tài liệu kiểm nghiệm thuốc bộ y tế

Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page of 217 BỘ Y TẾ KIỂM NGHIỆM THUỐC (DÙNG CHO ðÀO TẠO DƯỢC SĨ TRUNG CẤP) Mã số: T.60.Z.05 NHÀ XUẤT BẢN GIÁO DỤC HÀ NỘI − 2007 Chỉ ñạo biên soạn: VỤ KHOA HỌC VÀ ðÀO TẠO − BỘ Y TẾ Chủ biên: TRẦN TÍCH Những người biên soạn: NGUYỄN THỊ KIỀU ANH TRẦN TÍCH VÕ THỊ THU THUỶ Tham gia tổ chức thảo: ThS PHÍ VĂN THÂM file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page of 217 TS NGUYỄN MẠNH PHA  Bản quyền thuộc Bộ Y tế (Vụ Khoa học ðào tạo) 874 - 2007/CXB/1 - 1918/GD Mã số: 7G068M7 - DAI Lời giới thiệu Thực số ñiều Luật Giáo dục, Bộ Y tế ñã ban hành chương trình khung ñào tạo trung cấp ngành Y tế Bộ Y tế tổ chức biên soạn tài liệu dạy - học môn sở chuyên môn theo chương trình nhằm bước xây dựng sách chuẩn công tác ñào tạo trung cấp y tế Sách KIỂM NGHIỆM THUỐC ñược biên soạn dựa chương trình giáo dục nghề nghiệp Bộ Y tế biên soạn sở chương trình khung ñã ñược phê duyệt Sách ñược tác giả Nguyễn Thị Kiều Anh, Trần Tích, Võ Thị Thu Thuỷ biên soạn theo phương châm: Kiến thức bản, hệ thống; nội dung xác, khoa học; cập nhật tiến khoa học, kỹ thuật ñại thực tiễn Việt Nam Sách ñược cấu trúc gồm 22 bám sát theo chương trình giáo dục với nội dung theo hướng dẫn chuẩn quốc gia Tài liệu tiền ñề ñể giáo viên học sinh trường áp dụng phương pháp dạy − học tích cực Sách KIỂM NGHIỆM THUỐC ñược Hội ñồng chuyên môn thẩm ñịnh sách tài liệu dạy - học trung cấp dạy nghề Bộ Y tế thẩm ñịnh vào năm 2007 Bộ Y tế ñịnh ban hành làm tài liệu dạy - học thức ngành Y tế giai ñoạn 2006 − 2010 Trong trình sử dụng, sách phải ñược chỉnh lý, bổ sung cập nhật Bộ Y tế xin chân thành cảm ơn tác giả Hội ñồng chuyên môn thẩm ñịnh ñã ñầu tư công sức hoàn thành sách; Cảm ơn PGS TS Trịnh Văn Lẩu, TS Phùng Thị Vinh ñã ñọc phản biện, ñể sách sớm hoàn thành kịp thời phục vụ cho công tác ñào tạo nhân lực y tế Lần ñầu xuất bản, mong nhận ñược ý kiến ñóng góp ñồng nghiệp, bạn sinh viên ñộc giả ñể lần xuất sau ñược hoàn thiện VỤ KHOA HỌC VÀ ðÀO TẠO - BỘ Y TẾ file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page of 217 Bài ðẠI CƯƠNG VỀ CÔNG TÁC KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG THUỐC, MỸ PHẨM MỤC TIÊU - Trình bày ñược cần thiết phải kiểm tra chất lượng thuốc - Biết ñược nội dung, hệ thống tổ chức kiểm tra chất lượng thuốc Việt Nam CHẤT LƯỢNG VÀ KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG 1.1 Thuốc yêu cầu chất lượng 1.1.1 Khái niệm thuốc Trong "ðiều lệ thuốc phòng bệnh, chữa bệnh" ban hành ngày 24/1/1991 quy ñịnh: Thuốc sản phẩm có nguồn gốc từ ñộng vật, thực vật, khoáng vật, hay sinh học ñược sản xuất ñể dùng cho người nhằm: - Phòng bệnh, chữa bệnh - Phục hồi, ñiều chỉnh chức thể - Làm giảm triệu chứng bệnh - Chẩn ñoán bệnh - Phục hồi nâng cao sức khoẻ - Làm cảm giác phận hay toàn thân - Làm ảnh hưởng trình sinh sản - Làm thay ñổi hình dáng thể Thuốc lưu hành thị trường ña phần tân dược thuốc y học dân tộc (là thuốc ñược sản xuất theo phương pháp y học cổ truyền) Trong ñó có nhiều thuốc dạng biệt dược (biệt dược thuốc mang tên riêng, gọi tên thương mại riêng sở sản xuất hay hãng sản xuất lần ñầu ñặt cho ñã ñược phép ñưa thị trường ñang ñược bảo hộ quyền sở hữu công nghiệp) 1.1.2 Chất lượng thuốc yêu cầu chất lượng Chất lượng thuốc tổng hợp tính chất ñặc trưng thuốc ñó (ví dụ; có chứa ñúng thành phần theo tỷ lệ quy ñịnh, có ñộ tinh khiết theo yêu cầu, ñóng gói có nhãn quy ñịnh, ) ñược thể file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page of 217 mức ñộ phù hợp với yêu cầu kỹ thuật ñã ñịnh trước tuỳ theo ñiều kiện xác ñịnh kinh tế, kỹ thuật, xã hội, nhằm ñảm bảo cho thuốc ñó ñạt mục tiêu sau: - Có hiệu lực phòng bệnh chữa bệnh - Không có có tác dụng có hại - Ổn ñịnh chất lượng thời hạn ñã xác ñịnh - Tiện dụng dễ bảo quản Thuốc sản phẩm hàng hoá ñặc biệt, có quan hệ trực tiếp ñến sức khoẻ cộng ñồng, ñến chất lượng hiệu việc phòng bệnh, chữa bệnh Vì thuốc phải ñược bảo ñảm chất lượng toàn trình sản xuất (từ nguyên liệu cho ñến thành phẩm), trình bảo quản, lưu thông phân phối ñến người sử dụng Mục tiêu ñảm bảo chất lượng ñược coi ñạt thuốc ñáp ứng ñược yêu cầu sau: - Thuốc có chứa ñúng thành phần theo tỷ lệ quy ñịnh công thức ñã ñược ñăng ký ñược cấp phép (ñịnh tính, ñịnh lượng) - Thuốc ñược phép sản xuất sản xuất theo ñúng quy trình ñã ñăng ký ñược phép - Có ñộ tinh khiết ñạt yêu cầu quy ñịnh - Thuốc ñược ñóng gói ñồ ñựng ñồ bao gói với nhãn thích hợp ñúng quy cách ñã ñăng ký - Thuốc ñược bảo quản, phân phối, quản lý theo quy ñịnh ñể chất lượng thuốc ñược trì suốt tuổi thọ ñã ñăng ký hay thời hạn bảo hành ðể ñạt mục tiêu trên, cần phải có nhiều yếu tố, ñó yếu tố phải có là: a) Thực hành sản xuất thuốc tốt (GMP - Good Manufacture Practice) Nhằm ñể sản xuất ñược thuốc theo dự kiến ñạt tiêu chuẩn kỹ thuật ñã ñặt Muốn vậy, phải tuân thủ quy ñịnh chặt chẽ chi tiết mặt trình sản xuất, bao gồm: 1) Tổ chức nhân 2) Cơ sở nhà xưởng 3) Thiết bị 4) Vệ sinh 5) Nguyên liệu ban ñầu 6) Thao tác sản xuất file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page of 217 7) Dán nhãn ñóng gói 8) Hệ thống kiểm tra chất lượng 9) Tự tra 10) Hồ sơ phân phối 11) Các khiếu nại báo cáo tai biến dùng thuốc b) Thực hành kiểm nghiệm thuốc tốt (GLP - Good Laboratory Practice) Mục ñích GLP nhằm xây dựng ñược ñơn vị làm công tác kiểm nghiệm ñáp ứng ñầy ñủ yêu cầu công tác kiểm tra chất lượng thuốc ñề ra, ñể ñảm bảo kết phép phân tích thu ñược có tính chọn lọc cao, xác ñúng ñắn, có tính pháp lý ðồng thời giúp cho việc tra cứu tìm ñược nhanh chóng nguồn gốc sai sót xảy gặp phải Do vậy, phải tuân thủ quy ñịnh chặt chẽ ñược chuẩn hoá cho sở kiểm nghiệm mặt: 1) Tổ chức nhân 2) Hệ thống chất lượng 3) Cơ sở vật chất 4) Thiết bị phân tích hiệu chỉnh thiết bị phân tích 5) Thuốc thử chất ñối chiếu 6) Tiêu chuẩn chất lượng phương pháp phân tích 7) Mẫu thử 8) Thử nghiệm ñánh giá kết 9) Hồ sơ tài liệu 10) An toàn phòng thí nghiệm c) Thực hành bảo quản thuốc tốt (GSP - Good Storage Practice) Nhằm giám sát, kiểm tra chặt chẽ ñể thuốc ñảm bảo chất lượng ñến người sử dụng Vì vậy, phải tuân thủ quy ñịnh chặt chẽ nghiêm ngặt trình bảo quản, bao gồm: 1) Tổ chức nhân 2) Nhà kho trang thiết bị 3) Vệ sinh file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page of 217 4) Các quy trình bảo quản 5) Thuốc trả 6) Gửi hàng (vận chuyển cách gửi hàng) 7) Hồ sơ tài liệu 1.2 Kiểm tra chất lượng thuốc (Drug quality control) 1.2.1 Khái niệm Kiểm tra chất lượng thuốc trình ño, xem xét, thử nghiệm hay nhiều ñặc tính thuốc (thành phẩm nguyên liệu) so sánh kết với yêu cầu ñã ñặt nhằm xác ñịnh phù hợp ñặc tính ñó Từ khái niệm ta thấy kiểm tra chất lượng thuốc hay kiểm nghiệm thuốc việc sử dụng phương pháp phân tích: lý học, hoá học, hoá lý, sinh vật, vi sinh vật, ñã quy ñịnh ñể xác nhận thuốc hay nguyên liệu làm thuốc có ñạt tiêu chuẩn quy ñịnh hay không Nói cách cụ thể, kiểm tra chất lượng thuốc nhằm trả lời câu hỏi: - ðây có phải thuốc cần kiểm tra không? - Có ñảm bảo hoạt lực hay hàm lượng ñã ñăng ký không? - Có ñạt ñộ tinh khiết theo yêu cầu không? - Có bị phân huỷ hay biến chất không? - ðồ bao gói, nhãn có ñúng quy cách không? Như vậy, mục tiêu công tác kiểm tra chất lượng thuốc là: - ðể người sử dụng ñược dùng thuốc ñảm bảo chất lượng, ñạt hiệu sử dụng cao - Phát thuốc không ñạt tiêu chuẩn, thuốc giả, thuốc phẩm chất, ñể xử lý không cho phép lưu hành thị trường Trong ngành Y tế ñã quy ñịnh: Tất thuốc nguyên liệu làm thuốc ñều phải ñược kiểm nghiệm xác ñịnh chất lượng, ñạt tiêu chuẩn quy ñịnh ñược ñưa vào sử dụng Bởi thuốc phải ñược kiểm tra chất lượng cách nghiêm ngặt, chặt chẽ, bảo ñảm cho thuốc ñạt chất lượng hoạt ñộng sản xuất, lưu thông phân phối, xuất nhập khẩu, quản lý sử dụng thuốc 1.2.2 Khái niệm thuốc ñạt không ñạt tiêu chuẩn, thuốc giả mạo, thuốc phẩm chất a) Thuốc ñạt tiêu chuẩn (thuốc ñạt chất lượng) Là thuốc ñáp ứng ñầy ñủ yêu cầu kỹ thuật tiêu chuẩn ñã ñề (hay thuốc ñáp ứng ñầy ñủ tiêu chất lượng tiêu chuẩn chất lượng ñã ñăng ký) file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page of 217 b) Thuốc không ñạt tiêu chuẩn Là thuốc không ñáp ứng tiêu chất lượng tiêu chuẩn ñã ñăng ký Thuốc không ñạt tiêu chuẩn thuốc chất lượng c) Thuốc giả Theo quy ñịnh Tổ chức Y tế giới, thuốc giả chế phẩm ñược sản xuất không ñúng với nhãn khía cạnh nhận dạng hay nguồn gốc thuốc, với cố ý mang tính chất lừa ñảo nhà sản xuất Sản xuất sai thành phần công thức ñã ñăng ký, không ñủ hàm lượng hoạt chất, ñược ñóng gói bao bì giả mạo Như vậy, nói thuốc giả sản phẩm người sản xuất mang ý ñồ lừa ñảo, gian lận Có thể dựa vào số biểu ñể phát hiện: - Thuốc có dược chất - Thuốc có chứa dược chất khác với tên dược chất ghi nhãn - Nhãn, bao gói giống hay gần giống với nhãn, bao gói thuốc khác, d) Thuốc phẩm chất Là thuốc không ñạt tiêu chuẩn kỹ thuật mà trước ñó ñã ñạt Mức ñộ không ñạt tiêu chuẩn có nhiều hình thái khác Tất nguyên nhân gây xác minh ñược phương pháp khoa học, kỹ thuật cho phép Các nguyên nhân ñó là: - Do kỹ thuật sản xuất, bảo quản không ñúng, nên thuốc tự biến chất - Do ñồ bao gói không ñạt tiêu chuẩn, nên ñã ñưa tạp chất vào thuốc - Do tuổi thọ (hạn dùng) ñã hết - Do nguyên, phụ liệu không ñạt tiêu chuẩn - Do tác ñộng môi trường: nhiệt ñộ, ánh sáng, ñộ ẩm, HỆ THỐNG TỔ CHỨC QUẢN LÝ, KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG THUỐC Nhà nước giao cho Bộ Y tế chịu trách nhiệm quản lý toàn diện chất lượng thuốc Vì vậy, hệ thống tổ chức, quản lý, kiểm tra chất lượng thuốc ngành Y tế ñược chia làm phần: Hệ thống quản lý chất lượng thuốc; Hệ thống kiểm tra chất lượng thuốc; Hệ thống tra dược 2.1 Hệ thống quản lý chất lượng thuốc 2.1.1 Cục quản lý Dược Việt Nam Là quan ñược Bộ Y tế uỷ quyền thực nhiệm vụ lĩnh vực quản lý nhà nước chất lượng thuốc: - Xây dựng quy hoạch, kế hoạch quản lý chất lượng thuốc tổ chức kế hoạch ñã ñược phê file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page of 217 duyệt - Xây dựng văn pháp quy tiêu chuẩn chất lượng thuốc ñể Bộ ban hành, hướng dẫn kiểm tra việc thực văn - Quản lý việc ñăng ký tiêu chuẩn sở Cung cấp thông tin khoa học, kỹ thuật liên quan ñến ñảm bảo chất lượng thuốc - Chỉ ñạo, giám sát hệ thống kiểm tra chất lượng thuốc toàn quốc - Kiểm tra cấp giấy chứng nhận sở sản xuất ñạt tiêu chuẩn "Thực hành tốt sản xuất thuốc" phòng kiểm nghiệm ñạt tiêu chuẩn "Thực hành tốt kiểm nghiệm thuốc" - Tổ chức hướng dẫn nghiệp vụ cho cán quản lý chất lượng thuốc ngành Y tế, tổ chức ñào tạo bồi dưỡng nghiệp vụ tiêu chuẩn - ño lường - chất lượng thuốc - Phối hợp với tra Bộ Y tế thực chức kiểm tra, tra nhà nước chất lượng thuốc xử lý vi phạm pháp luật chất lượng thuốc theo thẩm quyền 2.1.2 Cơ quan quản lý nhà nước chất lượng thuốc ñịa phương Sở Y tế ñạo quản lý toàn diện chất lượng thuốc ñịa phương (thường uỷ quyền cho phòng nghiệp vụ Dược) có nhiệm vụ: - Phổ biến, hướng dẫn tổ chức thực văn pháp luật quản lý chất lượng thuốc ñịa phương - Thực chức kiểm tra, tra nhà nước chất lượng thuốc xử lý vi phạm chất lượng thuốc phạm vi ñịa phương 2.2 Hệ thống kiểm tra chất lượng thuốc 2.2.1 Cơ quan kiểm tra chất lượng Nhà nước thuốc - Ở Trung ương Viện Kiểm nghiệm trung ương (ở Hà Nội) Viện Kiểm nghiệm thành phố Hồ Chí Minh Giúp Bộ Y tế quản lý ñạo công tác kiểm tra chất lượng thuốc toàn quốc mặt kỹ thuật Có nhiệm vụ: + Nghiên cứu xây dựng tiêu chuẩn Việt Nam thuốc + Kiểm tra xác ñịnh chất lượng thuốc lưu hành thị trường + Thẩm tra kỹ thuật, giúp Bộ xét duyệt tiêu chuẩn kiểm nghiệm ñể xét cấp ñăng ký sản xuất lưu hành thuốc Việt Nam + Phát hành chất chuẩn chất ñối chiếu dùng kiểm nghiệm file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page of 217 + Làm trọng tài chất lượng có tranh chấp khiếu nại chất lượng thuốc + Tham gia ñào tạo cán làm công tác kiểm nghiệm + Tư vấn sách chất lượng thuốc quốc gia + Xây dựng tiêu chuẩn phòng kiểm nghiệm thuốc ñạt tiêu chuẩn giúp ñỡ, kiểm tra công nhận phòng kiểm nghiệm thuốc nước + Kiểm tra việc kiểm nghiệm thuốc theo tiêu chuẩn phạm vi toàn quốc - Ở tỉnh, thành phố trực thuộc Trung ương trung tâm kiểm nghiệm dược phẩm, mỹ phẩm ðó quan trực thuộc Sở Y tế, có nhiệm vụ Viện Kiểm nghiệm trung ương Viện Kiểm nghiệm thành phố Hồ Chí Minh giới hạn phạm vi tỉnh, thành phố 2.2.2 Hệ thống tự kiểm tra chất lượng sở (phòng kiểm nghiệm, phòng KCS) Công tác kiểm tra chất lượng thuốc ñược thực tất sở có liên quan tới thuốc Tuỳ theo quy mô sở sản xuất (xí nghiệp, công ty trung ương ñịa phương, sở nhỏ, ), kinh doanh (công ty, cửa hàng, ), bệnh viện (trung ương, ñịa phương) mà lập phòng kiểm nghiệm, phòng KCS hay tổ kiểm nghiệm ñể tự kiểm tra chất lượng thuốc Với sở sản xuất, bắt buộc phải có phận tự kiểm tra chất lượng Bộ phận phải có khả kiểm nghiệm xác ñịnh chất lượng thuốc ñược sản xuất sở theo tiêu chuẩn ñã duyệt Phải kiểm nghiệm, theo dõi ñược chất lượng thuốc suốt trình sản xuất từ nguyên liệu, bán thành phẩm, thành phẩm Phải lập hồ sơ theo dõi lô sản phẩm Cơ sở sản xuất phải chịu trách nhiệm thuốc sở sản xuất Các sở bảo quản, phân phối thuốc phải có phận tự kiểm nghiệm (với công ty lớn) kiểm tra, kiểm soát ñể quản lý, ñánh giá chất lượng thuốc, theo dõi chất lượng trình bảo quản, cung cấp hồ sơ chất lượng cho ñơn vị sử dụng thuốc Các bệnh viện, tuỳ theo quy mô lớn, nhỏ phải có phận kiểm nghiệm thuốc tự pha chế, kiểm tra, kiểm soát chất lượng thuốc trước phân phối ñến người sử dụng 2.3 Hệ thống tra dược Cùng quan quản lý nhà nước chất lượng thuốc, thực chức kiểm tra, tra nhà nước chất lượng thuốc ñược tổ chức từ trung ương ñến ñịa phương TỰ LƯỢNG GIÁ VÀ BÀI TẬP Mục tiêu công tác kiểm tra chất lượng thuốc Các yêu cầu ñể ñạt mục tiêu Nội dung công tác kiểm tra chất lượng thuốc ðiều kiện ñể thuốc ñược ñưa vào lưu thông, phân phối, sử dụng file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 10 of 217 Thế thuốc ñạt không ñạt tiêu chuẩn? Thuốc giả mạo? Thuốc phẩm chất? Trình bày hệ thống tổ chức kiểm tra chất lượng thuốc Việt Nam Chọn câu trả lời ñúng cho câu hỏi cách khoanh tròn chữ ñầu câu ñược chọn: Theo phân cấp: a) Hệ thống quản lý chất lượng thuốc Việt Nam gồm: A Cục Quản lý dược Việt Nam B Viện Kiểm nghiệm trung ương C Trung tâm kiểm nghiệm dược phẩm, mỹ phẩm tỉnh D Phòng nghiệp vụ dược - Sở Y tế b) Hệ thống kiểm tra chất lượng thuốc Việt Nam gồm: A Phòng Thanh tra dược - Sở Y tế B Viện Kiểm nghiệm thành phố Hồ Chí Minh C Trung tâm kiểm nghiệm dược phẩm, mỹ phẩm tỉnh D Phòng nghiệp vụ dược - Sở Y tế Theo quy ñịnh: a) Một thuốc ghi nhãn viên nén paracetamol 500mg kiểm nghiệm chứa hoạt chất aspirin, chế phẩm ñó là: A Thuốc ñạt tiêu chuẩn B Thuốc không ñạt tiêu chuẩn C Thuốc giả D Thuốc phẩm chất b) Thuốc nhỏ mắt cloramphenicol 0,4% có tiêu yêu cầu chất lượng, ñó có tiêu ‘’thể tích’’ không ñạt, chế phẩm ñó là: A Thuốc ñạt tiêu chuẩn B Thuốc không ñạt tiêu chuẩn C Thuốc giả file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 203 of 217 Pepton 10g Cao thịt 5g NaCl 5g Nước cất vừa ñủ 1000ml pH = 7,4 ± 0,2 − Môi trường ñể phát vi nấm: Môi trường Sabouraud lỏng (MT2) Pepton 10g Glucose 40g Nước cất vừa ñủ 1000ml pH = 5,8 ± 0,2 Hoà tan thành phần vào nước nguội, ñun nóng cho tan hoàn toàn, ñiều chỉnh pH dung dịch NaOH 1N HCl 1N ðiều chỉnh cho ñủ thể tích Phân môi trường vào ống nghiệm, ống 10ml Tiệt trùng hấp ướt 1atm 15 - 20 phút 2.2 Phương pháp tiến hành Dùng cồn 70o sát trùng ống tiêm vitamin B1 Bẻ ñầu ống tiêm kẹp sắt vô trùng Hút toàn thuốc ống tiêm vitamin B1 pipet bơm tiêm vô trùng cho vào ống nghiệm ñã chuẩn bị 10ml môi trường MT1 ống thuốc khác ñược cấy vào 10ml môi trường MT2 (mỗi môi trường làm ống) Ủ môi trường phát vi khuẩn 30 - 35oC môi trường phát vi nấm 20 - 25oC vòng 14 ngày 2.3 ðọc kết Nếu suốt thời gian ủ, không thấy có vi khuẩn, vi nấm phát triển chế phẩm vô khuẩn Nếu có nhiều ống nuôi cấy có vi sinh vật mọc cần tiến hành làm lại lần thứ hai, ñồng thời giữ lại môi trường có vi khuẩn vi nấm mọc Ở lần nuôi cấy thứ hai, ống có vi sinh vật mọc kết luận mẫu thử vô trùng; trường hợp có vi sinh vật mọc cần tiến hành phân lập, so sánh vi khuẩn, vi nấm môi trường cấy lại với vi khuẩn, nấm ñã mọc môi trường cũ Nếu nhận thấy vi khuẩn, vi nấm sau phân lập lần hai giống lần ñầu chế phẩm không ñạt tiêu chuẩn vô khuẩn, trường hợp vi khuẩn vi nấm khác biệt với lần thử nghiệm ñầu tiên cần tiến hành thử nghiệm lần thứ ba Ở lần thứ ba, không phát thấy vi khuẩn, vi nấm phát triển chế phẩm ñược coi vô trùng ngược lại thấy xuất vi khuẩn, vi nấm chế phẩm ñược coi không ñạt tiêu chuẩn vô file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 204 of 217 trùng XÁC ðỊNH SỐ LƯỢNG VI KHUẨN HIẾU KHÍ, VI NẤM TRONG XIRÔ BỔ PHẾ CHỈ KHÁI LỘ 3.1 Pha chế môi trường − Môi trường thạch thường (MT1) Pepton 10g Cao thịt 5g NaCl 5g Thạch 15g Nước cất vừa ñủ 1000ml pH = 7,4 ± 0,2 − Môi trường Sabouraud - kháng sinh (MT2) Pepton 10g Glucose 40g Cloramphenicol 50mg Thạch 15g Nước cất vừa ñủ 1000ml pH = 5,8 ± 0,2 − Cách pha chế: Cân thành phần theo công thức, ñun cho tan thạch trước, sau ñó thêm thành phần khác ñã ñược hoà vào nước, thêm nước cho ñủ thể tích ðun sôi, ñiều chỉnh pH cho ñạt theo yêu cầu môi trường Tiệt trùng môi trường cách hấp ướt 1atm 15 - 20 phút 3.2 Phương pháp tiến hành − Sát trùng bên lọ chế phẩm thử cồn 70o − Pha loãng chế phẩm nồng ñộ 10-1; 10-2: Dùng pipet lấy 10ml chế phẩm pha 90ml NaCl 0,9% ñể ñược dung dịch có nồng ñộ 10-1 Từ dung dịch pha loãng tiếp thành dung dịch có nồng ñộ 10-2 Cho vào hộp petri 1ml dung dịch ñã pha loãng Thêm 15ml môi trường thạch file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 205 of 217 thường ñã ñun chảy ñể nguội ñến 45oC vào hộp Petri ñể xác ñịnh số lượng vi khuẩn Làm tương tự với môi trường Sabouraud – kháng sinh ñể xác ñịnh số lượng vi nấm ðậy hộp, trộn ñều cách xoay hộp Petri Mỗi nồng ñộ làm ñĩa thử song song − Nuôi cấy: + Với ñĩa xác ñịnh số lượng vi khuẩn: nuôi cấy tủ ấm nhiệt ñộ 35oC 24 - 48 + Với ñĩa xác ñịnh số lượng vi nấm: nuôi cấy tủ ấm nhiệt ñộ 20 - 25oC ngày 3.3 ðọc kết Sau thời gian nuôi cấy, kiểm tra trình mọc vi khuẩn vi nấm, ñếm số khuẩn lạc vi khuẩn số khuẩn lạc vi nấm mọc ñĩa Petri Tính số lượng vi khuẩn vi nấm 1ml chế phẩm theo công thức: Trong ñó: X số lượng vi khuẩn vi nấm 1ml chế phẩm A1 A2 số khuẩn lạc vi khuẩn vi nấm trung bình ñĩa ñộ pha loãng tương ứng K1 K2 Trong trường hợp khuẩn lạc mọc ñĩa có ñộ pha loãng 1/10 kết luận chế phẩm có 10 khuẩn lạc 1ml chế phẩm TỰ LƯỢNG GIÁ VÀ BÀI TẬP Mục ñích kỹ thuật thử vô khuẩn gì? Nguyên tắc kỹ thuật thử vô khuẩn phương pháp nuôi cấy trực tiếp Tiêu chuẩn thử vô khuẩn thường ñược áp dụng cho chế phẩm nào? Cách pha chế môi trường nuôi cấy lỏng? Cách tiến hành thử vô khuẩn phương pháp nuôi cấy trực tiếp? Nguyên tắc ñể xác ñịnh số lượng vi khuẩn hiếu khí, vi nấm gam 1ml chế phẩm? Cách pha chế môi trường nuôi cấy ñặc? Phương pháp tiến hành thử nghiệm ñể xác ñịnh số lượng vi khuẩn, vi nấm 1ml chế phẩm file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 206 of 217 ðÁP ÁN Bài 0,01053N 0,0978N Bài A - mẫu thử ñạt B - mẫu thử không ñạt Bài 3 19,09o; ñạt 0,8524 Bài ðạt ðạt, 95,52% ðạt, 101,37% Bài ðạt ðạt, 97,47% C B Bài 6 ðạt, 96,1% Không ñạt, 115,3% Bài ðạt, 95,99% B file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 207 of 217 A Phụ lục BẢNG NGUYÊN TỬ LƯỢNG CÁC NGUYÊN TỐ Theo tài liệu Liên ñoàn quốc tế hoá học tuý ứng dụng xuất năm 1989 (Pure App.Chem.1991,63,978.) Tên nguyên tố * Ký hiệu Nguyên tử số Nguyên tử lượng Argon Ar 18 39,948 Arsen As 33 74,9216 Bạc (Argentum) Ag 47 107,8682 Bari Ba 56 137,327 Beryli Be 9,0122 Bismuth Bi 83 208,9804 Bor B 10,811 Brom Br 35 79,904 Cadmi Cd 48 112,411 Cesi Cs 55 132,9054 Calci Ca 20 40,078 Carbon C 12,011 Ceri Ce 58 140,115 Chì (Plumbum) Pb 82 207,2 Clor Cl 17 35,4527 Crom Cr 24 51,9961 Cobalt Co 27 58,9332 ðồng (Cuprum) Cu 29 63,546 Dysprosi Dy 66 162,50 Erbi Er 68 167,26 Europi Eu 63 151,965 F 18,9984 Fluor file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 208 of 217 Gadolini Gd 64 157,25 Gali Ga 31 69,723 Germani Ge 32 72,61 Hafni Hf 72 178,49 Heli He 4,0026 Holmi Ho 67 163,9303 Hydrogen H 1,0079 Indi In 49 114,82 Iod I 53 126,9045 Iridi Ir 77 192,22 Kali K 19 39,0983 Kẽm (Zincum) Zn 30 65,39 Krypton Kr 36 83,80 Lanthan La 57 138,9055 Lithi Li 6,941 Luteti Lu 71 174,967 Lưu huỳnh (Sulfur) S 16 32,066 Magnesi Mg 12 24,3050 Mangan Mn 25 54,9381 Molybden Mo 42 95,94 Natri Na 11 22,9898 Neodymi Nd 60 144,24 Neon Ne 10 20,1797 Nhôm (Aluminium) Al 13 26,9815 Nickel (Niccolum) Ni 28 58,6934 Niobi Nb 41 92,9064 Nitrogen N 14,0067 Osmi Os 76 190,2 Oxygen O 15,9994 Paladi Pd 46 106,42 file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 209 of 217 Phosphor P 15 30,9738 Platin Pt 78 195,08 Praseodymi Pr 59 140,9077 Rheni Re 75 186,207 Rhodi Rh 45 102,9055 Rubidi Rb 37 85,4678 Rutheni Ru 44 101,07 Samari Sm 62 150,36 Sắt (Iron) Fe 26 55,847 Scandi Sc 21 44,9559 Selen Se 34 78,96 Silic (Silicium) Si 14 28,0855 Stibi (Stibium) Sb 51 121,757 Stronti Sr 38 87,62 Tantal Ta 73 180,9479 Techneti Tc 43 (97) Telur Te 52 127,60 Terbi Tb 65 158,9253 Thali Tl 81 204,3833 Thiếc (Stanium) Sn 50 118,70 Thori Th 90 232,0381 Thuli Tm 69 168,9342 Thuỷ ngân (Hydrragyrum) Hg 80 200,59 Titan Ti 22 47,88 Uran U 92 238,0289 Vanadi V 23 50,9415 Vàng (Aurum) Au 79 196,9665 Wolfram W 74 183,85 Xenon Xe 54 131,29 Yterbi Yb 70 173,04 file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 210 of 217 Ytri Y 39 88,9059 Zirconi Zn 40 91,224 Phụ lục CÁC PHẢN ỨNG ðỊNH TÍNH MỘT SỐ ION Acetat A ðun nóng chế phẩm với lượng acid oxalic (TT) Hơi xông có mùi acid acetic B Hoà tan khoảng 30ml chế phẩm 3ml nước, lấy 3ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm 0,25ml dung dịch lanthan nitrat (TT), 0,1ml dung dịch iod 0,1 N 0,05ml dung dịch amoniac M (TT) ðun nóng hỗn hợp cẩn thận ñến sôi, sau vài phút xuất tủa màu xanh hay màu xanh thẫm Amoni (muối) A Hoà tan khoảng 0,2g chế phẩm 2ml nước, lấy lượng dung dịch theo dẫn chuyên luận, thêm 2ml dung dịch natri hydroxyd M (TT), ñun nóng, xông khí có mùi ñặc biệt làm xanh giấy quỳ ñỏ ñã thấm nước B Hoà tan khoảng 10mg chế phẩm 5ml nước, hay lượng dung dịch theo dẫn chuyên luận, thêm 0,2ml thuốc thử Nessler (TT), hỗn hợp có màu vàng hay tủa vàng nâu Bạc (muối) A Hoà tan khoảng 10ml chế phẩm 5ml nước, lấy lượng dung dịch theo dẫn chuyên luận, thêm giọt dung dịch acid hydrocloric 10% (TT) xuất tủa trắng lổn nhổn, tủa không tan acid nitric loãng (TT) tan dung dịch amoniac (TT) B Hoà tan 20mg chế phẩm 5ml nước, lấy lượng dung dịch theo dẫn chuyên luận, thêm lượng dung dịch amoniac (TT) có tủa màu nâu xám, tiếp tục thêm dung dịch amoniac (TT), tủa tan Sau ñó thêm vài giọt formalin (TT), ñun nóng dung dịch có tủa bạc kim loại bám vào thành ống nghiệm (phản ứng tráng gương) Bari (muối) A Lấy lượng dung dịch muối bari dẫn chuyên luận, thêm vài giọt acid sulfuric loãng (TT) xuất tủa trắng, tủa không tan acid hydrocloric 10% (TT) acid nitric loãng (TT) B Dùng dây bạch kim ñũa thuỷ tinh lấy lượng chất thử ñốt lửa không màu, lửa nhuộm thành màu xanh lục vàng, nhìn qua kính thuỷ tinh màu lục lửa có màu xanh Benzoat A Lấy 1ml dung dịch trung tính 10% chế phẩm, lượng chế phẩm theo dẫn chuyên luận, thêm 0,5ml dung dịch sắt (III) clorid 10% (TT) xuất tủa vàng thẫm, tủa tan ether (TT) B Lấy khoảng 0,2g chế phẩm lượng chế phẩm theo dẫn chuyên luận, làm ẩm 0,2ml ñến 0,3ml acid sulfuric (TT) ñun nóng nhẹ ñáy ống nghiệm, có tinh thể thăng hoa trắng bám thành ống file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 211 of 217 C Hoà tan 0,5g chế phẩm 10ml nước dùng 10ml dung dịch theo dẫn chuyên luận, thêm 0,5ml acid hydrocloric (TT), cho tủa Kết tinh lại tủa nước làm cho khô áp suất giảm, tủa thu ñược có nhiệt ñộ chảy từ 120oC ñến 124oC Bismuth (muối) A Thêm 10ml acid hydrocloric 10% (TT) vào 0,5g chế phẩm, dùng 10ml dung dịch theo dẫn chuyên luận ðun sôi phút, ñể nguội lọc cần Thêm 20ml nước vào 1ml dung dịch thu ñược trên, xuất tủa trắng hay vàng, tủa chuyển thành nâu thêm 0,05 ñến 0,1ml dung dịch natri sulfid (TT) B Thêm 10ml dung dịch acid nitric 2M (TT) vào 40 ñến 50mg chế phẩm, dùng 10ml chế phẩm ñã ñược xử lý theo dẫn chuyên luận ðun sôi phút, ñể nguội lọc cần Thêm 2ml dung dịch thioure 10% (TT) vào 5ml dịch lọc thu ñược trên, xuất màu vàng da cam hay tủa da cam Thêm 4ml dung dịch natri fluorid 2,5% (TT), dung dịch không ñược màu vòng 30 phút Borat A Hoà tan khoảng 0,1g chế phẩm vào 0,1ml acid sulfuric (TT) chén sứ, thêm 3ml methanol (TT), trộn ñều châm lửa vào hỗn hợp, hỗn hợp cháy với lửa màu lục B Lấy 5ml dung dịch chế phẩm 10%, thêm 0,5ml acid hydrocloric loãng (TT) 0,5ml cồn nghệ (CT), cho màu nâu; thêm 1ml dung dịch natri hydroxyd 10% (TT), màu nâu chuyển thành lam hay lục Bromid A Hoà tan lượng chế phẩm có chứa khoảng 3mg ion bromid 2ml nước, dùng 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Acid hoá acid nitric loãng (TT) thêm 0,4ml dung dịch bạc nitrat 4% (TT) Lắc ñể yên tạo tủa lổn nhổn màu vàng nhạt Lọc lấy tủa, rửa tủa ba lần, lần với 1ml nước Phân tán tủa 2ml nước, thêm 1,5ml dung dịch amoniac 10 M (TT) tủa khó tan B Hoà tan lượng chế phẩm có chứa khoảng 5mg ion bromid 2ml nước, lấy lượng dung dịch theo dẫn chuyên luận, acid hoá dung dịch acid sulfuric loãng (TT), thêm 1ml nước clo (TT) 2ml cloroform (TT), lắc Lớp cloroform có màu ñỏ nâu Calci (muối) A Lấy khoảng 20mg chế phẩm, lượng chế phẩm theo dẫn chuyên luận, hoà tan 5ml dung dịch acid acetic M (TT), thêm 0,5ml dung dịch kali ferocyanid (TT), dung dịch trong, thêm khoảng 50mg amoni clorid (TT), tạo thành tủa kết tinh trắng B Thêm vào dung dịch chế phẩm theo dẫn chuyên luận vài giọt dung dịch amoni oxalat 4% (TT), tạo thành tủa trắng, tủa tan acid acetic M (TT), tan acid hydrocloric (TT) Chì (muối) A Hoà tan 0,1g chế phẩm 1ml dung dịch acid acetic M (TT), lấy 1ml dung dịch theo dẫn chuyên luận, thêm 2ml dung dịch kali cromat (TT), tủa vàng tạo thành, tủa tan dung dịch natri hydroxyd 10 M (TT) B Hoà tan 50mg chế phẩm 1ml dung dịch acid acetic M, 1ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm 10ml nước 0,2ml dung dịch kali iodid 10% (TT), tủa vàng tạo thành; ñun sôi ñến phút cho tủa tan ra, ñể nguội, tủa lại xuất mảnh vàng Citrat file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 212 of 217 A Hoà tan khoảng 0,1g chế phẩm 2ml nước, cần trung tính hoá dung dịch amoniac (TT), dùng lượng dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm 1ml dung dịch calci clorid 10% (TT), dung dịch ðun sôi dung dịch xuất tủa trắng, tan acid acetic M (TT) B Hoà tan khoảng 0,1g chế phẩm 2ml nước, lấy 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận, thêm vài giọt dung dịch acid sulfuric loãng (TT), ñun ñến sôi, sau ñó thêm vài giọt dung dịch kali permanganat (TT), lắc, màu tím biến Chia dung dịch làm hai phần, phần dung dịch thêm vài giọt dung dịch thuỷ ngân (II) sulfat (TT), phần thứ hai thêm vài giọt dung dịch nước brom (TT), tủa trắng ñược tạo thành hai dung dịch Clorid A Hoà tan lượng chế phẩm tương ứng với 2mg ion clorid 2ml nước dùng 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Acid hoá dung dịch acid nitric M (TT), thêm 0,4ml dung dịch bạc nitrat 2% (TT) Lắc ñể yên, tạo tủa trắng lổn nhổn Lọc lấy tủa, rửa tủa lần, lần với 1ml nước, thêm vào tủa 2ml nước, thêm 1,5ml dung dịch amoniac 10 M, tủa tan dễ dàng B Cho vào ống nghiệm lượng chế phẩm tương ứng khoảng từ 10 ñến 50mg ion clorid (TT), ñun nóng, giải phóng khí clo có mùi ñặc biệt, khí làm xanh giấy tẩm hồ tinh bột có kali iodid (CT) ñã thấm nước ðồng (muối) A Hoà tan khoảng 10mg chế phẩm 2ml nước, dùng 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận, thêm vài giọt dung dịch kali ferocyanid (TT), có tủa màu ñỏ nâu không tan acid acetic (TT) B Hoà tan khoảng 10mg chế phẩm 2ml nước, dùng 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm vài giọt dung dịch amoniac (TT), có tủa màu xanh, tủa tan thuốc thử thừa tạo thành dung dịch màu xanh lam thẫm Iodid A Hoà tan lượng chế phẩm tương ứng khoảng 4mg ion iodid 2ml nước, dùng 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Acid hoá dung dịch acid nitric M (TT), thêm 0,4ml dung dịch bạc nitrat 4% (TT) Lắc ñể yên, có tủa tạo thành màu vàng nhạt, lổn nhổn Lọc lấy tủa Phân tán tủa 2ml nước, thêm 1,5ml dung dịch amoniac 10 M (TT), tủa không tan B Hoà tan lượng chế phẩm tương ứng với 4mg ion iodid 2ml nước, dùng 2ml dung dịch sắt (III) clorid 3% (TT), giọt acid hydrocloric (TT), 1ml cloroform (TT) lắc, ñể yên Lớp cloroform có màu tím Kali (muối) A Hoà tan 0,1g chế phẩm 2ml nước, dùng 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm 1ml dung dịch natri carbonat 10% (TT) ñun nóng, không tạo thành tủa Thêm vào lúc nóng 0,05ml dung dịch natri sulfid (TT), không tạo thành tủa Làm nguội nước ñá thêm 2ml dung dịch acid tartric 15% (TT) ðể yên, tạo thành tủa kết tinh trắng B Hoà tan khoảng 40mg chế phẩm 1ml nước dùng 1ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm 1ml dung dịch acid acetic M (TT) 1ml dung dịch natri cobal trinitrit 10% (TT) pha, tạo thành tủa vàng hay da cam Kẽm (muối) Hoà tan 0,1g chế phẩm 5ml nước, dùng 5ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm 0,2ml dung dịch natri hydroxyd 10 M (TT), tạo thành tủa trắng, tủa tan thêm 2ml natri hydroxyd 10 M (TT) Thêm 10ml dung dịch amoni clorid (TT), dung dịch trong, thêm 0,1ml dung dịch natri sulfid (TT), tủa trắng ñược tạo thành file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 213 of 217 Magnesi (muối) Hoà tan khoảng 15mg chế phẩm 2ml nước, lấy 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm 1ml dung dịch amoniac M (TT), tạo thành tủa trắng, tủa tan thêm 1ml dung dịch amoni clorid (TT) Thêm 1ml dung dịch dinatri hydrophosphat (TT), có tủa kết tinh trắng Natri (muối) A Dùng dây bạch kim hay ñũa thuỷ tinh, lấy hạt chất thử hay giọt dung dịch chế phẩm, ñưa vào lửa không màu, lửa nhuộm thành màu vàng B Hoà tan khoảng 50mg chế phẩm 2ml nước, lấy 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Acid hoá dung dịch acid acetic loãng (TT), thêm 1ml dung dịch magnesi uranyl acetat (TT), cọ thành ống nghiệm ñũa thuỷ tinh (nếu cần), có tủa kết tinh vàng Nhôm (muối) Hoà tan khoảng 0,1g chế phẩm 2ml nước, dùng 2ml dung dịch dẫn chuyên luận Thêm giọt dung dịch amoniac (TT) tạo tủa keo trắng, tủa chuyển thành ñỏ thêm vài giọt dung dịch alizarin S (TT) Nitrat A Hoà tan 0,1g chế phẩm 2ml nước, dùng 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm từ từ 2ml acid sulfuric (TT), trộn ñể nguội Cho cẩn thận (không trộn) dọc theo thành ống nghiệm 1ml dung dịch sắt (II) sulfat (TT) Ở miền tiếp giáp hai chất lỏng có vòng màu nâu B Trộn 0,1ml nitrobenzen (TT) với 0,2ml acid sulfuric (TT), thêm lượng chế phẩm ñã tán nhỏ tương ứng với khoảng 1mg ion nitrat lượng dung dịch theo dẫn chuyên luận, ñể yên phút, làm lạnh nước ñá vài phút, vừa lắc vừa thêm từ từ 5ml nước, sau ñó 5ml dung dịch natri hydroxyd 10 M (TT) 5ml aceton (TT), lắc ñể yên Lớp chất lỏng có màu tím thẫm Oxalat A Hoà tan khoảng 0,1g chế phẩm 5ml nước, dùng 5ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm 0,5ml dung dịch calci clorid 10% (TT), tạo tủa trắng, tủa tan acid vô cơ, không tan dung dịch acid acetic M (TT) B Hoà tan khoảng 0,1g chế phẩm 5ml nước, dùng 5ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Acid hoá dung dịch acid sulfuric 10% (TT), dung dịch làm màu dung dịch kali permanganat (TT) ñun nóng Peroxyd A Nhỏ giọt dung dịch chế phẩm vào 10ml dung dịch acid sulfuric 2% (TT), thêm 2ml ether (TT) giọt dung dịch kali dicromat (TT), lắc Ở lớp ether màu xanh B Lấy 1ml dung dịch chế phẩm, acid hoá nhẹ acid sulfuric 10% (TT), thêm giọt dung dịch kali iodid (TT), giải phóng iod, làm xanh hồ tinh bột (CT) Phosphat A Hoà tan khoảng 50mg chế phẩm 3ml nước, dùng 3ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Acid hoá dung dịch acid nitric loãng (TT), thêm 2ml dung dịch amoni molybdat (TT) tủa vàng file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 214 of 217 B Hoà tan khoảng 0,1g chế phẩm 2ml nước, dùng 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Trung tính hoá dung dịch acid nitric loãng (TT) dung dịch natri hydroxyd (TT) Thêm 1ml dung dịch bạc nitrat 4% (TT) tạo tủa vàng, màu tủa không thay ñổi ñun sôi, tủa tan thêm dung dịch amoniac 10 M (TT) Sắt (II) (muối) Hoà tan lượng chế phẩm tương ứng với 10mg sắt (II) 1ml nước, dùng 1ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm 1ml dung dịch kali fericyanid (TT), tạo tủa xanh lam, tủa không tan dung dịch acid hydrocloric M (TT) Sắt (III) (muối) A Hoà tan lượng chế phẩm có chứa khoảng 0,1mg sắt (III) 3ml nước, dùng 3ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm 1ml dung dịch acid hydrocloric M (TT) 1ml dung dịch kali thiocyanat (TT), dung dịch có màu ñỏ Dùng ống nghiệm, cho vào ống 1ml dung dịch thu ñược Một ống cho thêm 5ml alcol amylic (TT) ether (TT), lắc ñể yên, lớp dung môi có màu hồng Cho vào ống nghiệm 3ml dung dịch thuỷ ngân (II) clorid (TT), màu ñỏ biến B Hoà tan lượng chế phẩm tương ứng với 1mg sắt (III) 1ml nước, dùng 1ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm 1ml dung dịch kali ferocyanid (TT) tạo tủa xanh lam, tủa không tan dung dịch acid hydrocloric M (TT) Sulfat A Hoà tan 45mg chế phẩm 5ml nước, dùng 5ml dung dịch theo dẫn chuyên luận, thêm 1ml dung dịch acid hydrocloric M (TT) 1ml dung dịch bari clorid 5% (TT), có tủa trắng ñược tạo thành B Thêm 0,1ml iod 0,1 N vào hỗn dịch thu ñược phản ứng trên, hỗn dịch có màu vàng (phân biệt với sulfid dithionit) màu thêm giọt dung dịch thiếc (II) clorid (TT) (phân biệt với iodat) ðun sôi hỗn hợp, không ñược tạo thành tủa có màu (phân biệt với selenat tungstat) Sulfid Hoà tan 0,1g chế phẩm 2ml nước, dùng 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm 1ml acid hydrocloric 10%(TT), khí bay có mùi hydrosulfid, khí làm nâu ñen giấy tẩm chì acetat (CT) ñã thấm nước Thuỷ ngân (muối) A Nhỏ - giọt dung dịch thử lên miếng ñồng phôi (TT) ñã ñược cọ sạch, xuất vết hoen màu xám tối; vết sáng ñược lau nhẹ ðốt nóng phôi ñồng ñó ống nghiệm vết hoen B Hoà tan khoảng 0,10g chế phẩm 2ml nước, thuỷ ngân oxyd hoà tan 2ml acid hydrocloric 10% (TT), dùng 2ml dung dịch theo dẫn chuyên luận Thêm giọt dung dịch kali iodid (TT) cho tủa ñỏ, tủa tan thuốc thử thừa (ñối với muối thuỷ ngân (II)) Nếu muối thuỷ ngân (I), thêm giọt dung dịch kali iodid (TT) cho tủa vàng, sau ñó chuyển sang màu lục Phụ lục PHẢN ỨNG MÀU CỦA CÁC PENICILIN VÀ CEPHALOSPORIN file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 215 of 217 A Cho 2mg chế phẩm vào ống nghiệm (kích thước 15cm ´ 1,5cm), làm ẩm với 0,05ml nước, thêm 2ml acid sulfuric (TT) Lắc ñều hỗn hợp quan sát màu dung dịch ðặt ống nghiệm cách thuỷ sôi phút lại quan sát màu Màu sắc dung dịch ñược quy ñịnh bảng ñây B Lặp lại cách thử phản ứng A, thay 2ml acid sulfuric (TT) 2ml dung dịch formaldehyd acid sulfuric (TT) Màu sắc dung dịch ñược quy ñịnh bảng ñây Phản ứng màu penicilin cephalosporin Tên mẫu Acid sulfuric (TT) Acid sulfuric (TT) sau phút 100oC Dung dịch formaldehyd acid sulfuric (TT) Dung dịch formaldehyd acid sulfuric (TT) sau phút 100oC Amoxicilin natri Hầu không màu Vàng sẫm Amoxicilin trihydrat Hầu không màu Vàng sẫm Ampicilin Hầu không màu Vàng sẫm Ampicilin natri Hầu không màu Vàng sẫm Ampicilin trihydrrat Hầu không màu Vàng sẫm Benzathin penicilin Hầu không màu Nâu ñỏ Benzylpenicilin kali Hầu không màu Nâu ñỏ Benzylpenicilin natri Hầu không màu Nâu ñỏ Cephalexin Vàng nhạt Vàng sẫm Cephaloridin Vàng nhạt Hầu không màu ðỏ ðỏ nâu Cephalothin natri Vàng (màu chuyển nhanh) Hồng nâu ðỏ ðỏ nâu Cloxacilin natri Vàng xanh nhạt Vàng Dicloxacilin natri Vàng xanh nhạt Vàng Flucloxacilin natri Vàng xanh nhạt Vàng Phenoxymethyl penicilin Nâu ñỏ Nâu ñỏ sẫm Phenoxymethyl penicilin kali Nâu ñỏ Nâu ñỏ sẫm Hầu không màu Nâu ñỏ Procain penicilin Hầu không Hầu không file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 216 of 217 màu màu TÀI LIỆU THAM KHẢO Trường ðại học Dược Hà Nội (1998) Hoá phân tích II Trường ðại học Y dược thành phố Hồ Chí Minh (2001) Giáo trình kiểm nghiệm thuốc Bộ Y tế (2002) Dược ñiển Việt Nam III NXB Y học Hà Nội Bộ Y tế (2002) Các văn quản lý nhà nước lĩnh vực Dược NXB Y học Hà Nội Trường ðại học Dược Hà Nội (2004) Kiểm nghiệm thuốc Nguyễn Linh Thước (2002) Phương pháp phân tích vi sinh vật nước, thực phẩm mỹ phẩm Nhà xuất Giáo dục Bộ môn Hoá phân tích - Trường ðại học Dược Hà Nội (1998) Thực tập Hoá phân tích Tài liệu lưu hành nội - Trung tâm thông tin thư viện ðại học Dược Hà Nội British Pharmacopoeia (2005) Harold J Benson (1998) Microbiological applications laboratory manual in general microbiology 7th edition McGraw – Hill 10 United Stated Pharmacopoeia XXIX (2006) Chịu trách nhiệm xuất bản: Chủ tịch HðQT kiêm Tổng Giám ñốc NGÔ TRẦN ÁI Phó Tổng Giám ñốc kiêm Tổng biên tập NGUYỄN QUÝ THAO Chịu trách nhiệm nội dung: file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kiểm nghiệm thuốc - Bộ Y tế Page 217 of 217 Chủ tịch HðQT kiêm Giám ñốc Công ty CP Sách ðH − DN TRẦN NHẬT TÂN Biên tập sửa in: NGUYỄN HỒNG ÁNH Trình bày bìa: BÙI QUANG TUẤN Chế bản: THÁI SƠN KIỂM NGHIỆM THUỐC Mã số: 7G068M7 − DAI In bản, (Qð: ) khổ 19 × 27 cm, Số ðKKH xuất bản: 874 − 2007/CXB/1 − 1918/GD In xong nộp lưu chiểu tháng 12 năm 2007 file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 [...]... ly mu - Ni ly mu: Ti ni cha sn phm, mụi trng xung quanh khụng ủc g y nhim bn hoc tỏc ủng lm thay ủi tớnh cht ca mu v ngc li khụng ủ mu tỏc ủng xu ủn mụi trng - Ngi ly mu: Phi l ngi cú chuyờn mụn nht ủnh v ủỏp ng ủc y u cu ca quỏ trỡnh ly mu - Phi quan sỏt kim tra s b lụ hng (phõn loi nu cn), nhn xột v phi ghi vo biờn bn ly mu - Dng c ly mu: Sch, khụ, ủỏp ng y u cu cn ly mu - ủng mu: ỏp ng y u cu ly... Hỡnh 1 S ủ ly mu thuc Sau khi ly mu xong, ngi ly mu t tay dỏn nhón niờm phong, bao gúi (phi cú ch ký xỏc nhn ca ngi ly mu v c s ủc ly mu) v biờn bn ly mu (cng phi cú ủ ch ký xỏc nhn) b) Ly mu c th Cn c vo lụ thuc phi ly mu, xem xột phõn loi tin hnh ly nh sau: - Ly mu thuc cú phõn liu (lụ sn phm thuc dng thuc cú phõn liu): T lụ sn phm ly ra cỏc ủn v bao gúi mt cỏch ngu nhiờn bt k: Cỏc gúi ủc ly ra phi... khụ, cú nhón ghi chộp y ủ, ) - Thao tỏc ly mu: phi thn trng, t m, quan sỏt cn thn, - Phng thc ly mu: Ngi ly mu phi t tay ly mu, ghi nhón, lm biờn bn, ủúng gúi, niờm phong bo ủm v bo qun mu c bit lu ý phi ly ch ký xỏc nhn ca ủn v ủc ly mu 2.1.2 Tin hnh ly mu file://C:\WINDOWS\Temp\qivqkclstr\Kiem_nghiem_thuoc.htm 7/14/2010 Kim nghim thuc - B Y t Page 18 of 217 a) S ủ ly mu Vic ly mu phi bo ủm cho ủc... ủó ủc quy ủnh ủ xem thuc ủú ủt hay khụng ủt tiờu chun, t ủú quyt ủnh xem cú ủc phộp lu hnh hoc s dng hay khụng s ủỏnh giỏ ny chớnh xỏc, ủũi hi phi lm tt 3 vic sau: ly mu kim nghim, thc hnh phõn tớch, ủỏnh giỏ kt qu v vit phiu tr li (phiu kim nghim, phiu phõn tớch) 2.1 Ly mu kim nghim 2.1.1 Quy ủnh v ly mu Ly mu l mt tp hp cỏc thao tỏc nhm ly ra mt lng mu thuc ủi din ủ kim tra cht lng Do vy, ủ kt lun... thnh nhiu bao gúi: ly mu ban ủu theo cụng thc: nờu trờn - Ly mu l sn phm lng: + Trng hp mt bao gúi: Nu sn phm l ủng nht thỡ ly mu bt k v trớ no cng ủc Nu khụng ủng nht, trc khi ly mu phi khuy ủu, sau ủú mi ly mu + Trng hp nhiu bao gúi: ly theo cụng thc: Nu l nhng chai l nh thỡ cú th ly ht th tớch - Ly mu l cỏc sn phm thuc m, bt nhóo: Tin hnh ly mu nh cỏc sn phm lng nhng chỳ ý khuy k, trn ủu ủ ủc hn... tuõn theo quy tc ln sau ph ủnh ln trc ủú - Dc ủin Vit Nam I gm 638 chuyờn lun tõn dc v 284 chuyờn lun ủụng dc, ủc xut bn vo cỏc nm 1972, 1977 - Dc ủin Vit nam II gm 357 chuyờn lun tõn dc, 64 chuyờn lun ủụng dc, v 32 chuyờn lun v vaccin, ủc xut bn vo cỏc nm 1983, 1990, 1991, 1994 - Dc ủin Vit nam III gm 342 chuyờn lun hoỏ dc, 276 chuyờn lun v dc liu, 37 chuyờn lun v ch phm ủụng dc, 47 chuyờn lun ch phm... cú nghi ng v hm lng hoc hiu lc tỏc dng Ly mu ủ kim tra giỏm sỏt cht lng ca cỏc c s sn xut (ly 10% s lụ sn xut trong nm) hoc ly theo quy ủnh ca B Y t, S Y t Ly mu ủ thanh tra ủt xut trong nhng trng hp cú thụng tin v cht lng thuc xu, thuc khụng an ton, ớt hiu lc v ủc bit l thuc gi hay thuc kộm phm cht Vic ly mu ủc thc hin bi cỏc thanh tra viờn hoc cỏc cỏn b cú giy u nhim ca c quan kim tra, thanh tra v... phm sinh hc v 500 chuyờn lun v hoỏ cht thuc th, ủc xut bn vo nm 2002 1.4.2 Mt s quy ủnh chung khi s dng Dc ủin Vit Nam (hay dựng trong cụng tỏc kim nghim thuc) Cú nhiu quy ủnh, di ủ y nờu túm tt ni dung chớnh ca 7 quy ủnh: 1) Khỏi nim "cõn chớnh xỏc" ngha l cõn trờn cõn phõn tớch cú ủ nhy ủn 0,1mg (0,0001g) Khỏi nim "ly khong" cú ý ngha l ly mt lng vi ủ chờnh khụng quỏ 10% so vi y u cu Khỏi nim "n khi... biờn gii tin cy): Trong ủú t l mt tr s ph thuc vo n (hay bc t do K = n - 1) v ủ hy vng ủc cho sn (bng 2) vi = 0,95 v = 0,99 B ng 2 hy vng t K=n-1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 20 Ln t vi = 0,95 12,7 4,3 3,2 2,8 2,6 2,5 2,4 2,3 2,3 2,2 2,1 2,0 t vi = 0,99 63,7 9,9 5,8 4,6 4,0 3,7 3,5 3,4 3,3 3,2 2,8 2,6 * Giỏ tr thc à nm trong khong hay Nh vy biờn gii tin cy hay cn tin cy, hoc gii hn tin cy l gii hn hai... mu lu ly t mt phn mu ủó ly ủ th, do vy s lng ly phi ging nh mu ly ủ th Cỏc mu lu phi ủc gi li theo ủỳng thi gian quy ủnh Cỏc mu cú hn dựng phi lu tip 3 thỏng k t khi ht hn dựng Khi ht thi gian lu, c quan lp biờn bn x lý theo quy ch S sỏch, phiu kim nghim phi lu gi ớt nht l 3 nm Khi ht hn lu, mun hu phi ủc giỏm ủc c quan duyt T LNG GI V BI TP 1 Ni dung chớnh ca cụng tỏc tiờu chun hoỏ 2 Trỡnh by phng ... dy hc tớch cc Sỏch KIM NGHIM THUC ủc Hi ủng chuyờn mụn thm ủnh sỏch v ti liu dy - hc trung cp v dy ngh ca B Y t thm ủnh vo nm 2007 B Y t quyt ủnh ban hnh lm ti liu dy - hc chớnh thc ca ngnh Y. .. hay thi hỡnh tr, d hỳt m Bo qun ủ ủng kớn * Dung dch natri hydroxyd xM (xN): Ho tan 40x (g) natri hydroxyd nc v thờm nc va ủ 1000ml * Dung dch natri hydroxyd loóng: Ho tan 8,5g natri hydroxyd... thu ủc khỏc xa vi giỏ tr trung bỡnh ( ) hay giỏ tr thc (à ) ca mu th Nguyờn nhõn ch yu g y nờn sai s ny l s cu th ca ngi lm, hay yu t khỏch quan s thay ủi ủt ngt no ủú ca ủiu kin thc nghim loi