Kỹ thuật dùng tế bào gốc ghép da

Tế bào gốc là gì? Cơ thể con người có rất nhiều loại tế bào cần thiết cho sức khoẻ hàng ngày. Những tế bào này giúp cho cơ thể hoạt động bình thường, bao gồm nhịp đập của tim, suy nghĩ của não, thận làm sạch máu, và sự thay đổi tế bào mới cho da…Chức năng đặc biệt cuả tế bào gốc là tạo ra toàn bộ những loại tế bào khác trong cơ thể. Tế bào gốc là nhà cung cấp của tế bào mới. Khi tế bào gốc phân ra, nó có thể làm ra thêm tế bào gốc mới, hoặc làm ra những loại tế bào khác. Ví dụ, tế bào gốc của da có thể làm ra thêm những tế bào gốc mới của da, hoặc tạo ra những tế bào với những chức năng đặc biệt, như là giúp cho sắc tố cuả da. Tại sao tế bào gốc quan trọng cho sức khỏe? Khi chúng ta bị thương hoặc bị bệnh, tế bào trong cơ thể cuả chúng ta cũng sẽ bị thương hoặc chết. Khi như vậy, tế bào gốc bắt đầu hoạt động. Công việc của tế bào gốc gồm sửa chữa những tế bào bị thương và thay tế bào mới vào chỗ những tế bào chết. Đây là cách mà tế bào gốc giữ cơ thể khỏe mạnh và chống thoái hoá không bình thường.

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG VIỆN CNSH & MT o0o BÁO CÁO SEMINAR CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĐỘNG VẬT CHỦ ĐỀ 8: NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA GVHD: Ths Nguyễn Thị Kim Cúc SVTH : Nhóm 1 Vũ Tú Anh Phạm Thị Ngọc Anh Trần Thị Ngọc Kiều Trần Thị Thúy Nga (nt) Nguyễn Đăng Tình Nha Trang, ngày tháng năm 2015 MỤC LỤC NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA MỞ ĐẦU Cơ thể người có nhiều loại tế bào cần thiết cho sức khoẻ hàng ngày Những tế bào giúp cho thể hoạt động bình thường, bao gồm nhịp đập tim, suy nghĩ não, thận làm máu, thay đổi tế bào cho da…Chức đặc biệt cuả tế bào gốc tạo toàn loại tế bào khác thể Tế bào gốc nhà cung cấp tế bào Khi tế bào gốc phân ra, làm thêm tế bào gốc mới, làm loại tế bào khác Ví dụ, tế bào gốc da làm thêm tế bào gốc da, tạo tế bào với chức đặc biệt, giúp cho sắc tố cuả da Page of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA NỘI DUNG I/ TẾ BÀO GỐC: 1.Khái niệm: Tế bào gốc tế bào nguyên thủy chưa biệt hóa có khả tự trì tự tái sinh vô hạn (phân chia vô hạn định) Có khả sinh sản tạo nên tế bào khác có chức chuyên biệt (TB tim, da, xương…) cấy vào môi trường thích hợp Công nghệ tế bào gốc ngành công nghệ nghiên cứu tế bào gốc ứng dụng nhằm nâng cao chất lượng sống người Một khả kỳ diệu thể khả tái tạo hay tái sinh Tế bào gốc thể làm việc hệ thống sửa chữa, tái tạo cách phân chia thành tế bào chuyên biệt để bổ sung dạng tế bào có chức tương ứng cho tế bào hư, bệnh, giảm chức hay chức cần thay Công nghệ Tế bào gốc tìm kiếm nguồn tế bào gốc tốt nhất, nuôi cấy, nhân rộng tác động theo cách khoa học để biệt hoá thành dòng tế bào khác để chữa bệnh, chăm sóc sức khoẻ, sắc đẹp, chống lão hoá Công nghệ tế bào gốc gồm có nhóm công việc là: - Tạo nguồn tế bào gốc: tìm kiếm nguồn cung cấp tế bào gốc, tách chiết trì tế bào gốc ngân hàng phòng thí nghiệm để có nguồn tế bào gốc thường trực sử dụng cho nghiên cứu ứng dụng tế bào gốc - Biệt hoá tế bào gốc: tế bào gốc tế bào non trẻ chưa có cấu trúc chức chuyên biệt tế bào biệt hoá Biệt hoá tế bào gốc biến đổi tế bào gốc từ chỗ chưa có cấu trúc chức chuyên biệt thành tế bào có cấu trúc chức chuyên biệt tế bào xương, tế bào da, tế bào cơ, tế bào gan, tế bào thần kinh Page of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA - Ứng dụng tế bào gốc: công việc sử dụng tế bào gốc vào mục đích khác nghiên cứu chế sinh lý bệnh lý thể, nghiên cứu phát triển thuốc biện pháp điều trị Phân loại:  Phân loại theo nguồn gốc: Tế bào gốc có nguồn gốc với dạng sau: -Tế bào gốc phôi lấy trực tiếp từ phôi thai giai đoạn phôi bào tức hợp tứ sau 6-7 ngày thụ tinh -Tế bào gốc thai lấy từ tế bào gốc đa mô bào thai bị hủy phá thai -Tế bào gốc từ dây rốn tức từ màng dây rốn máu dây rốn thai nhi sau sinh -Tế bào gốc từ người trưởng thành lấy từ mô trưởng thành người trưởng thành Các tế bào gốc lấy từ phôi, thai, dịch ối, dây rốn, thai, mô khác người sau sinh người trưởng thành Dựa vào nguồn mô lấy để phân lập so với giai đoạn phát triển phôi thai thể người ta chia tế bào gốc - Tế bào gốc phôi (embryonic stem cells): tế bào gốc lấy từ khối tế bào bên phôi nang 4-7 ngày tuổi Đây tế bào chưa biệt hoá, có tính vạn tiềm năng, phát triển thành gần loại tế bào thể - Tế bào gốc thai (foetal stem cells): tế bào gốc phân lập từ tổ chức thai sau nạo phá thai Đây tế bào vạn tiềm đa tiềm năng, tức Page of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA chúng có tiềm phát triển thành nhiều loại tế bào khác mô quan - Tế bào gốc nhũ nhi (infant stem cells): tế bào đa tiềm vạn tiềm phân lập từ thể trẻ sơ sinh, dây rốn, từ thai - Tế bào gốc trưởng thành (adult stem cells): tế bào chưa biệt hoá, tìm thấy số lượng mô người trưởng thành (tủy xương, máu ngoại vi, mô não, mô da, mô ), cho có tính đa tiềm - Tế bào gốc giống tế bào gốc phôi (embryonic like stem cell) hay tế bào gốc vạn tiềm cảm ứng (induced plutipotent stem cell) tế bào tạo cách cảm ứng tế bào biệt hoá thể trở lại trạng thái giống tế bào gốc phôi Trong số nguồn cung cấp tế bào gốc kể trên, việc lấy tế bào gốc từ phôi, thai, dịch ối trước sinh có liên quan đến hủy phôi, nạo phá thai, can thiệp chọc dịch ối trước sinh việc làm có liên quan đến lo ngại đạo đức ảnh hưởng bất lợi cho thai nhi Việc lấy tế bào gốc từ mô người trưởng thành tủy xương, máu ngoại vi, nang lông… có khó khăn kỹ thuật hạn chế số lượng tế bào chất lượng tế bào gốc chúng tương đối “già” so với tế bào gốc lấy từ phôi thai  Phân loại theo chức năng: Tế bào gốc có loại : tế bào gốc toàn tế bào gốc đa : - TBG toàn : có khả tạo tất loại TB chuyên biệt khác nhau, có khả có khả tạo thể riêng biệt Page of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA - TBG đa : có khả tạo hầu hết tế bào chuyên biệt thể không thê tạo thể Đây loại tế bào gốc ứng dụng nhiều Đặc tính tế bào gốc khả phân chia không giới hạn, khả tự tái tạo khoảng thời gian dài không bị biệt hóa phát triển thành loại tế bào - Tế bào gốc biệt hóa thành dạng tế bào khác thể - Tế bào gốc hoạt động hệ thống sửa chữa, tái tạo cách phân chia không giới hạn để bổ sung dạng tế bào khác - Tế bào gốc phân chia tạo tế bào tương tự tế bào chuyên biệt có chức quan thể - Hầu hết sửa chữa mô thể người kích hoạt hệ thống tế bào gốc Nhờ mà từ tế bào gốc người ta tạo nhiều dòng tế bào khác chứa sản phẩm với ứng dụng đạt hiệu chữa bệnh thẩm mỹ II/ CẤU TRÚC DA Da quan lớn hoạt động nhiều thể người Đối với người Việt trưởng thành diện tích bề mặt da trung bình chiếm khoảng 15 - 17% trọng lượng toàn thể Da có chiều dày khoảng 0,07 - 2,5mm, dày vùng tay, bàn chân từ - mm mỏng vùng mi mắt 0,3 mm, môi Da dày mỏng khác giải thích tác động yếu tố khác môi trường vào vùng riêng rẽ thể Lớp biểu bì Biểu bì lớp da, tiếp xúc trực tiếp với môi trường Và hàng rào bảo vệ thể, mỏng chia Page of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA thành năm lớp nhỏ: lớp đáy, lớp sợi, lớp hạt, lớp bóng, lớp sừng Trong biểu bì mạch máu mạch bạch huyết điển hình Biểu bì nuôi dưỡng nhờ chế khuếch tán chất dinh dưỡng từ mô liên kết qua màng đáy Xen lớp tế bào biểu mô có đầu mút tận thần kinh trần, vỏ bao quanh Chúng chia nhánh nhỏ chia nhỏ chạy luồn khoảng gian bào tiếp xúc với tế bào biểu bì Một số đấu mút thần kinh cảm giác tiếp xúc với tế bào biệt hóa thành tế bào cảm giác phụ đống vai trò thụ thể tiếp xúc cảm giác da a Lớp đáy Lớp đáy tế bào khối vuông hay trụ thấp, nằm đáy màng, có khả phân chia liên tục di chuyền bề mặt để thay dần cho tế bào già bên bong ra, tế bào sừng Chủ yếu lớp đáy có chứa khoảng 10% tế bào sừng, 50% tế bào khác thời điểm giao thời sinh trưởng, 40% lại tế bào hậu kỳ giảm phân Những tế bào lớp đáy gắn kết màng nhờ phân tử dính fibronectindo nguyên bào sợi trung kỳ tiết Ngoài nằm rải rác lớp đáy có số loại tế bào khác: hắc tố bào, tế bào Langerhans Merkel b Lớp sợi Lớp sợi lớp đáy, tập hợp - 20 tầng tế bào đa diện liên kết chặt chẽ với nhờ cầu nối liên bào phân nhánh, chặt chẽ Các tế bào tương đối đặc trưng hình đa diện nhân hình cầu c Lớp hạt Lớp hạt bao gồm từ - lớp tế bào đa diện dẹp, lớp sợi Các tế bào chứa nhiều hạt sắc tố nhân, chúng tự chết theo chu trình để sẵn sàng chuyển thành dạng tế bào sừng hóa Lớp hạt gồm tế bào hình thoi, tế bào thường có chứa nhiều hạt keratohyalin bắt màu bazơ đậm d Lớp bóng Lớp bóng nằm phía lớp hạt lớp mỏng có biến đổi sâu sắc chất tế bào lớp Tế bào trở nên dài hơn, dẹt hơn, nhân tất bào quan biến dần bị Page of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA phân giải Nói chung, chúng thoái hóa không hình dạng tế bào e Lớp sừng Ở bề mặt biểu bì, tế bào biến thành sừng mỏng, bào tương chứa nhiều sừng nhằm ngăn cản thoát nước, cách nhiệt nhân tố bất lợi khác từ môi trường xâm nhập vào thể Sự đổi hoàn toàn lớp biểu bì tính từ sản sinh tế bào gốc đến rụng thành vảy vào khoảng 45 - 75 ngày Tuy nhiên trình phụ thuộc vào môi trường nội mô có thuận lợi hay không bao gồm tín hiệu tiếp xúc để tế bào chép di chuyển nhân tố hóa học nhân tố tăng trưởng f Các tế bào thuộc lớp biểu bì • Tế bào sừng Là tế bào có nguồn gốc từ ngoại phôi bì phân bố khắp biểu bì (chiếm 95% tổng số tế bào lớp biểu bì) có hoạt động phân bào Trong trình biệt hóa tế bào di chuyển lên phía thay cho tế bào phía bị bong ra, nhờ lớp biểu bì thay Quá trình di chuyển lên tế bào thường xảy khoảng 25 - 50 ngày • Tế bào melanin Là tế bào dạng đuôi gai chứa sắc tố melanin có màu nâu đen tìm thấy da, mắt, tóc Phân tử melanin hình thành acid amin bị oxy hóa Chiếm tỷ lệ nhỏ khoảng 2% số tế bào lớp biểu bì Tế bào melanin giúp hình thành nên màu sắc da, hấp thu lượng UV bảo vệ da tránh tác hại tia UV Có nguồn gốc từ tủy xương, theo máu xâm nhập vào da Chúng chiếm tỷ lệ - 8% tế bào biểu bì Những tế bào liên quan đến hệ thống miễn dịch biểu bì Chúng phát xử lý, trình diện kháng nguyên lạ xâm nhập vào biểu bì, kích thích gây nên đáp ứng nhu cầu miễn dịch • Tế bào Merkel Là tế bào thần kinh nội tiết, chiếm lượng nhỏ khoảng 1% lớp đáy biểu bì, liên kết với cầu nối gian bào Chúng tiếp xúc với đầu cuối dây thần kinh có chức thể cảm thụ học Ngoài ra, số tế bào khác biểu bì Page of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA như: tế bào bạch cầu trung tính, tế bào bạch cầu ưa acid, hồng cầu, … Là loại xuất tăng lên trường hợp bệnh lý g Hình thái điển hình tế bào biểu bì Biểu bì có cấu trúc lát tầng tạo nhiều lớp tế bào, lớp có hình dẹt đa diện, coi loại biểu mô bảo vệ điển hình Biểu mô trụ tầng có lớp tế bào trên hình trụ, loại mô có Loại biểu mô vuông tầng có lớp tế bào nằm có hình vuông, tế bào chứa nhiều sắc tố h Một số cấu trúc đặc biệt tế bào biểu bì Do đặc điểm tiếp xúc với bề mặt ngoài, có mặt tự do, tế bào biểu bì nói chung tế bào da có số cấu trúc liên kết đặc biệt, quan sát kính hiển vi quang học, màng tế bào nằm sát nhau, không chứa khoảng gian bào Những khoảng gian bào (có rộng tới 20 - 30mm) thường lấp đầy glycocalyx có chất glycoprotein tạo thành cấu trúc lớp dải bịt Lớp có trò quan trọng việc gắn kết tế bào biểu mô với nhau, ngăn chặn ngấm chất dịch không cần thiết, lại linh động trình âm bào miễn dịch tự nhiên việc lưu chuyển chất mà thể hay tế bào cần Vùng dính nằm sát bên dải bịt lớp bào tương tế bào tiếp giáp với lớp trở nên đặc, kết hợp với sợi nhỏ tạo thành vành liên tục quanh tế bào Thể liên kết kính hiển vi, quan sát thấy chúng tạo thành hai mảnh đặc biệt đối diện hai mảng bào tương thuộc hai tế bào nằm cạnh Tại khoảng gian bào rộng chứa chất có mật độ điện tử thấp Từ vị trí thể liên kết, sợi sừng tỏa vùng bào tương xung quanh • Thể liên kết Khe liên kết gặp nhiều loại tế bào khác: trơn, tim, mô thần kinh, Khoảng gian bào hẹp lại khoảng 2mm, có đơn vị kết nối hình ống nối xuyên ngang hai màng tế bào cạnh Lòng ống cho phép ion, phân tử có kích thước nhỏ (dưới 1000 Da) di chuyển từ tế bào qua tế bào khác Đây synap điện, sở cấu trúc truyền thông tin hai tế bào biểu bì • Khe liên kết Page of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA Sự phân cực tế bào biểu rõ tế bào biểu mô: phần bào tương phía hoàn toàn khác với phần phía nhân Sự phân cực có liên quan mật thiết tới chức tế bào biểu bì Mặt tự tế bào biểu bì thường tạo khía (giống bàn chải) để tăng diện tích tiếp xúc khía xơ actin Lớp trung bì Trung bì mô liên kết vững bao gồm chất nền, tế bào liên kết, sợi đàn hồi, nang lông, mạch máu sợi thần kinh thụ quan Bề dày lớp trung bì phát triển tùy vùng, nơi dày lên tới 2mm Trung bì chia làm hai lớp nhiên ranh giới không rõ ràng Màng Là ranh giới chỗ nối trung bì biểu bì, tế bào biểu bì bên trung bì bên Nó có cấu trúc mô xơ liên kết, có chức ngăn cản thoát phân tử có trọng lượng phân tử lớn 40 KDa cho phép tế bào Langerhans, tế bào Merkel, tế bào lympho hắc tố bào qua chúng Màng gồm bốn lớp là: lớp tế bào gốc, lớp suốt, lớp dày lớp Thành phần màng gồm chất: kháng nguyên Bullouspemphigoid (là glyprotein 200.000 Da), Laminin (glyprotein 1x10 Da),Collagen IV VII Sự phân bố mạch thần kinh Những tiêu động mạch dinh dưỡng cho da đến từ hai đám rối mạch, khu trí lớp nhú lớp lưới, đám rối lại nằm trung bì hạ bì Sự phân bố thần kinh da đa dạng nhằm tiếp nhận kích thích môi trường Ước tính, cm da chứa tới 70 cm mạch máu, 55 cm dây thần kinh, 100tuyến mồ hôi, 15 tuyến nhờn, 230 thụ quan cảm giác số tuyến dịch.Ngoài lớp da, đầu mút thần kinh đến tiếp xúc với tế bàobiểu mô tuyến phụ thuộc da, quanh nang lông Cấu trúc phụ da • Lông Lông phủ toàn thể, chúng có tác dụng giác quan phụ, bảo vệ điều hòa thân nhiệt, giúp dể thoát mồ hôi Lông phát triển từ tế bào bị sừng hóa chiều dài tự nhiên biến Page 10 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA hoạt động sinh dục người Nó coi phận sinh dục thể Các yếu tố ảnh hưởng Như biết trên, biểu bì gồm lớp Các tế bào gốc tế bào sừng có khả tăng sinh mạnh có lớp sâu biểu bì (là lớp đáy) Các tế bào gốc bám chặt vào màng Cho đến tế bào lớp đáy nhiều lên,một số tế bào bắt đầu di chuyển khỏi lớp lên bề mặt da Và chúng khoảng thời gian 25 - 50 ngày Sự thay đổi tế bào lớp đáy ngừng sản xuất chất sừng - 14 ngày sau tách khỏi màng nền.Sự chuyển đổi biểu gen xuất tế bào sừng từ lớp hạt lên lớp sợi chúng bắt đầu tổng hợp protein filaggrin loicrin Các tế bào sừng khiở lớp sợi cuối suy yếu hoạt hóa gen transglutaminase biểu bì,chúng xúc tác liên kết chéo protein màng tế bào sừng lớp sợi chết đi, vảy hay xương tế bào chứa đầy chất sừng chúng để lại Page 12 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA protein liên kết Xác tế bào chết tạo thành mảng bảo vệ lớp sừng, sau màng tạo thành lớp vảy dễ bị tróc a Ảnh hưởng môi trường đến biệt hóa tế bào Các chất dinh dưỡng , chất độc, áp suất, nhiệt độ, ảnh hưởng rõ rệt đến biệt hóa tế bào động vật Ví dụ, nuôi cấy tế bào gốc phôi (ES) chuột môi trường có chất dinh dưỡng, nồng độ CO2, nhiệt độ khác nhau, tạo nêncác loại tế bào khác nhau.Trong nuôi cấy mô thực vật, điều kiện chất dinh dưỡng môi trường định trinh tạo calus…Khả biệt hóa tái sinh da, phụ thuộc vào nồng độ loại protein đặc hiệu b Tác động tín hiệu tế bào đến trình biệt hóa Biệt hóa tế bào có vai trò quan trọng trình hình thành phát triển sinh vật, từ hợp tử đến thể trưởng thành Trong trình biệt hóa hình thành mô hệ quan thể, lớp tế bào phôi sớm có quátrình biệt hóa khác nhau, chịu ảnh hưởng nhiều loại tác nhân môi trường Mọi tế bào có khả tiếp nhận xử lý nhiều loại thông tin từ môi trường hàm lượng chất dinh dưỡng, hàm lượng oxy, nhiệt độ, áp suất… Trong trình biệt hóa nhiều loại tế bào khác nhau, tín hiệu tế bào giữ vai trò vô quan trọng Từ loại tế bào gốc đa hình thành nên nhiều loại tế bàogốc khác nhờ tác động loại tín hiệu tế bào (signal) khác Tế bào trả lời tín hiệu nhiều đường khác ức chế hay hoạt hóa gen, thayđổi bề mặt tế bào, thay đổi hoạt hóa enzyme, Mỗi loại tế bào có chế tiếp nhận tín hiệu, truyền tín hiệu trả lời tín hiệu khác nhau, làm cho từ loại tế bào gốc biệt hóa loại tế bào khác nhau.Quá trình biệt hóa tế bào gốc tạo da phụ thuộc vào tác động điều chỉnh hàng loạt tín hiệu tế bào Các tín hiệu tế bào khác tác động vào tế bào gốc tạo da dẫn đến trình biệt hóa khác nhau, hình thành loại tế bào khác c Vai trò gen trình biệt hóa Biệt hóa tế bào trình tất yếu trình phát sinh phát triển thể sống Biệt hóa tế bào giúp hợp tử sau thụ tinh phân hóa thành nhiều lớp tế bào phôi, từ biệt hóa thành nhiều loại mô, quan thể Trong trình biệt hóa loại tế bào, vai trò gen biệt hóa có ý nghĩa Page 13 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA định Cơ chế tác động loại gen đến trình biệt hóa nhiều loại tế bào khác chưa nghiên cứu đầy đủ d Cơ chế biệt hóa tế bào chịu số ảnh hưởng Hormone, cácyếu tố tăng trưởng vai trò ion Ca2+ Khi tế bào sừng nuôi cấy tên môi trường huyết bổ sung Hormone insulin protein EGF EGF protein sản xuất từ tá tràng tuyến nước bọt, DGF thúc đẩy tăng sinh tế bào kích thích sựtăng trưởng da bề mặt ruột màng sừng Trên màng tế bào sừng người chứa receptor insulin, suốt phát triển tế bào receptor làm tăng khả tăng sinh tế bào Hydrocorticone hormon khác cũngảnh hưởng đến kích thước quần thể tế bào, thiếu kích thước quần thể bị ảnh hưởng Ion canxi (Ca2+) ảnh hưởng tới biệt hóa tăng trưởng bào sừng, muốn điều chỉnh trình tăng sinh phân tầng tế bào sừng ta thayđổi nồng độ ion Ca2+ ngoại bào nuôi cấy mô invitro Đây coi điều chỉnh sinh lý bình thường cấu trúc biểu bì, có chênh lệch nồng độ ionCa2+ rõ ràng tế bào lớp đáy so với tế bào lớp Nồngđộ ion Ca2+ thấp thúc đẩy tăng sinh, nồng độ cao làm giảm biệt hóa tế bào sừng Trong nuôi cấy invitro, lượng tế bào tăng nhanh nồng độ Ca2+ khoảng 0,03 – 0,1mM Trong môi trường DMEM, lượng tế bào tăng nồng độ Ca2+khoảng 0,03 – 0,1mM III/ VAI TRÒ CỦA TẾ BÀO GỐC: Vai trò tế bào gốc: Tế bào gốc tế bào có khả biệt hóa trình phát triển để trở thành loại tế bà trung ương phần khong thể thiếu thể Từ động vật giai đoạn trứng nước, tế gốc phôi thai có khả biệt hóa thành dạng 220 loại tế bào, đồng thời thực chế sửa chữa cách tự nhiên suốt trình phát triển kiến tạo quan hác Về mặt lý thuyết, tế bào gốc từ phôi giữ khả phân chia tái phân chia suốt đời người động vật để sản sinh tế bào hồng cầu, tế bào da, tế bào hay loại tế bào cần thiết để trì sống Page 14 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA Tế bào gốc giữ vai trò vô quan trọng thể sống nhiều lí Trong phôi thai 3-5 ngày tuổi, gọi túi phôi, tế bào gốc nằm mô phát triển thành cá tế bào chuyên dụng tim, phổi, da… Ở thể trưởng thành, tế bào gốc tủy xương thay cá tế bào bị hủy diệt thương tật, bệnh tật Người ta cho tương lai rế bào gốc trở thành cứu cánh để điều trị số bệnh tiểu đường, tim mạch Nguyên bào sợi vai trò nguyên bào sợi: - Nguyên bào sợi tế bào đa năng, có nhiều ứng dụng Quy trình nuôi cấy nhằm mục đích thu nhận chủ động nguồn tế bào, ứng dụng trị bỏng, tổn thương da, đồng thời sử dụng nghiên cứu ứng dụng khác đặc biệt công nghệ y sinh học Nguyên bào sợi tế bào phổ biến mô liên kết, gồm loại có hình thái khác nhau: - Tế bào sợi non: tế bào thường biến dạng với nhiều nhánh bào tương, nhân lớn, hình trứng, bắt màu thuốc nhuộm, sợi nhiễm sắc mảnh, hạt nhân lớn Bào tương chứa lưới nội bào có hạt Golgi phát triển - Tế bào sợi: tế bào nhỏ hình thoi, nhân hình gậy, sẫm màu, lưới nội bào, Golgi phát triển Tế bào sợi có nhiệm vụ tổng hợp collagene glycosaminoglycan, chất Ở người lớn, tế bào sợi phân chia, hình ảnh gián phân thường quan sát mô liên kết bị tổn thương Tế bào nguyên bào sợi người loại tế bào dễ dàng nuôi cấy so với loại tế bào khác loài Vả lại, có tiềm ứng dụng vô phong phú, như: Page 15 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA + Là loại tế bào tiềm tăng sinh mạnh biệt hóa thành tế bào mỡ, nguyên bào xương, ứng dụng trong sản xuất vật liệu cấy ghép +Sử dụng để nghiên cứu di truyền, sản xuất vacxin,… +Sử dụng để thu nhận tế bào mầm Cơ chế biệt hóa tế bào gốc thành biểu bì da Vị trí tế bào sừng trình biệt hóa biểu bì: Như biết trên, biểu bì gồm lớp Các tế bào gốc tế bào sừng có khả tăng sinh mạnh có lớp sâu biểu bì (là lớp đáy) Các tế bào gốc bám chặt vào màng Cho đến tế bào lớp đáy nhiều lên, số tế bào bắt đầu di chuyển khỏi lớp lên bề mặt da Và chúng khoảng thời gian 25 50 ngày Sự thay đổi tế bào lớp đáy ngừng sản xuất chất sừng - 14 ngày sau tách khỏi màng Sự chuyển đổi biểu gen xuất tế bào sừng từ lớp hạt lên lớp sợi chúng bắt đầu tổng hợp protein filaggrin loicrin Các tế bào sừng lớp sợi cuối suy yếu hoạt hóa gen transglutaminase biểu bì, chúng xúc tác liên kết chéo protein màng tế bào sừng lớp sợi chết đi, vảy hay xương tế bào chứa đầy chất sừng chúng để lại protein liên kết Xác tế bào chết tạo thành mảng bảo vệ lớp sừng, sau màng tạo thành lớp vảy dễ bị tróc Page 16 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA IV/ ỨNG DỤNG TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA: 1.Thu nhận máu cuống rốn Máu cuống rốn thu nhận từ sản phụ xét nghiệm âm tính với HIV, HBV, HCV…ở bệnh viện Sau thai nhi vừa sinh ra, tiến hành kẹp phần cuống rốn gần bụng cắt vị trí kẹp cm Dùng kim tiêm túi thu máu (có chứa sẵn chất chống đông máu) đưa vào cuống rốn vị trí gần thai Máu cuống rốn theo kim ống dẫn chảy vào túi thu máu Khi máu hết chảy, rút kim mang túi chứa máu phòng thí nghiệm (được bảo quản lạnh đá gel) Giai đoạn nuôi cấy sơ cấp tế bào máu cuống rốn Chọn lọc MSC Về nguyên tắc, máu cuống rốn chứa ba loại tế bào chính: tế bào gốc tạo máu (Hemapoietic Stem Cell_HSC), tế bào máu trưởng thành tế bào gốc trung mô (Mesenchymal stem cell – MSC) Các MSC tế bào gốc tạo máu thuộc quần thể tế bào đơn nhân Tiến hành thu nhận quần thể tế bào đơn nhân phương pháp li tâm gradient nồng độ Ficoll-paque (Sigma) tốc độ 2.500 vòng/phút, phút Sau đó, thu nhận phân đoạn chứa tế bào đơn nhân nằm lớp Ficoll-paque lớp huyết tương bên Trong trình li tâm, tế bào biệt hóa với kích thước lớn xuyên qua lớp Ficoll lắng đáy ống li tâm Các tế bào hồng cầu không nhân nhẹ, nằm lớp huyết tương bên Và tế bào đơn nhân với kích thước trung bình nằm lớp MSC tách khỏi tế bào gốc tạo máu quần thể tế bào đơn nhân phương pháp nuôi cấy Trong nuôi cấy, MSC bám dính vào bề mặt (giá thể) nuôi cấy, tế bào gốc tạo máu khả Tế bào đơn nhân sau thu nhận huyền phù môi trường nuôi cấy IMDM, 10% FBS, nuôi bình nuôi cấy (Nunc, 25 cm2 ) cho đạt mật độ 3.105 tế bào/cm2 điều kiện 370C, 5% CO2 Sau 48 giờ, MSC bắt đầu bám bề mặt đáy bình nuôi, thay môi trường để loại bỏ hết tế bào không bám (các tế bào chết tế bào gốc tạo máu), tiếp tục nuôi tế bào mọc đạt tỷ lệ 7080% bề mặt đáy bình nuôi, với chế độ thay môi trường ngày/lần Giai đoạn nuôi cấy thứ cấp Page 17 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA Cấy chuyền tăng sinh MSC Khi mật độ MSC bình nuôi tăng, đạt khoảng 70-80% tỷ lệ diện tích đáy bình, tiến hành cấy chuyền nhằm cung cấp không gian chất dinh dưỡng cho MSC Quy trình tiến hành sau: loại bỏ môi trường cũ rửa tế bào với 4-5 ml PBSA có bổ sung gentamycin (10 µg/ml) hai lần Tiếp tục loại bỏ dịch rửa bổ sung 4-5 ml trypsin/EDTA 0,05% Sau 15 giây, tiến hành đổ bỏ dung dịch enzyme giữ lại khoảng ml tiếp tục ủ tủ ấm 370C, từ 2-3 phút Sau đó, lắc nhẹ bình nuôi cấy để tách tế bào khỏi bề mặt đáy Khi tế bào co tròn tách khỏi bề mặt bình nuôi, phải trung hòa trypsin thừa 10-11 ml môi trường IMDM 10% FBS Huyền phù tế bào chia cho bình nuôi Biệt hoá MSC thành tế bào dạng nguyên bào sợi Các MSC thu nhận theo phương pháp trên, sau cấy chuyền từ 5-7 lần, tiến hành kiểm tra độ tinh sạch, tạo nồng độ thích hợp để cuối sử dụng cho biệt hóa in vitro Chuyển tế bào nuôi cấy môi trường DMEM- low glucose , bổ xung 10 ng/ml KGF 20 ng/ml EGF Sau tuần nuôi, tế bào chuyển sang môi trường SFM bổ xung 20 ng/ml HGF 50 ng/ml IGF-2 tuần Sự thay đổi mật độ hình thái tế bào theo dõi liên tục Các tế bào chuyển từ trạng thái trải sang co tròn tăng sinh nhanh Ngoài , tế bào đánh giá biểu số gen đặc trưng cho tế bào biểu mô CK18 ,CK19 (là marker đặc trưng cho cho tế bào tiền nhân biểu mô hay TBG da) , P63 (marker tế bào biểu mô da, tế bào sừng),và β1-integrin (marker trung gian thị biệt hóa lớp trung mô biểu mô) RT-PCR Tế bào biệt hóa biểu CK18, β1-integrin sau tuần, tuần CK19 p63 Kiểm tra biểu CK18, β1-integrin, CK19 p63 Page 18 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA Thu nhận RNA tổng số tế bào biệt hóa Trizol Phản ứng RT-PCR thực kít AccessQuickTM RT-PCR ( Promega, Hoa Kì ) với phản ứng phiên mã ngược : 45 phút 45oC, kết thúc 95 OC phút Chu trình nhiệt PCR: 94 0C 45 giây, 55-60 OC 45 giây, 72 0C phút với 35 chu kì Ủ 10 phút 72 O C Sản phẩm PCR điện di gel Agarose 2% quan sát hệ thống chup gel tự động GelDoc It ( UVP, Hoa Kỳ) Trình Tự primer : CK18(149bp) F :TGGTACTCTCCTCAATCTGCTG R: CTCTGGATTGACTGTGGAAGT CK19(460bp) F:AGGTGGATTCCGCTCCGGGC R: ATCTTCCTGTCCCTCGAGCA P63 (611bp) F:CAGACTCAATTTAGTGAG R: AGCTCATGGTTGGGGCAC β1-Integrin (640bp) F: AATGTTTCAGTGCAGAGCC R: TTGGGATGATGTCGGGA Hình : Kết phân tích RT_PCR biểu gen CK18 (149bp), β1-integrin (640bp) , CK19 (460bp) p63 (611bp) 1: Tế bào đối chứng; 2: tế bào biệt hóa sau tuần; 3: tế Giai đoạn nuôi cấy nguyên sợi bào Page 19 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA 5.1 Chuẩn bị giá đỡ tế bào Giá đỡ tế bào collagen, màng sinh học tổng hợp Giá đỡ cắt tròn có diện tích đĩa nuôi cấy khử trùng giá đỡ đặt vào đĩa nuôi cấy, sau cho môi trường nuôi cấy vào cho láng ngập giá đỡ 5.2 Cấy tế bào lên giá đỡ Đếm tế bào mật độ tế bào dàn hỗn hợp dịch tế bào vừa thu lên giá chuẩn bị đặt đĩa nuôi cấy có gí đỡ vào tủ nuôi cấy 370C có 5%co2 khoảng thời gian 1h bổ sung môi trường cho vừa đủ 5ml 5.3 Theo dõi đánh giá tế bào nuôi cấy Các nguyên bào sợi nhân lên phát triển giá đỡ môi trường nuôi cấy theo dõi mật độ tế bào đủ lớn tình trạng nhiễm khuẩn, nhiễm nấm tiến hành ghép tế bào nuôi cấy lên vết thương, vết bỏng chuẩn bị Thông thường việc nuôi cấy diễn vòng 14 ngày Page 20 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA V/ KIỂM TRA THẢI LOẠI Đặc điểm biểu HLA-G, HLA-E HLA-DR tế bào Kết phân tích western blot phát có mặt kháng nguyên HLA-G HLA-E dịch nghiền tế bào gốc trung mô màng dây rốn cho thấy tất mẫu tế bào biểu lộ kháng nguyên HLA-G HLA-E Page 21 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA Mức độ biểu HLA-DR bề mặt TBGTM màng dây rốn phân tích qua flowcytometry Mức độ biểu HLA-DR chiếm 1,9 ± 1,53% Page 22 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA Mức độ biểu dấu ấn CD90 đặc thù tế bào gốc trung mô đạt tới 92,65 ± 6,3% Như vậy, tế bào gốc trung mô dây rốn có biểu cao dấu ấn CD90 đặc thù kháng nguyên hòa hợp tổ chức HLA -DR, HLA-E, HLA-G • Tế bào gốc trung mô dây rốn có tính sinh miễn dịch thấp Đặc điểm kháng nguyên HLA tế bào gốc trung mô dây rốn Kết biểu đồ 3.2 cho thấy, 98% số tế bào thuộc quần thể TBGTM màng dây rốn nằm vùng M1, vùng âm tính với tín hiệu huỳnh quang FITC gắn với kháng thể kháng HLA-DR Trong đó, 92% số tế bào nằm vùng M2 phân tích với kháng thể kháng CD90, thể tế bào dương tính với CD90 dấu ấn đặc trưng TBGTM dùng chứng dương lần phân tích Điều tái khẳng định tế bào phân tích TBGTM Kết phân tích 15 mẫu TBGTM màng dây rốn cho mức độ biểu HLA mức 1,95 ± 1,53% Theo qui ước Ủy ban Tế bào gốc mô trung mô Hội Liệu pháp tế bào quốc tế (ISCT), marker cho âm tính đánh giá kỹ thuật flowcytometry phải có tỉ lệ phần trăm dương tính nhỏ 2% tổng số tế bào dương tính Từ cho thấy, TBGTM màng dây rốn phân tích nghiên cứu âm tính với HLA-DR Kết nghiên cứu tương tự ghi nhận của Miki CS (2005) với tếbào biểu mô màng ối Deuse CS (2011) với tế bào gốc màng dây rốn , tế bào có nguồn gốc nhũ nhi HLA-G HLA-E phân tử HLA thuộc lớp HLA lớp I, bộc lộ chủyếu tế bào thai nhi, có tác dụng ức chế miễn dịch giúp cho thai nhi tồn thể người mẹ [8] HLA-DR kháng nguyên thuộc HLA lớp II, có tính sinh miễn dịch mạnh cấy ghép vào thể dị gen Page 23 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA Các kết thu từ nghiên cứu này, lần cho thấy, việc tồn phân tử HLA-G HLA-E không bộc lộ HLA-DR TBGTM màng dây rốn cung cấp “đặc ưu miễn dịch” giúp cho TBG dễ dung nạp cấy ghép vào thể khác gen Điều giúp giải thích tượng kích thích miễn dịch yếu không bền vững ghép TBGTM màng dây rốn người lên da thỏ nghiên cứu trước TBGTM màng dây rốn trẻ sơ sinh bộc lộ phân tử HLA-G HLA-E không lộ HLA-DR Đặc điểm biểu HLA phần nguyên nhân tạo nên tính sinh miễn dịch thấp loại tế bào gốc Khi cấy ghép tế bào từ thể sang thể khác có tượng thể nhận sinh đáp ứng miễn dịch chống lại tế bào khác gen ghép vào Trong nghiên cứu này, tất mẫu huyết thỏ thời điểm khảo sát D15, D30 D60 có hoạt tính kháng thể kháng TBGTMMDRN cấy ghép, chứng tỏ tế bào có tính sinh miễn dịch Mặc dù TBGTMMDRN cho có yếu tố góp phần làm cho tính sinh miễn dịch thấp, việc cấy ghép tế bào nghiên cứu ghép dị loài tế bào người vào thỏ nên có nhiều khác biệt vềcác định kháng nguyên hai loài tồn TBGTMMDRN Bên cạnh đó, việc cấy ghép lặp lại liên tục 7-8 lần góp phần tăng cường khả sinh miễn dịch Mặc dù vậy, hoạt tính kháng thể không mạnh giảm rõ rệt sau ngày D30 D60, chứng tỏ đáp ứng tạo kháng thể không bền vững Kháng nguyên HLA biết tác nhân sinh đáp ứng miễn dịch thải ghép HLA phân tử có bề mặt tế bào nguyên vẹn, nhiên, so sánh hoạt tính kháng thể phản ứng với kháng nguyên siêu nghiền lại mạnh so với tế bào nguyên vẹn, điều chứng tỏ bên cạnh HLA có kháng nguyên khác từ bên tế bào kích thích thể thỏ sinh kháng thể Kết Page 24 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA gợi ý cần cấy ghép tế bào khỏe mạnh chuẩn bị vết thương có mạch máu nuôi dưỡng tốt góp phần làm tăng khả sống sót tế bào sau ghép, đồng thời làm giảm khả sinh đáp ứng miễn dịch thải ghép Mặc dù vậy, cần có nghiên cứu sâu trước khẳng định giả thuyết Như vậy, tế bào gốc trung có biểu kháng nguyên HLA G, HLA-E, kháng nguyên gây ức chế miễn dịch Các kháng thể kháng tế bào gốc thỏ không cao bền vững Các kết từ nghiên cứu cho phép gợi ý khả sử dụng TBGTM màng dây rốn để cấy ghép khác gen đồng loại ứng dụng khác VI/ KẾT LUẬN Thu nhận nuôi cấy thành công tế bào gốc trung mô từ máu cuống rốn người Tế bào gốc trung mô dây rốn có đặc tính sinh miễn dịch thấp Tế bào gốc trung mô dây rốn cảm ứng để biệt hóa thành nguyên bào sợi môi trường định hướng in vitro Ghép tế bào gốc trung mô màng dây rốn mô hình vết thương bỏng an toàn có tác dụng tích cực điều trị vết thương KIẾN NGHỊ Tiếp tục nghiên cứu việc đáp ứng miễn dịch người để nhanh chóng ứng dụng lâm sàng Page 25 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA TÀI LIỆU THAM KHẢO Công nghệ sinh học người động vật – Phan Kim Ngọc Công nghệ tế bào gốc – Phan Kim Ngọc Đề tài “Nghiên cứu biệt hóa tế bào gốc trung mô màng dây rốn người để điều trị vết thương bỏng nhiệt thực nghiệm” (Bác sĩ Phan Minh Hoàng – Học viện Quân Y Hà Nội) Tạp chí sinh học 2014, 36(1) – Biệt hóa tế bào gốc trung mô dây rốn thành tế bào giống tế bào biểu mô da http://myweb.pro.vn/tailieu/thamkhao/tieu-luan-vat-lieu-sinh-hoc-trongghep-da-phan-tan-thuoc-52757/ http://doc.edu.vn/tai-lieu/de-tai-ung-dung-cua-te-bao-goc-da-trongchua-bong-11552/ Page 26 of 26 [...]... các tế bào hồng cầu, tế bào da, tế bào cơ hay bất cứ loại tế bào nào cần thiết để duy trì sự sống Page 14 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA Tế bào gốc giữ vai trò vô cùng quan trọng trong một cơ thể sống vì nhiều lí do Trong phôi thai 3-5 ngày tuổi, được gọi là túi phôi, các tế bào gốc nằm trong mô sẽ phát triển thành cá tế bào chuyên dụng của tim, phổi, da Ở cơ thể trưởng thành, tế bào gốc. .. giữa những tế bào của lớp đáy so với những tế bào ở lớp trên Nồngđộ ion Ca2+ thấp thúc đẩy sự tăng sinh, nồng độ cao làm giảm sự biệt hóa của tế bào sừng Trong nuôi cấy invitro, lượng tế bào tăng nhanh khi nồng độ Ca2+ khoảng 0,03 – 0,1mM Trong môi trường DMEM, lượng tế bào tăng khi nồng độ Ca2+khoảng 0,03 – 0,1mM III/ VAI TRÒ CỦA TẾ BÀO GỐC: 1 Vai trò của tế bào gốc: Tế bào gốc là những tế bào có khả... nhau, làm cho từ một loại tế bào gốc có thể biệt hóa các loại tế bào khác nhau.Quá trình biệt hóa của tế bào gốc tạo da phụ thuộc vào sự tác động và điều chỉnh của hàng loạt tín hiệu tế bào Các tín hiệu tế bào khác nhau tác động vào tế bào gốc tạo da dẫn đến các quá trình biệt hóa khác nhau, hình thành các loại tế bào khác nhau c Vai trò của gen trong quá trình biệt hóa Biệt hóa tế bào là quá trình tất... người lớn, tế bào sợi ít phân chia, hình ảnh gián phân thường được quan sát ở mô liên kết bị tổn thương Tế bào nguyên bào sợi người là loại tế bào dễ dàng nuôi cấy nhất so với các loại tế bào khác cùng loài Vả lại, nó có tiềm năng ứng dụng vô cùng phong phú, như: Page 15 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA + Là loại tế bào tiềm năng tăng sinh mạnh có thể biệt hóa thành tế bào mỡ, nguyên bào xương,... trình biệt hóa của nhiều loại tế bào khác nhau, tín hiệu tế bào giữ vai trò vô cùng quan trọng Từ một loại tế bào gốc đa năng hình thành nên nhiều loại tế bàogốc khác nhau nhờ tác động của các loại tín hiệu tế bào (signal) khác nhau Tế bào trả lời tín hiệu bằng nhiều con đường khác nhau như ức chế hay hoạt hóa gen, thayđổi bề mặt tế bào, thay đổi hoạt hóa enzyme, Mỗi loại tế bào đều có cơ chế tiếp nhận... cả các mẫu tế bào đều biểu lộ cả kháng nguyên HLA-G và HLA-E Page 21 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA Mức độ biểu hiện HLA-DR trên bề mặt TBGTM màng dây rốn được phân tích qua flowcytometry Mức độ biểu hiện HLA-DR chiếm 1,9 ± 1,53% Page 22 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA Mức độ biểu hiện dấu ấn CD90 đặc thù của tế bào gốc trung mô đạt tới 92,65 ± 6,3% Như vậy, tế bào gốc trung mô... CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA TÀI LIỆU THAM KHẢO Công nghệ sinh học trên người và động vật – Phan Kim Ngọc Công nghệ tế bào gốc – Phan Kim Ngọc Đề tài “Nghiên cứu biệt hóa tế bào gốc trung mô màng dây rốn người để điều trị vết thương bỏng nhiệt thực nghiệm” (Bác sĩ Phan Minh Hoàng – Học viện Quân Y Hà Nội) Tạp chí sinh học 2014, 36(1) – Biệt hóa tế bào gốc trung mô dây rốn thành tế bào giống tế bào. .. 1: Tế bào đối chứng; 2: tế bào biệt hóa sau 1 tuần; 3: tế 5 Giai đoạn nuôi cấy nguyên sợi bào Page 19 of 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA 5.1 Chuẩn bị giá đỡ tế bào Giá đỡ tế bào có thể là collagen, các màng sinh học tổng hợp Giá đỡ sẽ được cắt tròn có diện tích đĩa nuôi cấy khử trùng giá đỡ và đặt vào đĩa nuôi cấy, sau đó cho môi trường nuôi cấy vào sao cho láng ngập đều giá đỡ 5.2 Cấy tế bào. .. Nguyên bào sợi là tế bào phổ biến của mô liên kết, gồm 2 loại có hình thái khác nhau: - Tế bào sợi non: tế bào thường biến dạng với nhiều nhánh bào tương, nhân lớn, hình trứng, ít bắt màu thuốc nhuộm, sợi nhiễm sắc mảnh, hạt nhân lớn Bào tương chứa lưới nội bào có hạt và bộ Golgi phát triển - Tế bào sợi: là những tế bào nhỏ hình thoi, nhân hình gậy, sẫm màu, lưới nội bào, bộ Golgi ít phát triển Tế bào. .. xuất vật liệu cấy ghép +Sử dụng để nghiên cứu di truyền, sản xuất vacxin,… +Sử dụng để thu nhận tế bào mầm Cơ chế biệt hóa của tế bào gốc thành biểu bì da Vị trí của các tế bào sừng trong quá trình biệt hóa ở biểu bì: Như đã biết ở trên, biểu bì gồm 5 lớp Các tế bào gốc và các tế bào sừng có khả năng tăng sinh rất mạnh chỉ có trong lớp sâu nhất của biểu bì (là lớp đáy) Các tế bào gốc bám chặt vào màng ... nguyên Bullouspemphigoid (là glyprotein 200.000 Da) , Laminin (glyprotein 1x10 Da) ,Collagen IV VII Sự phân bố mạch thần kinh Những tiêu động mạch dinh dưỡng cho da đến từ hai đám rối mạch, khu trí... bệnh thẩm mỹ II/ CẤU TRÚC DA Da quan lớn hoạt động nhiều thể người Đối với người Việt trưởng thành diện tích bề mặt da trung bình chiếm khoảng 15 - 17% trọng lượng toàn thể Da có chiều dày khoảng... 26 NGHIÊN CỨU TẾ BÀO GỐC TRONG GHÉP DA động từ vài mm tới hàng mét (tóc), tiết diện từ 0,005 - 0,6 mm tùy theo vùng Cấu tạo chung, lông gồm rễ lông nằm da bao bao chân lông Tại đây, lông phình