nghiên cứu đánh giá ảnh hưởng của tỏi đối với sự phát triển của noãn nang(oocyst) cầu trùng phân lập từ gà bệnh. ứng dụng trong phòng trị bệnh cầu trùng trên đàn gà chăn nuôi theo hướng công nghiệp

25 2.3.3 Thí nghiệm theo dõi ảnh hưởng của các nồng độ tỏi đến sự phát triển noãn nang cầu trùng trong phòng thí nghiệm.... Phương pháp theo dõi ảnh hưởng của tỏi và thuốc five-anticoc đ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

- -

TRẦN HUY LIỆU

NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ ẢNH HƯỞNG CỦA TỎI ĐỐI VỚI

SỰ PHÁT TRIỂN CỦA NOÃN NANG(OOCYST) CẦU TRÙNG PHÂN LẬP TỪ GÀ BỆNH ỨNG DỤNG TRONG PHÒNG TRỊ BỆNH CẦU TRÙNG TRÊN ĐÀN GÀ CHĂN NUÔI THEO HƯỚNG CÔNG NGHIỆP

LUẬN VĂN THẠC SĨ

HÀ NỘI - 2014

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

- -

TRẦN HUY LIỆU

NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ ẢNH HƯỞNG CỦA TỎI ĐỐI VỚI

SỰ PHÁT TRIỂN CỦA NOÃN NANG(OOCYST) CẦU TRÙNG PHÂN LẬP TỪ GÀ BỆNH ỨNG DỤNG TRONG PHÒNG TRỊ BỆNH CẦU TRÙNG TRÊN ĐÀN GÀ CHĂN NUÔI THEO HƯỚNG CÔNG NGHIỆP

CHUYÊN NGÀNH : THÚ Y

MÃ SỐ : 60.64.01.01

NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: 1 PGS.TS BÙI THỊ THO

2 TS NGUYỄN THANH HẢI

HÀ NỘI - 2014

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi Các số liệu và kết quả trình bày trong luận văn là hoàn toàn trung thực và chưa từng được ai công

bố trong bất cứ công trình nghiên cứu nào

Tôi xin cam đoan mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này đã được cám ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã được chỉ rõ nguồn gốc

Hà Nội, ngày 8 tháng 10 năm 2014

Tác giả luận văn

Trần Huy Liệu

LỜI CẢM ƠN

Để hoàn thành luận văn tốt nghiệp này, ngoài sự cố gắng, nỗ lực của bản thân, tôi còn nhận được sự giúp đỡ nhiệt tình, sự chỉ bảo ân cần của các thầy cô hướng dẫn Trong luận văn này, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Bùi Thị Tho, bộ môn Nội- Chẩn - Dược lý - Độc chất học, khoa Thú y; TS Nguyễn Thanh Hải- Khoa Công Nghệ Sinh Học, Học viện Nông Nghiệp Việt Nam, đã ân cần chỉ bảo, giúp đỡ tận tình và hướng dẫn tôi trong suốt quá trình thực tập tốt nghiệp để tôi hoàn thành tốt luận văn tốt nghiệp

Đồng thời tôi cũng xin bày tỏ lòng biết ơn tới Ban giám hiệu nhà trường, các thầy cô giáo trong Học viện Nông Nghiệp Việt Nam nói chung, các thầy cô giáo trong khoa Thú y nói riêng đã tạo điều kiện cho tôi có môi trường học tập, nghiên cứu thuận lợi trong suốt thời gian học tập và nghiên cứu vừa qua

Nhân dịp này cho phép tôi được bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc về sự giúp đỡ tận tình của các đồng nghiệp trong Công ty cổ phần chăn nuôi C.P Việt Nam, các trang trại nuôi gia công với công ty đã tạo điều kiện giúp đỡ tôi trong suốt quá trình điều tra nghiên cứu tại cơ sở

Tôi xin được cảm ơn bạn bè, đồng nghiệp, người thân và gia đình đã động viên, tạo điều kiện về thời gian, về vật chất và tinh thần để tôi hoàn thành tốt khóa luận

Hà Nội, ngày 8 tháng 10 năm 2014

Tác giả luận văn

Trần Huy Liệu

MỤC LỤC

LỜI CAM ĐOAN i

LỜI CẢM ƠN ii

MỤC LỤC iii

DANH MỤC BẢNG vii

DANH MỤC HÌNH ẢNH, ĐỒ THỊ viii

DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ix

MỞ ĐẦU 1

1 Đặt vấn đề 1

2 Mục đích của đề tài 1

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài 2

3.1 Ý nghĩa khoa học 2

3.2 Ý nghĩa thực tiễn 2

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

I Bệnh cầu trùng 3

1.1 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước 3

1.1.1 Trên thế giới 3

1.1.2 Tình hình nghiên cứu trong nước 6

1.2 Bệnh cầu trùng gà 7

1.2.1 Định nghĩa bệnh cầu trùng gà 7

1.2.2 Tác nhân gây bệnh cầu trùng gà 8

1.2.3 Vòng đời của cầu trùng (chu kỳ sinh học) 9

1.2.4 Sự nhiễm bệnh cầu trùng 10

1.2.5 Quá trình sinh bệnh 10

1.2.6 Sự miễn dịch của gà đối với bệnh cầu trùng 11

1.2.7 Triệu chứng 11

1.2.8 Bệnh tích 12

1.2.9 Chẩn đoán 13

1.2.10 Phòng, trị bệnh cầu trùng 13

1.3 Một số hiểu biết về cây tỏi 16

1.3.1 Đặc điểm của cây và sự phân bố 16

1.3.2 Ứng dụng của tỏi trong cuộc sống 17

Chương 2 ĐỐI TƯỢNG, ĐỊA ĐIỂM, 23

VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23

2.1 Đối tượng và vật liệu nghiên cứu 23

2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 23

2.1.2 Vật liệu nghiên cứu 23

2.2 Địa điểm nghiên cứu 24

2.2.1 Địa điểm lấy mẫu và ứng dụng thực tế: 24

2.2.2 Địa điểm xét nghiệm 24

2.3 Nội dung nghiên cứu 25

2.3.1 Điều tra tình hình dịch tễ cầu trùng gà của đàn Ross 308 từ 1-7 tuần tuổi trong 3 năm (2011, 2012, 2013) 25

2.3.2 Theo dõi triệu chứng lâm sàng và bệnh tích đại thể của gà bị bệnh cầu trùng. 25

2.3.3 Thí nghiệm theo dõi ảnh hưởng của các nồng độ tỏi đến sự phát triển noãn nang cầu trùng trong phòng thí nghiệm 25

2.3.4 Ảnh hưởng của dấm tỏi đến khả năng phòng một số bệnh của đàn gà ross 308 ở trang trại của công ty cổ phần chăn nuôi C.P Việt Nam 25

2.4 Phương pháp nghiên cứu 26

2.4.1 Phương pháp điều tra về dịch tễ học bệnh cầu trùng tại Trại 26

2.4.2 Theo dõi sự biến đổi một số chỉ tiêu lâm sàng khi gà bị bệnh cầu trùng 26 2.4.3 Phương pháp mổ khám quan sát bệnh tích điển hình 26

2.4.4 Phương pháp lấy mẫu phân và bảo quản mẫu phân 27

2.4.5 Phương pháp xét nghiệm phân 28

2.4.6 Phương pháp theo dõi ảnh hưởng của tỏi và thuốc five-anticoc đến sự phát triển của noãn nang cầu trùng trong phân gà bệnh 29

2.4.7 Phương pháp bố trí thí nghiệm ảnh hưởng dấm tỏi đến khả năng phòng bệnh cầu trùng của đàn gà ross 308 32 2.4.8 Xử lý số liệu 34

Chương 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 36 3.1 Điều tra tình hình dịch tễ cầu trùng gà của đàn Ross 308 từ 1-7 tuần tuổi trong 3 năm (2011,2012,2013) 36

3.1.1 Công tác chăn nuôi - thú y tại trại 36 3.1.2 Điều tra tình hình mắc bệnh cầu trùng của gà Ross 308 từ 1-7 tuần tuổi trong 3 năm (2011, 2012, 2013) 38

3.2 Kết quả theo dõi triệu chứng lâm sàng và bệnh tích đại thể của gà mắc bệnh cầu trùng 39 3.3 Thí nghiệm theo dõi ảnh hưởng của các nồng độ tỏi đến sự phát triển noãn nang cầu trùng trong phòng thí nghiệm 43

3.3.1 Kết quả kiểm tra và phân loại cầu trùng gây bệnh cho gà của trang trại 43 3.3.2 Ảnh hưởng của các nồng độ tỏi đến sự phát triển của noãn nang cầu trùng. 45

3.3.3 So sánh sự phát triển của noãn nang cầu trùng dưới tác dụng tỏi nồng độ 7,5% và thuốc five- anticoc trong phòng thí nghiệm 49

3.4 Ảnh hưởng của dấm tỏi đến khả năng phòng bệnh của đàn gà ross 308 ở trang trại của công ty cổ phần chăn nuôi C.P Việt Nam 53

3.4.1 Ảnh hưởng của dấm tỏi đến cường độ và tỷ lệ nhiễm cầu trùng 53 3.4.2 Ảnh hưởng của dấm tỏi đến khả năng phòng một số bệnh thường gặp trên hai đàn gà thí nghiệm 64

Chương 4 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 72 4.1 Kết luận 72

4.1.1 Điều tra tình hình dịch tễ cầu trùng gà của đàn Ross 308 từ 1-7 tuần tuổi trong 3 năm (2011, 2012, 2013) 72 4.1.2 Về triệu chứng lâm sàng và bệnh tích đại thể của gà bị bệnh cầu trùng 72

4.1.3 Ảnh hưởng của các nồng độ dịch ép tỏi đến sự phát triển noãn nang cầu trùng trong phòng thí nghiệm 72 4.1.4 Ảnh hưởng của dấm tỏi đến khả năng phòng bệnh của đàn gà ross 308 ở trang trại của công ty cổ phần chăn nuôi C.P Việt Nam 73

4.2 Đề nghị 73 TÀI LIỆU THAM KHẢO 72

DANH MỤC BẢNG

Bảng 1.1 Các loại Vacxin Oocyst cầu trùng đã được sản xuất 15

Bảng 2.1 Định dạng các loài cầu trùng ở gà 30

Bảng 2.2 Thành phần các chất có trong các đĩa nuôi cấy 31

Bảng 3.1 Quy trình phòng bệnh cho đàn gà Ross 308 38

Bảng 3.2 Kết quả điều tra bệnh cầu trùng trên đàn gà trong 3 năm (2011, 2012, 2013) 39

Bảng 3.3 Kết quả mổ khám bệnh tích gà bị bệnh cầu trùng 40

Bảng 3.4 Ảnh hưởng của nồng độ tỏi khác nhau đến sự phát triển của noãn nang cầu trùng trong phòng thí nghiệm 46

Bảng 3.5 Ảnh hưởng của các nồng độ tỏi đến tỷ lệ noãn nang cầu trùng chưa được phân bào 48

Bảng 3.6 So sánh ảnh hưởng của tỏi 7.5% và thuốc five – anticoc đến sự phát triển của noãn nang cầu trùng gà 49

Bảng 3.7 Ảnh hưởng của nồng độ tỏi 7.5% và thuốc five –anticoc đến tỷ lệ % noãn nang chưa phân bào theo thời gian 51

Bảng 3.8 Tỷ lệ và cường độ nhiễm noãn nang cầu trùng theo lứa tuổi của gà Ross 308 từ 1- 7 tuần tuổi (lô đối chứng I) 54

Bảng 3.9 Tỷ lệ và cường độ nhiễm noãn nang cầu trùng theo lứa tuổi của gà Ross 308 từ 1- 7 tuần tuổi được nuôi theo quy trình của trại có dùng thuốc trị cầu trùng 58

Bảng 3.10 Tỷ lệ và cường độ nhiễm noãn nang cầu trùng theo lứa tuổi của gà Ross 308 từ 1- 7 tuần tuổi được bổ xung dấm tỏi 60

Bảng 3.11 Ảnh hưởng của dấm tỏi đến sinh trưởng tích lũy của gà 65

từ 1-7 tuần tuổi 65

Bảng 3.12 So sánh ảnh hưởng của dấm tỏi đến tỷ lệ nuôi sống gà qua các tuần tuổi 66

Bảng 3.13 Kết quả mổ khám bệnh tích gà chết 2 lô thí nghiệm và lô đối chứng 69

DANH MỤC HÌNH ẢNH, ĐỒ THỊ

Hình 1.1 Một số hình ảnh về tỏi 16

Hình 1.2 Một số chế phẩm của tỏi 17

Hình 3.1 Hình ảnh bệnh tích cầu trùng gà 43

Hình 3.2 Hình ảnh 6 loại cầu trùng xác định ở trang trại 44

Hình 3.3 Noãn nang cầu trùng gà có vỏ bình thường dưới tác động của nước sinh lý 52

Hình 3.4 Noãn nang cầu trùng gà có vỏ không bình thường và bị thoát nguyên sinh chất ra ngoài dưới tác động của tỏi nồng độ 7,5% ở 60h và 72h 52

Hình 3.5 Noãn nang cầu trùng gà có vỏ không bình thường và bị thoát nguyên sinh chất ra ngoài dưới tác động của tỏi 7,5% và thuốc five anticoc ở 60h và 72h 52

Biểu đồ 3.1 Tỷ lệ nhiễm cầu trùng theo độ tuổi trên gà( nhiễm tự nhiên) 55

Biểu đồ 3.2 Tỷ lệ nhiễm cầu trùng theo độ tuổi trên gà Ross 308 59

(dùng thuốc) 59

Biểu đồ 3.3 Tỷ lệ nhiễm cầu trùng theo độ tuổi trên gà Ross 308 (dấm tỏi) 61

Biểu đồ 3.4 So sánh tỷ lệ nhiễm cầu trùng theo độ tuổi trên gà Ross 308 ở 3 lô thí nghiệm (Theo tự nhiên, dùng thuốc và dấm tỏi) 62

Biểu đồ 3.5 So sánh cường độ nhiễm cầu trùng theo độ tuổi trên gà Ross 308 ở 3 lô thí nghiệm (Theo tự nhiên, dùng thuốc và dấm tỏi) 63

Biểu đồ 3.6.Tỷ lệ chết của gà giữa hai lô thí nghiệm và đối chứng 67

MỞ ĐẦU

1 Đặt vấn đề

Bệnh cầu trùng là một bệnh ký sinh trùng truyền nhiễm rất nguy hiểm do các loài nguyên sinh động vật khác nhau thuộc bộ Coccidae gây ra Bộ nguyên sinh động vật Coccidae được liệt vào những ký sinh trùng phổ biến khá rộng rãi trong tự nhiên, ở gia súc, gia cầm, hoang thú và người, cầu trùng đã gây nên nhiều bệnh nặng và gây nên tổn thất lớn về kinh tế

Bệnh chủ yếu do Eimeria tenella(ký sinh ở manh tràng), Eimeria

necatnix (ký sinh ở ruột non), Eimeria acervulina, Eimeria maxima, Eimeria

brunetti Cầu trùng có thể gây bệnh ở gà mọi lứa tuổi nhưng hay gặp ở gà 10-30 ngày tuổi

Gia cầm nuôi nhốt tập trung với mật độ cao, chật chội, ẩm độ môi trường cao, thức ăn không đủ dinh dưỡng, chăm sóc kém đều ảnh hưởng tới mức độ nhiễm cầu trùng Ẩm độ môi trường cao, nhiệt độ thay đổi đột ngột là điều kiện thuận lợi cho cầu trùng phát triển

Hiện nay một số phác đồ điều trị không còn hiệu quả nữa, gây thiệt hại lớn về kinh tế và đặc biệt để lại tồn lưu thuốc và kháng sinh trên các sản phẩm chế biến từ gà Vì vậy tôi lựa chọn đề tài:

“Nghiên cứu đánh giá ảnh hưởng của tỏi đối với sự phát triển noãn nang (Oocyst) cầu trùng phân lập từ gà bệnh Ứng dụng trong phòng trị bệnh cầu trùng trên đàn gà chăn nuôi theo hướng công nghiệp”

Nghiên cứu này nhằm xác định tỷ lệ nhiễm, cường độ nhiễm, các loài cầu trùng gây bệnh, đặc điểm lâm sàng, bệnh tích của gà mắc bệnh cầu trùng và tiến hành nuôi cấy trong phòng thí nghiệm với các nồng độ tỏi khác nhau Kết quả của nghiên cứu sẽ là cơ sở giúp điều trị, cũng như phòng trừ bệnh cầu trùng

có hiệu quả trong chăn nuôi

2 Mục đích của đề tài

Thực hiện đề tài này, chúng tôi hy vọng sẽ đạt được mục đích sau: theo dõi ảnh hưởng của tỏivới các nồng độ khác nhau đến sự phát triển và nhân lên của(Oocyst) cầu trùng Từ đó tìm nồng độ thích hợp mà có ảnh hưởng lớn với

đến sự phát triển của noãn nang(Oocyst) cầu trùng ở giai đoạn sinh sản vô tính(ngoài cơ thể gà) Ứng dụng tỏi ở nồng độ tốt nhất để đều trị bệnh cầu trùng trên đàn gà hướng thịt giống Ross 308 ở một số trang trại của công ty cổ phần chăn nuôi C.P Việt Nam

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài

3.1 Ý nghĩa khoa học

Sự thành công của đề tài sẽ góp phần tạo thêm một pháp đồ mới có hiệu quả trong điều trị cầu trùng trên gà, giúp giảm thiệt hại cũng như chi phí về thuốc trong phòng và điều trị về bệnh cầu trùng Đồng thời còn mở ra hướng mới về việc dùng các chế phẩm có nguồn gốc thiên nhiên trong phòng trị một số bệnh thường gặp trên đàn gà nói riêng và cho mọi loại vật nuôi nói chung Nếu

đề tài thành công còn góp phần làm phong phú thêm các biện pháp chọn thuốc trong phòng trị bệnh, hạn chế dùng kháng sinh tổng hợp, giảm bớt nguy cơ gây hại cho con người và xã hội

3.2 Ý nghĩa thực tiễn

Xuất phát từ nhu cầu sử dụng nguồn thực phẩm sạch, an toàn vệ sinh thực phẩm của người tiêu dùng trong xã hội ngày càng cao Sản xuất thịt gia cầm trong đó có thịt gà từ những trang trại gà ít hay không sử dụng kháng sinh đang

là mục tiêu phấn đấu của các nhà chăn nuôi nước ta(gà thảo dược) Sử dụng thảo dược là một trong những giải pháp chăn nuôi gia cầm theo hướng an toàn sinh học rất quan trọng và mang lại hiểu quả cao, giúp cho ngành chăn nuôi phát triển bền vững Đồng thời đây cũng là giải pháp cho phép hạn chế được tối đa sự tồn dư kháng sinh trong sản phẩm Nếu sử dụng tỏi trong chăn nuôi đã góp phần vào việc làm tăng hiệu quả kinh tế cho người chăn nuôi thông qua việc nâng cao

tỷ lệ nuôi sống, giảm tỷ lệ chết và kích thích tăng trọng

Từ các kết quả nghiên cứu của đề tài sẽ xây dựng được quy trình bổ sung tỏi và các thảo dược chứa kháng sinh thực vật khác trong chăn nuôi gia cầm nói riêng, cũng như chăn nuôi các động vật khác Kết quả của đề tài sẽ giúp chúng ta tạo ra được sản phẩm sạch, không tồn dư kháng sinh và tránh được ô nhiễm môi trường

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

Eimer trước đó và đặt lấy tên là Eimeria để đặt tên cho giống cầu trùng rất phổ

biến lúc giờ Sau đó hàng trăm loài cầu trùng đã được tìm thấy trên nhiều loại gia súc, gia cầm và động vật hoang dã, kể cả người

- Năm 1881 Scheider đã tìm thấy một loài cầu trùng kí sinh ở manh tràng

gà con, nhưng ông chưa xác định đó là loại gì, cho đến năm 1891 thì Raillet và

Lucet đã mô tả loại này và sau đó Fanham 1909 đã xác định đó chính là Eimeria

Tenella

Khoảng 40 năm sau đó (1909- 1942) sự công bố lần lượt của các nhà nghiên cứu

về một loạt các loài Eimeria, trong đó có các loài kí sinh về gà như sau:

Eimeria maxima Tyzzer, năm 1929

Eimeria acervulia Tyzzer, năm 1929

Eimeria mitis Tyzzer, năm 1929

Eimeria necartrix Johnson, năm 1930

Eimeria praecox Johnson, năm 1930

Eimeria hagani Leviner, năm 1938

Eimeria brunetti Leviner, năm 1942

Gần đây là Eimeria mivati, Edgar và Seibold năm 1964

Sau này, một số tác giả khác ở Trung Âu và Liên Xô(cũ) như Yakimoff, Kotlans

đã đưa ra một số công bố ba loài: Eimeria beachi, Eimeria tyzzeri,Eimeria

johnsoni

Cũng như vậy tại Ấn Độ, Ray(1945) đã tìm thấy một loại cầu trùng ở một

ổ dịch tự nhiên trên gà con 4-6 tuần tuổi tại bang Mukteswas, sau khi so sánh noãn nang này với các loại khác, ông cho rằng đây là một giống mới không

thuộc Eimeria nên đặt tên là Nenyolella Gallinae, nhưng kết quả này chưa được

giới khoa học công nhận

Năm 1934 Leholiskek cho rằng giống Isospora cũng có thể kí sinh ở gà và sau khi mô tả chi tiết ông đặt tên Isospora Gallinae Tiếp những năm sau đó tại

một số nước Trung Á như Turkmenistan, Azecbaizan, các tác giả khác như Glabazin, Mixsov, Aliva, cũng công bố tìm thấy các loại cầu trùng trên gà,

nhưng các tác giả khác lại cho rằng đó chính là Isospova Lacasei kí sinh trong

loài chim sẻ mà lẫn trong phân gà mà thôi(chứ không phải kí sinh trên gà)

Ở các nước kinh tế phát triển, nghành chăn nuôi gà cũng có điều kiện hơn

để xuất hiện những trang trại lớn, tập trung cao hơn, điều này tạo điều kiện để cầu trùng và bệnh cầu trùng phát triển, xuất hiện nhiều hơn và gây tác hại rõ rệt Ngày nay người ta không chỉ tiếp tục quan tâm đến các loài mới mà đi vào khía cạnh sâu hơn, xa hơn như các vấn đề sinh học phân tử, miễn dịch cầu trùng, cũng như tìm các loại hóa dược, chế tạo vacxin, và hoàn thiện các phương diện nghiên cứu, nhằm mục đích tiếp tục khai phá những bí mật của các loại cầu trùng và bệnh cầu trùng, nhằm mục đích khống chế nó có hiệu quả

Các kết quả nghiên cứu cho thấy cầu trùng trên gà thực sự là một điều đáng

lo ngại vì chúng lây lan rất nhanh tỷ lệ mắc bệnh và tỷ lệ chết rất cao Roncalli(1967) đã báo động là “ Bệnh cầu trùng đã lây lan khắp nơi trên thế giới

và gây thiệt hại nặng nề cho nghành chăn nuôi gà, cũng như chất lượng sản phẩm cho con người xấu đi”

Những năm gần đây Eimeria và bệnh cầu trùng gà đã được nhiều nhà khoa học

nghiên cứu công phu kể cả lý thuyết đến thực nghiệm

Theo Orlow(1975), bệnh cầu trùng chủ yếu ở gia cầm non E.tenella là loài gây bệnh mạnh nhất, phổ biến nhất là ở gà một tháng tuổi E.maxima gây

bệnh cho gà 1,5-2 tháng tuổi Gia cầm non mắc bệnh, gia cầm lớn là vật mang trùng

W.W.Braunius (Hà Lan, 1983) đã có nhiều nghiên cứu về cầu trùng bao gồm

cả về loài(phân loại), về dịch tễ học, về bệnh lý học, lâm sàng và cách phòng ngừa

Jacque Euzeby (Pháp) cũng là người có công trong nghiên cứu về

Eimeria và bệnh cầu trùng gà, các công trình của ông từ gần ba thập niên(1965-1990) đã để lại cho chúng ta những tài liệu khoa học vô cùng quý giá về bệnh cầu trùng gà

Sau những năm 1990 các nhà khoa học như J.Eckert (Insitute of Parasitology Universty of Rurick), R.Braw(Insitute of General Microbilogy, Universty of Berne), M.W Shirley(Insitute of Animal heath, Compton Laboratory, Neebury) và

P Couder (Inra stasion de Pathologie Aviaire et de parasittologie Cetre de Tours, Nouzilly, 1995) gồm những hướng dẫn nghiên cứu về cầu trùng và bệnh cầu trùng

Có thể nói đây là những hướng dẫn bổ ích nhất cho những người nghiên cứu về bệnh cầu trùng

Mới đây nhất là tác giả Archie Hunter(2000), sang công tác tại Việt Nam theo chương trình dự án “Tăng cường công tác Thú y ở Việt Nam” Trong cuốn sổ tay dịch bệnh động vật tác giả cho biết: Để phòng chống bệnh cầu trùng gà tốt nhất

là gà con không được tiếp xúc với số lượng noãn nang lớn trong môi trường nuôi Điều này có thể thực hiện được nhờ vệ sinh tốt, ngăn ngừa sự tích tụ phân trong chuồng, giữ cho chuồng nuôi luôn luôn khô thoáng

Ngày nay, tuy công nghiệp hóa dược và vacxin đang có những biến đổi rất lớn, những thành tụy về khoa học về các mặt này đang được ứng dụng vào sản xuất, những loại thuốc cầu trùng đã ra đời và đã góp phần hạn chế đáng kể tác hại của bệnh cầu trùng gà Singh.U.M(1996-1997) đã nghiên cứu và chế tạo

vacxin cầu trùng mới bao gồm E Maxima, E Acervulina, E Necatrix, E

cứu các loại vacxin cầu trùng mới với các loài Eimeria.spp tại chỗ có hiệu quả

hơn Những ứng dụng của các thành tựu khoa học phân tử cũng đang được

nghiên cứu để hi vọng tìm kiếm các loại vacxin tổ hợp trong tương lai Ngay cả

những nghiên cứu cơ bản người ta cũng đang trở lại nhiều vấn đề để trả lời

những câu hỏi mà khoa học đến nay vẫn chưa làm được trọn vẹn như xác định

đặc điểm cơ bản nhất của E Necatrix(Bhurtel.R, 1996), Có rất nhiều những

tác giả trên khắp thế giới đang quan tâm đến bênh cầu trùng hiện tại và mầm

bệnh Eimeria trong công nghệ chăn nuôi hiện nay

1.1.2 Tình hình nghiên cứu trong nước

Các dự đoán của các nhà nghiên cứu nói rằng bệnh cầu trùng đã có từ lâu

trong các chăn nuôi gà gia đình Theo Đỗ Cao Huệ(1995): “ Từ thời Pháp thuộc

người ta đã thấy những triệu chứng gà bệnh đi ỉa ra máu và gà con chết, khi mổ

ra thì thấy hai manh tràng sưng to tương tự triệu chứng và bệnh tích của bệnh

cầu trùng của gà công nghiệp hiện nay”

- Theo Dương Công Thuận (1974-1976) với việc phân tích từ hàng ngàn

mẫu phân gà đã kết luận: Ở phía bắc Việt nam gà công nghiệp nhiễm 5 loại cầu

trùng đó là E Tenella, E Necatrix, E Maxima, E Mitis và E Brunetti

- Lê Văn Năm(1999), cho biết nguyên tắc phòng bệnh cầu trùng bằng

thuốc phải dùng từ 5 ngày tuổi đến 60 ngày tuổi đối với gà thịt, sau đó cứ một

tháng phải tiếp tục dùng thuốc 3-4 ngày, kể cả thời gian gà đẻ

- Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Quang Tuyên(1997) và nhiều tác giả

khẳng định: Bệnh cầu trùng thường gây bệnh nặng ở gà con, gà lớn thường

mang căn bệnh và là nguồn gieo truyền căn bệnh làm ô nhiễm môi trường nuôi

Vì vậy biện pháp quan trọng là phòng bệnh cho gà con không bị nhiễm cầu

trùng

- Phan Lục, Bạch Mạch Điều (1999), tiến hành nghiên cứu cầu trùng gia

cầm bằng phương pháp xét nghiệm phân tìm noãn nang ở gà Tam Hoàng, gà Ai

Cập, vịt, ngan, ngỗng, chim cút, đà điểu, chim bồ câu Pháp từ 1-8 tuần tuổi được

nuôi tập trung ở Trung tâm nghiên cứu gia cầm Thuỵ Phương(Viện chăn nuôi)

Ở mỗi loại tuổi, gia cầm đều được xét nghiệm trên 240 con(phân phối đều ở mỗi lứa tuổi là 30 con), kết quả thu được như sau:

+ Các loại gia cầm trên đều bị nhiễm cầu trùng từ 8-56 ngày tuổi Mức độ nhiễm bệnh tăng dần từ 8 đến 28 ngày tuổi; ở tuần thứ 4(22-28 ngày tuổi) gà Tam Hoàng nhiễm 100%; gà Ai Cập nhiễm 93,3% và gà AA nhiễm 90%; chim

bồ câu nhiễm 100%

- Hoàng Thạch và cộng sự(1999) cho thấy: Gà các lứa tuổi đều có thể bị nhiễm cầu trùng, tuy tác hại của bệnh có khác nhau tuỳ theo chủng loại cầu trùng và lứa tuổi gà mắc bệnh Thường gà con bị nhiễm nặng hơn gà lớn

1.2 Bệnh cầu trùng gà

1.2.1 Khái niệm bệnh cầu trùng gà

Theo Lê Văn Năm(2006), bệnh cầu trùng là do một loại bệnh ký sinh trùng truyền nhiễm rất nguy hiểm thường gặp ở gà đặc biệt là gà nuôi tập trung theo lối sản xuất hàng hóa

Bệnh cầu trùng do một nhóm nguyên sinh đơn bào ngành Protozoa, lớp

Sporozoa, bộ Coccidae, 2 giống Eimeria và Isospora Bệnh có thể gây chết

nhiều gà, tỷ lệ chết cao, đặc biệt là ở gà con Khi cầu trùng mới theo phân ra ngoài gọi là kén hay noãn nang (Oocyst) là những bào tử trùng hình bầu dục, hình trứng hay hình cầu Có 3 lớp vỏ: Lớp ngoài cùng rất mỏng, bên trong có chứa nguyên sinh chất lổn nhổn thành hạt, giữa nguyên sinh chất có chứa một nhân tương đối to Khi gặp điều kiện nhiệt độ, độ ẩm thích hợp thì nhân và nguyên sinh chất bắt đầu phân chia

Cầu trùng thuộc giống Eimeria thì nhân và nguyên sinh chất sẽ hình

thành 4 bào tử, mỗi bào tử hình thành 2 bào tử con Bào tử con có hình lê, chính bào tử con này sẽ xâm nhập vào niêm mạc ruột, tổ chức gan và gây ra tổn thương bệnh lý

Cầu trùng giống Isospora thì nhân và nguyên sinh chất phân chia thành 2

bào tử, mỗi bào tử phân chia thành 4 bào tử con và cũng xâm nhập vào niêm mạc ruột

Gà mọi lứa tuổi đều bị nhiễm cầu trùng, nhưng ở mỗi lứa tuổi mức độ nhiễm khác nhau Gà con bị nhiễm nặng và chết nhiều hơn ở gà lớn, gà trưởng thành chủ yếu là vật mang trùng

1.2.2 Tác nhân gây bệnh cầu trùng gà

Theo Phan Lục 1996, cho biết các nghiên cứu của nhiều nhà khoa học đã chỉ ra 9 tác nhân gây bệnh cầu trùng gia cầm với những đặc điểm sinh học của chúng

+ Eimeria tenella thường ký sinh ở manh tràng Đây là loài gây bệnh mạnh nhất

ở gà con

+ Eimeria maxima chủ yếu ký sinh ở đoạn giữa ruột non

+ Eimeria mitis thường ký sinh ở đầu ruột non

+ Eimeria acervulina có hình dạng Oocyst gần giống E maxima nhưng kích

thước nhỏ hơn thường ký sinh ở phần trước ruột non

+ Eimeria necatric là loài có độc lực cao song mức độ phổ biến và khả năng gây bệnh thấp hơn loài E tenella, vị trí gây bệnh ở ruột non và manh tràng

+ Eimeria brunette ký sinh ở ruột già

+ Eimeria hagani thường ký sinh ở phần đầu ruột non

+ Eimeria paraecox ký sinh ở đầu ruột non

+ Eimeria mivatia thường gây bệnh ở bề mặt niêm mạc ruột

Theo Hoàng Thạch(1999), đã tìm thấy sự có mặt của 8 loài cầu trùng gây bệnh trên gà nuôi tại Miền Nam nước ta So với 9 loài cầu trùng tìm thấy của các

tác giả trên thế giới thì ở Việt Nam chưa thấy nói tới Eimeria paraecox Việc

phân loại cầu trùng gà cũng được các tác giả: Dương Công Thuận(1995), Phan Lục, Bạch Mạch Điều(1999) nghiên cứu và cho biết có 6 loài cầu trùng gà đã

được phát hiện là: Eimeria tenella, Eimeria necatric, Eimeria maxima, Eimeria

mitis, Eimeria brunette, Eimeria acervulina

1.2.3 Vòng đời của cầu trùng(chu kỳ sinh học)

Vòng đời phát triển của cầu trùng được tính từ khi gia cầm ăn phải noãn nang gây bệnh, qua quá trình sinh trưởng, phát triển trong và ngoài cơ thể cho đến khi chúng tạo ra các noãn nang có sức gây bệnh

Vòng đời của cầu trùng gồm 3 giai đoạn:

+ Giai đoạn 1: Sinh sản vô tính

Noãn nang sau khi cùng thức ăn vào vật chủ, xâm nhập vào tế bào biểu mô(lúc này được gọi là Trophozoit) làm tế bào bị phình ra, nhân bị kéo dài ra Chỉ sau vài giờ nhân của Trophozoit phân chia và trở thành Schizont thế hệ I(thể phân lập)

Schizont thế hệ I trưởng thành rất nhanh, bắt đầu hình thành và chứa đầy các phân đoạn(Merozoit) thế hệ I Lúc này chúng làm tế bào bị ký sinh trương to rồi vỡ(số lượng Merozoit trong một Schizont thay đổi rất lớn tuỳ loài cầu trùng:

Từ 8 đến 16, có khi tới 120.000)

Khi đã thành thục, các Merozoit thoát khỏi Schizont, một số xâm nhập trở lại tế bào biểu mô thích hợp để tiếp tục sinh sản vô tính, một số khác chuyển sang kiểu sinh sản hữu tính

+ Giai đoạn 2: Sinh sản hữu tính

Giao tử đực được gọi là Microgamet, có kích thước nhỏ hơn giao tử cái Giao tử cái được gọi là Macrogamet có nhân rất to, có lỗ noãn Giao tử đực và giao tử cái kết hợp với nhau tạo thành hợp tử(Zygota) Giai đoạn này cũng thực hiện trong tế bào biểu mô của vật chủ

+ Giai đoạn 3: Sinh sản bào tử

Sau khi hợp tử Zygota hình thành tiếp tục phát triển thành noãn nang Oocyst Oocyst sau khi được thải ra ngoài nếu gặp điều kiện nhiệt độ, độ ẩm thích hợp sẽ sinh bào tử gọi là Oocyst gây nhiễm Quá trình này diễn ra như sau: Khi Oocyst theo phân ra ngoài thì đã chiếm đầy Zygota trong lớp vỏ bọc bên ngoài Khi gặp điều kiện nhiệt độ, độ ẩm thích hợp thì nguyên sinh chất cũng bắt đầu phân chia cho ra Sporozoit

Một số Sporoplast hơi dài ra và quanh nó có một lớp vỏ khúc xạ tạo thành một Sporocyst có một khoảng ở phía đầu nhọn hơn gọi là thể Stieda, nguyên sinh chất trong Sporocyst phân chia ra và kéo dài thành 2 Sporozoit

1.2.4 Sự nhiễm bệnh cầu trùng

Bệnh cầu trùng là một bệnh phổ biến, do sức đề kháng cao đối với tác động điều kiện khí hậu không thuận lợi, các loại thuốc sát trùng, khả năng tái sinh sản lại nhanh

Đường nhiễm bệnh là do gà nuốt phải noãn nang có sức gây nhiễm Noãn nang cầu trùng lẫn vào thức ăn, nước uống, đất, nền chuồng, dụng cụ chăn nuôi trở thành nguồn lây nhiễm bệnh Các loài chim, gà, gia súc, động vật gặm nhấm, côn trùng, người… đều có thể là nguồn gieo rắc căn bệnh

Thời gian nhiễm bệnh cầu trùng được phân chia thành 2 thời kỳ:

+ Thời kỳ tiền phát: Kéo dài từ khi gà nhiễm phải noãn nang cầu trùng cho đến khi xuất hiện nang trứng trong phân

+ Thời kỳ phát bệnh: Từ khi xuất hiện nang trứng trong phân đến khi nang trứng biến mất hoàn toàn khỏi cơ thể

Bệnh cầu trùng gà thường tiến triển âm ỉ làm con vật còi cọc chậm lớn, sức đề kháng giảm, dễ kế phát các bệnh khác Khi gặp điều kiện thuận lợi cầu trùng phát triển thành ổ dịch lớn, tỷ lệ chết cao, đặc biệt ở gà con tỷ lệ chết có thể lên tới 100% Ngoài ra bệnh còn làm giảm tốc độ sinh trưởng 12%-30%, gà

tế bào biểu bì, lớp dưới niêm mạc, các mạch quản, thần kinh bị huỷ hoại

Do niêm mạc bị tổn thương nên nhiều đoạn ruột không tham gia vào quá trình tiêu hoá làm cho con vật bị thiếu dinh dưỡng gây rối loạn tiêu hoá, dẫn tới

ngưng đọng các độc tố, phù nề các cơ quan và mô bào Sự phá huỷ các tế bào ruột làm cho viêm ruột gây rối loạn chức năng hấp thu và vận động của ruột gây

ra ỉa chảy, quá trình viêm tăng sinh làm dịch rỉ tiết ra nhiều gây khó khăn hấp thu chất dinh dưỡng làm mất sự cân bằng nước tiểu trong cơ thể gà

Cầu trùng sinh ra độc tố làm gà bị trúng độc, thể hiện ở những rối loạn về thần kinh: Sã cánh, lờ đờ, kém nhanh nhẹn Cầu trùng chiếm đoạt dinh dưỡng là dịch tổ chức tế bào biểu mô ruột làm cho gà thiếu dinh dưỡng Nếu tình trạng này kéo dài làm cho gà ốm và chết

1.2.6 Sự miễn dịch của gà đối với bệnh cầu trùng

Tất cả các giống gà đều mắc bệnh cầu trùng Gà từ 20 ngày tuổi tới 2 tháng tuổi bị bệnh nặng nhất Sau khi khỏi bệnh gà sẽ có miễn dịch với loài cầu trùng chúng đã nhiễm phải

Thời gian miễn dịch trong bệnh cầu trùng là tương đối dài và phụ thuộc vào nhiều yếu tố, đặc biệt là phương pháp gây miễn dịch Nếu tiêm cho gà con một liều lớn nang trứng cầu trùng thì tới ngày thứ 14 chúng có sức đề kháng với bệnh và tới ngày thứ 42 thì sức đề kháng đó giảm đi một ít Sau khi tiêm cho gà con liều 3 nang trứng, mỗi liều cách nhau một tuần thì chúng có đủ sức đề kháng

và có thể tự bảo vệ khi tiêm cho chúng một liều trên liều chết Hơn nữa, gà còn được bảo vệ không bị tái nhiễm

1.2.7 Triệu chứng

Theo Phan Lục 1996, Lê văn Năm 2004 Bệnh cầu trùng ở gà biểu hiện bằng triệu chứng đặc trưng nhất là ỉa chảy, có máu, có dịch nhầy, ủ rũ, mệt mỏi, lông xơ xác, thần kinh không vững, gà thường tụ lại thành nhóm Mức độ nghiêm trọng của triệu chứng phụ thuộc vào mức độ nhiễm từ môi trường và

loài Eimeria nhiễm, trạng thái sức khoẻ cơ thể gà

Thời kỳ mang bệnh 4-5 ngày Bệnh tiến triển có thể cấp tính, mãn tính hay không có triệu chứng điển hình

* Thể cấp tính: Thường thấy ở gà con Lúc đầu gà có biểu hiện lờ đờ, kém nhanh nhẹn, lông dựng đứng, ít ăn Do hàng loạt tế bào biểu mô ruột bị phá huỷ,

cơ thể bị trúng độc nặng thêm, mất cân bằng, cánh gà bị tê liệt, uống nhiều nước, diều có nhiều dịch thể, bỏ ăn hoàn toàn Thiếu máu, niêm mạc và mào nhợt nhạt,

gà gầy dần, phân loãng như nước có lẫn máu Giai đoạn cuối gà bị tê liệt sau đó

bị chết Tỷ lệ gà chết nhiều hay ít phụ thuộc vào điều kiện chăm sóc quản lý, thức ăn, sức đề kháng của con vật đối với cầu trùng, cường độ nhiễm cầu trùng…

* Thể mãn tính: Thường thấy ở gà từ 4-6 tháng tuổi hoặc gà trưởng thành Triệu chứng lâm sàng về cơ bản giống thể cấp tính nhưng không rõ và không điển hình như trên Bệnh kéo dài từ vài tuần đến vài tháng Gà gầy còi dần, chân và cánh bị tê liệt nhẹ, tỷ lệ đẻ giảm, nhưng rất ít gà bị chết

* Thể không có triệu chứng lâm sàng: Đây là những thể mang trùng Những gà

bị bệnh bề ngoài không có biểu hiện bệnh vì gà ăn uống đi lại bình thường, thỉnh thoảng mới thấy gà bị ỉa chảy và tỷ lệ đẻ trứng bị giảm sút

1.2.8 Bệnh tích

Theo Nguyễn Kim Lan và Nguyễn Quang Tuyên 1997, khi gà bị bệnh cầu trùng thì xác chết gầy xơ xác, niêm mạc và mào nhợt nhạt, xung quanh lỗ huyệt dính phân Bệnh tích cơ bản là ở ruột, các cơ quan khác bệnh tích không rõ Diều và dạ dày tuyến trống rỗng, màng niêm mạc phủ niêm dịch Trong dạ dày

cơ có một ít thức ăn, tá tràng viêm chứa đầy chất niêm dịch hơi vàng, vách ruột dày lên rõ rệt, lớp nhung mao nằm bẹp, một số nơi thấy rõ những điểm xuất huyết

- E.tenella gây bệnh tích chủ yếu ở manh tràng Manh tràng viêm xuất huyết

phình to, trong đó có những cục máu nhỏ, xốp, vách manh tràng mỏng đi Màng niêm mạc bị huỷ hoại, phủ đầy những vết loét từ ngoài có thể nhìn thấy rõ Trong các giai đoạn cuối của bệnh, niêm mạc ruột hơi trắng, dày và có các cục máu

- E.necatric: Trên màng niêm mạc phần giữa ruột non thấy những cục nhỏ màu

trắng xám nằm sâu trong vách ruột nên có thể nhìn thấy rõ từ phía ngoài Ruột

sưng to, thành ruột dày lên, chất chứa ở ruột màu hồng nhạt hoặc màu xám, thỉnh thoảng có lẫn cục máu

- E.maxima: Gây viêm phần giữa ruột non, màng niêm mạc bị huỷ hoại xuất

huyết Viêm ruột xuất huyết với thành ruột dày, và xuất huyết lấm tấm Ruột non chứa đầy chất nhầy màu nâu hoặc hồng nhạt

- E.acervulina: Tá tràng dày, sưng phù, sung huyết đỏ Trên bề mặt tá tràng hay

phần đầu ruột non, có những tổn thương lớn màu trắng xám

- E.hagani: Bệnh tích thấy ở tá tràng và phần trước ruột non Trên thành ruột có

những điểm xuất huyết to bằng đầu kim hoặc có những mảng xuất huyết tròn màu đỏ

+Mổ khám bệnh tích: Với những gà chết ta tiến hành mổ khám, tuỳ vào chủng của căn nguyên và vị trí ký sinh của chúng mà khi mổ khám chúng ta thấy rõ những biến đổi ở niêm mạc và thành ruột ở những vùng đường ruột khác nhau Quan sát thấy ruột phù phình to chứa nhiều hơi, viêm xuất huyết Phân lẫn máu, các tế bào niêm mạc bị hoại tử, thành ruột sưng dày lên, có rất nhiều nốt xuất huyết hoặc từng dải xuất huyết dọc theo đường ruột Đôi khi thấy trong ruột

có dịch nhày fibrin màu vàng nâu

+ Xét nghiệm phân: Phương pháp này nhằm mục đích khẳng định bệnh và phân loại cầu trùng gà đã bị nhiễm Phương pháp phổ biến nhất để xét nghiệm

phân là phương pháp của Fulleborn và Darling

1.2.10 Phòng, trị bệnh cầu trùng

a, Một số thuốc phòng trị cầu trùng cơ bản

Theo Lê văn Năm(2003), cho đến nay có nhiều loại thuốc có tác dụng ức chế và tiêu diệt cầu trùng, nhưng tập trung chủ yếu vẫn nằm trong 6 nhóm thuốc dưới đây:

Nhóm Sulfanilamit: Bao gồm Sulfaguanidin, Sulfathiazon, Sulfarazin, Sulfaquynoxalin, Sulfapyrasol và Sulfachlorpyrazin…

Nhóm Nitrofuran gồm có: Furazolidon, Furaltadon, Nitrovinla,…

Nhóm Pyrimidin: Amprolium, Trimethoprin, Diaveridin…

Nhóm Antibiotis: Monezin, Salinomycin, Lymycin…

Nhóm Pyridin: Clopydol(Rigecoccin)

Toltrazuril là hoạt dược mới, tác dụng trị cầu trùng rất hiệu quả

b Phòng bệnh

* Vệ sinh chăn nuôi thú y

Theo Lê Hồng Mận và Xuân Giao(2000)

- Có điều kiện nên nuôi gà trên sàn để gà không ăn phải phân có chứa mầm bệnh

- Giữ nền chuồng khô ráo, năng dọn phân tránh để cầu trùng có điều kiện phát triển và lây nhiễm

Theo Lê Văn Năm 2006, khi thấy trong đàn xuất hiện các bãi phân tiêu chảy có máu màu socola cần tiến hành các biện pháp sau:

- Phải cách ly những gà bệnh và gà khoẻ Nuôi riêng gà con với gà lớn

- Tiến hành ủ phân, làm vệ sinh tiêu độc dụng cụ, chuồng trại để tiêu diệt noãn nang

Theo Nguyễn Đức Lưu và Nguyễn Hữu Vũ (2003)

- Đảm bảo thức ăn và nước uống sạch sẽ cho gà, không ô nhiễm cầu trùng

- Chuồng trại và nơi chăn thả phải giữ sạch sẽ, khô ráo, thoáng mát mùa

hè, kín ấm mùa đông, có định kỳ sử dụng hoá chất diệt mầm bệnh (Axit Phenic 2%, Hydroxyt Natrium 2%)

* Phòng bệnh bằng vacxin

Theo Lê Văn Năm và cộng sự 1999 và Lê Văn Năm(2006) Do tính chất nguy hiểm mà bệnh cầu trùng gây ra nên từ rất lâu đã có nhiều nghiên cứu của nhiều nhà khoa học trên phạm vi toàn thế giới nhằm giải quyết bệnh cầu trùng bằng vacxin Kết quả các nghiên cứu đã giúp cho một số nước chế được vacxin cầu trùng như: Avicoc, Coccivac, B,D,T, Anticoc… của Hà Lan, Pháp, Mỹ, Thái Lan, Bungari… Phương pháp sử dụng vacxin là cho uống qua đường miệng lúc gà ở 7-8 ngày tuổi và có thể lặp lại khi gà được 15-18 ngày tuổi

Bảng 1.1 Các loại Vacxin Oocyst cầu trùng đã được sản xuất

Tên

Ngày chủng (tuổi gà)

Nơi và năm đăng ký đầu tiên

Coccivac Sterwin lab (USA)

Hỗn hợp của các loài cầu trùng cường độc

Eimeria acervulina Eimeria mivatia Eimeria tenella Eimeria maxima

Pha nước uống 4- 14

1952 (Mỹ)

Immucox Vetech lab Canada

Hỗn hợp của các loài cầu trùng cường độc

Eimeria acervulina Eimeria maxima Eimeria necatric

Pha nước uống

4- 7 (Canada) 1985

VAC.M

Elanco product Co (USA)

Oocyst cường độc Eimeria

maxima

Pha nước uống

1989 (USA)

E praecox

Pha nước uống 5- 9

1992 (Anh)

Livacox

Biopharm, Researh Institute

Hồn hợp Oocyst cường độc:

E.acervalina E.maxima E.tenella

Pha nước uống

7- 10

1992 (Cộng hoà séc)

1.3 Một số hiểu biết về cây tỏi

1.3.1 Đặc điểm của cây và sự phân bố

Tên khoa học: Allium sativum L

Tên khác: Tỏi ta, đại toán(Trung Quốc), hom kía(Thái), sluôn(Tày)

Tên nước ngoài: Garlic, sown leek (Anh); ail commun(Pháp)

Họ: Hành(Alliaceae)

Có rất nhiều loại tỏi khác nhau như: tỏi voi, tỏi Trung Quốc, tỏi Pháp, tỏi gấu, tỏi ngọc…Nhưng chỉ có củ tỏi ta là được ưa chuộng và được nhiều nước trên thế giới sử dụng làm thuốc Vì tỏi ta củ nhỏ, thơm, trong thành phần hóa học có nhiều nhóm hoạt chất có tác dụng sinh học và công dụng phòng trị bệnh tốt

Tỏi là cây nhỏ mọc từ thân củ lên, cao khoảng 20 - 40 cm Thân giả mang nhiều lá dài, hẹp Giữa củ mọc lên cuống mang một số hoa ở đỉnh, bọc trong một mô mỏng Hoa tỏi màu trắng hay phớt hồng

Tỏi có nguồn gốc ở Siberi, hiện nay nó đã có mặt ở khắp các nước thuộc khu vực châu Á, châu Âu Ở nước ta, tỏi cũng được trồng khắp mọi miền nhưng tập trung nhiều ở huyện Kim Môn - Hải Dương, Gia Lâm - Hà Nội, thời gian trồng ở nước ta vào tháng 10 - 11 dương lịch trên nền đất tơi xốp, nhiều mùn, thu hoạch vào tháng

1 năm sau, phơi khô, treo mái hiên hay gác lên nóc nhà để dùng dần

Hình 1.1 Một số hình ảnh về tỏi

1.3.2 Ứng dụng của tỏi trong cuộc sống

Tỏi được cả thế giới coi như là thực phẩm có lợi cho sức khỏe Một amino acid chứa lưu huỳnh được phân lập từ tỏi và đặt tên là alliin(S-allyl-Lcysteine sulfoxide) Bản thân alliin không có hoạt tính kháng khuẩn và tương đối bền Trong các điều kiện phản ứng khác nhau, alliin dễ dàng bị chuyển hoá để tạo ra các sản phẩm Một trong những phản ứng chuyển hoá cơ bản và quan trọng nhất

là sự tạo thành allicin(Diallyl thiosulfinate) dưới tác dụng của enzym allinase Allicin là hoạt chất mạnh nhất và quan trọng nhất của tỏi Những năm gần đây,

đã có rất nhiều công trình nghiên cứu, nhiều đề tài đã nghiên cứu và nhiều sách, giáo trình đã viết về tác dụng tỏi nghiên cứu kĩ tính chất hóa học, thành phần của tỏi cho nên chúng tôi xin phép kế thừa kết quả từ các nghiên cứu đó và sẽ không

đi sâu vào tính chất của tỏi mà sẽ đưa ra những sản phẩm đã bào chế thành công như Dầu tỏi GARLIC OIL của Tuệ Linh, Viên tỏi AUFLULYSON của Học viện quân y, , những công dụng, bài thuốc hay để chữa những bệnh trong nhân

y và thú y

Hình 1.2 Một số chế phẩm của tỏi

Trong nhân y:

- Tác dụng phòng chống ung thư:

Tỏi có tác dụng chống lại tiến trình phát triển khối u và ung thư của nhiều loại ung thư khác nhau như: ung thư dạ dày, ung thư cột sống ung thư phổi, ung thư vú và màng trong tử cung, ung thư kết tràng, ung thư thanh quản…

Các nhà nghiên cứu cho biết trước khi chế biến tỏi nên thái lát mỏng rồi

để ngoài không khí 15 phút để các chất kháng sinh có trong tỏi kết hợp với oxy ngoài không khí mới tạo ra chất chống ung thư hiệu quả

- Tác dụng giảm đường huyết:

Tỏi có tác dụng gia tăng sự phóng thích Insulin tự do trong máu, tăng cường chuyển hóa glucose trong gan - giảm lượng đường trong máu và trong nước tiểu

- Tác dụng tăng cường hệ miễn dịch:

Tỏi có tác dụng đáng kể lên hệ miễn dịch giúp bảo vệ cơ thể, phòng chống nhiễm trùng

- Tác dụng kháng sinh:

+ Kháng khuẩn: Hoạt chất trong củ tỏi có khả năng ức chế 70 loại vi khuẩn gram (-) và gram (+): Staphylococcus, Streptococcus, Salmonella, E.coli,

vi khuẩn gây bệnh tả, lỵ, vi khuẩn gây thối rữa…

+ Kháng virus: Tỏi có thể ngăn ngừa được một số bệnh gây ra do virus như cúm, cảm lạnh, kể cả virus gây lở mồm long móng bò, trâu

+ Diệt ký sinh trùng và nguyên sinh động vật: Nước ép tỏi có tác dụng chữa bệnh đường ruột, amip do Entamocba histolytica gây ra cũng bị diệt ngay ở

dịch ép tỏi nồng độ thấp Tỏi có tác dụng diệt giun sán như giun đũa, giun kim, giun móc và trứng của chúng

- Tác dụng với hệ tiêu hoá

+ Tỏi đặc biệt tốt để phòng tránh các rối loạn men tiêu hóa Kích thích tiết dịch vị, tiết mật Phòng tránh các nhiễm khuẩn dạ dày ruột

+ Tỏi có tác dụng trị các chứng rối loạn tiêu hóa do men hoặc do thần kinh gây khó tiêu, đầy hơi, trướng bụng, bí trung tiện - chống co thắt dạ dày ruột

- Tác dụng giải độc kim loại nặng: Tỏi có tác dụng bảo vệ cơ thể chống nhiễm độc các kim loại nặng Hợp chất sulfur của tỏi là chất giải độc chì mãn tính Sau khi ăn tỏi hàm lượng chì trong mô gan và mô cơ giảm hẳn; các triệu chứng nhiễm độc giảm đáng kể

- Tác dụng chống nhiễm độc chất phóng xạ: Tỏi làm tăng thải trừ các chất đồng vị phóng xạ và giảm sự tích đọng các chất đồng vị phóng xạ trong cơ thể

- Tác dụng giải độc nicotin mạn tính: Tỏi là một loại thuốc giải độc nicotin mạn tính cho người nghiện thuốc lá và công nhân sản xuất thuốc lá rất hữu hiệu; với những người này tỏi làm giảm cơn nguy cấp ở tim, động mạch và các rối loạn chức năng ruột của người bệnh

- Tác dụng chống các bệnh đường hô hấp: Tỏi được dùng làm thuốc trị lao khí quản, hoại thư phổi, ho gà, thuốc long đờm cho người lao phổi, tỏi trị viêm phế quản mãn tính, trị viêm họng

- Tác dụng tăng cường hấp thu thiamine: Tác dụng của tỏi trị bệnh thiếu vitamin C được khẳng định bởi viện Hàn Lâm Y học Pháp Ở thế kỷ thứ 19, người Nhật đã phát hiện tác dụng của tỏi trị bệnh tê phù do thiếu vitamin B1 sinh ra Allicin cùng với thiamine tạo thành một sản phẩm(allithiamine) cải thiện được tính hòa tan và hấp thu thiamine Allithiamine có cùng những tác dụng sinh lý như vitamin B1 bởi sản phẩm cộng này được máu làm giảm đi Fuijwara

và các cộng sự ở Nhật đã ghi nhận rằng sau khi cho dùng allithiaminne thì sự hấp thu vitamin này từ ống tiêu hóa cũng như sự thải nó trong nước tiểu cao hơn

đáng kể , thậm trí cả khi cho dùng các lượng thiamine tương đương Ăn tỏi đều đặn giữ một vai trò quan trọng trong hấp thu vitamin B1, điều này cần thiết đối với chức năng của hệ thần kinh và các mạch vành, một quá trình thường bị rối loạn ở những người lớn tuổi

- Tác dụng với những rối loạn chuyển hóa của một số cơ quan khác: Tỏi

là một phương thuốc dân gian phổ biến trong nhiều năm Tỏi đặc biệt có lợi trong phòng tránh các bệnh nhiễm khuẩn dạ dày – ruột, trong kích thích tiết dịch

vị, các enzyme tiêu hóa và mật Tỏi thường được dùng khi có những triệu chứng cho thấy chớm có xơ cứng động mạch như những rối loạn tuần hoàn ngoại vi, cao huyết áp, tăng lipid máu, tăng cholesterol huyết, các rối loạn về thời gian đông máu kết tụ tiểu cầu, các dạng tiểu đường nhẹ và giảm trí nhớ nói chung Điều trị dự phòng xơ cứng động mạch và nhồi máu

+ Tác dụng lên hoạt lực của enzyme: Long P L and associate(1979) đã thử nghiệm tác dụng của allicin tổng hợp tinh khiết lên tổng cộng 28 enzym khác nhau Ông đã chứng minh được rằng có sự ức chế mạnh đặc biệt trong các ezym có chứa một nhóm SH trong các trung tâm hoạt tính của chúng Đặc biệt là

ức chế mạnh succinate dehydro–genase, triosephosphate dehydrogenase và xanthine oxdise

+ Tác dụng trị rối loạn tiêu hóa và khó tiêu: Việc dùng tỏi để trị những rối loạn trong dạ dày – ruột đã được biết tới từ rất xa xưa Tác dụng kích thích lên niêm mạc dạ dày làm kích thích các tuyến, khiến tiết ra một lượng nhiều hơn hydro – chloric acid và các ezym tiêu hóa vào dịch vị Tỏi thuộc số các chất kích thích acid mạnh nhất trong trường hợp giảm toan hoặc giảm độ acid Sự tiết mật cũng được tăng cường và các thành tố của dầu tỏi được thải từ gan và giàu lên trong mật kết quả là có một tác dụng kích thích tiết mật(lợi mật) và động mật, cũng có thế có tác dụng chống co thắt của cơ trơn

- Các tác dụng khác:

+ Chữa các bệnh răng miệng: Tỏi có tác dụng tốt chữa viêm khoang miệng, các bệnh viêm chân răng, biến chứng sau khi nhổ răng

+ Chữa bệnh mắt: Nhũ tương tỏi có tác dụng giúp phát triển tế bào biểu

mô giác mạc bị tổn thương Chống xơ cứng động mạch mắt làm giảm nhãn áp

+ Chữa bỏng và lở loét ngoài da: Thuốc mỡ tỏi đông khô có tác dụng chữa bỏng và lở loét trên da rất tốt Có tác dụng diệt vi khuẩn mạnh Kích thích phát triển tế bào hạt, tăng trưởng biểu mô, làm vết thương mau lành

+ Chữa phong thấp và đau thần kinh: Tỏi có hoạt tính kháng viêm khá mạnh so với các thuốc kháng viêm có nguồn gốc thực vật khác Nó được dùng chữa đau thần kinh, phong thấp, đau khớp háng và hệ cơ, phần lưng dưới

Một số bài thuốc chữa bệnh được sử dụng:

- Chữa cảm cúm: Dùng tỏi sống hoặc tỏi ngâm với dấm trong vòng 30 -

40 ngày để ăn hàng ngày Ép lấy nước tỏi, pha loãng với nước sạch theo tỉ lệ 1:10 Cho thêm chút muối sạch Dùng nước này để nhỏ vào mũi từ 2 -3lần/ngày

- Chữa ho, viêm họng: Tỏi bóc sạch, để cả nhánh khoảng 10g Ngâm tỏi với dấm trong vòng 30 ngày Dùng nhánh tỏi đã ngâm thái lát mỏng rồi ngậm từ

10 - 15phút

- Thấp khớp, đau nhức xương, vôi hóa các khớp, mỏi xương khớp: Tỏi không bóc vỏ, chẻ đôi nhánh ngâm với rượu theo tỉ lệ 100g tỏi với 200ml nước Ngâm trong vòng 45 - 60 ngày hoặc có thể lâu hơn Chắt lấy nước, dùng nước này bôi lên chỗ đau rồi xoa bóp nhẹ nhàng

- Bệnh tiểu đường: Ăn ít nhất là 5g tỏi ngâm dấm mỗi ngày, trong vòng 1 tháng sẽ giúp làm giảm lượng đường trong máu một cách đáng kể

- Bệnh huyết áp cao: 10g tỏi ngâm dấm hoặc rượu mỗi ngày sẽ là phương thức giúp ổn định huyết áp hiệu quả

- Trị các bệnh ở đường tiêu hóa: Tỏi chữa các bệnh ợ chua, khó tiêu, viêm loét dạ dày - tá tràng

Dùng nước ép tỏi, bỏ bã pha loãng với nước ấm để uống hàng ngày Lấy 50g tỏi xay nhỏ, ngâm với 200ml rượu trắng trong vòng 15 ngày Dùng rượu và bã tỏi để uống, mỗi lần 1thìa cà phê, 2 - 3lần/ngày

Trong chăn nuôi, thú y:

Theo Bùi Thị Tho(2009), giáo trình Dược liệu học thú y có một số bài thuốc kinh nghiệm được ứng dụng trong thú y:

- Bệnh liệt dạ cỏ trâu bò: Dùng 3 - 4 củ tỏi giã hòa tan trong 300ml rượu lắc kỹ, gạn nước cho uống, bã gói trong vải mềm xoa bóp ngoài dạ cỏ

- Vết thương nhiễm trùng, thối loét da thịt của lợn ngoại: Rửa vết thương bằng nước chè đặc hay lá chát, rửa lại bằng nước tỏi 10 %, sau cùng dùng thuốc dạng mỡ gồm : ánh tỏi, dầu thực vật và than xoan lượng như nhau nghiền mịn, trộn đều và bôi vào vết loét

- Chữa lợn đóng dấu: Dùng 30 – 40g tỏi giã nhỏ hòa trong 100ml nước cất

2 lần lắc kỹ, chờ 2 -3h lọc qua gạc vô trùng, tiêm bắp liều 2 – 5ml/con lợn nặng

30 – 60 kg, tiêm 2 lần trong ngày

- Chữa giun chỉ vịt: Mổ bướu lấy hết giun, dùng ánh tỏi, than xoan và dầu thực vật lượng như nhau, nghiền mịn bôi vào vết mổ Trong thời gian điều trị, không cho vịt bơi đề phòng nhiễm trùng kế phát

- Xua đuổi và diệt côn trùng: Nhiều loại côn trùng như dán, muỗi rất sợ mùi tỏi Tỏi còn giết chết được các ấu trùng muỗi với liều lượng rất thấp 25ppm cho các chất chiết hoặc 2ppm cho dầu tỏi

Chương 2 ĐỐI TƯỢNG, ĐỊA ĐIỂM, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Đối tượng và vật liệu nghiên cứu

2.1.1 Đối tượng nghiên cứu

Thí nghiệm được tiến hành trên giống gà Ross 308 nuôi tại gia trại của anh Phùng Văn Lịch xã Phú Nghĩa – Chương Mỹ - Hà Nội

2.1.2 Vật liệu nghiên cứu

* Vật liệu nghiên cứu

- Mẫu phân tươi của gà mắc bệnh cầu trùng

- Mẫu bệnh phẩm của gà mắc bệnh cầu trùng

- Dung dịch muối bão hòa

- Dung dịch Bichromat kali 2,5%

- Tỏi trắng – Alium sativum L được trồng tại huyện Kinh Môn - Hải Dương, thu hoạch đúng thời vụ, phơi khô, bảo quản trên gác nhà và dưới mái hiên Chúng tôi sử dụng tỏi này chế thành các nồng độ tỏi và dấm tỏi để dùng trong các nội dung thí nghiệm của đề tài

- Các thuốc dùng trong phòng và trị cầu trùng sử dụng

Để phòng trị bệnh cầu trùng có hiệu quả, thì trang trại đã sử dụng một số loại thuốc phòng trị bệnh cầu trùng cho đàn gà được lấy từ kho thuốc của công

ty và trại mua, cụ thể là các loại thuốc:

1 ESB3: Do công ty Novatit (Thụy Sĩ) sản xuất

Thành phần: Trong 100g thuốc có:

Amprolium Hydrochloride : 20g

Cách dùng: Thuốc pha nước uống

Liều dùng: 36mg/Kg P, dùng liên tục 3-5 ngày

3 Five Anticol : Do công ty cổ phần thuốc thú y trung ương V sản xuất Thuốc dạng bột, mỗi gói 100g

Thành phần: Trong 100g thuốc có:

Sulfachlozil: 30gr

Trimethoprim: 6 gr

Cách dùng: Thuốc pha nước uống

Liều dùng: 30mg/Kg P, dùng liên tục 3-5 ngày

* Dụng cụ nghiên cứu

Kính hiển vi, tủ lạnh, lamen, lam kính, cân, đũa thủy tinh, cốc thủy tinh,

lọ penicillin, lưới lọc, vòng vớt, bình tam giác, xilanh, ống nghiệm, buồng đếm

Mc Master, dụng cụ mổ khám(dao, pank, kẹp),…

2.2 Địa điểm nghiên cứu

2.2.1 Địa điểm lấy mẫu và ứng dụng thực tế:

Địa điểm lấy mẫu và ứng dụng thực tế: Tại trại gà anh Phùng Văn Lịch xã Phú Nghĩa – Chương Mỹ - Hà Nội Trại nuôi gà cho ăn hoàn toàn bằng thức ăn công nghiệp phù hợp với từng độ tuổi do công ty C.P cung cấp Trại luôn được

vệ sinh sạch sẽ, có hố sát trùng, cách ly với bên ngoài

Diện tích của của trại là 1,5 ha: gồm một trại nuôi 6000 con, hai trại nuôi

8000 con

2.2.2 Địa điểm xét nghiệm

Gà bệnh và các mẫu phân (của gà nuôi tại phòng thí nghiệm của bộ môn và mẫu thu tại cơ sở) được phân xét nghiệm tại phòng thí nghiệm bộ môn Nội – Chẩn – Dược – Độc chất, Khoa Thú y – Học viện Nông Nghiệp Việt Nam

2.3 Nội dung nghiên cứu

2.3.1 Điều tra tình hình dịch tễ cầu trùng gà của đàn Ross 308 từ 1-7 tuần tuổi trong 3 năm(2011,2012,2013)

2.3.1.1 Điều tra công tác thú y tại trại

+ Tình hình chăn nuôi gà Ross 308 của gia trại

2.3.3.1 Xác định loại cầu trùng ở trang trại

2.3.3.2 Ảnh hưởng của các nồng độ tỏi và thuốc five-anticoc đến sự phát triển của noãn nang cầu trùng

+ Theo dõi ảnh hưởng của tỏi nồng độ 2,5%; 5,0%; 7,5% và 10,0% đến sự phát triển của noãn nang cầu trùng gà ở phòng thí nghiệm

+ Theo dõi ảnh hưởng của thuốc five- anticoc đến sự phát triển của noãn nang cầu trùng gà ở phòng thí nghiệm

+ So sánh ảnh hưởng của nồng độ tỏi tốt nhất và thuốc five –anticoc đến sự phát triển của noãn nang cầu trùng gà ở phòng thí nghiệm

2.3.4Ảnh hưởng của dấm tỏi đến khả năng phòng một số bệnh của đàn gà ross 308 ở trang trại của công ty cổ phần chăn nuôi C.P Việt Nam

2.3.4.1 Ảnh hưởng của dấm tỏi đến cường độ và tỷ lệ nhiễm cầu trùng

2.3.4.2 Ảnh hưởng của dấm tỏi đến khả năng phòng một số bệnh thường gặp trên hai đàn gà thí nghiệm

Các chỉ tiêu theo dõi bao gồm:

+ Tỷ lệ nuôi sống của đàn gà

+ Tỷ lệ tăng trưởng của đàn gà

+ Ảnh hưởng của dấm tỏi đến khả năng phòng một số bệnh thường gặp cho đàn

gà thương phẩm hướng thịt giống Ross 308

2.4 Phương pháp nghiên cứu

Để thực hiện được các nội dung nghiên cứu trên, chúng tôi đã sử dụng các phương pháp nghiên cứu sau :

2.4.1 Phương pháp điều tra về dịch tễ học bệnh cầu trùng tại Trại

- Sử dụng phương pháp điều tra hồi qui: dựa vào lịch sử, địa lý và số liệu của gia trại về bệnh cầu trùng để sử lý và tổng kết số liệu trong ba năm gần đây

- Căn cứ vào điều kiện vệ sinh thú y và chăm sóc nuôi dưỡng

- Quan sát trực tiếp

- Phỏng vấn: Bác sỹ thú y, kỹ sư chăn nuôi và chủ trại

2.4.2 Theo dõi sự biến đổi một số chỉ tiêu lâm sàng khi gà bị bệnh cầu trùng

Theo dõi tình trạng chung của đàn gà, phát hiện những biểu hiện khác thường về:

- Mức độ ăn uống: nhiều hay ít

- Trạng thái hoạt động của gà: dáng đi đứng, cách ăn uống

- Trạng thái của phân: màu sắc, mùi, loãng hay đặc,

2.4.3 Phương pháp mổ khám quan sát bệnh tích điển hình

Trong thời gian theo dõi, tất cả các gà ốm chết đều được mổ khám để đánh giá mức độ, tình trạng bệnh, loài cầu trùng gây bệnh thông qua vị trí cầu trùng ký sinh và gây tổn thương chủ yếu ở 3 vị trí: manh tràng, ruột non và trực tràng

- Mổ khám (tài liệu tiêu chuẩn ngành - cục thú y, 2006) Chúng tôi tiến hành mổ khám gia cầm theo các bước sau:

Chuẩn bị mổ khám: Chuẩn bị đầy đủ các dụng cụ mổ khám đã được vô trùng, hoá chất và trang thiết bị bảo hộ cho người mổ khám

Tiến hành mổ khám:

+ Đối với gia cầm còn sống quan sát từ ngoài vào trong, kiểm tra từng cơ quan riêng biệt, ghi lại những biến đổi từ ngoài vào trong vào biên bản mổ khám Với gia cầm gần chết tiến hành mổ khám theo trình tự sau:

+ Kiểm tra các dấu hiệu ngoài da, xoang ngực, xoang bụng, ghi lại kết quả vào biên bản mổ khám

+ Đặt gia cầm nằm ngửa trên bàn mổ, dùng kéo cắt da giữa vùng bụng và vùng bẹn 2 bên chân, rồi lật chân sang 2 bên

+ Cắt da vùng giữa lỗ huyệt và xương lưỡi hái lên tới tận diều bộc lộ vùng

+ Quan sát các túi khí và phía ngoài cơ quan nội tạng

+ Loại bỏ màng treo ruột, cắt đứt phía trên dạ dày tuyến lật toàn bộ cơ quan tiêu hoá phía sau để kiểm tra sau cùng

+ Dùng kéo cắt mở 1 bên cạnh mỏ quan sát xoang miệng Cắt ngang mỏ trên kiểm tra xoang

+ Dùng kéo rạch ruột từ dạ dày tuyến xuống tận hậu môn kiểm tra các tổn thương xuất huyết hoại tử

+ Kiểm tra toàn bộ ruột từ ruột non đến manh tràng, xem ở các vị trí tá tràng, ruột non, manh tràng

2.4.4 Phương pháp lấy mẫu phân và bảo quản mẫu phân

* Lấy mẫu phân

- Nếu mẫu là phân: lấy mẫu theo cá thể gia cầm vào buổi sáng (8-9 giờ) Mẫu ghi rõ ngày lấy, tuổi, giống gia cầm Mỗi mẫu được đựng riêng trong lọ thủy tinh sạch có đậy nút

- Nếu mẫu là bệnh phẩm: chất chứa trong ruột, cắt ruột thành từng đoạn tùy theo mục đích và dùng kẹp vuốt dồn lấy chất chứa

* Bảo quản mẫu:

Mẫu lấy xong phải xét nghiệm ngay Nếu chưa xét nghiệm thì phải bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ từ 2 – 400C

2.4.5 Phương pháp xét nghiệm phân

2.4.5.1 Dung phương pháp Fulleborn(Phương pháp này dùng để phát hiện

noãn nang và xác định tỷ lệ nhiễm cầu trùng)

Tất các các mẫu phân đều được xét nghiệm bằng phương pháp phù nổi với dung

dịch nước muối bão hòa, tìm Oocyst dưới kính hiển vi, với thị kính 10 và vật

kính 40 Tức kích thước noãn nang cầu trùng có độ phóng đại 400 lần

Mục đích: Tìm noãn nang cầu trùng

Nguyên lý: Lợi dụng tỷ trọng của dung dịch nước muối bão hoà lớn hơn

tỷ trọng của noãn nang cầu trùng, làm noãn nang nổi lên bề mặt của dung dịch Phương pháp này có độ chính xác tương đối cao

Cách tiến hành:

+ Để pha dung dịch NaCl bão hòa, lấy 1 lít nước sôi cho vào đó 380g NaCl khuấy đều, hoặc đun sôi nước cho từ từ muối vào khuấy đều cho đến khi muối không tan được nữa thì dừng lại, để nguội lọc qua vải lọc hoặc bông để loại bỏ cặn

+ Lấy 1-3g phân cần xét nghiệm cho vào cốc sạch, đổ nước muối bão hòa vào, dùng đũa thủy tinh khuấy cho phân tan (lượng nước muối nhiều hơn lượng phân 10-20 lần), sau đó lọc qua lưới thép bỏ cặn Lấy dung dịch vừa lọc được cho vào ống nhỏ, để yên tĩnh trong 20-30 phút Dùng vòng thép vớt màng mỏng trên bề mặt, cho lên phiến kính quan sát dưới kính hiển vi, hoặc có thể đổ dung dịch vừa lọc vào ống nghiệm đầy đến tận miệng, đậy phiến kính lên trên sao cho

tiếp xúc với dung dịch Để khoảng 20-30 phút, sau đó lấy phiến kính ra soi trên

kính hiển vi để tìm Oocyst cầu trùng

2.4.5.2 Phương pháp xác định cường độ nhiễm cầu trùng

Phương pháp này dùng để xác định số lượng nang trứng cầu trùng trong 1g phân bằng buồng đếm Mc Master

- Cân 3g phân cho vào lọ thủy tinh

- Cho nước muối bão hòa tới vạch 45ml

- Lắc và trộn đều cho phân tan hết

- Lọc qua lưới lọc

- Trộn đều, dùng pipet hút dung dịch trên cho đầy tràn vào 2 buồng đếm

- Đếm số noãn nang trong 2 buồng đếm theo nguyên tắc đếm 2 cạnh

Cách tính:

+ Thể tích mỗi buồng đếm là 0,15ml

+ Gọi số trứng đếm được là: A

+ Tổng số trứng trong 45ml là: 45xA/0,15

+ Số trứng trong 1g phân là: 45xA/0,15x3

Phương pháp này còn dùng để xác định cường độ nhiễm noãn nang cầu trùng

Đếm Oocyst cầu trùng trong 1g phân bằng buồng đếm Mc Master và quy định theo các cường độ: nhẹ, trung bình, nặng và rất nặng Cụ thể như sau:

<5000 Oocyst/1g phân: cường độ nhiễm nhẹ (+)

>5000 - 10000 Oocyst/1g phân: cường độ nhiễm trung bình (++)

>10000 - 15000 Oocyst/1g phân: cường độ nhiễm nặng (+++)

>15000 Oocyst/1g phân: cường độ nhiễm rất nặng (++++)

2.4.6 Phương pháp theo dõi ảnh hưởng của tỏi và thuốc five-anticoc đến sự phát triển của noãn nang cầu trùng trong phân gà bệnh

2.4.6.1 Phương pháp xác định thành phần loài cầu trùng gà

Để định danh được các loài cầu trùng Eimeria gây bệnh trên gà, chúng

tôi sử dụng khóa phân loại của M.W Shirly (1995) và có tham khảo thêm khóa