khảo sát thành phần hóa học và hoạt tính ức chế enzym α glucosidase của cao hexan lá bình bát dây coccinia grandis (l ) j voigt họ bầu bí (cucurbitaceae)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH KHOA HĨA HỌC  KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYM α-GLUCOSIDASE CỦA CAO HEXAN LÁ BÌNH BÁT DÂY COCCINIA GRANDIS (L.) J VOIGT HỌ BẦU BÍ (CUCURBITACEAE) KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HĨA HỌC Chun ngành: Hóa hữu Hướng dẫn khoa học: TS LÊ TIẾN DŨNG Sinh viên thực hiện: TRẦN THỊ KIM HỒNG Tp HCM - 5/2013 LỜI CẢM ƠN Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc,em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến: • TS Lê tiến Dũng – phịng hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học, thầy đãtận tình hướng dẫn, giúp đỡ, cung cấp kiến thức, dộng viên, tạo diều kiện giúp em hoàn thành đề tài khóa luận tốt nghiệp • TS Mai Đình Trị - phịng hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học, thầy giúp đỡ, cho em ý kiến quý báu để em hoàn thiện đề tài • Thầy mơn hóa hữu – Khoa hóa – Trường đại học Sư Phạm HCM thầy cô viện khoa học công nghệ Việt Nam tạo điều kiện giúp đỡ em hồn thành khóa luận tốt nghiệp • Anh Nguyễn Hữu An-khóa k33, ĐH Sư phạm hướng dẫn, giúp đỡ em hồn thành khóa luận • Các bạn làm phịng 19 – Viện khoa học cơng nghệ Việt Nam, bạn lớp hóa 4C động viên giúp đỡ tơi q trình thực đề tài • Con xin cảm ơn ba mẹ quan tâm, động viên hỗ trợ mặt suốt trình học tập, thực đề tài tốt nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2013 Sinh viên: Trần Thị Kim Hồng i DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Kí hiệu Tiếng anh H Hexane C Chloroform EA Ethyl acetate EtOH Ethanol M Methanol Tiếng việt SKLM Sắc kí lớp mỏng SKC Sắc kí cột NMR Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance Carbon (13) nuclear Phổ cộng hưởng từ hạt nhân magnetic resonance carbon (13) Hydro (1) nuclear Phổ cộng hưởng từ hạt nhân magnetic resonance proton (1) Heteronuclear Multiple Phổ tương tác dị hạt nhân qua bond Coherence nhiều liên kết Heteronuclear Single Phổ tương tác dị hạt nhân qua Quantum Coherence liên kết δ Chemical shift Độ dịch chuyển hóa học ppm Part per million Phần triệu Mp Melting point Điểm nóng chảy s Singlet Mũi đơn d Doublet Mũi đôi dd Doublet of doublet Mũi đôi đôi 13 C-NMR H-NMR HMBC HSQC ii J Coupling constant (M)Hz (Mega) Hertz g Gram mg Milligram Kg Kilogram IC 50 Hằng số ghép spin half maximal inhibitory concentration iii 50% nồng độ ức chế tối đa DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Kết sắc ký cột cao BBD2(13,7g) 23 Bảng 2.2 Kết sắc khí cột silica gel cao BBD2.10 (567,4mg) 23 Bảng 3.1 Kết IC 50 mẫu cao Bình bát dây 26 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Điều chế mẫu thử hoạt tính 17 Sơ đồ 2.2 Phản ứng thủy phân enzym α-glucosidase với chất pNitrophenyl-α-D-glucopyranoside 18 Sơ đồ 2.3 Điều chế cao thô 21 Sơ đồ 2.4 Quy trình điều chế phân đoạn từ cao n-hexan 22 iv DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Phân loại bệnh đái tháo đường Hình 1.2 Bình bát dây Hình 1.3 Lá bình bát dây Hình 1.4 Hoa Bình bát dây 10 Hình 2.1 Bình bát dây khô 16 Hình 2.2 Cấu trúc Acid tannic (C 76 H 52 O 46 ) 19 Hình 3.1 Một số tương quan HMBC hợp chất BBD-H1 28 Hình 3.2 Hợp chất BBD-H1 29 v MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ii DANH MỤC CÁC BẢNG iv DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ iv DANH MỤC CÁC HÌNH v MỞ ĐẦU Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 BỆNH TIỂU ĐƯỜNG 1.1.1 Định nghĩa 1.1.2 Phân loại 1.1.3 Các biến chứng bệnh tiểu đường 1.1.4 Phương pháp điều trị Bệnh tiểu đường 1.2 TỔNG QUAN VỀ ENZYM ΑLPHA–GLUCOSIDASE] 1.2.1 Sơ lược enzym 1.2.2 Chất ức chế enzym 1.2.3 Giới thiệu enzym α–glucosidase 1.2.4 Cơ chế hoạt động enzym α–glucosidase 1.2.5 Tác nhân ức chế enzym α–glucosidase 1.3 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT 1.3.1 Đặc điểm Bình Bát Dây 1.3.2 Tác dụng dược lý Bình bát dây 10 1.3.3 Thành phần hóa học chung Bình bát dây 11 Chương 2: THỰC NGHIỆM 14 2.1 Hóa chất 14 2.2 Thiết bị 14 2.3 Phương pháp tiến hành 15 2.3.1 Phương pháp cô lập hợp chất 15 vi 2.3.2 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học hợp chất 15 2.4 Nguyên liệu 15 2.5 Xử lí mẫu nguyên liệu 15 2.6 Thử nghiệm hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase 16 2.6.1 Điều chế mẫu thử 16 2.6.2 Nguyên tắc 17 2.6.3 Cơ sở phương pháp 18 2.6.5 Cách tính kết 19 2.7 Cô lập chất từ bình bát dây 20 2.7.1 Điều chế cao thô 20 2.7.2 Cô lập chất từ cao hexan 21 Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 26 3.1 Kết thử nghiệm hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase 26 3.2 Xác định cấu trúc hợp chất 27 Chương 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO 33 vii MỞ ĐẦU Đái tháo đường hay bệnh tiểu đường, bệnh ngày phổ biến, gây nhiều biến chứng trầm trọng, ảnh hưởng đến sống bệnh nhân xã hội Đây bệnh xếp đứng thứ nguyên nhân gây tử vong, gây giảm tuổi thọ trung bình từ đến 10 năm; nguyên nhân hàng đầu gây mù loà, suy thận giai đoạn cuối cắt cụt chi khơng chấn thương Trung bình giây lại có người chết nguyên nhân đái tháo đường biến chứng; 30 giây lại có người đái tháo đường có biến chứng bàn chân bị cắt cụt chi (theo số liệu Liên đồn Đái tháo đường giới).Vì vậy, việc nghiên cứu phương pháp điều trị bệnh đái tháo đường nhà khoa học quan tâm Trong hướng điều trị bệnh đái tháo đường loại 2, hướng điều trị cách ức chế hoạt động enzym α-glucosidase nhà nghiên cứu quan tâm có chế đơn giản, an tồn Tuy nhiên, loại thuốc ức chế enzym αglucosidase sử dụng có nhiều tác dụng phụ, nên nhằm hạn chế tác dụng phụ đưa thêm nhiều lựa chọn cho việc điều trị bệnh đái tháo đường, cần phải nghiên cứu thêm chất ức chế enzym α-glucosidase từ nhiều nguồn khác Các nhà khoa học giới có nhiều cơng trình nghiên cứu hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase, lập nhiều hợp chất thiên nhiên có hoạt tính ức chế mạnh.Và Việt Nam nước có nguồn thuốc dồi dào, phong phú, dân gian ta từ lâu lưu truyền nhiều thuốc chữa bệnh đái tháo đường cỏ, có vài nghiên cứu vấn đề Bình bát dây có tên khoa học Coccinia grandis L thuộc họ Bầu Bí (Cucurbitaceae) loại quen thuộc với người dân miền Nam, chúng mọc hoang nương, rẫy, bờ rào Đọt non có vị ngọt, tính mát thường nấu canh ăn có tác dụng: Thanh nhiệt, mát phế, vị, nhuận táo, sinh tân dịch, dưỡng âm, tiêu độc, trị tiểu đường… Có thể dùng non hoa rửa ăn sống xay nước uống Người bệnh tiểu đường hái non bình bát dây 100g, thịt cua 50g, gia vị vừa đủ nấu canh ăn thường xuyên Nhiều người sử dụng bình bát dây cho biết, giảm 50% liều thuốc Tây trị đái tháo đường loại nhẹ Mặt khác, để giảm chứng đái tháo đường người bệnh nên có chế độ ăn uống tập luyện điều độ, tránh béo phì, tránh bệnh mạn tính huyết áp, tim mạch, gan nhiễm mỡ Tuy nhiên, cơng trình nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học loài chưa nghiên cứu nhiều giới Việt Nam Do vậy, đề tài “Khảo sát thành phần hóa học hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase cao hexan Bình bát dây Coccinia grandis (L.) J Voigt Họ Bầu Bí (Cucurbitaceae)” sở khoa học ban đầu cho nghiên cứu tiếp theo, nhằm sớm đưa Bình bát dây thành vị thuốc có giá trị đóng góp thêm hiểu biết thành phần Hóa – Thực vật lồi Coccinia grandis (L.), qua nâng cao giá trị sử dụng loài thực vật Mục tiêu đề tài - Phân lập chất tinh khiết từ Bình bát dây - Xác định cấu trúc chất phân lập - Khảo sát hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết thử nghiệm hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase Kết thử hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase cao chiết trình bày bảng Bảng 3.1 Kết IC 50 mẫu cao Bình bát dây Tên mẫu STT IC 50 (µg/mL) BBD-C-H 10,98 BBD-C-EA 3,26 BBD-C-H O 132,07 Nhận xét: Qua thử nghiệm hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase cao phân đoạn với chất đối chứng dương acid tannic cho thấy: Cao etyl acetat có biểu hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase mạnh với giá trị IC 50 3,26 µg/mL Tiếp đến cao hexan với giá trị IC 50 10,98 µg/mL hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase yếu cao nước với giá trị IC 50 132,07 µg/mL Kết thử nghiệm cao phân đoạn tiền đề cho việc tìm hợp chất có hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase Bình bát dây Từ kết cho thấy việc sử dụng Bình bát dây thuốc chữa bệnh đái tháo đường dân gian có sở khoa học Bước đầu mở hướng việc sử dụng Bình bát dây sản phẩm tân dược, tạo loại thuốc có nguồn gốc thiên nhiên có tác dụng chữa bệnh đái tháo đường, gây tác dụng phụ không mong muốn người sử dụng loại thuốc tổng hợp 26 3.2Xác định cấu trúc hợp chất[4],[5],[8] HỢP CHẤT BBD-H1 Hợp chất BBD-H1 thu dạng tinh thể màu trắng, màu tím với thuốc thử H SO /EtOH Phổ 1H-NMR (CDCl , δ ppm, 500MHz) phụ lục 1.1 cho thấy phân tử BBD-H1 có mũi đơn nhóm CH vị trí δ =0,76; 0,79; 0,83; 0,94; 0,97; 1,03 1,68ppm Tín hiệu phổ hai mũi đơi vị trí δ H 4,69 (d, 1H, J= 2,5) δ H 4,57 (d, 1H, J= 2) nhóm =CH với cacbon tương ứng δ C 109,3ppm, phân tích phổ HSQC phổ tương tác trực tiếp cacbon hidro cho biết hai proton thuộc nhóm metylen olefin, tương tác đặc trưng tritecpen thuộc kiểu khung lupan Tín hiệu δ H 3,2 ppm (1H, dd, J=4,8 J=11,3) proton thuộc nhóm hydroxy metin H-3β với cacbon tương ứng δ C 79,04ppm.Phụ lục 1.3 phổ HMBC cho thấy số tương quan proton cacbon (hình 3.1) Phổ 13C-NMR (CDCl , δ ppm ) phụ lục 1.2 cho thấy phân tử BBD-H1 có 30 nguyên tử cacbon Trong đó, có cacbon olefin tứ cấpở 150,99 ppm nhóm =CH 109,3 ppm với nhóm >CHOH 79,0 ppm - Phổ HMBC Proton δ H 4,69 (d, 1H, J= 2,5) δ H 4,57 (d, 1H, J= 2) tương quan với tín hiệu cacbon δ C 19,3 ppm suy C-30 tương quan với tín hiệu cacbon δ C =48,3 ppm suy C-19 Proton δ H 1,68 (s, 3H) H-30 tương quan với C-19(δ C =48,3 ppm) C-20 (δ C =150,99 ppm) Proton δ H 1,03 (s, 3H) H-26 tương quan với C-9 (δ C =50,4 ppm) C-7 (δ C =43,3 ppm) Proton H-25 δ H 0,83 (s, 3H) tương quan với C-9 (δ C =50,4 ppm) C-5 (δ C =55,3ppm) Proton δ H 0,76 (s, 3H) H-23 tương quan với C-3 (δ C =79,04 ppm) C-5 (δ C =55,3 ppm) Proton H-24 (δ H 0,97) tương quan với C-3 (δ C =79,04 ppm) 27 29 CH2 30 20 19 21 12 11 25 26 10 HO 24 17 14 28 16 27 15 22 18 13 23 Hình 3.1Một số tương quan HMBC hợp chất BBD-H1 Ngoài ra, phổ 1H-NMR cho thấy tín hiệu proton H-3 [δ H 3,2 1H] mũi doublet (J = 4,8 J =11,3 Hz), tức H-3 ghép cặp với H e -2 H a -2 Do đó, H-3 phải có cấu hình α hay nhóm –OH vị trí C-3 phải có cấu hình β 30 H3C H 25 H H HO H 24 CH3 CH3 H 10 CH3 23 J aa = 5-14 H H CH H H H H H 11 26 H H H 12 14 CH 19 18 15 H H 21 H 28 H 13 H 20 29 H2C H CH3 17 22 H H 16 H 27 J ae = 5-7 J ee = 0-5 Từ kết phân tích phổ nêu trên, kết hợp đối chiếu với số liệu phổ chất lupeol[8] nhận thấy có tương quan Do chất BBD-H1 xác định lupeol (3β-Lup-20(29)-en-3-ol) 28 H H 29 CH2 30 H3C 20 19 12 11 HO H3C 24 25 CH3 18 13 26 CH3 14 10 22 28 CH3 17 16 CH3 27 21 15 CH3 23 Hình 3.2 Hợp chất BBD-H1 Bảng 3.2Bảng so sánh số liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR BBD-H1 với số liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR lupeol Vị trí BBD-H1 Lupeol (CDCl ) (CDCl ) δ H ppm (J, Hz) 500 MHz δ C ppm δ H ppm (J, Hz) 125 MHz 500 MHz δC ppm 125 MHz 38,8 38,9 27,49 27,5 3,2 (dd, 1H, J=11,3; 4,8) 79,0 3,18 (dd, 1H, J=11; 4,5) 79,0 38,9 38,8 55,35 55,4 18,35 18,4 34,3 34,4 29 40,8 40,9 50,5 50,5 10 37,2 37,2 11 20,97 21,0 12 25,2 25,2 13 38,1 38,1 14 42,88 42,9 15 27,5 27,5 16 35,6 35,6 17 43,0 43,0 18 48,3 48,4 19 48,0 48,0 20 150,99 150,9 21 29,8 29,9 22 40,0 40,0 23 0, 76 (s, 3H) 28,0 0,78 (3H) 28,0 24 0,97 (s, 3H) 15,38 0,81(3H) 15,4 25 0,83 (s, 3H) 16,1 0,92(3H) 16,1 30 26 1,03 (s, 3H) 16,0 0,94 (3H) 16,0 27 0,94 (s, 3H) 14,58 1,02(3H) 14,6 28 0,79 (s, 3H) 18,0 0,75 (3H) 18,0 29 30 4,57 (d, 1H, J=2); 4,69 (d, 1H, J=2,5) 1,68 (s, 3H) 4,56 (d, 1H, 109,3 J=2,25; 1,25); 4,68 109,3 (dq, 1H, J=2) 19,3 31 1,68 (s, 3H) 19,3 Chương 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Trong khóa luận này, chúng tơi khảo sát thành phần hóa học phân đoạn BBD2 cao hexan trích từ Bình bát dây Coccinia grandis (L.) J Voigt, họ Bầu Bí (Cucurbitaceae), thu hái từ xã An Ngãi Trung, ấp An Lợi, huyện Ba Tri, Tỉnh Bến Tre Bằng phương pháp sắc ký cột pha thường với hệ dung môi giải ly khác thu hợp chất ký hiệu BBD-H1 Thông qua kết phân tích phổ đai phân tích phổ đại (1H-NMR, 13CNMR, HSQC, HMBC so sánh với tài liệu tham khảo, xác định cấu trúc hợp chất là: Lupeol (BBD-H1) Chúng tơi thử nghiệm hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase cho cao phân đoạn gồm: cao ethyl acetate, cao hexan cao nước với chất đối chứng dương acid tanic Kết cho thấy cao có hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase, cao ethyl acetate biểu mạnh (IC 50 = 3,26µg/ml) KIẾN NGHỊ Vì thời gian thực khóa luận vốn kiến thức cịn hạn chế, nên việc lập hợp chất cịn gặp nhiều khó khăn chưa triệt để, tương lai tiếp tục lập hợp chất khác cịn lại cao hexan cao cịn lại Bình bát dây thử hoạt tính sinh học hợp chất phân lập Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học phận khác Bình bát dây như: thân, quả, rễ… 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt [1] Đơng Thị Hồi An, Nguyễn Thị Hảo, Đỗ Đình Hồ, Phạm Thị Mai, Trần Thanh Lan Phương, Đỗ Thị Thanh Thủy, Lê Xuân Trường, Hóa sinh y học, Bộ mơn hóa sinh-khoa y, ĐH Y Dược tp.HCM, Nhà xuất y học, 137164 [2] Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập, Trần Toàn(2004), “ Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, tập 2, Nhà xuất Khoa học kĩ thuật Hà Nội [3] Võ Văn Chi, Trần Hợp (1999), Cây cỏ có ích Việt Nam Tập 2, NXB Giáo dục, 170-171 [4] Nguyễn Phi Kim Phụng (2005), phổ NMR sử dụng tích hữu cơ, Nhà Xuất Bản Đại Học Quốc Gia Thành Phố Hồ Chí Minh [5] Nguyễn Phi Kim Phụng (2007), phương pháp cô lập hợp chất hữu cơ, Nhà Xuất Bản Đại Học Quốc Gia Thành Phố Hồ Chí Minh, 151-281 [6] PGS.TS Nguyễn Thy Khêu, Nội tiết học, Bộ môn nội tiết, ĐH Y Dược tp.HCM, Tài liệu lưu hành nội [7] Huỳnh Ngọc Nghiêm Thụy (2011), “ Nghiên cứu hoạt tính ức chế enzym αglucosidase số thuốc An Giang thành phần hoạt chất thân Núc Nác Orpxylum indicum (L.) Kurz “, Luận văn thạc sĩ hóa học, Đại Học Khoa Học Tự Nhiên [8] Lê Anh Tuấn, Nguyễn Văn Hùng, Nguyễn Quyết Chiến(2004), “Các tritecpen ancol từ xerospermum laevigatum radlk”, viện hóa học, khoa học cơng nghệ Việt Nam, tạp chí Hóa học, 466-469 Tài liệu tiếng anh 33 [9] Rajeswari Arunachalam, Sujatha Dhanasingh, Balasaraswathi Kalimuthu, Mani Uthirappan,Chellan Rose, Asit Baran Mandal, Phytosynthesis of silver nanoparticles using Coccinia grandis leaf extract and itsapplication in the photocatalytic degradation, Colloids and Surfaces B: Biointerfaces 94 (2012) 226– 230 [10] U A Deokate and S S Khadabadi, Pharmacology and phytochemistry of Coccinia indica, Journal of Pharmacognosy and Phytotherapy Vol 3(11), pp 155-159, December 2011 [11] Tamilselvan N, Thirumalai T, Elumalai EK, Balaji R, David E, Pharmacognosy of Coccinia grandis: a review, Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine (2011)S299-S302 [12] Dnyaneshwar J Taur , Ravindra Y Patil, Mast Cell Stabilizing, Antianaphylactic and Antihistaminic Activity of Coccinia grandis Fruits in Asthma, Available online 20 Sep 2011 [13] Gunnar Samuelsson, Mohamed Hussein Farah, Per Claeson, Mekonen Hagos, Mats Thulin, Olov Hedberg, Ahmed Mumin Warfa, Abdirizak Osman Hassan, Abdulkadir Hassan Elmi, Abukar Dalo Abdurahman, Abdullahi S Ehni, Yakoub Aden Abdi and Mohamed Hassan Alin, Inventory of plants used in traditional medicine in Somalia II Plants of the families Combretaceae to Labiatae, Journal of Ethnopharmacology, 37 (1992) 47-70 [14] Sarah khurshid khan, South Asian and Chinese Medical Systems: Ayurveda and Traditional Chinese Medicine Treatments for Diabetes mellitus, Type , A dissertation submitted to the Graduate Faculty in Biology in partial fulfillment of the requirements for the degree of Doctor of Philosophy, The City University of New York, 2006 [15] Shakti Prasad Pattanayak and Priyashree Sunita, In vivo antitussive activity of Coccinia grandis against irritant aerosol and sulfur dioxide-induced cough model in rodents, Bangladesh J Pharmacol 2009; 4: 84-87 34 [16] Amalesh Samanta, Bolay Bhattacharya, Soma Ghosh, Gouranga Das, “in vivo antimalarial activity of the plant coccinia grandis (family: cucurbitaceae)”, IJPRD, 2011; Vol 3(4): June 2011 (73 - 79) [17] Evaluation of Hepatoprotective Activity of the Fruits of Coccinia grandis Linn http://www.ijhr.org [18] S Venkateswaran, L Pari, Effect of Coccinia indica leaves on antioxidant status in streptozotocin-induced diabetic rats, Journal of Ethnopharmacology 84 (2003) 163/168 [19] Patel DK, Kumar R, Laloo D, Hemalatha S, Diabetes mellitus: An overview on its pharmacological aspects and reported medicinal plants having antidiabetic activity, www.elsevier.com/locate/apjtb [20] Raju Patil, Ravindra Patil, Bharati Ahirwar, Dheeraj Ahirwar, Current status of Indian medicinal plants with antidiabetic potential: a review, www.elsevier.com/locate/apjtb [21] J ruby,P T nathan,J balasingh, and T H kunz, chemical composition of fruits and leaves eaten by short-nosed fruit bat, Cynopterus sphinx, Journal of Chemical Ecology, Vol 26, No 12, 2000 [22] Amruta Bedekar, Karan Shah, and Mattheos Koffas, Natural Products for Type II Diabetes Treatment, Advances in Applied Microbiology, Volume 71 [23] Preeth Manoharan , Shobana.John , Upendarrao.Golla, Dr.Thangathirupathi.A, anti-ulcer effect of coccinia grandis (Linn.) on pylorus ligated (albino) rats www.ijprd.com [24] P Poovendran, N Vidhya and S Murugan, Antimicrobial Activity of Coccinia grandis Against Biofilm and ESBL Producing Uropathogenic E coli, Global Journal of Pharmacology (1): 23-26, 2011 [25] Geetu Singh, Prasoon Guptaa, Preeti Rawat, Anju Puri,Gitika Bhatia, Rakesh Maurya, Antidyslipidemic activity of polyprenol from Coccinia grandis in high-fatdiet-fed hamster model, Phytomedicine 14 (2007) 792–798 35 [26] S.V Deshpande , M J Patil , S.C Daswadkar , U Suralkar , A Agarwal, a study on anti-inflammatory activity of the leaf and stem extracts of coccinia grandis l voigt, International Journal of Applied Biology and Pharmaceutical Technology, www.ijabpt.com [27] Aggarwal Ashish S, Suralkar Ujwala R, Chaudhari Sugandha G, Deshpande SV,Garud Aniket A, Talele Sandeep G, Analgesic and antipyretic activity of methanolic extract of Coccinia grandis L leaves in experimental animals Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences [28] A Sivaraj, B Preethi Jenifa, M Kavitha, P Inbasekar, B Senthilkumar, A Panneerselvam, Antibacterial activity of Coccinia grandis leaf extract on selective bacterial strains, Journal of Applied Pharmaceutical Science 01 (07); 2011: 120-123 Websize [29] http://www.thuocbietduoc.com.vn/tin-tuc-17903-1-24/chua-benh-tieu-duongbang-day-rau-bat.aspx [30] http://www.benhtieuduong.net/ [31] http://www.yte247.com/news/detail/cu-7-giay-lai-co-1-nguoi-chet-vi-benhdai-thao-duong-78/ 36 ... Nam Do vậy, đề tài ? ?Khảo sát thành phần hóa học hoạt tính ức chế enzym α- glucosidase cao hexan Bình bát dây Coccinia grandis (L. ) J Voigt Họ Bầu Bí (Cucurbitaceae)? ?? sở khoa học ban đầu cho nghiên... NGHỊ KẾT LUẬN Trong khóa luận này, chúng tơi khảo sát thành phần hóa học phân đoạn BBD2 cao hexan trích từ Bình bát dây Coccinia grandis (L. ) J Voigt, họ Bầu Bí (Cucurbitaceae), thu hái từ xã An... (27,25g) Sơ đồ 2.1 Điều chế mẫu thử hoạt tính Các cao chiết gồm cao hexan (BBD-C-H), cao etyl acetat (BBD-C-EA), cao nước (BBD-H O) đem thử hoạt tính ức chế enzym α- glucosidase 2.6.2 Nguyên tắc Hoạt