KHẢO sát THÀNH PHẦN hóa học của lá cây ME RỪNG

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA HÓA HỌC  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ CÂY ME RỪNG PHYLLANTHUS EMBLICA Giảng viên hướng dẫn : TS Nguyễn Thị Ánh Tuyết Sinh viên thực : Ngô Hồng Hoài Nam Mã số sinh viên : K38.201.068 Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA HÓA HỌC  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ CÂY ME RỪNG PHYLLANTHUS EMBLICA Giảng viên hướng dẫn : TS Nguyễn Thị Ánh Tuyết Sinh viên thực : Ngô Hồng Hoài Nam Mã số sinh viên : K38.201.068 Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2016 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam NHẬN XÉT CỦA HỘI ĐỒNG Thành phố Hồ Chí Minh, ngày tháng Chủ tịch hội đồng năm 2016 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam LỜI CẢM ƠN Nghiên cứu thực phòng thí nghiệm Hợp chất thiên nhiên, khoa Hóa học, trường Đại học Sư phạm thành phố Hồ Chí Minh Để hoàn thành tốt đề tài này, em xin chân thành cảm ơn cô Nguyễn Thị Ánh Tuyết, người Cô hướng dẫn hết lòng, tận tình giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi Cô không người truyền đạt kiến thức khoa học, kinh nghiệm thực tế mà người tạo thêm niềm đam mê nghiên cứu khoa học em Ngoài ra, em xin cảm ơn Thầy Bùi Xuân Hào, Thầy Dương Thúc Huy giúp đỡ cho em ý kiến quý báu để em hoàn thành tốt đề tài Em xin cảm quý Thầy Cô khoa Hóa học – trường Đại học Sư phạm thành phố Hồ Chí Minh Các Thầy Cô hết lòng tận tụy giảng dạy, truyền đạt cho em nhiều kiến thức khoa học quý báu lĩnh vực Hóa Học Cuối cùng, em xin cảm ơn bạn phòng Hợp chất thiên nhiên, giúp đỡ chia sẻ kiến thức, kinh nghiệm cho em để em hoàn thành tốt đề tài Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC LỜI MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT CÂY ME RỪNG 1.1.1 Mô tả chung 1.1.2 Vùng phân bố 1.2 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ DƯỢC TÍNH 1.2.1 Dược tính theo y học cổ truyền 1.2.2 Nghiên cứu dược tính 1.3 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CHƯƠNG THỰC NGHIỆM 15 2.1 HÓA CHẤT, THIẾT BỊ, PHƯƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 15 2.1.1 Hóa chất 15 2.1.2 Thiết bị 15 2.1.3 Phương pháp tiến hành 16 2.1.3.1 Phương pháp phân lập loại hợp chất 16 2.1.3.2 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học hợp chất 16 2.2 NGUYÊN LIỆU 16 2.2.1 Thu hái nguyên liệu 16 2.2.2 Xử lí mẫu nguyên liệu 16 2.3 ĐIỀU CHẾ CÁC LOẠI CAO 16 2.4 CÔ LẬP CÁC HỢP CHẤT HỮU CƠ TRONG CAO HEXANE 17 2.4.1 Sắc ký cột sillica gel cao hexane 17 2.4.2 Sắc ký cột silica gel phân đoạn H5 (0.94 g) H6 (1.83 g) 18 2.5 CÔ LẬP CÁC HỢP CHẤT HỮU CƠ TRONG CAO ETHYL ACETATE 19 2.5.1 Sắc ký cột silica gel cao ethyl acetate 19 2.5.2 Sắc ký cột silica gel phân đoạn EA4 (33.4 g) 20 2.5.3 Sắc ký cột silica gel phân đoạn EA4.1 (4.67 g) 20 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 3.1 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT PEA-N2 22 3.2 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT PEHC 23 3.3 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT PEA-N3 25 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 29 4.1 KẾT LUẬN 29 4.2 ĐỀ XUẤT 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu, chữ viết tắt H-NMR Tiếng Anh Proton (1) Nuclear Magnetic Resonance 13 Carbon (13) Nuclear Magnetic Resonance HSQC Heteronuclear Single Quantum Correlation HMBC Heteronuclear Multiple Bond Coherence s d t dd ddd m br s δ J ppm RP-18 UV Rf Ac DCM EA C Me H SKC SKLM g mg MHz Hz Singlet Doublet Triplet Double of doublet Double of doublet of doublet Multiplet Broad singlet Chemical shift Coupling constant Part per million Reversed Phase-18 Ultra Violet Retention factor Acetone Dichloromethane Ethyl Acetate Chloroform Methanol n-Hexane C-NMR gam miligam Mega Hertz Hertz Tiếng Việt Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (1) Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon (13) Phổ tương tác dị hạt nhân qua liên kết Phổ tương tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết Mũi đơn Mũi đôi Mũi ba Mũi đôi đôi Mũi đôi đôi đôi Mũi đa Mũi đơn rộng Độ chuyển dịch hoá học Hằng số ghép spin Một phần triệu Pha đảo C-18 Tia cực tím axeton diclometan Etyl acetat Cloroform Metanol Hexan Sắc ký cột Sắc ký lớp mỏng Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Sắc kí cột silica gel cao hexane 18 Bảng 2.2 Sắc kí cột silica gel phân đoạn (H5) 19 Bảng 2.3 Sắc kí cột silica gel phân đoạn (H6) 19 Bảng 2.4 Sắc kí cột silica gel cao ethyl acetate 20 Bảng 2.5 Sắc kí cột silica gel phân đoạn (EA4) 20 Bảng 2.6 Sắc kí cột silica gel phân đoạn (EA4.1) 21 Bảng 3.1 Số liệu phổ NMR hợp chất PEA-N2 23 Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR hợp chất PEHC 25 Bảng 3.3 Số liệu phổ NMR hợp chất PEA-N3 28 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ Quy trình điều chế cao hexane me cao ethyl acetate me 17 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cây me rừng Hình 3.1 Một số tương quan HMBC PEA-N3 27 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất PEA-N2 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất PEA-N2 Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất PEHC Ngô Hồng Hoài Nam Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất PEHC Ngô Hồng Hoài Nam Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất PEHC Ngô Hồng Hoài Nam Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất PEA-N3 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất PEA-N3 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất PEA-N3 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất PEA-N3 Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 10 Phổ HSQC hợp chất PEA-N3 Ngô Hồng Hoài Nam Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 11 Phổ HSQC hợp chất PEA-N3 Ngô Hồng Hoài Nam Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 12 Phổ HSQC hợp chất PEA-N3 Ngô Hồng Hoài Nam Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 13 Phổ HSQC hợp chất PEA-N3 Ngô Hồng Hoài Nam Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 14 Phổ HMBC hợp chất PEA-N3 Ngô Hồng Hoài Nam Khóa luận tốt nghiệp Phụ lục 15 Phổ HMBC hợp chất PEA-N3 Ngô Hồng Hoài Nam [...]... cứu về thành phần hóa học của cây me rừng về các bộ phận như rễ, thân, quả tương đối nhiều, nhưng các nghiên cứu về thành phần của lá me rừng vẫn còn ít Và ở Việt Nam, me rừng chưa được nghiên cứu thành phần hóa học, do đó chúng tôi chọn lá cây me rừng được chọn để nghiên cứu trong đề tài này với mong muốn tìm hiểu các thành phần hóa học có trong lá me rừng để đóng góp thêm những chứng cứ khoa học vào... tách rõ 3 4 5 6 7 EA4.1.3 EA4.1.4 EA4.1.5 EA4.1.6 EA4.1.7 DCM :Me 9:1 DCM :Me 9:1 DCM :Me 9:1 DCM :Me 8:2 DCM :Me 7:3 923.6 181.4 536.1 553.0 412.1 Nhiều vết, kéo vệt Kéo vệt Kéo vệt Nhiều vết Kéo vết Ghichú Chưa khảo sát Khảo sát thu được PEA-N2 Chưa khảo sát Chưa khảo sát Chưa khảo sát Đã khảo sát Chưa khảo sát Ghi chú: DCM (dichloromethane), Me (methanol) Trong các phân đoạn từ EA4.1.1 – EA4.1.7 thì phân... EA4.8 H:EA 1:3 H:EA 1:3 H:EA 1:9 H:EA 1:9 EA EA :Me 95:5 EA :Me 85:15 EA :Me 6:4 4.67 3.78 2.52 2.75 1.59 1,86 3.40 2.80 Vệt dài Nhiều vết kéo vệt Nhiều vết kéo vệt Vệt dài Vệt dài Kéo vệt Có vết, tách rõ Kéo vệt Khảo sát Chưa khảo sát Chưa khảo sát Chưa khảo sát Chưa khảo sát Chưa khảo sát Đã khảo sát Chưa khảo sát Ghi chú: EA (ethyl acetate), H (hexane), Me (methanol) 2.5.3 Sắc kí cột silicagel trên phân... 20 cm Lá xếp thành hai dãy trên các cành nhỏ giống như lá 2 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam kép lông chim, cuống lá rất ngắn Lá cây me rừng thuộc loại lá kèm, hình ba cạnh, rất nhỏ Cây me rừng có hoa nhỏ, đơn tính cùng gốc Cụm hoa thành xim co mọc ở nách lá phía dưới của cành, cụm hoa có cả hoa đực và hoa cái Quả hình cầu, mọng Hạt hình ba cạnh, màu hồng nhạt 1.1.2 Vùng phân bố [1] Cây me rừng. .. 96:4 191.4 Vệt dài 2 H5.2 DCM :Me 96:4 426.9 Nhiều vết, tách rõ 3 H5.3 DCM :Me 5:5 104.8 Nhiều vết Chưa khảo sát Khảo sát thu được PEA-N3 Chưa khảo sát Ghi chú: DCM (dichloromethane), Me (methanol) Bảng 2.3 Sắc kí cột silica gel trên phân đoạn (H6) Phân STT đoạn Dung môi giải ly Trọng lượng (mg) Sắc kí lớp mỏng Ghichú Chưa khảo sát Khảo sát thu được PEHC Chưa khảo sát Chưa khảo sát 1 H6.1 H:DCM 1:1 567.5... vào kho dược liệu của Y học dân tộc Việt Nam 1 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN 1.1 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT CÂY ME RỪNG [1] Tên thông thường: me rừng Tên gọi khác: chùm ruột núi, du cam tử, ngưu cam tử Thuộc họ Thầu dầu (Euphorbiaceae) Tên khoa học: Phyllanthus emblica L Hình 1.1 Cây me rừng 1.1.1 Mô tả chung [1] Cây nhỏ, cao khoảng 3 m, nhiều cành Cành của me rừng nhỏ, mềm, vỏ thân... Ghichú Chưa khảo sát Đã khảo sát Chưa khảo sát Chưa khảo sát Khảo sát Khảo sát 2.4.2 Sắc kí cột silica gel trên phân đoạn H5 (0.94 g) và H6 (1.83 g) Phân đoạn H5 (0.94 g) cho SKLM nhiều vết nên được SKC silica gel với hệ dung môi DCM :Me với độ phân cực tăng dần (4-100% Me) Dựa vào SKLM, kết quả thu được 3 phân đoạn, kí hiệu từ H5.1 – H5.3 Kết quả được trình bày ở bảng 2.2 Dựa vào kết quả SKLM của phân... (bảng 2.4) 19 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam Bảng 2.4 Sắc kí cột silica gel trên cao ethyl acetate STT Phân đoạn Dung môi giải ly Trọng lượng (g) Sắc kí lớp mỏng Ghichú 1 2 3 4 5 EA1 EA2 EA3 EA4 EA5 H:EA 2:8 EA EA :Me 95:5 EA :Me 8:2 EA :Me 7:3 16.50 13.28 22.25 33.40 14.70 Vệt dài Nhiều vết Nhiều vết kéo vệt Nhiều vết Nhiều vết Đã khảo sát Chưa khảo sát Đã khảo sát Khảo sát Chưa khảo sát Ghi chú:... dụng phục hồi tổn thương tinh hoàn do tác dụng phụ của thuốc động kinh 4 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam Dịch chiết từ cành me rừng có tác dụng cải thiện nồng độ tinh dịch của chuột đực đã được tiêm valproic acid [13] 1.3 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC Các nghiên cứu từ năm 1998 trở về trước cho thấy trong cây me rừng có các hợp chất: zeatin (1), zeatin nucleotide (2), zeatin riboside (3),... Phụ lục 9 Phổ 13C-NMR của hợp chất PEA-N3 Phụ lục 10 Phổ HSQC của hợp chất PEA-N3 Phụ lục 11 Phổ HSQC của hợp chất PEA-N3 Phụ lục 12 Phổ HSQC của hợp chất PEA-N3 Phụ lục 13 Phổ HSQC của hợp chất PEA-N3 Phụ lục 14 Phổ HMBC của hợp chất PEA-N3 Phụ lục 15 Phổ HMBC của hợp chất PEA-N3 Khóa luận tốt nghiệp Ngô Hồng Hoài Nam LỜI MỞ ĐẦU Trong nền y học dân tộc của nhiều nước, các loài cây thuộc chi Phyllanthus