Ảnh hưởng của thời gian tiếp xúc giữa huyết thanh với cục máu đông và sự khác nhau của việc sử dụng huyết thanh, huyết tương chống đông bằng heparin liên quan đến các chỉ số xét nghiệm hóa sinh

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT A Uric : Axit Uric Cholesterol.T : Cholesterol toàn phần CK : Creatin Kinase EDTA : Ethylen diamin tetraacetic acid GOT : Glutamate oxaloacetate transaminase HT : Huyết HTg : Huyết tương NaF : Natri fluoride NCCLS : National committee for clinical laboratory standards Protein.T : Protein toàn phần MỤC LỤC PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG DANH MỤC BIỂU ĐỒ DANH MỤC HÌNH, SƠ ĐỒ ĐẶT VẤN ĐỀ Hóa sinh lâm sàng hóa sinh ứng dụng tiến hành xét nghiệm khoa hóa sinh bệnh viện trung tâm xét nghiệm nhằm giúp ích cho thầy thuốc lâm sàng việc chẩn đoán sớm, xác định hướng cho điều trị tiên lượng theo dõi bệnh tật Nhiều nghiên cứu rằng, xét nghiệm chiếm 5% chi phí y tế 60-70% định lâm sàng dựa kết xét nghiệm kết xét nghiệm định loại hình điều trị cho bệnh nhân [1] Do chất lượng xét nghiệm gắn liền với chất lượng chuẩn đoán, điều trị, tiên chăm sóc sức khỏe bệnh nhân Kết xét nghiệm đạt độ tin cậy cao phụ thuộc vào nhiều yếu tố ba giai đoạn trước, sau xét nghiệm.Trong đó, sai số giai đoạn trước xét nghiệm đáng kể nhất, chiếm 60-70% [2] sai số trình Các yếu tố tác động đến kết xét nghiệm hóa sinh giai đoạn trước xét nghiệm bao gồm: thủ tục hành chính, viêc lấy mẫu sử lý mẫu, thời gian lấy mẫu, sử dụng loại chất chống đông, thời gian bảo quản vận chuyển mẫu, thời gian tiến hành….Trong có thời gian tiếp xúc kéo dài huyết với cục máu đông việc sử dụng loại chất chống đông khác dùng xét nghiệm gây biến đổi ảnh hưởng đến kết xét nghiệm hóa sinh Cùng với phát triển kinh tế thị trường phát triển khoa học công nghệ đại nhu cầu dịch vụ chăm sóc sức khỏe người dân ngày tăng cao Các dịch vụ khám bệnh xét nghiệm nhà, tận nơi … ngày phổ biến Tuy nhiên, buổi lấy mẫu xét nghiệm xa thời gian vận chuyển mẫu máu làm xét nghiệm từ nơi lấy mẫu phòng xét nghiệm, hay từ sở y tế đầy đủ máy móc trang thiết bị làm xét nghiệm lên sở y tế tuyến khoảng thời gian dài Theo NCCLS [3] khuyến cáo: sau lấy máu làm xét nghiệm, huyết huyết tương nên tách biệt tránh tiếp xúc với tế bào máu sớm tốt, tốt trước sau lấy máu Tuy nhiên chất phân tích lại bị ảnh hưởng khác thời gian tiếp xúc kéo dài huyết thanh, huyết tương với tế bào máu Nhiều chất phân tích ổn định lâu Nếu yêu cầu vận chuyển khắt khe đặt tất chất phân tích hóa sinh nhiều mẫu chấp nhận bị loại bỏ cách không cần thiết Vậy để đánh giá ảnh hưởng số yếu tố tới kết xét nghiệm hóa sinh nhằm giảm sai số nâng cao chất lượng xét nghiệm tiến hành nghiên cứu: “Ảnh hưởng thời gian tiếp xúc huyết với cục máu đông khác việc sử dụng huyết thanh, huyết tương chống đông heparin liên quan đến số xét nghiệm hóa sinh” với mục tiêu sau: Đánh giá thay đổi số số xét nghiệm hóa sinh : Glucose, Creatinine, Albumin, Protein toàn phần, Cholesterol toàn phần , CK, Amylase, GOT, Natri, Kali,Clo, tiếp xúc kéo dài huyết với cục máu đông So sánh khác số số xét nghiệm hóa sinh : Glucose, Creatinin, Albumin, Protein toàn phần, Clolesterol toàn phần, CK, Amylase, GOT, Natri, Kali, Clo sử dụng huyết sử dụng huyết tương ống chống đông Heparin CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chế đông – cầm máu Đông – cầm máu biểu trình sinh lý sinh hóa, thay đổi tình trạng vật lý máu biến chuyển protein hòa tan thành dạng gel rắn (sợi huyết) Sự biến chuyển nhằm mục đích cuối hạn chế máu nới có tổn thương thành mạch Quá trình đông-cầm máu có tham gia toàn vẹn mạch máu tình trạng lỏng máu Quá trình đông – cầm máu tác động lẫn ba thành phần bản: thành mạch máu, tế bào máu protein huyết tương hình thức phản ứng enzyme 1.1.1 Những yếu tố tham gia hoạt hóa trình đông – cầm máu [4]  Nội mạc nội mạc huyết quản Khi có tổn thương thành mạch, lớp nội mạc tiếp xúc với máu hoạt hóa tiểu cầu yếu tố tiếp xúc  Tiểu cầu Chức tiểu cầu làm bên vững mạch máu, tạo nút cầm máu ban đầu tham gia vào trình đông máu huyết tương Tiểu cầu thực chức nhờ đặc tính sau: • • • Chức bám dính Chức ngưng tập tiểu cầu Chức phóng thích chất từ tiểu cầu   Các yếu tố đông máu huyết tương Tên gọi 12 yếu tố đông máu xác định ký hiệu chữ số La mã, hai yếu tố xác định gần không mang chữ số La mã  Các yếu tố đông máu glycoprotein, phương diện chức chúng thuộc nhóm khác tùy theo chúng zymogen, đồng yếu tố chất fibrinogen Bảng 1.1 Các yếu tố đông máu huyết tương Tên gọi cũ I II III IV V VII VIII IX X XI XII XIII Tên gọi Fibrinogen Prothrombin Yếu tố tổ chức, thrombin Ion calci (hiện không xếp vào yếu tố đông máu) Proaccelerin, Plasma accelerator globulin Proconvertin Yếu tố chống hemophilia A Yếu tố chống hemophilia B, yếu tố Christmas Yếu tố Stuart Yếu tố chống hemophiliac, Plasma thromboplastin antecedent Yếu tố Hageman,yếu tố tiếp xúc Yếu tố ổn định sợi huyết Prekallikrein Kininogen trọng lượng phân tử lớn Các nhóm yếu tố: – Các yếu tố tiếp xúc gồm bốn yếu tố tham gia vào giai đoạn đầu-giai đoạn tiếp xúc là: yếu tố XI, XII, Prekallikrein, Kinninogen có đặc tính không phụ thuộc vào vitamin K tổng hợp, không phụ thuộc vào Ca++ trình hoạt hóa ,ổn định tốt huyết tương lưu trữ – yếu tố bền vững Nhóm prothrombin gồm yếu tố II, VII, IX, X Đây yếu tố phụ thuộc vitamin K tổng hợp cần có ion Ca ++ trình hoạt 10 hóa Trừ yếu tố II, yếu tố lại không bị tiêu thụ trình đông máu ( có mặt huyết thanh), ổn định huyết tương lưu trữ Nhóm fibrinogen gồm yếu tố I, V, VIII,XIII Thrombin có tác dụng – qua lại với tất yếu tố Các yếu tố bị tiêu thụ trình đông máu (không có mặt huyết thanh), yếu tố V VIII hoạt  tính huyết tương lưu trữ Yếu tố tổ chức Sự tiếp xúc máu với tổ chức dập nát phát động trình đông máu, khởi phát lipoprotein gọi yếu tố tổ chức hay thromboplastin ngoại sinh Các phần lipid protein yếu tố tổ chức cần thiết cho đông máu tính đặc hiệu nằm phần protein Yếu tố tổ chức hoạt tính enzyme tác động đồng yếu tố hoạt hóa yếu tố VII, X  Ion calci Ion calci tạo thuận lợi cho protein phụ thuộc vitamin K kết hợp với Phospholipid Nhưng ion can thiệp vào phản ứng liên quan đến protein phụ thuộc vitamin K cần thiết cho thể hoạt tính enzyme yếu tố XIIIa, cho ổn định yếu tố V phức hệ yếu tố VonWillebrand yếu tố VIII: C 1.1.2 Các giai đoạn chế đông cầm máu [4] • • •  – Giai đoạn cầm máu ban đầu Đông máu huyết tương Tiêu sợi huyết Giai đoạn cầm máu ban đầu Khi thành mạch bị tổn thương, lớp nội mạc bị bộc lộ tiểu cầu dính vào lớp nội mạc với có mặt yếu tố von-Willebrand – yếu tố tiểu cầu GPIb Tiểu cầu dính vào tổ chức nội mạc giải phóng sản phẩm ADP, serotonin, epinephrine dẫn xuất prostaglandin, đặc biệt 54 Hình 4.1 Sơ đồ thoái hóa glucose theo đường đường phân  Xét nghiệm creatinine So với Glucose/HT creatinine/HT có tính ổn định cao nhiều Khi mẫu máu lấy vào ống chứa chất chống đông để điều kiện nhiệt độ phòng (26oC) nồng độ creatinine/HT thay đổi ý nghĩa thống kê (p > 0,05) thời điểm giờ, 24 tiếp xúc huyết với cục máu đông Kết nghiên cứu hoàn toàn phù hợp với kết nghiên cứu Bobby L Boyanton Jr cộng [20] tính ổn định 24 số xét nghiệm hóa sinh huyết huyết tương Trong nghiên cứu Bobby L Boyanton Jr cộng creatinine/HT creatinine/HTg ổn định đến 24 lưu trữ nhiệt độ 25oC Hay nghiên cứu T Ono cộng [21] họ tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng thời gian tiếp xúc huyết với cục máu 55 đông nhiệt độ 4oC, 23oC 30oC Các thử nghiệm thử vào lúc giờ, giờ, giờ, giờ, 24 48 Các mẫu huyết lưu trữ -20 oC sau ly tâm tách khỏi cục máu đông làm tan làm xét nghiệm thời gian tương tự creatinine/HT đánh giá xét nghiệm ổn đến 48 không bị ảnh hưởng nhiệt độ lưu trữ  Xét nghiệm Albumin protein toàn phần Khi mẫu máu lấy vào ống không chứa chất chống đông để điều kiện nhiệt độ phòng (26oC) Nồng độ albumin/HT protein.T/HT thay đổi ý nghĩa thống kê (p > 0,05) thời điểm giờ, 24 tiếp xúc huyết với cục máu đông Kết nghiên cứu hoàn toàn phù hợp với kết nghiên cứu Laessig cộng [22] báo cáo ảnh hưởng thời gian tiếp xúc huyết với cục máu đông đến kết 25 số hóa sinh có albumin protein toàn phần Mẫu máu họ để nhiệt độ phòng giờ, giờ, giờ, giờ, 24 48 trước tách huyết với cục máu đông, nghiên cứu albumin protein toàn phần huyết thay đổi không đáng kể vòng 48 Tuy nhiên, kết nghiên cứu không tương đồng với kết nghiên cứu Dongbo J Zhang cộng [8] Trong nghiên cứu Dongbo J Zhang cộng rằng: có gia tăng nồng độ albumin/HT có ý nghĩa quan sát lúc tiếp xúc huyết với cục máu đông tăng nồng độ protein.T/HT có ý nghĩa quan sát lúc 24 tiếp xúc huyết với cục máu đông Và gia tăng nồng độ albumin/HT protein.T/HT nằm giới hạn chấp nhận mặt lâm sàng Họ đưa giả thuyết giải thích tăng nồng độ protein.T/HT albumin/HT theo thời gian áp suất thẩm thấu bên tế bảo giảm làm nước di chuyển vào tế bào làm cho nồng độ protein toàn phần albumin 56 tăng huyết Qua thấy độ ổn định albumin/HT protein.T/HT nghiên cứu Dongbo J Zhang cộng thấp so với nghiên cứu điều kiện bảo quản nhiệt độ phòng (26 oC) Sự khác kết do: điều kiện nhiệt độ bảo quản mẫu khác nhau, khác cỡ mẫu phương pháp tiến hành  Xét nghiệm Cholesterol toàn phần Khi máu lấy vào ống máu không chứa chất chống đông để tách huyết ống máu để điều kiện nhiệt độ phòng (26 oC) nồng độ cholesterol.T/HT thay đổi ý nghĩa (p > 0.05) thời điểm giờ, 24 tiếp xúc huyết với cục máu đông Kết nghiên cứu tương đương với kết nghiên cứu số tác giả [8], [20], [21] 4.1.2 Ảnh hưởng thời gian đến kết enzyme Qua bảng 3.2 biểu đồ 3.2 ta thấy, lấy máu vào ống không chứa chất chống đông để tách huyết ống máu để điều kiện nhiệt độ phòng (26oC) hoạt độ enzyme CK/HT, amylase/HT GOT/HT thay đổi ý nghĩa thống kê (p > 0,05) thời điểm giờ, 24 tiếp xúc huyết với cục máu đông Kết nghiên cứu tương đương với kết nghiên cứu số tác giả [8], [22] Theo nghiên cứu Dongbo J.Zhang cộng [8] ống máu không chứa chất chống đông để điều kiện 32 oC hoạt độ enzyme CK/HT, amylase/HT, GOT/HT thay đổi ý nghĩa thời điểm giờ, 24 tiếp xúc huyết với cục máu đông Hay nghiên cứu Laessig RH cộng [22] mẫu máu để điều kiện nhiệt độ phòng giờ, giờ, giờ, giờ, 24 48 trước tách huyết với cục máu đông hoạt độ enzyme CK/HT, amylase/HT, GOT/HT thay đổi không đâng kể, ý nghĩa Tuy nhiên, 57 xét nghiêm GOT/HT nghiên Ono T cộng [22] ống máu tách huyết để điều kiện 30 oC hoạt độ enzyme GOT/HT thay đổi có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) thời điểm trước tách huyết với cục máu đông Sự khác nha kết nghiên cứu với kết nghiên cứu Ôn T cộng để ống máu điều kiện 30oC do: khác nhiệt độ bảo quản mẫu, khác cỡ mẫu phương pháp tiến hành 4.1.3 Ảnh hưởng thời gian đến kết nhóm xét nghiệm điện giải  Xét nghiệm Na+ Khi máu lấy vào ống máu không chứa chất chống đông để tách huyết ống máu để điều kiện nhiệt độ phòng (26 oC) nồng độ Na+/HT thay đổi không đáng kể (p > 0.05) thời điểm giờ, 24 tiếp xúc huyết với cục máu đông Kết nghiên cứu tương đương với kết nghiên cứu số tác giả [7], [21]  Xét nghiệm K+ Khi máu lấy vào ống không chứa chất chống đông để tách huyết thanh, ống máu để điều kiện nhiệt độ phòng (26 oC) Nồng độ K+/HT giảm ý nghĩa thời điểm tiếp xúc huyết với cục máu đông Tuy nhiên đến thời điểm 24 tiếp xúc huyết với cục máu đông nồng độ K +/HT tăng 10,49% so với thời điểm ban đầu sau lấy máu, tăng có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Trong nghiên cứu Dongbo J Zhang cộng [8] nghiên cứu ảnh hưởng thời gian tiếp xúc huyết với cục máu đông đến xét nghiệm K+ Họ tiến hành nghiên cứu hai điều kiên nhiệt độ nhiệt độ phòng (24oC) nhiệt độ 32oC Ở nhiệt độ phòng nồng độ K+/HT tăng lên có tiếp xúc huyết cục máu đông, thay đổi có ý nghĩa 58 thời điểm sau lấy máu Tại 32 oC giá trị K+/HT giảm nhẹ thời điểm sau lấy máu nhiên, đến thời điểm 24 sau lấy máu có gia tăng có ý nghĩa nồng độ K +/HT Hay nghiên cứu T Ono cộng [21] nồng độ K +/HT có ý nghĩa sau điều kiện nhiệt độ 4oC tăng sau 24 điều kiện 30oC Qua thấy xét nghiệm ion K +/HT không ảnh hưởng thời gian tiếp xúc huyết cục máu đông mà ảnh hưởng liên quan đến nhiệt độ bảo quản mẫu máu Sự khác kết nghiên cứu với kết nghiên cứu tác giả khác cỡ mẫu nghiên cứu, khác điều kiện nhiệt độ bảo quản mẫu khác phương pháp nghiên cứu Có thể giải thích thay đổi kết K +/HT nghiên cứu sau: Sự thay đổi nồng độ K + huyết theo thời gian có liên quan mật thiết đến trình đường phân, trình trao đổi K + qua màng tế bào nhờ bơm Na+/K+ - ATPase khuếch tán thụ động K+ qua màng tế bào [24] [25] K+ ion dương chủ yếu dịch nội bào, 90% K + thể dịch nội bào, có 2% dịch ngoại bào có chênh lệch lớn nồng độ K+ dịch nội bào ngoại bào Nồng độ K + nội bào khoảng 150 mmol/L huyết tương có 3,5 – mmol/L Và chênh lệch nồng độ Na+, K+ trì hai bên màng tế bào nhờ enzyme Na +/K+ - ATPase, enzyme bơm Na+ từ nội bào ngoại bào K + theo chiều ngược lại, bơm có màng tế bào.Và hoạt động bơm Na +/K+ - ATPase hoạt động đòi hỏi lượng Ở đây, thời điểm trước tách huyết với cục máu đông trình đường phân diễn mạnh mẽ cung cấp lượng để trì hoạt động bơm Na +/K+ - ATPase để đưa ion Na+ ion K+ vào bên tế bào, làm cho nồng độ K+/HT thời điểm giảm so với thời điểm ban đầu Theo thời gian 59 nồng độ glucose/HT ngày cạn kiệt,quá trình đường phân chậm lại, làm giảm hoạt động bơm Na+/K+ - ATPase khuếch tán thụ động K+ từ tế bào trở nên trội K+ có nồng độ cao bên tế bào khuếch tán bên tế bào qua kênh K+ làm cho nồng độ K+ huyết tăng lên sau  Cl- Khi máu lấy vào ống máu không chứa chất chống đông để tách huyết ống máu để điều kiện nhiệt độ phòng (26 oC) nồng độ Cl-/HT thay đổi không đáng kể (p > 0.05) thời điểm giờ, 24 tiếp xúc huyết với cục máu đông Kết nghiên cứu tương đồng với kết nghiên cứu số tác giả [8], [23] Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian tiếp xúc huyết với cục máu đông đến số hóa sinh: cỡ mẫu nhỏ, số nghiên cứu ít, thời gian theo dõi ngắn, tiến hành theo dõi điều kiện nhiệt độ phòng (26oC) nên đánh giá cách tổng quan thay đổi giá trị 11 số hóa sinh tham gia nghiên cứu khía cạnh thời gian 4.2 Bàn luận khác kết xét nghiệm hóa sinh sử dụng huyết huyết tương chống đông heparin Mẫu máu sử dụng để xét nghiêm hóa sinh gồm ba loại: Máu toàn phần, huyết tương huyết Ngày labo xét nghiệm hóa sinh hay sử dụng huyết tương chống đông heparin cho xét nghiệm hóa sinh Nguyên nhân tác dụng heparin lên đường đông máu, ức chế thrombin không ảnh hưởng tới nồng độ chất Trong khi, sử dụng chất chống đông khác cho xét nghiệm hóa sinh ví dụ EDTA ảnh hưởng đến xét nghiệm ion K +, Ca+ Còn chất chống đông NaF làm ổn định nồng độ glucose với chất alkaline phosphatase (ALP), amylase acid uric định ống 60 [26] Huyết tương ưa sử dụng huyết phòng xét nghiệm cung cấp hai lợi riêng biệt Đầu tiên, thời gian việc thu thập phân tích rút ngắn máu sử dụng chất chống đông thời gian ly tâm nhanh hơn, thời gian chờ đợi cho trình hình thành cục máu đông nhờ rút ngắn thời gian làm xét nghiệm Thứ hai việc sử dụng huyết tương tránh loại trừ sai số gặp hoại huyết ngăn ngừa chất khuyếch tán từ hồng cầu vào huyết tương [7] Để tìm hiểu khác kết xét nghiệm hóa sinh sử dụng huyết huyết tương chống đông heparin Chúng tiến hành so sánh kết xét nghiệm mười số xét nghiệm hóa sinh: Glucose, creatinine, protein toàn phần, albumin, cholesterol toàn phần, GOT, CK, amylase, Natri, Kali Clo sử dụng huyết sử dụng huyết tương chống đông Heparin Kết thu được thể hiên qua mục 3.2 4.2.1 Bàn luận khác kết xét nghiệm định lượng sử dụng huyết huyết tương chống đông heparin Qua bẳng 3.4 ta thấy kết xét nghiệm glucose, creatinine, albumin,protein toàn phần cholesterol toàn phần huyết khác không nhiều so với giá trị chúng sử dụng huyết tương chống heparin Sự khác ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Nghiên cứu chúng tương đương với nghiên cứu số tác giả, Doumas cộng [27] hay nghiên cứu Rodney R Miles cộng [28] 4.2.2 Bàn luận khác kết xét nghiệm đo hoạt độ enzym sử dụng huyết huyết tương chống đông heparin Qua bẳng 3.5 thấy hoạt độ enzyme CK, amylase GOT huyết khác không nhiều so với hoạt độ chúng sử dụng 61 huyết tương chống heparin Sự khác ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Kết nghiên cứu enzyme CK Amylase tương đồng với kết nghiên cứu tác giả Doumas cộng [27], nghiên cứu Rodney R Miles cộng [28] Tuy nhiên có khác biệt kết enzyme GOT nghiên cứu với kết enzyme GOT nghiên cứu Doumas cộng [27] Trong nghiên cứu chúng tôi, hoạt độ enzyme GOT huyết giảm khoảng 0,56% so với kết GOT đo huyết tương Tuy nhiên nghiên cứu Doumas cộng lại thấy sử dụng huyết tương chống đông heparin hoạt độ enzyme GOT tăng lên khoảng 28,07% [27] Và họ giải thích tăng cao enzyme GOT huyết tương có mặt heparin tăng tỉ lệ thuận với nồng độ heparin Sự khác biệt nghiên cứu với nghiên cứu Doumas cộng sự khác cỡ mẫu nghiên cứu, khác nhay tỉ lệ chống đông ống máu chống đông heparin 4.2.3 Sự khác kết xét nghiệm điện giải đồ sử dụng huyết huyết tương chống đông heparin Qua bảng 3.6 thấy giá trị Na + Cl- sử dụng huyết khác ý nghĩa thống kê (p > 0,05) so với sử dụng huyết tương chống đông heparin Đối với xét nghiệm K + sử dụng huyết nồng độ K + huyết tăng khoảng 10,65% so với kết sử dụng huyết tương chống đông heparin Kết nghiên cứu tương đương với kết số nghiên cứu [27], [28] Trong nghiên cứu Doumas cộng [27] giá trị K+/HT cao giá trị K +/HTg chống đông heparin 8,01% Hay nghiên cứu Rodney R Miles cộng [28] so sánh kết xét nghiệm hóa sinh sử dụng huyết với huyết tương nồng 62 độ K+ huyết tương chống đông heparin thấp khoảng 9,3 % so với sử dụng huyết Có thể giải thích nồng độ Kali huyết cao huyết tương chống đông heparin sau: sử dụng ống không chứa chất chống đông để tách huyêt làm xét nghiệm K + giải phóng từ hồng cầu, bạch cầu tiểu cầu trình đông máu làm tăng kali giả tạo huyết Bình thường giá trị K + huyết thường cao khoảng 0,2 – 0,3 mmol/L so với K + huyết tương Nếu khác lớn giá trị người ta cho tăng K+ giả tạo [6] Có thể giải thích tính ổn định xét nghiệm glucose, creatinine, albumin, protein toàn phần, cholesterol toàn phần, CK, amylase, GOT, Na +, Cl- sử dụng huyết tương chống đông heparin khác biệt sử dụng huyết dựa vào chế chống đông heparin Heparin ức chế chuyển prothrombin thành thrombin, tạo phức với antithrombin III (AT III) thúc đẩy nhanh phản ứng antithrombin – thrombin phản ứng antithrombin với yếu tố kể gấp 1000 lần mặt heparin Nhóm sulfat cấu tạo heparin cần thiết cho gắn AT III với thrombin nhờ tích điện âm chứa nhiều gốc SO42- nên heparin làm thay đổi hình dáng thrombin prothrombin Cơ chế chống đông heparin không ảnh hưởng đến nồng độ chat Hơn ống chống đông heparin mà sử dụng dạng đông khô nên không gây sai số pha loãng sử dụng ống chống đông heparin dạng dung dịch Có nồng độ chất chống đông phù hợp để không ảnh hưởng đến xét nghiệm điện giải đồ hay xét nghiệm GOT Trong nghiên cứu nhận thấy số xét nghiệm nghiên cứu có khác không nhiều kết huyết huyết tương chống đông heparin Tuy nhiên xét nghiệm Kali máu 63 lại tương đồng kết huyết huyết tương chống đông heparin Nồng độ K + /HT cao có ý nghĩa (p < 0,05) 10,65% so với sử dụng huyết tương chống đông heparin Giá trị bình thường Kali huyết tương có 3,5-5 mmol/ L, giá trị bình thường dao động khoảng nhỏ thay đổi nhỏ kali ảnh hưởng đến kết luận bác sĩ lâm sàng Vì xét nghiệm K+ nên sử dụng huyết tương chống đông heparin với tỉ lệ chống đông phù hợp để tiến hành làm xét nghiêm Còn số nghiên cứu khác sử dụng huyết tương chống đông heparin huyết để tiến hành làm xét nghiệm Tuy nhiên sử dụng heparin làm chất chống đông nên ý tới số đểm sau: Một nên sử dụng ống chống heparin dạng đông khô, không nên sử dụng heparin nước gây sai số pha loãng mẫu máu [9] Nên sử dụng heparin với tỉ lệ chống đông phù hợp, nồng độ 25UI/ml không ảnh hưởng đến chất điện giải [29] Khi lấy máu vào ống chống đông heparin để làm xét nghiệm hóa sinh nên lấy thể tích để phù hợp với lượng chống đông ống Nếu lấy nhiều máu so với quy định lượng chất chống đông làm cho ống máu bị đông dây Còn lấy lượng máu lượng chất chống đông heparin bị thừa gây ảnh hưởng đến số xét nghiệm hóa sinh GOT, ion K+, amylase… 64 KẾT LUẬN Ảnh hucưởng thời gian tiếp xúc huyết với cục máu  đông đến kết số xét nghiệm hóa sinh Creatinin, Albumin, Protein toàn phần, Cholesterol toàn phần, enzyme CK (creatin kinase), enzyme Amylase, enzyme GOT (glutamate oxaloaxetat transaminase ), ion Na+ ion Cl- chất mà giá trị chúng huyết thay đổi ý nghĩa thống kê (p > 0,05) vòng 24  trước tách huyết với cục máu đông Đối với xét nghiệm K+ thời điểm cho tiếp xúc huyết với cục máu đông nồng độ K+/HT giảm ý nghĩa thống kê so với thời điểm ban đâu (p > 0,05) Tuy nhiên, đến thời điểm 24 tiếp xúc huyết với cục máu đông nồng độ K +/HT tăng lên cách đáng kể (10,49%) so với thời điểm ban đầu Sự thay đổi có ý nghĩa  thống kê (p < 0,05) Đối với xét nghiệm Glucose nồng độ glucose/HT giảm dần theo thời gian tiếp xúc huyết với cục máu đông Nồng độ glucose/HT thời điểm giờ, 24 trước tách huyết với cục máu đông giảm là: 10,55%; 21,1%; 45,41% so với thời điểm ban đầu sau lấy máu Ngay thời điểm sau lấy máu nồng độ glucose/HT giảm có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Sự khác kết xét nghiệm hóa sinh sử dụng huyết với huyết tương chống đông heparin  Đối với xét nghiệm glucose, creatinine, albumin, protein toàn phần, enzyme CK, enzyme amylase, enzyme GOT, Na+ Cl- kết xét nghiệm chúng huyết khác ý nghĩa thống kê (p > 0,05) so với kết  chúng sử dụng huyết tương chống đông heparin Đối với xét nghiệm K+ nồng độ K+/HT cao 10,65% so với nồng độ K+/HTg Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) TÀI LIỆU THAM KHẢO Forsman RW (1996) “Why is the laboratory an afterthought for managed care organizations?” Clin Chem 42 813-816 Carraro P, Plebani (2007) “ Errors in a stat laboratory: types and frequencies 10 years later” Clin Chem.53 1338-1342 NCCLS Infobase 95, H18-A, Procedures for the handling and processing of blood specimens; approved guideline Villanova, PA: NCCLS, 1995 Bộ môn huyết học – truyền máu trường đại học Y Hà Nội (2013) Huyết học – truyền máu NXB Y học, tr 59 – 66 Bộ môn sinh lý học trường đại học Y Hà Nội (2012) Sinh lý học NXB Y học Bộ môn hóa sinh trường đại học Y Hà Nội (2002) Thực tập hóa sinh NXB Y học, tr 50 – 53 Bobby L, Boyanton Jr and Kenneth E Blick (2002) “Stability studies of twenty – Four analytes in Human Plasma and Serum” Clin chem 48 2242-2247 Zhang DJ, Elswick RK, Miller WG, Bailey JL (1998) “Effect of serumclot contact time on clinical chemistry laboratory results” Clin Chem 10 44 1325-1333 “Các loại ống nghiệm dùng xét nghiệm lâm sàng” (2012) http://xetnghiemdakhoa.com/diendan/printthread.php?tid=393 Guminska M, Dterkowic (1976) “Effect of sodium flowride on glycolysis in human erythrocytes and Ehrlich ascites tumour cells 11 invitro” Acta Biochim Pol 23(4) 285 – 291 Chan AYW, Swaminathan R, CS (1989) “Effectiveness of sodium 12 fluoride as a preservative of glucose in blood” Clin chem 35 315 – 317 Booloo Sharma, DevaJit Sarmah, Pavan Sonke (2013) “Effect of diferent anaticoagulants on HbA1c estimatation and its stability” 13 Journal of Laboratory Physican 143-144 Trần Thị Chi Mai (2015) “ Bài giảng xét nghiệm chẩn đoán theo dõi ĐTĐ” Khoa Hóa Sinh trường Đại học Y Hà Nội 14 15 Khoa kỹ thuật Y học trường đại học Y Hà Nội (2013) Hóa sinh lâm sàng NXB Y học Bệnh viện trung ương quân đội 108 “ Một số điểm cần lưu ý lấy máu làm xét nghiệm hóa sinh” http://benhvien108.vn/khoakhambenh/tinbai/1174/mot-so-diem-can-luu- 16 17 y-khi-lay-mau-mau-xet-nghiem-sinh-hoa Gh Burtis CA Ashwood ER eds Tietz textbook of clinical chemistry 2nd ed 18 1994;76 WB Saunders Philadelphia, PA Tolstoi E Glycolysis in bloods of normal subjects and of diabetic 19 patients J Biol Chem 1924;60;69 Sunderman FW, Jr, Copeland BE, MacFate RP, Martens VE, Naumann HN, Stevenson GF (1956) “Manual of American Society of Clinical 20 Pathologists workshop on glucose” Am J Clin Pathol 26 1355-1372 Boyanton BL Jr, Blick KE (2002) “Stability studies of twenty-four 21 analytes in human plasma and serum” Clin Chem 48 2242-2247 Ono T, Kitabuchi K, Takehara M, Shiiba M, Hayami K (1981) “Serumconstituents amalyses: effect of duration and temperature of clotted 22 blood” Clin Chem 27 35-38 Laessig RH, Indriksons AA, Hasemer DJ, Paskey TA, Schwartz TH (1976) “Changes in serum chemical values as a result of prolonged 23 contact with the clot” Am J Clin Path 27 35-38 Rehak NN, Chiang BT (1988) “Storage of whole blood: effect of temperature on the measured concentration of analytes in serum” Clin 24 Chem 34 211-2114 Danowski TS (1941) “The transfer of potassium across the human 25 blood cell membrane” J Biol Chem 1941 139 693-705 Goodman JR, Vincent J, Rosen I (1954) “Serum potassium changes in 26 blood clots” Am J Clin pathol 24 111-113 Chapter 1: Anticoagulase http://compepid.tuskegee.edu/syllabi/pathobiology/pathology/clinpath/ch 27 apter1.html Doumas BT, Hause LL, Simuncak DM, Bretienfeld D (1989) “Differences between values for plasma and serum in tests performed in the Ektachem 700 XR Analyzer, and evaluation of plasma separator 28 tubes (PST)” Clin Chem 35 151-153 Miles RR, Roberts RF, Putnam AR, Roberts WL (2004) “Comparison of serum and heparinized plasma samples for measurement of chemistry anatytes” Clin Chem 50 1704-1706 PHỤ LỤC DANH SÁCH BỆNH NHÂN STT Họ tên Vũ Thị N Nguyễn Văn Đ Trần Vân A Lê Thị N Hoàng Lan H Lê Văn Đ Lê Thị N Tuổi 56 19 22 67 21 27 38 Địa Hà Nội Nam Định Thái Bình Thanh Hóa Thanh Hóa Thanh Hóa Hà Nội STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 Họ tên Nguyễn Bích T Nguyễn Thị H Lê Thị N Nguyễn Lan A Nguyễn Văn T Phạm Thị Lan A Trần Văn T Nguyễn Thị Y Ngô Quang C Hoàng Thị H Nguyễn Thị T Bùi Thanh H Nguyễn Thị V Nguyễn Thị L Nguyễn Thị T Tuổi 32 51 24 22 24 19 24 55 23 22 50 29 22 26 47 Địa Hà Nam Nghệ An Hà Nội Hà Nội Nghệ An Hà Nội Hải Phòng Vĩnh Phúc Bắc Ninh Bắc Giang Hà Nội Hà Nam Nam Định Hà Nội Hà Nội