NÂNG CAO GIÁ TRỊ SỬ DỤNG, GIÁ TRỊ GIA TĂNG TRÁI CACAO ĐỒNG NAI

ỦY BAN NHÂN DÂN TỈNH ĐỒNG NAI SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ THUYẾT MINH ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Đề tài: “NÂNG CAO GIÁ TRỊ SỬ DỤNG, GIÁ TRỊ GIA TĂNG TRÁI CACAO ĐỒNG NAI” CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI: TS PHAN TẠI HUÂN PGS.TS BÙI VĂN MIÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.HCM Tháng 04.2014 THUYẾT MINH ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ I THÔNG TIN CHUNG VỀ ĐỀ TÀI Tên đề tài Nâng cao giá trị sử dụng, gíá trị gia tăng trái Cacao Đồng Nai Mã số (được cấp Hồ sơ trúng tuyển) Thời gian thực hiện: 24 tháng Từ tháng 01/2014 – 01/2016 Cấp quản lý Nhà nước Tỉnh √ Bộ Cơ sở Kinh phí 2.100 triệu đồng, đó: Nguồn - Từ Ngân sách nghiệp khoa học Tổng số 2.100 triệu - Từ nguồn tự có tổ chức - Từ nguồn khác Thuộc Chương trình (Ghi rõ tên chương trình, có), Mã số: Thuộc dự án KH&CN; Đề tài độc lập; Lĩnh vực khoa học √ Tự nhiên; Kỹ thuật công nghệ; Nông, lâm, ngư nghiệp; Y dược Chủ nhiệm đề tài Họ tên: Phan Tại Huân Ngày, tháng, năm sinh: 07/08/1978 Nam/ Nữ: Nam Học hàm, học vị: Tiến sĩ Chức vụ: Trưởng Khoa Công nghệ Thực phẩm – ĐHNL TP.HCM, kiêm Trưởng Bộ môn Hóa sinh thực phẩm Điện thoại: Tổ chức: 84(8)38960871 Nhà riêng: 84 (8) 62821209 Mobile: 090 680 2545 Fax: 38960713 E-mail: pthuan@hcmuaf.edu.vn Tên tổ chức công tác: Khoa Công Nghệ Thực Phẩm, Trường Đại Học Nông Lâm - TP.HCM Địa quan: Khu phố 6, Phường Linh Trung, Quận Thủ Đức, Tp Hồ Chí Minh Địa nhà riêng: Số 11B, Đường số 9, KP 3, P Linh Trung, Q Thủ Đức, TP.HCM Đồng chủ nhiệm đề tài Họ tên: Bùi Văn Miên Ngày, tháng, năm sinh: 14 /06/1955 Nam/ Nữ: Nam Học hàm, học vị: Phó giáo sư, Tiến sĩ Chức vụ: Trưởng phòng Quản lý nghiên cứu khoa học, Trưởng môn Phát triển sản phẩm , khoa CNTP, Đại học Nông Lâm TPHCM Điện thoại quan: 38963340 Fax: 38960713 Điện thoại nhà riêng: 38963740 DTDĐ: 0903957664 E-mail: buimien@yahoo.com Tên tổ chức công tác: Khoa Công Nghệ Thực Phẩm, Trường Đại Học Nông Lâm TP.HCM Địa quan: Khu phố 6, Phường Linh Trung, Quận Thủ Đức, Tp Hồ Chí Minh Địa nhà riêng: 5/8 Lê Văn Chí, Phường Linh Trung, Quận Thủ Đức TP Hồ Chí Minh Thư ký đề tài Họ tên: Lương Hồng Quang Năm sinh: 1979 Nam/ Nữ: Nam Học hàm, học vị: Thạc sĩ Chức danh khoa học Chức vụ: Phó trưởng Khoa Công nghệ Thực phẩm-Trường ĐHNL TP.HCM Điện thoại: Tổ chức: 84(8)38960871 Nhà riêng: Mobile: 01285678456 Fax: 38960713 E-mail: lhquang@hcmuaf.edu.vn Tên tổ chức công tác: Khoa Công Nghệ Thực Phẩm, Trường Đại Học Nông Lâm TP.HCM Địa quan: Khu phố 6, Phường Linh Trung, Quận Thủ Đức, Tp Hồ Chí Minh Địa nhà riêng: 160/33/20A, đường Bùi Đình Tuý, P 12, Q Bình Thạnh, Tp Hồ Chí Minh 10 Tổ chức chủ trì đề tài Tên tổ chức chủ trì đề tài: Trường Đại Học Nông Lâm TP.HCM Điện thoại: 08.38963340 – 8966780 Fax: 08.38960713 E-mail: qlnckh@hcmuaf.edu.vn Website: http://www.hcmuaf.edu.vn Địa chỉ: Khu phố 6, Phường Linh Trung, Quận Thủ Đức, Tp Hồ Chí Minh Họ tên thủ trưởng tổ chức: PGS.TS Nguyễn Hay Số tài khoản : 932901300024 Ngân hàng: Kho bạc Nhà nước Q Thủ Đức TP.HCM Tên quan chủ quản đề tài: Sở Khoa học Công nghệ Tỉnh Đồng Nai 11 Các tổ chức phối hợp thực đề tài Tổ chức: Trung tâm Ứng dụng Công nghệ sinh học Đồng Nai Tên quan chủ quản : Sở Khoa học Công nghệ tỉnh Đồng Nai Họ tên thủ trưởng tổ chức: Nguyễn Thị Hoàng Điện thoại người Lãnh đạo Cơ quan: 0613.822297-8188 Địa Cơ quan: 1597 Phạm Văn Thuận, Biên Hòa, Đồng Nai 12 Các cán thực đề tài (Ghi người có đóng góp khoa học chủ trì thực nội dung thuộc tổ chức chủ trì tổ chức phối hợp tham gia thực đề tài, không 10 người kể chủ nhiệm đề tài) Họ tên, học hàm học vị Tổ chức công tác Nội dung công việc tham gia Thời gian làm việc cho đề tài (Số tháng quy đổi2) TS Phan Tại Huân ĐH Nông Lâm Chủ nhiệm đề tài Trực tiếp thực thí nghiệm lên men hạt cacao, lên men rượu cacao 24 PGS TS Bùi Văn Miên ĐH Nông Lâm 24 TS Vũ Thị Lâm An ĐH Nông Lâm Đồng chủ nhiệm đề tài Trực tiếp thực thí nghiệm thiết kế bồn cacao, đánh giá rượu cacao Tham gia thực thí nghiệm phân lập tuyển chọn chủng vi sinh lên men cacao ThS Nguyễn Minh Hiền ĐH Nông Lâm ThS Lương Hồng Quang ĐH Nông Lâm Tham gia thực thí nghiệm phân lập tuyển chọn chủng vi sinh lên men cacao Tham gia thực thí nghiệm lên men cacao TS Lê Trung Thiên ĐH Nông Lâm Tham gia thực thí nghiệm lên men cacao ThS Lâm Thanh Hiền ĐH Nông Lâm Tham gia thực thí nghiệm sản xuất rượu cacao 8 TS Dương Thị Ngọc Diệp ĐH Nông Lâm Tham gia thực thí nghiệm sản xuất rượu cacao Một (01) tháng quy đổi tháng làm việc gồm 22 ngày, ngày làm việc gồm tiếng 8 ThS Nguyễn Thị Hoàng Trung tâm Ứng dụng Công nghệ sinh học Đồng Nai Điều tra tình hình thời tiết, suất, giống cacao Đồng Nai Chuyển giao kỹ thuật lên men cacao 10 ThS Nguyễn Quang Tuấn Trung tâm Ứng dụng Công nghệ sinh học Đồng Nai Điều tra tình hình thời tiết, suất, giống cacao Đồng Nai Chuyển giao kỹ thuật chế biến rượu cacao nước cacao lên men II MỤC TIÊU, NỘI DUNG KH&CN VÀ PHƯƠNG ÁN TỔ CHỨC THỰC HIỆN ĐỀ TÀI 13 Mục tiêu đề tài (Bám sát cụ thể hoá định hướng mục tiêu theo đặt hàng - có) Mục tiêu tổng quát : - Nâng cao giá trị sử dụng trái cacao Đồng Nai - Nâng cao chất lượng hạt cacao lên men Đồng Nai Mục tiêu cụ thể : - Cải thiện trình lên men cách tách phần dịch ép từ lớp cơm nhầy hạt tươi để tạo sản phẩm có giá trị, - Phát triển chế phẩm sinh học nhằm lên men định hướng ổn định cho trình lên men hạt cacao ứng dụng hệ thống lên men bồn ủ inox cho chất lượng đồng - Xây dựng chế độ sấy hạt lên men tương ứng với trình lên men định hướng để đảm bảo giá trị thương phẩm - Phá triển sản phẩm rượu cacao nước cacao lên men có hương vị đặc trưng từ phụ phẩm phẩm dịch ép cơm nhầy 14 Tình trạng đề tài Mới Kế tiếp hướng nghiên cứu nhóm tác giả √ Kế tiếp nghiên cứu người khác Đề tài kế thừa nhiều thành nghiên cứu trước lên men cacao chế biến rượu trái nước giới Tính ưu việt đề tài thể điểm sau: - Mang lại giá trị sử dụng từ phụ phẩm thịt hạt cacao - Ứng dụng, sử dụng phụ phẩm vào sản xuất sản phẩm mang tính chất đặc trưng - Giảm thiểu thiệt hại ảnh hưởng thời tiết vùng Đồng Nai đến trình lên men hạt cacao thông qua việc sử dụng lên men có định hướng 15 Tổng quan tình hình nghiên cứu, luận giải mục tiêu nội dung nghiên cứu Đề tài 15.1 Đánh giá tổng quan tình hình nghiên cứu thuộc lĩnh vực Đề tài Ngoài nước (Phân tích đánh giá công trình nghiên cứu có liên quan kết nghiên cứu lĩnh vực nghiên cứu đề tài; nêu bước tiến trình độ KH&CN kết nghiên cứu đó) Lên men hạt cacao chịu ảnh hưởng nhiều phản ứng sinh hóa lớp cơm nhầy nhân để hình thành chất lượng hạt chế biến Các nghiên cứu giới trọng tới vấn đề xác định diễn biến trình lên men, ảnh hưởng yếu tố tới phản ứng sinh hóa xảy Nhiều nghiên cứu trình sinh hóa xảy trình này, phản ứng hợp chất sản sinh tảng cho phát triển hương vị Lopez Dimick (1998), Thompson công (2001) khẳng định enzyme vi sinh vật có tác động lớn đến phản ứng sinh hóa hình thành chất lượng hạt Mặc dù tiến đáng kể việc xác định đa dạng loài vi sinh vật liên quan đến trình lên men, lượng thông tin cấu h́nh tăng trưởng loài suốt trình lên men cacao Việt Nam nói chung tỉnh Đồng Nai nói riêng chưa đầy đủ Những liệu định lượng, kết hợp với hóa chất thích hợp phân tích cảm quan hạt chất lượng chocolate, cần thiết để xác định loài vi sinh vật quan trọng trình lên men Với thông tin giúp tối ưu hóa trình lên men cần thiết, chọn loài thích hợp để sử dụng giai đoạn đầu lên men (Lopez Dimick, 1998) Những hệ vi sinh vật chủ yếu lên men cacao kể đến sau: Nấm men Trong giai đoạn đầu trình lên men, phát triển nấm men chiến ưu hàm lượng đường cao, pH thấp lượng O2 giới hạn phần thịt Hoạt động nấm men chuyển hóa đường thành cồn hoạt động khác chuyển hóa axít citric, cắt mạch pectin xem hoạt động quan trọng nấm men Đối với lên men đổ đống người ta thấy có loại nấm men sau: Hansenula sp., Kloeckra sp., Tonilopsis sp., Saccharomyces sp., Candida sp., Pichia sp Schizosaccharomyces sp Lên men hộp thấy có loại nấm men sau: Candida sp., Kloeckra sp., Pichia sp., Saccharomyces spp Vi khuẩn lactic Nấm men nhanh chóng tiêu thụ O2 có khối lên men, tạo điều kiện thuận lợi cho phát triển vi khuẩn lactic Vi khuẩn lactic lên men đường chuyển hóa đường thành axít lactic, đồng thời đồng hóa axít citric Trong trình lên men đổ đống, người ta phân lập chủng sau: Lactobacillus colonides, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus mali Vi khuẩn axêtic Sự thủy phân pectin nấm men làm phân hủy thịt quả, làm tăng khuếch tán không khí khối lên men đồng hóa axít citric nấm men LAB làm cho pH tăng lên Điều có lợi cho phát triển vi khuẩn acetic (AAB) Vi khuẩn axêtic chuyển hóa etanol thành axít acetic tỏa nhiệt Ethanol axít axêtic khuếch tán khối hạt, điều kết hợp với nhiệt sinh làm hạt chết, diệt phôi dẫn đến biến đổi sinh hóa Sự chuyển hóa ethanol thành axít axêtic AAB trình tỏa nhiệt Điều xác nhận trình lên men đổ đống nhỏ, phần đầu lên men đống lớn Sự tăng nhiệt độ liên quan mật thiết đến số lượng AAB Có thể nói việc xác định thành phần vai trò vi sinh vật tham gia thời điểm trình lên men hạt cacao cần thiết, sở thiết lập quy trình lên men có bổ sung chủng vi sinh vật (chế phẩm vi sinh khởi động) thích hợp giúp tạo sản phẩm cacao lên men có chất lượng cao ổn định đáp ứng với nhu cầu thị trường nước xuất Trong lên men rượu từ phần nước ép thịt hạ cacao trình chuyển hóa đường glucose thành rượu ethylic CO2 Tác nhân lên men rượu chủ yếu nấm men, chủ yếu nòi Saccharomyces cerevisiae Đối với trình lên men rượu vang (từ nho) rượu vang trái cây, bên cạnh việc chuyển hóa đường thành rượu, có đóng góp nhiều thành phần khác nguyên liệu, bao gồm hợp chất carbonyl, ester, acid acetaldehyd…(Duarte cộng sự, 2010) Tất chúng tạo thành hương vị đặc biệt cho sản phẩm rượu vang, tùy theo loại nguyên liệu trái sử dụng Phần cơm nhầy bao quanh hạt cacao, phụ phẩm ngành chế biến cacao hạt, sử dụng để sản xuất nhiều loại thức uống lên men không lên men Cơm nhầy cacao chứa 82-87% nước, 10-15% đường (trong chiếm 60% đường saccharose 39% hỗn hợp đường glucose fructose), 2-3% pentose, 1-3% acid citric, 1-1,5% pectin; protein, amino axít, vitamin (nhiều vitamin C) thành phần muối khoáng (nhiều canxi với 316,92mg/100g, kali, natri, kẽm, sắt magiê) làm cho cơm nhầy cacao trở thành môi trường giàu dinh dưỡng cho vi sinh vật phát triển (Puerari, Magalhães & Schwan, 2012) Phần cơm nhầy này, sau tách khỏi vỏ với hạt trước hạt chuẩn bị chuyển vào thùng lên men, chuyển thành dịch lỏng tác động hệ thống enzyme pectinase có sẵn cacao Dịch cơm nhầy chảy tận thu để lên men rượu vang Dias cộng (2007) khẳng định việc sử dụng dịch cơm nhầy cacao để sản xuất rượu vang hoàn toàn khả thi Với nghiên cứu mình, Duarte cộng (2010) cho cơm nhầy cacao phù hợp để chế biến sản phẩm rượu vang Rượu vang tạo thành từ cơm nhầy cacao có thành phần tương tự sản phẩm rượu vang truyền thống khác Bên cạnh đó, rượu vang từ cơm nhầy cacao cho hương vị đặc biệt trái cây, có mùi hương táo xanh, chuối, có mùi kẹo ngọt, mùi chanh, mùi vani, hoa hồng mật ong De Cássia Trindade cộng (1999) nghiên cứu quần thể nấm men có cơm nhầy cacao tươi, phân lập tuyển chọn chủng lên men tiêu biểu phát triển mô hình sản xuất rượu cacao nhỏ Với 65 chủng nấm men thu được, tất mẫu cơm nhầy lên men cho sản phẩm có độ cồn từ 8-11,5% (là độ cồn phù hợp cho sản phẩm rượu vang) độ Brix từ 4,2-7%; đó, chủng Brettanomyces, đặc biệt chủng B custersianus cho chất lượng sản phẩm lên men tốt Theo thí nghiệm Duarte cộng (2010), chủng nấm men Saccharomyces cerevisiae UFLA CA 1162 mà nhóm sử dụng cho chất lượng lên men cơm nhầy cacao tốt Ở nghiên cứu khác, Dias cộng (2007) cho cơm nhầy cacao lên men dễ dàng Sacchamyces cerevisiae để tạo thành loại thức uống có cồn Nhóm nghiên cứu sử dụng chủng Sacchamyces cerevisiae CA 116, CA 1162 CA 1183 để lên men cơm nhầy cacao Phần cơm nhầy cacao bổ sung đường saccharose đến 22oBrix, bổ sung CaCO3 để điều chỉnh pH đến 4, bổ sung enzyme pectinase để làm dịch cơm nhầy, sử dụng K2S2O5 với nồng độ 200mg/l để ngăn chặn nâu hóa dịch lên men phát triển vi sinh vật gây hại trình lên men Giai đoạn lên men thực 22oC giai đoạn lên men phụ thực 10oC 30 ngày Kết quả, chủng S cerevsiae CA 1183 cho khả sản sinh ethanol cao có hiệu suất tốt Bằng phương pháp phân tích sắc ký, nhóm nghiên cứu phát sản phẩm rượu vang từ cơm nhầy cacao có hàm lượng cồn, methanol, ester acetaldehyde tương đồng với tiêu chuẩn rượu vang truyền thống Kết đánh giá cảm quan cho thấy ưa thích hầu hết thành viên thử nếm Tuy nhiên, nghiên cứu khác, Anvoh cộng (2010) lại cho giai đoạn lên men cơm nhầy cacao nấm men Saccharomyces cerevisiae tốt nên thực 28-30oC nhiệt độ tối ưu cho phát triển nấm men Anvoh cộng (2010) thấy thực trình lên men cơm nhầy cacao có điều khiển cho chất lượng sản sinh ethanol cao gấp lần so với để lên men tự nhiên Bên cạnh việc sử dụng để sản xuất rượu vang, cơm nhầy cacao nghiên cứu làm sản phẩm kefir (Puerari cộng sự, 2012) Darman, Ngang Etoa (2011) thử nghiệm sản phẩm rượu vang từ cơm nhầy cacao phối hợp với hoa bụp giấm cho chất lượng hóa học cảm quan tốt, so với sản phẩm rượu vang thương mai từ nho Thậm chí, dịch cơm nhầy cacao lên men chứa nhiều acid lactic acid acetic phát có khả diệt trừ sâu bệnh cho (Acheampong cộng sự, 2013) Trong nước (Phân tích, đánh giá tình hình nghiên cứu nước thuộc lĩnh vực nghiên cứu đề tài, đặc biệt phải nêu cụ thể kết KH&CN liên quan đến đề tài mà cán tham gia đề tài thực Nếu có đề tài chất thực cấp khác, nơi khác phải giải trình rõ nội dung kỹ thuật liên quan đến đề tài này; Nếu phát có đề tài tiến hành mà đề tài phối hợp nghiên cứu cần ghi rõ Tên đề tài, Tên Chủ nhiệm đề tài quan chủ trì đề tài đó) Hiện nước ta, nghiên cứu phát triển cacao tập trung chủ yếu giải pháp kỹ thuật nhân giống nâng cao suất trồng Trong nghiên cứu kỹ thuật lên men nhằm nâng cao trì ổn định chất lượng cacao lên men sử dụng hiệu nâng cao giá trị sử dụng hạt cacao c̣n nhiều hạn chế Năm 2006, Dự án “Lên men, sấy đánh giá chất lượng cacao Việt Nam” chấp thuận Chương trình hợp tác Nông nghiệp Phát triển Nông thôn (Chương trình CARD 013/VIE05) Dự án hưởng ứng chương trình phát triển 10.000 trồng cacao vào năm 2010 Chính phủ Việt Nam Trong thời gian thực Dự án Bộ NN&PTNT thay đổi kế hoạch trồng cacao lên đến 60.000 vào năm 2015 80.000 vào năm 2020 Chính phủ cam kết đầu từ 40 tỉ đồng để phát triển thị trường cacao Sản lượng cacao dự đoán đạt khoảng 52.000 vào năm 2015 108.000 vào năm 2020 Tại Việt Nam, chưa có công trình nghiên cứu thử nghiệm từ dịch cơm nhầy cacao thức công bố có số doanh nghiệp thức đưa rượu cacao thị trường Theo Baodongnai online, công ty TNHH cacao Trọng Đức -Định Quán, Đồng Nai sản xuất loại rượu cacao có 12 39 độ cồn từ trái cacao tươi Phan Thanh Bình cộng (2010) bước đầu nghiên cứu sử dụng chế phẩm enzyme Flavourzyme (Novozyme) trình lên men hạt cacao với kết quả: bổ sung tốt 80ppm chế phẩm/khối lượng hạt tươi vào đầu trình lên men Phan Thanh Bình cộng (2011 a) bước đầu nghiên cứu sử dụng chế phẩm enzyme Flavourzyme (Novozyme) trình lên men hạt cacao để nâng cao chất lượng sản phẩm Kết cho thấy enzyme protease có tác dụng thay đổi chất lượng cacao sau lên men Chế phẩm sử dụng tốt với lượng 40 ppm bổ sung thích hợp sau 96 lên men Phan Thanh Bình cộng (2011 b) nghiên cứu lên men cacao có bổ sung chế phẩm chứa enzyme invertase nhằm làm tăng hàm lượng đường khử có hạt từ tăng cao tiền chất tạo hương vị cho chocolate Kết xác định liều lượng enzyme invertase thích hợp định bổ sung vào lên men cacao với quy mô vừa nhỏ 60 ppm với thời điểm bổ sung enzyme invertase thích hợp sau lên men Kết nghiên cứu khảo sát chất lượng hạt cacao lên men điều kiện tự nhiên, biến đổi sinh hóa mật số vi sinh vật chủ yếu trình lên men (Vương Thanh Tùng, 2006) cho thấy hạt cacao lên men điều kiện tự nhiên có chất lượng chấp nhận không đồng lớp khối ủ, phụ thuộc nhiều vào điều kiện thời tiết Đây chuỗi trình lên men nhóm vi sinh vật nối tiếp Đầu tiên phát triển nấm men, vi khuẩn, cuối phát triển số nấm sợi bề mặt khối ủ Chất lượng hạt cacao sau lên men tốt điều kiện nhiệt độ lên men 40oC, độ ẩm nguyên liệu 82% thời gian lên men ngày Hoàng Văn Tiến Nguyễn Đức Lượng (2005) bước đầu nghiên cứu sản xuất bột cacao phương pháp lên men có bổ sung vi sinh vật Theo đó, nghiên cứu sử dụng giống nấm mốc Aspergillus niger để phân giải cellulose pectin làm gia tăng lượng chiết chất hòa tan cho hạt cacao xác định tỉ lệ giống Aspergillus niger: bột mì rang 1:3, độ ẩm tối ưu khối lên men 60%, lượng chế phẩm lên men chiếm 1% khối lượng hạt lên men thời gian lên men kéo dài 96 Năm 2002, kết nghiên cứu nhóm tác giả Trần Xuân Ngạch phân lập chủng nấm men trình lên men hạt cacao Quãng Ngãi: Hansenia sporauvarum, Galatomyces resii, Candida sorboxylosa, Candida fructus Huỳnh Thị Minh Tuyết cộng (2011) nghiên cứu sử dụng Saccharomyces cerevisiae Acetobacter aceti để lên men hạt cacao Sau sấy khô, lượng chất béo thu 5,67% Tất hạt có màu nâu nâu tím, không chua vị đắng chát Hạt có cacao phương pháp lên men có định hướng không xuất nấm mốc bề mặt hạt, nguyên nhân mẫu bổ sung nấm men vi khuẩn để thúc đẩy sinh nhiều ethanol acid đủ ức chế phát triển nấm mốc Tỷ lệ hạt nâu 80% cao so với lên men tự nhiên (chỉ 70%) Hạt cacao sau rang phương pháp có mùi thơm không chua, tất vị chat Ngoài ra, hàm lượng lipid hạt cacao sau sấy cao Lên men cacao giai đoạn cần thiết để tạo hương vị cho hạt cacao Thông thường giới Việt Nam, cacao thường lên men đơn giản cách sử dụng nguồn nấm men vi khuẩn tự nhiên từ môi trường xâm nhập vào lớp cơm nhầy Với phương pháp lên men tự nhiên giá trị kinh tế hạt thu không cao, đặc biệt trường hợp điều kiện phát triển hệ vi sinh kiểm soát cách ổn định Phương pháp lên men cacao có sử dụng Sacharosemyses cerevisiae, Aacetobacter cách chọn lọc tiến hành trường Đại học Công nghiệp Tp Hồ Chí Minh Quá trình diễn sáu ngày, hai ngày đầu nhiệt độ 350C, ngày lại nhiệt độ 500C Tổng lượng chất khô cơm nhầy giảm đột ngột sau 24 lên men Hàm lượng cơm nhầy giảm mạnh dạt 8,9% sau 144 Sau sấy khô lượng chất béo thu 5,67% Tất hạt có hạt màu nâu tím không chua vị đắng chát 15.2 Luận giải việc đặt mục tiêu nội dung cần nghiên cứu Đề tài (Trên sở đánh giá tình hình nghiên cứu nước, phân tích công trình nghiên cứu có liên quan, kết lĩnh vực nghiên cứu đề tài, đánh giá khác biệt trình độ KH&CN nước giới, vấn đề giải quyết, cần nêu rõ vấn đề tồn tại, hạn chế cụ thể, từ nêu hướng giải - luận giải cụ thể hoá mục tiêu đặt đề tài nội dung cần thực Đề tài để đạt mục tiêu) Với hỗ trợ mạnh mẽ Hiệp hội cacao giới, diện tích cacao ngày mở rộng Việt Nam Hiện nay, cacao trở thành trồng chuyên canh nhiều vùng, có tỉnh Đồng Nai Việc phát triển cacao Đồng Nai hướng mang lại nhiều lợi ích cho người dân Tuy nhiên, lợi nhuận thu từ cacao chưa cao Ước tính, cacao, phần hạt tươi chiếm khoảng gần 40% khối lượng quả, phần lại vỏ cùi trụ khoảng 60% Trong phần hạt tươi, lớp cơm nhầy chứa khoảng 0,2% Chất nhầy bao quanh hạt cacao tươi Đồng Nai thường có hàm lượng đường cao Bên cạnh điều kiện thời tiết mưa nắng không ổn định, lý dẫn đến hạt cacao sau lên men thường có hàm lượng acid cao làm chất lượng liquor (nguyên liệu làm chocolate) bị đánh giá chua Hơn nữa, lớp nhầy nhiều làm ảnh hưởng đến trình tạo hương cho sản phẩm Đây nguyên nhân hạt cacao lên men Đồng Nai chưa đạt giá trị thương phẩm cao Việc kiểm soát chất lượng hạt cacao thành phần, nâng cao giá trị xuất hạt cacao Đồng Nai nhu cầu mang tính cấp thiết Chất lượng hạt cacao Đồng Nai bị hạn chế điều kiện thời tiết lượng thịt hạt nhiều làm cho hạt có hàm lượng a-xít cao; tiền hợp chất mùi, vị sô-cô-la tạo thành trình ủ lên men, phơi hạt chưa tốt Nên giá trị xuất không ổn định Việc ảnh hưởng đến phát triển bền vững cacao (nguy chuyển đổi cấu trồng từ người nông dân cao) Bên cạnh chất lượng hạt cacao chua, chất lượng hạt chưa tốt nên khó phát triển sản phẩm công nghiệp chế biến kèm Cho nên, việc nâng cao chất lượng hạt cacao thông qua công đoạn lên men/ủ hạt cacao tươi quan trọng Những nghiên cứu nước việc sử dụng chế phẩm sinh học nói chung vi sinh nói riêng chứng tỏ hiệu việc nâng cao chất lượng cacao sau lên men, đặc biệt vùng mà điều kiện lên men tự nhiên khó kiểm soát ổn định Tuy nhiên chưa có nghiên cứu hệ thống hệ vi sinh vật lên men tự nhiên cacao sử dụng chế phẩm vi sinh để ổn định cải thiện chất lượng cacao Đồng Nai Các kỹ thuật lên men bồn ủ sử dụng chế phẩm vi sinh kỹ thuật sấy hạt cacao tương chưa nghiên cứu đưa vào thử nghiệm toàn diện Hơn việc khai thác đồng thời phụ phẩm dịch ép từ màng nhầy cacao để sản xuất rượu cacao đặc trưng giúp khai thác tối đa giá trị kinh tế từ hạt cacao Đồng Nai Quá trình lên men hạt cacao phân hủy phần lớn cơm nhầy cacao phức hợp vi sinh vật Nên tiến hành nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến phát triển vi sinh vật như: Nguồn dinh dưỡng cho vi sinh vật (hàm lượng lớp cơm nhầy, thành phần chất dinh dưỡng lớp cơm cacao tươi) phương pháp lên men (dạng thùng, khối lượng hạt cacao tươi/mẻ, đảo trộn khối hạt trình ủ, bổ sung lượng vi sinh vật khơi mào trình lên men) Nội dung cụ thể - Tận thu thêm phần phụ phẩm dịch ép từ lớp cơm nhầy cacao sử dụng làm chất lên men rượu đặc trưng, đồng thời tạo điều kiện giảm độ acid độ đườngtuy nhiên đảm bảo phần chất lại đủ để lên men hạt cacao đạt chất lượng cao - Phân lập định danh chủng vi sinh vật (các chủng nấm men vi khuẩn) trình Nội dung 6: Tuyển chọn chủng nấm men thích hợp lên men rượu từ phụ phẩm dịch cơm nhầy hạt cacao Đồng Nai Chuyên đề 27: Tuyển chọn đánh giá khả lên men chủng nấm men từ dịch cơm nhầy để chế biến rượu Đánh giá so sánh khả lên men rượu cacao chủng phân lập giống thương mại điều kiện lên men cụ thể 60 60 60 60 60 Chuyên đề 28: Đánh giá biến đổi vật lý, hóa học dịch hạt trình lên men với chủng nấm men tuyển chọn 30 30 30 30 30 Chuyên đề 29: Khảo sát kỹ thuật tách ép xử lý sơ dịch cơm nhầy hạt cacao tươi dùng làm chất lên men rượu (phối hợp với nội dung nội dung 3) 30 30 30 30 30 Chuyên đề 30: Tối ưu hóa thông số kỹ thuật (tỷ lệ nấm men, hàm lượng chất rắn hòa tan pH dịch lên men) ảnh hưởng đến trình lên men rượu cacao 30 30 30 30 30 Chuyên đề 31: Khảo sát ảnh hưởng kỹ thuật làm trong, ổn định rượu nhiệt độ môi trường trình lên men phụ 30 30 30 Nội dung 7: Tối ưu hóa qui trình chế biến rượu nước cacao lên men từ dịch cơm nhầy hạt cacao Đồng Nai 38 30 30 Chuyên đề 32: Khảo sát ảnh hưởng kỹ thuật làm trong, ổn định rượu nhiệt độ môi trường trình lên men phụ Chuyên đề 33: Xây dựng quy trình hoàn chỉnh chế biến rượu vang cacao 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 Chuyên đề 34: Xây dựng quy trình hoàn chỉnh chế biến nước cacao lên men 30 30 30 30 30 Chuyên đề 35: Sản xuất thử nghiệm rượu vang cacao qui mô pilot (từ nguồn dịch ép 100kg hạt/mẻ) 30 30 30 30 30 Chuyên đề 36: Sản xuất thử nghiệm nước cacao lên men qui mô pilot (từ nguồn dịch ép 100kg hạt/mẻ) 30 30 30 30 30 Tập huấn chuyển giao qui trình kỹ thuật sản xuất rượu vang cacao nước cacao lên men từ dịch cơm nhầy hạt tươi cho đơn vị chức Đồng Nai 30 30 30 30 30 1170 1170 Nội dung 8: Tổ chức chuyển giao quy trình kỹ thuật chế biến rượu cacao nước cacao lên men Đồng Nai Tổng cộng 39 1170 700 700 470 470 Khoản Nguyên vật liệu, lượng Đơn vị: Triệu đồng TT Nội dung Đơn vị đo Số lượng Đơn giá Nguồn vốn Thành tiền SNKH Tổng số 1 Trong đó, khoán chi theo quy định* Năm thứ nhất* Trong đó, khoán chi theo quy định * Năm thứ hai* Nguyên, vật liệu Nguyên liệu (dùng cho tất nội dung) Trái ca cao (7.000 kg x 7.000 đ/kg) kg 7000 0.007 49 49 28 Hóa chất chuẩn bị môi trường phân lập, tăng sinh nấm men vi khuẩn 2.5 5 + MAE (500gr) Hộp Hộp 2.8 5.6 5.6 5.6 + DRBC (500gr) Hộp 10 10 10 Hộp 2 4 2 4 + MRS (500gr) + Peptone (500gr) + Plate Count agar (500gr) Hộp 40 21 Trong đó, khoán chi theo quy định * Năm thứ ba* 10 Tự có Khác 11 12 Trong đó, khoán chi theo quy định * + Yeast extract (500gr) Hộp + YEPD (500gr) + Nutrient broth (500gr) - Hóa chất nhuộm Gram vi khuẩn - Kháng sinh Oxytetracycline - Kháng sinh Cycloheximide - Hóa chất thực thử nghiệm sinh hóa nấm men vi khuẩn (kit API) Hộp 1.5 3 3.5 7 2 4 0.8 1.6 1.6 1.6 Chai 6 Chai 3.5 7 Kit 20 20 20 + Tris HCl (500 gr) + Sodium Chloride (500gr) Hộp 2 4 Hộp 1.5 3 + EDTA (500gr) + Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) (500gr) + Phenol: chloroform: isoamyl (500ml) + Chloroform (100 ml) Hộp 2.5 5 Hộp 6 Chai 1.5 3 Chai 0.5 1 + Ethanol (500 ml) Chai 0.2 0.4 0.4 0.4 + RNase A (8 mg) Ống 2.5 5 Hộp - Hóa chất ly trích DNA 41 - Hóa chất thực phản ứng PCR + Taq DNA polymerase (gold) + dNTP set (4 x 25 µmol), 50mM each + Nuclease free water (10 ml) Ống 10 20 20 20 Ống 10 10 10 Ống 1.5 3 + Primer - Hóa chất điện di DNA, sản phẩm PCR Bộ 4 4 + TE + Gel agarose (100 Ống 0.5 1 Hộp 2.5 5 + TBE 10X (1 lít) Chai 1.5 3 + Loading dye X - Giải trình tự sản phẩm PCR - Hóa chất khác để phân tích tiêu cảm quan (vị đắng, chát v.v) Hoá chất phân tích thành phần lên men, chất lượng hạt Kali hydroxide Cái 1.5 3 40 40 40 40 28 28 28 2.5 12.5 12.5 12.5 2.6 13 13 13 0.7 3.5 3.5 3.5 g) Natri sulfate khan Acid cloric Hộp 1kg Hộp 1kg Bình 1L 42 Petroleum ete Chất chuẩn vitamin C, anthocyanin… Hexane Acetone Methanol Ethanol Methyl-tert-butyl ether Ethyl acetate Acetonitrile Acid acetid Trolox [(S)-(−)-6Hydroxy-2,5,7,8tetramethylchroman-2carboxylic acid] ABTS [2,2′-Azinobis(3ethylbenzothiazoline-6sulfonic acid)] Kali persulfate Bình 1L 2.1 10.5 10.5 10.5 Ống 2.4 12 12 12 2.9 14.5 14.5 14.5 1.2 6 1.8 9 1.8 9 1.7 8.5 8.5 8.5 2.9 5.8 5.8 5.8 3.4 6.8 6.8 6.8 2.7 5.4 5.4 5.4 Ống 1g 3.3 6.6 6.6 6.6 Chai 100m L 2.9 5.8 5.8 5.8 2.3 4.6 4.6 4.6 2.5 5 2 4 Bình 1L Bình 1L Bình 1L Bình 1L Bình 1L Bình 1L Bình 1L Bình 0,5L Kali metabisulfit Hộp 250g Hộp Gallic acid Hộp 43 Cloroform Folin - Ciocalteau Bình 1L Bình 1L Hộp 100g Hộp Natri carbnonate Hộp 2 4 Natri fluorescein Hộp 1.8 3.6 3.6 3.6 Hộp 1.9 3.8 3.8 3.8 Hộp 1.6 3.2 3.2 3.2 Hộp 1.7 3.4 3.4 3.4 Hộp 3.2 6.4 6.4 6.4 1.9 3.8 3.8 3.8 Natri thiosulfate (0,01N) Kali iodine Monosodium phosphate monohydrate Disodium phosphate heptahydrate Acid citric DPPH KIT thử axít lactic 2 1.9 3.8 3.8 3.8 0.7 1.4 1.4 1.4 2.4 4.8 4.8 4.8 2.5 5 Dụng cụ, phụ tùng, vật rẻ tiền mau hỏng Dụng cụ phân lập nấm men vi khuẩn - Đĩa petri Cái 500 0.025 12.5 12.5 12.5 - Bình tam giác 250 mL - Bình tam giác 1.000 mL Cái 20 0.045 0.9 0.9 0.9 Cái 0.1 0.5 0.5 0.5 - Ống nghiệm Cái 250 0.01 2.5 2.5 2.5 - Bộ que cấy Bộ 0.5 1.5 1.5 1.5 - Lam lame Bộ 0.1 0.3 0.3 0.3 44 - Đèn cồn - Eppendorf (1,5 mL; 0,2 mL) - Đầu tip (xanh, trắng, vàng) Cái 0.1 0.3 0.3 0.3 Cái 2 2 Túi 2 2 - Bông gòn không thấm - Vật tư tiêu hao khác: găng tay, trang, giấy vệ sinh v.v Dụng cụ, phụ tùng, vật rẻ tiền mau hỏng phân tích thành phần hóa học Bình định mức loại kg 0.2 0.4 0.4 0.4 Túi 1.3 1.3 1.3 1.3 Cái 0.5 2.5 2.5 2.5 Bình tam giác Cái 0.2 1 Cốc thủy tinh loại Cái 0.2 1 Đũa thủy tinh Cái 0.05 0.25 0.25 0.25 Bình tỷ trọng Cái 0.1 0.5 0.5 0.5 Giấy gói Hộp 0.1 0.5 0.5 0.5 Giấy lọc Hộp 0.2 1 Hộp 0.5 2.5 2.5 2.5 Hộp 0.2 1 Ống đong loại Cái 0.4 2 Pipet loại Cái 0.1 0.5 0.5 0.5 Ống nghiệm Cái 0.03 0.15 0.15 0.15 Nút ống nghiệm cao su Cái 0.02 0.1 0.1 0.1 Ống thủy tinh đựng mẫu 10cm Nút đậy ống đựng mẫu 45 Giá đỡ ống nghiệm Cái 0.2 1 Phễu thủy tinh Cái 0.2 1 Micro pipette 1000 μL Cái 5 25 25 25 Quả bóp cao su Cái 0.1 0.5 0.5 0.5 Cột 27 27 27 27 Cột 19 19 19 19 0.9 4.5 4.5 4.5 0.5 2.5 2.5 2.5 1.2 6 25 100 100 25 2.5 10 10 10 kWh 10 10 10 5 5 m3 10 10 10 5 5 Cột HPLC μm Discovery® C18 (Supelco, USA), 25 cm×0.46 cm Cột HPLC (3 μm YMC® C30 (Wilmington, NC), 25 cm x 0,46 cm) Đầu lọc mẫu HPLC (PTFE Filter) Syringe hút mẫu HPLC Vial mẫu HPLC Thùng inox Thùng gỗ Hộp 50 Hộp 50 Hộp 50 Cái Cáu 75 Năng lượng, nhiên liệu - Than - Điện - Xăng, dầu - Nhiên liệu khác Nước 46 Mua sách, tài liệu, số liệu Cộng: 710 710 20 47 604 10 106 10 Khoản Thiết bị, máy móc Đơn vị: Triệu đồng TT Nội dung I Thiết bị có tham gia thực đề tài (chỉ ghi tên thiết bị giá trị lại, không cộng vào tổng kinh phí Khoản 3) II Thiết bị mua Mua thiết bị, công nghệ Mua thiết bị thử nghiệm, đo lường III Khấu hao thiết bị (chỉ khai mục quan chủ trì doanh nghiệp) IV Thuê thiết bị (ghi tên thiết bị, Mục chi Đơn vị đo Số lượng Đơn giá 48 Nguồn vốn Thành tiền SNKH Tổng Năm thứ nhất* Năm thứ hai* Năm thứ ba* 10 Tự có Khác 11 12 thời gian thuê) V Vận chuyển lắp đặt Cộng: 49 Khoản Xây dựng, sửa chữa nhỏ Đơn vị: Triệu đồng TT Nội dung Nguồn vốn Kinh phí SNKH Tổng Năm thứ nhất* Năm thứ hai* Năm thứ ba* 50 50 25 25 50 50 25 25 Chi phí xây dựng m nhà xưởng, PTN Chi phí sửa chữa m2 nhà xưởng, PTN Chi phí lắp đặt hệ thống điện, nước Chi phí khác Sửa chữa nhỏ Cộng: 50 Tự có Khác Khoản Chi khác Đơn vị: Triệu đồng Nguồn vốn Tổng số TT Nội dung Công tác nước Thuê xe lấy mẫu Đồng Nai Hợp tác quốc tế a Đoàn (nước đến, số người, số ngày, số lần, ) b Đoàn vào (số người, số ngày, số lần ) Kinh phí quản lý (của quan chủ trì) Quản lý phí quan chủ trì (15 triệu/ năm) Quản lý phí quan quản lý (3 triệu/ năm) Mục chi Tổng Ngân sách SNKH Tổng số Trong đó, khoán chi theo quy định* Năm thứ Trong đó, khoán chi theo quy định * Năm thứ hai* Trong đó, khoán chi theo quy định * Năm thứ ba* Trong đó, khoán chi theo quy định * 11 12 10 20 20 20 10 10 10 10 30 30 30 15 15 15 15 6 3 3 51 Tự có 13 Khác 14 Chi phí đánh giá, kiểm tra nội bộ, nghiệm thu cấp Chi phí đánh giá, kiểm tra nội bộ, nghiệm thu cấp Chi phí xét duyệt, giám định, nghiệm thu 23 23 23 13 13 10 10 5 2 3 2 2 12 12 12 12 12 Chi khác - Hội thảo - Ấn loát tài liệu, văn phòng phẩm - Dịch tài liệu - Đăng ký bảo hộ quyền sở hữu trí tuệ Xây dựng đề cương Lập thuyết minh chi tiết đề tài Tổng kết, viết báo cáo chi tiết đề tài Phụ cấp chủ nhiệm đề tài 48 48 48 24 24 24 24 Phụ cấp thư ký, kế toá đề tài 24 24 24 12 12 12 12 170 170 170 81 81 89 89 Cộng: 52 [...]... sử dụng để nghiên cứu sản xuất rượu vang và nước trái cây lên men cacao Về nội dung 7: Tối ưu hóa qui trình chế biến rượu và nước cacao lên men từ dịch cơm nhầy hạt cacao Đồng Nai Phương án sản phẩm lên men từ dịch trích ép màng nhầy cacao bao gồm:  Rượu vang cacao  Nước trái cây lên men cacao  Ưu, nhược điểm của sản phẩm:  Rượu vang cacao: Thời gian lên men dài (tối thiểu 2 tháng) Trong thời gian... giống cacao đang trồng ở Đồng Nai Thu thập mẫu và đánh giá độ ổng định thông qua lượng đường và độ acid trung bình của các mẫu cacao trồng đại trà ở Đồng Nai 14 Về nội dung 2: Sàng lọc hệ vi sinh thích hợp lên men hạt cacao Đồng Nai Để đánh giá một cách đầy đủ và chính xác hệ vi sinh vật tham gia trong quá trình lên men cũng như biến đổi về vật lý, hóa học của hạt cacao lên men tại Đồng Nai, đề tài sử. .. Các giá trị độ brix, pH, loại men và hàm lượng men giống sẽ được thí nghiệm quanh các giá trị trong quy trình sản xuất rượu vang cacao chuẩn bên trên Thời gian theo dõi để sản phẩm được ổn định từ 3 đến 6 tháng (tùy thuộc vào từng nhóm sản phẩm) Về nội dung 8: Tổ chức chuyển giao quy trình kỹ thuật chế biến rượu cacao và nước cacao lên men tại Đồng Nai Đối với sản xuất rượu vang cacao và nước cacao. .. 4: Đánh giá việc bổ sung các chủng vi sinh vật (chế phẩm vi sinh khởi động/starter cultures) trong quá trình lên men cacao Tiến hành thí nghiệm lên men cacao có bổ sung vi sinh ở quy mô phòng thí nghiệm Các phương pháp nghiên cứu sử dụng như sau: Lên men quy mô phòng thí nghiệm + Chuẩn bị mẫu hạt cacao Lượng mẫu sử dụng trong thí nghiệm là 5 kg hạt cacao (tương đương 20 kg trái cacao) , trái cacao chín... được chọn lọc để có thể lên men định hướng hạt cacao nhằm nâng cao chất lượng hạt cacao lên men trồng tại Đồng Nai - Quy trình lên men cacao sử dụng chế phẩm sinh học trong bồn ủ dạng lớn đạt chất lượng ổn định không phụ thuộc điều kiện thời tiết - Quy trình sản xuất sản phẩm rượu cacao và nước cacao lên men đặc trưng với hương vị cacao Đồng Nai 22 Sản phẩm KH&CN chính của Đề tài và yêu cầu chất lượng... giá hơn, mang lại giá trị gia tăng cho người nông dân - Lượng phụ phẩm trong quá trình sản xuất hạt cacao lên men rất lớn do 10-12kg trái tươi mới được 1kg hạt khô nên lượng phụ phẩm bỏ đi rất lớn Nếu tận dụng được lượng dịch nhầy từ hạt cacao tươi để tạo nên sản phẩm thức uống thơm ngon, đậm đà hương vị cacao sẽ làm tăng thêm hiệu quả kinh tế từ trái cacao - Nghiên cứu lên men hạt cacao có bổ sung vi... thời tiết ở các vùng trồng cacao Đồng Nai + Chuyên đề 2: Khảo sát giống và chất lượng trái cacao được trồng chính ở khu vực Đồng Nai Nội dung 2: Sàng lọc hệ vi sinh thích hợp lên men hạt cacao Đồng Nai Hệ vi sinh vật tham gia trong quá trình lên men rất đa dạng về chủng, loài tùy theo điều kiện địa lý, khí hậu thời tiết của từng vùng trong cùng một quốc gia hay giữa các quốc gia với nhau Chính vì thế,... có thể được sử dụng bởi các hộ trồng cacao và các đơn vị lên men chế biến cacao tại Đồng Nai Kết quả đề tài sẽ được chuyển giao cho đơn vị : Trung tâm Ứng dụng Công nghệ sinh học Đồng Nai (Ấp 2, xã Xuân Đường, huyện Cẩm Mỹ, tỉnh Đồng Nai) Địa chỉ văn phòng liên hệ: 1597 Phạm Văn Thuận, Biên Hòa, Đồng Nai - Điện thoại : 0613.8222978188 ; trong đó, Trung tâm Ứng dụng Công nghệ sinh học Đồng Nai hiện đang... nguyên liệu hạt cacao, sử dụng chế phẩm vi sinh (starter cultures), sử dung dụng thùng ủ inox, bố trí thí nghiệm và các chỉ tiêu đánh giá Về nội dung 5: Tổ chức chuyển giao quy trình kỹ thuật lên men định hướng cacao Đồng Nai Phối hợp tổ chức chuyển giao cho Trung tâm Ứng dụng Công nghệ sinh học Đồng Nai (Địa chỉ: Ấp 2, xã Xuân Đường, huyện Cẩm Mỹ, tỉnh Đồng Nai) để làm cơ sở chuyển giao cho các hộ... biến rượu cacao và nước cacao lên men tại Đồng Nai 130.000.000 Công việc 1: Sản xuất thử nghiệm rượu vang cacao qui mô pilot (từ nguồn dịch ép của 100kg hạt/mẻ) - Báo cáo thử nghiệm Công việc 2: Sản xuất thử nghiệm nước cacao lên men qui mô pilot (từ nguồn dịch ép của 100kg hạt/mẻ) - Báo cáo thử nghiệm Công việc 3: Tập huấn chuyển giao qui trình kỹ thuật sản xuất rượu vang cacao và nước cacao lên men ... Ethanol Methyl-tert-butyl ether Ethyl acetate Acetonitrile Acid acetid Trolox [(S )-( − )-6 Hydroxy-2,5,7,8tetramethylchroman-2carboxylic acid] ABTS [2,2′-Azinobis(3ethylbenzothiazoline-6sulfonic acid)]... Trường Đại học Nông Lâm Hồ Chí Minh 13 http://www.baodongnai.com.vn/kinhte/201212/Lam-tang-gia-tri-cho-ca-cao-2206778/ 17 Nội dung nghiên cứu khoa học triển khai thực nghiệm Đề tài phương án thực... 0.5 1.5 1.5 1.5 - Lam lame Bộ 0.1 0.3 0.3 0.3 44 - Đèn cồn - Eppendorf (1,5 mL; 0,2 mL) - Đầu tip (xanh, trắng, vàng) Cái 0.1 0.3 0.3 0.3 Cái 2 2 Túi 2 2 - Bông gòn không thấm - Vật tư tiêu hao