Xây dựng mô hình gây rối loạn lipid máu bằng hỗn hợp dầu cholesterol chứa lượng thấp acid cholic trên chuột cống trắng

Xây dựng mô hình gây rối loạn lipid máu hỗn hợp dầu cholesterol chứa lượng thấp acid cholic chuột cống trắng Nguyễn Trọng Thông, Vũ Thị Ngọc Thanh, Nguyễn Phương Thanh, Đàm Đình Tranh TrườngĐợi học YHàNội SUMMARY Lowering-lipid effect o f drug is evaluated based on dyslipidemia model on animals The objective o f this study is to build a dyslipidemia model in rats using cholesterol mixed oil with low amount o f cholic acid Wistar rats were used in this study Exogenous model o f hyperlipidemia was induced by cholesterol mixed oil (1 mL cholesterol mixed oil includes 0.7 g cholesterol, low-amount o f add cholic: 0.1 g; 0.03 g propylthiouracil and peanut oil): Rots were divided into groups: ( 1) Control group: received drinking water mUlOO body weight/day; (2) Model group: received cholesterol mixed oil mư100 g body weight/day: (3) Positive group: received cholesterol mixed oil 1iriư l 00 g body weight and treated with lovastơtin 10 mg/kg for weeks Results showed that cholesterol mixed oil caused significant changes in blood lipid: increased TC 103.2%, LDL-C 153.2%, and triglyceride 16.4%, it did not affect HDL - c lovastotin significantly decreased TC, LDL - c triglycerid and increased HDL - c In conclusion, cholesterol mixed oil with low amount o f cholic acid was effective in causing model ofdyslipidemia on animals Từ khóa: Add cholic, cholesterol, mô hình rối loọn lipid máu Đặtvấn để Để nghiên cứu thuốc điểu trị rối loạn lipid máu, trước hết phải gây mô hình tăng lipid máu Nhiều loài động vật đà sử dụng nhiểu mô hình dược lý nghiên cứu áp dụng động vật thực nghiệm Các mô hình thuộc loại: gây tăng cholesterol lipid máu ngoại sinh (đưa cholesterol mỡ theo đường thức ăn), gây tăng cholesterol máu nội sinh (gây tăng tổng hợp cholesterol) phối hợp hai loại Động vật sử dụng mô hình tăng cholesterol máu thường là: thỏ, chuột cống, chuột nhắt, hamster, dùng khỉ, lợn, chim cút Trên thỏ, mô hình Anichkov coi mô hình kinh điển tiến hành cách cho thỏ ăn cholesterol 0,3 - 0,5 g/kg/ngày năm Tại Việt Nam, Đoàn Thị Nhu cộng gây mô hình tăng cholesterol máu cách cho thỏ đực uống cholesterol hoà tan dẩu lạc với liểu 0,5 g/kg/ ngày kéo dài liên tục tuần [1] Tuy nhiên thỏ loài động vật thường ăn thực vật, nên mô hình gây rối loạn lipid máu thỏ có nhiều điểm không tương đồng với người Nhiểu nhà nghiên cứu giới sửdụng chuột cống trắng trưởng thành với mô hình gây tăng cholesterol bổ sung vào chế độ ăn 1% cholesterol, 1% acid mật (acid cholic) 0,5% kháng giáp trạng propylthiouracil vòng tuần Bổ sung acid cholic làm tăng hấp thu cholesterol nổng độ cholesterol huyết tăng mạnh sử dụng thêm thuốc kháng giáp trạng Nassiri cộng cải tiến mô hình cách cho chuột uống 10 ml/kg cân nặng hỗn hợp dẩu cholesterol gồm: 10 mg cholesterol, g propylthiouracil 10 g acid cholic, dẩu lạc vừa đủ 100 ml Kết cho thấy nhóm sử dụng 10 ml hỗn hợp dẩu cholesterol/ kg/ngàỵ, cholesterol toàn phẩn tăng lên 9,65 ± 0,1 mmol/l nhóm đối chứng 3,7 ± 0,1 mmol/l, tức tăng lên 160% [2] Tuy mô hình cho kết tốt hàm iượng acid cholic sử dụng cao, giá thành đắt Để xây dựng mô hình thực nghiệm có tính khả thi cao, chi phí rẻ có nhiểu đặc điểm tương đồng với rối loạn lipid máu người, tiến hành nghiên cứu với mục tiêu: Xđy dựng mô hình rối loạn lipid máu chuột cống trâng hỗn hợp dâu cholesterol chứa lượng thấp acid cholic Đối tượng, nguyên liệu - th iế t bị phương pháp nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu Chuột cống trắng chủng Wistar hai giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 150 -180 g Chuột cổng trắng cung cấp bởiTrung tâm Chăn nuôi, Học viện Quân y Chuột cống trắng nuôi ngày trước nghiên cứu suốt thời gian nghiên cứu cho ăn thức ăn chuẩn riêng Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương cung cấp Nguyên liệu - thiết bị Lovastatin viên nén 20 mg (BRAWN - Ấn Độ) Kít định lượng chất chuyển hóa máu: Cholesterol toàn phẩn, triglycerid, HDL-cholesterol hãng DIALAB Máy móc: Máy Screen master hãng Hospitex Diagnostics (Italy) Phương pháp nghiên cứu Xây dựng mô hình gây rối loạn lìpìd máu ngoại sinh: Ap dụng điều chỉnh mô hình theo Nassiri cộng (2009) cách sử dụng hỗn hợp dầu cholesterol chứa hàm lượng thấp acid cholic propylthiouracil (PTU) chuột cống trắng (bảng 1) [2] Trong mô hình này, đâ sử dụng hàm lượng thấp acid cholic PTU với lý hạn chế gia tăng mức số lipid máu, đánh giá xác tác dụng thuốc Đồng thời với việc sử dụng hàm lượng thấp hai chất tiết kiệm chi phí nghiên cứu Thành phẩn Mô hình Nassiri (2009) Mô hình điều chỉnh Cholesterol (g/ml) 0,1 0,1 Add cholic (g/ml) 0,1 0,01 PTU (g/ml) 0,03 0,005 Dầu lạc vừa đủ ml ml Chuột cống chia thành lô, lô 15 với tỉ lệ đực/cái lô, lô uống thuốc tuẩn sau: lô (lô chứng, n = 15): hàng ngày chuột uống nước lọc với thể tích ml/100 g chuột Lô (lô mô hình, n = 15): hàng ngày chuột uống hỗn hợp dẩu cholesterol ml/100 g chuột Lô (đối chứng dương, n = 15): hàng ngày chuột uống hỗn hợp dẩu cholesterol lô 2, sau uống lovastatin liều 10 mg/kg Tiến hành cân kiểm tra trọng lượng chuột tất lô thời điểm trước, sau thí nghiệm 1,2 tuần Vào ngày đẩu tiên ngày thứ 29 (sau tuẩn), cho chuột lô nhịn ăn qua đêm, uống nước tự Lấy máu đuôi chuột tiến hành định lượng cholesterol toàn phẩn (TC), triglycerid (TG), HDL cholesterol (HDL - C) Tính LDL cholesterol (LDL - C) theo công thức Frieldewald: (LDL - C) = (TC) - (HDL - C) - (TG/5) A Kết nghiên cứu * Thay đổi cân nặng lô chuột nghiên cứu □ Chímgtrmig EaMôhiiứi SLovastatiii T rưó'c Tuần Tuần Tuần HìnhlStfthQyđồicánnộngchuộtcóngtỉQngsau4tuón('ĩí±SD,gì Kết cho thấy cân nặng lô chuột đểu tăng cân sau 1,2 tuẩn, khác biệt có ý nghĩa thống kê lô chứng, lô mô hình lô uống lovastatin thời điểm trước nghiên cứu, sau 1,2 tuẩn * Kết quà gây mô hình rối loạn lipìd máu chuột cổng hỗn hợp dâu cholesterol: Báng Mõ hình rối loạn lipid máu băng hỗn hợp dấu cholesterol Chỉ số (sau tuần) x ± SD, mg/dL LÔ n TG TC HDL-C LDL-C (Phần trăm thay đổi so với lô chứng trắng) Chứng trắng 15 132,2 ±22,0 119,7 ±11,5 15,8 ±2,1 77,4 ±12,7 Mô hình 15 153,8 ±22,6* (T 1M % ) 243,2 ±47,8*** (t103,2%) 16,4 ± ,0 (T3,8%) 196,0 ±47,4*** (t153,2%) Lovastatin lOm g/kg 15 134,6 ± 24,r 181,4 ±29,0+^ 19,4 ± 4,r 135,5 ±30,7++ Chú thích: Khác biệt so với lô chứng vớip < 0,05: “ :p ... điểm mô hình gây rối loạn lipid máu hỗn hợp dầu cholesterol chứa lượng thấp acid cholic Nhiều nghiên cứu gần giới tiến hành mô hình gây rối loạn lipid máu ngoại sinh sử dụng acid cholic hàm lượng. .. với lô mô hình Bàn luận Kết cho thấy mô hình rối loạn lipid máu chuột gây dựng thành công hỗn hợp dẩu cholesterol chứa lượng thấp acid cholic Mô hình có đặc điểm giống với rối loạn lipid máu người,... loạn lipid máu hỗn hợp dẩu cholesterol chứa lượng thấp acid cholic Như nghiên cứu này, mô hình rối loạn lipid máu chuột cống trắng xây dựng thành công với hai ưu điểm hiệu quả, tính tin cậy mô