ứng dụng bromelain từ vỏ khóm để chiết xuất chitin từ đầu tôm thẻ (litopenaeus vannamei)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH VI SINH VẬT HỌC ỨNG DỤNG BROMELAIN TỪ VỎ KHÓM ĐỂ CHIẾT XUẤT CHITIN TỪ ĐẦU TÔM THẺ (Litopenaeus vannamei) CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN ThS VÕ VĂN SONG TOÀN NGUYỄN VIỆT HƢNG MSSV: 3113719 LỚP: Vi Sinh Vật K37 Cần Thơ, Tháng 5/2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH VI SINH VẬT HỌC ỨNG DỤNG BROMELAIN TỪ VỎ KHÓM ĐỂ CHIẾT XUẤT CHITIN TỪ ĐẦU TÔM THẺ (Litopenaeus vannamei) CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN ThS VÕ VĂN SONG TOÀN NGUYỄN VIỆT HƢNG MSSV: 3113719 LỚP: Vi Sinh Vật K37 Cần Thơ, Tháng 5/2015 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƢỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN (ký tên) (ký tên) Ths Võ Văn Song Toàn Nguyễn Việt Hưng DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày tháng năm 2015 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (ký tên) LỜI CẢM TẠ Lời nói xin chân thành gửi lời biết ơn sâu sắc đến cha mẹ gia đình động viên hỗ trợ mặt suốt trình học tập, thực hoàn thành luận văn Ngoài ra, nhận giúp đỡ từ nhiều phía trình thực luận văn tốt nghiệp Xin gửi lời cảm ơn đến thầy Nguyễn Đức Độ, cô Dương Thị Hương Giang anh Nguyễn Văn Tính CNSH TT K32, bạn Nguyễn Chí Linh CNSH K37 em Võ Minh Nhật CNSH K38 phòng thí nghiệm Sinh hóa, Công nghệ enzyme nhiệt tình hướng dẫn tạo điều kiện để hoàn tất đề tài Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy Võ Văn Song Toàn hết lòng hướng dẫn, động viên, truyền đạt cho kiến thức kinh nghiệm quý báu tận tình giải đáp thắc mắc suốt trình thực đề tài Cần Thơ, ngày tháng năm 2015 Nguyễn Việt Hƣng Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2015 Trường ĐHCT TÓM LƢỢC Đề tài nghiên cứu “Ứng dụng bromelain từ vỏ khóm để chiết xuất chitin từ đầu tôm thẻ (Litopenaeus vannamei)” thực nhằm thu nhận sản phẩm chitin Kết khảo sát nguyên liệu thô ban đầu cho thấy, hàm lượng protein đầu tôm thẻ 15,31% ẩm độ 74,78%; dịch chiết enzyme bromelain từ vỏ khóm có hoạt tính đặc hiệu 10,68 U.mg - Các thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng nồng độ, nhiệt độ, thời gian pH đến trình thủy phân cho thấy với nồng độ bromelain 10,68 U.mg - phản ứng gram chất đầu tôm môi trường đệm phosphate pH8 thủy phân nhiệt độ 450C điều kiện thích hợp Cụ thể, hàm lượng đạm amin sinh đạm ammoniac 4,423 mgN/ml 0,256 mgN/ml; phần trăm vật chất khô chitin thu hồi tương ứng 5,367% Kết điện di SDS - PAGE cho thấy, với điều kiện thủy phân môi trường pH có trọng lượng phân < 14,4 kDa Từ khóa : bromelain, chitin, đạm amin sinh ra, đạm ammoniac, Litopenaeus vannamei, thủy phân, vật chất khô Chuyên ngành Vi Sinh Vật i Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2015 Trường ĐHCT MỤC LỤC Trang MỤC LỤC ii DANH SÁCH BẢNG v DANH SÁCH HÌNH vi CÁC TỪ VIẾT TẮT vii CHƢƠNG 1: GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài CHƢƠNG 2: LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan chung tôm thẻ chân trắng (Litopenaeus vannamei) 2.1.1 Giới thiệu tôm thẻ chân trắng (Litopenaeus vannamei) 2.2 Chitin 2.2.1 Giới thiệu chitin 2.2.2 Cấu trúc chitin 2.2.3 Tính chất chitin 2.2.4 Ứng dụng chitin .4 2.3 Một số thành phần dinh dưỡng khác có phận khác tôm 2.4 Tổng quan enzyme bromelain khóm 2.4.1 Giới thiệu bromelain 2.4.2 Tính chất bromelain 2.4.3 Cơ chế hoạt động bromelain 2.4.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính bromelain 2.4.5 Ứng du ̣ng của enzyme bromelain 11 2.5 Một số phản ứng ảnh hưởng đến màu sắc dịch thủy phân đầu tôm 12 2.6 Nghiên cứu nước đầu tôm 14 2.6.1 Trong nước 14 2.6.2 Ngoài nước 15 CHƢƠNG 3: PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Phương tiện nghiên cứu 16 3.1.1 Thời gian, địa điểm .16 Chuyên ngành Vi Sinh Vật ii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2015 Trường ĐHCT 3.1.2 Dụng cụ, thiết bị 16 3.1.3 Nguyên vật liệu .16 3.1.4 Hóa Chất .16 3.2 Phương pháp nghiên cứu 17 3.2.1 Chuẩn bị nguyên liệu 17 3.2.2 Khảo sát nguồn nguyên liệu 17 3.2.3 Khảo sát số yếu tố ảnh hưởng đến trình thủy phân protein từ đầu tôm 17 3.2.3.1 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng nồng độ bromelain vỏ khóm đến trình thủy phân protein đầu tôm .17 3.2.3.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng nhiệt độ đến trình thủy phân protein đầu tôm bromelain vỏ khóm 18 3.2.3.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng thời gian đến trình thủy phân protein đầu tôm bromelain vỏ khóm 19 3.2.3.4 Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng pH đến trình thủy phân protein đầu tôm bromelain vỏ khóm .20 3.2.4 Phương pháp xử lý số liệu 20 3.3 Một số phương pháp phân tích 21 CHƢƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23 4.1 Thành phần hóa học vỏ đầu tôm 23 4.2 Hàm lượng protein hoạt tính bromelain vỏ khóm 23 4.3 Ảnh hưởng nồng độ bromelain vỏ khóm đến trình thủy phân protein đầu tôm 24 4.4 Ảnh hưởng nhiệt độ đến trình thủy phân protein đầu tôm 28 4.5 Ảnh hưởng thời gian đến trình thủy phân protein đầu tôm 31 4.6 Ảnh hưởng pH đến trình thủy phân protein đầu tôm 34 CHƢƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 39 5.1 Kết luận 39 5.2 Đề nghị 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Tiếng Anh Chuyên ngành Vi Sinh Vật iii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2015 Trường ĐHCT PHỤ LỤC Phụ lục 1: Các phương pháp phân tích Phụ lục 2: Các số liệu thí nghiệm Chuyên ngành Vi Sinh Vật iv Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2015 Trường ĐHCT DANH SÁCH BẢNG Bảng Thành phần axít béo bão hòa không bão hòa có thịt tôm Bảng Hàm lượng axít amin chủ yếu thịt tôm Litopenaeus vannamei Bảng Nhiệt độ pH tối ưu bromelain chất khác 10 Bảng Ảnh hưởng pH nhiệt độ đến trình oxy hóa phenol oxidase 12 Bảng Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ đến trình thủy phân vỏ, đầu tôm 17 Bảng Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng nhiệt độ đến trình thủy phân đầu tôm bromelain vỏ khóm 18 Bảng Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng thời gian đến trình thủy phân đầu tôm bromelain vỏ khóm 19 Bảng Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng pH đến trình thủy phân đầu tôm 20 Bảng Thành phần đầu tôm thẻ chân trắng 23 Bảng 10 Hàm lượng protein hoạt tính tổng bromelain vỏ khóm 23 Bảng 11 Số band trọng lượng phân tử mẫu điện di 37 Chuyên ngành Vi Sinh Vật v Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2015 Trường ĐHCT DANH SÁCH HÌNH Hình 1: Tôm thẻ chân trắng Hình 2: Cấu trúc mạch polymer chitin Hình 3: Quá trình hình thành sắc tố melnosis tôm thẻ Hình 4: Cơ chế hoạt động cystein protease Hình 5: Ảnh hưởng nồng độ bromelain vỏ đến hàm lượng đạm dịch thủy phân 24 Hình 6: Ảnh hưởng nồng độ bromelain vỏ đến hàm lượng chitin thu hồi 25 Hình 7: Ảnh hưởng nồng độ bromelain đến màu sắc dịch thủy phân 26 Hình 8: Chitin vỏ đầu tôm thô 27 Hình 9: Ảnh hưởng nhiệt độ đến hàm lượng đạm dịch thủy phân 28 Hình 10: Ảnh hưởng nhiệt độ đến hàm lượng chitin thu hồi 29 Hình 11: Ảnh hưởng nhiệt độ đến màu sắc dịch thủy phân 30 Hình 12: Ảnh hưởng thời gian đến hàm lượng đạm dịch thủy phân 31 Hình 13: Ảnh hưởng thời gian đến hàm lượng chitin thu hồi 32 Hình 14: Ảnh hưởng thời gian đến màu sắc dịch thủy phân dầu tôm 33 Hình 15: Ảnh hưởng pH đến hàm lượng đạm dịch thủy phân 34 Hình 16: Ảnh hưởng pH đến hàm lượng chitin thu hồi 35 Hình 17: Ảnh hưởng pH đến màu sắc dịch thủy phân 36 Hình 18a: Điện di đồ thí nghiệm ảnh hưởng pH đến trình thủy phân đầu tôm 37 Hình 19: Đồ thị đường chuẩn Tyrosin Hình 20: Đồ thị đường chuẩn BSA Hình 21: Phương trình hồi qui tuyến tính Rf logM 12 Chuyên ngành Vi Sinh Vật vi Viện NC&PT Công nghệ Sinh học PHỤ LỤC 3: KẾT QUẢ PHÂN TÍCH THỐNG KÊ Kết thống kê ảnh hƣởng nồng độ đến trình thủy phân protein đầu tôm thẻ Summary Statistics for Dam ammoniac Nong Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness 0u 0.294 0.0 0.0% 0.294 0.294 0.0 10u 15u 20u 25u 30u 5u Total 3 3 3 21 0.35 0.396667 0.373333 0.364 0.326667 0.312667 0.345333 0.0 0.0080829 0.0080829 0.0 0.0080829 0.0080829 0.0346718 0.0% 2.03771% 2.16506% 0.0% 2.47436% 2.58515% 10.0401% 0.35 0.392 0.364 0.364 0.322 0.308 0.294 0.35 0.406 0.378 0.364 0.336 0.322 0.406 0.0 0.014 0.014 0.0 0.014 0.014 0.112 ANOVA Table for Dam ammoniac by Nong Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.02352 0.00392 Within groups 0.000522667 14 0.0000373333 Total (Corr.) 0.0240427 20 Multiple Range Tests for Dam ammoniac by Nong Method: 95.0 percent LSD Nong Count Mean 0u 0.294 5u 0.312667 30u 0.326667 10u 0.35 25u 0.364 20u 0.373333 15u 0.396667 Homogeneous Groups X X X X X X X Contrast Sig Difference +/- Limits 0u - 10u * -0.056 0.0107001 0u - 15u * -0.102667 0.0107001 0u - 20u * -0.0793333 0.0107001 0u - 25u * -0.07 0.0107001 0u - 30u * -0.0326667 0.0107001 0u - 5u * -0.0186667 0.0107001 10u - 15u * -0.0466667 0.0107001 10u - 20u * -0.0233333 0.0107001 10u - 25u * -0.014 0.0107001 10u - 30u * 0.0233333 0.0107001 10u - 5u * 0.0373333 0.0107001 15u - 20u * 0.0233333 0.0107001 15u - 25u * 0.0326667 0.0107001 15u - 30u * 0.07 0.0107001 15u - 5u * 0.084 0.0107001 20u - 25u 0.00933333 0.0107001 20u - 30u * 0.0466667 0.0107001 20u - 5u * 0.0606667 0.0107001 25u - 30u * 0.0373333 0.0107001 25u - 5u * 0.0513333 0.0107001 30u - 5u * 0.014 0.0107001 * denotes a statistically significant difference F-Ratio 105.00 P-Value 0.0000 1.73205 1.22474 -1.22474 -1.73205 1.22474 1.22474 -0.06504 Summary Statistics for Dam OPA Nong Count Average Standard deviation 0u 2.91133 0.163237 10u 4.387 0.0190526 15u 4.271 0.0311769 20u 3.8 0.0644903 25u 3.696 0.0 30u 3.63 0.0294449 5u 3.52067 0.0879621 Total 21 3.74514 0.471166 ANOVA Table for Dam OPA by Nong Source Sum of Squares Df Between groups 4.35845 Within groups 0.0814893 14 Total (Corr.) 4.43994 20 Coeff of variation 5.60695% 0.434296% 0.729968% 1.69711% 0.0% 0.811153% 2.49845% 12.5807% Mean Square 0.726408 0.00582067 Multiple Range Tests for Dam OPA by Nong Method: 95.0 percent LSD Nong Count Mean 0u 2.91133 5u 3.52067 30u 3.63 25u 3.696 20u 3.8 15u 4.271 10u 4.387 Homogeneous Groups X X X XX X X X Contrast Sig Difference +/- Limits 0u – 10u * -1.47567 0.133606 0u – 15u * -1.35967 0.133606 0u – 20u * -0.888667 0.133606 0u – 25u * -0.784667 0.133606 0u – 30u * -0.718667 0.133606 0u – 5u * -0.609333 0.133606 10u – 15u 0.116 0.133606 10u – 20u * 0.587 0.133606 10u – 25u * 0.691 0.133606 10u – 30u * 0.757 0.133606 10u – 5u * 0.866333 0.133606 15u – 20u * 0.471 0.133606 15u – 25u * 0.575 0.133606 15u – 30u * 0.641 0.133606 15u – 5u * 0.750333 0.133606 20u – 25u 0.104 0.133606 20u – 30u * 0.17 0.133606 20u – 5u * 0.279333 0.133606 25u – 30u 0.066 0.133606 25u – 5u * 0.175333 0.133606 30u – 5u 0.109333 0.133606 * denotes a statistically significant difference F-Ratio 124.80 Minimum 2.731 4.365 4.235 3.743 3.696 3.596 3.424 2.731 Maximum 3.049 4.398 4.289 3.87 3.696 3.647 3.596 4.398 P-Value 0.0000 Range 0.318 0.033 0.054 0.127 0.0 0.051 0.172 1.667 Stnd skewness -0.774881 -1.22474 -1.22474 0.615362 -1.22474 -0.726329 -0.682003 Summary Statistics for Dam amin sinh Nong Count Average Standard deviation 0u 2.61733 0.163237 10u 4.031 0.0138564 15u 3.87433 0.0392598 20u 3.42667 0.0721411 25u 3.332 0.0 30u 3.30333 0.0375278 5u 3.208 0.095687 Total 21 3.39895 0.444413 Coeff Of variation 6.23677% 0.343746% 1.01333% 2.10528% 0.0% 1.13606% 2.98276% 13.075% ANOVA Table for Dam amin sinh by Nong Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 3.86177 0.643628 Within groups 0.0882967 14 0.0063069 Total (Corr.) 3.95006 20 Multiple Range Tests for Dam amin sinh by Nong Method: 95.0 percent LSD Nong Count Mean 0u 2.61733 5u 3.208 30u 3.30333 25u 3.332 20u 3.42667 15u 3.87433 10u 4.031 Homogeneous Groups X X XX XX X X X Contrast Sig Difference +/- Limits 0u – 10u * -1.41367 0.139075 0u – 15u * -1.257 0.139075 0u – 20u * -0.809333 0.139075 0u – 25u * -0.714667 0.139075 0u – 30u * -0.686 0.139075 0u – 5u * -0.590667 0.139075 10u – 15u * 0.156667 0.139075 10u – 20u * 0.604333 0.139075 10u – 25u * 0.699 0.139075 10u – 30u * 0.727667 0.139075 10u – 5u * 0.823 0.139075 15u – 20u * 0.447667 0.139075 15u – 25u * 0.542333 0.139075 15u – 30u * 0.571 0.139075 15u – 5u * 0.666333 0.139075 20u – 25u 0.0946667 0.139075 20u – 30u 0.123333 0.139075 20u – 5u * 0.218667 0.139075 25u – 30u 0.0286667 0.139075 25u – 5u 0.124 0.139075 30u – 5u 0.0953333 0.139075 * denotes a statistically significant difference F-Ratio 102.05 Minimum 2.437 4.015 3.829 3.365 3.332 3.26 3.102 2.437 Maximum 2.755 4.039 3.897 3.506 3.332 3.325 3.288 4.039 P-Value 0.0000 Range 0.318 0.024 0.068 0.141 0.0 0.065 0.186 1.602 Stnd Skewness -0.774881 -1.22474 -1.22474 0.732505 1.73205 -1.22474 -0.80077 -0.602029 Summary Statistics for Ham luong DM chitin thu hoi Nong Count Average Standard deviation Coeff Of variation 0u 7.6838 0.0460727 0.599608% 10u 6.1584 0.0553531 0.898823% 15u 6.2562 0.0406708 0.650087% 20u 6.44417 0.0265014 0.411246% 25u 6.64477 0.142741 2.14817% 30u 7.0495 0.164515 2.33372% 5u 7.46953 0.0942693 1.26205% Total 21 6.8152 0.573238 8.41117% ANOVA Table for Ham luong DM chitin thu hoi by Nong Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 6.44429 1.07405 117.71 Within groups 0.12774 14 0.00912428 Total (Corr.) 6.57203 20 Multiple Range Tests for Ham luong DM chitin thu hoi by Nong Method: 95.0 percent LSD Nong Count Mean 10u 6.1584 15u 6.2562 20u 6.44417 25u 6.64477 30u 7.0495 5u 7.46953 0u 7.6838 Homogeneous Groups X X X X X X X Contrast Sig Difference +/- Limits 0u – 10u * 1.5254 0.167278 0u – 15u * 1.4276 0.167278 0u – 20u * 1.23963 0.167278 0u – 25u * 1.03903 0.167278 0u – 30u * 0.6343 0.167278 0u – 5u * 0.214267 0.167278 10u – 15u -0.0978 0.167278 10u – 20u * -0.285767 0.167278 10u – 25u * -0.486367 0.167278 10u – 30u * -0.8911 0.167278 10u – 5u * -1.31113 0.167278 15u – 20u * -0.187967 0.167278 15u – 25u * -0.388567 0.167278 15u – 30u * -0.7933 0.167278 15u – 5u * -1.21333 0.167278 20u – 25u * -0.2006 0.167278 20u – 30u * -0.605333 0.167278 20u – 5u * -1.02537 0.167278 25u – 30u * -0.404733 0.167278 25u – 5u * -0.824767 0.167278 30u – 5u * -0.420033 0.167278 * denotes a statistically significant difference Minimum 7.6313 6.1012 6.2148 6.414 6.5001 6.9063 7.4114 6.1012 Maximum 7.7175 6.2117 6.2961 6.4637 6.7855 7.2292 7.5783 7.7175 P-Value 0.0000 Range 0.0862 0.1105 0.0813 0.0497 0.2854 0.3229 0.1669 1.6163 Stnd Skewness -1.08222 -0.223079 -0.117197 -1.07119 -0.0876155 0.671216 1.21603 0.741168 Kết thống kê ảnh hƣởng nhiệt độ đến trình thủy phân protein đầu tôm thẻ Summary Statistics for Dam ammoniac Nhiet Count Average Standard deviation 30 0.364 0.0242487 35 0.382667 0.0161658 40 0.326667 0.0213854 45 0.298667 0.0080829 Coeff Of variation 6.66173% 4.22451% 6.54654% 2.70633% Minimum Maximum Range Stnd Skewness 0.336 0.364 0.308 0.294 0.378 0.392 0.35 0.308 0.042 0.028 0.042 0.014 -1.22474 -1.22474 0.6613 1.22474 phong Total 2.43951% 9.90532% 0.322 0.294 0.336 0.392 0.014 0.098 -1.22474 0.345369 15 0.331333 0.0080829 0.340667 0.0337441 ANOVA Table for Dam ammoniac by Nhiet Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.0130667 0.00326667 Within groups 0.00287467 10 0.000287467 Total (Corr.) 0.0159413 14 F-Ratio 11.36 P-Value 0.0010 Multiple Range Tests for Dam ammoniac by Nhiet Method: 95.0 percent LSD Nhiet Count Mean 45 0.298667 40 0.326667 phong 0.331333 30 0.364 35 0.382667 Homogeneous Groups X XX X X X Contrast Sig Difference +/- Limits 30 – 35 -0.0186667 0.0308455 30 – 40 * 0.0373333 0.0308455 30 – 45 * 0.0653333 0.0308455 30 – phong * 0.0326667 0.0308455 35 – 40 * 0.056 0.0308455 35 – 45 * 0.084 0.0308455 35 – phong * 0.0513333 0.0308455 40 – 45 0.028 0.0308455 40 – phong -0.00466667 0.0308455 45 – phong * -0.0326667 0.0308455 * denotes a statistically significant difference Summary Statistics for Dam OPA Nhiet Count Average Standard deviation 30 3.755 0.234681 Coeff Of variation 6.24982% Minimum Maximum Range Stnd Skewness 3.485 3.91 0.425 -1.18484 35 40 45 3 3.804 0.0228692 4.30533 0.170318 4.47233 0.216493 0.601188% 3.95598% 4.84072% 3.787 4.207 4.235 3.83 4.502 4.659 0.043 0.295 0.424 1.0583 1.22474 -0.703902 phong Total 15 3.85433 0.0964175 4.0382 0.334623 2.50153% 8.28644% 3.743 3.485 3.91 4.659 0.167 1.174 -1.22474 0.781994 ANOVA Table for Dam OPA by Nhiet Source Sum of Squares Df Between groups 1.28607 Within groups 0.281544 10 Total (Corr.) 1.56762 14 Mean Square 0.321518 0.0281544 F-Ratio 11.42 P-Value 0.0010 Multiple Range Tests for Dam OPA by Nhiet Method: 95.0 percent LSD Nhiet Count Mean 30 3.755 35 3.804 phong 3.85433 40 4.30533 45 4.47233 Homogeneous Groups X X X X X Contrast Sig Difference +/- Limits 30 – 35 -0.049 0.305261 30 – 40 * -0.550333 0.305261 30 – 45 * -0.717333 0.305261 30 – phong -0.0993333 0.305261 35 – 40 * -0.501333 0.305261 35 – 45 * -0.668333 0.305261 35 – phong -0.0503333 0.305261 40 – 45 -0.167 0.305261 40 – phong * 0.451 0.305261 45 – phong * 0.618 0.305261 * denotes a statistically significant difference Summary Statistics for Dam amin sinh Nhiet Count Average Standard deviation Coeff Of variation Minimum Maximum Range Stnd Skewness 30 35 40 3 3.391 3.42133 3.96867 0.21053 0.0230723 0.195147 6.2085% 0.674367% 4.91719% 3.149 3.395 3.855 3.532 3.438 4.194 0.383 0.043 0.339 -1.17519 -1.09914 1.2246 45 phong Total 3 15 4.17367 3.523 3.69553 0.224181 0.0883346 0.357043 5.37133% 2.50737% 9.66148% 3.927 3.421 3.149 4.365 3.574 4.365 0.438 0.153 1.216 -0.737541 -1.22474 0.954284 ANOVA Table for Dam amin sinh by Nhiet Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 1.50272 0.37568 Within groups 0.281996 10 0.0281996 Total (Corr.) 1.78472 14 Multiple Range Tests for Dam amin sinh by Nhiet Method: 95.0 percent LSD Nhiet Count Mean 30 3.391 35 3.42133 phong 3.523 40 3.96867 45 4.17367 Homogeneous Groups X X X X X Contrast Sig Difference +/- Limits 30 – 35 -0.0303333 0.305506 30 – 40 * -0.577667 0.305506 30 – 45 * -0.782667 0.305506 30 – phong -0.132 0.305506 35 – 40 * -0.547333 0.305506 35 – 45 * -0.752333 0.305506 35 – phong -0.101667 0.305506 40 – 45 -0.205 0.305506 40 – phong * 0.445667 0.305506 45 – phong * 0.650667 0.305506 * denotes a statistically significant difference F-Ratio 13.32 P-Value 0.0005 Summary Statistics for Ham luong DM chitin thu hoi Nhiet Count Average Standard deviation Coeff Of variation Minimum Maximum Range Stnd Skewness 30 35 40 3 6.81437 6.97227 6.18667 0.011443 0.175871 0.0812742 0.167925% 2.52244% 1.3137% 6.8016 6.7701 6.1233 6.8237 7.09 6.2783 0.0221 0.3199 0.155 -0.868766 -1.17553 0.972809 45 phong Total 3 15 5.66003 6.62307 6.45128 0.374895 0.138534 0.519711 6.62355% 2.09169% 8.05594% 5.3475 6.5198 5.3475 6.0757 6.7805 7.09 0.7282 0.2607 1.7425 0.809114 1.05395 -1.37612 ANOVA Table for Ham luong DM chitin thu hoi by Nhiet Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 3.38658 0.846646 21.44 Within groups 0.39481 10 0.039481 Total (Corr.) 3.78139 14 Multiple Range Tests for Ham luong DM chitin thu hoi by Nhiet Method: 95.0 percent LSD Nhiet Count Mean 45 5.66003 40 6.18667 phong 6.62307 30 6.81437 35 6.97227 Homogeneous Groups X X X X X Contrast Sig Difference +/- Limits 30 – 35 -0.1579 0.361486 30 – 40 * 0.6277 0.361486 30 – 45 * 1.15433 0.361486 30 – phong 0.1913 0.361486 35 – 40 * 0.7856 0.361486 35 – 45 * 1.31223 0.361486 35 – phong 0.3492 0.361486 40 – 45 * 0.526633 0.361486 40 – phong * -0.4364 0.361486 45 – phong * -0.963033 0.361486 * denotes a statistically significant difference P-Value 0.0001 Kết thống kê ảnh hƣởng thời gian đến trình thủy phân protein đầu tôm thẻ Summary Statistics for Dam ammoniac Thoi gian Count Average Standard deviation Coeff Of variation Minimum Maximum Range Stnd Skewness 12 16 Total 0.28 0.532 0.784 0.364 0.518 0.784 0.028 0.028 0.14 0.07 0.028 0.532 3 3 15 0.270667 0.518 0.690667 0.331333 0.499333 0.462 0.0161658 0.014 0.080829 0.0352326 0.0161658 0.157772 5.97259% 2.7027% 11.703% 10.6336% 3.23748% 34.1498% ANOVA Table for Dam ammoniac by Thoi gian Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.331501 0.0828753 Within groups 0.0169867 10 0.00169867 Total (Corr.) 0.348488 14 0.252 0.504 0.644 0.294 0.49 0.252 F-Ratio 48.79 -1.22474 0.0 1.22474 -0.41407 1.22474 0.572528 P-Value 0.0000 Multiple Range Tests for Dam ammoniac by Thoi gian Method: 95.0 percent LSD Thoi gian Count Mean 0.270667 0.331333 0.499333 12 0.518 16 0.690667 Homogeneous Groups X X X X X Contrast Sig Difference +/- Limits – 12 * -0.247333 0.0749811 – 16 * -0.42 0.0749811 0–4 -0.0606667 0.0749811 0–8 * -0.228667 0.0749811 12 – 16 * -0.172667 0.0749811 12 – * 0.186667 0.0749811 12 – 0.0186667 0.0749811 16 – * 0.359333 0.0749811 16 – * 0.191333 0.0749811 4–8 * -0.168 0.0749811 * denotes a statistically significant difference Summary Statistics for Dam OPA Thoi gian Count Average Standard deviation 4.612 0.175758 12 3.82833 0.302022 16 3.72833 0.161593 4.45067 0.149179 4.03167 0.256861 Total 15 4.1302 0.402171 Coeff Of variation 3.81089% 7.88913% 4.33419% 3.35183% 6.37108% 9.73733% ANOVA Table for Dam OPA by Thoi gian Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 1.79148 0.447869 Within groups 0.472905 10 0.0472905 Total (Corr.) 2.26438 14 F-Ratio 9.47 Minimum 4.413 3.485 3.542 4.289 3.743 3.485 Maximum 4.746 4.053 3.83 4.583 4.235 4.746 P-Value 0.0020 Range 0.333 0.568 0.288 0.294 0.492 1.261 Stnd Skewness -1.01583 -1.05722 -1.20951 -0.601488 -0.940436 -0.0707297 Multiple Range Tests for Dam OPA by Thoi gian Method: 95.0 percent LSD Thoi gian Count Mean 16 3.72833 12 3.82833 4.03167 4.45067 4.612 Homogeneous Groups X X X X X Contrast Sig Difference +/- Limits – 12 * 0.783667 0.395626 – 16 * 0.883667 0.395626 0–4 0.161333 0.395626 0–8 * 0.580333 0.395626 12 – 16 0.1 0.395626 12 – * -0.622333 0.395626 12 – -0.203333 0.395626 16 – * -0.722333 0.395626 16 – -0.303333 0.395626 4–8 * 0.419 0.395626 * denotes a statistically significant difference Summary Statistics for Dam amin sinh Thoi gian Count Average Standard deviation 4.34133 0.159939 12 3.31033 0.299882 16 3.03767 0.144195 4.11933 0.183249 3.53233 0.272619 Total 15 3.6682 0.540542 Coeff Of variation 3.68409% 9.05897% 4.74692% 4.44852% 7.71783% 14.7359% ANOVA Table for Dam amin sinh by Thoi gian Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 3.60219 0.900548 Within groups 0.488407 10 0.0488407 Total (Corr.) 4.0906 14 Multiple Range Tests for Dam amin sinh by Thoi gian Method: 95.0 percent LSD Thoi gian Count Mean 16 3.03767 12 3.31033 3.53233 4.11933 4.34133 Homogeneous Groups X XX X X X Contrast Sig Difference +/- Limits – 12 * 1.031 0.402058 – 16 * 1.30367 0.402058 0–4 0.222 0.402058 0–8 * 0.809 0.402058 12 – 16 0.272667 0.402058 12 – * -0.809 0.402058 12 – -0.222 0.402058 16 – * -1.08167 0.402058 16 – * -0.494667 0.402058 4–8 * 0.587 0.402058 * denotes a statistically significant difference F-Ratio 18.44 Minimum 4.161 2.967 2.898 3.925 3.225 2.898 Maximum 4.466 3.521 3.186 4.289 3.745 4.466 P-Value 0.0001 Range 0.305 0.554 0.288 0.364 0.52 1.568 Stnd Skewness -0.973329 -1.13219 0.190558 -0.420556 -0.971703 0.0843626 Summary Statistics for Ham luong DM chitin thu hoi Thoi gian Count Average Standard deviation Coeff Of variation 7.95443 0.521583 6.55714% 12 5.4221 0.0994297 1.83379% 16 5.24667 0.202723 3.86384% 5.80257 0.206582 3.56018% 5.47237 0.215097 3.93061% Total 15 5.97963 1.06683 17.8411% ANOVA Table for Ham luong DM chitin thu hoi by Thoi gian Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 15.1098 3.77744 45.85 Within groups 0.82395 10 0.082395 Total (Corr.) 15.9337 14 Multiple Range Tests for Ham luong DM chitin thu hoi by Thoi gian Method: 95.0 percent LSD Thoi gian Count Mean 16 5.24667 12 5.4221 5.47237 5.80257 7.95443 Homogeneous Groups X XX XX X X Contrast Sig Difference +/- Limits – 12 * 2.53233 0.522213 – 16 * 2.70777 0.522213 0–4 * 2.15187 0.522213 0–8 * 2.48207 0.522213 12 – 16 0.175433 0.522213 12 – -0.380467 0.522213 12 – -0.0502667 0.522213 16 – * -0.5559 0.522213 16 – -0.2257 0.522213 4–8 0.3302 0.522213 i* denotes a statistically significant difference Minimum 7.3522 5.3338 5.0286 5.568 5.2272 5.0286 Maximum 8.2615 5.5298 5.4294 5.9574 5.6294 8.2615 P-Value 0.0000 Range 0.9093 0.196 0.4008 0.3894 0.4022 3.2329 Stnd Skewness -1.22403 0.59721 -0.537752 -1.04518 -1.08489 2.53636 Kết thống kê ảnh hƣởng pH đến trình thủy phân protein đầu tôm Summary Statistics for Dam ammoniac pH Count Average Standard deviation 10 0.317333 0.0161658 0.373333 0.0080829 0.345333 0.0213854 0.326667 0.0080829 0.312667 0.0080829 0.256667 0.0291433 0.28 0.028 Total 21 0.316 0.0402293 Coeff of variation 5.09427% 2.16506% 6.19267% 2.47436% 2.58515% 11.3545% 10.0% 12.7308% ANOVA Table for Dam ammoniac by pH Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.027272 0.00454533 Within groups 0.005096 14 0.000364 Total (Corr.) 0.032368 20 Multiple Range Tests for Dam ammoniac by pH Method: 95.0 percent LSD pH Count Mean 0.256667 0.28 0.312667 10 0.317333 0.326667 0.345333 0.373333 Homogeneous Groups X XX XX X X XX X Contrast Sig Difference +/- Limits 10 - * -0.056 0.033411 10 - -0.028 0.033411 10 - -0.00933333 0.033411 10 - 0.00466667 0.033411 10 - * 0.0606667 0.033411 10 - * 0.0373333 0.033411 4-5 0.028 0.033411 4-6 * 0.0466667 0.033411 4-7 * 0.0606667 0.033411 4-8 * 0.116667 0.033411 4-9 * 0.0933333 0.033411 5-6 0.0186667 0.033411 5-7 0.0326667 0.033411 5-8 * 0.0886667 0.033411 5-9 * 0.0653333 0.033411 6-7 0.014 0.033411 6-8 * 0.07 0.033411 6-9 * 0.0466667 0.033411 7-8 * 0.056 0.033411 7-9 0.0326667 0.033411 8-9 -0.0233333 0.033411 * denotes a statistically significant difference F-Ratio 12.49 Minimum 0.308 0.364 0.322 0.322 0.308 0.224 0.252 0.224 P-Value 0.0001 Maximum 0.336 0.378 0.364 0.336 0.322 0.28 0.308 0.378 Range 0.028 0.014 0.042 0.014 0.014 0.056 0.056 0.154 Stnd skewness 1.22474 -1.22474 -0.6613 1.22474 1.22474 -0.914531 0.0 -0.806203 Summary Statistics for Dam OPA pH Count Average Standard deviation 10 4.412 0.0465081 3.583 0.198879 4.266 0.128129 4.41367 0.141825 4.497 0.121112 4.67967 0.10053 4.593 0.101651 Total 21 4.34919 0.360863 ANOVA Table for Dam OPA by pH Source Sum of Squares Between groups 2.37773 Within groups 0.226709 Total (Corr.) 2.60444 Df 14 20 Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness Stnd kurtosis 1.05413% 5.55064% 3.00349% 3.21331% 2.69316% 2.14824% 2.21318% 8.29724% 4.458 3.742 4.413 4.543 4.603 4.746 4.677 4.746 Mean Square 0.396288 0.0161935 Multiple Range Tests for Dam OPA by pH Method: 95.0 percent LSD pH Count Mean Homogeneous Groups X 3.583 X 4.266 XX 10 4.412 XX 4.41367 XX 4.497 XX 4.593 X 4.67967 Contrast 10 - 10 - 10 - 10 - 10 - 10 - 4-5 4-6 4-7 4-8 4-9 5-6 5-7 5-8 5-9 6-7 6-8 6-9 7-8 7-9 8-9 Sig * * * * * * * * * * * Difference 0.829 0.146 -0.00166667 -0.085 -0.267667 -0.181 -0.683 -0.830667 -0.914 -1.09667 -1.01 -0.147667 -0.231 -0.413667 -0.327 -0.0833333 -0.266 -0.179333 -0.182667 -0.096 0.0866667 +/- Limits 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 0.222849 * denotes a statistically significant difference 4.365 3.36 4.178 4.262 4.365 4.564 4.48 3.36 F-Ratio 24.47 P-Value 0.0000 0.093 0.382 0.235 0.281 0.238 0.182 0.197 1.386 -0.0683862 -0.917932 1.15454 -0.488645 -0.65162 -1.18546 -0.833899 -2.92672 1.96992 Summary Statistics for Dam amin sinh pH Count Average Standard deviation 10 4.09467 0.0337095 3.20967 0.19104 3.91067 0.133508 4.08367 0.144901 4.18433 0.128769 4.423 0.0718958 4.313 0.122854 Total 21 4.03129 0.392707 Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness Stnd kurtosis 0.823255% 5.95202% 3.41394% 3.54831% 3.0774% 1.6255% 2.84845% 9.74148% 4.122 3.364 4.063 4.211 4.295 4.466 4.397 4.466 ANOVA Table for Dam amin sinh by pH Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 2.85778 0.476297 Within groups 0.226593 14 0.0161852 Total (Corr.) 3.08438 20 Multiple Range Tests for Dam amin sinh by pH Method: 95.0 percent LSD pH Count Mean Homogeneous Groups X 3.20967 X 3.91067 XX 4.08367 XXX 10 4.09467 XX 4.18433 XX 4.313 X 4.423 Contrast Sig Difference +/- Limits 10 - * 0.885 0.222792 10 - 0.184 0.222792 10 - 0.011 0.222792 10 - -0.0896667 0.222792 10 - * -0.328333 0.222792 10 - -0.218333 0.222792 4-5 * -0.701 0.222792 4-6 * -0.874 0.222792 4-7 * -0.974667 0.222792 4-8 * -1.21333 0.222792 4-9 * -1.10333 0.222792 5-6 -0.173 0.222792 5-7 * -0.273667 0.222792 5-8 * -0.512333 0.222792 5-9 * -0.402333 0.222792 6-7 -0.100667 0.222792 6-8 * -0.339333 0.222792 6-9 * -0.229333 0.222792 7-8 * -0.238667 0.222792 7-9 -0.128667 0.222792 8-9 0.11 0.222792 * denotes a statistically significant difference 4.057 2.996 3.814 3.926 4.043 4.34 4.172 2.996 F-Ratio 29.43 P-Value 0.0000 0.065 0.368 0.249 0.285 0.252 0.126 0.225 1.47 -0.883749 -0.892933 1.09609 -0.636919 -0.714819 -1.22235 -1.15853 -2.64929 1.51598 Summary Statistics for Ham luong DM chitin thu hoi pH Count Average Standard deviation Coeff of variation 10 5.8536 0.073293 1.2521% 6.966 0.104036 1.49348% 6.24183 0.187813 3.00894% 5.9494 0.186005 3.12646% 5.6812 0.0824429 1.45115% 5.36747 0.0435792 0.811913% 5.51493 0.106047 1.9229% Total 21 5.9392 0.519248 8.74271% ANOVA Table for Ham luong DM chitin thu hoi by pH Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 5.18035 0.863391 Within groups 0.212018 14 0.0151441 Total (Corr.) 5.39236 20 F-Ratio 57.01 Multiple Range Tests for Ham luong DM chitin thu hoi by pH Method: 95.0 percent LSD pH Count Mean Homogeneous Groups X 5.36747 XX 5.51493 XX 5.6812 XX 10 5.8536 X 5.9494 X 6.24183 X 6.966 Contrast Sig Difference +/- Limits 10 - * -1.1124 0.215507 10 - * -0.388233 0.215507 10 - -0.0958 0.215507 10 - 0.1724 0.215507 10 - * 0.486133 0.215507 10 - * 0.338667 0.215507 4-5 * 0.724167 0.215507 4-6 * 1.0166 0.215507 4-7 * 1.2848 0.215507 4-8 * 1.59853 0.215507 4-9 * 1.45107 0.215507 5-6 * 0.292433 0.215507 5-7 * 0.560633 0.215507 5-8 * 0.874367 0.215507 5-9 * 0.7269 0.215507 6-7 * 0.2682 0.215507 6-8 * 0.581933 0.215507 6-9 * 0.434467 0.215507 7-8 * 0.313733 0.215507 7-9 0.166267 0.215507 8-9 -0.147467 0.215507 * denotes a statistically significant difference Minimum 5.7789 6.8485 6.0587 5.8072 5.6284 5.3177 5.3931 5.3177 Maximum 5.9254 7.0464 6.434 6.1599 5.7762 5.3988 5.5865 7.0464 P-Value 0.0000 Range 0.1465 0.1979 0.3753 0.3527 0.1478 0.0811 0.1934 1.7287 Stnd skewness -0.125705 -0.990419 0.152691 1.01087 1.20201 -1.10512 -1.16939 1.9033 LÝ LỊCH KHOA HỌC I LÝ LỊCH TRÍCH NGANG Họ tên sinh viên: Nguyễn Việt Hưng Ngày, tháng năm sinh: 15/02/1991 Nơi sinh: Cái nước - Cà Mau Địa nay: Khóm 2, phường 8, Thành phố Cà Mau, Tỉnh Cà Mau Điện Thoại: 0982117817 E - mail: viethung113719@gmail.com II QÚA TRÌNH ĐÀO TẠO Đại học Hệ đào tạo: Chính Quy Ngành đào tạo: Vi Sinh Vật Học Nơi ĐàoTạo: Trường Đại Học Cần Thơ Trình Độ Ngoại Ngữ Chứng Anh văn: A (Trung tâm ngoại ngữ - Đại học Cần Thơ) [...]... Tn dng ngun ph phm bromelain di do t v khúm sn xut chitin sch t cht thi u tụm th Chuyờn ngnh Vi Sinh Vt 1 Vin NC&PT Cụng ngh Sinh hc Lun vn tt nghip i hc Khúa 37 - 2015 Trng HCT CHNG 2: LC KHO TI LIU 2.1 Tng quan chung v tụm th chõn trng (Litopenaeus vannamei) 2.1.1 Gii thiu v tụm th chõn trng (Litopenaeus vannamei) Tụm th chõn trng (Litopenaeus vannamei, tờn gi trc õy Penaeus vannamei) l loi bn a... HCT 2.2 Chitin 2.2.1 Gii thiu v chitin Theo Domard (1996), vo nm 1811, chitin (C8H13O5N)n c phõn lp u tiờn t nm bi mt nh húa hc ngi phỏp Henri Braconnot n nm 1823, chỳng li c phỏt hin trong cỏc loi cụn trựng v c t tờn l chitine bi mt nh khoa hc ngi phỏp khỏc cú tờn l Auguste Odier Mc dự c phỏt hin sm, nhng khong 20 nm nay chitin mi c nghiờn cu chuyờn sõu iu ny c gii thớch l do dng tinh khit ca chitin. .. mó s ca bromelain thõn (EC 3.4.22.32), ananain (EC 3.4.22.31) v bromelain qu (EC 3.4.22.33) Tng t, bromelain cng hin din trong v, lừi, ngn v lỏ khúm Trong ú, ngn khúm cú hm lng protein v hot tớnh phõn gii protein cao nht (Ketnawa et al., 2012) 2.4.2 Tớnh cht ca bromelain Bromelain thõn l mt glycoprotein, mi phõn t cú glycan gm 3 mannose, 2 glucosamine, 1 xylose v 1 fructose (Nguyn c Lng, 2004) Bromelain. .. - 2015 Trng HCT 2.4 Tng quan enzyme bromelain trong cõy khúm 2.4.1 Gii thiu v bromelain Bromelain l mt nhúm cỏc protease thiol (tõm hot ng cú gc cystein mang nhúm sulfhydryl - SH gn vo nguyờn t cacbon) cú trong thc vt h Bromeliaceae (Hebbar et al., 2008) v cú ngun gc ch yu t thõn v qu khúm (Ananas comosus) Trong thõn khúm gm bromelain thõn, ananain v comosain cũn bromelain qu cú trong nc ộp ca qu khúm... 2010) Tuy nhiờn, õy li l ngun enzyme bromelain di do cú th c phc hi to ra mt sn phm cú giỏ tr cao hn Do ú, vic kt hp gia hai ngun ph ph phm t u tụm th v dch chit bromelain t v khúm sn xut chitin sch phc v nhu cu cụng nghip, sc khe cng ng, vv ng thi, gúp phn gim thiu ụ nhim mụi trng, chi phớ sn xut v nõng cao cht lng sn phm Vỡ th, ti ng dng bromelain t v khúm chit xut chitin t v u tụm th Litopenaeus... tớnh ca bromelain Bromelain thõn s dng c cỏc c cht khỏc nhau chng hn nh gelatin, casein, azocasein v azoalbumin, hemoglobin, sodium caseinate, vv (Arshad et al., 2014) Trong ú, hai c cht t nhiờn c s dng nhiu nht l casein v hemoglobin (Nguyn c Lng, 2004) Tuy nhiờn, i vi mi c cht riờng bit thỡ bromelain thớch hp vi pH v nhit ti u khỏc nhau Bng 3 Nhit v pH ti u ca bromelain trờn cỏc c cht khỏc nhau Bromelain. .. nhng sn phm sinh ra khụng tng tuyn tớnh theo nng enzyme Hỡnh 6: nh hng ca nng bromelain v n hm lng chitin thu hi *Ghi chỳ: Chitin thu hi :CV = 1,4(%) Cỏc giỏ tr cú cựng ký t th hin s khỏc bit khụng ý ngha thng kờ mc 5% Theo th (hỡnh 7) cho thy, sau quỏ trỡnh thy phõn protein u tụm bng enzyme bromelain thỡ hm lng vt cht khụ chitin thu hi gim dn nng t 0 n 10 U.mg - 1 (7,683 - 6,158%, bng 17, ph lc... n hot tớnh ca bromelain Bromelain hot ng tt di s hin din ca Ethylene diamine tetraacetic acid (EDTA), Ethylene glycol tetraacetic acid (EGTA) (Ahemd, 2004), Cysteine, NaCN, H2S (Sree et al., 2012) v CaCl2 (Mohapatra et al., 2013) Cng theo Ketnawa et al (2012) cho rng khi chit xut bromelain t v khúm trong dung dch cha 100mM m phosphate, 15 mM cysteine v 2 mM EDTA pH 7,0 thỡ hot ng ca bromelain l cao... bng phng phỏp Kjeldahl (ph lc) - Kho sỏt hm lng protein ca Bromelain v bng phng phỏp Bradford (ph lc) - Kho sỏt hot tớnh Bromelain v bng phng phỏp Kunitz ci tin (ph lc) 3.2.3 Kho sỏt mt s yu t nh hng n quỏ trỡnh thy phõn protein t u tụm 3.2.3.1 Thớ nghim 1: nh hng ca nng bromelain v khúm n quỏ trỡnh thy phõn protein u tụm Mc ớch : xỏc nh nng bromelain thớch hp cho quỏ trỡnh thy phõn protein u tụm B... Sinh hc Lun vn tt nghip i hc Khúa 37 - 2015 Trng HCT enzyme thng mi bromelain ca Sigma Aldrich USA (5 - 15 U.mg - 1) (on Cụng Tht, 2013) Nh vy, cú th s dng dch chit v khúm tin hnh cỏc thớ nghim thy phõn protein u tụm chit xut chitin sch 4.3 nh hng ca nng bromelain v khúm n quỏ trỡnh thy phõn protein u tụm Hỡnh 5: nh hng ca nng bromelain v n hm lng m trong dch thy phõn *Ghi chỳ: m ammoniac: CV =