Ảnh hưởng của một số yếu tố đến sinh trưởng và phát triển của loài lan hoàng thảo (dendrobium nobile linndl ) nuôi cấy mô giai đoạn vườn ươm

TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ====== TRẦN THỊ HẢI ANH ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ ĐẾN SINH TRƢỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA LỒI LAN HỒNG THẢO (DENDROBIUM NOBILE LINDL.) NI CẤY MƠ GIAI ĐOẠN VƢỜN ƢƠM KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Kỹ thuật Nông nghiệp HÀ NỘI, 2014 TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ====== TRẦN THỊ HẢI ANH ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ ĐẾN SINH TRƢỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA LỒI LAN HỒNG THẢO (DENDROBIUM NOBILE LINDL.) NI CẤY MƠ GIAI ĐOẠN VƢỜN ƢƠM KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Kỹ thuật Nông nghiệp Ngƣời hƣớng dẫn khoa học TS VŨ NGỌC LAN HÀ NỘI, 2014 Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN ỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận tốt nghiệp này, tơi xin chân thành cảm ơn TS Vũ Ngọc Lan, khoa Nông Học, Trƣờng Đại học Nông Nghiệp Hà Nội tận tình giúp đỡ, hƣớng dẫn tơi q trình thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn tồn thể cán phịng thí nghiệm khoa Nơng Học, Trƣờng Đại học Nông Nghiệp Hà Nội giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho tơi hồn thành khóa luận Tơi xin cảm ơn thầy, giáo trƣờng Đại học Sƣ Phạm Hà Nội truyền đạt kiến thức kinh nghiệm nghiên cứu khoa học cho suốt thời gian học tập Cuối cho tơi bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè ngƣời ln động viên giúp đỡ tơi suốt q trình học tập thực đề tài Do thời gian nghiên cứu hạn chế nên khóa luận chắn khơng tránh khỏi thiếu sót Tơi mong nhận đƣợc góp ý thầy giáo tồn thể anh chị, bạn bè để khóa luận tốt nghiệp tơi đƣợc hồn thiện Hà Nội, ngày 05 tháng 05 năm 2014 Sinh viên thực Trần Thị Hải Anh Trần Thị Hải Anh Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan khóa luận tốt nghiệp đề tài “Ảnh hƣởng số yếu tố đến sinh trƣởng phát triển loài Lan Hồng Thảo (Dendrobium nobile Lindl.) ni cấy mơ giai đoạn vƣờn ƣơm” thực Đề tài nghiên cứu không trùng với đề tài không chép lại Nếu sai xin hoàn toàn chịu trách nhiệm Hà Nội, ngày 05 tháng 05 năm 2014 Sinh viên thực Trần Thị Hải Anh Trần Thị Hải Anh Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Bt Bacillus thuringienis D nobile Dendrobium nobile Lindl RE Robert Ernst 1979 NAA Naphtyl axit TB Trung bình CT Cơng thức D Dendrobium Trần Thị Hải Anh Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Phân hạng mức độ bị đe dọa số loài chi lan Hoàng Thảo Việt Nam 11 Bảng 3.1 Ảnh hƣởng thời vụ trồng đến tỷ lệ sống, khả sinh trƣởng lồi lan Dendrobium nobile Lindl ni cấy mơ giai đoạn vƣờn ƣơm 24 Bảng 3.2 Ảnh hƣởng loại giá thể trồng đến tỷ lệ sống, khả sinh trƣởng loài lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm 26 Bảng 3.3 Ảnh hƣởng ẩm độ giá thể trồng đến tỷ lệ sống, khả sinh trƣởng lồi lan Dendrobium nobile Lindl ni cấy mơ giai đoạn vƣờn ƣơm 28 Bảng 3.4 Ảnh hƣởng loại chế phẩm dinh dƣỡng đến khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl giai đoạn vƣờn ƣơm 29 Bảng 3.5 Ảnh hƣởng loại chế phẩm sinh học phòng trừ sâu bệnh đến khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm 31 Trần Thị Hải Anh Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Lan Hồng Thảo Thạch Hộc (Dendrobium nobile Lindl.) Hình 2.1 Cây invitro lan Hoàng Thảo Thạch Hộc chuẩn bị vƣờn ƣơm 19 Hình 3.1 Ảnh hƣởng thời vụ đến tỷ lệ sống, khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mơ giai đoạn vƣờn ƣơm 25 Hình 3.2 Ảnh hƣởng giá thể đến tỷ lệ sống, khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm 27 Trần Thị Hải Anh Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN MỤC ỤC MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Mục đ ch yêu cầu nghiên cứu Ý nghĩa lí luận thực tiễn đề tài CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chi lan Hoàng Thảo (Dendrobium) 1.1.1 Nguồn gốc, phân bố giá trị sử dụng chi Hoàng Thảo (Dendrobium) 1.1.2 Phân bố chi lan Hoàng Thảo (Dendrobium) Việt Nam 1.1.3 Một số đặc điểm giá trị sử dụng loài lan Hoàng Thảo Thạch Hộc (Dendrobium nobile Lindl.) 1.1.4 Thực trạng khai thác số loài lan Hoàng Thảo địa miền Bắc Việt Nam 10 1.2 Tổng quan tình hình nghiên cứu nƣớc 11 1.2.1 Những nghiên cứu nuôi cấy lan giới 11 1.2.2 Những nghiên cứu nuôi cấy lan nƣớc 12 1.3 Các nghiên cứu nuôi trồng lan Hoàng Thảo 14 1.3.1 Các điều kiện để trồng lan Dendrobium 14 1.3.2 Nghiên cứu nuôi trồng lan Dendrobium sau nuôi cấy mô 17 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG,VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Đối tƣợng, vật liệu nghiên cứu 19 2.1.1 Đối tƣợng 19 2.1.2 Vật liệu 19 2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 20 2.2.1 Địa điểm 20 2.2.2 Thời gian 20 Trần Thị Hải Anh Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN 2.3 Nội dung phƣơng pháp nghiên cứu 20 2.4 Các tiêu theo dõi 23 2.5 Phƣơng pháp xử lí số liệu 23 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24 3.1 Ảnh hƣởng thời vụ trồng đến tỷ lệ sống, khả sinh trƣởng loài lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm 24 3.2 Ảnh hƣởng loại giá thể trồng đến tỷ lệ sống, khả sinh trƣởng lồi lan Dendrobium nobile Lindl ni cấy mơ giai đoạn vƣờn ƣơm 26 3.3 Ảnh hƣởng ẩm độ giá thể đến tỷ lệ sống chất lƣợng lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm 28 3.4 Ảnh hƣởng loại chế phẩm dinh dƣỡng đến khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl giai đoạn vƣờn ƣơm 29 3.5 Ảnh hƣởng loại chế phẩm sinh học phòng trừ sâu bệnh đến khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl 30 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO 33 PHỤ LỤC 36 Trần Thị Hải Anh Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN MỞ ĐẦU í chọn đề tài Hoàng Thảo chi lớn họ lan (Orchidaceae) Chi Hoàng Thảo giới có khoảng 1400 lồi, chủ yếu phân bố lục địa Đông Nam Á đảo thuộc Philippin, Malaixia, Inđơnêxia, Ghinê, Đơng Bắc Ơtxtrâylia Ở Việt Nam biết đến 101 loài thứ, phân bố chủ yếu vùng núi suốt từ Bắc vào Nam số đảo ven biển nƣớc ta Chi lan với dáng đa dạng, phong phú đặc biệt hoa đẹp tƣơi lâu Ngoài ra, số loài Hoàng Thảo vị thuốc dân tộc cổ truyền dùng để chữa sốt nóng, khơ cổ, ăn, giảm thị lực Theo “Dƣợc điển” Trung Quốc năm 1997, nhiều loài đƣợc sử dụng làm thuốc nhƣ: D loddigesii Rolfe, D fimbriatum Hook Var oculatum Hook., D chrysanthum Wall., D candidum Wall ex Lindl., D nobile Lindl (Dẫn theo Đỗ Huy Bích, 2004) [2] D nobile Lindl có chứa alcaloid nhƣ: sesquiterpen, dendrobin (alcaloid chính), nobilin, dendroxin, dendramin, dendrin, 8- hydroxydendroxin, 3-hydroxy – oxydendrobin, 6-hydroxydendroxin Hàm lƣợng dendrobin trồng 0,58% (ở thân), 0,6% (lá) rừng 3,2% (thân), 0,8% (lá), 0,08% (rễ) Thạch Hộc cịn có số alcaloid bậc 4, polysaccharid với hiệu suất 22,7, tinh dầu chứa 54 thành phần, chủ yếu manool Tuy nhiên, trình phát triển kinh tế xã hội, nguyên nhân khác nhau, nhiều loài Hoàng Thảo bị tuyệt chủng bị đe doạ tuyệt chủng Năm 2004, số loài lan thuộc chi lan Hoàng Thảo có danh lục Đỏ “Sách đỏ Việt Nam” nhƣ: Thuỷ Tiên Hƣờng (Dendrobium amabile (Lour.) O‟Brien, 1909), Hạc Vĩ (Dendrobium aphyllum Roxb.), Ngọc Vạn Vàng (Dendrobium chrysanthum Lindl.), Kim Điệp (Dendrobium fimbriatum Hook.), Hoàng Thảo hoa trắng - vàng (Dendrobium nobile var albolu-teum Huyen & Aver 1989)[29],… Tác dụng loại thuốc từ phong lan đƣợc biết đến từ lâu, thuốc đƣợc mơ tả sách nói thuốc Hải Thƣợng Lãn Ông, sách thuốc lƣu truyền dân gian Việt Nam sách thuốc giới Trần Thị Hải Anh Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN 3.2 Ảnh hƣởng loại giá thể trồng đến tỷ lệ sống, khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm Giá thể (chất trồng) trồng hoa lan quan trọng, liên quan đến suốt trình sinh trƣởng phát triển Các loại giá thể trồng lan đƣợc biết đến bao gồm than củi, xơ dừa, gỗ, than, dớn, rêu, rễ bèo, dƣơng xỉ, Nhƣng lan ni cấy mơ giá thể phù hợp để có tỷ lệ sống cao, chất lƣợng tốt? Để trả lời cho câu hịi chúng tơi tiến hành th nghiệm nghiên cứu ảnh hƣởng giá thể đến tỷ lệ sống chất lƣợng vƣờn ƣơm giống lan Hoàng thảo Dendrobium nobile Lindl với loại giá thể: xơ dừa xé chỉ, bột xơ dừa, dớn, ½ Bột xơ dừa+½ dừa Sau tuần theo d i cho kết qua bảng 3.2: Bảng 3.2 Ảnh hƣởng loại giá thể trồng đến tỷ lệ sống, khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm Công thức Tỷ lệ Chiều cao Số /cây Số rễ /cây Hình thái sống (cm) (lá) (rễ) 5,34 5,48 5,34 Lá xanh, rễ (%) CT1: Bột xơ 96,67 dừa CT2: dừa xé 66,67 4,54 4,30 3,55 CT3: Dớn Lá xanh nhạt, không rễ 73,33 5,18 5,18 4,95 Lá xanh, rễ CT4: ½ Bột xơ 90,0 5,27 5,26 dừa+½ dừa Trần Thị Hải Anh 5,22 Lá xanh, rễ 26 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN CT1 CT2 CT4 CT3 Hình 3.2 Ảnh hƣởng giá thể đến tỷ lệ sống, khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm Theo kết bảng 3.2 hình 3.2, trồng giá thể dừa xé (CT2) Dớn (CT3) cho tỷ lệ sống (66,67%; 73,33%) tiêu theo d i thấp, không ra t rễ Tiếp theo, trồng giá thể có ½ Bột xơ dừa+½ dừa (CT4) có tỷ lệ sống nhƣ tiêu theo d i cao (tỷ lệ sống 90,0%; chiều cao 5,27cm; số /cây: 5,26 lá; số rễ đạt 5,22 rễ) Các trồng giá thể Bột xơ dừa (CT1) tạo điều kiện thuận lợi cho sinh trƣởng phát triển (tỷ lệ sống 96,67%; chiều cao TB đạt 5,34 cm; số /cây 5,48 lá; số rễ đạt 5,34 rễ), có màu sắc xanh tƣơi, nhiều rễ Nhƣ vậy, giá thể th ch hợp để trồng in vitro D nobile vƣờn ƣơm giá thể bột xơ dừa (CT1) Trần Thị Hải Anh 27 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN 3.3 Ảnh hƣởng ẩm độ giá thể đến tỷ lệ sống chất lƣợng loài loài lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm Dendrobium nhƣ đa số giống lan khác phát triển tốt điều kiện khơng kh ẩm nhƣng thống kh Loại giá thể khô ẩm úng điều kiện bất lợi cho sinh trƣởng giống Dendrobium Vậy ẩm độ giá thể khoảng đảm bảo cho Dendrobium phát triển tốt? Chúng tiến hành th nghiệm mức độ ẩm giá thể khác nhau: 40%, 50%, 60%, 70% Ghi chú: kiểm tra ẩm độ giá thể máy đo, cung cấp nước cho giá thể vào sáng sớm chiều muộn (sáng trước 9h, chiều sau 16h) Sau tuần theo d i ta có bảng thu hoạch: Bảng 3.3 Ảnh hƣởng ẩm độ giá thể trồng đến tỷ lệ sống, khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm Công thức Tỷ lệ Chiều Số /cây Số rễ/cây sống cao (lá) (rễ) (%) (cm) CT1: 40% 96,67 5,42 5,66 5,00 Lá xanh, rễ CT2: 50% 86,67 5,62 5,54 5,19 Lá xanh, rễ CT3: 60% 60,00 4,80 4,50 4,32 Lá xanh nhạt, rễ CT4: 70% 43,33 4,72 4,69 3,85 Lá xanh nhạt, khơng Hình thái rễ Theo số liệu bảng 3.3 với độ ẩm 60% - 70% in vitro có tỷ lệ chết cao (40 – 56,67%), tiêu sinh trƣởng thấp, có xanh nhạt mọc rễ t không mọc Ở độ ẩm 40% - 50%, tỷ lệ sống cao (86,67% - 96,67%), tiêu sinh trƣởng cao tƣơng đƣơng Trần Thị Hải Anh 28 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN (chiều cao cây: 5,42 cm 5,62 cm; số /cây 5,54 5,66 lá; số rễ /cây đạt 5,0 rễ 5,19 rễ), xanh tƣơi rễ nhiều Nhƣ vậy, độ ẩm th ch hợp giá thể cho nuôi trồng lan D nobile in vitro vƣờn ƣơm bột xơ dừa với ẩm độ 40% - 50% 3.4 Ảnh hƣởng loại chế phẩm dinh dƣỡng đến khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm Trƣớc đƣợc đƣa vƣờn ƣơm, in vitro sống môi trƣờng nhân tạo hồn tồn thuận lợi cho sinh trƣởng Vì vậy, cần phải tạo điều kiện tốt cho th ch nghi với mơi trƣờng bên ngồi Chúng tơi tiến hành th nghiệm tìm đƣợc giá thể phù hợp với vƣờn ƣơm mùn xơ dừa cho có tỷ lệ sống cao ổn định Tuy nhiên, không kể đến yếu tố dinh dƣỡng, dinh dƣỡng đóng vai trị quan trọng việc sinh trƣởng phát triển thân giai đoạn sinh trƣởng cần lƣợng phân bón khác nên tiến hành th nghiệm ảnh hƣởng loại dinh dƣỡng đến tốc độ gia tăng chiều cao lan Dendrobium Nobile Lindl với loại chế phẩm dinh dƣỡng: Antonic, Komic, Đầu Trâu 501(Ghi chú: Phun định kì lần/ tuần) Sau tuần theo d i ta có bảng thu hoạch: Bảng 3.4 Ảnh hƣởng loại chế phẩm dinh dƣỡng đến khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl giai đoạn vƣờn ƣơm Công thức Chiều cao Số /cây Số rễ /cây (cm) (lá) (rễ) CT1: Antonic 5,53 4,63 4,77 Lá xanh, rễ CT2: Komix 5,92 5,17 5,10 Lá xanh, rễ 5,70 4,53 4,77 CT3: Đầu Trâu 501 Trần Thị Hải Anh 29 Hình thái Lá xanh nhạt, rễ Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN Qua bảng 3.4 thấy loại chế phẩm dinh dƣỡng có ảnh hƣởng tốt đến động thái tăng chiều cao cây, số /cây số rễ /cây Phun chế phẩm dinh dƣỡng tốt Komix, giúp có xanh tƣơi, nhiều rễ đạt chiều cao trung bình 5,92cm, số đạt 5,17 số rễ TB 5,10 rễ Nhƣ vậy, loại dinh dƣỡng có tác động khác đến động thái tăng trƣởng chiều cao, số lan rừng địa đƣợc nhân giống kỹ thuật nuôi cấy mô chế phẩm dinh dƣỡng Komix cho mức tăng trƣởng th nghiệm tốt 3.5 Ảnh hƣởng loại chế phẩm sinh học phòng trừ sâu bệnh đến khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm Trong q trình sinh trƣởng phát triển, cịn non đƣợc đƣa từ môi trƣờng l tƣởng, invitro loài lan hoàng thảo Dendrobium nobile Lindl không tránh khỏi xâm nhiễm phá hoại lồi sâu bệnh Để phịng trừ sâu bệnh hại bảo vệ con, cần sử dụng loại chế phẩm sinh học diệt sâu bệnh không gây ô nhiễm môi trƣờng Tuy nhiên thị trƣờng có nhiều loại chế phẩm sinh học, chế phẩm sinh học loại phù hợp với invitro loài lan Hoàng thảo Dendrobium nobile Lindl.? Để trả lời cho câu hỏi này, tiến hành th nghiệm nhằm lựa chọn chế phẩm có hiệu cao sử dụng cho in vitro loài lan hoàng thảo Dendrobium nobile Lindl với chế phẩm sinh học: Zineb 80 WP, VINEEM 1500EC, Bacillus thuringienis, chế phẩm sinh học ủ với dịch chiết ( gừng, tỏi ớt) Ghi chú: Phun định kì ½ tháng lần Sau tuần theo d i kết thu đƣợc tổng hợp qua bảng 3.5: Trần Thị Hải Anh 30 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN Bảng 3.5 Ảnh hƣởng loại chế phẩm sinh học phòng trừ sâu bệnh đến khả sinh trƣởng lan Dendrobium nobile Lindl nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm Công thức Tỷ lệ Chiều cao Số /cây sống (%) (cm) (lá) 73,33 5,44 4,64 4,32 CT2: VINEEM 1500 EC 80 5,83 4,92 4,67 CT3: Bt 90 6,22 5,15 5,04 83,33 6,26 5,28 5,16 CT1: Zineb 80 WP CT4: dịch chiết gừng, tỏi, Số rễ /cây (rễ) ớt Sau tuần nuôi cấy, loại chế phẩm phịng trừ sâu bệnh hại có ảnh hƣởng tốt đến sinh trƣởng lan in vitro vƣờn ƣơm Tuy nhiên, CT1 (Zineb 80 WP) CT2 (VINEEM 1500 EC) khả phịng trừ sâu hại không hiệu chế phẩm sinh học.Do vậy, tỷ lệ sống 83%; chiều cao cây: 6,22- 6,26 cm; số đạt 5,15- 5,28 số rễ /cây 5,04- 5,16 rễ Nhƣ vậy, chế phẩm sinh học Bt dịch chiết gừng, tỏi, ớt có hiệu cao phịng trừ sâu bệnh hại vƣờn ƣơm lan in vitro Trần Thị Hải Anh 31 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN CHƢƠNG KẾT UẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận Qua kết thu đƣợc từ th nghiệm rút kết luận yếu tố tác động t ch cực đến lan Hoàng thảo Thạch Hộc (Dendrobium nobile Lindl.) nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn ƣơm sau tuần trồng nhƣ sau: - Mùa vụ th ch hợp loài D nobile vụ xuân (tháng 3) đạt tỉ lệ sống 93,33%, chiều cao TB 5,15 cm, số 5,57 lá, số rễ 4,89 rễ - Giá thể th ch hợp với D nobile bột xơ dừa với tỉ lệ sống 96,67%, chiều cao TB 5,34 cm, số 5,48 lá, số rễ 5,34 rễ - Độ ẩm giá thể phù hợp với D nobile mức 40- 50% cho tỉ lệ sống 86,6796,67%, chiều cao TB 5,42- 5,62 cm, số 5,54- 5,66 lá, số rễ 5,05,19 rễ - Sử dụng chế phẩm dinh dƣỡng Komix với nồng độ 0,5ml l t tƣới phun 7- 10 ngày lần sau in vitro đƣa vƣờn ƣơm tháng giúp sinh trƣởng tốt, sau tháng loài D nobile đạt chiều cao TB 5,92 cm, số 5,17 số rễ 5,1 rễ - Chế phẩm sinh học phòng trừ sâu bệnh th ch hợp chế phẩm Bt dịch chiết gừng, tỏi, ớt phòng trừ sâu bệnh phun tháng lần Sử dụng chế phẩm cho tỉ lệ sống từ 83,33%- 90%, chiều cao TB 6,22- 6,26 cm, số 5,15- 5,28 lá, số rễ 5,04- 5,16 rễ 4.2 Đề nghị Tiếp tục nghiên cứu sinh trƣởng phát triển hoa lan nuôi cấy mô giai đoạn vƣờn sản xuất để hồn thành quy trình ni cấy mơ lồi lan Dendrobium nobile Lindl Trần Thị Hải Anh 32 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN TÀI IỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt Nguyễn Tiến Bân (1990), Cẩm nang tra cứu nhận biết họ thực vật hạt kín (Magnoliophyta angios permae) Việt Nam, N B Nông nghiệp Hà Nội Đỗ Huy B ch cộng (2004), “Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, tập II trang 803-804, N B Khoa học Kỹ thuật Nguyễn Văn Chƣơng, Trịnh Văn Thịnh (1991), Từ điển bách khoa nông nghiệp, Trung tâm Quốc gia biên soạn, Hà Nội Lê Trần Đức (1997), Cây thuốc Việt Nam, N B Nơng nghiệp Vũ Thị Hồi (2006), Nghiên cứu số khâu kỹ thuật trồng lan cấy mô, Luận văn thạc sỹ Nông nghiệp, Đại học Nơng nghiệp Hà Nội Lê Văn Hồng (2008), Giáo trình ni cấy mơ tế bào thực vật, Đại học Đà Nẵng Phạm Hoàng Hộ (2000), Cây cỏ Việt Nam, N B thành phố Hồ Ch Minh Trần Hợp (1989), Hoa lan, cảnh vấn đề phát triển sản xuất, kinh doanh, xuất khẩu, N B thành phố Hồ Ch Minh Trần Hợp (1990), Phong lan Việt Nam, N B Khoa học Kỹ thuật 10 Trần Hợp (2001), Phong lan Việt Nam, N B Khoa học Kỹ thuật 11 Trần Văn Huân, Văn T ch Lƣợm (2002), Kỹ thuật nuôi trồng lan, N B Thành phố Hồ Ch Minh 12 Trần Văn Huân, Văn T ch Lƣợm (2007), Kỹ thuật nuôi trồng lan, N B Thành phố Hồ Ch Minh 13 Phan Thúc Huân (1989), oa lan cảnh vấn đề phát triển sản xuất kinh doanh xuất khẩu, N B Nông nghiệp thành phố Hồ Ch Minh 14 Dƣơng Đức Huyến (2007), Thực vật chí Việt Nam, – ọ lan (Orchidceae), NXB Khoa học Kỹ thuật Trần Thị Hải Anh 33 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN 15 Dƣơng Công Kiên (2002), Nuôi cấy mô thực vật, N B Đại học Quốc gia TP.HCM 16 Hoàng Xuân Lam (2006), Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật nhằm tăng suất, phẩm chất số giống hoa phong lan Điệp nhập nội, Luận văn Thạc sỹ Nông nghiệp, Đại học Nông nghiệp Hà Nội, 17 Đỗ Tất Lợi (1968), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Khoa học Kỹ thuật 18 Nguyễn Đức Lƣơng Lê Thị Thủy Tiên (2002) 19 Trần Văn Minh (1999), Giáo trình cơng nghệ sinh học Thực vật, Viện Sinh học Nhiệt đới 20 Nguyễn Công Nghiệp (2000), Trồng hoa lan, N B Trẻ 21 Trần Duy Qu (2005), Sổ tay người Nội chơi lan, NXB Nông nghiệp Hà Nội 22 Nguyễn Quang Thạch, Hoàng Thị Nga, Hoàng Minh Tú (2004), Nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống địa lan kỹ thuật ni cấy mơ 23 Nguyễn Quang Thạch, Hồng Thị Nga, Lê Văn Vy, Hoàng Minh Tú (2008), Nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật ni trồng địa lan Cymbidium spp cấy mô, Tạp ch Nông nghiệp Phát triển, tập 24 Nguyễn Thiện Tịch tác giả khác – 1997 25 Khuất Hữu Trung cộng (2007), „‟Nghiên cứu đa dạng di truyền loài lan Hài đốm (Paphiopedium concloro Pfizer) địa Việt Nam‟‟, Tạp chí khoa học cơng nghệ Việt Nam, số 3(12) 2009 26 Đào Thanh Vân, Đặng Thị Tố Nga (2008), Giáo trình hoa lan, NXB Nơng Nghiệp, Hà Nội II Tài liệu tiếng Nƣớc Ngoài 27 Fan Min Fu Yulan (2008), Techniques of soil- less cultivation of Dendrobium nobile Journal of Chinese Urban Forestry, 2008-01, p.30 Trần Thị Hải Anh 34 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN 28 Gong Jian-ying, Yu Xue-biao, Xu da-ping (2007) Study on Selecting Dendrobium for Soilless Culture Substrate Guangxi Forestry Science, 2007-02, p.4 29 Huyen and Aver, 1989 A new varity Dendrobium nobile var alboluteum from the South Vietnam region Bot Zhunrn (Leningrad), 74 (7): 1039-1040 30 Lenna Kechacupt (1987) Effect of Triacontanol on growth of Dendrobium Hepa II flowering size Kasetsart Univ., Bangkok 31 Pan Chun-xiang et al (2009) Effects of Different Culture Substrates of Dendrobium chrysanhum Wall Root Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2009- 16, p.54 32 Uthairatanakij, Jitareerat, Obsuwan (2008) „‟Efficacy of Chitosan spraying on improving quality of Dendrobium Sonia‟‟ No 17 Infloreacence Ishs Acta Horticulturae 776: XXVII International Horticultural Congress- IHC2006: International Symposium on Ornamentals, Now! (31 March 2008- Seoul , Korea) III, Tài liệu internet 33 http://vi.wikipedia.org 34 www.congnghemoi.com.vn 35 http://www.sciencedirect.com/science? 36 www.chonongnghiep.com/forum.aspx?g=posts&t=218 37 www.suckhoedoisong.com.vn 38 www.caythuocquy.infor.vn 39 www.rauquavietnam.vn 40 http://orchid.com.vn 41 www.hoalanvietnam.org 42 www.thuoctrusausinhhoc.com Trần Thị Hải Anh 35 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN PHỤ ỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA TRONG ĐỀ TÀI Xơ dừa dùng làm giá thể Cây lan Dendrobium nobile indl ống nghiệm Bột xơ dừa dùng làm giá thể thí nghiệm Trần Thị Hải Anh 36 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN Cây invitro loài lan Dendrobium nobile indl trồng tr n giá thể bột xơ dừa Cây lan Dendrobium nobile indl giai đoạn vƣờn ƣơm Trần Thị Hải Anh 37 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN XUẤT XỨ , THÀNH PHẦN, CÁCH SỬ DỤNG CÁC OẠI CHẾ PHẨM DÙNG TRONG ĐỀ TÀI Chế phẩm dinh dưỡng sử d ng cho giai oạn vườn ươm STT Loại chế uất xứ Thành phần Cách sử dụng Công ty ADC Hợp chất Nitro -Nồng độ 0,2ml l t 101 Phan Đình Thơm, chất -Thời điểm: Phun Phùng- TP Cần điều tiết sinh vào lúc sáng sớm Thơ trƣởng tổng hợp chiều mát Công ty Cổ N: 3,5% P2O5 -Nồng độ 0,5 ml/lít phần Thiên Sinh, 7% K2O 2,3% -Thời điểm: Phun Đƣờng ĐT 744- Cu: 100ppm vào lúc sáng sớm An Tây- Bến Cát Zn: 200ppm chiều mát - Bình Dƣơng Mg: 800ppm phẩm Antonic Komix Mn: 100ppm Đầu Cơng ty Phân bón N:17%, -Nồng độ: 1ml l t Trâu Bình Điền -Thời điểm: Phun 17-21- C12/21 Tân Kiên, K2O: 0,03%, vào lúc sáng sớm 21 Bình Chánh, Mg: 0,05%, chiều mát Thành phố Zn: 0,05%,Cu: Hồ Ch Minh 0,03%,B: 0,01%, P2O5:21%, Fe: 0,01%, Mn: 0,001%, Mo: 0,002%, PENACP,GA3, αNAA,β NAA Trần Thị Hải Anh 38 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN Chế phẩm sinh học phòng trừ sâu sử d ng cho lan Dendrobium nobile Lindl STT Loại chế phẩm uất xứ Thành phần Tác dụng diệt trừ VINEEM Công ty CP hoạt chất Rầy xanh, 1500EC Thuốc sát trùng Việt Azadirachtin Nhện đỏ, Nam (VIPESCO) 0.15%w/w Bọ trĩ, Bọ x t, Bọ nhảy, Sâu xanh, Bƣớm trắng, Rệp, Sâu lá, Bọ trĩ Bacillus Công ty Valent 60-70 bào tử Sâu khoang, Thuringienis BioSciences- Hoa Kỳ /gam Sâu tơ, (Bt) Sâu xanh, … Chế phẩm Tự chế theo công thức Gừng: tỏi: ớt Sâu khoang, sinh học ủ với Cung cấp wedside :rƣợu Sâu tơ, dịch chiết thuoctrusausinhhoc.com tỉ lệ Bọ nhảy (gừng, tỏi, ớt) Zineb 80 WP 1:1:1:3 Tập đoàn AGRIA SA- ZINEB 80% Đốm trắng, BULGARIA WW Phấn trắng, Mốc sƣơng Trần Thị Hải Anh 39 Lớp K36C Sinh - KTNN Trường ĐHSP Hà Nội Khoa Sinh - KTNN QUY TRÌNH NI TRỒNG AN DENDROBIUM NOBILE LINDL NUÔI CẤY MÔ GIAI ĐOẠN VƢỜN ƢƠM Với kết nghiên cứu tham khảo kết đề tài giai đoạn trƣớc, đƣa quy trình ni trồng lan Dendrobium nobile Lindl ni cấy mơ ngồi vƣờn ƣơm nhƣ sau: Bƣớc 1: Chọn đủ tiêu chuẩn, mùa vụ điều kiện khác Cây cao 4cm, lá, rễ, đƣợc Giá thể bột xơ dừa đƣợc tiến rửa agar, khử trùng hành khử trùng phơi giãi dung dịch KMnO4 0,1% nắng khô ngâm 10 phút dung dịch KMnO 0,1% Ra vào vụ xuân Bƣớc 2: Tiến hành trồng vào khay Khay nhựa có k ch thƣớc Mỗi khay trồng 30 cây, cách 3cm, hàng cách hàng 40 x 25 x 12 cm, lỗ khay 4cm 0,5 x 1,0 cm; lót đáy lƣới có mắt lỗ 0,1 Đặt khay nơi bóng mát, thống x 0,1 cm khí Tiến hành phun ẩm thƣờng xuyên, đảm bảo ẩm độ giá thể trồng ln đạt 40-50% Bƣớc 3: Chăm sóc Phun phân bón vi sinh Komix 0,5 ml/lít, 1lần tuần Cây đạt chiều cao 8cm, trở lên, tiến hành tách chuyển chậu nhỏ riêng lẻ để có đủ diện tích sống Trần Thị Hải Anh Phun luân chuyển thuốc phòng trừ sâu bệnh chế phẩm Bt dịch chiết gừng, tỏi, ớt phòng trừ sâu bệnh 1/2 tháng lần, để phòng sâu bệnh với nồng độ 1gram/lít 40 Phun tƣới nƣớc dạng sƣơng mù để giữ độ ẩm cho giá thể trồng, đảm bảo ẩm độ 40%-50% Lớp K36C Sinh - KTNN ... KHOA SINH - KTNN ====== TRẦN THỊ HẢI ANH ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ ĐẾN SINH TRƢỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA LỒI LAN HỒNG THẢO (DENDROBIUM NOBILE LINDL .) NI CẤY MƠ GIAI ĐOẠN VƢỜN ƢƠM KHĨA LUẬN TỐT... hƣởng số yếu tố đến sinh trƣởng phát triển loài Lan Hồng thảo (Dendrobium nobile Lindl .) ni cấy mơ giai đoạn vƣờn ƣơm” Mục đích y u cầu nghi n cứu *M c ch Đánh giá yếu tố ảnh hƣởng, chọn yếu tố. .. Lan Hoàng Thảo Thạch Hộc (Dendrobium nobile Lindl .) giai đoạn vƣờn ƣơm, tìm yếu tố tốt giúp phát triển tốt xây dựng quy trình ni cấy invitro lan Hoàng Thảo Thạch Hộc (Dendrobium nobile Lindl.)