Tiếp tục nghiên cứu hệ phân tán rắn của dihydroartemisinin và ứng dụng vào dạng thuốc đạn

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI TIẾP TỤC NGHIÊN c ứ u HỆ PHÂN TÁN RẮN CỦA DIHYDROARTEMISININ VÀ ÚNG DỤNG VÀO DẠNG THUỐC ĐẠN KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP DUỢC s ĩ ĐẠI HỌC KIIOÁ 50 1995-2000 Người thực hiện: Bùi Đức Thọ Nguời hướng dẫn: TS Nguyễn Văn Long DSCKI Nguyễn Thị Hồng Hà Nơi thực hiện: Bộ Môn Bào Chế Thời gian thực hiên: 03/03/2000 - 20/05/2000 Hà nội, - 2000 Chú giải chữ viết tắt ART : Artemisinin BP 93 : Dược điển Anh 1993 CDH : Chất diện hoạt CP 88 : Dược điển Trung Quốc 1988 CD : Cyclodcxtrin DD, dd : Dung dịch DHA : D ihydroartem isinin ĐT : Độ tan KST : Ký sinh trùng HP Ị3 CD : Hydroxyl propyl (3 Cyclodextrin HHVL : Hỗn hợp vật lý HPTR : Hệ phân tán rắn HSTT : Hệ số thay MĐ : Mức độ p : Plasmodium PEG : Polyethylenglycol SKD : Sinh khả dụng SR : Sốt rét TĐ : Tốc độ TĐT : Tốc độ tan TLPT : Trọng lượng phân tử USP XXIII W HO : Dược điển Mỹ 23, 1995 : Tổ chức y tế giới MỤC LỤC I Đặt vấn đổ II Tổng quan Bệnh sốt rét thuốc điều trị sốt rct 1.1 Sơ lược tình hình bệnh sốt rét Thế giới Việt Nam 1.2 Các nhóm thuốc diều trị sốt rét hiộn Thuốc chống sốt rét nhóm sesquitcrpcnlacton 2.1 Artemisinin dẫn chất 2.2 Vài nét Dihydroartemisinin 2.2.1 Điều chế 2.2.2 Cấu trúc hoá học tính chất DHA 2.2.3 Tác dụng dược lực DHA 2.2.4 Độc tính DHA 2.2.5 Dược động học DHA 2.2.6 Thử nghiệm lãm sàng Hệ phân tán rắn 3.1 Khái niệm 3.2 Cấu trúc lý hoá hệ phân lán rắn 3.3 Cơ chế giải thích HPTR làm tăngđộ tan dược chất 3.4 Các phương pháp chế tạo HPTR 3.4.1 Phương pháp đun chảy 3.4.2 Phương pháp dung môi 3.4.3 Phương pháp nghiền 3.5 Các chất mang dùng HPTR 3.5.1 Yêu cầu chất mang dùng HPTR 3.5.1 Một số chất mang thường dùng 3.6 Một số kết ứng dụng HPTR Thuốc đạn 4.1 Ưu nhược điểm dạng thuốc đạn 4.1.1 Ư u điểm dạng thuốc dạn 4.1.2 Nhược điểm dạng thuốc đạn 4.2 Các yếu tố dược học ảnh hưởng tới hấp thu thuốc qua đường trực tràng 4.2.1 Ảnh hưởng dược chất 4.2.2 Ảnh hưởng tá dược 4.2.3 Ảnh hưởng chất diện hoạt III Kết thực nghiệm bàn luận Nguyên liệu, phương tiện phương pháp thực nghiệm 1.1 Nguyên liệu 1.2 Máy móc thiết bị 1.3 Phương phỉíp thực nghiệm 2 3 3 4 5 6 6 7 7 8 8 10 11 11 11 11 12 12 12 13 15 15 15 15 15 1.3.1 Phương pháp chế tạo HPTR 1.3.2 Phương pháp chế tạo thuốc đạn 1.3.3 Phương pháp nghiên cứu độ tan tốc độ tan DHA HPTR thuốc đạn 1.3.4 Đo độ rã thuốc đạn 1.3.5 Đo độ chảy thuốc đạn 1.3.6 Theo dõi độ ổn định thuốc dạn DMA Kết thực nghiệm bàn luận 2.1 Xây dựng đường chuẩn DHA 2.2 So sánh khả giải phóng DHA khỏi HPTR với chất mang hỗn hợp PEG HHVL DHA với Suppocire , hỗn hợp PEG 2.3 Nghiên cứu khả giải phóng DHA khỏi HPTR với chất mang hỗn hợp PEG 400 PEG 4000 với tỷ lệ : Tween 20 2.4 Nghiên cứu khả giải phóng DHA khỏi HPTR với đồng chất mang hỗn hợp PEG 400 PEG 4000 với tỷ lệ : Cremophor EL 2.5 Nghiên cứu khả giải phóng DHA khỏi HPTR với đồng chất mang hỗn hợp PEG 400 PEG 4000 với tỷ lệ : 1% CDH không ion hoá 2.6 Nghiên cứu khả giải phóng DHA khỏi thuốc đạn chế với tá dược khác 2.7 Nghiên cứu khả giải phóng DMA khỏi thuốc dạn với tá dược hỗn hợp PEG 400 4000 với tỷ lệ : thêm số chất phụ 2.8 Nghiên cứu khả giải phóng DHA khỏi thuốc đạn với tá dược hỗn hợp PEG 400, 1540 vặ 4000 với tỷ lộ 1,5 : 2,5 : thêm số chất phụ 2.9 Nghiên cứu khả giải phóng DHA khỏi thuốc đạn với tá dược Suppocire thêm 1% CDH không ion hoá 2.10 So sánh khả giải phóng DHA khỏi thuốc đạn với tá dược khác thêm 1% CDH không ion hoá 2.11 Đo độ rã nhiệt độ nóng chảy thuốc đạn DHA 20 mg 2.12 Theo dõi độ ổn định DHA thuốc đạn thực nghiệm IV Kết luận đề xuất Kết luận Đề xuất Tài liệu tham khảo 15 16 17 18 18 18 18 18 19 21 23 24 26 28 29 30 31 33 34 35 35 36 Phần I: ĐẶT VẤN ĐỂ Bệnh sốt rét môt bệnh truyền nhiễm bệnh có tỷ lệ tử vong cao, nước chậm phát triển , có điều kiện kinh tế , xã hội thấp Công tác phòng chống sốt rét nhiệm vụ cấp bách ngành y tế Ihế giới nước ta Trong chiến lược phòng chống sốt rét Việt Nam có nội dung quan trọng đảm bảo nhu cầu thuốc điều trị sốt rét có hiệu lực cao , tác dụng tốt với nhiều chủng ký sinh trùng SR Qua kết nghiên cứu nước cho thấy Artemisinin dẫn chất coi thuốc điều trị sốt rét tốt thập kỷ 90 với hiệu lực điều trị cao , tác dụng tốt với chủng kháng lại thuốc sốt rét kinh điển : Cloroquin , meíloquin Nhóm thuốc WHO đưa vào danh mục thuốc thiết yếu điều trị sốt rét Một dẫn chất ART có nhiều triển vọng Dihydroartemisinin (DMA) với hoạt lực điều trị sốt rét cao ART , tỷ lệ tái phát thấp Ị 19] Tuy nhiên ART , DMA íl tan nước dầu, gây khó khăn việc bào chế dạng thuốc SKD thuốc không ổn định không cao Đã có số công trình nghiên cứu làm thay đổi trạng thái vật lý ART, DHA với kỹ thuật phân tán rắn nhằm tăng ĐT, TĐT ART, DHA trước đưa vào dạng thuốc từ làm tăng SKD thuốc [2,5,6] Tiếp tục theo hướng trên, mục tiêu đề tài bao gồm : - Nghiên cứu ảnh hưởng hỗn hợp chất mang PEG HPTR đến khả làm tăng ĐT , TĐT DHA - Nghiên cứu ảnh hưởng số chất diện hoạt ( chất mang HPTR với chất mang PEG tá dược béo) đến khả làm tăng ĐT, TĐT DHA - ứng dụng nghiên cứu vào dạng thuốc đạn PHẦN II: TỔNG QUAN Bệnh sốt rét thuốc điều trị sốt rét : 1.1 Sơ lược tình hình bệnh sốt rét Việt Nam Thê g iớ i: Bệnh sốt rét ký sinh liùng Plasmodium gây đến nguy hiểm người Theo WHO giới có khoảng 2800 triệu dân sống vùng sốt rét lưu hành , hàng năm có khoảng 200 triệu người mắc bệnh sốt rét , có lừ 1,5 đến 2,7 triệu người chết bệnh này, có 70 - 80% p falciparum gây Việt Nam giới xếp vào nước có sốt rét lưu hành cao, năm 80,90 bệnh SR phát triển trở lại gây nhiều vụ dịch SR lớn Từ năm 1991 với giới Việt Nam thực chuơng trình phòng chống sốt rét quốc gia đến năm 1998 giảm tỷ lệ bệnh SR 4,93/100 dân tỷ lệ tử vong 0,24/100000 dân Hiện công tác phòng chống SR Việt Nam tiếp tục đẩy mạnh [ ] 1.2 Các nhóm thuốc điều trị sốt rét : Dựa vào cấu trúc hoá học chia thành nhóm : -Nhóm arylaminoalcohol : quinin sulfat, quinin bisulfat, meAoquin, haloíatrin -Nhóm 4-aminoquinolein : cloroquin, amodiaquin -Nhóm 8-aminoquinolcin : primaquin, quinocid -Nhóm 9-aminoacrinđin : quinacrin -Nhóm biguanid : proguanin -Nhóm diaminopyrimiclin: pyrimetamin, trimethoprim -Nhóm sulfon sulfamid: dapson, sulfalen, sulfadoxin -Nhóm serquintcr penlacton: artcmisinin, dihydroartemisinin, artesunat, artemether Ngoài có số kháng sinh phối hợp điều trị ,vaccin phòng sốt rét nghiên cứu Với tình hình KST Plasmodium đặc biệt p.falciparum kháng lại nhiều thuốc kinh điển Artemisinin dẫn chât coi thuốc SR có nhiều triển vọng nay.[4] Nhóm thuốc chống SR nhóm sesquinterpenlacton: 2.1 A rtem isinin dẫn chất : Thanh cao hoa vàng (Artcmisia annua L.Artcraccacc) thuốc dã đưực sử dụng từ lâu y học cổ truyền phương đông đến năm 1972 nhà khoa học Trung Quốc chiết Artemisinin (quinghaosu) tinh khiết xác định rõ công thức cấu tạo Hiện Artemisinin dẫn chất Trung Quốc ,các nước Đông nam giới nghiên cứu sử dụng điểu trị SR có hiệu CTCT Artemisinin tlẫn c h ấ t: CI-I3 II ; 1-I3C— R Dẫn chất o A rtem isinin OH DHA A rtem ether Arteeter CII3 R OCOCH2CH2COOM Acid artesunic H ìn h a Cơ chế tác dụng chống SR: vãn chưa giải thích cách rõ ràng, số tác giả cho ART dẫn chất có cấu trúc cầu peroxyd nội phân tử tạo gốc tự do, gốc tự gắn vào màng Plasmodium làm biến đổi ribosom lưới nội bào KST phá huỷ KSTị 19 ] 2.2 Vài nét D ihydroartem isinin: 2.2.1 Điểu chế: DUA bán tổng hợp từ ART cách khử hoá natri borohyđrid môi trường methanol 0-5° c Theo Klayman có tác nhân khử có tính khử chọn lọc lên nhóm lacton C |2 ART Nếu chọn tác nhân khác tạo dãn chất lác đụng chống SR nhóm peroxyd.L19,10J 2.2.2 Cấu trúc hoá học tính chất DHA: CTCT : (hình a) CTPT :C15H240 Trọng lượng phân tủ ': 284 Tên khoa học : (3R, 5aS, 6R, 8aS, 9R, 12S, 12aR)- octahydro-3,6,9-trimethyl 3,12-epoxy 12Hpyranol [4,3jl -12bcnzocycloxepin -10-(3H)-ol Tính chất : DMA tinh thể hình kim màu trắng, vị đắng, không mùi , tan nước dầu, tan tốt ethanol 95° , tan dung môi ether, cloroCorm Trong môi trường kiềm mạnh acid mạnh DHA bị phân huỷ bền vững môi trường trung tính Nhiệt độ nóng chảy : 145 - 150° c Năng suất quay cực [oc ]D20= 140-146° (C= 1,0026 cloroform) C l2 trung tâm bất đối DHA nên lạo hai phân oc p Bằng nhiễu xạ tia X tác giả chứng minh thể rắn DHA tồn dạng p, dung dịch hỗn hợp phan oc p [10,19J 2.2.3 Tác dụng dược lực DHÀ: DHA có tác dụng điều trị tốt tiến hành nghiên cứu p berghei Keyberg 173 chuột có tác dụng với p íalciparum in vitro - Thực nghiệm in vitro : kết cho thấy liều trung bình DHA ART có hiệu p íalciparum nuôi cấy 0,385 ng/ml 5,65 ng/ml, hiệu lực tác dụng DHA cao ART khoảng 14 lần hẳn cloroquin - Thực nghiệm in vivo: tác dụng DHA p.berghei Keyberg 173 (nhạy cảm với cloroquin) cho thấy liều EDÍ0=12,2 mg/kg LD50=0,99 mg/kg Hiệu lực chữa SR DMA gấp 5-7 lần ART Đồng thời qua nghiên cứu lâm sàng DMA tác dụng lốt lên KST kháng cloroquin - Tác dụng co' quan khác: DMA không thấy có tác dụng dược lý rõ hệ thần kinh , hệ tim mạch, hệ hô hấp qua nghiên cứu với liều trung bình có hiệu lực chữa SR chuột mèo Chỉ tăng liều đến 40 mg/kg (gấp 25 lần liều điẻu trị) thấy lác dụng giảm đau làm dịu trôn chuột [10] 2.2.4 Độc tính DHA: - Độc tính: LD S0 DMA dùng đường uống 834,5mg/kg chuột thí nghiệm - Độc tính trường diễn: cho chuột uống liên tục với liều 20mg/kg 60mg/kg hàng ngày thấy chuột bình thường Khi tăng liều đến 180mg/kg (gấp 100 lẩn liều điếu trị người) thấy trọng lượng chuột giảm sút, ăn Các thử nghiệm bệnh lý, huyết học, máu ngoại vi bình thường - Độc tính với bào thai: DHA có độc tính với bào thai chuột giai đoạn nhạy cảm chuột mang thai Kết nghiên cứu suy giống người Tuy nhiên nên thận trọng dùng DHA phụ nữ có thai Nói chung DHA có độc tính thấp an toàn điều trị [ 19,10 ] 2.2.5 Dược động h ọ c: - Nghiên cứu động vật thực nghiệm: DHA hấp thu tốt qua đường uống, tỷ lệ liên kết với protein huyết tương 50% Với liều uống 20 mg/kg kết cho thấy thời gian bán thải 2,10 h thải trừ hoàn toàn sau 3,04 h DHA phân bố đến khắp quan , dãc biệt phân bố nhanh đến gan tim DHA phân bố đến hồng cẩu bị nhiễm p.íalciparum cao so với hồng cầu bình thường DHA thải trừ nguyên dạng qua nước tiểu (82,7%) phần qua phân Khi dùng DHA đồng thời với thuốc khác có tỷ ]ệ liên kết với protein huyết tương cao nhận thấy độc tính không tăng lên - Nghiôn cứu trôn thổ người: DMA hấp (.hu lối qua đường uống với liều 1,1 mg/kg 2,2 mg/kg , nồng độ huyết tương cao đạt sau 1,33 h t l/2 1,63-1,57 h Nếu so với ART SKD ART 1,62- 10,08 % SKD DHA.[10] 2.2.6 Thử nghiệm lâm sàng - Liều uống tối đa DHA cho người lớn khoẻ mạnh ngày 11,0 mg/kg - Tổng liều DHA (uống) điều trị sốt rét ác lính 480 mg ngày Đã thử với 239 bệnh nhân, trung bình hạ sốt sau 14,5-24,7 h sau 64,9-69,2 h thấy không KST sốt rét, tỷ lệ tái phát 1,95% - Điều trị với nhóm 104 bệnh nhân kết cho thấy trường hợp bệnh tim mạch ( tắc nhĩ th ấ t) bệnh SR gây thuốc.[10] Tóm lại DHA dẫn chất ART có hiệu chữa sốt rét t ố t , tác dụng mạnh với thể vô tính hồng cầu nên cắt sốt nhanh mạnh với Plasmodium kháng lại Clorquin nhiều thuốc SR kinh điển khác DHA dộc , an toàn tỷ lệ tái phát thấp sử dụng điều trị SR Hệ phân tán rắn[ 7] 3.1 Khái niệm: HPTR hộ dó inộl hay Iiliiổu dược chất plĩôn tán clĩấl mang khung (matrix) trơ mặt tác dụng, chế tạo phương pháp thích hợp 3.2 C ấu trú c lý hoá H PTR: Dựa vào tương tác dược chất chất mang, chia thành ố loại : • Hỗn hợp eutecti đơn giản • Các dung dịch rắn • Các dung dịch hỗn dịch kiểu thuỷ tinh • Các kết tủa vô định hình chất mang kết tinh nồng độ Twcen 20 đến 3% tlù mírc dộ lốc ctộ giải phóng DIIA khỏi IIPTR lại giảm Điều giải thích sau: thêm CDH vào hệ làm thay đổi tính lliấm dược chất làm lăng ĐT, TĐT DUA Khi tâng lỷ lệ CD1I hệ , tính thấm dược chất tăng , làm tăng khả hoà tan Nhưng tăng CDH lên cao nhiều nồng độ mixel tới hạn làm giảm giải phóng hoạt chất - Kết phù hợp với nghiên cứu tác giả [17 ], sử dụng Tvveen 20 với nồng độ 0,5%, 1%, 3%, 5%, 10% thành phần công thức gel nhằm tăng khả giải phóng Nonivamide acetat Kết nghiên cứu in vitro cho thấy mức độ tốc độ giải phóng dược chất khỏi hệ cao với nổng độ Tween 20 5% 2.4 Nghiên cứu khả giải phóng DHA khỏi HPTR với đồng chất mang hỗn hợp PEG 400 PEG 4000 theo tỷ lệ :7 Cremophor EL: Tiến hành khảo sát tốc độ giải phóng DHA khỏi HPTR với đồng chất mang hỗn hợp PEG 400 - PEG 4000 theo tỷ lệ : Cremophòr EL với tỷ lệ 0,5%, 1%, 3% theo phương pháp ghi phần (1.3.3) Kết trình bày bảng hình B ảng 4: Khả năn ẹ giải phóng DHA khỏi HPTR với đồng chất mang hỗn hợp PEG 400 - PEG 4000 Cremophor EL Tỷ lệ Cremophor EL (%) 0,5 22,4 21,7 22,2 21,4 10 25,8 31,9 43,2 34,5 Tỷ lệ % DHA giải phóng Thời gian (phút) 15 30 45 51,1 36,5 44,7 47,3 55,3 40,9 54,7 69,6 76,5 57,3 66,0 41,1 23 60 56,8 66,0 78,0 69,9 20 40 60 80 thời gian (phút) H ìn h 4: Đồ thị biểu diễn tốc độ giải phóng DHA khỏi HPTR với đồng chất mang hỗn hợp PEG 400 - PEG 4000 Cremophơr EL Nhận xét: - Kết cho thấy giống kết khảo sát phần (2.3) thêm Cremophor EL làm đồng chất mang hỗn hợp PEG 400 - PEG 4000 mức độ tốc độ giải phóng DHA khỏi HPTR tăng lên Khi tăng nồng độ CDH HPTR tốc độ giải phóng DMA tăng theo Tuy nhiên , nồng độ Cremophor EL thích hợp 1% Nếu liếp lục tăng nồng độ Cremophor EL đến 3% mức độ tốc độ giải phóng DHA khỏi HPTR lại giảm 2.5 Nghiên cứu khả giải phóng DHA khỏi HPTR với đồng chất mang hỗn hợp PEG 400 PEG 4000 theo tỷ lệ 3:7 1% CDH không ion hoá: Trong công trình nghiên cứu trước [2,5,6] tác giả kết luận sử dụng CDH không ion hoá làm đồng chất mang HPTR nhằm làm tăng ĐT, TĐT DMA ià thích hợp Chúng lôi mở rộng sử clụng CDH : 24 Cremophor EL, Tween 20, PEG 400 stearat với nồng độ 1% làm đồng chất mang hỗn hợp PEG 400 - PEG 4000 theo tỷ lệ 3:7 HPTR DHA Tiến hành khảo sát so sánh khả giải phóng DHA khỏi hệ theo phương pháp ghi mục (1.3.3), kết trình bày bảng hình Bảng 5: Kliả nătiỊỊ giải phónụ DUA va khỏi HPTR với đồng chất mơng hỗn hợp PEG 400 - PEG 4000 !% CDH khổng ion hoá Các CDH (1%) Không CDH Tween 20 Cremophor EL PEG 400 stearat 22,4 27,6 22,2 25,2 Tỷ lệ % DHA giải phóng Thời gian (phút) 15 45 10 30 44,7 51,1 25,8 36,5 42,2 58,3 50,4 72,9 43,2 54,7 69,6 76,5 37,1 42,4 52,7 46,8 60 56,8 76,0 78,0 61,4 % -| 80 60 nr\ c 70 - t 60- '2 50 - < 40- t>0 p ãi- 20 - 10 - 00 Hình 5: Đ thị biêu cliễỉỉ tốc độ íỊÌải phóng cứa DHA khỏi HPTR với đồng chất mưng hỗn hợp PEG 400 - PEG 4000 / % CDH không ion hoa Nhận xét: - Từ kết , nhận thấy CDH không ion hoá sử dụng iàm lăng mức độ tốc độ giải phóng DMA khỏi HPTR, thứ tự dược xếp sau: Crcmophor OL > Twccn 20 > PEG 400 slcarat > không CDII - Với nồng độ 1% so với chíít, Cremophor EL làm tăng tốc độ giải phóng DHA tốt (tăng khoảng 20 % so với HPTR CDH) - Dựa vào kếl thu dược chọn lựa Cremophor EL Tween 20 làm đồng chất mang cho IIPTR chứa DHA đưa vào dạng thuốc đạn 2.6 Nghiên cứu khả giải phóng DHA khỏi thuốc đạn chê với tá dược khác nhau: Chúng chọn tá dược để chế tạo thuốc đạn DHA 20 mg theo phương pháp ghi mục (1.3.2) là: + Hỗn hợp HPTR PEG 400 PEG 4000 theo tỷ lệ 3:7 + Hỗn hợp I IPTR PEG 400, PEG 1540 PEG 4000 theo tỷ lệ 1,5: 2,5: + Suppocire Kết khảo sát khả giải phóng DHA khỏi thuốc đạn DHA 20 mg chế với tá dược trôn clược trình bày bảng hình B ảng 6: So sánh khả giải phóng DHA rơ khỏi thuốc đạn c h ế với tá dược khác Tá dược Tỷ lệ % DHA giải phóng llmốc dạn DMA Tliòi gian (phút) 20 mg 10 15 30 45 60 HPTR PEG( 400 + 4000) 25,5 31,7 41,3 54,8 66,3 70,2 HPTR PEG (400 +1540 +4000) 26,0 31,7 33,7 45,2 52,9 58,7 Suppocirc 12,5 18,3 26,0 27,9 31,7 31,7 Nhận xét: - Qua kết bảng hình cho thấy thuốc đạn chế với tá dược hỗn hợp PEG ciưứi dạng I-IPTR clồu làm mức độ tốc độ giải phóng DMA cao khoảng lần so với tá dược Suppocire, thứ tự xếp sau: HPTR PEG (400 + 4000) > HPTR PEG ( 400+ 1540 + 4000) > Suppocire 26 - Tuy hỗn hợp tá dược PEG 400, 1540 4000 có khả giải phóng DHA hỗn hợp PEG 400 4000 chất thích hợp để làm tá dược thuốc đạn thời gian (phút) H ình 6: Đồ thị biểu diễn tốc độ giải phóng DHA khỏi thuốc đạn chê với (ả dược khác 2.7 Nghiên cứu khả giải phóng DHA khỏi thuốc đạn chế với HPTR gồm đồng chất mang hỗn hợp PEG 400 - PEG 4000 theo tỷ lệ :7 vớỉ sô chất phụ: Chúng lôi dùng HPTR gồm hỗn hợp PEG 400 - 4000 theo tỷ lệ 3:7 làm dược thuốc đạn theo phương pháp ghi mục ( 1.3.2 ) Đồng thời chúng có thêm chất phụ : Tween 20( ỉ%), Cremophor EL(1%) beta- cyclodextrin (theo tỷ lệ 1: so với dược chất) Kết khảo sát khả giải phóng DHA khỏi thuốc đạn trình bày bảng hình 27 B ảng 7: So sánh khả giải phóng DMA rơ khỏi thuốc đạn ch ế với tá dược HPTR với đồng chất mang hỗn hợp PEG (400+ 4000) chất phụ Tỷ lệ % DMA giải phóng Tá dược HPTR PEG (400 — 4000) Thời gian (phút) 10 15 30 45 60 Không chất phụ 25,5 31,7 41,3 54,8 66,3 70,2 1% Tween 20 29,8 43,3 47,1 66,3 74,0 77,9 1% Cremophor EL 31,7 47,1 60,6 76,0 91,3 91,3 Ị3-C D (1:5) 29,5 43,0 53,2 70,0 77,9 85,5 % 100 A - T - - T - 20 40 60 80 thời gian (phúl) Iỉỉn h 7: Đồ thị biểu diễn tốc độ giỏi phóng DHA rơ khỏi thuốc đạn ch ế với tá dược HPTR với chất mang PEG (400+ 4000) s ố chất phụ N hận xét: - Kết thu cho thấy mức độ tốc độ giải phóng DHA khỏi thuốc đạn tăng lên đáng kể thêm chất phụ vào tá clược thuốc đạn Khả làm tăng tốc độ giải phóng DHA khỏi thuốc đạn chất phụ xếp theo thứ tự là: Cremophor EL > beta-cyclođextrin > Tween 20 > không chất phụ Cremophor EL (1%) làm tăng tốc độ giải phóng DHA khỏi thuốc đạn cao ( khoảng 20% so với thuốc đạn chất phụ) 28 - Khi dùng beta- cyclodextrin làm đồng chất mang HPTR PEG làm tá dược thuốc đạn , kết thu cho thấy mức độ tốc độ giải phóng DHA khỏi thuốc đạn tăng khoảng 15 % so với thuốc đạn không cho thêm chất phụ Kết phù hợp với nghiên cứu tác giả [13 ] sử dụng beta-cyclodextrin làm chất mang HPTR với dược chất Diazepam ứng dụng vào dạng thuốc đạn, kết nghiên cứu in vitro cho thấy ĐT, TĐT chất thuốc đạn tăng lên đáng kể - Cremophor EL P-cyclođextrin ỉà chất phụ chọn lựa đưa vào làm đồng chất mang HPTR với PEG nhằm tăng ĐT, TĐT dược chất khỏi dạng thuốc thời thể chất thích hợp cho dạng thuốc đạn với điều kiện khí hậu nước ta 2.8 Nghiên cứu khả giải phóng DHÀ khỏi thuốc đạn chê' từ HPTR với đồng chất mang PEG 400, PEG 1540 , PEG 4000 theo tỷ lệ 1.5 : 2,5 : số chất phụ: Tiếp tục tiến hành so sánh khả giải phóng DHA khỏi thuốc đạn với tá dược HPTR với đồng chất mang PEG 400, 1540 4000 theo tỷ lệ 1.5 : 2,5: có chất phụ : Tween 20( 1%), Cremophor EL(1%) pcyclodextrin (theo tỷ lệ 1: so với dược chất) Kết trình bày bảng hình B ảng 8: So sánh khả qiảỉ phóng DHA khỏi thuốc đạn c h ế từ HPTR với chất mang PEG (400+J540+4000) sô chất phụ Tádươc HPTR PEG( 400 + 1540 + 4000) Không chất phụ 1% Tween 20 1% Cremophor EL Ị5 - CD (1:5 ) 26,0 27,9 33,7 31,7 10 31,7 37,5 37,5 33,7 Tỷ lệ % DHA giải phóng Thời gian (phút) 15 30 33,7 45,2 47,1 56,7 64,4 52,9 43,3 60,0 29 45 52,9 60,6 76,0 66,3 60 58,7 66,3 83,7 68,8 Nhất mang PEG (400+1540+4000) chất phụ tăng mức độ tốc độ giải phóng DĨIA khỏi thuốc dạn lôn lất nhiổu, llrứ lự làm lũng dược xếp là: Cremophor EL > P-cyclođextrin > Tween 20 > không chất phụ H ình 8: Đồ thị biểu diễn tốc độ giải phóng DHA khỏi thuốc đạn c h ế với HPTR với đồng chất mang PEG (400+ỉ 540+4000) s ố chất phụ 2.9 Nghiên cứu khả gĩảỉ phóng DHA khỏi thuốc đạn chế với tá dược Suppocire 1% CDH không ion hoá: Thuốc đạn DHA 20 mg với tá dược Suppocire thêm 1% CDH ỉà : Twcen 20, Cremophor EL Chúng so sánh khảo sát khả giải phóng DHA khỏi thuốc đạn , kết trình bày bảng hình B ảng 9: So sánh khả nâng giải phóng DMA khỏi thuốc đạn với tả dược Suppocire /% CDH không iơn hóa Đan Tá Dươc Suppocire Không CDH 1% Tween 20 1% Cremophor EL 12,5 18,3 18,3 Tỷ lệ % DHA giải phóng Thời gian (phút) 15 30 45 10 31,7 18,3 26,0 27,9 26,0 28,0 35,6 37,5 31,7 35,6 26,0 26,0 30 60 31,7 43,3 35,6 thời gian (phút) H ìn h 9: Đồ thị biểu diễn tốc độ giải phóng DHA khỏi thuốc đạn với tá dược Suppocire 1% CDH không ion hoá Nhận xét: - Kết cho thấy Twecn 20 Crcmophor EL làm tăng mức độ lốc độ giải phóng DHA lên giống trường hợp với tá dược hỗn hợp PEG Nhưng có điểm khác với tá dược Suppocire , Tween 20 làm tăng tốc độ giải phóng DHA khỏi thuốc đạn khoảng 10% so với thuốc đạn CDH cao Cremophor EL với nồng độ 1% 2.10 So sánh khả giải phóng DHA khỏi thuốc đạn chê vói tá dược khác có 1% CDH không ion hoá: Từ kết khảo sát ỏ' tiến hành so sánh mức độ tốc độ giải phóng DHA khỏi thuốc đạn chế với tá dược khác có 1% CDH Tween 20 Cremophor EL Kết trình bày bảng 10,11 hình 10, 11 31 B ảng 10: Sơ sánh khả ììăng giải phóng DMA khỏi thuốc đạn với tá dược khác 1% Cremophor EL Tá dược HPTR' PEG (400 + 4000 +1540) I-IPTR PEG (400 + 4000) Suppocire 33,7 31,7 18,3 Tỷ lệ % DHA giải phóng "hời gian (phút) 10 15 30 45 37,5 52,9 64,4 66,3 47,1 60,6 76,0 91,3 26,0 26,0 31,7 35,6 60 68,3 91,3 35,6 H ình 10: Đồ thị biểu diễn tốc độ qicíi phóng DHA khỏi thuốc đạn với tá dược khác ì % Cremophor EL B ảng 11 : Sơ sánh khả nâng giải phóng DMA khỏi thuốc đạn với tá dược khác 1% Tween 20 Tỷ lộ % D IIA giải phóng Tá dược Thời gian (phút) HPTR PEG (400 + 4000) 29,8 10 15 30 45 60 43,3 47,1 66,3 74,0 85,5 HPTR PEG (400 + 0 + ) 27,9 37,5 47,1 56,7 60,6 66,3 Suppocire 18,3 26,0 28,0 35,6 37,5 43,3 Nhận xét: - Kết phần cho thấy thuốc đạn chế HPTR với chất 32 mang hỗn hợp PEG có thêm hay không thêm chất phụ cao so với thuốc dạn tá dược Suppociic - Mức độ tốc độ giải phóng DHA khỏi thuốc đạn chế HPTR với đồng chất mang PEG (400 + 4000) 1% Cremophor EL tốt nhất, tăng khoảng gấp lần so với tá dược Suppocire H ình 11: Đồ thị biểu diễn tốc độ giải phóng DHA khỏi thuốc đạn với tá dược khác vả 1% Tween 20 2.11 Đo độ rã nhiệt độ nóng chảy thuốc đạn DHA 20 mg: Bảnq 12 : Đo độ rã nhiệt độ nóng chảy thuốc đạn DHA thực nghiệm Tá dược Suppocire Các HPTR: PEG(400 : 4000 = :7 ) PEG(400 : 1540: 4000 = 1,5:2,5:6) PEG(400 : 1540: 4000 = 1,5:2,5:6) 1% Cremophor EL PEG(400 : 1540: 4000 = 1,5:2,5:6) P-CD 33 Thời gian lã (phút) 15 Nhiêt đô nóng chảy (°C ) 38,0 17 22 18 48,2 52,0 49,5 17 52,3 Kết bảng 12 cho thấy thuốc đạn DMA chế tạo với tá đạt yêu cầu độ rã theo CP 88 đồng thời tá dược HPTR PEG(400 : 1540: 4000 = 1,5:2,5:6) có độ chảy cao , thích hợp cho việc chế tạo bảo quản thuốc đạn diều kiện khí hậu nóng ẩm nước ta 2.12 Theo dõi độ ổn định DIIA thuốc đạn thực nghiệm: Chúng tiến hành sắc ký lớp mỏng với viên thuốc đạn DHA 20mg ( cuả lô thuốc bảo quản nhiệt dộ phòng thí nghiệm sau 20 ngày ) chế lạo với tá dược : + HPTR PEG(400 : 4000 = :7 ) + HPTR PEG(400 : 1540: 4000 = 1,5:2,5:6) Kết trình bày hình 13 H ình 13 : sắc kỷ đổ + 1: DMA chuẩn + 2: tá dược HPTR PEG(400 : 1540: 4000 =1,5: 2,5:6) thêm 1% Cremophor EL + 3: tá dược HPTR PEG(400 : 1540: 4000 =1,5: 2,5:6) thêm cyclodextrin (1:5) Nhận xét: sắc đồ thu cho thấy vết sắc ký có hình dạng, kích thước màu sắc không thấy xuất vết lạ Có thể sơ kết luận DHA không bị biến đổi trình chế tạo thuốc đạn sau thời gian 20 ngày bảo quản diồu kiộn bình thường 34 Phần IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUÂT l.K ế t luận: Sau thời gian thực nghiệm lút số kết luận sau: - Độ tan tốc độ tan DHA HPTR với chất mang hỗn hợp PEG cao hẳn HHVL DHA với Suppocire hỗn hợp PEG tương ứng - Khi chế tạo HPTR DHA tỷ lệ PEG có TLPT khác làm chất mang có ảnh hưởng đến khả hoà lan DHA HPTR Khi tăng tỷ lệ PEG có TLPT thấp khả hoà tan DHA tăng theo - Dùng CDH làm đồng chất mang HPTR với hỗn hợp PEG tốc độ giải phóng DHA khỏi HPTR cao hẳn so với sử dụng chất mang Kết cho thấy với nồng độ 1% Tween 20 Cremophor EL làm đồng chất mang HPTR ,tốc độ giải phóng DHA tăng khoảng 20% so với PEG Khi tăng giảm nồng độ CDH đến 3% hay 0,6% mức độ, tốc độ giải phóng DHA HPTR không tăng mà thấp (khoảng 10%) so với sử dụng 1% CDH tương ứng - Thuốc đạn DBA 20mg chế từ I IPTR với chất mang hỗn họp PECỈ có tốc độ giải phóng DHA cao khoảng lần hẳn so với tá dược Suppocire -Tốc giải phóng DHA khỏi thuốc đạn chế từ HPTR với PEG có thêm 1% Cremophor EL cao khoảng 15% so với Tween 20 Nhưng với tá dược Suppocire kết ngược lại Tween 20 tốt Cremophor EL - Khi sử dụng HPTR chế với cyclodextrin PEG với tỷ lệ dược chất : chất mang = 1: 5, để điều chế thuốc đạn, mức độ tốc độ giải phóng DHA khỏi thuốc đạn tăng khoảng 10% so với sử dụng riêng chất mang tương ứng - Thuốc đạn chế với HPTR gồm hỗn hợp chất mang PEG (400 :1540 : 4000), 1% Cremophor EL [3- cyclođexlrin (1:5), ổn định trình chế tạo bảo quản điều kiện bình thường sau 20 ngày Đề xuất: - Tiếp tục theo dõi độ ổn định DMA dạng thuốc đạn chế tù' HPTR 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ môn bào chế trường đại học Dược Hà Nội , Sinh dược học kỹ thuật bào chế , Chuyên đề sau đại học, 1998 Ngô Hùng Cường , Công trình tốt nghiệp dược sỹ đại học , 1996 Dược điển Trung Quốc, 1988 Hoàng Kim Huyền, Sử dụng thuốc điều trị sốt rét, Chuyên đề dược lâm sàng, Tủ sách sau đại học trường, Đại học Dược Hà Nội , 1996 Nguyễn Thị Hương , Công trình tốt nghiệp dược sỹ đại học ,1996 Đỗ Minh cộng , Góp phần nghiên cứu ứng dụng hệ phân tán rắn kỹ Ihuậl điồii chế tliuốc dạn Arlcmisinin , Y học thực hành , , 1996 , 30 31 Nguyễn Văn Long , Một số vấn đề hệ phân tán rắn , Dược học, 6, 1993, 14 — 16 Trần Quốc Tuý, Lê Đình Công, Kết phòng chống sốt rét Việt Nam từ 1968 - 1998, Tạp chí sinh học, 6, 1999, - 10 c De Muynck and J p Remon - Influence of fat composition on the melling behaviour and on the in vitro release of indomethacin suppositoria , 6th International conĩerence on pharmaceutical technology, - 1992, Paris, 398 -404 C o tec A c o m p r e h e n siv e report o f d ih y d ro a rtem isin in stu d y - B eijn g , C hina 11.F Fawaz , F Bonini, Bioavailability of Noríloxacin from PEG 6000 solid dispersion and cyclodextrin inclution complexes in rabbits , Int J Pharm , 132, 1996,271 - 275 12.H p Gerrit et al , Preparation pharmaceutical application of linear dextrin III Drug realease ữom fatty supposittory bases containing amylodextrin, Pharm Res., 11(1), 1994, 108 -110 13.L J M Tasic et al , The influence of beta - cyclodextrin on the solubility and dissolution rate of paracetainol solid dispersion, J Pharm Pharmcoỉ ,1992, 44, 52- 55 14.M Naji et al , Release of ibuprofen from PEG solid dispersions , Drug Develop Ind Pharm , 13(12) , 1987, 2263 - 2275 15.M J Arias et al , Dissolution properties with PEGs behaviour of triamterene in solid dispersions with PEG , Phar Acta Helv.,7 , 1996, 235 -239 16.M ưrban et al, Iníluence of enhancers of physico chemical properties and on the release of suppositories of clormipramine , Drug Develop Ind Pharm., 17, 1991 , 1325 -1342 17.Pao Chu Wu and Jia You Fang , In vitro effect of penetration enhancers on sodium nonivainide acetat in rat skin , Biol Pharma Bull., 18(12), 1995, 1790 - 1792 18.Polyethylenglycol , Hanbook of pharmaceutical Excipients, 1995 , 209 - 213 19.p J de Vrics and Tran K Dien , Clinnical pharmacology and thcra potential of ART and its derivaties in the treatment of malaria, Drugs, 52(6), 1996, - 20.Y Nozawa , Effects of roll mixing with beta- cyclodextrin on enhancing solubilities of waler insoluble drugs , Pharmà Acta Helv., 64(1), 1989, 24 29 21.J Sallai , Experiences wilh rectal use trimethoprim, J Pharm Pharmacol , 1997 , 49,496 — 499 22.s Anguinano and ỉgea, The properties of solid dispersion of clofibrate in PEGs , Pharm Acla Iỉelv., 70 ,1995 , 57 -66 23.s ỉ Saleh , Preparalioĩi and cvalualion of metformine hydroclorid suppositories, 6lh International conference on pharmaceuticaỉ technology , Paris - 1992,405 -414 24 United State Pharmacopoeia XXIII , 1995 [...]... Diazepam và ứng dụng vào dạng thuốc đạn, kết quả nghiên cứu in vitro cho thấy ĐT, TĐT của được chất trong thuốc đạn tăng lên đáng kể - Cremophor EL và P-cyclođextrin ỉà 2 chất phụ chúng tôi chọn lựa đưa vào làm đồng chất mang trong HPTR cùng với PEG nhằm tăng ĐT, TĐT của dược chất ra khỏi dạng thuốc và đổng thời thể chất cũng thích hợp cho dạng thuốc đạn với điều kiện khí hậu nước ta 2.8 Nghiên cứu khả... quản 4.1 Ưu nhược điểm của dạng thuốc đạn: Thuốc đạn là dạng thuốc đưa thuốc vào cơ thể qua đường trực tràng, hoạt chất được giải phóng và hấp thu qua niêm mạc , có thể gây tác đụng tại chỗ hay toàn thAn 4.1.1 Ưu điểm của dạng thuốc đạn: - Thuốc được hấp Ihu Irực liếp vào luán hoàn nôn rất thích hợp với các được chất gây kích ứng dạ dày, ruột; dược chất có mùi khó chịu dễ bị phân huỷ bởi dịch dạ dày,... làm lá dược thuốc dạn dã được ghi trong USP23 và BP93 Đặc biệt sử dụng các PEG làm tá dược thuốc đạn sẽ đạt được hai mục tiêu là làm chất mang trong HPTR và đồng thời làm tá dược thuốc đạn có độ chảy cao Một số công trình nghiên cứu thuốc đạn có sử dụng tá dược PEG điển hình: - c Dc Muynck và J p Rcnon [9 J ngliiôn cứu sử dụng Suppoeirc AP và hỏn hợp tá dược PEG làm (á được thuốc đạn và kết qủa thấy... HPTR không có CDH) - Dựa vào kếl quả thu dược chúng tôi chọn lựa Cremophor EL và Tween 20 làm đồng chất mang cho IIPTR chứa DHA và đưa vào dạng thuốc đạn 2.6 Nghiên cứu khả năng giải phóng của DHA ra khỏi thuốc đạn được chê với các tá dược khác nhau: Chúng tôi chọn 3 tá dược để chế tạo thuốc đạn DHA 20 mg theo phương pháp ghi trong mục (1.3.2) là: + Hỗn hợp HPTR PEG 400 và PEG 4000 theo tỷ lệ 3:7... phóng của DHA ra khỏi thuốc đạn cao nhất ( khoảng 20% so với thuốc đạn không có chất phụ) 28 - Khi dùng beta- cyclodextrin làm đồng chất mang trong HPTR cùng PEG làm tá dược thuốc đạn , kết quả thu được cho thấy mức độ và tốc độ giải phóng của DHA ra khỏi thuốc đạn cũng tăng khoảng 15 % so với thuốc đạn không cho thêm chất phụ Kết quả này cũng phù hợp với nghiên cứu của các tác giả [13 ] đã sử dụng. .. HPTR với dược chất Ibuprofen và kết quả đã làm tăng ĐT, TĐT của dược chất in vi (ro lên đáng kể 10 Ở Việt Nam cũng có một sô công Irình nghiôn cứu ứng dụng kỹ thuẠí chế HPTR dổ làm tăng ĐT, TĐT của một số dược chất như: Paracelamol, Diazcpam, Griseoíìulvin, ART , DMA., trước khi đưa vào dạng thuốc và cũng đã thu được một số kết quả bước đầu 4 Thuốc đạn: Dạng thuốc đặt là dạng thuốc đã có từ khá lâu (thế... 7: Đồ thị biểu diễn tốc độ giỏi phóng của DHA rơ khỏi thuốc đạn được ch ế với tá dược là HPTR với đổng chất mang PEG (400+ 4000) và một s ố chất phụ N hận xét: - Kết quả thu được cho thấy mức độ và tốc độ giải phóng DHA ra khỏi thuốc đạn tăng lên đáng kể khi thêm các chất phụ vào tá clược thuốc đạn Khả năng làm tăng tốc độ giải phóng của DHA ra khỏi thuốc đạn của các chất phụ được sắp xếp theo thứ... Wieirk, Eissens và cộng sự [12] đã nghiên cứu ứng dụng chế tạo thuốc đạn cliazcpam Thành phẩn dược cliAÌ dược chế tạo IIPTR với chất mang là HP-PCD và y-CD Kết quả cho thấy dược chất giải phóng ra khỏi thuốc đạn chế với IIPTR cao hơn so với dạng dược chất tinh khiết chế thuốc đạn bằng phương pháp thông thường 14 PHẦN III : KẾT QUẢ THỤC NGHIỆM VÀ BÀN LUẬN i Nguyên liệu, phuưng tiện và phiíưng pháp... trình nghiên cứu về thuốc đạn trong những năm gần đây: - M Ưrban và cộng sự [14] dã nghiên cứu so sánh ảnh hưởng của một số CDII ờ những nồng độ khác nhau đến ĐT, TĐT của Clomipramine lù' thuốc đạn chế với Suppocirc Kết quả nghiôn cứu in vivo cho thấy các CDII đồu làm tăng ĐT của dược chất ở những mức độ khác nhau, trong đó tween 80 (2%) và Brij 35 (1%) làm tăng ĐT cao nhất - Đặc biệt là công trình của. .. phóng của DHA ra khỏi thuốc đạn được chê vói các tá dược khác nhau và có 1% CDH không ion hoá: Từ các kết quả khảo sát ỏ' trên chúng tôi tiến hành so sánh mức độ và tốc độ giải phóng của DHA ra khỏi thuốc đạn chế với các tá dược khác nhau và có 1% CDH là Tween 20 và Cremophor EL Kết quả được trình bày trong bảng 10,11 và hình 10, 11 31 B ảng 10: Sơ sánh khả ììăng giải phóng của DMA ra khỏi thuốc đạn ... 3.6 Một số kết ứng dụng HPTR Thuốc đạn 4.1 Ưu nhược điểm dạng thuốc đạn 4.1.1 Ư u điểm dạng thuốc dạn 4.1.2 Nhược điểm dạng thuốc đạn 4.2 Các yếu tố dược học ảnh hưởng tới hấp thu thuốc qua đường... chế dạng thuốc SKD thuốc không ổn định không cao Đã có số công trình nghiên cứu làm thay đổi trạng thái vật lý ART, DHA với kỹ thuật phân tán rắn nhằm tăng ĐT, TĐT ART, DHA trước đưa vào dạng thuốc. .. cứu ứng dụng kỹ thuẠí chế HPTR dổ làm tăng ĐT, TĐT số dược chất như: Paracelamol, Diazcpam, Griseoíìulvin, ART , DMA., trước đưa vào dạng thuốc thu số kết bước đầu Thuốc đạn: Dạng thuốc đặt dạng