sự hình thành callus Trong sinh học thực vật, các tế bào mô sẹo là những tế bào được hình thành từ một vết thương thực vật khi được nuôi cấy trong môi trường có chất điều hoà sinh trư
Trang 11. Định nghia
Callus: khối vô định hình thành từ các tế bào nhu mô có vách mỏng được xếp một cách lỏng lẻo
Trong tự nhiên: callus được hình thành ở nơi bị cắt hoặc phần thân hay rễ bị tổn
hại => sự thích ứng để bảo vê Vì vết cắt đó sẽ làm cho vi sinh vật và côn trùng dễ dàng xâm nhập (chỉ xảy ra ở nhóm thực vật sống)
2. sự hình thành callus
Trong sinh học thực vật, các tế bào mô sẹo là những tế bào được hình thành từ một vết thương thực vật khi được nuôi cấy trong môi trường có chất điều hoà sinh trưởng auxin cà cytokinin với nồng độ thích hợp cùng với các hợp chất hửu cơ, vô
cơ để duy trì sự sống cho tế bào trong điều kiện vô trùng Nguyên tắc hình thành
mô sẹo là các tế bào phân chia để bù đắp lại các vết thương
Trong tự nhiên: callus được hình thành ở nơi bị cắt hoặc phần thân hay rễ bị tổn
hại => sự thích ứng để bảo vê Vì vết cắt đó sẽ làm cho vi sinh vật và côn trùng dễ dàng xâm nhập (chỉ xảy ra ở nhóm thực vật sống)
Mô sẹo được tạo ra ngoài nguyên nhân te bào nhu mô chịu sự phân hoá còn do
sự phân chia của tế bào tượng tầng, sự xáo trộn của các mô phân sinh sơ khởi hay
sự xáo trộn trong quá trình tạo cơ quan
Mô sẹo có thể tạo ra từ nhiều cơ quan khác nhau của cơ thể thực vật Tuy nhiên, với mổi loại mô hay cơ quan thì sử dụng chất điều hoà sinh trưởng với loại và nồng
độ khác nhau tuỳ mức độ nhạy cảm của tế bào trong mô hay cơ quan của thực vật được nuôi cấy như: rể, thân, lá, túi phấn…
Các kiểu callus
Mô sẹo khi hình thành gồm hai 2 loại:
• Loại xốp: chứae nhều tế bào xốp với nhân nhỏ, tế bào chất loãng và không bào to
• Loại cứng: các tế bào chắc, nhân to, tế bào chất đậm và không bào nhỏ
Sự chuyên hóa và tổ chức callus
Một callus đồng nhất bao gồm toàn bộ các tế bào nhu mô Sự chuyên hóa này xuất hiện ở các thực vật hoàn chỉnh
Trang 2Mô nuôi cấy mất chuyên hóa khi các tế bào đã chuyên hóa phát sinh các tế bào mới Khi mất chuyên hóa thì tạo ra các tế bào nhu mô không chuyên hóa và không có trật tự cấu trúc
Cấy truyền callus
Nuôi cấy một thời gian cần cấy truyền callus vì môi trường hết chất dinh dưỡng trong môi trường và gel argar trở nên khô đi
Điều đáng quan tâm nữa là các chất thải của callus có thể tích lũy ở mức nào đó gây độc cho môi trường
Mẩu cấy của vài loài thực vật có thể hoá nâu hoặc đen, khi mẩu cấy hoá nâu thì
sự tăng trưởng sẽ bị ức chế, nếu để lâu ngày mẩu sẽ chết Các mô còn non ít bị hoá nâu hơn mô già (hiện tượng hoá nâu là do hoạt động của enzyme oxidase)
Callus được cấy phải đủ kích thước và luôn được cấy lại trên môi trường mới Những tế bào này có thể được duy trì vô thời hạn miễn là chúng được nuôi thường xuyên vào môi trường phát triển phù hợp
3. ứng dụng
Nuôi cấy mô sẹo rất quan trọng trong nuôi cấy tế bào Mô sẹ là nguyên liệu khởi đầu cho các nghiên cứu quang trọng khác như: phân hoá mô và tế bào, chọn dòng tế bào, protolast, sản xuất các chất hoạt tính sinh học
Mô sẹo có thể biệt hóa thành cơ quan hay một cây con hoành chỉnh (được gọi là tái sinh) bằng việc bổ sung các chất điều hòa sinh trưởng thích hợp trong môi trường nuôi cấy
Việctái sinh một cây con từ một tế bào duy nhất cho phép các nhà nghiên cứu
có thể phục hồi toàn bộ thực vật có một bản sao của gen chuyển trong mỗi tế bào Callus là sử dụng đặc biệt trong vi nhân giống Nó có thể được sử dụng để phát triển các bản sao giống hệt nhau về mặt di truyền của cây có đặc tính mong muốn
Ghi chu: Protoplast là các tế bào trong đó có thành tế bào được loại bỏ và màng tế bào chất là lớp ngoài cùng nhất trong tế bào Protoplast có thể thu được bằng
enzyme lytic cụ thể để loại bỏ vách dung hợp