BOY TE TRl/ễNG DAI HOC Dl/OC H NOI Ll/ONG Vĩ DlfC BtfOC DU KHAO ST DC TIN H HễA TAN CĩA DEHYDROEPIANDROSTERON KHO LUN TễT NGHEấP DUĩC S DAI HOC KHễA 1998-2003 Nguụi huong dõn: GS.TS Tự Minh Koụng ThS Nguyờn Thanh Hõi Ncri thuc hiờn: Bụ mụn Cụng nghiờp D uỹc Thcfi gian thuc hiờn: 03/2003 - 05/2003 H Nụi, 2003 66- t M ) '9 @ A m CfQl Trong suụ't quõ trinh thicc hiờn dộ ợi em luụn nhõn duac su chợ bõo quy bõu cỹa cõc thy giõo, cụ giõo cựng su ỹng hụ, dụng viờn tựgia dinh, ban bố Trong nhợing dụng õõu ny, xin by tụ long biởt an sõu sac ợi: GS.TS Tự Minh Koụng ThS NguyờnThanh H Nhợing nguõi dõ truc tiờ'p htiụng dan, giỷp dd em hon thnh khoõ luõn ny Em cỹng xin by ợụ long biờ't an sõu sac tõi ton thộ cõc thy giõo, cụ giõo a bụ mon Cụng nghiờp Duac, cõc cõn bụ phụng GMP - trudng Dai hoc Duac dõ tao diộu kiờn, hụ trỗr vờ phuang tien, mõy mục dộ dộ ti hon thnh dỷng thi han H Nụi, thõng 5/2003 Sinh viờn Luang VỹDỷc MUCLUC Trang DAT VAN D E PHN 1: TễNG QUAN 1.1 Khõi niờm vờ dụ tan 1.2 Khõi niờm vờ sinh khõ dung 1.3 Anh huụng cỹa dụ tan tụi sinh khõ dung cỹa cõc chộ phõm thuục 1.4 Cõc bien phõp tng dụ tan cỹa dirac chõ't 1.5 Duoc chõ't 1.5.1 Cụng thrùc v tờn g o i 1.5.2 Nguụn gụ'c v tõc dung 1.5.3 Mot sụ' thong sụ võt l 10 1.6 Cõc chõ't tng dụ tan 10 1.6.1 Hydroxypropyl- (3 - cyclodextrin 10 1.6.2 Polyvinylpyrrolidon 11 PHN 2: THUC NGHIấM V KET QU 12 2.1 Nguyờn lieu v phuong phõp 12 2.1.1 Nguyờn liờu 12 2.1.2 Thiộtbi .12 2.1.3 Phuong phõp 13 2.2 Kờt quõ v nhõn xột: 18 2.2.1 Khõo sõt sa bụ khõ nng hoa tan mụt sụ dung mụi 18 2.2.2 Xõy dung ducmg chuõn dinh luong .19 2.2.3 nh hucmg cỹa hydroxypropyl- p - cyclodextrin tụi dụ tan cỹa dehydroepiandrosteron 21 2.2.4 Anh huụng cỹa polyvinylpyrrolidon dờn khõ nng tao phỷc I6ng cỹa hydroxypropyl|3 cyclodextrin v dehydroepiandrosteron 23 2.2.5 Chờ' tao phỹc long giỹa hydroxypropyl- P - cyclodextrin v dehydroepiandrosteron bng phuong phõp sõiy phun suong .27 2.2.6 Pho nhiờu xa tia X 28 2.2.7 Chộ thỹ dung dich nuục cỹa DHEA 29 2.2.8 Khõo sõt dụ on dinh cỹa cõu truc phirc lụng 29 2.2.9 Bn lun 30 PHN 3: KấT LUN V DE XUAT 31 TI LIEU THAM KHO ? CAC CHĩ VIẫT TT AUC Diờn tich dirụi dircmg cong CTCT Cụng thuc cõu tao CTPT Cụng thtfc phõn tir DHEA Dehydroepiandrosteron DT Dụ tan G-6-PD Glucose-6-phosphat dehydrogenase HPCD Hydroxypropyl-P-cyclodextrin kl/kl Khoi luỗfng/khoi luang kl/tt Khụl luỗfng/thộ tfch PL Phỷc long PVP Polyvinylpyrrolidon TLPT Trong luang phõn tu SKD Sinh khõ dung M/L Mol/lit DAT VAN DE Dõc tinh l hoõ ca ban cỹa phõn tỹ duac chat l nhỷng thụng tin quan cn duac quan tõm thiột kộ mot dang bo chộ Cõc thụng tin ny sờ xõc dinh nhỷng cụng viờc cõn thiột tiộp theo v tir dụ sở tựng burac hon chợnh mot cụng thỷc bo chộ Dụ tan l mot nhỷng yộu tụ quan hng dõu dụi vụi cõc nh bo chộ Bụi dụ tan cụ õnh hirụng Ion v xuyờn suụ't ton bụ quõ trinh xõy dung cụng thỹc Xõc dinh duac dụ tan cỹa duac chõt v cõc yộu tụ õnh huụng dộn dụ tan sở gụp phõn dõn dộn thnh cụng thiột kộ cụng thỷc bo chộ Trong co thộ, hờ thụng nụi tiột tõc dụng toi moi hoat dụng sụng thụng qua hormon - mot chõt trung gian hoõ hoc VI thộ, hoat dụng cỹa hormon cụ vai tro to lụn dụi vụi cuục sụng nguụi DHEA l mot hormon steroid, cụ nguụn gục tự tuyộn thuỗrng thõn Mot sụ kột quõ nghiờn cuu buục dõu cho thõ'y, DHEA cụ nhiốu triờn vong lieu phõp tri lieu thay thộ cỹng nhu phụng, chụng bờnh tõt Dộ duoc chõt phõt huy duoc hiốu lue diộu tri, thi viờc thiột kộ cho duỗfc chõt nhỷng dang bo chộ thich hop l võn dờ cn duoc quan tõm Trờn thuc tộ, DHEA l mụt duoc chõt tan rõt ft nuục, diờu ny gõy khụ khan viờc bo chộ cõc chộ phõm cỹng nhu han chộ sinh khõ dung cỹa cõc chộ phõm dụ Chmh vi thộ, dộ tao tiốn dờ cho viờc hùnh thnh cõc chộ phõm cỹa DHEA, chỹng tụi tiộn hnh dờ ti ny vụi mue tiờu: - Khõo sõt sa bụ khõ nõng hụa tan cỹa DHEA mot sụ dung mụi - Tợm bien phõp lm tõng dụ tan nirorc cỹa DHEA Vụi hy vong cõi thiờn duac dụ tan cỹa DHEA truục ỷng dung vo cõc chộ phõm bo chộ PHN I - TễNG QUAN 1.1 Khõi niờm dụ tan Thộo DDVN ni: " Tan " co nghợa l chõt thu (duoc tan nhụ nộu l chõ't rõn) duoc ho tan dung mụi tao thnh mot dung dich suụ't, dụng nhõ't, khụng phn tir chat thu "Dụ tan " l sụ' ml dung mụi ho tan duoc lg hoc 1ml chõ't thu 1.2 Khõi niờm vố sinh khõ dung Sinh khõ dung l mot dai luong chợ tụ'c dụ v mire dụ hõ'p thu duoc chõ't nguyờn hoat tmh tir mot chờ' phõm bo chờ' vo tun hon chung v dua dờn co quandich.[l] De dõnh giõ SKD tụ't nhõ't l duoc cõc dõp rùng lõm sng cỹa thuục hoc dinh luong duoc chõ't tai vi tri tac dung Tuy nhiờn, trờn thuc tờ' phn Ion cõc dõp ung dờu khụ xõc dinh (trCr mot sụ' truụng hop nhu: huyờ't õp, nhip tim, ) v viờc xõc dinh nụng dụ duoc chõ't tai co quan, tộ chỹc ca thộ l rõt khụ thuc hiờn Vợ võy theo quan diờm duoc dụng hoc, lõ'y nụng dụ duoc chõt mõu dộ dõnh giõ hiờu quõ diờu tri cỹa thuụ'c trờn ca sa cụng nhõn cụ su tuong quan dụng biờn giựa nụng dụ duoc chõt mõu v noi tõc dung Nhu võy, phn õnh nụng dụ duoc chõt mõu nờn SKD gõn liờn voi tõc dung lõm sng cỹa thuụ'c [5] De dõnh giõ SKD, phõi xõy dung duoc dụ thi biờn thiờn cỹa nụng dụ duoc chõ't mõu (hoc cõc dich sinh hoc khõc) theo thụi gian (goi tt l dụ thi nụng dụ mõu) Tự sụ lieu thu duoc sở xõc dinh cõc thụng sụ' duoc dụng hoc cõn thiờ't cho viờc tợnh toõn SKD cỹa thuụ'c nhu: Diờn tich duoi duefng cong (AUC): biờu thi nụng dụ hõ'p thu cỹa duoc chõ't tir chờ' phõm Nụng dụ dợnh (Cp): thộ hiờn cuụng dụ tõc dung cỹa thuụ'c Thi gian dat nụng dụ dợnh (tmax): thộ hiờn toc dụ hõ'p thu cỹa duoc chat tir chờ' phõm Khi dõnh giõ tuong duong sinh hoc, tu chờ' phõm doi chiờu m ta co loai SKD invivo SKD tuyờt doi duoc xõc dinh ta so sõnh AUC cỹa chờ' phõm thir voi dung dich tiờm tlnh mach chỹra cựng liộu duoc chat vcd chờ' phõm thu, vi thuụ'c tiờm tlnh mach duoc xem l co SKD 100% SKD tuyờt dụ'i ^ AẽTC w ^ cua thuục dõnh giõ AU C w ^ cỹa thuục tiờm tTnh mach Khi su dung chờ' phõm dụ'i chiờu l thuụ'c uụ'ng ta cụ SKD tuong dụ'i: SKD tuong dụ'i = ^ AU C w ^ cỹa thuục dõnh giõ AIT C w ^ cựa dung dich uụ'ng Mot sõn phõm mụi, duoc cụng nhõn vờ hiờu quõ, tmh an ton xõc dinh duoc SKD tuyờt dụ'i hoc dõnh giõ duoc tuong duong sinh hoc vcri mụt chờ' phõm dụ'i chiờu (chờ' phõm duoc coi l hõ'p tụ't hoc dõ duoc cụng nhõn vờ hiờu lue tac dung) 1.3 nh huung cua dụ tan dờ'n sinh khõ dung cỹa cõc chờ' phlm thuụ'c Sinh khõ dung cỹa dang thuụ'c l mot nhỹng thuục tợnh quan nhõ't Mụ'i tuong quan giỹa sinh khõ dung v tinh chõ't l, hoõ cỹa duoc chõ't dõ duoc nghiờn cỹu nhiờu cụng trợnh khoa hoc Trong dụ, dõng chu nhõ't l dụ tan v tụ'c dụ tan, dc biờt l vcri cõc chõ't ợt tan [4] Khi dua mot dang thuụ'c vo co thộ, quõ trùnh sinh duoc hoc cỹa thuụ'c xõy nhu sau: - Duoc chat - Ta dirac - K thuõt bo chộ - Tai vựng hõ'p thu Su 1: Quõ trợnh sinh duoc hoc cỹa dang thuụ'c Nhir võy, muụn gõy duac dõp ỷng lõm sng, truac hột duac chõt phõi duac giõi phụng khụi dang thuục, hụa tan tai vựng hõp thu, tựr dụ hõp thu qua mng sinh hoc vo tun hon mõu v tụi ca quan dợch [1] Dõc tmh hõp thu cỹa duac chõt duỗfc dõc trung bai tục dụ khộch tan qua mng v duỗfc mụ tõ bcfi biởu thỷc toõn hoc, theo dinh luõt Fick, nhu sau: dQ _ D-A-Kj^Xầ^ "C;) Ht ~ H q \ Trong dụ, D: hờ sụ khộch tan qua mng A: diờn tợch tiộp xỹc giỷa mng v vựng hõp thu Kft: hờ sụ phõn bụ giỷa mng v vựng hõp thu C, : nụng dụ duỗfc chõt tai vựng hõp thu C2: nụng dụ duỗfc chõt mõu Vụi su hõp thu mụt duac chõt xõc dinh, tai vựng hõp thu xõc dinh v vụi su luõn chuyởn cỹa vong tuõn hon, quõ trinh hụa tan v hõp thu duỗfc chõt l mot quõ trinh dụng, dụ cụng thỷc (1) duỗfc don giõn hụa nhu sau: = KC{ (2) dT Trong dụ, K l mụt hng sụ dõc trung cho khõ nng thõm qua mng v duac xõc dinh dura vo D, A, Kft>h Cụng thỷc (2) cho thõy, tục dụ hõp thu (dQ/dt) sờ tng tuyộn tợnh vụi nụng dụ duỗfc chõt tai vựng hõp thu Nhu võy, khõ nng hụa tan tai vựng hõp thu cỹa duỗfc chõt, dõc biờt l vụi duỗfc chõt iù tan, quyột dinh truc tiộp tụi tục dụ hõp thu v õnh huong tụi sinh khõ dung cỹa chộ phõm [23] Dụi vụi cõc chộ phõm thuục tiờm - mụt dang thuục luụn dụi hụi duỗfc chõt phõi cụ nhỷng tiờu chuõn rõt chõt chở vờ dõc tinh hụa l Trong dụ, DT v tục dụ tan cụ vai trụ dõc biờt quan dụi vụi su phõt triộn mot cụng thỷc thuục tiờm an ton, hiờu quõ Hoat chõt dộ pha thuục tiờm, dựng tiờm truc tiộp vo long mach nhõ't thiột phõi tan hon ton nuục (trự mot sụ chộ phõm duỗfc su dung vụi mue dợch dõc biờt), nhm trõnh nguy ca gõy tõc mach duỗfc chõt ft tan Dụi vai cõc thuụ'c tiờm duụi da hoc tiờm bp, thộ tfch mot lõn tiờm chợ khoõng mot dờ'n mot vi ml, vợ thộ duoc chõ't phõi co DT thfch hop Hon nỷa, theo hai duụng tiờm ny duoc chõ't phõi duoc hõ'p thu tự vi tri tiờm vo tuõn hon chung, vi thờ' toc dụ hụa tan duoc chõ't co õnh huụng rụ rờt tụi nụng dụ thuụ'c mõu Nờ'u duoc chõ't co DT thõ'p, cụ thộ khõc phuc bng cõch chờ' duụi dang hụn dich hoc nhỹ tuong, nhiờn, duoc chõ't chợ hõ'p thu vo mõu duụi dang dung dich vi thờ' võn dụi hụi duoc phõi cụ DT thich hop [1] Dụ'i vụi cõc dang thuụ'c hõ'p thu tai khoang miờng, thụi gian luu tai vi tri hõ'p thu ngn, duoc chõ't phõi duoc giõi phụng v ho tan nhanh chụng dộ cụ thộ hõ'p thu qua niờm mac Chfnh vi thộ, dộ dõm bõo sinh khõ dung cỹa chờ' phõm, duoc chõ't phõi dờ tan Dụ'i vụi cõc chờ' phõm dựng theo duụng uụ'ng, hõu hờ't cõc duoc chõ't dờu duoc hõ'p thu tai vựng da dy - ruụt De hõ'p thu duoc, duoc chõ't phõi hụa tan thnh dung dich dich tiờu hụa Nhu võy, khõ nng hụa tan dich tiờu hụa l mot cõc yờ'u tụ' cụ vai trụ quyờ't dinh dụ'i vụi su hõ'p thu cỹa duoc chõ't Vụi dang thuụ'c dan, su hõ'p thu duoc chõ't theo duụng truc trng l mụt quõ trinh hờ't suc phỹc tap, phu thuục vo nhiờu yờ'u tụ' (yờ'u tụ' sinh l, cõc dõc diởm vờ duoc chõ't, vờ k thuõt bo chờ', ) Tuy nhiờn, chợ duụi dang ho tan niờm dich duoc chõ't mụi thõ'm qua niờm mac, hõ'p thu vo tợnh mach truc trng Vi thộ, khõ nng ho tan cỹa duoc chõ't niờm dich cụ õnh huụng lụn tụi toc dụ giõi phụng duoc chõ't khụi ta duoc thuục dan v hõ'p thu qua niờm mac Hon nỷa, thộ tfch niờm dich truc trng chợ khoõng ml, dõy l luong nuục tụi thiờu cõn thiờ't cho su hụa tan duoc chõ't, vi võy dộ dõm bõo sinh khõ dung cho chờ' phõm duoc chõ't cõn cụ dụ tan thich hop [5] Vụi dang thuụ'c hõ'p thu qua da, tmh chõ't l hoõ cỹa duoc chõt cụ y nghùa cõn ban dụ'i vụi quõ trinh giõi phụng duoc chõ't khụi tõ duoc v hõ'p thu qua da Trong dụ, DT cỹa mụt duoc chõ't, dõc biờt l duoc chõ't ft tan, quyờ't dinh mỹc dụ v toc dụ giõi phụng nụ khụi ta duoc Do dụ, quyột dinh mure dụ v tục dụ hp thu qua da v õnh huong tefi sinh khõ dung cỷa chộ phõm thuục.[2] Nhu võy, doi vụi duoc chat ft tan, dự bo chộ ụ dang thuục no, cụ thộ diờu tiột quõ trợnh hõp thu bng cõch tac dụng vo khõ nõng ho tan cỹa duoc chõt, tự dụ tng SKD cỹa chộ phõm 1.4 Cõc bien phõp lm tng dụ tan DC [4] DT cỷa duoc chõt chiu õnh huong cỹa nhiờu yộu tụ: cõc dc tmh l hoõ cỹa duoc chõt, tõc dụng cỹa k thuõt bo chộ, co dia sinh l, bờnh l cỹa ngueri dựng thuục Dua trờn cõc yộu to õnh huong tụi DT cỹa duoc chõt, thõ'y rng cụ thộ sir dung phuong phõp khõc nhm tng dụ tan cỹa duoc chõt: - Thay doi kfch thuục tiởu phõn - Lua chon cõu truc theo tmh da hinh - Su dung hờ phõn tõn rõn - Su dung hụn hop dung mụi - Thay doi pH dung dich - Thay doi cõu truc hụa hoc cỹa phõn tu duoc chõt -Tao phỹc dờ tan Trong dụ, phuong phõp tao phrùc dở tan dõ duoc irng dung phộ biộn bo chộ nhõm lm tng DT cỹa duoc chõt Phỷc giỹa duoc chõt v chõ't mang duoc chia lm hai loai co bõn: phỹc phõn tỹ, phỹc hoõ tri, vụi cõu truc v pham vi ỹng dung khõc Trong nhỹng nõm gõn dõy, nhiờu nghiờn crùu dõ thnh cụng vụi viờc su dung phiic long nhm tng DT cỹa duoc chõ't Phu:c long l mot loai phỹc phõn tỹ, cõu truc phỷc long duoc hùnh thnh mụt phõn tỹ chõ't mang cụ cõu truc rụng v phõn tỹ duoc chõ't ft tan cụ khõ nng * Nhõn xột: Trong pham vi khõo sõt, tõ't cõ cõc nụng dụ cỹa HPCD, DT cỹa DHEA dờu tng lờn rụ rờt Nhu võy HPCD cụ tõc dung lm tng DT cỹa DHEA nuục Tõc dung ny duoc coi l su hinh thnh mot phirc lụng giỹa HPCD v DHEA Kột quõ, lm giõm tmh so nuục cỹa duoc chõt v tng DT nuục cỹa duoc chõt Trong khoõng nụng dụ khõo sõt, DT cỹa DHEA tng tuyộn tmh vụi su tng nụng dụ cỹa HPCD Dc biờt vụi dung dich HPCD nụng dụ 23,3%, DT cỹa DHEA tng lờn khoõng 440 lõn Duụng cong dụ tan duoc coi l duụng thang vụi hờ so tuong quan v2= 0,999 Hng sụ cn bng tao phỹc tmh duoc dua vo cụng thỹc (5), l 6273,8 M '1 Nhõn thõy rng, pham vi khõo sõt, tõt cõ nụng dụ cỹa HPCD, t le mol giỹa (HPCD:DHEA) dung dich luụn tri khoõng 1,8:1 So bụ nhõn dinh, quõ trinh tao phỹc giỷa HPCD v DHEA khụng phu thuục vo nụng dụ cỹa HPCD dunh dich Dộ tng cuụng mire dụ tao phỹc giỹa HPCD v DHEA (giõm t lờ mol cỹa HPCD phỹc lụng), tiộn hnh nghiờn cuu õnh huong cỷa mụt sụ yộu tụ dộn quõ trợnh tao phirc Vụi mue dich ny, chỹng tụi sỹ dung PVP v khõo sõt su õnh huefng cỹa nụng dụ PVP dờn khõ nng tao phirc lụng giỷa HPCD v DHEA 2.2.4 nh huong cỹa PVP dộn khõ nng tao phirc lụng giỷa HPCD v DHEA 2.2.4.1 nh huong cỹa PVP dộn DT cỹa DHEA nirục: - Sỹ dung cõc dung dich nuục cỹa PVP mire nụng dụ khõc nhau: 0,1% - 0,29% - 0,49% (kl/tt) - Xõc dinh DT cỹa DHEA cõc dung dich trờn theo phuong phõp dõ nờu 23 * Diờu kiờn ho tan: - Thcfi gian siờu õm: 30 phỹt - Nhiờt dụ: 25C Hm luỗrng PVP tmh theo luong chõt dõ lm khan Cõc giõ tri duỗfc tmh trung bợnh tir ln thuc nghiờm Kờt quõ duỗfc trinh by bng Bng : DT cỹa DHEA cõc dung dich PVP cụ nụng dụ khõc Nụng dụ PVP 0,10 0,29 0,49 50 51 52 52 (% kl/tt ) DT ( mcg/ml) * Nhõn xột: Tir kờt quõ trờn, so bụ nhõn dinh rõng, pham vi nụng dụ dõ khõo sõt, PVP õnh huụng khụng dang kộ tụi DT nuục cỹa DHEA 2.2.4.2 nh huong cỹa PVP dởn dụ tan cỹa DHEA dung dich HPCD 4,65 % (kl/tt) - Thờm PVP vo cõc dung dich HPCD 4,65 % (kl/tt) vụi cõc nụng dụ tucfng ỷng l 0,1%; 0,29 %; 0,49 % (kl/tt) Xõc dinh dụ tan cỹa DHEA cõc dung dich trờn theo phuong phõp dõ nờu 24 Kột quõ duoc trinh by bng Cõc giõ tri duoc tinh trung binh cỹa ln thuc nghiờm ? Bng 4: Anh hucmg cỹa PVP den dụ tan cỹa DHEA dung dich HPCD 4,65 % (kl/tt) Nụng dụ PVP DT cỷa Mõu (% kl/tt) DHEA (mg/ml) Hờ sụ T lờ sụ mol tõng dụ HPCD : DHEA tan dung dich 4,9 98 1,9:1 0,10 5,9 118 1,6:1 0,29 5,6 112 0,49 5,4 108 1,7:1 1,8:1 Kột quõ tir bng cho thõy, cụ mõt PVP, DT cỹa DHEA dung dich HPCD 4,65% tõng lờn rụ rờt v mỷc dụ tao phu'c cụ xu tng cucmg Cõc kột quõ bng 3; duoc trinh by duụi dang dụ thi nhu hợnh 25 Nộng dụ PVP (% kl/tt) Hợnh Dụ thi biởu diờn DT cỹa DHEA cõc dung dich PVP cụ (--) hoõc khụng cụ (-o-) 4,65% (kl/tt) HPCD * Nhõn xột: Tir cõc kờt quõ trờn cho thõy: DT cỹa DHEA thay dụi khụng dang kộ cõc dung dich nuục cụ chỹa PVP v tõng khoõng 98 ln dung dich nuục cụ chira 4,65% (kl/tt) HPCD Khi su dung dụng thcfi PVP v HPCD thợ tõt cõ cõc nụng dụ cỹa PVP dõ khõo sõt, DT cỷa DHEA dờu tõng so vụi DT dung dich chợ cụ HPCD Kột quõ ny cụ thộ l giõi vụi giõ thiột, pham vi khõo sõt bõn thõn PVP khụng cụ tõc dung lm tõng dụ tan cỹa DHEA nuục nhung lai cụ tõc dung lm tõng khõ nõng tao phirc lụng giỷa DHEA v HPCD, tự dụ lm tõng dụ tan cỹa DHEA Nhõn thõy, thờm PVP vo dung dich nuục cỹa HPCD, DT cỹa DHEA tõng lờn rụ rờt v nhanh chong dat giõ tri DT tụi da, gõp khoõng 118 ln DT nuục, tuang ỷng vụi nụng dụ PVP l 0,1% (kl/tt), giõ tri ny duac coi l nụng dụ PVP tụi uu cn sỹ dung dở tõng cuụng quõ trinh tao phirc giỷa HPCD v DHEA Hng sụ cõn bng cỹa phirc tar giõ tri ny dat duỗfc l 11157,1 m -1 26 Trong khoõng khõo sõt, khõ nõng tng cirdng tao phirc cỹa PVP co xu huong bi han chộ bai su tng nụng dụ cỹa chinh nụ Hờ sụ tng DT toi da l 118 ỹng vụi nụng dụ PVP l 0,1% v vụi nụng dụ 0,49% l 108 Kờ't quõ ny cụ thộ hoc, tng nong dụ PVP, dụ nhụt cỹa dung dich tng dõ han chờ' quõ trinh tao phỹc, hoc tng nong dụ, PVP tao phỹc canh tranh vụi DHEA, hoõc cụ thộ cõ nguyờn nhõn trờn 2.2.5 Chờ' tao phirc lụng bng phuong phõp sõ'y phun suong Tỹ cõc kờ't quõ trờn, nghiờn cỹu thỹ tiờ'n hnh chờ' tao PL giỹa HPCD v DHEA o trang thõi rõn Chỹng tụi chờ' tao loai PL tỹ cõc dung dich HPCD cụ nụng dụ khõc theo phuong phõp dõ nờu Lõ'y phõn bụt thu duoc a binh hỹng cỹa thiờ't bi phun sõ'y, khụng tmh phõn bụt bõm trờn thnh binh phun sõ'y Dinh luong DHEA PL theo phuong phõp dõ nờu % DHEA PL _ ùHdhm x|qq mPL Trong dụ, mDHEA: khụ'i luong DHEA PL (mg) mPL: khụ'i luong PL (mg) Kờ't quõ duoc trinh by theo bõng 5, tmh theo luong chõt khan Bng 5: Bac tinh cỹa PL HPCD/DHEA Nụng dụ Dụ õm HPCD cỹa PL (% kl/tt ) (%kl/kl) 5,6 5,6 11,1 1,7:1 11,6 6,0 11,0 1,7:1 23,3 6,1 11,5 1,6:1 Mõu %DHEA PL(kl/kl) 27 T lờ mol HPCD: DHEA PL * Nhõn xột: Cõc mõu PL thu duac dờu ho tan nhanh, hon ton nuục Trong tõ't cõ cõc mõu PL thu duoc, t lờ mol cỹa HPCD:DHEA giõm xuụ'ng cụn 1,6:1 (so vụi 1,8:1 dung dich), diờu ny cho thõy mu:c dụ tao phuc giỷa HPCD v DHEA tõng lờn, cụ nghợa l DT tõng lờn Kột quõ ny cụ duoc cụ thộ thụi gian ộn dinh tng lờn (12 giụ so vụi giụ), dõ lm tng quõ trinh tao phỹc Nhõn thõy vụi mõu v 2, nụng dụ HPCD thõp, dõc tmh cỹa PL thu duoc l nhu nhau, vụi mõu 3, nụng dụ HPCD cao hon, PL thu duoc cụ hm luong DHEA cao hon v t lờ mol cỹa HPCD PL thõp hon Nhu võy PL giỷa HPCD v DHEA duoc chộ tao duụi dang bụt phun sõy võn dõm bõo tõc dung tng DT cỹa HPCD dụi vụi DHEA Hon nỷa duoc chộ duụi dang bụt phun sõy, PL cụ nhỷng uu diộm hon hõn so vụi dang dung dich Vợ thộ, dõy cụ thộ l mụt dang chộ phõm trung gian thich hop cho cõc viờc bo chộ cõc dang thuụ'c khõc 2.2 Nghiờn cỹru nhiờu xa tia X cỹa PL - Kờ't quõ duoc trinh by theo hợnh * Nhõn xột: Tự phộ nhiờu xa tia X thu duoc, nhõn thõy DHEA thộ hiờn phộ cỹa mot chõ't cụ cõ'u truc tinh thộ, dụ HPCD thộ hiờn phộ cỷa mụt chõt vụ dinh hợnh Phộ cỹa hụn hop võt l cho thõ'y cụ su trựng lp vụi phộ cỹa DHEA v cỷa HPCD nguyờn chõt dụ phộ cỹa PL thộ hiờn cỹa mot chõ't vụ dinh hợnh, khụng thõ'y cụ su trựng lp vụi phộ cỹa DHEA, diờu ny khõc biờt hon ton vụi phộ cỹa hụn hop võt l Kờ't quõ ny cho thõ'y, su tao 28 phirc vụi HPCD dõ lm thay doi dõc tmh kờt tinh cỹa DHEA v lm thay doi DT cỹa DHEA 2.2.7 Chở thu" dung dich nuục cỹa DHEA PL a dang rn duac sỹ dung dở pha dung dich nuục cỹa DHEA Kờt quõ, dõ pha duac dung dich nuục cỹa DHEA vụi nụng dụ khoõng 2,87% (kl/tt), dung dich dụ nụng dụ tuong ung cỹa HPCD khoõng 22,12% (kl/tt) Dung dich DHEA nuục duofc sỹ dung dở tiởp tue nghiờn cuu, hon thiờn dang thuục tiờm tinh mach nuục cỹa DHEA, lm ca sụ cho viờc xõc dinh SKD tuyờt dụi cỹa cõc chở pham chỷa DHEA 2.2.8 Khõo sõt dụ on djnh cỹa cõu truc PL Rụ rng l cõu truc PL cỹa HPCD vụi DHEA dõ lm tõng dõng kở DT cỹa DHEA, nhung dở ung dung vo mot dang bo chở thi dụ ởn dinh cỹa PL l mot van dờ rat dõng quan tõm Trong diộu kiờn nghiờn cuu, tiờn hnh khõo sõt dõc tinh ho tan cỹa PL thu duac Kởt quõ nhu sau: Bng 6: Dõc tinh hụa tan cỹa PL ụ dang rõn sau thựi gian bdo quan Mõu Ban du + + + Sau thõng + + + Sau thõng - + + Thụi gian * Ghi chu: (+) Dich hụa tan suụt (-) Dich hụa tan bi duc * Nhõn xột: 29 Nhu võy, sau thõng, diờu kiờn bõo quõn thụng thuụng, dc tinh hụa tan cỹa PL võn khụng thay dội Sau thõng, hiờn tuong võn duc mõu cho thõy cụ khõ nng cõu truc PL dõ bi phõ vụ mot phõn sau thụi gian bõo quõn, duoc chõt bi nhõ khụi khoang rụng cỹa chõt mang, gõy duc dich hụa tan Dich ho tan tự mõu 2, mõu khụng bi duc sau thụi gian bõo quõn, chỷng tụ cõu truc PL khụng bi phõ vụ, dc tmh ho tan cỹa PL khụng thay doi sau thụi gian bõo quõn 2.2.9 Bn luõn o Vờ õnh cỹa HPCD dụ'i vdi DT cỹa DHEA Kờt quõ thuc nghiờm cho thõy HPCD co khõ nng lm tng DT cỹa DHEA Phõn tfch nhỷng tuong tõc giỹa DHEA v HPCD dung dich cỹng nhu ụ trang thõi rõn cho thõy co chờ' tõng DT cỹa HPCD dụ'i vụi DHEA l hinh thnh cõu truc PL giỹa DHEA vụi khoang rụng cỹa HPCD, tự dụ lm giõm tmh so nuục, thay dội dc tmh kờ't tinh cỹa duoc chõ't, lm tng DT nuục cỷa DHEA u nh hitng phụ'i hffp cỹa PVP v HPCD dụ'i või DT cỹa DHEA Trong pham vi khõo sõt, PVP khụng cụ tõc dung lm tng DT nuục cỹa DHEA nhung cụ khõ nng tng cuụng mỷc dụ tao phỷc giỹa HPCD v DHEA Tuy nhiờn, khõ nng tng cuụng lai bi han chờ' bụi viờc tng nụng dụ cỷa PVP Nhỷng kờ't quõ ny cụ thờ duoc giõi thich vụi giõ thiờ't, PVP l mụt polyme thõn nuục mach thõng, tan vo nuục, nhỷng mach thõng ny sở xen vo giỹa nhỷng phõn tỹ HPCD liờn kờ tao diờu kiờn cho tựng phõn tỹ HPCD dung riờng rở, tng co hụi cho su tiờ'p cõn cỹa DHEA vụi khoang rụng Tuy nhiờn tng nụng dụ , nhỷng mach thõng ny cụ thộ dan chộo gõy hiờu ỷng khụng gian cõn trụ quõ trinh xõm nhõp vo khoang rụng, hoc cụ thộ PVP tham gia tao phỷc canh tranh vo khoang rụng cỹa HPCD, hoc cụ thộ cõ hai nguyờn nhõn trờn 30 PHAN III - KẫT LUN V DE XUAT 3.1 KấT LUN Sau thcfi gian nghiờn cuu, tir nhỹng kờt quõ thu duoc cụ thộ di dờn mot sụ kờt luõn sau: * Khõ nõng ho tan cỹa DHEA mụt sụ dung mụi tinh khiờt nhu sau: DHEA de tan dimethyl sulfoxid, ethanol; tan ethyl acetat; hai tan propylen glycol, triethyl citrat, polyethylen glycol; khụ tan isopropyl palmitat, thuc te khụng tan dimethicol, parifin lụng, du Silicon, glycerin * Trờn thuc tờ' DHEA khụng tan nuục ụ diờu kiờn thuc nghiờm * HPCD cụ tõc dung lm tng dang kở DT nuục cỷa DHEA * Viờc tõng nụng dụ cỹa HPCD khụng õnh huong dang kờ toi mue dụ tao phỹc giỹa HPCD v DHEA dung dich (diờu ny thở hiờn cf t le mol giỹa HPCD:DHEA luụn tri t lờ 1,8:1 ụ tõt cõ cõc mõu) *Trong pham vi khõo sõt, PVP khụng cụ tõc dung lm tng DT nuục cỹa DHEA Tuy nhiờn, PVP cụ khõ nng tng cuụng mỹc dụ tao phỹc giỹa HPCD v DHEA, chợ vụi t lờ 0.1% (kl/tt), PVP dõ lm giõm t lờ mol cỹa HPCD:DHEA cõu truc PL tỹ (1,9:1) xuụng cụn (1,6:1) * Su cụ mõt cỹa PVP lm tõng dụ bờn cỹa PL (hng sụ cõn bng cỹa PL l 11157,1 M1 so vụi 6273,8 M'1) * Vụi PL cỹa HPCD v DHEA thu duoc bng phuong phõp sõy phun suong, cụ thở dờ dng diờu chờ" duoc dung dich cỹa DHEA nuục cụ nụng dụ khoõng 2,8% (kl/tt), dõt co scf cho viờc nghiờn cỹu chộ tao dung dich thuục tiờm nuục cỹa DHEA, cho cõc nghiờn cỹu tiộp theo 31 * Nhõn thõy, thcfi gian lõc siờu õm, thcfi gian dở on dinh cỹng õnh huong tụi mue dụ tao phirc giỷa HPCD v DHEA, vợ thộ õnh hucmg tụi DT nuục cỹa DHEA * Sau thụi gian bõo quõn thõng, dc tmh ho tan cỹa PL khụng thay doi Sau thõng bõo quõn, cõu truc PL thu duỗfc tir mõu bi phõ v mụt phõn Dc tmh hụa tan cỹa PL thu duỗfc tir mõu 2, khụng thay doi Cõu truc PL võn bờn vỹng dieu kiờn bõo quõn 3.2 Dấ XUAT Do thụi gian thuc hiờn dờ ti cụ han, nhỷng kờt quõ thu duỗfc trờn mụi chợ l nhỷng kột quõ so bụ ban dõu Vợ thộ cn tiộp tue nghiờn cỷu dờ ti mỷc dụ sõu v rụng han u Xõc dinh diờu kiờn ho tan dộ cụ thộ khõo sõt DT a trang thõi cõn bng u Tiộn hnh cõc bien phõp phõn tfch nhm lm rụ thờm vờ cõu truc PL giỷa HPCD v DHEA u Dụi vụi DT cỹa DHEA, cõn khõo sõt mụt sụ yộu tụ õnh huong khõc nhu: nh huong cỹa pH nh huefng cỹa cõc chõt phu dựng kốm (cõc ion, cõc polyme ) Diờu kiờn ho tan (thụi gian siờu õm, thụi gian on dinh, ) u Dở cụ thộ ỷng dung PL vo cõc dang bo chộ, cõn khõo sõt mụt sụ yộu tụ õnh huong dộn dc tinh cỹa PL, nhu: Cõc yộu tụ õnh huụng tụi mỷc dụ tao phỷc (cõc chõt phu dựng kốm, chõt tao phỷc khõc ngoi HPCD, ) Khõo sõt dụ bờn v cõc yộu tụ õnh huefng tụi dụ bờn cỹa cõu truc PL 32 Dụ on dinh cỹa PL (trang thõi võt l, cõu truc hoõ hoc, ) Hy vong cụ thộ ung dung PL cỹa HPCD v DHEA duụi dang bụt sõy phun suong nhu mot dang trung gian dộ dua vo cõc chờphõm bo chộ thich hop % t 00 Cps 0 0 2-T heta - Rn* 1*ằ ằ * TI LIấU THAM KHO Bụ mon Bo chộ,(1996), K thuõt bo chộ cõc dang thuoc v sinh khõ dung cỹa chộ pham, Tnrcmg dai hoc Duoc H Nụi, Tõp I, trangl2; 3840; 86 Bụ mon Bo chộ,(1996), K thuõt bo chộ cõc dang thuụ'c v sinh khõ dung cỹa chộ phõm, Trudng dai hoc Duoc H Nụi, Tõp II, trang 41 Bụ Y Tộ,(2000), Duac diộn Viờt Nam, tõp n i, trang PL 139 Nguyờn Võn Long, (1993),Mụt so võn de vờ hờ phõn tan rõn v ỷng dung k thuõt bo chộ cõc dang thuục , Tap chi duac hoc, sụ 6, trang 10-14 V5 Xuõn Minh, (1999), Dai cuong vờ sinh duoc hoc, Ti lieu sau dai hoc, Trudng dai hoc Duoc H Nụi, trang 3-4 Vỹ Võn Thõo, (1996), Sinh duoc hoc thuục dan, Ti lieu sau dai hoc, Trucmg dai hoc Duoc H Nụi, trang 3-4 Arthur H Kibbe, (2000), Handbook o f pharmaceutical excipient, London United Kingdom, page 165 Barrett- Connor E, Khaw KT, Yen SS, (1986), A prospective study of DHEA sulfat, mortality and cardiovascular diasease N Engl J Med, Dec 11, 315 (24): page 1519-24 Berr C, Lasont S, Dartigue JF, Baulieu EE, (1996), Relationship of DHEA sulfat in elderly with funtional, psychological and mental status and short-term mortality , Proc Natl Acad Sci USA, Novl2, 93(23): pagel3410-13415 10 Bologa L, Roberts E, Sharma J, (1987), DHEA v DHEA sulfat reduces neuronal death and enhance astrocytic differention in brain cell cultures J Neuro Sci Res, 17 (3): page 225 - 34 11 Cleary MP, Zisk JF, (1986), Anti - Obesity effect of two diffộrent levels of DHEA in lean and obese middle - aged female Zucke rats Int J Obes, 10 (3): page 193 - 204 12 Dessi S, Ennas MG, (1997), Influence of DHEA on G-6-PD activity and 3H- thymidine uptake of human lymphocytes invivo , Toxicol Pathol, 15 (2): page 241-244 13 Friess E, Grasser S, Holsboer F, Wiedemann K, (1994), Steriod effects on central neutrons and implications for psychiatrie and neurological disorders Ann NY A cad Sci Nov 30, 746: page 345- 61 14 Gilbert S Banker, Christopher T Rhodes, (1996), Modem pharmaceutic , Marcel Dekker, INC, page 36-37 15 Haji M, I Kuyama S, Nawata H, Sakai Y, Tanaka S, Tanakayanagi R, Yanase T, (1995), Aromatase in bone cell: association with osteoporosin in postmenopausal women J Steroid Biochem Mol Biol, Jun, 53(1-6): page 165-74 16 Herrington DM, (1995), DHEA and coronary atheroscleosis Ann NY, Acad SCI, Dec 29, 774: page 271 - 80 17 Khaw KT DHEA, DHEA sufat and cardiovascular disease, J Endocrinol, 150 suppl: page 149-153 18 Pashko LL, Schwarrtz AG, (1995), Cancer prộvention with DHEA and non - androgộnie structural analogs J Cell Biochem Suppl 22: page 210-7 19 Weksler ME, (1993), Imumune senescenộ and adrenal steriod: immune dysregulation and the action of DHEA in old animais Eur J Clin Pharmacol 45 Suppl, 1: page 21- discussion 43 - 20 (1996), DHEA: a hormon with multiple effects Curr Opin Obstet Gynecol (United States) O ct,, (5): page -4 21 (1996), DHEA and diseases of aging , Drugs & aging (Newzealand), 9/4, page 274-291 22 (2000), Remington, Philadelphia college of pharmacy and science, page 183-197 23 (2001), Merck Index, Merck & Co., INC, page 1377 [...]... Phirong phõp khõo sõt sa bụ dụ tan Theo duac diởn Viờt Nam II, tõp El dụ tan duoc phõn loai nhu sau: Dụ tan Rõt tan Dờ tan Tan Hai tan Khụ tan Rat khụ tan Thuc tờ' khụng tan Sụ' ml dung mụi ho tan lg diroc chõt 1 -1 0 > 1 0 -3 0 > 30 - 100 > 100-1000 > 1 000 - 10 000 > 10 000 * Thu nghiờm 1: Thỹ nguụng tan: 13 Lõy chmh xõc 1 ml dung mụi cn khõo sõt 1 Thờm 100 mg DHEA I Siờu õm 15 phỹt 1 ễn dinh 30 phỹt... dờn mot sụ kờt luõn sau: * Khõ nõng ho tan cỹa DHEA trong mụt sụ dung mụi tinh khiờt nhu sau: DHEA de tan trong dimethyl sulfoxid, ethanol; tan trong ethyl acetat; hai tan trong propylen glycol, triethyl citrat, polyethylen glycol; khụ tan trong isopropyl palmitat, thuc te khụng tan trong dimethicol, parifin lụng, du Silicon, glycerin * Trờn thuc tờ' DHEA khụng tan trong nuục ụ diờu kiờn thuc nghiờm... Ethanol -110 Ethyl acetat -100 Propylen glycol -33,3 Triethyl citrat -33,3 Polyethylen glycol -14,3 Isopropyl palmitat ~7,7 Dimethicol ... khõo sõt sa bụ dụ tan Theo duac diởn Viờt Nam II, tõp El dụ tan duoc phõn loai nhu sau: Dụ tan Rõt tan Dờ tan Tan Hai tan Khụ tan Rat khụ tan Thuc tờ' khụng tan Sụ' ml dung mụi ho tan lg diroc chõt... palmitat ~7,7 Dimethicol