DM-1 Hình 3.64 Các tương tác HMBC hợp chất BM.19 92 Hình 3.65 Phổ H-NMR hợp chất BM.19 94 Hình 3.66 Phổ DEPT hợp chất BM.19 94 Hình 3.67 Phổ HMBC hợp chất BM.19 94 Hình 3.68 Cấu trúc hóahọc tương tác HMBC hợp chất BM.20 95 Hình 3.69 Phổ 1H-NMR hợp chất BM.20 96 Hình 3.70 Phổ 13C-NMR hợp chất BM.20 96 Hình 3.71 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.21 97 Hình 3.72 Phổ H-NMR hợp chất BM.21 98 Hình 3.73 Phổ DEPT hợp chất BM.21 98 Hình 3.74 Các tương tác HMBC, COSY, NOESY hợp chất BM.22 99 Hình 3.75 Phổ 1H-NMR hợp chất BM.22 101 Hình 3.76 Phổ DEPT hợp chất BM.22 101 Hình 3.77 Phổ HSQC hợp chất BM.22 102 Hình 3.78 Phổ HMBC hợp chất BM.22 102 Hình 3.79 Phổ COSY hợp chất BM.22 102 Hình 3.80 Phổ NOESY hợp chất BM.22 103 Hình 3.81 Phổ ESI-MS hợp chất BM.22 103 Hình 3.82 Cấu trúc hóahọc hợp chất BM.23 104 Hình 3.83 Phổ 1H-NMR hợp chất BM.23 104 Hình 3.84 Phổ DEPT hợp chất BM.23 105 Hình 3.85 Phổ HSQC hợp chất BM.23 105 Hình 3.86 Phổ HMBC hợp chất BM.23 105 Hình 3.87 Cấu trúc hóahọc tương tác HMBC hợp chất GP.24 112 Hình 3.88 Phổ IR hợp chất GP.24 112 Hình 3.89 Phổ 1H-NMR hợp chất GP.24 112 Hình 3.90 Phổ DEPT hợp chất GP.24 113 Hình 3.91 Cấu trúc hóahọc hợp chất GP.25 114 Hình 3.92 Phổ 1H-NMR hợp chất GP.25 115 DM-1 Hình 3.93 Phổ DEPT hợp chất GP.25 115 Hình 3.94 Phổ HSQC hợp chất GP.25 115 Hình 3.95 Phổ HMBC hợp chất GP.25 116 Hình 3.96 Phổ COSY hợp chất GP.25 116 Hình 3.97 Cấu trúc hóahọc hợp chất GP.26 117 Hình 3.98 Phổ 1H-NMR hợp chất GP.26 118 Hình 3.99 Phổ DEPT hợp chất GP.26 119 Hình 3.100 Phổ HSQC hợp chất GP.26 119 Hình 3.101 Phổ HMBC hợp chất GP.26 120 Hình 3.102 Phổ COSY hợp chất GP.26 120 Hình 3.103 Phổ HR-ESI-MS hợp chất GP.26 121 Hình 3.104 Sơ đồ phân mảnh hợp chất GP.27 phổ ESI-MS 123 Hình 3.105 Các tương tác HMBC, COSY NOESY hợp chất GP.27 123 Hình 3.106 Phổ 1H-NMR hợp chất GP.27 124 Hình 3.107 Phổ DEPT hợp chất GP.27 124 Hình 3.108 Phổ HSQC hợp chất GP.27 124 Hình 3.109 Phổ HMBC hợp chất GP.27 125 Hình 3.110 Phổ COSY hợp chất GP.27 125 Hình 3.111 Phổ NOESY hợp chất GP.27 126 Hình 3.112 Phổ ESI-MS hợp chất GP.27 126 DM-2 DANH MỤC CÁC BẢNG TRONG LUẬN ÁN Trang Bảng 2.1 Kết thử hoạttính hợp chất phân lập từ Khổsâmmềm bốn dòng ung thư Bảng 2.2 Kết thử hoạttính gây độc tế bào ung thư KB hợp chất BM.06, BM.07, BM.10, BM.15, BM.17, BM.19, BM.22 Bảng 2.3 48 Kết thử hoạttính gây độc tế bào ung thư HL-60 hợp chất BM.06, BM.07, BM.10, BM.15, BM.17, BM.19, BM.22… Bảng 3.1 47 Kết thử hoạttính gây độc tế bào ung thư LNCaP hợp chất BM.06, BM.07, BM.10, BM.15, BM.17, BM.19, BM.22 Bảng 2.5 47 Kết thử hoạttính gây độc tế bào ung thư LU-1 hợp chất BM.06, BM.07, BM.10, BM.15, BM.17, BM.19, BM.22 Bảng 2.4 46 48 Kết thử độc tính tế bào cặn chiết từ Khổsâmmềm(Bruceamollis Wall.ex Kurz) 50 Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.04 53 Bảng 3.3 Số liệu phổ 13C-NMR hợp chất BM.05 chất tham khảo 55 Bảng 3.4 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.06, BM.07 chất tham khảo 58 Bảng 3.5 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.10 64 Bảng 3.6 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.10 chất tham khảo 65 Bảng 3.7 Tổng hợp hợp chất phân lập từ Khổsâmmềm 72 Bảng 3.8 Số liệu phổ H-NMR hợp chất BM.13 chất tham khảo 74 Bảng 3.9 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.15 78 Bảng 3.10 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.15 chất tham khảo 79 Bảng 3.11 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.16 chất tham khảo 83 Bảng 3.12 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.17 chất tham khảo 86 Bảng 3.13 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.18 chất tham khảo 90 DM-2 Bảng 3.14 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.19 chất tham khảo 93 Bảng 3.15 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.20 95 Bảng 3.16 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.21 chất tham khảo 97 Bảng 3.17 Số liệu phổ NMR hợp chất BM.22 100 Bảng 3.18 Tổng hợp hợp chất phân lập từ thân rễ Khổsâmmềm 106 Bảng 3.19 Số liệu phổ NMR hợp chất GP.24 111 Bảng 3.20 Số liệu phổ NMR hợp chất GP.25 113 Bảng 3.21 Số liệu phổ NMR hợp chất GP.25 chất tham khảo 114 Bảng 3.22 Số liệu phổ NMR hợp chất GP.26 chất tham khảo 118 Bảng 3.23 Số liệu phổ NMR hợp chất GP.26 118 Bảng 3.24 Số liệu phổ NMR hợp chất GP.27 122 Bảng 3.25 Cấu trúc hợp chất phân lập từ rễ Cơmrượutráihẹp 127 Bảng 3.26 Bảng tổng kết hợp chất phân lập từ Khổsâmmềm(BruceamollisWallexKurz)Cơmrượutráihẹp(Glycosmisstenocarpa(Drake)Guillaum) 129 DM-3 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT H-NMR 13 C- NMR DEPT Proton Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance Spectroscopy proton Carbon -13 Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance Spectroscopy cacbon 13 Distortionless Enhancement by Phổ DEPT Polarisation Transfer HMBC Heteronuclear Multiple Bond Phổ HMBC Correlation HSQC Heteronuclear Single Quantum Phổ HSQC Coherence NOESY Nuclear Overhauser Effect Phổ NOESY Spectroscopy H-1H-COSY H -1H - Correlation Phổ tương tác proton Spectroscopy ESI-MS HR-ESI-MS Electron Spray Ionization-Mass Phổ khối ion hóa phun mù Spectroscopy điện tử High Resolution Electron Phổ khối phân giải cao ion hóa Spray Ionization Mass phun mù điện tử Spectroscopy IR Infrared Spectroscopy Phổ hồng ngoại s Singlet d Doublet t Triplet q Quartet dd doublet doublet dt doublet triplet DM-3 b Broad m Multiplet J (Hz) Hằng số tương tác tính Hz δ (ppm) (ppm = part per million) Độ dịch chuyển hóahọctính ppm (phần triệu) CC Column Chromatography Sắc ký cột thường TLC Thin Layer Chromatography Sắc ký mỏng HS (%) Hiệu suất so với mẫu khô CTCT Công thức cấu tạo CTPT Công thức phân tử KB Human epidermoid carcinoma Ung thư biểu mô Hep-G2 Human hepatocellular Ung thư gan người carcinoma MCF-7 Adenocarcinoma Ung thư vú LU-1 Human lung carcinoma Ung thư phổi người LNCaP Human prostate Ung thư tiền liệt tuyến adenocarcinoma HL-60 Human promyelocytic Ung thư máu cấp tính leukemia IC50 Inhibitory concentration 50% Nồng độ ức chế tối thiểu 50% Mp Melting point Điểm chảy MeOH Metanol DMSO Dimethylsulfoxide Py Pyridin EtOAc Etyl axetat TMS Tetrametyl Silan BuOH Butanol MỞ ĐẦU Cho đến ngày dân số giới đạt bảy tỷ người, số lớn nhu cầu khám chữa bệnh tăng theo Trong tình trạng sử dụng thuốc bừa bãi không theo hướng dẫn bác sĩ dẫn đến kháng thuốc, đặc biệt nước phát triển vô tình tạo áp lực lớn ngành y tế giới phải cố gắng tìm loại thuốc Thiên nhiên kho thuốc khổng lồ, mà giới chưa khám phá hết ViệtNam có khí hậu nhiệt đới gió mùa, nóng ẩm, có hệ động thực vật đa dạng phong phú Đây tiềm to lớn mà cần phải tận dụng Hiện nay, tình trạng đốt phá rừng ngày gia tăng kiểm soát, đồng thời khí hậu thay đổi theo chiều hướng khắc nghiệt hơn, làm cho số lượng lớn loài suy thóai dần Nếu không nhanh chóng nghiêncứu bảo vệ nguồn gien mát to lớn loài người Ngày nay, hầu hết thuốc gia truyền sử dụng theo kinh nghiệm, phần lớn chưa chứng minh theo y học đại Thông thường người ta sử dụng dạng sắc lấy nước uống dạng cao, viên Đó hỗn hợp bao gồm nhiều thànhphần khác nhau, có thànhphần có khả làm tăng giảm hoạttính độc tính thuốc Vì vậy, cần phải nghiêncứu xác định xác tác dụng thànhphần hợp phần, từ tạo sở cho sử dụng tốt thuốc thuốc dân tộc Trong y học dân gian Khổsâmmềm(BruceamollisWallexKurz) sử dụng để trị sốt rét, đau bụng, u nhọt, amíp, ghẻ lở [1] Trong chương trình hợp tác ViệtNam Hàn Quốc, nhằm phát loài thực vật có kháng ung thư, tác giả phát dịch chiết MeOH từ Khổsâmmềm(Brucea mollis) có hoạttính mạnh, ức chế tới 96% tế bào ung thư phổi người A549 [2] Cây Cơmrượutráihẹp(Glycosmisstenocarpa(Drake)Guillaum) thu háiViệtNamnghiêncứu từ năm 2004 Từ Cơmrượutráihẹpphân lập số ancaloit murrayanin, murrayafoline A Trong đó, murrayafoline A có hoạttính ức chế mạnh phát triển tế bào ung thư đại tràng thông qua đường Wnt/b-catenin [3] Nhằm mục đích sâu nghiêncứuthànhphầnhóahọc tác dụng dược lý hai này, lựa chọn đề tài: " NghiêncứuthànhphầnhóahọchoạttínhsinhhọchailoàiKhổsâmmềm(BruceamollisWallexKurz)Cơmrượutráihẹp(Glycosmisstenocarpa(Drake)Guillaum)ViệtNam'' với nội dung nghiêncứu sau: Nghiêncứuthànhphầnhóahọchailoài Đánh giá hoạttính kháng ung thư số hợp chất phân lập CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chi Brucea (Sầu đâu) 1.1.1 Sơ lược chi Brucea Chi Brucea (Sầu đâu) chi thuộc họ Simaroubaceae (Thanh Thất) với sáu loài(Brucea javanica, Brucea mollis var tonkinensis, Brucea guineensis, Brucea sumatrana, Brucea antidysenterica Brucea amarissima) phân bố vùng nhiệt đới phía đông bán cầu [4], [5] ỞViệt Nam, theo Phạm Hoàng Hộ, chi Brucea có ba loài gồm Brucea javanica, Brucea mollis Brucea mollis var tonkinensis [5].Trong đó, có hailoài sử dụng dân gian để làm thuốc Sầu đâu cứt chuột (Brucea javanica) Khổsâmmềm(Brucea mollis) trị sốt rét, đau bụng, u nhọt Hailoài thường gặp vùng Lào Cai, Kom Tum, Lâm Đồng [1] Ở Trung Quốc, hailoài Brucea mollis Brucea javanica sử dụng thuốc thảo dược truyền thống hoạttính chống ung thư chống sốt rét chúng [6] Gần đây, thuộc chi Brucea thu hút nhiều quan tâm nghiêncứuthànhphầnhóa học, phổ hoạttínhsinhhọc đa dạng chúng Các nghiêncứuhóahọc chi Brucea phát nhiều hợp chất thuộc lớp chất quassinoit, ancaloit, tritecpenoit flavonoit 1.1.2 Thànhphầnhóahọc chi Brucea 1.1.2.1 Tình hình nghiêncứu nước Ở nước, có ba công bố nghiêncứuhailoài chi Brucea B javanica B sumatrana Năm 1979, tác giả Ngô Văn Thu nghiêncứuhoạttính chống sốt rét dịch chiết từ B sumatrana [7] Năm 1995, GS Trần Văn Sung cộng phân lập glycoside từ B javanica [8] Gần đây, 2009, GS Douglas Kinghorn, Đại học Ohio, Mỹ, phân lập năm tritecpenoit, hai quassinoit flavonolignan từ B javanica thu háiViệtNam đánh giá hoạttính gây độc tế bào chúng [9] 1.1.2.2 Tình hình nghiêncứu giới Cho đến nay, có nămloài sáu loài chi Brucea nghiêncứuthànhphầnhóahọchoạttínhsinhhọc giới gồm: B javanica, B mollis var tonkinensis, B sumatrana, B antidysenterica B amarissima Kể từ năm 1900, có 100 hợp chất hóahọc tách từ chi Brucea, bao gồm lớp chất: quassinoit, ancaloit, tritecpenoit, flavonoit axít béo [674] Trong lớp chất quassinoit lớp chất chính, chiếm 50% hợp chất tách từ chi Cấu trúc hợp chất phần sau; tên hợp chất nguồn gốc tương ứng liệt kê Bảng 1.1 (trang 9) 1.1.2.2.1 Lớp chất quassinoit Các quassinoit lớp chất chi Brucea phát loài thuộc họ Simaroubaceae Cho đến nay, có khoảng 75 quassinoit (1-75), phân lập từ chi Brucea [10-45] tập trung nhiều loài B javanica Các quassinoit chủ yếu tách từ hạt cây, số quassinoit có hoạttínhsinhhọc lý thú Từ loài B javanica phân lập quassinoit: bruceantinol A 12, bruceene 16, bruceine H-J (24-26), bruceoside A-G (27-33), dehydrobruceine A 37 B 38, javanicolide A-D (41-44), javanicoside A-H (45-52), yadanzigan 57, yadanziolide B 58, C 59, S 60, yadanzioside A-O (61-75) Trong số chúng hợp chất yadanzigan 57 yadanzioside B 62, C 63, E 65, I 69 K 71, phát loài B amarissima, hợp chất yadanzioside M 73 tìm thấy loài B antidysenterica Các quassinoit bruceine A-G (17-23) javanicoside I-L (53-56) phân lập từ loài B amarissima Trong số chúng hợp chất bruceine A-G (17-23) tìm thấy loài B javanica Đặc biêt hợp chất brusatol 34 phát hailoài B sumatrana B javanica Một số quassinoit khung C-20 như: bruceantarin 9, bruceantin 10, bruceantinol 11, bruceantinoside A 13 B 14 tách từ loài B javanica Các quassinoit lại phân lập từ loài B antidysenterica 1.1.2.2.2 Lớp chất ancaloit Cho đến có 25 ancaloit (76-100) phân lập từ chi Brucea [6], [46-53], [...]... cây này, chúng tôi đã lựa chọn đề tài: " Nghiên cứuthànhphầnhóahọcvàhoạttínhsinhhọccủa hai loàiKhổsâmmềm(BruceamollisWallexKurz)vàCơmrượutráihẹp(Glycosmisstenocarpa(Drake)Guillaum)ởViệtNam'' với nội dung nghiêncứu như sau: 1 Nghiên cứuthànhphầnhóahọccủa hai loài trên 2 Đánh giá hoạttính kháng ung thư của một số hợp chất phân lập được 3 CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN 1.1 Giới... thành phầnhóa học, bởi vì phổ hoạttínhsinhhọc đa dạng của chúng Các nghiêncứuhóahọc về chi Brucea đã phát hiện ra nhiều hợp chất thuộc các lớp chất chính là quassinoit, ancaloit, tritecpenoit và flavonoit 1.1.2 Thành phầnhóahọccủa chi Brucea 1.1.2.1 Tình hình nghiêncứu trong nước Ở trong nước, cho đến nay chỉ có ba công bố các nghiêncứu về hailoài trong chi Brucea là B javanica và B sumatrana... chuột (Brucea javanica) vàKhổsâmmềm(Brucea mollis) trị sốt rét, đau bụng, u nhọt Hailoài trên thường gặp ở vùng Lào Cai, Kom Tum, Lâm Đồng [1] Ở Trung Quốc, hailoài Brucea mollisvà Brucea javanica cũng được sử dụng như là thuốc thảo dược truyền thống bởi vì hoạttính chống ung thư và chống sốt rét của chúng [6] Gần đây, các cây thuộc chi Brucea đã thu hút nhiều sự quan tâm nghiêncứu về thành phần. .. (BruceamollisWallexKurz) được sử dụng để trị sốt rét, đau bụng, u nhọt, amíp, ghẻ lở [1] Trong chương trình hợp tác giữa ViệtNamvà Hàn Quốc, nhằm phát hiện các loài thực vật có kháng ung thư, các tác giả đã phát hiện ra dịch chiết MeOH từ lá cây Khổsâmmềm(Brucea mollis) có hoạttính rất mạnh, ức chế tới 96% tế bào ung thư phổi người A549 [2] Cây Cơmrượutráihẹp(Glycosmisstenocarpa(Drake) Guillaum). .. dụng ở dạng sắc lấy nước uống hoặc ở dạng cao, viên Đó là một hỗn hợp bao gồm nhiều thànhphần khác nhau, có những thànhphần có khả năng làm tăng hoặc giảm hoạttính hoặc độc tínhcủa thuốc Vì vậy, chúng ta cần phải nghiêncứu xác định chính xác tác dụng của từng thànhphần hoặc các hợp phần, từ đó tạo cơ sở cho sử dụng tốt hơn cây thuốc và bài thuốc dân tộc Trong y học dân gian cây Khổsâmmềm (Brucea. .. chất tham khảo 118 Bảng 3.23 Số liệu phổ NMR của hợp chất GP.26 118 Bảng 3.24 Số liệu phổ NMR của hợp chất GP.27 122 Bảng 3.25 Cấu trúc các hợp chất phân lập từ rễ cây Cơmrượutráihẹp 127 Bảng 3.26 Bảng tổng kết các hợp chất được phân lập từ cây Khổsâmmềm(BruceamollisWallexKurz)và cây Cơmrượutráihẹp(Glycosmisstenocarpa(Drake)Guillaum) 129 DM-3 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC... ViệtNam đã được nghiêncứu từ năm 2004 Từ cây Cơmrượutráihẹp đã phân lập được một số ancaloit như murrayanin, murrayafoline A Trong đó, murrayafoline A 2 có hoạttính ức chế mạnh sự phát triển tế bào ung thư đại tràng thông qua con đường Wnt/b-catenin [3] Nhằm mục đích đi sâu nghiêncứu về thành phầnhóahọc và tác dụng dược lý củahai cây này, chúng tôi đã lựa chọn đề tài: " Nghiêncứuthành phần. .. hình nghiêncứu trên thế giới 4 Cho đến nay, đã có nămloài trong sáu loài chính của chi Brucea được nghiêncứu về thànhphầnhóahọcvàhoạttínhsinhhọc trên thế giới gồm: B javanica, B mollis var tonkinensis, B sumatrana, B antidysenterica và B amarissima Kể từ năm 1900, đã có hơn 100 hợp chất hóahọc được tách ra từ chi Brucea, bao gồm các lớp chất: quassinoit, ancaloit, tritecpenoit, flavonoit và. .. Văn Thu nghiêncứu về hoạttính chống sốt rét của các dịch chiết từ cây B sumatrana [7] Năm 1995, GS Trần Văn Sung và cộng sự đã phân lập được một glycoside mới từ lá cây B javanica [8] Gần đây, 2009, GS Douglas Kinghorn, Đại học Ohio, Mỹ, đã phân lập được năm tritecpenoit, hai quassinoit và một flavonolignan từ lá cây B javanica thu hái tại ViệtNamvà đã đánh giá hoạttính gây độc tế bào của chúng... LNCaP của các hợp chất BM.06, BM.07, BM.10, BM.15, BM.17, BM.19, BM.22 Bảng 2.5 47 Kết quả thử hoạttính gây độc tế bào ung thư LU-1 của các hợp chất BM.06, BM.07, BM.10, BM.15, BM.17, BM.19, BM.22 Bảng 2.4 46 48 Kết quả thử độc tính tế bào các cặn chiết từ lá cây Khổsâmmềm(Bruceamollis Wall. exKurz) 50 Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR của hợp chất BM.04 53 Bảng 3.3 Số liệu phổ 13C-NMR của hợp