Design Vi Sinh

Design Veterinary micrococcus Micrococcus Staphylococcus Streptococcus Pasteurella multocida( cđ1) Brucella( cđ2) Erysipelothrix rhusiopathiae( c đ) Salmonella Sal choleraesuis + Sal Typhisuis Escherichia coli Bacillus anthracis( c đ) 10 Clostridium tetani 11 Mycobacterium tuberculosis( cđ2) 12 Leptospira( cđ2) virus ĐẶC TÍNH SINH HỌC Phân loại, hình thái, cấu trúc: Đặc tính nuôi cấy: Đặc tính sinh hóa: Sức đề kháng: Cấu trúc kháng nguyên: Độc tố: Khả gây bệnh: Staphylococcus • Φ0.7-1µm, đứng đôi or chùm nho, + • 32-370c, pH 7.2-7.6  Nước thịt: 24h, mt đục rõ, lâu có cặn  Thạch thường: S, sắc tố(gây bệnh)  Thạch máu: dung huyết tố α(thỏ, hoại tử>chết, KN hoàn toàn), β+ δ(cừu, người, ngựa, thỏ, hoại tử da), γ(ko ngựa)  Thạch Sapman: 1000ml thạch thường, 75gNaCl, 10g Mannit, 3-4ml phenol 4%, pH8.4 ->6.8, vàng  Gellatin:2-3 ngày, 20oc, phễu • Gây bệnh: mannit • Catalase +.T0 cao: kém, 70/1h, 100/vài phút: Tolạnh: cao • Sát trùng tt: acid phenic2-3%/2-3phút, focmol1%/1h Nơi khô/>200 ngày • Hemolysin, Leucotocxin, Enterotocxin • Coagulaza, Fibrinolysin, Deoxyribonucleaza, Hyaluronidaza • Tự nhiên: ký sinh da  ↓SDK or có tổn thương da: -> viêm, nặng -> nhiễm trùng huyết, bại huyết, độc tố đường ruột nhiễm thức ăn gây viêm ruột cấp  ↓cảm nhiễm: ngựa, bò, chó, lợn, người, gà(ko) • Thí nghiệm: thỏ cảm nhiễm tiêm 1-2ml canh khuẩn 24h vào TM tai, sau 36-48h thỏ chết huyết nhiễm mủ Streptococcus • Φ0.5-1µm,chuỗi 6-8, + • 37oc, pH 7.2-7.4  Nước thịt: 24h mt đục đều, lâu có cặn đáy  Thạch thường:S, 1-2mm  Thạch máu:S>, dung huyết tố:α, β, γ  Maconkey:mọc tốt, khuẩn lạc nhỏ • Glucose, lacto, saccarose, trehalose + • Catalase+ • KN O € A=>V + KN F/ fily • Streptolysine O: €chủng tan máu, KN mạnh, dễ hoạt tính o2 Streptolysine S: €nhiều chủng, KN yếu, không o2 • Fibrinolysine (Streptokinaza, Streptodornaza), Hyaluronidaza, Proteinaza; Diphospho Pyridin Nucleotidaza- nhân tố diệt bạch cầu • Tự nhiên: Khu trú đường hô hấp trên, amidant sau theo tuần hoàn đến phổi, khớp, màng não  Nhóm D, R, S gây bệnh Lợn lợn chết nhiễm trùng huyết, viêm màng não; gây viêm khớp, viêm bao hoạt dịch, viêm nội tâm mạc, viêm họng, phế quản, phổi lợn trưởng thành  Streptococcus equi nhóm c gây viêm hạch truyền nhiễm ngựa Streptococcus disgaelactiae(D) viêm vú, viêm đa khớp cừu  Streptococcus nhóm A gây exzeme, viêm hầu họng cho người • Thí nghiệm: tiêm da thỏ> ổ áp xe; tiêm tm> nhiễm trùng máu=> chết Pasteurella multocida • Trứng, 0.25-0.4* 0.4-1.5µm, giáp mô mỏng >khó qs thể bệnh, -, lưỡng cực, riêng lẻ • 13-370c, pH 7.2-7.4, tốt/ mt huyết or máu  Nước thịt: 24h, đục, lâu có cặn, màng, mùi nc rãi khô  Thạch thường: S nhỏ long lanh giọt sương  Thạch máu: giữ giống vk, S to hơn, ko dung huyết  Huyết huyết cầu tố: phân lập + xác định độc lực= 100ml martin, 1ml huyết cầu tố cừu 10%, 4ml huyết bò S có huỳnh quang 24h(450 , 20 lần)  Gellatin: chích sâu> S nhỏ • Lên men ko hơi: gluco, saccaro, mannit • Indol +, catalase, oxylase +, H2S bất thường Yếu với t0 cao: 58/20’, 80/10’, 100/ 0’ Asmt diệt vk/canh trùng/1h Đv thối nát/3tháng, lâu mt ẩm, tối, nhiều muối NO3, chất hữu Acid phenic 5%/1’, crezyl3%, nước vôi/3-5’ • KN-Carter1955 KABDEF, gắn với thụ thể>ngưng kết gián tiếp hồng cầu • KN O bộc lộ tách K, Heddleston-1972=16 • Tự nhiên: bại huyết+ tụ huyết, xuất huyết/gs,gc  Lợn 3-6 tháng: sốt cao, mắt đỏ, da xh, thủy thũng, sưng hạch hầu họng: viêm phổi có vùng gan hóa, tích nước ngoại tâm mạc- lây sang trâu bò, gc • Tự nhiên(tiếp):  Trâu bò: thủy thũng, sưng hạch hầu họng> viêm phổi  Gc mắc tỷ lệ cao, chết nhanh> dịch gà lớn: gan sưng-điểm hoại tử, tim sưng, ngoại tâm mạc tích nước, mỡ vành tim xuất huyết  Người: mắc gc, gs cào cắn thể cục • Tno: thỏ chuột bạch mẫn cảm  Tiêm canh khuẩn 24h or bệnh phẩm da thỏ> chết sau 24 - 48h, bệnh tích giống chuột bạch: nơi tiêm tụ máu, lồng ngực tích nước, lách sưng to, phổi sưng tụ máu, khí quản có bọt màu hồng  Gà chết nhanh, bệnh tích chưa biểu rõ PHẢN ỨNG MIỄN DỊCH PHÓNG XẠ N.lý: Dùng KT or kháng KT gắn đồng vị phóng xạ cho kết hợp với KN cần chẩn đoán, sử dụng máy đo đồng vị phóng xạ để phát phản ứng • Kỹ thuật giống phương pháp miễn dịch huỳnh quang • Phản ứng trực tiếp: đánh dấu KT • Phản ứng gián tiếp: đánh dấu kháng KT Độ nhạy số phản ứng huyết học: Phản ứng Nồng độ KN (µg/ ml) Phản ứng Nồng độ KN (µg/ ml) NK trực tiếp 0.5 Huỳnh quang 10-1 NK gián tiếp 10-3 ELISA 10-5 Kết tủa Phóng xạ 10-6 Kết hợp C’ 10-1 TUBERCULIN N.lý: vk Lao vào thể gây đáp ứng miễn dịch đặc hiệu Khi KT tế bào gặp vk Lao chất chiết vk Lao gây phản ứng trung hòa phản ứng dị ứng mẫn muộn • Tuberculin chiết từ môi trường nuôi cấy vk Lao:  Tuberculin thô gồm: albumin, nucleoprotein, lipid, polysaccarit dễ gây p/ư + giả  Tuberculin tinh chế= protein có tính đặc hiệu cao gồm: TbPPDM(Tuberculin Protein Purified Derivative Mamifera), TbPPDA(Tuberculin Protein Purified Derivative Avia), TbPPDH(Tuberculin Protein Purified Derivative Human) Tiến hành phản ứng: phương pháp: tiêm da, tiêm da, nhỏ mắt • Phương pháp tiêm da:  Vị trí tiêm Tuberculin= gấp nếp đuôi+ cổ Trước tiêm phải cắt lông, rửa sạch= nước sinh lý, đo độ dày da  Tiêm TbPPDM 0.1ml/ mũi tiêm  Sau 72h, đo lại độ dày da chỗ tiêm: p/ư + độ dày da tăng >5mm Nếu nghi ngờ phải thử lại sau 60ngày Ở người: • Tiêm da cánh tay= p/ư Mantoux • Người= TbPPDH 0.1ml/mũi tiêm • Người Φ>=1cm p/ư +, 30 L4+ 20-30 L3+ 6-12 L2+ ly tâm 1000vòng/phút thu hồng cầu> rửa nước sinh lý, ly tâm tiếp, rửa lần.> lấy hồng cầu pha nước sinh lý nông độ 1%  PP lấy máu tim gà: cố định gà trống khỏe 1.5-2kg nằm nghiêng giá, tráng xilanh= NatriCitrat5% cho vào ống nghiệm đựng máu> xác định vị trí đỉnh tim= tâm tam giác có đỉnh(mỏm xương ác, đầu khớp xương cánh, đầu phớp xương hông)> cắt lông sát trùng= cồn> dùng kim tiêm cỡ 18-20 dài 3-4cm đâm ngập vào đỉnh tim, trúng tim, đốc kim lay động+ máu đẩy lên> lắp xilanh hút từ từ, hút ra, lấy 10ml • Nước trứng có virus: bệnh phẩm xử lý, tiêm phôi gà 910 ngày tuổi Phôi chết, mổ thu nước trứng • Tiến hành phản ứng: Cho vào dãy p/ư vi ngưng kết(Microtest plates) theo sơ đồ: đơn vị= µl giếng 10 11 Nước SL 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 Nc trứng 50 50 Hiệu giá VR 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 HC 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 • 50= virus Newcatle; 10= đối chứng-; 11= đối chứng+ • Cho nguyên liệu, hồng cầu, lắc nhẹ để t0 phòng, đọc kq sau 20 phút: p/ư += hồng cầu ngưng kết nằm rải đáy giếng(ô lộn ngược) Xác định hiệu giá ngưng kết= độ pha loãng vr cao mà virus hồng cầu gây ngưng kết rõ PHẢN ỨNG HI N.lý: KT đặc hiệu huyết gặp KN tương ứng, phản ứng trung hòa virus xảy làm virus không khả gây ngưng kết hồng cầu • ứng dụng: 1.chẩn đoán bệnh Newcatle cúm gia cầm; 2.giám định virus Newcatle cúm gc; 3.định lượng hàm lượng KT để đánh giá mức độ miễn dịch đàn gà dung vacxin; 4.xác định thời gian tái chủng vacxin • Phản ứng giám định virus Newcatle+cúm gc • Chuẩn bị: - KN nghi= virus phân lập có khả gây ngưng kết hồng cầu, xác định đơn vị HA Newcatle:1HI= 4HA, cúm gc:1HI= 8HA - Dung dịch hồng cầu gà 1% - KT chuẩn= KT Newcatle+ KT cúm gc • Tiến hành phản ứng:  Mỗi mẫu làm dãy giếng: dãy Newcatle, dãy cúm gc  Cho nguyên liệu> cho KN nghi vào lắc nhẹ, để 20-30 phút t0 phòng> tiếp tục cho hồng cầu gà 1% lắc nhẹ, để yên 20-30 phút, đọc kq • Sơ đồ phản ứng: 25= virus Newcatle; 10= đối chứng-; 11= đối chứng+ • Virus Newcatle: giếng 10 11 Nước SL 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 KT Newcatle 25 Hiệu giá KT 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 KN=4HA 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 HC1% 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 25 50 •Virus cúm gia cầm: •Sơ đồ phản ứng: 25= virus cúm gia cầm; 10= đối chứng-; 11= đối chứng+ giếng 10 11 Nước SL 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 KT Cúm gc 25 Hiệu giá KT 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 KN=8HA 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 HC1% 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 25 50 • Kết phản ứng HI:  Nếu bên dãy có KT Newcatle ko có ngưng kết bên dãy với KT cúm gc có hồng cầu ngưng kết=> mẫu chứa Newcatle  Nếu bên dãy có KT Newcatlecó ngưng kết bên dãy với KT cúm gc ko có hồngcầu ngưng kết=> mẫu chứa virus cúm gc  Nếu dãy ko có ngưng kết=> mẫu chứa loại virus virus MỘT SỐ MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY • Markconkey: pepton 20g, lacto 5g, muối mâtixioid 5g, NaCl 5g, đỏ trung tính 0,075g, thạch 12g=> pH 7.4, lacto lên men> khuẩn lạc đỏ • Muller kauffman: martin 90g, CaCO3 5g, Natri thiosulfat 5% 10ml, dd Iodua 2ml, lục sáng 1ml, mật bò 5ml • TSA- triple sugar agar: FeSO4, đường lacto+ saccaro, đỏ phenol…, NaOH> pH7.4 • SS: muối mật(natri deoxycolatortorocolat) ngăn e.coli, proteus, gram+; lục sáng ngăn gram+; khuẩn lạc e.coli=đỏ, proteus=đen, sal+shi=trắng [...]... phân, thận, nước xoang bụng Virus 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Pestis suum virus( cđ2) Foot and mouth disease virus Lyssa virus – Rabies virus( cđ2) Newcastle virus( cđ1) Gumboro virus( cđ1) Avian influenza virus( cđ1) Pestis anatum virus – Duck enteritis virus( cđ1) Hepatitis anatum virus – Duck hepatitis virus( cđ1) Porcine respiratory and reproductive syndrom Pestis suum virus • €họ Flaviridae, giống pestis suum,... sốt cao, đi tháo phân, hôi thối, dính máu> O78B, O35B5, O86B7, O9A, O26B6, O26B6, O25B4, O137  Gia cầm: O1,O2,O78> gà con ỉa phân xanh, thối, vi m kết mạc mắt, vi m mũi, vi m khí quản, vi m khớp, chết đột ngột Bệnh tích: vi m ngoại tâm mạc, vi m quanh gan, vi m túi khí  Người: O111B4, O55B5, O128B12> trẻ bú mẹ • Tno: tiêm bệnh phẩm, canh khuẩn dưới da thỏ or chuột bạch, liều cao gây bại huyết> chết... già> cúc áo; lách nhồi huyết răng cưa; hạch lympho sưng, xuất huyết, tụ máu như đá hoa vân; da xuất huyết hình đinh ghim, virus có thể> đám Foot and mouth disease virus • €họ picornaviridae, giống aputhovirus, ARN, hình cầu nhẵn gồm 80 capsome (vp1 quy định tính kn+ tính độc của virus, ko có kháng chéo), Φ10-20nm 7serotyp: thế giới= A,O,C; châu á= asia; châu phi= sat1,2,3 biến chúng> 70 subtype Vn... tím xanh  TSI: mt đỏ, sinh H2S, đường cấy đen ≠ E.coli mt vàng, ko sinh H2S, đường cấy ko màu • Lên men sinh hơi: mannit, glacto, mantoza • Ko lên men: lacto, saccaro H2S +  KN O = 65 yếu tố> 34 nhóm(I,II,…) 1nhóm có ytố đặc hiệu chỉ có ở nhóm + ytố ko đặc hiệu  KN H = 2pha: pha đặc hiệu>28 ytố(abc…) + pha ko đặc hiệu> 6 ytố(123…)  KN K ở 2 loại vk gây bệnh cho người= KN virulence = KN độc  Cấu... cướp sắt của các chất ≠ > vk tăng sinh mạnh • Tự nhiên: vk ký sinh trong đường ruột, khi có ytố làm tăng độc lực> vk sẽ gây bệnh Vk ngoài tự nhiên theo nước, thức ăn vào đg tiêu hóa • Tno: tiêm bệnh phẩm or canh trùng/ dưới da or phúc mạc chuột bạch> chết sau 3-5 ngày, bệnh tích: nơi tiêm phù thũng, thủy thũng, sưng mủ, loét Các cơ quan nội tạng tụ máu, lách sưng, ruột vi m loét hoại tử Sal choleraesuis... khí tuyệt đối, 370c, pH7.2-7.4:  Nước thịt gan yếm khí: đục, sau lắng cặn>trong Mùi thối or sừng cháy, làm đen tổ chức óc  Thạch máu Gluco: R, đám bắt chéo như tóc rối  Thạch VF( Viande Foie): kl như vẩn bông trắng đục, sinh hơi> nứt thạch • Phản ứng lên men đường ko có ý nghĩa H2S, NH3, Indol + • Ngoại độc tố mạnh= tetanoslysine> tan huyết cầu thỏ, người, ngựa, gây hoại tử; tetanospasmin> gây bệnh... kháng thuốc> nhẵn hơn • Sinh sản theo cách nảy chồi, trực phân( 24h / 1lần) • Đk kém với t0+ tia tử ngoại, 65/15’, 70-80/5-10’, asmt/8h, acid phenic 5%/24h, focmol 1% /12h, NaOH 2%, vôi bột có tdụng tốt • MD qua trung gian TB, là MD có trùng • Tự nhiên: mẫn cảm↓ người> bò> gà> lợn> chó> mèo> trâu, con non mẫn cảm hơn 3type Mt humanus lao người: 90-95% người mắc, chó, mèo, bò; Mt bovinus: bò max, người,... icterohemorhagiae 2/ L autumlasis 8/ L mitis 3/ L bataviae 9/ L poi 4/ L canicola 10/ L pomona 5/ L grippotyphosa 11/ L saxkoebing 6/ L prepdomadis 12/ L sejroe • 5,7 người hay mắc; 3,4,5,7,8,9 gia súc hay mắc • Mỏng nhỏ, 15-20vòng xoắn liên tiếp, 0.1-0.2* 4-20µm  Nhuộm= pp thấm bạc, vk nâu/vàng  Nhuộm Jemsa vk màu đỏ tím  Xem tươi trên kính hiển vi tụ quang nền đen • Hiếu khí, 280c, pH7.2-7.4, mt... dd+ruột vi m đỏ, tụ máu, nốt loét lan tràn ở ruột già≠ cúc áo dịch tả lợn • Tno: tiêm canh khuẩn 24h> dưới da thỏ or chuột bạch> chết sau 8-10 ngày Tiêm tm > chết sau 5-9 ngày Escherichia coli • Gậy, ngắn, 2 đầu tròn, 0.6*2-3µm, giáp mô, lông,• 370c, pH7.2-7.4, dễ nuôi/mttt  Nước thịt: như Sal  Thạch thường: S trong suốt, tro trắng, r=2-3cm  Thạch máu: chủng gây bệnh có thể> dung huyết • Lên men sinh. .. hiệu chỉ có ở nhóm + ytố ko đặc hiệu  KN H = 2pha: pha đặc hiệu>28 ytố(abc…) + pha ko đặc hiệu> 6 ytố(123…)  KN K ở 2 loại vk gây bệnh cho người= KN virulence = KN độc  Cấu trúc KN: Sal choleraesuis =VI, VII, c,1,5; Sal gallinarum pullorum= IX, XII1, XII2, XII3 • 1000c/5’ Nước/1 tuần, nước đá/1 tháng, xác Đv/2 tháng, thịt muối29%NaCl+cá muối16-20%NaCl/4 tháng • Chất sát trùng tt dễ diệt  Nội độc tố/ ... xoang bụng Virus Pestis suum virus( cđ2) Foot and mouth disease virus Lyssa virus – Rabies virus( cđ2) Newcastle virus( cđ1) Gumboro virus( cđ1) Avian influenza virus( cđ1) Pestis anatum virus –... cầm: O1,O2,O78> gà ỉa phân xanh, thối, vi m kết mạc mắt, vi m mũi, vi m khí quản, vi m khớp, chết đột ngột Bệnh tích: vi m ngoại tâm mạc, vi m quanh gan, vi m túi khí  Người: O111B4, O55B5, O128B12>... chết nhiễm trùng huyết, vi m màng não; gây vi m khớp, vi m bao hoạt dịch, vi m nội tâm mạc, vi m họng, phế quản, phổi lợn trưởng thành  Streptococcus equi nhóm c gây vi m hạch truyền nhiễm ngựa