Nghiên cứu một số cây thuốc kháng vi nấm gây bệnh lang ben

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN ĐINH NGA NGHIÊN CỨU MỘT SỐ CÂY THUỐC KHÁNG VI NẤM GÂY BỆNH LANG BEN LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯC HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - 2006- BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NGUYỄN ĐINH NGA NGHIÊN CỨU MỘT SỐ CÂY THUỐC KHÁNG VI NẤM GÂY BỆNH LANG BEN CHUYÊN NGÀNH: ĐÔNG DƯC VÀ THUỐC NAM MÃ SỐ: 3.02.06 LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS NGUYỄN KHẮC QUỲNH CỨ PGS.TS TRẦN XUÂN MAI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - 2006- LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết ghi luận án trung thực chưa công bố công trình khác Nguyễn Đinh Nga MỤC LỤC Trang Lời cam đoan Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục sơ đồ Danh mục biểu đồ Danh mục hình MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Vi nấm Malassezia spp 1.2 Thuốc dùng trò bệnh lang ben nguồn gốc tổng hợp 15 1.3 Dược liệu trò bệnh da Malassezia spp gây 17 1.3.1 Cây Bông móng tay 21 1.3.2 Cây Riềng nếp 25 1.4 Phương pháp xác đònh tác dụng kháng nấm 30 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên liệu, trang thiết bò 36 2.2 Phương pháp nghiên cứu 41 2.2.1 Thu hái chế biến dược liệu 42 2.2.2 Phương pháp khảo sát đặc điểm thực vật dược liệu 43 2.2.3 Chiết xuất cao dược liệu tinh dầu dùng sàng lọc thuốc kháng M furfur 44 2.2.4 Chiết xuất phân tách hoạt chất từ thuốc kháng M furfur mạnh 44 2.2.5 Xây dựng phương pháp đònh lượng hoạt chất kháng Malassezia spp thuốc 46 2.2.6 Ly trích đònh danh vi nấm Malassezia spp từ vẩy da 47 2.2.7 Phương pháp xác đònh tác dụng kháng Malassezia spp 48 2.2.8 Xác đònh số chế tác động cao chiết hoạt chất 50 2.2.9 Xác đònh hiệu phối hợp hai chất kháng nấm 53 2.2.10 Phương pháp thử tính kích ứng liều dùng cao chiết 53 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ 3.1 Sàng lọc dược liệu kháng M furfur 57 3.1.1 Xác đònh loại phận dùng BMT kháng M furfur mạnh 59 3.1.2 Xác đònh loài riềng kháng M furfur mạnh 61 3.2 Khảo sát móng tay trắng 66 3.2.1 Đặc điểm thực vật 66 3.2.2 Chiết xuất cao BMT-T 70 3.2.3 Phân lập xác đònh cấu trúc hoá học hoạt chất kháng M furfur 73 3.3 Khảo sát thân rễ Riềng nếp 77 3.3.1 Đặc điểm thực vật 77 3.3.2 thành phần hóa học thân rễ Riềng nếp 79 3.3.3 Chiết xuất phân đoạn kháng M furfur từ thân rễ Riềng nếp 79 3.3.4 Phân lập xác đònh cấu trúc hoá học hoạt chất kháng M furfur từ PĐDR 83 3.3.5 Sơ đánh giá hàm lượng galangal acetat PĐDR 89 3.3.6 Dự thảo tiêu chuẩn sở cho thân rễ riềng nếp 99 3.4 Tác dụng kháng Malassezia spp PĐDR, ACA, cao BMT-T IB1 102 3.4.1 Ly trích đònh danh Malassezia spp từ vẩy da người tình nguyện 102 3.4.2 Tác dụng kháng M furfur PĐDR, GA, cao BMT-T IB1 103 3.5 Sơ xác đònh chế tác động PĐDR, ACA, cao BMT-T IB1 106 3.5.1 Tác động ức chế chuyển dạng vi nấm Malassezia spp 106 3.5.2 Khảo sát đường cong tăng trưởng M furfur 109 3.5.3 Tác động PĐDR, GA, cao BMT-T IB1 cấu trúc tế bào M furfur 110 3.6 Khảo sát hiệu phối hợp PĐDR số chất 112 3.6.1 Hiệu phối hợp PĐDR acid salicylic, acid benzoic 112 3.6.2 Hiệu phối hợp PĐDR cao BMT-T 113 3.7 Thăm dò tính kích ứng liều tác dụng PĐDR 115 3.7.1 Tính kích ứng PĐDR da thỏ 115 3.7.2 Khảo sát tính kích ứng liều tác dụng PĐDR da người tình nguyện 117 3.7.3 Tính kích ứng da tác dụng PĐDR công thức 118 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 4.1 Sàng lọc dược liệu kháng M furfur 123 4.2 Chiết xuất, phân lập xác đònh cấu trúc hoá học hoạt chất kháng M furfur chiết từ BMT-T Riềng nếp 125 4.3 Tác dụng kháng Malassezia spp BMT-T Riềng nếp 129 4.4 Cơ chế tác động BMT-T Riềng nếp Malassezia spp 130 4.5 Liều tác dụng tính kích ứng PĐDR người tình nguyện 133 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 136 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ CỦA TÁC GIẢ TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ACA Acetoxychavicol acetat - Hoạt chất kháng nấm chiết từ thân rễ Riềng nếp AEA 1’ Acetoxyeugenol acetat BMT Cây Bơng móng tay – Impatiens balsamina L Balsaminaceae BMT-Đ Cây Bơng móng tay hoa đỏ BMT-H Cây Bơng móng tay hoa hồng BMT-T Cây Bơng móng tay hoa trắng BMT-t Cây Bơng móng tay hoa tím DMSO Dimethyl sulfoxid HPLC High performance liquid chromatography – Sắc ký lỏng hiệu cao GA Galangal acetat GC Gas chromatography – Sắc ký khí Ib- AMP Peptid giàu cystein chiết từ hạt Bơng móng tay IB1 Hoạt chất chiết từ Bơng móng tay trắng kháng Malassezia spp KTC Ketoconazol Mf A Vi nấm Malassezia furfur ATCC 44344 MFC Minimum fungicidal concentration – Nồng độ tối thiểu chất thử có tác dụng diệt nấm MIC Minimum inhibited concentration – Nồng độ tối thiểu chất thử có tác dụng ức chế phát triển vi sinh vật MOPS Acid 3-[N-morpholino]propanesulfonic – chất đệm cho mơi trường RPMI 1640 MT Morphogenesic transformation – Nồng độ ức chế chuyển dạng vi nấm từ dạng men sang dạng sợi NCCLS National committee for clinical laboratory standards MNQ 2-methoxy-1,4-naphthoquinon – Hoạt chất kháng nấm Bơng móng tay NSB Thuốc nhuộm Nile Blue Sulfat Nyst Nystatin PĐDR/DR Phân đoạn dạng dầu, có hoạt tính kháng nấm, chiết từ thân rễ Riềng nếp RPMI 1640 Mơi trường dùng xác định hoạt tính chất kháng nấm qui định NCCLS Thành phần mơi trường gồm acid amin vitamin RPMI-S Mơi trường RPMI 1640 bổ sung acid béo cần thiết cho phát RPMI-S1 triển vi nấm Malassezia spp RPMI-S2 Mơi trường RPMI 1640 bổ sung acid béo cần thiết để tạo chuyển dạng Malassezia furfur từ nấm men sang nấm sợi SKLM Sắc ký lớp mỏng VKN Vết kháng nấm xác định mỏng sắc ký kỹ thuật hình sinh học DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Tên bảng 1.1 Một số thuốc dùng trò lang ben nấm da theo kinh Trang nghiệm dân gian 18 1.2 Một số hợp chất naphthoquinon có BMT 22 1.3 Một số hợp chất phenolic có BMT 22 1.4 Một số hợp chất flavonol có vỏ BMT-T 23 2.5 Một số dược liệu dùng sàng lọc tác dụng kháng M furfur 2.6 36 Cây BMT khác màu hoa nghiên cứu tác dụng kháng M furfur 37 2.7 Một số loài riềng nghiên cứu tác dụng kháng M furfur 38 2.8 Tên thành phần môi trường sử dụng nghiên cứu 40 2.9 Khoá đònh danh Malassezia spp 48 2.10 Thang điểm mức độ kích ứng da thỏ 54 2.11 Thang điểm mức độ kích ứng da người tình nguyện 55 2.12 Các đặc điểm ghi nhận bôi chất thử lặp lại da bệnh lang ben 56 2.13 Tác dụng kháng M furfur cao chiết tinh dầu 58 3.14 MIC trung bình cao BMT theo màu hoa khác 59 3.15 Đặc điểm thân rễ tên khoa học mẫu riềng 62 3.16 MIC cao CHCl3 EtOH VKN loại Riềng 65 3.17 Hiệu suất chiết cao BMT-T với dung môi phương pháp khác 72 3.18 Đặc điểm phân đoạn tách từ BMT-T 73 3.19 So sánh phân mảnh MS IB1 thư viện phổ 75 3.20 Dòch chuyển hoá học 1H NMR 13 C NMR IB1 so với 2-methoxy-1,4-naphthoquinon (MNQ) 76 3.21 Đặc điểm nhận dạng thân rễ Riềng nếp 78 3.22 Thể chất MIC PĐDR chiết theo qui trình qui trình 80 3.23 Hiệu suất chiết PĐDR từ lô riềng 81 3.24 Thành phần hoá học PĐDR xác đònh GC-MS 83 3.25 Đặc điểm phân đoạn tách từ PĐDR qua sắc ký cột 84 3.26 Tác dụng kháng M furfur chất G so với PĐDR 86 3.27 Dòch chuyển hóa học phổ NMR hợp chất G 88 3.28 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống mẫu đối chiếu 90 3.29 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống mẫu thử (PĐDR) 91 3.30 Kết khảo sát tính tuyến tính 91 3.31 Kết kiểm tra độ xác phương pháp sắc ký khí 92 3.32 Kết khảo sát độ phương pháp 93 3.33 Hàm lượng GA trung bình PĐDR thân rễ Riềng nếp (GC) 93 3.34 Một số điều kiện thăm dò để triển khai HPLC 94 3.35 Tính tương thích hệ thống mẫu đối chiếu GA (HPLC) 96 3.36 Tính tương thích hệ thống mẫu thử (PĐDR-HPLC) 96 3.37 Tương quan nồng độ chất đối chiếu GA diện tích đỉnh 97 3.38 Kết khảo sát độ xác (HPLC) 98 3.39 Kết khảo sát độ (HPLC) 98 3.40 Lượng GA % thân rễ Riềng nếp đònh lượng HPLC 99 3.41 Phân bố loài Malassezia spp ly trích từ vẩy da 102 xxiv Phụ lục 8a So sánh kết lâm sàng sau tuần bơi thuốc TT Họ Huỳnh H Kết lâm sàng Tuần Tuần Tên A di Nguyễn Thị D 5 Nguyễn Tr TD 5 Lê Thị H 5 Nguyễn Thị NH 5 Võ Cơng H 5 Huỳnh Tấn L 5 Đặng Kim N 5 Dỗn Minh T 5 10 Hứa Hồng T 5 11 Lê Bổn T 5 12 Lê Minh T 5 13 Đỗ Cao T 5 14 Trần Thị PT 5 15 Võ Thị TT 5 16 Nguyễn Thị TV 5 17 Ngơ Thị NY 5 n = 17 n = 17 Xếp di theo trị số tuyệt đối từ nhỏ đến lớn di 5 5 5 5 5 5 5 5 hạng 9 9 9 9 9 9 9 9 gọi T(+) tổng hạng dương → T(+) = 153 T(-) tổng hạng âm → T(-) = T (-) < T(+) nên T(-) chọn để tham chiếu xxv Tra bảng T : trị số T ứng với n = 17, P = 0,01 23,3 T(-) = < 23,3 → P < 0,01 Kết luận: khác biệt kết lâm sàng sau tuần bơi thuốc so với trước bơi thuốc có ý nghĩa thống kê (P < 0,01) Phụ lục 8b So sánh kết lâm sàng sau tuần bơi thuốc TT kết lâm sàng Tuần Tuần 10 Họ Tên di 10 Huỳnh H A Lê Thị H 10 10 Võ Cơng H 10 10 Đặng Kim N 10 10 Dỗn Minh T 10 10 12 Lê Minh T 10 10 13 Đỗ Cao T 10 10 n=7 n=7 Xếp di theo trị số tuyệt đối từ nhỏ đến lớn Di 10 10 10 10 10 10 10 Hạng 4 4 4 gọi T(+) tổng hạng dương → T(+) = 28 T(-) tổng hạng âm → T(-) = T (-) < T(+) nên T(-) chọn để tham chiếu Tra bảng T : trị số T ứng với n = 7, P = 0,05 2,1 T(-) = < 2,1 → P < 0,05 Kết luận: khác biệt kết lâm sàng sau tuần bơi thuốc so với trước bơi thuốc có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) xxvi PL 8c So sánh kết lâm sàng sau tuần bơi thuốc TT Họ Kết lâm sàng Tên Tuần Tuần di Huỳnh H A 15 15 Nguyễn Thị D 15 15 Lê Thị H 15 15 Đặng Kim N 15 15 Dỗn Minh T 10 10 13 Đỗ Cao T 10 10 n=6 n=6 Xếp di theo trị số tuyệt đối từ nhỏ đến lớn di 10 10 15 15 15 15 hạng 1,5 1,5 4,5 4,5 4,5 4,5 gọi T(+) tổng hạng dương → T(+) = 21 T(-) tổng hạng âm → T(-) = T (-) < T(+) nên T(-) chọn để tham chiếu Tra bảng T : trị số T ứng với n = 6, P = 0,05 0,6 T(-) = < 0,6 → P < 0,05 Kết luận: khác biệt kết lâm sàng sau tuần bơi thuốc so với trước bơi thuốc có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) xxvii Phụ lục So sánh lượng ổ nấm vi trường (x 400) sau tuần bôi thuốc TT Họ Tên Lượng ổ nấm/vi trường (x400) Trước bôi thuốc Tuần Tuần Tuần Huỳnh H A 10 10 10 Nguyễn Thò D 10 10 10 Nguyễn Tr TD 10 - - Lê Thò H 10 10 10 Nguyễn Thò NH 10 - - Võ Công H 10 10 - Huỳnh Tấn L 10 10 - Đặng Kim N 10 10 10 Doãn Minh T 10 10 10 10 Hứa Hồng T 10 - - 11 Lê Bổn T 10 - - 12 Lê Minh T 10 10 - 13 Đỗ Cao T 10 10 10 14 Trần Thò PT 10 - - 15 Võ Thò TT 10 - - 16 Nguyễn Thò TV 10 - - 17 Ngô Thò NY 10 - - n = 17 n = 17 n=9 n=6 P < 0,01 P < 0,01 P < 0,05 Test Wilcoxon, so với trước bôi thuốc xxviii Phụ lục 9a So sánh lượng ổ nấm vẩy da sau tuần bôi thuốc Lượng ổ nấm/ vi trường (x400) TT Họ Tên Tuần Tuần di Huỳnh H A 10 Nguyễn Thị D 10 Nguyễn Tr TD 10 10 Lê Thị H 10 Nguyễn Thị NH 10 Võ Cơng H 10 Huỳnh Tấn L 10 10 Đặng Kim N 10 Dỗn Minh T 10 10 Hứa Hồng T 10 11 Lê Bổn T 10 12 Lê Minh T 10 13 Đỗ Cao T 10 10 14 Trần Thị PT 10 15 Võ Thị TT 10 16 Nguyễn Thị TV 10 17 Ngơ Thị NY 10 n = 17 n = 17 Xếp di theo trị số tuyệt đối từ nhỏ đến lớn di 4 4 4 4 4 4 7 10 10 10 H 6,5 6,5 6,5 6,5 6,5 6,5 6,5 6,5 6,5 6,5 6,5 6,5 13,5 13,5 16 16 16 H: hạng gọi T(+) tổng hạng dương → T(+) = 153 T(-) tổng hạng âm → T(-) = T (-) < T(+) nên T(-) chọn để tham chiếu Tra bảng T : trị số T ứng với n = 17, P = 0,01 23,3 T(-) = < 23,3 → P < 0,01 Kết luận: giảm lượng ổ nấm sau tuần bơi thuốc so với trước bơi thuốc có ý nghĩa thống kê (P < 0,01) xxix Phụ lục 9b So sánh lượng ổ nấm vẩy da sau tuần bơi thuốc TT Họ Huỳnh H Lượng ổ nấm/ vi trường (x400) Tuần Tuần 10 Tên A di Nguyễn Thị D 10 4 Lê Thị H 10 Võ Cơng H 10 Huỳnh Tấn L 10 10 Đặng Kim N 10 Dỗn Minh T 10 12 Lê Minh T 10 13 Đỗ Cao T 10 10 n=9 n=9 Xếp di theo trị số tuyệt đối từ nhỏ đến lớn di 4 4 4 10 10 Hạng 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 8,5 8,5 gọi T(+) tổng hạng dương → T(+) = 45 T(-) tổng hạng âm → T(-) = T (-) < T(+) nên T(-) chọn để tham chiếu Tra bảng T : trị số T ứng với n = 9, P = 0,01 1,6 T(-) = < 1,6 → P < 0,01 Kết luận: giảm lượng ổ nấm sau tuần bơi thuốc so với trước bơi thuốc có ý nghĩa thống kê (P < 0,01) xxx Phụ lục 9c So sánh lượng ổ nấm vẩy da sau tuần bơi thuốc Lượng ổ nấm/ vi trường (x400) TT Họ Tên Tuần Tuần di Huỳnh H A 10 Nguyễn Thị D 10 4 Lê Thị H 10 Đặng Kim N 10 Dỗn Minh T 10 13 Đỗ Cao T 10 10 n=6 n =6 Xếp di theo trị số tuyệt đối từ nhỏ đến lớn gọi di 4 4 10 Hạng 2,5 2,5 2,5 2,5 T(+) tổng hạng dương → T(+) = 21 T(-) tổng hạng âm → T(-) = T (-) < T(+) nên T(-) chọn để tham chiếu Tra bảng T : trị số T ứng với n = 6, P = 0,05 0,6 T(-) = < 0,6 → P < 0,05 Kết luận: giảm lượng ổ nấm sau tuần bơi thuốc so với trước bơi thuốc có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) xxxi Phụ lục 10 So sánh lượng tế bào nấm vi trường trước sau bơi thuốc Lượng tế bào nấm ổ nấm/1 vi trường TT Họ Tên Trước bôi thuốc Tuần thứ Tuần thứ Tuần thứ Huỳnh H A 10 10 Nguyễn Thò D 10 10 10 Nguyễn Tr TD - - Lê Thò H 10 10 Nguyễn Thò NH - - Võ Công H 10 - Huỳnh Tấn L 7 - Đặng Kim N 10 10 Doãn Minh T 10 10 10 Hứa Hồng T - - 11 Lê Bổn T - - 12 Lê Minh T 10 - 13 Đỗ Cao T 7 10 14 Trần Thò PT - - 15 Võ Thò TT - - 16 Nguyễn Thò TV - - 17 Ngô Thò NY - - n = 17 n = 17 n=9 n=6 P < 0,01 P < 0,01 P < 0,05 Test Wilcoxon, so với trước bôi thuốc xxxii Phụ lục 10a Lượng tế bào nấm vi trường sau tuần bôi thuốc Lượng ổ nấm/ vi trường (x400) TT Họ Tên Tuần Tuần di Huỳnh H A Nguyễn Thị D 10 10 Nguyễn Tr TD 7 Lê Thị H 7 Nguyễn Thị NH Võ Cơng H 7 Huỳnh Tấn L 7 Đặng Kim N 7 Dỗn Minh T 10 Hứa Hồng T 7 11 Lê Bổn T 7 12 Lê Minh T 7 13 Đỗ Cao T 7 14 Trần Thị PT 7 15 Võ Thị TT 7 16 Nguyễn Thị TV 7 17 Ngơ Thị NY n = 17 n = 17 Xếp di theo trị số tuyệt đối từ nhỏ đến lớn di 3 3 7 7 7 7 7 7 10 H 2,5 2,5 2,5 2,5 10,5 10,5 10,5 10,5 10,5 10,5 10,5 10,5 10,5 10,5 10,5 10,5 17 H: hạng gọi T(+) tổng hạng dương → T(+) = 153 T(-) tổng hạng âm → T(-) = T (-) < T(+) nên T(-) chọn để tham chiếu Tra bảng T : trị số T ứng với n = 17, P = 0,01 23,3 T(-) = < 23,3 → P < 0,01 Kết luận: giảm lượng tế bào nấm sau tuần bơi thuốc so với trước bơi thuốc có ý nghĩa thống kê (P < 0,01) xxxiii Phụ lục 10b Lượng tế bào nấm vi trường sau tuần bôi thuốc TT Họ Huỳnh H Tên A Lượng tế bào nấm/ vi trường (x1000) Tuần Tuần 10 di Nguyễn Thị D 10 10 Lê Thị H 10 10 Võ Cơng H 10 10 Huỳnh Tấn L 7 Đặng Kim N 10 10 Dỗn Minh T 10 12 Lê Minh T 10 10 13 Đỗ Cao T 7 n=9 n=9 Xếp di theo trị số tuyệt đối từ nhỏ đến lớn di 6 7 10 10 10 10 10 Hạng 1,5 1,5 3,5 3,5 7 7 gọi T(+) tổng hạng dương → T(+) = 45 T(-) tổng hạng âm → T(-) = T (-) < T(+) nên T(-) chọn để tham chiếu Tra bảng T : trị số T ứng với n = 9, P = 0,01 1,6 T(-) = < 1,6 → P < 0,01 Kết luận: giảm lượng tế bào nấm sau tuần bơi thuốc so với trước bơi thuốc có ý nghĩa thống kê (P < 0,01) xxxiv Phụ lục 10c Lượng tế bào nấm vi trường sau tuần bôi thuốc Lượng tế bào nấm/ vi trường (x1000) TT Họ Tên Tuần Tuần di Huỳnh H A 10 Nguyễn Thị D 10 10 Lê Thị H 10 10 Đặng Kim N 10 10 Dỗn Minh T 10 13 Đỗ Cao T 10 10 n=6 n=6 Xếp di theo trị số tuyệt đối từ nhỏ đến lớn di 6 10 10 10 10 Hạng 1,5 1,5 4,5 4,5 4,5 4,5 gọi T(+) tổng hạng dương → T(+) = 21 T(-) tổng hạng âm → T(-) = T (-) < T(+) nên T(-) chọn để tham chiếu Tra bảng T : trị số T ứng với n = 6, P = 0,05 0,6 T(-) = < 0,6 → P < 0,05 Kết luận: giảm lượng tế bào nấm sau tuần bơi thuốc so với trước bơi thuốc có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) xxxv Phụ lục 11 Mức độ kích ứng da người tình nguyện bôi thuốc chứa PĐDR 1,25% TT Họ Tên Kết kích ứng da người bôi thuốc Trước bôi thuốc Tuần Tuần Tuần Huỳnh H A 10 10 10 10 Nguyễn Thò D 10 10 0 Nguyễn Tr TD 10 10 - - Lê Thò H 10 10 10 10 Nguyễn Thò NH 10 10 - - Võ Công H 10 10 10 - Huỳnh Tấn L 10 10 - Đặng Kim N 10 10 3 Doãn Minh T 10 10 6 10 Hứa Hồng T 10 10 - - 11 Lê Bổn T 10 10 - - 12 Lê Minh T 10 10 - 13 Đỗ Cao T 10 10 10 14 Trần Thò PT 10 10 - - 15 Võ Thò TT 10 10 - - 16 Nguyễn Thò TV 10 10 - - 17 Ngô Thò NY 10 10 - - n = 17 n = 17 n=9 n=6 P > 0,05 P > 0,05 Test Wilcoxon, so với trước bôi thuốc xxxvi Phụ lục 11a Mức độ kích ứng sau tuần bôi thuốc Mức độ kích ứng TT Họ Tên Tuần Tuần di Huỳnh H A 10 10 Nguyễn Thị D 10 -10 Lê Thị H 10 10 Võ Cơng H 10 10 Huỳnh Tấn L 10 -10 Đặng Kim N 10 -7 Dỗn Minh T 10 -4 12 Lê Minh T 10 -4 13 Đỗ Cao T 10 10 n=9 n=9 Xếp di theo trị số tuyệt đối từ nhỏ đến lớn di 0 0 -4 -4 -7 -10 -10 Hạng 2,5 2,5 2,5 2,5 5,5 5,5 8,5 8,5 gọi T(+) tổng hạng dương → T(+) = 10 T(-) tổng hạng âm → T(-) = 35 T (+) = 10 < T(-) nên T(+) chọn để tham chiếu Tra bảng T : trị số T ứng với n = 9, P = 0,05 8,1 T(+) = 10 > 0,6 → P > 0,05 Kết luận: Sự khác biệt mức độ kích ứng sau tuần bơi thuốc khơng có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) xxxvii Phụ lục 11b Mức độ kích ứng sau tuần bôi thuốc Múc độ kích ứng TT Họ Tên Tuần Tuần di Huỳnh H A 10 10 Nguyễn Thị D 10 -10 Lê Thị H 10 10 Đặng Kim N 10 -7 Dỗn Minh T 10 -4 13 Đỗ Cao T 10 -10 n=6 n=6 Xếp di theo trị số tuyệt đối từ nhỏ đến lớn di 0 -4 -7 -10 -10 Hạng 1,5 1,5 5,5 5,5 gọi T(+) tổng hạng dương → T(+) = T(-) tổng hạng âm → T(-) = 18 T (+) = < T(-) nên T(+) chọn để tham chiếu Tra bảng T : trị số T ứng với n = 6, P = 0,05 0,6 T(+) = > 0,6 → P > 0,05 Kết luận: Sự khác biệt mức độ kích ứng sau tuần bơi thuốc khơng có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) xxxviii Phụ lục 11c So sánh mức độ kích ứng tuần thứ tuần thứ bơi thuốc Mức độ kích ứng TT Họ Tên Tuần Tuần di Huỳnh H A 10 10 Nguyễn Thị D 0 Lê Thị H 10 10 Đặng Kim N 3 Dỗn Minh T 6 13 Đỗ Cao T 10 -10 n=6 n=6 Xếp di theo trị số tuyệt đối từ nhỏ đến lớn di 0 0 -10 Hạng 3 3 gọi T(+) tổng hạng dương → T(+) = 15 T(-) tổng hạng âm → T(-) = T (-) = < T(+) nên T(-) chọn để tham chiếu Tra bảng T, trị số T ứng với n = 6, P = 0,05 0,6 T(-) = > 0,6 → P > 0,05 Kết luận: Sự khác biệt mức độ kích ứng tuần thứ tuần thứ bơi thuốc khơng có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) [...]... được nghiên cứu sàng lọc và nhận thấy có tác dụng kháng vi nấm gây bệnh lang ben 18 Bảng 1.1 Một số cây thuốc dùng trò bệnh lang ben và nấm da theo kinh nghiệm dân gian Tên khoa học Alpinia galanga (L.) Tên Vi t Nam Thành phần chính Tác dụng kháng nấm 1,8-cineol, terpinen- Candida, nấm da Willd 4-ol, -pinen, - Thân rễ dùng Zingiberaceae pinen, limonene, ngoài trò nấm da [10],[27],[54] diterpen, galangal... dân số ở vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới [66] Ở Hoa kỳ bệnh chiếm từ 2-8% dân số, mặc dù tỉ lệ mắc bệnh chính xác khó thống kê được vì nhiều người bò bệnh này không quan tâm đến vi c chăm sóc y tế Ở một số vùng bờ biển của Mexico và tây Samoa, 50% dân số mắc bệnh [20] Ở Tripoli, Libya bệnh lang ben chiếm 27,8% trong số các bệnh nhân bò bệnh ngoài da do vi nấm, đứng sau bệnh nấm da nhưng cao hơn bệnh. .. trò gây bệnh của các loài này đã có nhiều thay đổi, ngoài M furfur các loài Malassezia khác cũng có thể gây bệnh lang ben và các bệnh da khác 1.1.4.1 Bệnh lang ben Tất cả các loài Malassezia lệ thuộc lipid đều được tìm thấy ở da người bình thường ở dạng nấm men Dưới một số điều kiện ngoại sinh lẫn nội sinh, vi nấm này chuyển từ dạng tế bào men sang dạng sợi nấm gây bệnh Sự chuyển dạng của vi nấm gây. .. nguồn thuốc trò bệnh da do vi nấm từ những nguyên liệu quen thuộc với người dân, đã được người dân sử dụng nhưng tiện lợi, dễ sử dụng và có hiệu quả hơn Thực hiện đề tài nghiên cứu này chúng tôi mong muốn đạt các mục tiêu sau: 1 Sàng lọc một số cây thuốc kháng Malassezia furfur từ đó chọn một đến hai cây thuốc có tác dụng mạnh để nghiên cứu sâu 2 Nghiên cứu đặc điểm thực vật kết hợp với tác dụng kháng nấm. .. [79] Ở Vi t Nam, trong thời kỳ chiến tranh, bệnh da là nguyên nhân thường gặp nhất ở những bệnh nhân khám ngoại trú, chiếm 12,3%, loại bệnh thường nhất là bệnh nấm da, lang ben và bệnh da do Candida; trong đó bệnh lang ben chiếm 2,7% người khám bệnh, là một trong 10 bệnh da thường gặp nhất [132] Bệnh thường tấn công vào những tháng hè Kim và Suh nghiên cứu trên 50 bệnh nhân Hàn quốc, 66% bò bệnh vào... minh tác dụng kháng nấm trên nấm da, nấm men và nấm mốc Riêng dược liệu sử dụng để trò lang ben chủ yếu được dùng theo kinh nghiệm dân gian, chưa có nghiên cứu hệ thống cũng như chưa được chứng minh bằng những thử nghiệm sinh học Các cây thuốc liệt kê ở bảng 1.1 đã được dùng trò bệnh nấm da, lang ben theo kinh nghiệm dân gian hoặc được chứng minh có tác dụng kháng nấm Trong số các cây này, cây Bông móng... đời khác để trò lang ben và bệnh nấm da như dùng củ Riềng, Rau răm, Muồng trâu [3],[8] Với xu hướng tìm thuốc mới từ nguồn gốc tự nhiên và để thực hiện đường lối kế thừa, phát huy và phát triển nền Y học cổ truyền dân tộc, chúng tôi nghiên cứu một số cây thuốc kháng vi nấm gây bệnh lang ben, giải thích cơ chế tác động của các cây thuốc chọn nghiên cứu, nhằm chứng minh một cách khoa học kinh nghiệm trò... như vi m nang lông, vi m da tăng tiết bã và gàu, vi m da thể tạng và có thể gây nhiễm trùng lan toả nếu có điều kiện xâm nhập [30],[96] Malassezia cùng với một số vi nấm khác như Candida spp (không là C albicans), Fusarium, Trichosporon thường được cho là những vi nấm ít hoặc không gây bệnh cho người, hiện nay đã trở thành vi nấm gây bệnh cơ hội quan trọng, các bệnh nhiễm nấm xâm nhập do chúng gây. .. điểm của nhóm thuốc này là gây kích thích da, có mùi hôi, thời gian điều trò lâu, đôi khi gây rụng tóc, gây vi m da 1.2.3 Nhóm kháng sinh kháng nấm Thuốc kháng nấm thường được sử dụng hiện nay là các azol Đây là những chất có phổ kháng nấm rộng, có tác dụng ức chế C-14 demethylase làm cho lượng ergosterol ở tế bào nấm giảm dần, giảm tính cứng rắn của tế bào nấm Để điều trò lang ben và các bệnh da khác... men phát sinh từ sợi nấm G H Hình 1.5 Sự tạo thành ổ nấm mới ở lớp sừng G:Ổ nấm mới tạo thành từ sợi nấm xâm nhập H: Các tế bào men phát triển ở ổ nấm mới 11 1.1.4 Bệnh học [10],[11] Malassezia phát triển ở lớp sừng của da, gây một số bệnh mãn tính như lang ben, gầu, vi m da tăng tiết bã, vi m nang lông… Các bệnh trên trước đây được cho là do M furfur gây ra vàø M pachydermatis gây bệnh cơ hội Từ khi ... cho vi nấm không gây bệnh cho người, trở thành vi nấm gây bệnh hội quan trọng, bệnh nhiễm nấm xâm nhập chúng gây chiếm đến 11%, Candida spp (85,6%) [128] Vấn đề vi nấm gây bệnh hội với vi nấm kháng. .. Riềng nếp nghiên cứu sàng lọc nhận thấy có tác dụng kháng vi nấm gây bệnh lang ben 18 Bảng 1.1 Một số thuốc dùng trò bệnh lang ben nấm da theo kinh nghiệm dân gian Tên khoa học Alpinia galanga (L.)... Samoa, 50% dân số mắc bệnh [20] Ở Tripoli, Libya bệnh lang ben chiếm 27,8% số bệnh nhân bò bệnh da vi nấm, đứng sau bệnh nấm da cao bệnh da Candida [79] Ở Vi t Nam, thời kỳ chiến tranh, bệnh da nguyên