Khảo sát điều kiện nuôi cấy và sinh bào tử vi khuẩn Bacillus subtilis

Khảo sát điều kiện nuôi cấy sinh bào tử vi khuẩn Bacillus subtilis Mô tả tài liệu: Việt nam nước nông nghiệp có nghành chăn nuôi phát triển có đóng góp lớn vào phát triển kinh tế đất nước Vì vậy, vấn đề nâng cao suất, chất lượng sản phẩm cải thiện môi trường chăn nuôi quan tâm nước ta Xuất phát từ vấn đề này, tiến hành nghiên cứu khảo sát đặc điểm vi khuẩn Bacillus subtils, tìm hiểu điều kiện nuôi cấy thích hợp xử lí bào tử để sản xuất chế phẩm sinh học nhằm cung cấp thông tin để chọn lựa điều kiện nuôi cấy vi khuẩn Bacillus subtilis thích hợp, từ sản xuất chế phẩm sinh học cung cấp cho nghành chăn nuôi Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Hiện nay, loại chế phẩm sinh học từ vi sinh vật sử dụng ngày phổ biến Đặc biệt chế phẩm từ vi khuẩn Bacillus subtilis Nước ta nước nông nghiệp, ngành chăn nuôi phát triển Với mục đích tăng suất chất lượng sản phẩm chăn nuôi, bảo vệ sức khoẻ người tiêu dùng, bảo vệ môi trường sống không bị ô nhiễm loại hoá chất độc hại đặc biệt nhằm hạn chế dần việc sử dụng kháng sinh chăn nuôi, chế phẩm sinh học giải pháp tối ưu để thực mục đích Vì vậy, nhà chăn nuôi ý đến vấn đề sử dụng chế phẩm sinh học Chế phẩm sinh học chứa vi sinh vật sống có lợi, người ta chọn lọc vi sinh vật có lợi có tính đối kháng cao để đưa vào đường ruột tạo cân có lợi cho hệ vi sinh vật đường ruột, khôi phục lại hoạt động bình thường, ức chế vi sinh vật có hại cho vật nuôi Ngoài ra, chế phẩm sinh học cải thiện lượng thức ăn ăn vào khả tiêu hoá, cung cấp chất dinh dưỡng… Xuất phát từ nhu cầu thực tiễn hướng dẫn TS Nguyễn Ngọc Hải, tiến hành nghiên cứu đề tài “ Khảo sát điều kiện nuôi cấy sinh bào tử vi khuẩn Bacillus subtilis” 1.2 Mục đích – Yêu cầu Mục đích Tìm hiểu điều kiện: nhiệt độ, thời gian, pH, môi trường nuôi cấy thích hợp nhiệt độ, pH xử lý bào tử để ứng dụng sản xuất thử nghiệm chế phẩm sinh học Yêu cầu Khảo sát đặc điểm Bacillus subtilis: hình thái khuẩn lạc, tế bào vi khuẩn… Tìm điều kiện: nhiệt độ, pH, môi trường thời gian nuôi cấy thích hợp. Tìm điều kiên: nhiệt độ, pH xử lý tạo bào tử. Phần TỔNG QUAN 2.1 Đại cƣơng vi khuẩn Bacillus subtilis 2.1.1 Lịch sử phát triển Bacillus subtilis phát lần phân ngựa (1941) Tổ chức y học Nazi Đức Lúc đầu, chủ yếu sử dụng để phòng bệnh lị cho bệnh sĩ Đức chiến đấu Bắc Phi Việc sử dụng để điều trị bệnh phải đợi đến năm 1949 - 1957 Henry, Albot cộng tách chủng khiết Bacillus subtilis Từ đó, “subtilistherapie” có nghĩa thuốc subtilin đời trị chứng viêm ruột, viêm đại tràng, chống tiêu chảy rối loạn tiêu hoá Ngày nay, vi khuẩn Bacillus subtilis trở nên phổ biến sử dụng rộng rãi chăn nuôi, y học, thực phẩm… 2.1.2 Đặc điểm phân loại Theo khoá phân loại Bergey, vi khuẩn Bacillus subtilis thuộc Bộ: Eubacteriales Họ: Bacillaceae Giống: Bacillus Loài: Bacillus subtilis 2.1.3 Đặc điểm phân bố Vi khuẩn Bacillus subtilis thuộc nhóm vi sinh vật bắt buộc đường ruột, chúng phân bố hầu hết tự nhiên như: cỏ khô, bụi, đất nước… Phần lớn chúng tồn đất, thông thường đất trồng trọt chứa khoảng 10 - 100 triệu CFU/g Đất nghèo dinh dưỡng sa mạc, đất hoang Bacillus subtilis Nước bùn cửa sông nước biển có tồn bào tử tế bào sinh dưỡng Bacillus subtilis (Vũ Thị Thứ, 1996) 2.1.4 Đặc điểm hình thái Bacillus subtilis vi khuẩn nhỏ, hai đầu tròn, G+, kích thước 0,5 - 0,8 µm x 1,8 – µm, đứng thành chuỗi ngắn đơn lẻ, di động, - 12 lông Sinh bào tử nhỏ vi khuẩn nằm tế bào, kích thước từ 0,8 - 1,8 µm Phát triển cách nảy mầm nứt bào tử, không kháng acid, có khả chịu nhiệt, chịu ẩm, tia tử ngoại, tia phóng xạ…(Tô Minh Châu, 2000) 2.1.5 Đặc điểm nuôi cấy Điều kiện phát triển: hiếu khí, nhiệt độ tối ưu 37oC Nhu cầu O2: Bacillus subtilis vi khuẩn hiếu khí có khả phát triển môi trường thiếu oxy Độ pH: Bacillus subtilis thích hợp với pH = 7,0 – 7,4 Môi trường thạch đĩa TSA: khuẩn lạc có dạng hình tròn, rìa cưa không đều, có tâm sẩm màu, phát triển chậm, màu vàng xám, đường kính - 5mm Sau 1- ngày bề mặt nhăn nheo màu sẩm Môi trường thạch nghiêng TSA: dễ mọc, tạo thành màu xám, rìa gợn sóng Môi trường canh TSB: Bacillus subtilis phát triển làm đục môi trường, tạo màng nhăn, lắng cặn kết lại vẩn mây đáy, khó tan lắc lên Dinh dưỡng cần nguyên tố C, H, O, N nguyên tố khác 2.1.6 Đặc điểm sinh hoá Lên men không sinh loại đường: glucose, maltose, manitol, saccharose, xylose, arabinosse Indol (-), nitrate (-), VP (+), H2S (-), NH3 (+), catalase (+), amylase (+), casein (+), citrate (+), di động (+), hiếu khí (+) Dung huyết: số dòng gây dung huyết dạng thạch máu ngựa thỏ tác động hemolysine 2.1.7 Cấu trúc kháng nguyên Bacillus subtilis có kháng nguyên H O, cấu trúc kháng nguyên dạng D L acid glutamic Sản sinh kháng sinh subtilin bacitracin có tác dụng ức chế vi khuẩn G+ G- Bệnh học: đa số chủng Bacillus subtilis không gây bệnh 2.1.8 Tính chất đối kháng Bacillus subtilis với số vi sinh vật gây bệnh Do Bacillus subtilis vi khuẩn bắt buộc đường ruột nên khả chịu đựng acid dày , chất dịch tiêu hoá đường ruột Chúng có khả đấu tranh lại với vi sinh vật gây bệnh đường ruột Với vi sinh vật gây bệnh Môi trường nuôi cấy nấm bệnh có diện Bacillus subtilis với số lượng lớn gây cạnh tranh dinh dưỡng, cạnh trạnh không gian sống vi khuẩn nấm Do vi khuẩn phát triển nhanh (trong 24h) sử dụng phần lớn chất dinh dưỡng môi trường, đồng thời tạo kháng sinh subtilin nên sinh trưởng nấm bị ức chế Với đồng loại Các chuyên gia Đại Học Havard, Mỹ cho biết: chất dinh dưỡng bắt đầu cạn kiệt, vi sinh vật đối phó cách chuyển sang tình trạng “ngủ đông”, hay nghỉ ngơi thời gian dài Bacillus subtilis thực điều cách tạo bào tử, trì trạng thái sống tiềm tàng nhiều năm, chí hàng kỉ Tuy nhiên thí nghiệm mình, nhóm nghiên cứu nhận thấy giai đoạn sớm hình thành bào tử, vài tế bào Bacillus tạo kháng sinh để giết chết tế bào vi khuẩn bên cạnh chưa bắt đầu trình Chất kháng sinh phá vỡ màng tế bào vi khuẩn bị công, giải phóng chất dinh dưỡng tế bào hình thành bào tử tiêu thụ Theo nhà nghiên cứu trên, trình tạo bào tử tiêu tốn lượng lớn lượng, phải vài bắt đầu đảo ngược Do đó, vi khuẩn cố gắng tránh thời điểm lâu tốt Đặc biệt, dinh dưỡng môi trường cạn kiệt, vi khuẩn tiêu diệt kẻ xung quanh để hút chất dinh dưỡng kéo dài thời kì chờ đợi này, phải chuyển sang sống tiềm sinh (Nguyễn Thị Công Dung, 2004) 2.2 Bào tử vi khuẩn Bacillus subtilis Bào tử hình thức tiềm sinh vi khuẩn, giúp cho vi khuẩn vượt qua điều kiện bất lợi như: môi trường nghèo dinh dưỡng, nhiệt độ, pH không thích hợp, môi trường tích luỹ nhiều sản phẩm trao đổi chất bất lợi… Mỗi vi khuẩn tạo bào tử Khi gặp điều kiện thuận lợi, bào tử nảy mầm để trở dạng tế bào sinh dưỡng 2.2.1 Sự hình thành bào tử Một đặc điểm quan trọng Bacillus subtilis khả tạo bào tử điều kiện định Bacillus subtilis có khả hình thành bào tử chu trình phát triển tự nhiên vi khuẩn gặp điều kiện bất lợi (dinh dưỡng môi trường bị kiệt quệ, nhiệt độ…) (Tô Minh Châu, 2000) Quá trình hình thành bào tử gồm bước Hình thành vách ngăn Sự tạo tiền bào tử Tạo lớp vỏ bào tử Sự tổng hợp lớp vỏ bào tử Sự giải phóng bào tử Lúc đầu lớp nguyên sinh chất tế bào sử dụng Tế bào chất nhân tập trung vị trí định tế bào Tế bào chất tiếp tục cô đặc tạo thành tiền bào tử (prospore) Tiền bào tử dần bao bọc lớp màng Tiền bào tử phát triển trở thành bào tử Khi bào tử trưởng thành, tế bào sinh dưỡng phân giải bào tử giải phóng khỏi tế bào mẹ Khi gặp điều kiện thuận lợi bào tử hút nước bị trương Sau vỏ chúng bị phá huỷ bào tử nảy mầm phát triển thành tế bào Mỗi tế bào sinh dưỡng tạo bào tử (Lê Đỗ Mai Phương, 2004) 2.2.2.Cấu tạo bào tử Bào tử khối nguyên sinh chất đặc, có chứa thành phần hoá học tế bào sinh dưỡng có vài điểm khác tỉ lệ thành phần có thêm số thành phần Phía nguyên sinh chất bao bọc nhiều lớp màng Ngoài bào tử lớp màng, mỏng không thấm nước, cấu tạo chủ yếu lipoprotein Dưới lớp màng vỏ, vỏ bào tử có nhiều lớp, bề mặt lớp xù xì, thành phần hoá học protein có tham gia keratin lớp có khả ngăn chặn thẩm thấu nước chất hoà tan nước, chúng có tác dụng tăng cường khả bảo vệ bào tử trước điều kiện bất lợi Dưới lớp vỏ lớp màng bào tử khối tế bào chất đồng Trong bào tử tự không tồn trao đổi chất, giữ trạng thái tiềm sinh nhiều năm (Lê Đỗ Mai Phương 2004) Bào tử khác tế bào sinh dưỡng cấu trúc, thành phần hoá học, tính chất sinh lí 2.2.3 Thành phần hoá học bào tử Các lớp bao màng bào tử có cấu tạo protein có chứa nhiều glyxin, tyroxin đặc biệt cystein, có tham gia keratin Nguyên sinh chất bào tử có chứa nhiễm sắc thể, ribosome enzyme chuyển hoá trạng thái không hoạt động Khi bào tử nảy mầm enzyme bắt đầu hoạt động Bào tử có chứa lượng lớn canxi, magie acid dipicolinic Acid chiếm từ 5- 12% khối lượng khô bào tử (acid tế bào sinh dưỡng, hình thành trình hình thành bào tử nảy mầm) Lượng nước bào tử thấp tồn dạng liên kết 2.2.4 Sự nảy mầm bào tử (Nguyễn Lân Dũng cộng sự, 1998) Quá trình chuyển bào tử từ trạng thái nghỉ sang tế bào sinh dưỡng vi khuẩn gọi trình nảy mầm bào tử Quá trình gồm giai đoạn: hoạt hoá, nảy mầm sinh trưởng: Hoạt hoá Sau cho bào tử Bacillus subtilis tồn trạng thái nghỉ ngày, ta xử lí 60o C phút xúc tiến trình nảy mầm Sau xử lí nhiệt, ta chuyển vào môi trường nuôi cấy thích hợp Có số hoá chất đặc biệt xúc tiến trình nảy mầm bào tử Ví dụ: L-alanine, Mn2+ , chất hoạt động bề mặt, glucose,… Cũng có chất lại có tác dụng ức chế trình nảy mầm: D-alanine, natri bicarbonate… Nảy mầm Protein có chứa nhiều cystein áo bào tử hoá xốp lên làm tăng tính thấm, xúc tiến hoạt động enzyme protease Khi lượng protein bào tử áo giảm xuống Các cation bên co thể xâm nhập vào lớp vỏ bào tử làm trương lớp vỏ bào tử lên, sau làm tan tiêu Khi đó, nước bên xâm nhập vào lớp lõi bào tử, làm cho lõi trương to lên, loại enzyme bắt đầu hoạt hoá, bắt đầu trình tổng hợp thành tế bào Trong trình nảy mầm đặc tính chịu nhiệt, tính chiết quang…bắt đầu giảm dần; lượng dipicolinate-canxi, acid amin, polipeptide đi; bắt đầu việc tổng hợp DNA, RNA protein vỏ bào tử Bào tử chuyển thành tế bào sinh dưỡng Khi nảy mầm, bào tử đâm theo phía cực đâm ngang Lúc thành tế bào mỏng chưa hoàn chỉnh, nâng cao khả tiếp nhận thêm DNA ngoại lai để thực trình biến nạp 2.2.5 Sức đề kháng bào tử Bào tử có sức đề kháng cao yếu tố vật lý hoá học như: nhiệt độ, tia cực tím, áp suất chất sát trùng Sỡ dĩ bào tử có sức đề kháng cao sống lâu yếu tố sau: Nước bào tử phần lớn trạng thái liên kết, khả làm biến tính protein tăng nhiệt độ Do bào tử có khối lượng lớn ion Ca2+ acid dipicolinic, protein bào tử kết hợp với dipicolinate canxi thành phức chất có tính chất ổn định cao nhiệt độ Các enzyme hoạt chất sinh học khác chứa bào tử tồn dưới dạng không hoạt động, hạn chế trao đổi chất bào tử tế bào bên Với cấu trúc có nhiều màng bao bọc tính thẩm thấu lớp màng làm cho chất hoá học chất sát trùng khó tác động tới bào tử 2.3 Hệ vi sinh vật đƣờng ruột loạn khuẩn 2.3.1.Hệ vi sinh vật đƣờng ruột Theo Nguyễn Vĩnh Phước (1987), ruột dày động vật sinh hoàn toàn vi khuẩn, sau vài từ chúng sinh thấy có xuất vài vi khuẩn từ chúng bắt đầu sinh sản dần Sau vài vi khuẩn khác theo thức ăn, nước uống vào đường tiêu hoá, sống sinh sôi nảy nở đó, chúng biến đổi nhiều chúng tồn vật chết Thành phần, số lượng vi sinh vật đường tiêu hoá phụ thuộc vào tuổi tác gia súc, cách nuôi dưỡng, chăm sóc…ngoài có điều kiện vật lí, hoá học môi trường đường tiêu hóa Theo Nguyễn Vĩnh Phước (1970) nhiều tác giả khác, chia hệ vi sinh vật đường tiêu hoá làm nhóm: Nhóm vi sinh vật tuỳ nghi Một số vi sinh vật vi sinh vật có hại, chúng thay đổi theo điều kiện thức ăn, môi trường, đường tiêu hoá, khả đề kháng thể…như: Samonella, Klebsiella, E coli, Clostridium, Shigella, Staphylococus… Đa số chúng thích nghi với môi trường pH trung tính đến kiềm Dưới điều kiện môi trường thích hợp chúng phát triển, sản sinh độc tố xâm nhập phá vỡ tế bào đường ruột, gây tổn thương thành đường ruột nguy hại cho gia súc gia cầm Nhóm vi sinh vật bắt buộc  Đây vi sinh vật chịu độ pH thấp, chúng phát triển tốt đường ruột gia súc, gia cầm định cư vĩnh viễn Đa số chúng giúp thể động vật tiêu hoá thức ăn tốt nhờ vào hệ thống enzyme chúng giúp thể phòng chống số bệnh vi sinh vật hội gây Nhóm vi sinh vật bắt buộc gồm có: Vi khuẩn: Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Streptococus lactic (hiện gọi Lactococus lactis), Bacillus subtilis, Bifidobacterium, Cellulosemonas… Nấm men: Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces bouladii… Nấm mốc: Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Mucor spp… Protozoa: Entodinium, Diploinium… Ngoài ra, người ta chia hệ vi sinh vật đường ruột làm nhóm dựa vào số lượng chúng có đường ruột Nhóm hệ phổ chính: chiếm tổng số 90% số lượng vi sinh vật đường ruột như: Bifidobacterium, Lactobacillus, Bacterioides… Nhóm hệ phổ vệ tinh chiếm 10% bao gồm: nấm men, Clostridium, Proteus, Samonella… Nhóm tuỳ nghi: chiếm 0,1% gồm: Clostridium, Samonella…  (Tô Minh Châu, 2000) Hai nhóm vi sinh vật trạng thái cân động điều kiện cần thiết bảo đảm cho sức khoẻ vật chủ Cũng hai nhóm vi khuẩn khác tranh chấp chất dinh dưỡng có khối lượng ống tiêu hoá Vi khuẩn đồng hoá chất dinh dưỡng tốt loại trừ vi khuẩn Một số vi khuẩn làm thay đổi số đặc điểm lí hoá hệ thống tiêu hoá như: độ pH, tiềm oxy hoá khử, nồng độ chất chuyển hoá làm cho số vi sinh vật khác phát triển không phát triển (Nguyễn Kiều Uyên Vi, 2004) 2.3.2 Vai trò hệ vi sinh vật đƣờng ruột Giúp cho trình tiêu hoá tốt nhờ vào hệ enzyme Đa số vi khuẩn có lợi đường ruột tham gia vào trình tiêu hoá, phân giải tinh bột, đường, đạm chất xơ thành sản phẩm dễ hấp thu Nhóm gồm vi sinh vật sinh số enzyme có khả phân huỷ chất trên: amylase, protease, glucanase, cellulase… gồm vi khuẩn Lactic, Bacillus subtilis, Isotrichs, Aspergillus oryzae, Aspergillus niger… Theo Nguyễn Thị Vân Hương (1990), bổ sung chế phẩm Saccharomyces boulardii vào phần gà thịt làm giảm hệ số chuyển biến thức ăn kg tăng trọng, làm tăng sức kháng bệnh gà làm giảm tỉ lệ chết, từ góp phần làm tăng hiệu kinh tế chăn nuôi Đối với thú trưởng thành tiêu hoá chủ yếu nhờ enzyme xuất vi sinh vật sản sinh enzyme giúp thú tiêu hoá thức ăn tốt So với enzyme tổng hợp, nguồn enzyme vi sinh vật tương đối lí tưởng, có nhiều ưu điểm so với nguồn từ động vật thực vật như: Tốc độ sinh sản vi sinh vật nhanh  Nguồn nguyên liệu dễ nuôi cấy, dễ kiếm rẻ tiền. Các enzyme vi sinh vật có hoạt tính cao  Ngoài ra, điều khiển điều kiện tối ưu trình nuôi cấy để đạt hiệu cao sản xuất (Trần Thị Minh Chiến, 2002) 2.3.3 Sự loạn khuẩn Từ loạn khuẩn Nissle đưa vào năm 1916 Ông cho vi khuẩn có ruột người gia súc quân bình để đảm bảo cho tiêu hoá bình thường vật chủ Thế quân bình dựa vào chế: (1) Cùng tranh giành chất dinh dưỡng cần cho sinh trưởng chúng (2) Chúng tiết chất có tính kháng vi khuẩn khác Các nguyên nhân gây loạn khuẩn: Theo Tô Minh Châu (2004) có nguyên nhân: Do kháng sinh có phổ rộng lâu ngày làm cân hệ vi sinh vật đường ruột Do yếu tố ngoại cảnh: thức ăn phẩm chất, thú bị stress, thay đổi thời tiết, vệ sinh kém… Do yếu tố sinh lý thú con: Sức đề kháng thể yếu… Cơ chế tƣợng loạn khuẩn Theo Nguyễn Vĩnh Phước (1977), thể khoẻ mạnh, hai nhóm vi sinh vật bắt buộc tuỳ nghi cân có lợi nhờ chế cạnh tranh sinh học Khi hai hệ cân dễ gây rối loạn hệ vi khuẩn đường ruột Thông thường, hệ vi khuẩn tuỳ nghi lấn át hệ vi khuẩn bắt buộc Dưới tác động vài điều kiện bất lợi đó, làm cho sức đề kháng thể giảm dùng kháng sinh lâu ngày, trúng độc…làm cho hệ vi sinh vật đường ruột bị thay đổi số lượng, dòng vi khuẩn vị trí cư trú chúng Từ đó, gây giảm độ tiêu hoá, tạo điều kiện cho vi khuẩn gây thối hoạt động, gây trình thối rửa, phân giải chất ruột sinh khí CO2, H2S, CH4… Những chất phá huỷ phản ứng bình thường dày, ruột phá hoại trình tạo men thức ăn, gây phản ứng ống tiêu hoá như: biểu mô niêm mạc bị phồng lên, rộp tróc tạo điều kiện cho thuận lợi cho xâm nhập vi khuẩn gây hại Do để ổn định hệ vi sinh vật có lợi, đồng thời giúp cho vật nuôi sớm trở lại trạng thái ban đầu việc bổ sung chế phẩm vi sinh vật có lợi cho đường ruột vấn đề thiết thực cần quan tâm 2.4 Giới thiệu chung probiotic 2.4.1 Định nghĩa Thuật ngữ probiotic đưa lần Lilly Stillwel (1965) để mô tả yếu tố kích thích sinh trưởng sản sinh vi sinh vật Probiotic bắt nguồn từ nguồn gốc Hy Lạp với nghĩa “ tiền sống” (prolife) Năm 1989, Fuller định nghĩa probiotic thức ăn bổ sung vi sinh vật sống có tác động có lợi đến động vật chủ thông qua cải tiến cân vi sinh vật Năm 1992, Havenar cộng định nghĩa probiotic Fuller bị hạn chế thức ăn bổ sung cho động vật qua đường ruột Ông mở rộng định nghĩa probiotic Fuller lứa cấy đơn hỗn hợp vi sinh vật sống mà chúng có ảnh hưởng có lợi vật chủ cách cải thiện tính chất hệ vi sinh vật xứ 2.4.2.Chức sinh học probiotic Trung hoà độc tố, khử độc phân huỷ số thuốc có độc tính cao. Kích thích hệ thống miễn dịch. Giúp ổn định hệ vi sinh vật đường ruột Làm tăng thức ăn ăn vào làm tăng khả tiêu hoá nhờ hệ thống enzyme Tổng hợp vitamine nhóm B K manh tràng  2.5 Tình hình nghiên cứu ứng dụng chế phẩm chứa vi khuẩn Bacillus subtilis Trong y học chăn nuôi Trong kháng chiến chống Pháp Bacillus subtilis giáo sư Đặng Đức Trạch, Hoàng Thuỷ Nguyên (là bác sĩ quân y) nghiên cứu sản xuất chế phẩm Bacillus subtilis để đưa chiến trường nhằm giải dịch tiêu chảy Năm 1949, Pháp lưu hành thuốc uống dạng ống chứa vi khuẩn Bacillus subtilis chủng IB 5832, đến năm 1955 có thêm thuốc dạng bột đóng ống viên nang Năm 1962,Guy Albot phát Bacillus subtilis có tác dụng điều trị tiêu chảy lạm dụng kháng sinh viêm đại tràng mãn, trộn thêm với vi khuẩn lên men lactic khác chữa loạn khuẩn đường ruột hiệu 1958 - 1960 bác sĩ Phạm Ngọc Thạch sản xuất đồng loạt chế phẩm Bacillus subtilis dùng trị bệnh đường ruột Khoa vệ sinh y học bệnh viện Bạch Mai Hà Nội nghiên cứu sản xuất chế phẩm Bacillus subtilis dùng điều trị bệnh tiêu chảy người Viện bào chế Pharimex Tp.HCM, Viện Pasteur Nha Trang nghiên cứu sản xuất chế phẩm Bacillus subtilis 1971, Trần Minh Hùng, Lê Thị Ba, Nguyên Văn Hùng nghiên cứu sản xuất chế phẩm Bacillus subtilis dạng viên nuôi cấy môi trường đậu tương, cua đồng…hấp thu tinh bột tan Chế phẩm dùng cho heo uống từ 0,5 - 1g/kg thể trọng Kết heo sau sử dụng chế phẩm Bacillus subtilis tăng trọng nhanh 1982 Vũ Văn Ngữ cộng sản xuất thử nghiệm chế phẩm coli_subtly (Escherichia coli Bacillus subtilis) làm giảm tái phát bệnh tiêu chảy gây lợn so với phương pháp điều trị kháng sinh, kết heo tăng trọng tốt Nghiên cứu Baker, Braude Kon (1925), Hauser (1957) bổ sung kháng sinh liều lượng thấp vào thức ăn thú nhận thấy: acid folic, acid patothenic, vitamin A, vitamin B12 tích tụ gan cao Ngoài Bacillus subtilis phối trộn với số chủng nấm mốc, nấm men số vi khuẩn khác dùng chế phẩm EM, probiotic… Trong nông nghiệp Chế phẩm Bacillus subtilis dùng phòng trừ vi sinh vật gây bệnh nấm Rhizoetonia solani, Fusarium sp, Pyriculariaoryaze… bảo vệ nông sản sau thu hoạch Trung tâm sinh học thuộc liên hiệp sản xuất hoá chất thuộc công nghiệp nặng Tp.HCM, nghiên cứu sản xuất chế phẩm Bactophyl từ Bacillus subtilis để phòng trừ loại nấm gây bệnh rau cải Hồ Thị Mỹ Hồng, Nguyễn Thanh Bình Trung tâm ứng dụng sinh học Hà Nội sản xuất chế phẩm Bacillus subtilis để phòng trừ nấm gây bệnh bắp Ostrinia furnacalis 1940 Norio Kimura Yokohamo sử dụng chế phẩm Bacillus subtilis để ngăn chặn phát triển sinh độc tố chủng nấm mốc Aspergilus flavus, Aspergillus paraciticus Roman cộng nghiên cứu B subtilis (ATCC_6633, ATCC_9372) làm giảm 40 - 50% aflatoxin dịch chứa aflatoxin vòng 20 ngày [...]... chứa vi khuẩn Bacillus subtilis chủng IB 5832, đến năm 1955 có thêm thuốc dạng bột đóng ống và vi n nang Năm 1962,Guy Albot phát hiện Bacillus subtilis có tác dụng trong điều trị tiêu chảy do lạm dụng kháng sinh và vi m đại tràng mãn, trộn thêm với các vi khuẩn lên men lactic khác chữa loạn khuẩn đường ruột rất hiệu quả 1958 - 1960 bác sĩ Phạm Ngọc Thạch đã sản xuất đồng loạt chế phẩm Bacillus subtilis. .. trị bệnh đường ruột Khoa vệ sinh y học bệnh vi n Bạch Mai Hà Nội đã nghiên cứu và sản xuất chế phẩm Bacillus subtilis dùng điều trị bệnh tiêu chảy ở người Vi n bào chế Pharimex Tp.HCM, Vi n Pasteur Nha Trang đã nghiên cứu sản xuất chế phẩm Bacillus subtilis 1971, Trần Minh Hùng, Lê Thị Ba, Nguyên Văn Hùng đã nghiên cứu sản xuất chế phẩm Bacillus subtilis dạng vi n nuôi cấy trên môi trường đậu tương,...Cơ chế của hiện tƣợng loạn khuẩn Theo Nguyễn Vĩnh Phước (1977), khi cơ thể khoẻ mạnh, hai nhóm vi sinh vật bắt buộc và tuỳ nghi luôn ở thế cân bằng có lợi nhờ cơ chế cạnh tranh sinh học Khi một trong hai hệ này mất cân bằng thì dễ gây ra sự rối loạn hệ vi khuẩn đường ruột Thông thường, hệ vi khuẩn tuỳ nghi lấn át hệ vi khuẩn bắt buộc Dưới tác động của một vài điều kiện bất lợi nào đó, làm cho sức... tăng khả năng tiêu hoá nhờ hệ thống enzyme Tổng hợp vitamine nhóm B và K ở manh tràng  2.5 Tình hình nghiên cứu và ứng dụng chế phẩm chứa vi khuẩn Bacillus subtilis Trong y học và chăn nuôi Trong kháng chiến chống Pháp Bacillus subtilis được các giáo sư Đặng Đức Trạch, Hoàng Thuỷ Nguyên (là các bác sĩ quân y) đã nghiên cứu sản xuất chế phẩm Bacillus subtilis để đưa ra chiến trường nhằm giải quyết dịch... patothenic, vitamin A, vitamin B12 tích tụ trong gan cao Ngoài ra Bacillus subtilis còn được phối trộn với một số chủng nấm mốc, nấm men và một số vi khuẩn khác dùng trong chế phẩm EM, probiotic… Trong nông nghiệp Chế phẩm Bacillus subtilis được dùng phòng trừ vi sinh vật gây bệnh như nấm Rhizoetonia solani, Fusarium sp, Pyriculariaoryaze… và trong bảo vệ nông sản sau thu hoạch Trung tâm sinh học thuộc... ra và tróc đi tạo điều kiện cho thuận lợi cho sự xâm nhập của những vi khuẩn gây hại Do đó để ổn định hệ vi sinh vật có lợi, đồng thời giúp cho vật nuôi sớm trở lại trạng thái ban đầu thì vi c bổ sung chế phẩm vi sinh vật có lợi cho đường ruột là một vấn đề rất thiết thực cần được quan tâm 2.4 Giới thiệu chung về probiotic 2.4.1 Định nghĩa Thuật ngữ probiotic được đưa ra lần đầu tiên bởi Lilly và Stillwel... sử dụng chế phẩm Bacillus subtilis tăng trọng nhanh 1982 Vũ Văn Ngữ và các cộng sự đã sản xuất thử nghiệm chế phẩm coli_subtly (Escherichia coli và Bacillus subtilis) làm giảm tái phát do bệnh tiêu chảy gây ra ở lợn so với phương pháp điều trị bằng kháng sinh, kết quả heo tăng trọng tốt Nghiên cứu của Baker, Braude và Kon (1925), Hauser (1957) khi bổ sung kháng sinh liều lượng thấp vào thức ăn thú nhận... của Fuller như là một lứa cấy đơn hoặc hỗn hợp các vi sinh vật sống mà chúng có ảnh hưởng có lợi đối với vật chủ bằng cách cải thiện những tính chất của hệ vi sinh vật bản xứ 2.4.2.Chức năng sinh học của probiotic Trung hoà độc tố, khử độc và phân huỷ một số thuốc có độc tính cao. Kích thích hệ thống miễn dịch. Giúp ổn định hệ vi sinh vật đường ruột Làm tăng thức ăn ăn vào và làm tăng khả năng tiêu... lợi nào đó, làm cho sức đề kháng của cơ thể giảm hoặc do dùng kháng sinh lâu ngày, trúng độc…làm cho hệ vi sinh vật đường ruột bị thay đổi về số lượng, về các dòng vi khuẩn cũng như vị trí cư trú của chúng Từ đó, gây giảm độ tiêu hoá, tạo điều kiện cho vi khuẩn gây thối hoạt động, gây ra quá trình thối rửa, phân giải các chất trong ruột sinh ra khí CO2, H2S, CH4… Những chất này sẽ phá huỷ các phản ứng... từ Bacillus subtilis để phòng trừ các loại nấm gây bệnh trên rau cải Hồ Thị Mỹ Hồng, Nguyễn Thanh Bình Trung tâm ứng dụng sinh học Hà Nội sản xuất chế phẩm Bacillus subtilis để phòng trừ nấm gây bệnh ở bắp Ostrinia furnacalis 1940 Norio Kimura Yokohamo đã sử dụng chế phẩm Bacillus subtilis để ngăn chặn sự phát triển và sinh độc tố của chủng nấm mốc Aspergilus flavus, Aspergillus paraciticus Roman và