Tương tác thuốc luôn là vấn đề nhận được sự quan tâm của các chuyên gia y tế trong thực hành lâm sàng và là nguyên nhân hàng đầu gây ra biến cố bất lợi của thuốc 9, góp phần làm tăng tỷ lệ tử vong và gánh nặng tài chính đáng kể trên bệnh nhân nội trú 43. Theo một khảo sát trên các đơn thuốc ngoại trú tại bệnh viện Thống Nhất TP.Hồ Chí Minh, trung bình một lần kê đơn phối hợp 6,29 ± 2,06 thuốc 20 điều này làm tăng nguy cơ tương tác thuốc, tần suất xuất hiện tương tác thuốc tỉ lệ thuận với số lượng thuốc người bệnh sử dụng đồng thời, từ 3 – 5% ở người bệnh dùng vài thuốc đến 20% người bệnh đang dùng 10 – 20 thuốc 9.
1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC Y DƯỢC TP HỒ CHÍ MINH - BỘ Y TẾ KHẢ NĂNG TƯƠNG TÁC GIỮA BÀI THUỐC PT5 VÀ MELOXICAM TRÊN THỰC NGHIỆM Luận văn Thạc sĩ: Y học cổ truyền DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VIẾT TẮT ADR: Phản ứng có hại thuốc AUC: Diện tích đường cong BN : Bệnh nhân COX: Cyclooxygenase CSDL : Cơ sở liệu CXK : Cơ xương khớp Cyt : Cytochrom oxidase CYP : Cytochrom P450 DĐVN IV : Dược điển Việt Nam IV DL : Dược liệu Dmax : Liều tối đa thuốc qua đầu kim mà súc vật thử nghiệm chết (Dose maximum) IMAO : Inhibitor Monoamine Oxidase INR : International Normalized Radio LD50 : Liều tối thiểu làm chết ½ số súc vật thí nghiệm (Lethal dose 50) NC : Nghiên cứu NSAID : Non Steroid Anti-inflammatory Drug (Thuốc chống viêm không steroid) PL : Phụ lục p.o : Thuốc sử dụng đường uống (per os) SD : Độ lệch chuẩn SKLM : Sắc kí lớp mỏng TT : Thuốc thử TTYT Vd : Trung tâm y tế : Thể tích phân bố YHCT : Y học cổ truyền YHHĐ : Y học đại MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 1.1.1 1.1.2 1.1.3 1.2 1.2.1 1.2.2 1.2.3 1.2.4 1.2.5 1.2.6 1.2.7 1.2.8 1.2.9 1.2.10 1.2.11 1.2.12 1.2.13 1.3 1.3.1 1.3.2 1.3.3 1.3.4 1.3.5 Tương tác thuốc Tương tác thuốc theo YHHĐ -5 Tương tác thuốc theo YHCT 14 Tương tác thuốc YHHĐ - YHCT -15 Meloxicam -18 Tình hình sử dụng 18 Dược lí chế tác dụng -18 Dược lực học -19 Chỉ định -19 Chống định 19 Thận trọng -20 Thời kì mang thai -21 Thời kì cho bú 21 Tác dụng không mong muốn 21 Cách dùng -22 Tương tác thuốc 23 Tương kị 24 Quá liều cách xử trí 24 Bài thuốc PT5 24 Xuất xứ -24 Thành phần 24 Các công trình nghiên cứu -24 Phân tích thành phần thuốc 26 Tác dụng dược lí YHHĐ YHCT thuốc -39 CHƯƠNG 2: PHƯƠNG TIỆN – PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU -41 2.1 2.1.1 2.1.2 2.1.3 2.1.4 Phương tiện nghiên cứu 41 Dược liệu thuốc PT5 -41 Hóa chất nghiên cứu 42 Dụng cụ thiết bị nghiên cứu -42 Động vật nghiên cứu 42 2.2 2.2.1 2.2.2 2.2.3 2.2.4 Phương Phương Phương Phương Phương pháp pháp pháp pháp pháp nghiên cứu -43 kiểm tra chất lượng dược liệu 43 bào chế kiểm tra chất lượng cao 47 thử độc tính cấp 50 đánh giá tác dụng kháng viêm phối 2.2.5 hợp PT5 Meloxicam 52 Phương pháp đánh giá tác dụng giảm đau phối hợp PT5 Meloxicam 55 2.2.6 Phương pháp đánh giá tác động thuốc lên niêm 2.2.7 mạc dày -56 Phương pháp xử lí thống kê kết nghiên cứu- -56 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU -58 3.1 3.1.1 3.1.2 3.2 3.3 3.3.1 3.3.2 3.3.3 3.4 Tiêu chuẩn thuốc nghiên cứu -58 Kết định lượng cao PT5 -58 Kết định tính cao PT5 SKLM -59 Độc tính cấp -60 Tác dụng kháng viêm - giảm đau cao PT5 -61 Tác dụng kháng viêm cấp 61 Tác dụng kháng viêm mạn -63 Tác dụng giảm đau -65 Hiệu kháng viêm giảm đau phối hợp PT5 3.4.1 Meloxicam 67 Hiệu kháng viêm cấp phối hợp PT5 Meloxicam 67 3.4.2 Hiệu kháng viêm mạn khối hợp PT5 3.4.3 3.5 Meloxicam 73 Tác dụng giảm đau phối hợp 76 Sự thay đổi niêm mạc dày sau ngày dùng thuốc 82 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN -83 4.1 4.2 Độc tính khả dung nạp cao PT5 -83 Tác dụng kháng viêm - giảm đau thuốc PT5 4.2.1 4.2.2 84 Tác dụng kháng viêm -84 Tác dụng giảm đau -90 4.3 Hiệu kháng viêm giảm đau phối hợp PT5 Meloxicam 92 4.3.1 Tác dụng kháng viêm phối hợp PT5 Meloxicam 93 4.3.2 Tác dụng giảm đau điều trị phối hợp PT5 4.4 Meloxicam 93 Tác động thuốc lên niêm mạc dày -94 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 96 5.1 Kết luận 96 5.2 Kiến nghị 98 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Tương tác thuốc vấn đề nhận quan tâm chuyên gia y tế thực hành lâm sàng nguyên nhân hàng đầu gây biến cố bất lợi thuốc [9], góp phần làm tăng tỷ lệ tử vong gánh nặng tài đáng kể bệnh nhân nội trú [43] Theo khảo sát đơn thuốc ngoại trú bệnh viện Thống Nhất TP.Hồ Chí Minh, trung bình lần kê đơn phối hợp 6,29 ± 2,06 thuốc [20] điều làm tăng nguy tương tác thuốc, tần suất xuất tương tác thuốc tỉ lệ thuận với số lượng thuốc người bệnh sử dụng đồng thời, từ – 5% người bệnh dùng vài thuốc đến 20% người bệnh dùng 10 – 20 thuốc [9] Hiện nay, việc sử dụng thuốc có nguồn gốc từ dược liệu để điều trị bệnh ngày phổ biến, dược liệu sử dụng nhiều hình thức khác nhau, dạng thuốc thang, chè thuốc, cao thuốc ….và nhiều dạng chế biến đại khác Điều làm cho khả thuốc có nguồn gốc từ dược liệu sử dụng đồng thời với thuốc YHHĐ tăng cao Một khảo sát Mỹ năm 1997 cho thấy có đến 15 triệu người trưởng thành sử dụng dược liệu đồng thời với thuốc kê đơn [46] Tình trạng tiềm tàng nguy xảy tương tác thuốc – thảo dược vốn nhiều vấn đề chưa rõ ràng Với tình hình phát triển YHCT nước ta tại; hầu hết tỉnh, thành phố trực thuộc trung ương có bệnh viện YHCT; 90% bệnh viện YHHĐ có khoa YHCT [30], lượt khám chữa bệnh YHCT TTYT tổng số lượt đến khám Hà Tĩnh 16,6%, Thừa Thiên Huế 22,2% Bình Định 16,1% [34] Tuổi thọ trung bình người nâng cao kèm theo tăng tỉ lệ bệnh mạn tính, bệnh lí xương khớp chiếm tỉ lệ cao, gây nhiều đau đớn cho tàn phế cho nhiều người Ở nước ta điều kiện khí hậu nóng ẩm, điều kiện kinh tế xã hội nên tần suất mắc bệnh xương khớp lên đến 47,6% số người 60 tuổi; bệnh viện Bạch Mai từ năm 1991 – 2000 số bệnh nhân mắc bệnh CXK đến khám chiếm 4,5% để lại di chứng nặng nề, giảm khả sinh hoạt, lao động, ảnh hưởng đến chất lượng sống bệnh nhân [1][31] Trong điều trị bệnh lí xương khớp theo YHHĐ, nhóm thuốc chống viêm không steroid xếp vào thuốc điều trị triệu chứng [31]; thuốc có hiệu tốt việc kháng viêm, giảm đau cho bệnh nhân mặt khác gây nhiều tác dụng phụ [8] chiếm tỉ lệ không nhỏ báo cáo tương tác thuốc theo nghiên cứu bệnh viện Thanh Nhàn [16]; NSAID ghi nhận nhiều tương tác thuốc với loại thảo dược [49] Trong loại NSAID nay, Meloxicam sử dụng rộng rãi, chiếm 43% tổng số bệnh nhân điều trị NSAID bệnh viện YHCT Đồng Nai năm 2013 [38] 51% tổng số bệnh nhân điều trị bệnh xương khớp bệnh viện điều dưỡng phục hồi chức Thái Nguyên [32] YHCT với phương pháp uống thuốc, châm cứu, xoa bóp, bấm huyệt có nhiều thành công điều trị hỗ trợ bệnh nhân xương khớp [4]; vậy, bệnh lí CXK nhóm bệnh sử dụng phương pháp điều trị YHCT có tỉ lệ cao, chiếm 28,4% số bệnh nhân đến khám điều trị tỉnh phía Bắc [30] Riêng bệnh viện YHCT Đồng Nai, tỉ lệ bệnh nhân điều trị phối hợp YHHĐ YHCT chiếm 61% năm 2013 [38] Thuốc YHCT với nhiều dược liệu sử dụng nhóm bệnh lí xương khớp chủ yếu nhập từ Trung Quốc; theo thống kê từ Cục quản lí dược Việt Nam năm nước ta tiêu thụ khoảng 75.000 dược liệu, dược liệu nhập từ Trung Quốc lên đến 85% Do nhu cầu nghiên cứu tạo chứng khoa học sử dụng phát triển nguồn dược liệu nước trở nên thiết yếu [6] Bài thuốc PT5 gồm vị thuốc nam phổ biến, dễ tìm theo lí luận dược lí YHHĐ YHCT thuốc phù hợp sử dụng cho bệnh xương khớp [10][33], có nhiều nghiên cứu khoa học chứng minh thuốc có tác dụng kháng viêm giảm đau thực nghiệm [13] hiệu bệnh nhân thoái hóa khớp gối, viêm khớp dạng thấp, bệnh viêm thấp khác, [2],[3] ; khuyến cáo sử dụng điều trị cho bệnh thoái hóa khớp [1],[11] Ngoài ra, thực tế lâm sàng thuốc sử dụng kết hợp với Meloxicam chưa có nghiên cứu ghi nhận hiệu việc phối hợp Nhằm mục đích củng cố chứng khoa học cho thuốc PT5 để tăng cường sử dụng thuốc PT5 nói riêng nguồn thuốc nam nói chung điều trị bệnh lí xương khớp YHCT Đồng thời bắt kịp xu hướng kết hợp YHCT – YHHĐ điều trị nhu cầu sử dụng YHCT bệnh nhân, tiến hành nghiên cứu “Khả tương tác Meloxicam thuốc PT5 thực nghiệm” để trả lời cho câu hỏi “ Việc kết hợp hai loại thuốc mang lại hiệu kháng viêm giảm đau tác dụng phụ dày thực nghiệm ?” 10 MỤC ĐÍCH NGHIÊN CỨU Mục tiêu chung • Đánh giá tương tác Bài thuốc PT5 Meloxicam thực nghiệm Mục tiêu cụ thể • Đánh giá kết tương tác hai thuốc tác dụng kháng viêm cấp • Đánh giá kết tương tác hai thuốc tác dụng kháng viêm mạn • Đánh giá kết tương tác hai thuốc tác dụng giảm số đau quặn • Đánh giá tác động thuốc lên niêm mạc dày 98 nghiên cứu tiến hành so sánh độ phù chân chuột để xác định liều có hiệu kháng viêm cấp Theo kết thực nghiệm ghi nhận bảng 3.4 3.5, ta thấy được: Độ phù chân chuột lô bệnh lí tăng khoảng 70% sau gây viêm (đỉnh gây viêm carrageenan [40]), giảm dần vào sau đến thứ 24 lại 33,16%, phù hợp với nghiên cứu trước [12],[22],[27] Meloxicam m/kg, uống sau gây viêm giờ, có tác dụng giảm viêm mô hình viêm cấp thực nghiệm carrageenan thời điểm giờ, giờ, 24 sau điều trị (p < 0,05) Đến thứ 24, độ phù lại 8,75% so với ban đầu Điều phù hợp với dược động học Meloxicam chuột nhắt trắng [41] nghiên cứu trước [12] PT5 liều 20,7 g/kg, uống sau gây viêm giờ, có tác dụng giảm viêm mô hình viêm cấp thực nghiệm carrageenan thời điểm giờ, 24 sau điều trị (p < 0,05), tương đương với tác dụng Meloxicam mg/kg (p > 0,05) PT5 liều 16,6 g/kg tác dụng giảm viêm mô hình viêm cấp thực nghiệm tất thời điểm nghiên cứu (p > 0,05) PT5 liều 10,35 g/kg tác dụng giảm viêm mô hình viêm cấp thực nghiệm tất thời điểm nghiên cứu (p > 0,05) PT5 liều 8,3 g/kg tác dụng giảm viêm mô hình viêm cấp thực nghiệm tất thời điểm nghiên cứu (p > 0,05) 99 Kết luận: PT5 liều 20,7 g/kg có hiệu kháng viêm cấp mô hình gây viêm carrageenan 1% chuột nhắt trắng 4.2.1.2 Tác dụng kháng viêm mạn Thí nghiệm đánh giá tác dụng kháng viêm mạn thuốc thông qua khả làm giảm trình tăng sinh tổ chức, giảm trọng lượng u hạt tạo thành cấy viên cotton vào da lưng chuột Viên cotton vật lạ, khả tiêu hủy đưa vào thể, cấy vào gây trình viêm, diện lâu dài đưa đến trình viêm mạn Khi thể tạo thành phản ứng viêm cách tập trung nhiều tế bào, tạo mô lưới, nguyên bào sợi bao quanh viên cotton, tạo nên hình ảnh u hạt [40] Thuốc có tác dụng kháng viêm mạn ức chế trình tạo thành u hạt, làm giảm trọng lượng u hạt tạo thành so với lô bệnh lí Thông qua việc so sánh trọng lượng u hạt lô thuốc thử lô bệnh lí, kết luận thuốc nghiên cứu có tác dụng kháng viêm mạn hay không [40] Mô hình gây viêm mạn thực cách cấy viên cotton vào da lưng chuột, sau cấy chuột phân thành lô uống thuốc sau: Meloxicam mg/kg, PT5 20,7 g/kg PT5 10,35 g/kg Sau ngày uống thuốc vào cố định, tiến hành giết chuột bóc tách u hạt, ghi nhận thay đổi trọng lượng u hạt lô thử nghiệm so sánh khả giảm trọng lượng u hạt lô uống PT5 với lô bệnh lí Meloxicam Theo kết ghi nhận bảng 3.6, ta thấy: Meloxicam mg/kg có tác dụng ức chế tạo thành u hạt, khác biệt so với lô bệnh lí có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) 100 PT5 20,7 g/kg có tác dụng ức chế tạo thành u hạt, khác biệt so với lô bệnh lí có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) PT5 10,35 g/kg tác dụng ức chế tạo thành u hạt Kết luận: PT5 liều 20,7 g/kg có tác dụng kháng viêm mạn mô hình tạo u hạt cấy viên cotton Cơ sở kháng viêm thuốc PT5 Thành phần thuốc PT5 gồm: Cỏ xước, Hà thủ ô, Lá lốt, Mắc cỡ, Quế chi, Sài đất, Sinh địa, Thiên niên kiện, Thổ phục linh Dựa sở khoa học tác dụng dược lí theo YHHĐ lí luận YHCT vị thuốc theo phân tích phần 1.3, dự đoán chế kháng viêm thuốc PT5 sau: Nhóm thuốc có tác dụng kháng viêm gồm: Cỏ xước, Mắc cỡ, Sài đất, Thổ phục linh, Thiên niên kiện Theo YHHĐ vị thuốc có tính kháng viêm Theo YHCT vị thuốc thuộc nhóm khu phong, trừ thấp, nhiệt, giải độc [10],[33] Các vị thuốc nhóm làm giảm triệu chứng trình viêm nên làm giảm độ phù chân chuột mô hình nghiên cứu Cỏ xước: Chất saponin Cỏ xước có tác dụng phá huyết, làm vón albumin Có tác dụng chống viêm tốt giai đoạn cấp mạn tính viêm khớp [2] Được sử dụng phổ biến nhiều thuốc nam dùng trị bệnh khớp như: Thoái hóa khớp, Loãng xương [29] Theo YHCT, Cỏ xước có vị chua, đắng, không độc; có tác dụng phá huyết, hành ứ, bổ can thận, mạnh gân cốt thường dùng bệnh lí viêm khớp, đau bụng, kinh nguyệt không thông [33.1] Mắc cỡ: Từ Mắc cỡ phân lập chất alkaloid mimosin Theo YHHĐ, toàn thân rễ, phơi mát, tẩm rượu, vàng, nươc sắc có tác dụng giảm đau trong: Thoái hóa cột 101 sống thắt lưng, Viêm khớp dạng thấp [29] Theo YHCT, Mắc cỡ có công an thần, dịu đau, trừ phong thấp; dùng trị ngủ, tâm thần không yên, phong thấp – tê bại [10.4],[33.4] Thiên niên kiện: Thành phần hóa học Thiên niên kiện tinh dầu Thiên niên kiện có tác dụng kháng viêm mô hình gây viêm cấp carrageenan theo nghiên cứu Phan Phước Hiền CS năm 2013 [19], tác dụng kháng viêm mạn theo phương pháp Freund’s Complete Adjuvant gây viêm khớp theo nghiên cứu Nguyễn Thị Thu Hương CS năm 2013 [27] Hiện nay, Thiên niên kiện vị thuốc dùng chữa tê thấp, bổ gan cốt, giảm đau, khớp xương đau nhức, tê dại, giúp kích thích tiêu hóa Theo YHCT, Thiên niên kiện có vị đắng, cay, ngọt, tính ôn vào hai kinh Can, Thận có tác dụng trừ phong thấp, mạnh gân cốt [10.8],[33.9] Sài đất: Thành phần hóa học chứa tinh dầu, muối vô cơ, coumarin Nghiên cứu bệnh viện Bắc Giang, Hà Bắc năm 1961; Sài đất có tác dụng giảm đau, hạ sốt, kháng viêm Năm 1966, bệnh viện Ngô Quyền, Hải Phòng nghiên cứu Sài đất thấy có tác dụng kháng viêm rõ ràng Trong nhân gian, Sài đất dùng để điều trị: Đinh độc, mụn nhọt, viêm tấy da, bệnh xương khớp, viêm [10.6],[33.6] Thổ phục linh: Thành phần hóa học có saponin, tanin chất nhựa Tác dụng chống viêm khớp thực nghiệm theo nghiên cứu Đỗ Trung Đàm năm 1996 [15] Hiện nay, Thổ phục linh dùng để giải độc thể, mạnh gân cốt, trị đau nhức, phù thũng Theo YHCT, Thổ phục linh vị nhạt, tính bình, quy hai kinh Can Vị; có tác dụng khử phong thấp, lợi gân, chữa đau xương [10.9],[33.9] 102 Như vậy, phối hợp Cỏ xước, Mắc cỡ, Sài đất, Thiên niên kiện, Thổ phục linh cho hiệu kháng viêm thực nghiệm thể qua bảng 3.4, 3.5, 3.6 Nhóm thuốc hỗ trợ: Có tác dụng hỗ trợ giảm viêm bao gồm Hà thủ ô, Sinh địa Theo YHHĐ hai thuốc có tác dụng bổ dưỡng, bổ thần kinh, tăng cường tuần hoàn huyết; theo quan điểm YHCT nhóm thuốc có tác dụng ôn ấm kinh mạch, tán hàn, bổ âm, sinh huyết Hà thủ ô: Theo nghiên cứu YHHĐ, Hà thủ ô có thành phần hóa học gồm đạm, tinh bột, chất béo, antraglucozit, lexitin Trong đó, Lexitin thành phần chủ yếu hệ thần kinh nên dùng bệnh thần kinh trung ương, lexitin có tác dụng sinh huyết dịch bổ tim; antraglucozit có tác dụng xúc tiến co bóp ruột, xúc tiến tiêu hóa cải thiện dinh dưỡng Theo lí luận YHCT, Hà thủ ô vị đắng, tính bình; có tác dụng bổ huyết, bổ can thận, mạnh gân xương, nhuận tràng; dùng để chữa đau lưng mỏi gối, huyết hư, tóc bạc sớm, gân cốt tê đau [10.2],[33.2] Sinh địa: Theo YHHĐ, Siinh địa có chứa acid amin, mannit, glucose, carbohydrat có tác dụng hạ đường huyết, cầm máu, lợi tiểu, kháng khuẩn Theo YHCT, Sinh địa vị ngọt, tính hàn; có tác dụng tư âm dưỡng huyết; trị huyết hư, huyết nhiệt [10.7],[33.7] → Tác dụng kháng viêm thuốc PT5 ghi nhận qua hai mô hình thực nghiệm nghiên cứu phù hợp với nghiên cứu trước thuốc Năm 1996 PSG.TS Nguyễn Thị Bay ghi nhận tác dụng kháng viêm với mô hình viêm khớp thực nghiệm bệnh nhân Viêm khớp dạng thấp [2] Năm 2005, Th.S Nguyễn Thị Minh Tâm bệnh nhân thoái hóa khớp [3] Năm 2012, Th.S Lê Thị 103 Lan Phương mô hình gây phù chân chuột carrageenan [12] Tác dụng giảm đau 4.2.2 Hiện có nhiều mô hình gây đau thực nghiệm để chứng minh tác dụng giảm đau thuốc cần nghiên cứu, có hai phương pháp nhiều tác giả áp dụng phương pháp mâm nóng phương pháp gây đau quặn acid acetic phương pháp đơn giản dễ thực đặc trưng cho kiểu giảm đau giảm đau trung ương giảm đau ngoại biên [40],[50] Trong nghiên cứu với mục đích đánh giá khả tương tác thuốc Meloxicam cao PT5, thuốc có chế giảm đau ngoại vi thông qua khả kháng viêm nên nghiên cứu lựa chọn mô hình gây đau quặn acid acetic để tiến hành đánh giá tác dụng giảm đau Theo phương pháp gây đau quặn tiêm acid caetic vào màng bụng gây nên đau quặn kích thích tác nhân hóa học chỗ Trong thí nghiệm này, pha đáp ứng kích thích trực tiếp lên sợi cảm giác, pha đáp ứng muộn thứ phát xuất đáp ứng phản ứng viêm giải phóng trung gian hóa học gây đau Mô hình giúp đánh giá tác dụng giảm đau ngoại biên, thuốc nghiên cứu làm giảm đau thời điểm nghiên cứu [40], [50] Thực nghiệm tiến hành với lô chuột, tiêm 0,2 mL acid acetic 1% vào màng bụng chuột gây nên đau quặn mình, đếm số lần đau quặn chuột lô tiến hành so sánh lô điều trị PT5 20,7 g/kg, PT5 10,35 g/kg, Meloxicam mg/kg bệnh lí với 104 Theo kết ghi nhận bảng 3.7 cho thấy: Meloxicam mg/kg có tác dụng giảm đau rõ rết thông qua việc giảm số đau quặn so với bệnh lí, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) PT5 20,7 g/kg có tác dụng giảm đau rõ rết thông qua việc giảm số đau quặn so với bệnh lí, khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) PT5 10,35 g/kg tác dụng giảm đau rõ rệt thông qua việc giảm số đau quặn so với bệnh lí, khác biệt ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Kết luận : PT5 liều 20,7 g/kg có tác dụng giảm đau mô hình gây đau quặn acid acetic 1% tiêm vào ổ bụng chuột Cơ sở giảm đau thuốc PT5 Nhóm dược liệu có tác dụng giảm đau qua chế kháng viêm: Nguyên tắc phương pháp gây đau quặn acid acetic là: acid acetic sau tiêm vào màng bụng chuột kích thích giải phóng chất trung gian Bradykinin, prostaglandin cytokine IL, TNF … gây đau viêm [40],[50] Bài thuốc PT5 với dược liệu: Cỏ xước, Mắc cỡ, Sài đât, Thổ phục linh, Thiên niên kiện có tác dụng kháng viêm, làm giảm trình viêm gây acid acetic qua làm giảm đau quặn Nhóm dược liệu có tác dụng giảm đau không qua chế kháng viêm: Gồm vị thuốc Lá lốt, Quế chị Theo YHHĐ, nhóm thuốc chứa tinh dầu có khả giảm đau; theo YHCT, nhóm thuốc vị cay, tính ấm, có tác dụng trừ phong hàn, thống Quế chi: Theo YHHĐ, thành phần có chứa tinh dầu bay hơi; có tác dụng hạ nhiệt, giải độc, ức chế vi khuẩn, giảm co thắt dày, giảm đau Theo YHCT, vị cay ngọt, tính ấm; tác dụng ôn trung 105 hành huyết, tiêu thũng lợi thấp dùng trị chứng phát lãnh, gân co rút đau nhức, ngoại cảm Lá lốt: Theo YHHĐ, thành phần chưa tinh dầu Dùng trị đau xương, thấp khớp, tê thấp, đậy bụng, nôn mửa 4.3 Hiệu kháng viêm giảm đau phối hợp PT5 Meloxicam 4.3.1 Tác dụng kháng viêm cấp phối hợp PT5 Meloxicam Để đánh giá khả tương tác Meloxicam PT5 phối hợp với tác dụng kháng viêm, nghiên cứu tiến hành mô hình gây viêm cấp carrageenan 1% thực nghiệm với lô chuột uống thuốc nêu chương Đo độ phù chân chuột thời điểm nghiên cứu so sánh mức độ phù chân chuột lô đơn trị phối hợp; lô phối hợp với Số liệu ghi nhận thể qua bảng 3.8, 3.9, 3.10, 3.11; cho thấy: Meloxicam mg/kg tác dụng kháng viêm cấp tất thời điểm nghiên cứu (p > 0,05) Phối hợp PT5 10,35 g/kg Meloxicam mg/kg tác dụng kháng viêm cấp tất thời điểm nghiên cứu so với Meloxicam mg/kg, PT5 10,35 g/kg đơn trị (p < 0,05) tương đương với tác dụng kháng viêm cấp đơn trị Meloxicam mg/kg (p > 0,05) Phối hợp PT5 20,7 g/kg Meloxicam mg/kg tác dụng kháng viêm cấp tất thời điểm nghiên cứu (p 0,05) tương đương với đơn trị (p > 0,05) < 106 Hiệu kháng viêm lô phối hợp PT5 10,35 g/kg Meloxicam mg/kg cao so với lô phối hợp PT5 20,7 g/kg Meloxicam mg/kg thứ 24 sau điều trị (p < 0,05) 4.3.2 Tác dụng kháng viêm mạn phối hợp PT5 Meloxicam Mô hình gây viêm mạn thực cách cấy viên cotton vào da lưng chuột, sau cấy chuột phân thành lô uống thuốc với liều nêu chương Sau ngày uống thuốc cố định, tiến hành giết chuột bóc tách u hạt, ghi nhận thay đổi trọng lượng u hạt lô thử nghiệm so sánh khả giảm trọng lượng u hạt lô đơn trị phối hợp; lô phối hợp với Số liệu ghi nhận thể qua bảng 3.13, 3.14; cho thấy: Meloxicam liều mg/kg tác dụng kháng viêm mạn không làm giảm trọng lượng u hạt (p < 0,05) Phối hợp PT5 10,35 g/kg Meloxicam mg/kg có tác dụng kháng viêm mạn thông qua việc làm giảm trọng lượng u hạt (p < 0,05) tương đương với đơn trị Meloxicam mg/kg (p > 0,05) Phối hợp PT5 20,7 g/kg Meloxicam mg/kg có tác dụng kháng viêm mạn thông qua việc làm giảm trọng lượng u hạt (p < 0,05) thấp tác dụng đơn trị Meloxicam mg/kg (p > 0,05) Nhận xét qua hai mô hình gây viêm thực nghiệm Phối hợp PT5 liều 10,35 g/kg Meloxicam mg/kg làm tăng tác dụng kháng viêm hai thuốc Tác dụng phối hợp tương đương với Meloxicam mg/kg 107 Phối hợp PT5 liều 20,7 g/kg Meloxicam mg/kg không làm tăng tác dụng kháng viêm hai thuốc 4.3.3 Tác dụng giảm đau điều trị phối hợp Meloxicam – PT5 Thực nghiệm tiến hành với lô chuột, tiêm 0,2 mL acid acetic 1% vào màng bụng chuột gây nên đau quặn mình, đếm số lần đau quặn chuột lô tiến hành so sánh lô phối hợp đơn trị, lô phối hợp với Kết thực nghiệm ghi nhận qua bảng 3.13, 3.14, 3.15; cho thấy: Meloxicam liều mg/kg có tác dụng giảm đau số thời điểm nghiên cứu (p < 0,05) thấp Meloxicam mg/kg (p < 0,05) Phối hợp Meloxicam 4mg với PT5 10,35 g/kg có tác dụng giảm đau tất thời điểm nghiên cứu (p < 0,05) tương đương với Meloxicam mg/kg Phối hợp Meloxicam mg với PT5 20,7 g/kg có tác dụng giảm đau tất thời điểm nghiên cứu so với chứng bệnh lí (p < 0,05) Tác dụng giảm đau lô phối hợp Meloxicam 4mg với PT5 10,35g DL/kg cao lô phối hợp Meloxicam 8mg PT5 20,7g DL/kg tất thời điểm nghiên cứu (p < 0,05) Nhận xét Phối hợp Meloxicam liều mg/kg PT5 liều 10,35 g/kg làm tăng tác dụng giảm đau hai thuốc tương đương với Meloxicam mg/kg Phối hợp Meloxicam liều mg/kg PT5 liều 20,7 g/kg không làm tăng tác dụng giảm đau hai thuốc 108 Cơ sở tác dụng kháng viêm – giảm đau phối hợp Meloxicam PT5 Ta thấy qua ba mô hình thực nghiệm trên, kết hợp PT5 10,35 g/kg Meloxicam mg/kg mang lại hiệu kháng viêm – giảm đau tương với hiệu Meloxicam mg/kg đơn trị Theo YHHĐ, có tương tác hiệp đồng tăng mức tác dụng hai thuốc, tương tác có lợi Theo YHCT, không xếp Meloxicam vào tính vị thuốc nên tương tác hai thuốc tương sử, tức hai thuốc tính vị khác phối hợp với làm tăng tác dụng Và việc phối hợp Meloxicam mg/kg PT5 20,7 g/kg không làm tăng tác dụng nhau, giải thích hai thuốc sử dụng đạt ngưỡng tối đa có tác dụng nên tăng liều không tăng hiệu lại tăng nguy tác dụng phụ, biểu độc tính 4.4 Tác động thuốc lên dày Những phản ứng có hại Meloxicam hay gặp biến chứng hệ tiêu hóa, gan thận [8],[48] Trên đường tiêu hóa, phản ứng có hại Meloxicam bao gồm từ triệu chứng khó chịu chưa có tổn thương niêm mạc qua nội soi đến xuất huyết tiêu hóa nặng [8],[48], tỉ lệ có nhóm thuốc NSAID khác [42] gây nhiều biến cố bất lợi điều trị Nguy xảy phản ứng có hại tăng sử dụng thuốc liều cao chưa có đồng thuận mức định nghĩa liều cao Trong nghiên cứu Mỹ, với liều Meloxicam 15 mg/kg tiêm phúc mô 15 ngày thấy có tượng dị sản niêm mạc dày, teo tuyến niêm mạc dày [45] 109 Trong nghiên cứu sử dụng Meloxicam mg/kg đường uống tương đương liều 40 mg/người/ngày, gấp lần liều tối đa khuyến cáo người [8] Thời gian sử dụng nghiên cứu ngày Khả chịu đựng chuột nhắt trắng khác với người Về thuốc PT5 không ghi nhận tác dụng phụ đường tiêu hóa định sử dụng [21], nghiên cứu lâm sàng trước [2],[3] Kết luận Vì tất lí nên mặt lí thuyết Meloxicam gây tổn thương niêm mạc dày nghiên cứu chưa ghi nhận tổn thương dày quan sát đại thể 110 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận PT5 có tính an toàn thực nghiệm 5.1.1 Liều cao chuột nhắt trắng dung nạp (liều tối đa hút qua đầu kim) 83 g dược liệu/kg (gấp lần liều dự kiến có tác dụng người), biểu độc tính cấp không xác định LD 50 Như vậy, cao PT5 an toàn qua đường uống với liều Dmax = 83 gDL/kg thể trọng chuột nhắt trắng (# 432 gDL/người/ngày) 5.1.2 Bài thuốc PT5 có tác dụng kháng viêm giảm đau 5.1.2.1 Tác dụng chống viêm cấp PT5 liều 20,7 gDL/kg làm giảm thể tích phù chân chuột rõ ràng thứ 24 đạt 41,21% so với chứng bệnh lí tác dụng tương đương với Meloxicam mg/kg 5.1.2.2 Tác dụng chống viêm mạn PT5 liều 20,7 gDL/kg làm giảm trọng lượng u hạt rõ ràng đạt 20,7% so với chứng bệnh lí tác dụng tương đương với Meloxicam mg/kg 5.1.2.3 Tác dụng giảm đau 111 PT5 liều 20,7 gDL/kg làm giảm số đau rõ ràng đạt 40,34% so với chứng bệnh lí tác dụng tương đương với Meloxicam mg/kg Phối hợp PT5 10,35 gDL/kg Meloxicam mg/kg làm 5.1.3 tăng tác dụng kháng viêm giảm đau so với đơn trị 5.1.3.1 Hiệu kháng viêm cấp Phối hợp PT5 10,35 gDL/kg Meloxicam mg/kg làm giảm thể tích phù chân chuột rõ ràng thứ 24 đạt 72,83% tác dụng tương đương với Meloxicam mg/kg, cao đơn trị hai liều khoảng 60% 5.1.3.2 Hiệu kháng viêm mạn Phối hợp PT5 10,35 gDL/kg Meloxicam mg/kg làm giảm trọng lượng u hạt đạt 34,4% tác dụng tương đương với Meloxicam mg/kg, cao đơn trị hai liều khoảng 20% 5.1.3.3 Hiệu giảm đau Phối hợp PT5 10,35 gDL/kg Meloxicam mg/kg làm giảm số đau quặn đạt 50,21% tác dụng tương đương với Meloxicam mg/kg, cao đơn trị hai liều khoảng 30% Phối hợp PT5 20,7 gDl/kg Meloxicam mg/kg 5.1.4 không làm tăng hiệu kháng viêm giảm đau so với đơn trị 5.1.4.1 Hiệu kháng viêm cấp Phối hợp PT5 20,7 gDL/kg Meloxicam mg/kg làm giảm thể tích phù chân chuột rõ ràng thứ 24 đạt 61,32% tác dụng tương đương với Meloxicam mg/kg 5.1.4.2 Hiệu kháng viêm mạn 112 Phối hợp PT5 20,7 gDL/kg Meloxicam mg/kg làm giảm trọng lượng u hạt đạt 26,88% tác dụng tương đương với Meloxicam mg/kg 5.1.4.3 Hiệu giảm đau Phối hợp PT5 20,7 gDL/kg Meloxicam mg/kg làm giảm số đau quặn đạt 45,28% tác dụng tương đương với Meloxicam mg/kg 5.1.5 Sự thay đổi niêm mạc dày chuột nhắt trắng sau ngày uống thuốc Chưa ghi nhận tổn thương niêm mạc dày quan sát đại thể lô dùng thuốc 5.2 Kiến nghị Cân nhắc giảm ½ liều hai thuốc phối hợp lâm sàng liều có hiệu thực nghiệm Trên thực nghiệm chưa ghi nhận tác dụng phụ lên niêm mạc dày quan sát đại thể loại trừ tổn thương vi thể nên cần tiến hành nghiên cứu với cỡ mẫu lớn hơn, thời gian uống thuốc lâu quan sát vi thể để có đánh giá khách quan Tiếp tục nghiên cứu tương tác hai thuốc mức liều khác Tiến hành nghiên cứu với mô hình viêm khớp thực nghiệm Xây dựng nghiên cứu lâm sàng tương tác hai thuốc bệnh nhân Thoái hóa khớp, Viêm khớp dạng thấp