1 Báo cáo khoa học Viện Chăn Nuôi 2006 Xây dựng quy trình phòng bệnh Newcastle Gumboro vaccin cho gà Sao Nguyễn Thị Nga, Phùng Đức Tiến, Cao Đình Tuấn, Nguyễn Hồng Dung Dơng Thị Oanh, Phạm Minh Hờng, Nguyễn Thị Nhung Tác giả liên hệ: Nguyễn Thị nga, TT nghiên cứu gia cầm Thuỵ phơng-Viện chăn nuôi Tel 7570812; Email: ngagiacam@yahoo.com Tóm tắt Dựa vào biến động hàm lợng kháng thể chủ động thụ động để đa lịch sử dụng vaccin cho gà Sao: Đối với gà sinh sản nhỏ vaccin ND-IB vào lúc 10 25 ngày tuổi, tiêm ND-Imulsion vào lúc 45 170 ngày tuổi Đối với gà nuôi thịt nhỏ vaccin ND-IB vào lúc 10 25 ngày tuổi, tiêm ND-Imulsion vào lúc 45 ngày tuổi Gà Sao đáp ứng miễn dịch với bệnh Gumboro, túi Fabricius phát triển bình thờng, công cờng độc gà biểu triệu chứng, bệnh tích, âm tính thử với kháng nguyên kháng thể chuẩn qua thực tế chăn nuôi không cần phải sử dụng vaccin phòng bệnh Gumboro cho giống gà Đặt vấn đề Gà Sao (Guineafowl) đợc nhập Trung tâm nghiên cứu gia cầm Thuỵ phơng từ tháng năm 2002, loại gà đợc hoá từ hoang d có chất lợng thịt thơm ngon Theo tài liệu số nớc nh Nemoci drubeze - Cộng hoà Sec, năm1997, Diseases of birds Nhật, 2000 Manual of Standards Diagnostic Test and Vaccines, 2000 A gyongytyuk Hungrari, 2004 Guineafowl hoàn toàn kháng đợc bệnh Gumboro, Marek, Leuco nhng bệnh Newcastle mẫn cảm Bệnh Newcastle Bệnh Gumboro virus gây nên Bệnh có mặt khắp nơi giới, gây thiệt hại lớn cho chăn nuôi gia cầm Để phòng chống bệnh công tác vệ sinh an toàn sinh học phòng bệnh vaccin biện pháp tích cực hiệu Tuy nhiên, câu hỏi đợc đặt liệu gà Sao nuôi Trung tâm có phải giống gà không mắc bệnh hay không? Với điều kiện Việt nam sức đề kháng bệnh nh nào? để trả lời câu hỏi tiến hành thực việc thử nghiệm sử dụng vaccin Newcastle Gumboro cho gà Sao nhằm đa đợc quy trình phòng bệnh Newcastle Gumboro vaccin cho gà Sao, góp phần hoàn thiện quy trình thú y cho gà Sao Vật liệu phơng pháp nghiên cứu Đối tợng Gà Sao từ ngày tuổi đến 10 tháng tuổi Gà Sao nuôi thịt từ ngày tuổi đến tuần tuổi Địa điểm nghiên cứu Trung tâm nghiên cứu gia cầm Thuỵ phơng Phần Nghiên cứu Dinh dỡng Thức ăn Vật nuôi Trung tâm chẩn đoán thú y Trung ơng Vật liệu nghiên cứu Vaccin ND-IB vaccin nhợc độc sống đông khô Vaccin: ND - Imulsion vaccin nhũ dầu Vaccin Gumboro B vaccin nhợc độc đông khô Các loại vaccin h ng Medion Indonesia sản xuất Virus Newcastle cờng độc VN91 đợc sử dụng để công cờng độc trung tâm chẩn đoán thú y Trung ơng Phơng pháp - Sử dụng phơng pháp ngăn trở ngng kết hồng cầu Haemagglutination Inhibition (HI) để xác định hàm lợng kháng thể thụ động chủ động Newcastle - Sử dụng phản ứng kết tủa khuyếch tán thạch(AGP) để xác định có mặt kháng thể chống lại bệnh Gumboro - Số lợng gà Sao thí nghiệm: thí nghiệm gồm 200 thí nghiệm + 20 nuôi đối chứng Bố trí thí nghiệm Theo dõi biến động hàm lợng kháng thể thụ động chủ động chống bệnh Newcastle - Theo dõi biến động hàm lợng kháng thể thụ động gà Sao Gà từ đàn bố mẹ đợc tiêm vaccin Newcastle, lấy máu thời điểm: 1, 3, 5, 7, ngày tuổi, số lợng mẫu: 10 mẫu/lần Khi hàm lợng kháng thể giảm xuống dới 3log2 sử dụng vaccin - Theo dõi diễn biến hàm lợng kháng thể chủ động Newcastle sau sử dụng vaccin Lấy mẫu thời điểm: 7, 14, 21, ngày sau sử dụng ND-IB sau sử dụng vaccin nhũ dầu 14, 21, 35 sau tháng lấy mẫu kiểm tra lần, số lợng mẫu: 10% tổng đàn Khi hàm lợng kháng thể giảm dới 3log2 sử dụng vaccin nhắc lại tiêm NDImultion, theo hớng dẫn Mary Young, Robyn Alders, Sally Grimes, Peter Spradbrow, Paula Dias, Amílcar da Sliva and Quintino Lobo, 2002 Theo dõi biến động hàm lợng kháng thể thụ động chủ động chống bệnh Gumboro - Theo dõi diễn biến hàm lợng kháng thể thụ động Lấy máu lúc gà đợc 1, 3, ngày tuổi, chắt huyết để làm phản ứng kết tủa khuyếch tán thạch (AGP) - Theo dõi diễn biến hàm lợng sau sử dụng vaccin Gumboro Sau sử dụng vaccin đợc7, 14, 21 ngày lấy máu kiểm tra AGP Báo cáo khoa học Viện Chăn Nuôi 2006 Công cờng độc - Công cờng độc sau tiêm ND-Imulsion lần đợc 30 ngày tuổi: số lợng công cờng độc 10 sử dụng vaccin 10 không sử dụng vaccin Newcastle Giống để sử dụng công cờng độc: Newcastle VN91 Kiểm tra hàm lợng kháng thể Newcastle lô đối chứng trớc công cờng độc, đảm bảo kháng thể Newcastle - Công cờng độc gà đợc 42 ngày tuổi, số lợng công cờng độc 10 sử dụng vaccin 10 không sử dụng vaccin - Trớc công cờng độc kiểm tra AGP lô sử dụng vaccin lô không sử dụng vaccin Giống sử dụng để công cờng độc là: Gumboro 52/70 Trung tâm chẩn đoán thú y trung ơng - Dựa vào biến đổi hàm lợng kháng thể để xây dựng quy trình phòng bệnh vaccin Kết thảo luận Đối với virus gây bệnh Newcastle Gumboro, vào thể gà kích thích sinh đáp ứng miễn dịch trung gian tế bào miễn dịch dịch thể( Timms and D.J.Alexander, 1997 Vladimir Jurajda,2000), nhiên tác giả đ đáp ứng miễn dịch dịch thể chủ yếu Biến động hàm lợng kháng thể thụ động chủ động Newcastle gà Sao Biến động hàm lợng kháng thể thụ động Newcastle gà Sao Hàm lợng kháng thể thụ động Newcastle gà Sao cao ngày tuổi đạt 7,6 log2 giảm dần xuống 2,9 log2 vào lúc ngày tuổi So với giống gà khác nh Hybro, Plymouth hàm lợng kháng thể thụ động lúc ngày tuổi đạt 3,7log2 (Trần Thị Lan Hơng, 1999) Theo Hà Bằng Mu, 2000 hàm lợng kháng thể thụ động gà Kabir lúc ngày tuổi đạt 6,38log2-6,66log2 Sang ngày tuổi thứ thứ lợng kháng thể bắt đầu giảm nhngvẫn cao đến ngày thứ hàm lợng kháng thể mức 3,5log2 quan trọng có 100% số mẫu >log2 thời điểm số giống gà khác đạt 1,5log2(Trần Thị Lan Hơng, 1999) phải sử dụng vaccin sớm thời điểm thời điểm ngày tuổi hàm lợng kháng thể đ giảm xuống 2,9log2 70% số mẫu lớn 3log2, ngày tuổi thứ 10 bắt đầu sử dụng vaccin ND-IB cho đàn gà 4 Phần Nghiên cứu Dinh dỡng Thức ăn Vật nuôi Bảng 1: Biến động hàm lợng kháng thể thụ động Newcastle gà Sao Ngày tuổi Số mẫu kiểm tra 10 10 10 10 10 10 Hiệu giá HI (log2) 4 3 2 4 HI trung bình(Xmx) 7,60,172 7,00,127 6,30,316 5,10,331 3,50,283 2,90,246 HI>3log2 Số % mẫu 10 100 10 100 10 100 10 100 90 70 HI Tb Diễn biến hàm lợng kháng thể thụ động Newcastle Hiệu giá HI Tb Ngày tuổi 10 Biểu đồ Biến động hàm lợng kháng thể thụ động Newcastle gà Sao Nh vậy, hàm lợng khángthể thụ động gà Sao cao giảm dần đến ngày thứ dới 3log2 việc sử dụng vaccin phòng bệnh Newcastle muộn so với loại gà khác Biến động hàm lợng kháng thể chủ động sau sử dụng vaccin phòng bệnh Newcastle Gà nở có mặt kháng thể thụ động giúp cho vật đề kháng với bệnh vòng thời gian ngắn Để đảm bảo trạng thái miễn dịch liên tục cho đàn gà phải sử dụng vaccin tạo miễn dịch chủ động Việt Nam để phòng bệnh Newcastle hai loại vaccin sản xuất nớc lasota hệ sử dụng phổ biến đ sử dụng số loại vaccin nhập từ nớc Trung tâm nghiên cứu gia cầm năm gần thờng sử dụng vaccin ND-IB Intervet Medion sản xuất cho kết phòng bệnh tốt giống gà Báo cáo khoa học Viện Chăn Nuôi 2006 khác Trên đàn gà Sao sử dụng vaccin ND-IB h ng Medion sản xuất Hàm lợng kháng thể sau sử dụng vaccin ND-IB Bảng Hàm lợng kháng thể sau sử dụng vaccin ND-IB Ngày sau sử dụng vaccin Số mẫu kiểm tra 14 20 20 14 21 20 20 20 2 Hiệu giá HI (log2) HI trung bình(Xmx) HI>3log2 Số % mẫu ND-IB lần 10 8 10 14 10 ND-IB lần 2 2 3,10,246 3,80,263 16 20 80 100 3,30,225 3,90,189 4,00,314 18 20 20 90 100 100 Vào lúc 10 ngày tuổi sử dụng ND-IB lần cho đàn gà cách nhỏ mắt, mũi, sau nhỏ vaccin 14 ngày kiểm tra hàm lợng kháng thể ngày sau sử dụng vaccin hàm lợng kháng thể bắt đầu tăng lên mức 3,1log2 có 80% số mẫu có hàm lợng kháng thể >3log2, theo Mary Young, Robyn Alders, Sally Grimes, Peter Spradbrow, Paula Dias, Amislcar da Sliva and Quintino Lobo, 2002 hàm lợng kháng thể 3log2 đàn gà khả chống lại virus cờng độc Cũng thời điểm giống gà khác theo Trần Thị Lan Hơng đạt 1,6log2, Sau 14 ngày sử dụng vaccin hàm lợng kháng thể đạt 3,8log2, sử dụng vaccin ND-IB lần theo cần sử dụng vaccin nhắc lại để có đáp ứng miễn dịch bền vững mặt khác để tạo miễn dịch sở lứa tuổi gà quan miễn dịch cha phát triển hoàn hảo ngày sau sử dụng vaccin lần hàm lợng kháng thể giảm kháng thể bị giảm bớt phải trung hoà virus vaccin, nhng đến 14 ngày sau sử dụng vaccin lần hàm lợng kháng thể đ bắt đầu tăng lên đạt 3,9log2 sau 21 ngày đạt mức 4log2 sau thời gian sử dụng vaccin nhũ dầu ND - Imulsion để đảm bảo miễn dịch lâu dài chắn cho đàn gà Biến động hàm lợng kháng thể Newcastle sau sử dụng vaccin nhũ dầu ND-Imulsion Sau sử dụng vaccin nhũ dầu lần hàm lợng kháng thể tăng cao vào lúc 21 ngày kéo dài đến tận 120 ngày giảm xuống 3,9log2 6 Phần Nghiên cứu Dinh dỡng Thức ăn Vật nuôi Để chuẩn bị phòng bệnh Newcastle giai đoạn sinh sản hệ sau có hàm lợng kháng thể thụ động phòng bệnh cho ngày đầu nở Mặt khác thời điểm hàm lợng kháng thể đ bắt đầu giảm mạnh tiến hành tiêm nhắc lại vaccin nhũ dầu, 30 ngày sau tiêm hàm lợng kháng thể đạt 7,3log2, đến 180 ngày sau tiêm đạt 5,5log2 với 100% mẫu kháng thể bảo hộ Nh đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch gà Sao với vaccin nhũ dầu tốt Theo kết nghiên cứu Trần Thị Lan Hơng, 1999 giống gà khác thời điểm sau tiêm hệ I 30 ngày đạt hiệu giá kháng thể đạt 5,9log2 Bảng Biến động hàm lợng kháng thể Newcastle sau sử dụng vaccin nhũ dầu NDImulsion Ngày Số Hiệu giá HI (log2) sau mẫu sử kiểm dụng tra vaccin ND-Imulsion lần 1(45 ngày tuổi) 14 20 21 20 30 20 10 60 20 90 20 10 120 20 8 2 ND-Imulsion lần (170 ngày tuổi) 30 20 10 60 20 90 20 120 20 5 150 20 HI trung bình(Xmx) HI>3log2 Số % mẫu 6 4,30,316 6,70,316 7,10,246 7,00,272 6,80,306 3,90,215 20 20 20 20 20 20 100 100 100 100 100 100 7,30,225 7,20,312 6,80,246 6,00,283 5,50,272 20 20 20 20 20 100 100 100 100 100 Hàm lợng HI (log2) Diễn biến hàm lợng kháng thể sau sử dụng vaccin HI Tb lần HI Tb lần 50 100 150 200 Ngày sau sử dụng vaccin Biểu đồ Diễn biến hàm lợng kháng chủ động Newcastle sau sử dụng vaccin Báo cáo khoa học Viện Chăn Nuôi 2006 Sau sử dụng vaccin nhũ dầu 30 ngày, tiến hành công cờng độc Trung tâm chẩn đoán thú y quốc gia với 10 sử dụng vaccin 10 đối chứng không sử dụng vaccin (sau kiểm tra HI âm tính) Sử dụng giống công cờng độc Newcastle VN91 với liều 104LD50, 0,5ml/con Sau ngày công cờng độc đàn gà đối chứng bị chết 100% với triệu chứng bệnh tích nh sau: Bảng Triệu chứng gà Sao sau công cờng độc Ngày sau công cờng độc Triệu chứng Số gà chết Cha biểu Bắt đầu xuất số ủ rũ, bỏ ăn, s cánh Bỏ ăn, ủ rũ, rải rác ỉa phân xanh, trắng, số có tợng thần kinh nh đầu lắc l, chúi đầu xuống đất Gà ủ rũ toàn đàn, ỉa chảy nặng, toàn đàn nằm bẹp xuống sàn Gà chết 0 4 Bảng Bệnh tích gà Sao sau công cờng độc Cơ quan mổ khám Xoang mũi Lô đối chứng Khô, dịch nhầy Khí quản Phổi Dạ dày Dạ dày tuyến Ruột Xung huyết nhẹ Bình thờng Xuất huyết Xung huyết, thành bị dày lên Niêm mạc viêm dày, xuất huyết ruột già, van hồi manh tràng xuất huyết nặng Xuất huyết số gan, lách sng có điểm xuất huyết, thận chứa nhiều ure trắng Xung huyết tiểu n o Hậu môn Gan, lách, thận N o Lô thí nghiệm Khô, dịch nhầy Bình thờng Bình thờng Bình thờng Bình thờng Bình thờng Bình thờng Bình thờng Bình thờng Biến động hàm lợng kháng thể thụ động chủ động Gumboro gà Sao Bảng Kết phản ứng AGP Ngày tuổi 14 21 35 Số mẫu kiểm tra 10 10 10 20 20 20 Kháng thể thụ động ( AGP) Âm tính Âm tính Âm tính Kháng thể chủ động Âm tính Âm tính Âm tính Phần Nghiên cứu Dinh dỡng Thức ăn Vật nuôi Khi gà đợc 42 ngày tuổi, lứa tuổi gà bình thờng mẫn cảm với bệnh Gumboro tiến hành công cờng độc Sau 10 ngày theo dõi thu đợc kết nh sau: Bảng Kết công cờng độc Chỉ tiêu theo dõi Trạng thái gà Kháng thể Kháng nguyên Mổ khám Gà sử dụng vaccin Ăn uống khoẻ mạnh bình thờng Âm tính Âm tính Không có bệnh tích Túi Fabricius bình thờng, quan khác bình thờng Gà không sử dụng vaccin Ăn uống khoẻ mạnh bình thờng Âm tính Âm tính Cơ đùi ngực có điểm xung huyết nhẹ Túi Fabricius sng, quan khác bình thờng Lịch sử dụng vaccin phòng bệnh Newcastle cho gà Sao Dựa vào diễn biến hàm lợng kháng thể thụ động nh kháng thể chủ động sau sử dụng vaccin qua áp dụng thực tế sản xuất đa lịch sử dụng vaccin phòng bệnh Newcastle cho gà Sao nh sau: Loại vaccin ND-IB lần ND-IB lần ND-Imulsion lần ND-Imulsion lần Ngày tuổi sử dụng 10 25 45 175 Cách sử dụng Nhỏ mắt mũi Nhỏ mắt mũi Tiêm dới da cổ Tiêm dới da cổ Kết luận Hàm lợng kháng thể thụ động Newcastle gà Sao cao ngày tuổi đạt 7,6 log2, ngày tuổi đạt 6,3log2 giảm dần xuống 2,9 log2 vào lúc ngày tuổi Sau nhỏ vaccin ND-IB lần đợc ngày hàm lợng kháng thể đạt 3,1log2, sau 14 đạt 3,8log2 sau nhỏ vaccin ND-IB lần đợc ngày hàm lợng kháng thể đạt 3,3log, sau 14 ngày đạt 3,9log2,sau 21 ngày đạt 4log2 có 100% mẫu kháng thể >3log2 Đàn gà đạt hàm kháng thể bảo hộ bệnh Newcsatle Hàm lợng kháng thể sau tiêm vaccin nhũ dầu ND-Imulsion đạt cao sau tiêm 21 ngày cao 30 ngày sau tiêm (đạt 7,1log2 lần 7,3 lần 2) kéo dài đến tận 120 ngày sau tiêm bắt đầu giảm nhng đạt 3,9log2 lần sau tiêm 50 ngày lần tiêm thứ đạt 5,5log2 với 100% mẫu >3log2 Sau công cờng độc Newcastle, đàn gà sử dụng vaccin đợc bảo hộ 100% đàn gà không sử dụng vaccin chết 100% Nh gà Sao đề kháng tốt với virus Newcastle cờng độc sau sử dụng vaccin Báo cáo khoa học Viện Chăn Nuôi 2006 Lịch sử dụng vaccin cho gà Sao: Đối với gà sinh sản: ND-IB nhỏ vào lúc 10 25 ngày tuổi ND-Imulsion tiêm vào lúc 45 170 ngày tuổi Đối với gà nuôi thịt: ND-IB nhỏ vào lúc 10 25 ngày tuổi ND-Imulsion vào lúc 45 ngày tuổi Gà Sao đáp ứng miễn dịch với bệnh Gumboro, túi Fabricius phát triển bình thờng Gà Sao hoàn toàn kháng đợc bệnh Gumboro không cần phải sử dụng vaccin phòng bệnh Gumboro cho giống gà Tài liệu tham khảo Vladimir Jurajda Virove nemoci drubeze, 2000 Szalay István; Barna Judit; Korosiné Molnar Andrea; Agyongtyuk, 2004 Mary Young, Robyn Alders, Sally Grimes, Peter Spradbrow, Paula Dias, Amílcar da Sliva and Quintino Lobo Controling Newcastle Disease in Village Chickens- A laboratory Manual, 2002 Timms and D.J.Alexander Cell-mediated immune response of chickens to Newcastle disease vaccines, 1997 Trần Thị Lan Hơng Xác định đáp ứng miễn dịch gà Hybro, Plymouth, sau sử dụng vaccin hệ I lúc 45 ngày tuổi ảnh hởng Salmonella đến trình đáp ứng miễn dịch trên- luận án thạc sĩ , 1999 Hà Bằng Mu Một số kết nghiên cứu đáp ứng miễn dịch gà Kabir thử nghiệm phòng bệnh lần kết hợp chế phẩm vaccin chống bệnh Gumboro Newcastle h ng Merial, 2000 Japanese Society on Poultry Diseases Diseases of birds, 2000 Manual of Standards Diagnostic Test and Vaccines, 2000