Đặc điểm thành thục sinh dục và ứng dụng hormon steroid trong sinh sản nhân tạo cá rô biển (pristolepis fasciata bleeker, 1851 (TT)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ PHAN PHƢƠNG LOAN ĐẶC ĐIỂM THÀNH THỤC SINH DỤC VÀ ỨNG DỤNG HORMON STEROID TRONG SINH SẢN NHÂN TẠO CÁ RÔ BIỂN Pristolepis fasciata (Bleeker, 1851) Chuyên ngành: Nuôi trồng Thủy sản Mã số: 62620301 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ THỦY SẢN 2016 i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ PHAN PHƢƠNG LOAN ĐẶC ĐIỂM THÀNH THỤC SINH DỤC VÀ ỨNG DỤNG HORMON STEROID TRONG SINH SẢN NHÂN TẠO CÁ RÔ BIỂN Pristolepis fasciata (Bleeker, 1851) Chuyên ngành: Nuôi trồng Thủy sản Mã số: 62620301 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ THỦY SẢN Ngƣời hƣớng dẫn khoa học TS Phạm Thanh Liêm TS Bùi Minh Tâm 2016 ii Công trình hoàn thành tại: Khoa Thủy Sản, Trƣờng Đại học Cần Thơ Người hướng dẫn khoa học: TS Phạm Thanh Liêm TS Bùi Minh Tâm Phản biện 1:………………………………………………………… Phản biện 2:………………………………………………………… Phản biện 3:………………………………………………………… Luận án bảo vệ Hội đồng chấm luận án cấp Trường Họp tại……………………………………………………………… Vào …… giờ………, ngày………tháng…… năm……………… Có thể tìm luận án tại: Trung tâm học liệu Trƣờng Đại học Cần Thơ Thƣ viện Quốc gia iii Chƣơng TỔNG QUAN VỀ LUẬN ÁN 1.1 Giới thiệu Cá rô biển Pristolepis fasciata (Bleeker, 1851) loài cá địa đặc trưng miền Nam, Việt Nam Đây loài rộng muối, phân bố nước lợ Cá rô biển có phẩm chất thịt ngon xương giăm nên người dân Đồng sông Cửu Long (ĐBSCL) ưa thích Trong vài năm gần đối tượng trở nên khan tình trạng lạm thác nên sản lượng đánh bắt không đủ đáp ứng nhu cầu người tiêu dùng Giá bán thị trường cá rô biển cao, từ 120.000150.000 đồng/kg kích cỡ 10-12 con/kg (Phan Phương Loan, 2014) Chính vậy, cá rô biển đối tượng có tiềm để phát triển nuôi hệ thống nuôi trồng thủy sản ĐBSCL khắp nước Để đưa cá rô biển trở thành đối tượng nuôi quan trọng tương lai việc sản xuất giống nhân tạo đủ số lượng tốt chất lượng yêu cầu Hiện nay, công trình nghiên cứu cá rô biển công bố hạn chế Để phát triển nuôi cá rô biển tương lai cần có nhiều nghiên cứu sâu đặc điểm sinh học, đặc biệt sinh lý sinh sản, biện pháp dưỡng, nuôi vỗ cá bố mẹ, kích thích sinh sản nhân tạo, ương giống,… Trong nghiên cứu thực tế sinh sản nhân tạo loài cá Việt Nam nói chung ĐBSCL nói riêng, chất kích thích sinh sản có nguồn gốc tự nhiên kích dục tố não thùy thể cá chế phẩm HCG (Human Chorionic Gonadotropin) chất tổng hợp từ công nghệ sinh học LHRHa (Luteinizing Hormone-Releasing Hormone analogue) thường sử dụng (Nguyễn Tường Anh, 1997) Ngoài chất kích thích sinh sản trên, số nghiên cứu sinh sản nhân tạo nước cá cho thấy hormon steroid C21 progesteron (P), 17 - hydroxyprogesteron (17P) 17α, 20β-dihydroxy progesteron (17,20P) có hiệu gây chín rụng trứng quy mô thí nghiệm in vitro sản xuất (Nguyễn Tường Anh, 1999a) Để có sở khoa học nhằm đưa hormon steroid vào thực tiễn sản xuất việc so sánh đánh giá tác dụng gây chín rụng trứng chúng so với chất kích thích sinh sản thường sử dụng đối tượng cụ thể cần thiết Điều nhằm đa dạng hoá chất kích thích sinh sản sản xuất giống nhân tạo cá nói chung cá rô biển nói riêng Với lý trên, đề tài “Đặc điểm thành thục sinh dục ứng dụng hormon steroid sinh sản nhân tạo cá rô biển Pristolepis fasciata (Bleeker, 1851)” thực 1.2 Mục tiêu tổng quát luận án Bổ sung liệu khoa học đặc điểm sinh học cá rô biển, khả gây chín rụng trứng hormon steroid cá rô biển, cung cấp sở lý luận nhằm phát triển quy trình sản xuất giống nhân tạo nuôi thương phẩm cá rô biển; từ góp phần đa dạng hóa đối tượng cá nuôi cho vùng Đồng sông Cửu Long nói riêng nước nói chung 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn luận án Về mặt khoa học, luận án cung cấp kiến thức đặc điểm sinh học sinh sản cá rô biển, cung cấp số liệu khoa học ảnh hưởng loại thức ăn đến thành thục sinh dục cá dưỡng nuôi ao đất Đặc biệt, nghiên cứu luận án tìm phương thức sử dụng hormon steroid sinh sản nhân tạo cá rô biển Bên cạnh đó, với kết nghiên cứu phát triển ống tiêu hoá góp phần nâng cao tỷ lệ sống ấu trùng cá trình ương giống Những kết luận luận án nguồn liệu khoa học quan trọng góp phần hoàn thiện quy trình sản xuất giống nhân tạo cá rô biển, tạo khả cung cấp giống góp phần đưa cá rô biển thành đối tượng nuôi đầy tiềm hiệu kinh tế 1.4 Những điểm luận án Kết nghiên cứu luận án có đóng góp lý thuyết ứng dụng sản xuất - Cung cấp dẫn liệu đặc điểm sinh học sinh sản cá rô biển kích thước thành thục lần đầu, đặc điểm phát triển tuyến sinh dục, hệ số thành thục, sức sinh sản, mùa vụ sinh sản cá Những dẫn liệu làm sở khoa học cho việc xây dựng giải pháp bảo vệ nguồn lợi, dưỡng góp phần xây dựng quy trình sản xuất giống nhân tạo đối tượng - Xác định phương pháp nuôi, loại thức ăn phù hợp khả thành thục cá rô biển điều kiện nuôi nhốt Kết góp phần xây dựng quy trình sản xuất giống nhân tạo đối tượng - Đã đánh giá khả xác định phương pháp sử dụng loại steroid 17,20P; 17P P để kích thích cá rô biển sinh sản: kích thích cá sinh sản thành công với 17,20P liều định sau liều sơ với HCG hay LRH-A3 Việc sử dụng hormon steroid kích thích cá rô biển sinh sản hoàn toàn kết góp phần đa dạng chất kích thích sinh sản quy trình sản xuất giống nhân tạo đối tượng - Nghiên cứu xác định trình phát triển phôi, ấu trùng cá cá rô biển thời gian ấu trùng dinh dưỡng noãn hoàng, thời gian hoàn thiện trình phát triển ống tiêu hoá thời điểm cá bắt đầu ăn thức ăn bên Những kết góp phần quan trọng việc ương giống thành công đối tượng Chƣơng PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu tiến hành từ năm 2011-2014 Tất thí nghiệm thực Khoa Thuỷ Sản, Trường Đại học Cần Thơ Khoa Nông Nghiệp – Tài Nguyên Thiên Nhiên, Trường Đại học An Giang 3.2 Đối tƣợng nghiên cứu Cá rô biển Pristolepis fasciata (Bleeker, 1851) 3.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 3.3.1 Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản cá rô biển 3.3.1.1 Phương pháp thu mẫu - Mẫu cá rô biển có khối lượng từ 19-360 gam/con thu điểm tuyến sông Hậu thuộc địa bàn tỉnh An Giang liên tục từ tháng 5/2012 đến tháng 4/2013 Mẫu cá bảo quản dung dịch formol 10% tiêu mô học buồng trứng thực theo phương pháp Drury and Wallington (1967) Kiernan (1990) Tiêu nhuộm với thuốc nhuộm Haematoxyline Eosin (H&E) theo Hinton (1990) 3.3.1.2 Các tiêu phân tích - Xác định giai đoạn phát triển tuyến sinh dục dựa theo thang bậc Xakun and Buskaia (1968) - Chiều dài thành thục lần đầu Lm hay L50 kích thước mà 50% cá thể thành thục tính toán theo công thức King (1995) - Xác định hệ số thành thục (Gonadosomatic Index, GSI) theo công thức Crim and Glebe (1990) - Xác định sức sinh sản theo Banegal (1967) - Xác định đường kính trứng thước đo kính hiển vi với số lượng trứng 30 tế bào mẫu 3.3.2 Nghiên cứu số tiêu sinh lý sinh sản cá rô biển 3.3.2.1 Phương pháp thu mẫu Mẫu cá rô biển thu địa bàn tỉnh An Giang có khối lượng trung bình 51,8 gam/con chiều dài trung bình 12,9 cm mùa sinh sản cá tự nhiên để có đủ giai đoạn phát triển tuyến sinh dục Mẫu cá giữ sống chuyển phòng thí nghiệm Bộ môn Dinh dưỡng Chế biến thuỷ sản để tiếp tục phân tích 3.3.2.2 Các tiêu phân tích - Các tiêu máu: số lượng hồng cầu; tỷ lệ huyết cầu (hematocrit), thể tích trung bình hồng cầu xác định theo phương pháp Larsen and Snieszko (1961; trích Đỗ Thị Thanh Hương Nguyễn Văn Tư, 2010) - Protein gan cá xác định theo phương pháp Lowry et al (1951), sử dụng Bovine serum albumin (BSA, Sigma) làm đường chuẩn - Hàm lượng vitellogenin xác định thông qua hàm lượng phosphate protein huyết tương 3.3.3 Nghiên cứu nuôi vỗ thành thục sinh dục cá rô biển loại thức ăn khác 3.3.3.1 Hệ thống thí nghiệm Thí nghiệm nuôi vỗ thành thục sinh dục cá rô biển bố trí giai lưới (30 m2/giai) đặt ao đất Mực nước giai sâu 1,8 m Nước ao trao đổi tháng lần theo thuỷ triều Trong ao, hệ thống phun mưa thiết kế vị trí đặt giai nhằm tăng cường ôxy 3.3.3.2 Cá dùng thí nghiệm Cá dùng thí nghiệm đánh bắt từ tự nhiên Cá thích ứng giai để làm quen với điều kiện nuôi nhốt thức ăn chế biến (3 tháng) Tiến hành chọn cá có kích cỡ tương đồng khoẻ mạnh để bố trí thí nghiệm Hình Vi bụng cá đực (trái) cá (phải) Tiêu chuẩn lựa chọn cá đực đưa vào nuôi vỗ sau (Hình 1): - Cá đực: có khối lượng từ 40-80 gam/con Cá đực có vây bụng dài tới lỗ niệu-sinh dục - Cá cái: có khối lượng từ 60-100 gam/con Cá có vây bụng ngắn cá đực 3.3.3.3 Bố trí thí nghiệm Thí nghiệm bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên giai với nghiệm thức (NT) lặp lại lần Mật độ nuôi vỗ 0,5 kg cá/m2 Tỷ lệ đực:cái 1:1 Thức ăn dùng nuôi vỗ cá bố mẹ cá tạp (cá biển) thức ăn công nghiệp dùng cho cá có vẩy có 35% protein (Bảng 1) - NT 1: 100% cá tạp (được băm nhỏ) - NT 2: 50% cá tạp + 50% thức ăn công nghiệp (theo khối lượng) - NT 3: 100% thức ăn công nghiệp Bảng Kết phân tích thức ăn nuôi vỗ thành thục cá rô biển (theo % khối lượng tự nhiên thức ăn) Thức ăn Cá tạp Thức ăn CN Vật chất khô (%) 24,07 91,29 Protein (%) 16,78 35,06 Béo (%) 3,56 2,79 Tro (%) 3,50 8,74 3.3.3.4 Cho ăn chăm sóc Cá cho ăn ngày lần vào lúc 17 với mức thỏa mãn theo nhu cầu Các tiêu thủy lý – hóa (nhiệt độ, ôxy hoà tan, pH, amôn tổng số (TAN) nitrite): định kỳ tuần đo lần vào lúc sáng 14 chiều theo phương pháp chuẩn 3.3.3.5 Các tiêu phân tích - Hệ số thành thục (GSI) tỷ lệ thành thục cá đánh giá tháng/lần từ bố trí thí nghiệm nuôi vỗ Thời gian bắt đầu thí nghiệm nuôi vỗ đến kết thúc tháng 3.3.4 Nghiên cứu xác định loại, liều lƣợng, phƣơng pháp tiêm hormon steroid kích thích cá rô biển chín rụng trứng 3.3.4.1 Cá thí nghiệm Cá rô biển dùng thí nghiệm chọn từ cá thành thục sinh dục thí nghiệm nuôi vỗ Cá chọn cá khoẻ mạnh, thành thục sinh dục tốt (tuyến sinh dục giai đoạn IV), khối lượng từ 50-100 g/con 3.3.4.2 Các loại hormon sử dụng nghiên cứu * Progesterone (P) 17-hydroxyprogesterone (17P): Công ty Sigma (Pháp), dạng bột, màu trắng 17α, 20β – dihydroxyprogesterone (17,20P) điều chế từ 17P phản ứng khử NaBH4 theo Norymberski and Woods (1955) - Tất hormon steroid hòa tan cồn tuyệt đối Thể tích dung dịch 17,20P, 17P P tiêm cho cá khống chế mức mL cho kg cá tiêm vào xoang thân cá * LRH-A3 Trung Quốc sản xuất; * Domperidon (DOM) Công ty dược phẩm Hậu Giang * Human Chorionic Gonadotropin (HCG): sản phẩm Công ty dịch vụ nuôi trồng thuỷ sản trung ương thuộc Bộ Nông Nghiệp & PTNT - Các hormon HCG, LRH-A3+DOM tiêm vào 3.3.4.3 Bố trí thí nghiệm Thí nghiệm (TN1): Ảnh hưởng loại steroid lên trình chín noãn bào cá rô biển Thí nghiệm gồm thử nghiệm nhằm đánh giá khả gây chín noãn bào cá rô biển liều gây chín tối ưu loại steroid P, 17P 17,20P Trong thí nghiệm không sử dụng liều sơ để đảm bảo chín noãn bào tác động steroid Mỗi thử nghiệm tiến hành cá cái, chia ngẫu nhiên thành nghiệm thức trình bày bảng sau Bảng Thử nghiệm đánh giá chín noãn bào cá rô biển với hormon steroid liều lượng khác Tên NT Số cá cái/ lần lập lại 3 Liều steroid (mg/kg cá cái) 17P 10 15 P 10 15 20 17,20P - Tác động gây chín noãn bào steroid đánh giá vào lúc sau tiêm hormon Phương pháp đánh giá chín noãn bào (Final oocyte maturation-FOM) theo Brzuska (1979); Mishra and Joy (2006); Tokumoto et al (2011) Żarski et al (2011) Các tiêu phân tích TN1 + Sự thay đổi kích thước trứng sau tiêm loại steroid + Tỷ lệ chín trứng: tỷ số trứng chín tổng số trứng quan sát Thí nghiệm (TN2): Kích thích sinh sản cá rô biển 17,20P; 17P P liều tiêm định sau liều sơ HCG - Thí nghiệm bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên, gồm nghiệm thức (NT) lặp lại lần NTĐC sử dụng hoàn toàn HCG Liều định cho NTĐC 2.500 IU HCG/kg cá liều định cho NT lại liều steroid tối ưu có tác dụng gây chín noãn bào từ TN1 (Bảng 3) Bảng Thí nghiệm kích thích sinh sản cá rô biển 17,20P, 17P P sau liều sơ HCG NT (ĐC) Số cá 15 15 15 15 Liều sơ (tính cho kg cá cái) 500 IU HCG 500 IU HCG 500 IU HCG 500 IU HCG Liều định (tính cho kg cá cái) 2.500 IU HCG mg 17,20P 10 mg 17P 15 mg P Thí nghiệm (TN3): Kích thích sinh sản cá rô biển 17,20P; 17P P liều tiêm định sau liều sơ LRH-A3+DOM - TN3 bố trí tương tự TN2 NTĐC sử dụng hoàn toàn LRH-A3+DOM Liều định cho NTĐC 56 μg LRH-A3+6 mg DOM /kg cá liều định cho NT lại liều steroid tối ưu có tác dụng gây chín noãn bào từ TN1 (Bảng 4) Bảng Thí nghiệm kích thích sinh sản cá rô biển 17,20P, 17P P sau liều sơ LRH-A3+DOM NT (ĐC) Số cá 15 15 15 15 Liều sơ (tính cho kg cá cái) 14 μg LRH-A3 + mg DOM 14 μg LRH-A3 + mg DOM 14 μg LRH-A3 + mg DOM 14 μg LRH-A3 + mg DOM Liều định (tính cho kg cá cái) 56 μg LRH-A + mg DOM mg 17,20P 10 mg 17P 15 mg P Trong TN2 TN3, cá đực tiêm lần với HCG hay LRHA3+DOM với liều liều sơ (1/3 liều định cá đối chứng) vào thời điểm tiêm liều định cá Thời gian lần tiêm liều sơ liều định TN2 TN3 Áp dụng hình thức sinh sản bán nhân tạo TN2 TN3: cá sau tiêm chất kích thích sinh sản vào bể đẻ (mức nước bể sâu khoảng 40 cm) với tỷ lệ đực/cái = 1/1 để cá tự bắt cặp sinh sản Các tiêu phân tích TN2 TN3 gồm: Thời gian hiệu ứng (giờ); Tỷ lệ cá đẻ (%); Sức sinh sản tương đối thực tế (trứng/g cá cái), Tỷ lệ thụ tinh (%), tỷ lệ nở (%) tỷ lệ sống cá bột (%) 3.3.5 Nghiên cứu phát triển cá rô biển từ giai đoạn phôi đến 30 ngày tuổi 3.3.5.1 Quá trình phát triển phôi, thời gian cá dinh dưỡng noãn hoàng, kích cỡ miệng chiều dài cá bột - Quá trình phát triển phôi quan sát kính hiển vi độ phóng đại vật kính 4X, 10X ghi nhận đầy đủ thời gian hình ảnh từ trứng thụ tinh đến nở thành ấu trùng - Thời gian cá dinh dưỡng noãn hoàng xác định thông qua mức độ giảm đường kính noãn hoàng theo thời điểm khác - Kích cỡ miệng cá xác định dựa theo phương pháp Shirota (1970) 3.3.5.2 Nghiên cứu phát triển ống tiêu hóa từ giai đoạn ấu trùng đến 30 ngày tuổi - Mẫu cá thu vào ngày tuổi 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15 20, 25 30 sau nở Quan sát biến đổi hình thái ống tiêu hóa trực tiếp kính hiển vi Tiêu mô học ống tiêu hóa thực theo phương pháp mô tả Drury and Wallington (1967) Kiernan (1990) 3.3.5.3 Khả chịu đựng cá giai đoạn ấu trùng đến 30 ngày tuổi số yếu tố môi trường Nghiên cứu thực với cá rô biển 1, 5, 10, 20 30 ngày tuổi sau nở - Giai đoạn II (GĐII): buồng tinh hai dãi mỏng có màu hồng nhạt, bề mặt buồng tinh bóng - Giai đoạn III (GĐIII): buồng tinh có màu trắng hồng, mạch máu phân bố nhiều - Giai đoạn IV (GĐIV): buồng tinh đạt kích thước lớn, có màu trắng phớt hồng - Giai đoạn V (GĐV): buồng tinh đạt kích thước lớn nhất, có màu trắng sữa Tinh trùng chứa đầy ống dẫn tinh Cá trạng thái sinh sản, sẵn sàng phóng tinh có hoạt động sinh sản Khi ấn nhẹ vào lỗ sinh dục cá đực có buồng tinh giai đoạn này, tinh dịch chảy - Giai đoạn VI (GĐVI): buồng tinh teo nhỏ lại mềm nhão; bề mặt buồng tinh có màu đỏ bầm Hình Hình dạng buồng tinh cá rô biển đực giai đoạn phát triển I, II, III, IV, V VI (từ trái sang phải) 4.1.4 Sự biến đổi giai đoạn thành thục sinh dục (GĐTT) cá rô biển đực qua tháng thu mẫu 4.1.4.1 Sự quan hệ GĐTT sinh dục kích thước cá theo thời gian Kết nghiên cứu cho thấy cá rô biển thu có chiều dài tổng cộng (TL) nhỏ 6,5 cm lớn 25,4 cm cá rô biển đực thu có chiều dài tổng cộng (TL) nhỏ 6,3 cm lớn 20,8 cm Các giá trị cá đực thấp cá Theo Baran et al (2007), cá rô biển đạt thành thục sinh dục với chiều dài tổng cộng từ 7-10 cm Dựa kích thước cá rô biển có tuyến sinh dục giai đoạn IV thấy có nhóm cá cái: nhóm cá nhỏ có TL≤15 cm nhóm cá lớn có TL>15 cm; tương tự, có nhóm cá đực: nhóm cá nhỏ có TL≤14 cm nhóm cá lớn có TL>14 cm Cá kích thước nhỏ thường chiếm tỷ lệ cao hay tuyệt đối nhóm cá có giai đoạn thành thục sinh dục khác nhau, đặc biệt giai đoạn phát dục thấp (GĐI, II III); cá kích thước lớn thường chiếm tỷ lệ đáng kể hay cao nhóm cá có giai đoạn thành thục sinh dục cao (GĐIV) Đặc biệt, có gia tăng chiều dài theo giai đoạn thành thục nhóm cá kích thước nhỏ 11 Từ kết phân tích nhận định có cá kích thước nhỏ quần đàn cá tham gia sinh sản lần đầu cá kích thước lớn quần đàn cá tham gia sinh sản mùa trước Các quần đàn sống riêng biệt hòa nhập với tham gia sinh sản 4.1.4.2 Sự biến đổi GĐTT sinh dục cá theo thời gian Cá rô biển bắt đầu trình phát dục từ nửa cuối mùa khô Vào tháng xuất cá thành thục sinh dục (có tuyến sinh dục giai đoạn IV) với tỷ lệ 23,5% Tỷ lệ cá thành thục sinh dục tăng dần đạt cực đại (100%) vào tháng Từ tháng đến tháng 12, cá có tuyến sinh dục giai đoạn IV không nữa, cá thu chủ yếu có tuyến sinh dục giai đoạn phát triển sớm (I, II III) (Hình 6) Đặc biệt, tháng 11/2012, 50% số cá thu lại có buồng trứng GĐII thuộc nhóm kích thước lớn; cá tham gia sinh sản, hồi phục bắt đầu chu kỳ sinh dục Hình Biến động GĐTT sinh dục cá rô biển (trái) đực (phải) theo thời gian Cá đực có buồng tinh giai đoạn I (GĐI) tìm thấy vào tháng 9, 10 12 Cá có buồng tinh giai đoạn II (GĐII) tìm thấy hầu hết tháng thu mẫu với tỷ lệ cao tăng dần từ tháng 9/2012 (55,6%) đến tháng 2/2013 (80%) Cá có buồng tinh giai đoạn III (GĐIII) tìm thấy phần lớn tháng thu mẫu (ngoại trừ tháng 5, 8, 10 11/2012) với tỷ lệ thấp 7/2012 (5,6%) tăng dần từ tháng 12/2012 (12,5%) đến tháng năm sau (73,3%) Cá có buồng tinh giai đoạn IV (GĐIV) tìm thấy với tỷ lệ tương đối cao giai đoạn đầu nghiên cứu, từ tháng (40%) đến tháng 7/2012 (55,6%) với tỷ lệ thấp giai đoạn cuối nghiên cứu, 14,3% vào tháng 13,3% vào tháng 4/2013 Khác với cá cái, cá có buồng tinh giai đoạn V (GĐV, giai đoạn cá sinh sản) tìm thấy vào tháng 5, 8/2012 với tỷ lệ 50, 33,3 100% Cá đực sinh sản giai đoạn hồi phục (GĐVI) tìm thấy vào tháng 11/2012 với tỷ lệ 53,8% (Hình 6) 12 Từ khảo sát biến động giai đoạn thành thục sinh dục cá rô biển thời gian thu mẫu cho thấy có tương đồng trình phát dục cá rô biển đực cá Có thể nhận định cá rô biển có thời gian sinh sản kéo dài, bắt đầu phát dục từ tháng sinh sản tập trung vào nửa đầu mùa khô vùng ĐBSCL (từ tháng đến tháng 8) 4.1.5 Sự biến đổi hệ số thành thục (GSI) cá rô biển đực qua tháng thu mẫu Hệ số thành thục cá rô biển bắt đầu tăng dần từ tháng 12 năm trước (2,51%), đạt giá trị cao vào tháng (14,68%), giảm dần vào tháng sau (12,89% vào tháng 10,19% vào tháng 8) Vào tháng 9, tháng 10 hệ số thành thục cá bắt đầu giảm nhanh (5,06 1,40%) đạt thấp vào tháng 11 (0,36%) (Hình 7) Tương tự, hệ số thành thục cá rô biển đực thấp vào tháng 11 (0,19%) cao vào tháng (4,75%) (Hình 7) Hình Biến động hệ số thành thục cá rô biển theo thời gian Hình Đường cong thể mối tương quan tỷ lệ thành thục chiều dài cá rô biển Không có tương quan có ý nghĩa (p>0,05) hệ số thành thục (GSI, %) chiều dài tổng cộng (TL, cm) cá rô biển đực (GSI=6238TL-4,963, r2=0,5853, n=32) (GSI=4.0611TL0,345, r2=0,0175, n=87) Với hệ số thành thục cá đực đạt cao từ tháng đến tháng 8, lần cố nhận định mùa sinh sản cá rô biển An Giang tập trung vào nửa đầu mùa mưa hàng năm 4.1.6 Chiều dài thành thục lần đầu cá rô biển Dựa kết phân tích tỉ lệ thành thục theo nhóm chiều dài quần thể cá rô biển mùa sinh sản từ tháng 12/2012 đến tháng 9/2013, xác định chiều dài thành thục lần đầu (L50) trung bình loài cá 11,68 cm (n=364 cá thể) (Hình 8) Kết phù hợp với nhận định Baran et al (2007) kích thước thành thục cá rô biển 13 4.1.7 Sức sinh sản biến đổi đƣờng kính trứng cá rô biển Sức sinh sản tuyệt đối cá rô biển lớn, đạt 41.884 trứng/cá thể (biến động 14.786-95.346 trứng/cá thể) Sức sinh sản tương đối trung bình cá rô biển 453.314 trứng/kg cá (biến động 328.571-556.372 trứng/kg cá cái) Kết phân tích cho thấy có tương quan đường thẳng sức sinh sản (SSS, trứng) khối lượng thể (WB, g) khối lượng buồng trứng (WG, g) cá rô biển theo phương trình sau SSS (trứng) = 425,52WB + 2424 SSS (trứng) = 3684,8WG - 800,03 Với giá trị R cao (R2=0,9046 cho WB R2=0,7268 cho WG) phản ánh tương quan chặt chẽ Sức sinh sản tuyệt đối gia tăng theo khối lượng thể khối lượng buồng trứng cá rô biển (Hình 9) Hình Tương quan sức sinh sản với khối lượng thể (trái) khối lượng buồng trứng (phải) cá rô biển (n=30) 4.2 Một số đặc điểm sinh lý sinh sản cá rô biển 4.2.1 Mối tƣơng quan khối lƣợng chiều dài Hình 10 Tương quan khối lượng (W) chiều dài (L) cá rô biển (n=226) (trái) cá rô biển đực (n=143) 14 Các phương trình tương quan khối lượng chiều dài tính cho cá W=0,1829L2,2685 cho cá đực W=0,2775L2,0547 Hệ số tương quan R2=0,8748 R2=0,7721 cho thấy tương quan khối lượng chiều dài cá cá đực chặt chẽ (Hình 10) 4.2.2 Biến đổi tỷ lệ huyết cầu (Hematocrit), số lƣợng hồng cầu thể tích trung bình hồng cầu (MCV) theo giai đoạn phát triển tuyến sinh dục cá rô biển Tỷ lệ huyết cầu (hematocrit, %) cá rô biển đực (dao động khoảng 31,83-44,93%) cao cá (dao động khoảng 26,5830,61%) Không có khác biệt có ý nghĩa thống kê (p>0,05) hematocrit giai đoạn phát triển tuyến sinh dục cá rô biển Số lượng hồng cầu cá rô biển (biến động 0,80x106-4,07x106 tế bào/mm3) thấp giá trị cá đực (biến động 2,37x106-2,75x106 tế bào/mm3) Số lượng hồng cầu cá rô biển có buồng trứng giai đoạn I, II III khác biệt ý nghĩa thống kê (p>0,05) cao cách có ý nghĩa so với cá rô biển có buồng trứng giai đoạn IV (p0,05) Thể tích trung bình hồng cầu cá đực cao cá giai đoạn phát triển tuyến sinh dục Không có khác biệt có ý nghĩa thống kê (p>0,05) thể tích trung bình hồng cầu giai đoạn phát triển tuyến sinh dục cá rô biển 4.2.3 Biến đổi hàm lƣợng protein cơ, gan hàm lƣợng phosphate protein huyết tƣơng (vitellogenin) theo giai đoạn phát triển tuyến sinh dục cá rô biển Hàm lượng protein gan cá rô biển có biến động trình phát triển tuyến sinh dục; đạt giá trị cao buồng trứng giai đoạn II đạt giá trị thấp buồng trứng giai đoạn IV Giá trị hàm lượng protein cá giai đoạn IV khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) thấp có ý nghĩa thống kê (p[...]... 40,0 33,3 IV 13,3 66,7 Sự thành thục sinh dục của cá rô biển cũng tuân theo quy luật chung của đa số các loài các nước ngọt vùng ĐBSCL là thành thục sinh dục vào đầu mùa mưa, được bắt đầu vào cuối tháng 4 đầu tháng 5 4.3.2.2 Biến động hệ số thành thục sinh dục của cá rô biển cái theo thời gian nuôi vỗ Hệ số thành thục sinh dục của cá rô biển cái tăng dần qua các tháng nuôi vỗ và khác biệt không có ý... Chƣơng 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 5.1 Kết luận - Cá rô biển bắt đầu thành thục sinh dục khi đạt chiều dài trung bình 11,68 cm Tỷ lệ đực, cái trong quần đàn cá rô biển phân bố ở địa bàn tỉnh An Giang là 1:1,58 - Hệ số thành thục của cá rô biển cái vào mùa sinh sản cao nhất đạt 14,68% và ở cá rô biển đực là 4,75% Mùa vụ sinh sản của cá rô biển bắt đầu vào nửa đầu mùa mưa (tháng 5, 6, 7 và 8 dương lịch) tại... tuyến sinh dục cá rô biển cái và đực 4.1.3.1 Đặc điểm tuyến sinh dục cái (buồng trứng) Dựa vào các tiêu chuẩn phân chia các giai đoạn thành thục tuyến sinh dục của Xakun and Buskaia (1968), thì buồng trứng cá rô biển có những đặc điểm phát triển như sau: - Giai đoạn I (GĐI): buồng trứng chỉ là hai dạng sợi ngắn, nhỏ, màu trắng trong Về mặt tổ chức học, noãn sào chỉ bao gồm tế bào sinh dục là các noãn... sinh sản và sự biến đổi đƣờng kính trứng của cá rô biển Sức sinh sản tuyệt đối của cá rô biển khá lớn, đạt 41.884 trứng /cá thể (biến động 14.786-95.346 trứng /cá thể) Sức sinh sản tương đối trung bình của cá rô biển là 453.314 trứng/kg cá cái (biến động 328.571-556.372 trứng/kg cá cái) Kết quả phân tích cho thấy có sự tương quan đường thẳng giữa sức sinh sản (SSS, trứng) và khối lượng cơ thể (WB, g) và. .. Chƣơng 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Một số đặc điểm sinh học sinh sản của cá rô biển 4.1.1 Phân biệt giới tính Khó xác định giới tính bằng các đặc điểm hình thái bên ngoài khi cá còn nhỏ Tuy nhiên, trong mùa sinh sản có thể phân biệt giới tính cá rô biển tương đối dễ dàng - Cá rô biển cái có tuyến sinh dục phát triển có bụng to hơn cá đực; khi ép lên bụng cá đực thấy sẹ trắng chảy ra - Cá rô biển đực thường... sinh sản lần đầu và cá kích thước lớn là quần đàn cá đã tham gia sinh sản mùa trước Các quần đàn này cũng có thể sống riêng biệt và có thể hòa nhập với nhau khi tham gia sinh sản 4.1.4.2 Sự biến đổi GĐTT sinh dục cá theo thời gian Cá rô biển cái bắt đầu quá trình phát dục từ nửa cuối mùa khô Vào tháng 1 đã xuất hiện cá cái thành thục sinh dục (có tuyến sinh dục giai đoạn IV) với tỷ lệ 23,5% Tỷ lệ cá. .. khối lượng buồng trứng (phải) của cá rô biển cái (n=30) 4.2 Một số đặc điểm sinh lý sinh sản của cá rô biển 4.2.1 Mối tƣơng quan giữa khối lƣợng và chiều dài Hình 10 Tương quan giữa khối lượng (W) và chiều dài (L) của cá rô biển cái (n=226) (trái) và của cá rô biển đực (n=143) 14 Các phương trình tương quan giữa khối lượng và chiều dài được tính cho cá cái là W=0,1829L2,2685 và cho cá đực là W=0,2775L2,0547... đoạn cá sinh sản) đã được tìm thấy vào tháng 5, 7 và 8/2012 với tỷ lệ lần lượt là 50, 33,3 và 100% Cá đực đã sinh sản và ở giai đoạn hồi phục (GĐVI) chỉ tìm thấy vào tháng 11/2012 với tỷ lệ 53,8% (Hình 6) 12 Từ những khảo sát về sự biến động giai đoạn thành thục sinh dục cá rô biển trong thời gian thu mẫu cho thấy có sự tương đồng trong quá trình phát dục của cá rô biển đực và cá cái Có thể nhận định cá. .. 0,02-0,07 ppm và N-NO2-: 0,11-0,50 ppm) trong ao nuôi vỗ không có biến động lớn và đều nằm trong giới hạn thích hợp cho sự phát triển tuyến sinh dục của cá rô biển 4.3.2 Sự thành thục sinh dục của cá rô biển trong quá trình nuôi vỗ 4.3.2.1 Biến động giai đoạn thành thục (GĐTTSD) của cá rô biển cái theo thời gian nuôi vỗ Vào tháng 2, khi mới bắt đầu bố trí thí nghiệm thì tất cả cá rô biển cái được khảo... nhận định cá rô biển có thời gian sinh sản kéo dài, bắt đầu phát dục từ tháng 1 và sinh sản tập trung vào nửa đầu mùa khô ở vùng ĐBSCL (từ tháng 5 đến tháng 8) 4.1.5 Sự biến đổi hệ số thành thục (GSI) của cá rô biển cái và đực qua các tháng thu mẫu Hệ số thành thục của cá rô biển cái bắt đầu tăng dần từ tháng 12 năm trước (2,51%), đạt giá trị cao nhất vào các tháng 6 (14,68%), giảm dần vào các tháng sau ... thích sinh sản sản xuất giống nhân tạo cá nói chung cá rô biển nói riêng Với lý trên, đề tài Đặc điểm thành thục sinh dục ứng dụng hormon steroid sinh sản nhân tạo cá rô biển Pristolepis fasciata. ..BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ PHAN PHƢƠNG LOAN ĐẶC ĐIỂM THÀNH THỤC SINH DỤC VÀ ỨNG DỤNG HORMON STEROID TRONG SINH SẢN NHÂN TẠO CÁ RÔ BIỂN Pristolepis fasciata (Bleeker, 1851) Chuyên... thuyết ứng dụng sản xuất - Cung cấp dẫn liệu đặc điểm sinh học sinh sản cá rô biển kích thước thành thục lần đầu, đặc điểm phát triển tuyến sinh dục, hệ số thành thục, sức sinh sản, mùa vụ sinh sản