Callus Định nghia Callus: khối vô định hình thành từ các tế bào nhu mô có vách mỏng được xếp một cách lỏng lẻo Trong tự nhiên: callus được hình thành ở nơi bị cắt hoặc phần thân hay rễ bị tổn hại => sự thích ứng để bảo vê Vì vết cắt đó sẽ làm cho vi sinh vật và côn trùng dễ dàng xâm nhập (chỉ xảy ở nhóm thực vật sống) sự hình thành callus Trong sinh học thực vật, tế bào mô sẹo tế bào hình thành từ vết thương thực vật nuôi cấy môi trường có chất điều hoà sinh trưởng auxin cà cytokinin với nồng độ thích hợp với hợp chất hửu cơ, vô để trì sống cho tế bào điều kiện vô trùng Nguyên tắc hình thành mô sẹo tế bào phân chia để bù đắp lại vết thương Trong tự nhiên: callus được hình thành ở nơi bị cắt hoặc phần thân hay rễ bị tổn hại => sự thích ứng để bảo vê Vì vết cắt đó sẽ làm cho vi sinh vật và côn trùng dễ dàng xâm nhập (chỉ xảy ở nhóm thực vật sống) Mô sẹo tạo nguyên nhân te bào nhu mô chịu phân hoá phân chia tế bào tượng tầng, xáo trộn mô phân sinh sơ khởi hay xáo trộn trình tạo quan Mô sẹo tạo từ nhiều quan khác thể thực vật Tuy nhiên, với mổi loại mô hay quan sử dụng chất điều hoà sinh trưởng với loại nồng độ khác tuỳ mức độ nhạy cảm tế bào mô hay quan thực vật nuôi cấy như: rể, thân, lá, túi phấn… Các kiểu callus Mô sẹo hình thành gồm hai loại: • Loại xốp: chứae nhều tế bào xốp với nhân nhỏ, tế bào chất loãng không bào to • Loại cứng: tế bào chắc, nhân to, tế bào chất đậm không bào nhỏ Sự chuyên hóa và tổ chức callus Một callus đồng nhất bao gồm toàn bộ các tế bào nhu mô Sự chuyên hóa này xuất hiện ở các thực vật hoàn chỉnh Mô nuôi cấy mất chuyên hóa các tế bào đã chuyên hóa phát sinh các tế bào mới Khi mất chuyên hóa thì tạo các tế bào nhu mô không chuyên hóa và không có trật tự cấu trúc Cấy truyền callus Nuôi cấy một thời gian cần cấy truyền callus vì môi trường hết chất dinh dưỡng môi trường và gel argar trở nên khô Điều đáng quan tâm nữa là các chất thải của callus có thể tích lũy ở mức nào đó gây độc cho môi trường Mẩu cấy vài loài thực vật hoá nâu đen, mẩu cấy hoá nâu tăng trưởng bị ức chế, để lâu ngày mẩu chết Các mô non bị hoá nâu mô già (hiện tượng hoá nâu hoạt động enzyme oxidase) Callus được cấy phải đủ kích thước và được cấy lại môi trường mới Những tế bào trì vô thời hạn miễn chúng nuôi thường xuyên vào môi trường phát triển phù hợp ứng dụng Nuôi cấy mô sẹo quan trọng nuôi cấy tế bào Mô sẹ nguyên liệu khởi đầu cho nghiên cứu quang trọng khác như: phân hoá mô tế bào, chọn dòng tế bào, protolast, sản xuất chất hoạt tính sinh học Mô sẹo có thể biệt hóa thành quan hay một hoành chỉnh (được gọi tái sinh) bằng việc bổ sung các chất điều hòa sinh trưởng thích hợp môi trường nuôi cấy Việc tái sinh từ tế bào cho phép nhà nghiên cứu phục hồi toàn thực vật có gen chuyển tế bào Callus sử dụng đặc biệt vi nhân giống Nó sử dụng để phát triển giống hệt mặt di truyền có đặc tính mong muốn Ghi chu: Protoplast tế bào có thành tế bào loại bỏ màng tế bào chất lớp tế bào Protoplast thu enzyme lytic cụ thể để loại bỏ vách dung hợp