Đang tải... (xem toàn văn)
Khái niệm và Quy trình phân lập VSV Phương pháp và kỹ thuật phân lập Phương pháp sàn lọc: Nguyên tắc - Tách rời các tế bào vsv - Nuôi cấy các tế bào vsv trên trong môi trường dinh dưỡng để tạo khuẩn lạc riêng rẽ. Phân lập vi khuẩn Bacillus subtilis: – Cỏ khô cắt nhỏ, cho vào 1 bình tam giác. – Bổ sung thêm: + Một chút phân + Nước sạch đổ ngập cỏ. – Đun sôi 15 phút để diệt các tế bào sinh dưỡng và các tế bào không sinh bào tử. – Đậy nút bông, để tủ ấm ở nhiệt độ 25 – 26 0C trong 48 – 72 h. – Kết quả: + Xuất hiện lớp váng xám có nhiều vi khuẩn Bacillus sublitis vì cỏ khô bao giờ cũng có bào tử của vi khuẩn này. + Soi kính hiển vi : Tế bào Bac. sublitis có hình que, dài, bào tử hình ôvan nằm ở xa tâm hay gắn tâm khuẩn lạc. Tế bào có kích thước (3 – 5 x 0,6) µm.
CHÀO CÔ VÀ CÁC BẠN !!! ĐH CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM TIỂU LUẬN MÔN KỸ THUẬT THỰC PHẨM Đề tài: Tìm hiểu trình phân lập VSV chủng NHÓM GVHD: TRẦN THỊ MINH HÀ DANH SÁCH NHÓM Giang Thị Huỳnh Tiên Huỳnh Long Dâng Phan Thị Kim Hoa Nguyễn Thị Minh Thúy Đinh Quốc Thi Nguyễn Thị Thanh Hiền NỘI DUNG Khái niệm Quy trình phân lập VSV Dụng cụ thiết bị phân lập Các phương pháp kỹ thuật phân lập Một số ví dụ Kết luận Khái niệm • Phân lập là: Tách rời Quần thể VSV loại VSV Gieo Ủ QUÁ TRÌNH Môi trường thạch Phân chia Quần thể mọc riêng Quy trình phân lập • Dụng cụ thiết bị phân lập: Quy trình phân lập • Dụng cụ: Que tráng thủy tinh; Que cấy móc; Que cấy thẳng; Đĩa petri; Bình erlen Quy trình phân lập • Thiết bị: Cân điện tử; Nồi hấp áp lực nước; Tủ cấy Phương pháp kỹ thuật phân lập Phương pháp sàn lọc: • Nguyên tắc - Tách rời tế bào vsv - Nuôi cấy tế bào vsv môi trường dinh dưỡng để tạo khuẩn lạc riêng rẽ Phương pháp kỹ thuật phân lập • Nguyên lý phương pháp - Trước hết người ta kiểm tra sơ hỗn hợp giống vi sinh vật từ mẫu tự nhiên đất nước, cỏ Làm huyền phù pha loãng 1/10 đến 1/100 từ đất gieo mặt hộp petri đựng môi trường thạch dinh dưỡng cấy chủng VSV kiểm định có tác dụng đối kháng - Chỉ có chất đất sinh chất đối kháng với chủng kiểm định, nghĩa có tính chất kháng sinh sau nuôi tạo vùng ức chế đặc hiệu đĩa thạch Ta tách khuẩn lạc chúng đem nuôi cấy, thử chất sinh xác định Phương pháp kỹ thuật phân lập • Cũng đơn giản đặt mẫu đất lên điểm khác mặt thạch dinh dưỡng (nếu muốn tìm vi khuẩn) thạch khoai tây ( muốn tìm nấm) có chủng kiểm định nuôi cấy từ trước Giữ đĩa thạch 28-370C khoảng ngày, quan sát vùng bị ức chế định công việc phân lập chủng VSV có tác dụng • Tác dụng kháng sinh mẫu thử xác định vùng mặt thạch không bị mờ giao điểm đường cấy chủng bị ức chế Phương pháp kỹ thuật phân lập Kỹ thuật phương pháp: - Lấy mẫu thử để khảo sát với nhiều chủng kiểm định - Lấy nhiều mẫu thử để khảo sát với chủng kiểm định Phương pháp kỹ thuật phân lập Chọn lọc theo kỹ thuật Penicilin: -Mẫu lựa chọn phương pháp tế bào hoang dại phát triển môi trường dinh dưỡng thiếu a.a bị giết chết penicilin - Penicilin có tác dụng lên tế bào sinh trưởng nên tế bào cần a.a không sinh trưởng nên sống sót Một số ví dụ Phân lập vi khuẩn Bacillus subtilis: • – Cỏ khô cắt nhỏ, cho vào bình tam giác – Bổ sung thêm: + Một chút phân + Nước đổ ngập cỏ – Đun sôi 15 phút để diệt tế bào sinh dưỡng tế bào không sinh bào tử – Đậy nút bông, để tủ ấm nhiệt độ 25 – 26 0C 48 – 72 h – Kết quả: + Xuất lớp váng xám có nhiều vi khuẩn Bacillus sublitis cỏ khô có bào tử vi khuẩn + Soi kính hiển vi : Tế bào Bac sublitis có hình que, dài, bào tử hình ôvan nằm xa tâm hay gắn tâm khuẩn lạc Tế bào có kích thước (3 – x 0,6) µm Một số ví dụ • Phân lập nấm mốc Aspergillus oryzae, Aspergillus niger Mucor: • – Có thể phân lập loài nấm mốc cơm nguội, xôi làm mốc tương, bánh mì để khô ngày – Thông qua màu sắc mốc để nhận diện + Mốc có màu trắng: Có thể Mucor hay Rhizopus + Mốc có màu đen Aspergillus niger + Mốc có màu xanh lục Penicillium italicum Loại mốc thường có vỏ cam, chanh để lâu ngày – Dùng que cấy đầu hình thước thợ lấy sợi nấm cấy vào môi trường thạch nghiêng thích hợp (Czapek) Một số ví dụ • Phân lập nấm men: • – Có thể phân lập nấm men dễ dàng từ môi trường như: + Bề mặt trái dịch ép số trái táo, lê, nho, dâu, mơ, dứa, … + Trong rượu nếp, bánh men rượu, bia, nước mía, hạt kêphia – Nấm men quan sát kính hiển vi thường có dạng hình cầu hay hình trứng Tế bào có kích thước lớn, có khả nảy chồi Khuẩn lạc cho màu trắng sữa – Chọn khuẩn lạc nấm men riêng rẽ cấy vào môi trường thích hợp ng khoai tây – đường cám hay môi trường Sabouraud) Kết luận [...]...Phương pháp và kỹ thuật phân lập • Cũng có thể đơn giản là đặt các mẫu đất lên các điểm khác nhau trên mặt thạch dinh dưỡng (nếu muốn tìm vi khuẩn) hoặc của thạch khoai tây ( nếu muốn tìm nấm) đã có chủng kiểm định được nuôi cấy từ trước Giữ đĩa thạch ở 28-370C trong khoảng 2 ngày, quan sát vùng bị ức chế và quyết định công việc phân lập các chủng VSV có tác dụng tiếp theo • Tác dụng kháng... của mẫu thử sẽ được xác định ở vùng mặt thạch không bị mờ tại các giao điểm đường cấy của chủng bị ức chế Phương pháp và kỹ thuật phân lập Kỹ thuật của phương pháp: - Lấy một mẫu thử để khảo sát với nhiều chủng kiểm định - Lấy nhiều mẫu thử để khảo sát với một chủng kiểm định Phương pháp và kỹ thuật phân lập Chọn lọc theo kỹ thuật Penicilin: -Mẫu được lựa chọn trong phương pháp này là các tế... Soi kính hiển vi : Tế bào Bac sublitis có hình que, dài, bào tử hình ôvan nằm ở xa tâm hay gắn tâm khuẩn lạc Tế bào có kích thước (3 – 5 x 0,6) µm Một số ví dụ • Phân lập nấm mốc Aspergillus oryzae, Aspergillus niger và Mucor: • – Có thể phân lập các loài nấm mốc này trên cơm nguội, xôi làm mốc tương, bánh mì để khô ít ngày – Thông qua màu sắc của mốc để nhận diện + Mốc có màu trắng: Có thể là Mucor... italicum Loại mốc này thường có trên vỏ cam, chanh để lâu ngày – Dùng que cấy đầu hình thước thợ lấy một ít sợi nấm cấy vào môi trường thạch nghiêng thích hợp (Czapek) Một số ví dụ • Phân lập nấm men: • – Có thể phân lập nấm men dễ dàng từ các môi trường như: + Bề mặt trái cây và dịch ép một số trái cây như táo, lê, nho, dâu, mơ, dứa, … + Trong rượu nếp, trong các bánh men rượu, trong bia, trong nước... penicilin - Penicilin chỉ có tác dụng lên các tế bào đang sinh trưởng nên các tế bào nào cần a.a không sinh trưởng được nên sống sót Một số ví dụ Phân lập vi khuẩn Bacillus subtilis: • – Cỏ khô cắt nhỏ, cho vào 1 bình tam giác – Bổ sung thêm: + Một chút phân + Nước sạch đổ ngập cỏ – Đun sôi 15 phút để diệt các tế bào sinh dưỡng và các tế bào không sinh bào tử – Đậy nút bông, để tủ ấm ở nhiệt độ 25 ... vi khuẩn) thạch khoai tây ( muốn tìm nấm) có chủng kiểm định nuôi cấy từ trước Giữ đĩa thạch 28 -37 0C khoảng ngày, quan sát vùng bị ức chế định công việc phân lập chủng VSV có tác dụng • Tác dụng... sublitis có hình que, dài, bào tử hình ôvan nằm xa tâm hay gắn tâm khuẩn lạc Tế bào có kích thước (3 – x 0,6) µm Một số ví dụ • Phân lập nấm mốc Aspergillus oryzae, Aspergillus niger Mucor: • –