Nuôi cấy không liên tục Cấy vi khuẩn vào một bình nón chứa môi trường lỏng rồi giữ bình ở nhiệt độ thích hợp, trong một thời gian nhất định.. Nếu trong suốt quá trình đó người ta không
Trang 1SỰ SINH TRƯỞNG VÀ PHÁT
TRIỂN CỦA VI SINH VẬT
Trang 2SỰ SINH TRƯỞNG CỦA VI SINH
VẬT
I Khái niệm sinh trưởng
II Thời gian thế hệ
III Sinh trưởng của quần thể vi sinh vật
Trang 3I Khái niệm về sinh trưởng
Sinh trưởng là biểu thị sự tăng trưởng các thành phần của tế bào
• Đối với các vi sinh vật có hình thức sinh sản bằng nẩy chồi hay phân đôi thì sinh trưởng dẫn tới sự gia tăng số lượng tế bào Tế bào tăng trưởng đến một mức độ nhất định thì sẽ phân cắt thành hai tế bào thế hệ con có kích thước hầu như bằng nhau
• Đối với các vi sinh vật đa nhân thì sự phân cách nhân không đồng hành với sự phân cắt tế bào - sự sinh trưởng làm tăng kích thước
tế bào mà không làm tăng số lượng tế bào
Nghiên cứu về sinh trưởng, là xét đến sự biến đổi về số lượng của cả
Trang 4II Thời gian thế hệ
Thời gian thế hệ là thời gian tính từ khi một tế bào sinh ra cho đến khi tế bào đó phân chia.
Thời gian thế hệ của mỗi loài sinh vật không giống nhau.
Trang 5Thời gian thế hệ của vi khuẩn E.Coli là 20 phút
Trang 7Thời gian thế hệ của trùng đế giày là 24 giờ
Trang 8Vi sinh vật Nhiệt độ ( 0 C) Thời gian thế hệ (giờ)
Vi khuẩn và Vi khuẩn lam
Trang 9III Sinh trưởng của vi sinh vật
1 Nuôi cấy không liên tục
Cấy vi khuẩn vào một bình nón chứa môi trường lỏng rồi giữ bình ở nhiệt độ thích hợp, trong một thời gian nhất định Nếu trong suốt quá trình đó người ta không thêm môi trường mới vào bình cũng không rút sinh khối tế bào
ra khỏi bình thì kiểu nuôi như vậy được gọi là nuôi cấy không liên tục và sinh trưởng ở đây là của cả quần thể vi sinh vật.
Trang 10- Sự sinh trưởng của quần thể vi
khuẩn trong môi trường nuôi cấy
không liên tục tuân theo quy luật
đường cong gồm 4 pha:
Trang 11Đường cong sinh trưởng của quần thể vi sinh vật trong nuôi cấy không liên tục
Trang 122 Nuôi cấy liên tục
Nếu nuôi cấy vi sinh vật trong một hệ thống hở, trong quá trình nuôi cấy thường xuyên bổ sung chất dinh dưỡng và thải loại các chất cặn bã thì có thể làm cho môi trường luôn giữ ở trạng thái ổn định Đó là hệ thống nuôi cấy liên tục (continuous culture system)
Trong hệ thống này sự sinh trưởng của vi sinh vật luôn giữ được ở trạng thái logarit, nồng độ sinh khối vi sinh vật luôn giữ được ổn định trong một thời gian tương đối dài
Mục đích: tránh hiện tượng suy vong của tế bào
Trang 13Đường cong sinh trưởng của quần thể vi sinh vật trong nuôi cấy liên tục
Trang 14Chemostat Khi sử dụng Chemostat
để nuôi cấy vi sinh vật người ta đưa môi trường
vô khuẩn vào bình nuôi cấy với lượng tương đương với tốc độ đưa môi trường chứa vi khuẩn ra khỏi bình nuôi cấy.
Trang 15 Turbidostat là loại hệ thống nuôi cấy liên tục thứ hai Thông qua tế bào quang điện (photocell) để đo độ hấp thụ ánh sáng hay độ đục trong bình nuôi cấy để tự động điều chỉnh lưu lượng môi trường dinh dưỡng, làm cho
độ đục hay mật độ tế bào giữ ở mức độ như dự kiến.
Trang 16Nuôi cấy liên tục
trong
Chemostat
và
Turbidostat
Trang 17Nuôi cấy không
liên tục
Nuôi cấy liên tục
Không được bổ sung chất dinh
dưỡng mới
Không được lấy đi các sản phẩm
chuyển hóa vật chất
Đường cong sinh trưởng theo 4
pha: pha tiềm phát, pha lũy thừa,
pha cân bằng, pha suy vong
Nghiên cứu sự sinh trưởng của
Trang 19Các yếu tố bên ngoài tác dụng lên tế bào thuộc 3 loại:
Yếu tố vật lí (độ ẩm, nhiệt độ, tia bức xạ…)
Yếu tố hóa học (pH môi trường, các chất diệt khuẩn…)
Yếu tố sinh học ( chất kháng sinh, kháng thể, virus)
Tác động của 3 yếu tố trên lên vi sinh vật qua các biến đổi:
Phá hủy thành tế bào ( do tác dụng của một số hóa chất, enzyme, kháng sinh…)
Biến đổi tính thấm của màng tế bào chất,ức chế sự sinh sản của
Trang 201/ Nhiệt độ:
Có 4 nhóm VSV:
• VSV ưa lạnh: Sống ở Nam cực ( t0 <=150C).
• VSV ưa ấm: Sống ở đất nước, kí sinh ( 200C – 400C)
• VSV ưa nhiệt: Nấm, tảo, vi khuẩn (550C – 650C)
• VSV ưa siêu nhiệt: Vi khuẩn đặc biệt (750C – 1000C)
• Con người dùng nhiệt độ cao để thanh trùng, nhiệt độ thấp
để kìm hãm sinh trưởng của vi sinh vật.
• Nhiệt độ thấp làm bất họat các quá trình vận chuyển các chất
hòa tan qua màng tế bào, làm thay đổi hình dạng emzyme
Permease hay ảnh hưởng đến sự hình thành và tiêu thụ ATP cho quá trình dinh dưỡng chủ động
• Nhiệt độ cao làm biến tính Protein.
• Tốc độ các phản ứng sinh hóa trong tế bào làm VSV sinh sản
nhanh hay chậm.
Trang 21Phạm vi nhiệt độ sinh trưởng của vi sinh vật
Trang 23Vi khuẩn quang hợp và vi khuẩn lam
Trang 242/ Độ ẩm
Hàm lượng nước trong môi trường quyết định độ ẩm + Nước là dung môi của các chất khoáng dinh dưỡng + Nước là yếu tố hóa học tham gia vào các quá trình thủy phân các chất.
Vi khuẩn đòi hỏi độ ẩm cao.
Nấm men đòi hỏi ít nước.
Nấm sợi cần độ ẩm thấp.
Độ ẩm thích hợp cho vi sinh vật phát triển thường là
Trang 25Hoạt độ nước Môi trường Vi khuẩn, Nấm, Tảo
1,00 Nước thuần khiết Phần lớn VK Gram (-) không ưa mặn
Cá muối Halobacterium, Aspergillus,
Dunaliella , Actinospora 0,70 Ngũ cốc, kẹo, quả khô Aspergillus
0,60 Sôcôla, mật ong, sữa
bột Saccharomyces rouxii (trong đường),
Xeromyces bisporus
Trang 263/ Độ pH:
• Ảnh hưởng tới tính thấm của màng, hoạt động
chuyển hóa các chất trong tế bào, hoạt tính Enzyme,
sự hình thành ATP…
• Có 3 nhóm Vi sinh vật:
+ VSV ưa axit: Đa số nấm, một số vi khuẩn (pH: 4 6)
+ VSV ưa trung tính: Vi khuẩn, động vật nguyên sinh ( pH: 68).+ VSV ưa kiềm: Vi khuẩn ở các hồ, đất kiềm (pH: 9 11)
Trang 27Ưa acid (Acidophile) Sinh trưởng tốt nhất
trong phạm vi pH 0-5,5
Sulfolobus,Picrofilus, Ferroplasma, Acontium, Cyanidum caldarium
Ưa trung tính
(Neutrophile)
Sinh trưởng tốt nhất trong phạm vi pH 5,5- 8,0
Escherichia, Euglena, Paramecium
Ưa kiềm(Alkalophile) Sinh trưởng tốt nhất
trong phạm vi pH 11,5
8,5-Bacillus alcalophilus, Natronobacterium
Trang 28làm biến tính Axit Nucleoic, Ion hóa protein,
gây đột biến Axit Nucleoic.
Trang 29Micrococcus luteus, Pseudomonas,
Mycobacteriun, phần lớn Tảo, Nấm và ĐV nguyên sinh
Kỵ khí không bắt buộc
(Facultative anaerobe)
Không cần O2 để sinh trướng nhưng sinh trưởng tốt hơn khi có mặt O2-.
Escherrichia, Enterococcus, Saccharomyces cerevisiae
Trang 30Kỵ khí bắt buộc
(Obligate anaerobe)
Bị chết khi có mặt O2 Clostridium,
Bacteroides, Methanobacterium, Trepomonas agilis
Trang 31Oxygen và sự sinh trưởng của vi khuẩn
Chú thích: Các nhóm vi sinh vật xem trong bài Mỗi chấm biểu hiện khuẩn lạc của vi khuẩn trong hay trên bề mặt môi trường SOD và catalase là biểu thị vi khuẩn có tồn tại enzyme
superoxide dismutase và catalase hay không(Theo sách của
Prescott,Harley và Klein)
Trang 327/ Các chất sát trùng
Chất sát trùng là những chất hóa học có tính diệt khuẩn hay ức chế vi khuẩn Ví dụ:
• Phenol và các hợp chất chứa phenol tác dụng yếu lên
thành tế bào lam biến tính protein của thành tế bào
(Không diệt được bào tử của VSV).
• Ancol có tác dụng làm ngưng tụ protein.
• Các chất oxy hóa mạnh (H2O2, thuốc tím) tác dụng lên các enzyme có chứa nhóm –SH.
• Các chất Halogen (Clo, Flo, Iod…) trong nước tạo HX
Trang 338/ Các yếu tố sinh học
• Chất kháng sinh: là những chất đặc biệt do VSV
tiết ra trong quá trình họat động sống, có khả năng
ức chế hay tiêu diệt VSV gây bệnh có chọn lọc
(Tác dụng lên thành tb VK ức chế sự tổng hợp
peptidoglycan; tác động lên sự tổng hợp protein; tác động lên sự tổng hợp acid nucleic…)
• Kháng thể: là những gamma globulin có trong
huyết thanh có khả năng ngăn cản sự phát triển của VSV.
• Phage: là virus có khả năng làm tan tế bào.
Trang 34Tài liệu tham khảo:
Vi sinh vật học cơ sở_ Tô Minh Châu
http://thinhlong.info/forum/showthread.php?t=6027 http://maxreading.com/sach-hay/vi-sinh-vat/sinh-
truong-va-phat-trien-cua-vi-sinh-vat-37171.html
Trang 35CẢM ƠN CÔ VÀ CÁC BẠN ĐÃ
LẮNG NGHE!
Trang 36- Vi khuẩn thích nghi với môi trường mới.
- Enzim cảm ứng được hình thành để phân giải cơ chất
Trang 37Pha lũy thừa
Số lượng tế
Nguyên nhân Do chất dinh dưỡng dồi dào còn hàm lượng chất thải thì rất ít
Trang 40Pha suy vong
Số lượng tế
Nguyên nhân Do thiếu chất dinh dưỡng và chất độc tích lũy quá nhiều