Nguyên lý Công nghệ sinh học hiện đại

LÊ ĐìNH LƯƠNG NGUYÊN Lý CÔNG NGHệ SINH HọC HIệN ĐạI (Biên dịch từ tài liệu tiếng Anh tác giả dùng cho luật s- triết gia EU làm luật công nghệ sinh học đại khuôn khổ Dự án LEMLIFE Pháp chế, Môi tr-ờng Quản lý CNSH, 2001; đ-ợc bổ sung, cập nhật giáo trình hợp tác với Đại học Công nghệ Massachusetts khuôn khổ Quỹ Đào tạo ViệtMỹ - VEF, 2009) Tài liệu dùng cho độc giả không chuyên nh-ng quan tâm đến công nghệ sinh học đại Hà Nội - 2009 Lời giới thiệu Chúng ta bị hút phần thật tham gia vào cách mạng khoa học công nghệ thật đà đ-ợc dự đoán tr-ớc từ năm bảy m-ơi kỷ XX vừa qua Nh-ng loài ng-ời bị bất ngờ thành tựu nối tiếp thành tựu ngày dồn dập làm tăng nhanh tốc độ cách mạng - cách mạng công nghệ sinh học đại mà hạt nhân kỹ thuật di truyền (genetic engineering) - lĩnh vực khoa học đà đạt tới tầm cao lý thuyết đủ để trở thành lực l-ợng sản xuất trực tiếp, phục vụ hiệu cho nhu cầu hàng ngày thực tiễn xà hội, n-ớc phát triển mà cho n-ớc nghèo nhn-ớc ta Điều đặc biệt đặc thù cách mạng đà tạo hội lớn có n-ớc nghèo rút ngắn khoảng cách với n-ớc giầu việc phát triển khoa häc nµy, nÕu chóng ta biÕt chíp lÊy vµ tận dụng tốt hội Các khái niệm gen , sinh vật chuyển gen, ngày mang nặng tính hàn lâm, lý thuyết xa vời, sản phẩm chuyển gen đà bày bán sạp chợ khắp châu lục Việc thao tác ADN, kỹ thuật di truyền phân tử - hệ thống ph-ơng pháp kết hợp thành tựu khoa học lớn đ-ợc giải th-ởng Nobel, đ-ợc sử dụng phổ biến khắp giới, có nhiều phòng thí nghiệm n-ớc ta, để phục vụ nhu cầu thực tiễn đa dạng Ngày 12-2-2001 toàn trình tự hệ gen ng-ời đà đ-ợc xác định công bố, mở mét thêi kú ph¸t triĨn míi cđa kü tht di truyền đối t-ợng ng-ời Đây lại hội cho n-ớc phát triển đ-ợc thừa h-ởng kho thông tin khổng lồ vô trả tiền Tập tài liệu Nguyên lý công nghệ sinh học đại đ-ợc biên soạn nhằm cung cấp kiến thức công nghệ sinh học, giúp bạn đọc có trình độ phổ thông trung học trở lên có ý định tìm hiểu sở khoa học công nghệ sinh học Trung tâm CNSH đại gen Trong 20 năm qua kỹ thuật di truyền đà phát triển với tốc độ thần kỳ đạt tới điểm mà nhiều phòng thí nghiệm toàn giới kỹ thuật đà trở thành công việc hàng ngày: từ tách chiết đoạn ADN ®Ỉc thï cđa mét hƯ gen tõ mét sinh vËt đến việc xác định trình tự bazơ đánh giá chức Điều đặc biệt hấp dẫn nhà khoa học riêng biệt áp dụng kỹ thuật mà không cần thiết bị đắt tiền nguồn tài lớn, nằm tầm với phòng thí nghiệm đ-ợc trang bị vừa phải Liên hợp quốc dùng thuật ngữ công nghệ sinh học đại Nghị định th- Cartagena an toàn sinh học nhiều văn thức kh¸c cđa Tỉ chøc qc tÕ lín nhÊt thÕ giíi Thuật ngữ kỹ thuật di truyền (genetic engineering) đ-ợc sử dụng phổ biến Tuy nhiên, có số thuật ngữ khác đ-ợc sử dụng để khái niệm Đó thao tác gen (gene manipulation), tách dòng gen (gene cloning), công nghệ ADN tái tổ hợp (recombinant ADN technology), sửa đổi di truyền (genetic modification), vµ di trun häc míi (new genetics) Ngoµi ra, có thuật ngữ thống đ-ợc sử dụng quy chế hành n-ớc sử dụng công nghệ sinh học đại Chẳng hạn, CHLB Nga dïng kü thuËt gen (gene engineering), Trung quèc dïng công học di truyền, nhiều n-ớc khác dùng công nghệ gen (gene technology), thao tác ADN (ADN manipulation) hay công nghƯ di trun (genetic technology) v.v MỈc dï cã nhiỊu kỹ thuật đa dạng phức tạp đ-ợc sử dụng, nh-ng nguyên lý kỹ thuật đơn giản Cơ sở công nghệ thông tin di truyền mà hoá ADN, tồn dạng gen Thông tin sửa đổi theo nhiều cách khác để đạt tới mục tiêu định nghiên cứu khoa học bản, khoa häc øng dơng vµ y häc Cã lÜnh vùc chđ u sư dơng viƯc thao t¸c di truyền là: - Nghiên cứu cấu trúc chức gen; - Sản xuất protein hữu ích ph-ơng pháp mới, dựa chức gen; - Tạo thực vật, động vËt vµ vi sinh vËt chun gen; - XÐt nghiƯm ADN để xác định đặc tr-ng cá thể chẩn đoán bệnh di truyền bệnh nhiễm trùng nh- cúm gà A H1N1, cúm lợn hay HIV Một vấn đề công nghệ sinh học đại làm ng-ời quan tâm tranh luận xung quanh khả ứng dụng công nghệ Thuật ngữ đạo đức di truyền (genethics) gần đà đ-ợc nói đến nhiều, khía cạnh đạo đức công nghệ sinh học đại Việc sử dụng thực vật động vật chuyển gen (GMO), việc nghiên cứu hệ gen ng-ời, liệu pháp gen, nhiều đề tài khác mối quan tâm nhà khoa học mà công chúng nói chung Điều đ-ợc loại bỏ chóng ta sư dơng c«ng nghƯ sinh häc chØ phơc vụ lợi ích loài ng-ời, tránh đ-ợc việc lạm dụng công nghệ vào mục đích xấu th-ờng kèm theo thành tựu khoa học Nh- vậy, trung tâm công nghệ sinh học đại GEN Trên sở hiểu biết rõ cấu trúc, chức qui luật vận động chúng ng-ời ngày làm chủ công nghệ điều khiển sống muôn loài, tr-ớc hết điều khiển biểu hiƯn cđa sù sèng theo h-íng mong mn VËy gen gì? hành vi chúng sao? Con người làm đ-ợc để điều khiển hành vi phục vụ cho lợi ích nhân loại? Gen đà đ-ợc Mendel phát từ kỷ 19 Ngay từ lịch sử loài ng-ời bắt đầu, ng-ời ta đà tự hỏi đặc điểm, tính trạng đà đ-ợc truyền từ hệ sang hệ khác nh- Mặc dù th-ờng trông giống bố mẹ hơn, nh-ng nói chung đặc điểm th-ờng pha trộn bố mẹ Nhiều kỷ chọn giống động thực vật đà cho thấy tính trạng có ích nh- tốc độ chạy ngựa, sức mạnh bò, kích th-ớc hoa chịu ảnh h-ởng rõ ràng phép lai định Tuy nhiên, lúc ph-ơng pháp khoa học dự đoán tr-ớc kết phép lai hai cặp cha mẹ cụ thể Cho đến tận năm 1865 thày tu ng-ời áo tên Gregor Mendel đà phát tính trạng riêng biệt xác định nhân tố riêng rẽ mà sau gọi gen Chính chúng cáI di truyền từ bố mẹ sang Cách nghiên cứu nghiêm túc chặt chẽ ông đà biến chọn giống nông nghiệp từ nghệ thuật trở thành khoa học Tuy nhiên, công trình ông lúc ch-a đ-ợc thừa nhận V× vËy, khoa häc di trun chØ thËt sù đ-ợc tái sinh với việc phát minh lại công trình Gregor Mendel vào đầu kỷ 20 40 năm sau nguyên lý di truyền đà đ-ợc chứng minh làm sáng tỏ Di truyền học vi sinh vật đà phát triển mạnh mẽ vào năm 40 kỷ tr-ớc vai trò ADN (thành phần hóa học gen) đà đ-ợc khẳng định Cũng vậy, hiểu biết ng-ời chế chuyển gen vi khuẩn nh- kiến thức khoa học sống trở nên sáng tỏ nhiều, đặt tảng vững cho phát triển công nghệ sinh học đại Phát minh James Watson Francis Crick năm 1953 cấu trúc ADN đà tạo b-ớc đột phá cho phát triển di truyền học mức phân tử Việc giải xong mà di truyền đầy đủ vào năm 1966 đ-ợc coi ngày đời di truyền học đại Từ năm 1865 đến ngày lịch sử phát triển di truyền học phản ánh hiểu biết ngày tăng ng-ời gen Tr-ớc định nghĩa gen cách xác, hÃy tạm hiểu gen đoạn ADN có đủ thông tin di truyền để qui định chức nh- màu mắt ng-ời, hình dạng hạt đậu hay bệnh Gen chủ yếu định vị nhiễm sắc thể Tất sinh vật cấu thành từ tế bào Các phản ứng hóa học diễn bên tế bào gọi trình trao đổi chất Thông tin di truyền cần thiết để trì tế bào tồn sản sinh tế bào đ-ợc tàng trữ nhân tế bào sinh vật Thông tin di truyền đ-ợc truyền từ hệ sang hệ Nhân tế bào có chứa thông tin di truyền (ADN) trung tâm điều khiển tế bào ADN đ-ợc bọc gói thành nhiễm sắc thể Việc tổng hợp (sao chép) ADN tổng hợp (phiên mÃ) ARN t-ơng ứng diễn bên nhân Phiên mà b-ớc trình biểu thông tin di truyền hoạt động trao đổi chất chủ yếu nhân tế bào Mỗi gen, tức đơn vị thông tin di truyền đoạn ADN mà thông tin đ-ợc thể ngôn ngữ bao gồm chữ cái, chữ bazơ nitơ Thông tin l-u trữ sợi ADN sau thể trình tự loại polymer sinh học khác, protein Công trình tế bào học cuối năm 1800s đà chứng minh thể sống có nhiễm sắc thể đặc thù nằm tế bào Cùng thời gian nghiên cứu hóa sinh học đà cho thấy vật liệu cấu tạo nên nhiễm sắc thể bao gồm ADN protein Trong 40 năm đầu kỷ 20 nhiều nhà khoa học tin r»ng protein mang m· di trun, cßn ADN chØ cã chức làm dàn giáohỗ trợ Nh- quan điểm ng-ợc lại đà đ-ợc chứng minh Công trình Avery Hershey, năm 1940s 1950s, đà chứng minh ADN phân tử di truyền Các công trình hoàn thành vào năm 1960s 1970s đà cho thấy nhiễm sắc thể gói bao gồm sợi ADN liên tục dài sinh vật bậc cao protein cấu trúc, mà số histon, cung cấp giá đỡ giúp cho ADN có cấu trúc nhiễm sắc thể chặt chẽ Gen có thành phần ADN ARN Cấu ADN (Axit DeoxyriboNucleic) gồm đơn vị vật liệu gọi nucleotid Mỗi nucleotid gồm đ-ờng deoxyribose, nhóm phosphat, bazơ nitơ: adenin (A), thymin (T), guanin (G), cytosin (C) Các nhóm phosphat đ-ờng nucleotid kế cận nối với tạo nên polymer mạch dài Trong bazơ nitơ A kết với T G kết với C tạo cho phân tử ADN hình ảnh chuỗi xoắn kép giống nh- thang xoắn nhà Điều đ-ợc khảng định công trình năm 1953 James Watson Francis Crick phòng thí nghiệm Cavendish Cambridge, n-ớc Anh Nh- cặp bazơ có tác dụng gắn chuỗi xoắn kép với Nơi "bắt đầu" sợi phân tử ADN đ-ợc ký hiệu 5' Còn đuôi phân tử ADN đ-ợc ký hiệu đầu 3' Thuật ngữ 5' 3' vị trí bazơ t-ơng ứng với phân tử đ-ờng khung ADN nơi mối liên kết phosphodiester kết nối nguyên tử carbon 3' carbon 5' đ-ờng deoxyribose (trong ADN) đ-ờng ribose (trong ARN) Mỗi nhiễm sắc thể bao gồm phân tử ADN đơn lẻ ADN chứa tới tỷ cặp bazơ - số khổng lồ Tất l-ợng thông tin phải đ-ợc tổ chức theo cách để bọc gói bên nhân tế bào bé nhỏ Để thực đ-ợc việc đó, ADN phải nằm tổ hợp với histon để tạo thành chromatin Histon protein đặc biệt để phân tử ADN quanh trở nên cô đặc Sau chromatin tự cuộn tạo thành dạng nhiễm sắc thể Khi tế bào phân chia thành hai tế bào ADN, tất 46 nhiễm sắc thể, chẳng hạn, ng-ời, phải đ-ợc chép (tổng hợp) Tính đặc hiệu việc kết cặp A/T C/G quan trọng để tổng hợp sợi ADN giống hệt sợi ADN cha mẹ Vì sợi đ-ợc dùng làm khuôn để tổng hợp ADN theo nguyên tắc bổ sung hai sợi sợ cũ làm khuôn sợi đ-ợc tổng hợp Nừu có trục trặc xảy trình chép ADN làm hỏng chức gen Chẳng hạn, bazơ sai đ-ợc xen vào trình chép (một đột biến) sai sót xảy đoạn gen quan trọng, dẫn đến protein không hoạt động chức Rất may, đà có đ-ợc trình tiến hóa chế khác để đảm bảo đột biến nh- đ-ợc phát hiện, đ-ợc sửa chữa không bị nhân lên Tuy nhiên, chế bị hỏng đột biến không đ-ợc sửa chữa xảy Trong tr-ờng hợp trình chuyển hóa cấu trúc bị hủy hoại dẫn đến bệnh tật Một số virut l-u trữ thông tin di truyền ARN, đà có lúc ng-ời ta tin ADN phân tử di truyền Mặc dù vậy, virut tạo protein theo c¸ch nh- ë c¸c sinh vËt bËc cao Trong qu¸ trình gây nhiễm, mà ARN phiên mà ng-ợc trở lại ADN sau chuyển sang ARN sang protein phù hơp với sơ đồ đà đ-ợc chấp nhận Quá trình chuyển đổi từ ARN sang ADN gọi phiên mà ng-ợc, virut sử dụng chế gọi retrovirut Một polymerase chuyên dụng, gọi transcriptase ng-ợc, sử dụng ARN nh- sợi khuôn để tổng hợp phân tử ADN mạch kép bổ sung nh- nêu hình Gen tự sinh gen Vì gen có thành phần cấu tạo ADN nên chúng tự tạo chúng ADN chép Tính đặc hiệu trình kết cặp bazơ A/T C/G giúp giải thích ADN đ-ợc chép tr-ớc tế bào phân chia Các enzym dÃn xoắn ADN cách bẻ gÃy mối liên kết hydro cặp bazơ Các bazơ không kết cặp tự bám vào nucleotid khác với bazơ bổ trợ Enzym primase bắt đầu trình cách tổng hợp đoạn mồi ARN ngắn bổ trợ với ADN ch-a kết cặp ADN polymerase đính nucleotid ADN vào đầu sợi bổ trợ đ-ợc kéo dài tổng hợp Quá trình chép đ-ợc thực liên tục sợi gọi sợi dẫn đầu Trên hình phía d-ới Quá trình tổng hợp diễn với đoạn ngắn riêng biệt có tên Okazaki gọi sợi theo sau, nằm hình phía sợi dẫn đầu Sự khác biệt ADN gắn nucleotid vào đầu Sau enzym có tên ligase nối đoạn Okazaki với Bây giê ta cã ph©n tư ADN, mét ph©n tư sợi gốc ban đầu sợi có trình tự nucleotid bổ trợ (bổ sung) với Hai sợi giống hệt Ngôn ngữ gen đơn giản nh-ng chứa đầy thông tin Thông tin di truyền giống nh- ngôn ngữ Chúng ta sử dụng chữ bảng alphabet để tạo từ, sau nối từ lại với để tạo câu, đoạn văn sách Trong ngôn ngữ ADN: Bảng alphabet có chữ (A,T,G C) Mỗi chữ hợp chất hóa học gọi bazơ nucleotid Bốn chữ đ-ợc dùng để tạo từ di truyền gọi codon Khác ngôn ngữ bình th-ờng, tất từ di truyền có chữ Các từ kết hợp với tạo nên câu gọi gen có chức mà hóa cho trình tự axit amin polypeptid Tại cuối câu có từ đặc biệt dùng làm dấu chấm câu gọi codon dừng Tất câu nối lại với tạo thành sách chứa đựng toàn thông tin di truyền bạn ( mét sinh vËt) gäi lµ hƯ gen Chóng ta h·y làm phép so sánh tiếng Việt Ngôn ngữ di truyền: So sánh ngôn ng Tiếng Việt      Ng«n ngữ di trun Chóng ta có 24 ch- để tạo nên từ Các từ có chiều dài khác Chúng ta ghép từ để tạo nên câu Mỗi câu kết thúc dấu chấm Các câu phối hợp tạo sách ADN có phân tử để tạo nên ba Các ba có chiều dài Các ba phối hợp tạo nên gen Mỗi gen kết thúc ba vô nghĩa Tất ca gen phối hợp tạo nên hệ gen Ngôn ngữ di truyền ADN cung cấp thông tin cần thiết cho việc sản xuất protein để thực trình trao đổi chất đảm bảo cho sống sinh vật Các protein lại có ngôn ngữ riêng chúng với bảng "alphabet" có 20 "chữ cái" Các chữ axit amin Insect, Apis mellifera aka Honey 1,770,000,000 Bee Fish, Tetraodon type of Puffer fish nigroviridis, Mammal, Homo sapiens 385,000,000 Smallest vertebrate genome known 3,200,000,000 Fish, Protopterus aethiopicus 130,000,000,000 aka Marbled lungfish Largest vertebrate genome known C¸c sinh vËt kh¸c cã chøa nhiỊu gen chung Tất sinh vật l-u trữ thông tin di truyền phân tử nh- ADN hoăc ARN Mà di truyền chung ghi phân tư nµy lµ b»ng chøng tÊt u cho thÊy tÊt sinh vật có tổ tiên chung Quá trình tiến hóa dạng sông bậc cao đòi hỏi phát triển gen để hỗ trợ ch-ơng trình khác thể kiểu dinh d-ỡng khác Mặc dù vậy, sinh vật phức tạp trì nhiều gen điều khiển chức chuyển hóa nòng cốt đ-ợc thực từ khứ sơ khai chúng Các gen chung cđa c¸c sinh vËt víi ng-êi % gen chung víi ng-êi KhØ Chimpanzee, Pan troglodytes, 30 000 genes Chimpanzees have about the same number of genes as humans But then why can't they speak? The difference could be in a single gene, FOXP2, which in the chimpanzee is missing certain sections 98% Chuét, Mus musculus, 30 000 genesThanks to mice, researchers have been able to identify genes linked to skeletal development, obesity and Parkinson's disease, to name but a few 90% C¸ v»n (Zebra Fish, Danio rerio), 30 000 genes85% of the genes in these little fish are the same as yours Researchers use them to study the role of genes linked to blood disease such as anemia falciforme and heart disease 85% 19 Ruåi dÊm, Drosophila melanogaster, 13 600 genesFor the past 100 years, the fruit fly has been used to study the transmission of hereditary characteristics, the development of organisms, and, more recently, the study of changes in behaviour induced by the consumption of alcohol (Image: David M.Phillips, Visuals Unlimited, Inc.) 36% C©y Arabidopsis thaliana, 25 000 genesThis little plant, from the mustard family, is used as a model for the study of all flowering plants Scientists use its genes to study hepatolenticular degeneration, a disease causing copper to accumulate in the human liver.(Image: Wally Eberhart, Visuals Unlimited, Inc.) 26% NÊm men Saccharomyces cerevisiae, 6275 genes You have certain genes in common with this organism that is used to make bread, beer and wine Scientists use yeast to study the metabolism of sugars, the cell division process, and diseases such as cancer (Image: Kessel & Shih, Visuals Unlimited, Inc.) 23% Giun ®ịa Caenorhabditis elegans, 19 000 genes Just like you, this worm possesses muscles, a nervous system, intestines and sexual organs That is why the roundworm is used to study genes linked to aging, to neurological diseases such as Alzheimer's, to cancer and to kidney disease 21% Vi khuÈn Escherichia coli, 4800 genes The E coli bacterium inhabits your intestines Researchers study it to learn about basic cell functions, such as transcription and translation (Image: Fred Hossler, Visuals Unlimited, Inc.) 7% Các gen đ-ợc trì qua trình tiến hóa sinh vật; nhiên chúng bị biến đổi đ-ợc lÊy tõ c¸c sinh vËt kh¸c c¸c vi khuÈn cã thể trao đổi với plasmid kháng thuốc kháng sinh, virut 20 đính gen chúng vào vật chủ Một số gen động vật có vú bị virut lấy sau đính vào vật chủ khác chúng Nh- vậy, tất sinh vật có gen cổ x-a bắt nguồn từ buổi ban đầu loài ng-ời cã c¸c gen chung víi c¸c sinh vËt NÕu ng-ời có nhiều gen chung với loài khác nh- tạo nên khác biệt ng-ời? Cái đà biến ng-ời thành sinh linh phøc hỵp biÕt häc, biÕt nãi, biÕt nghÜ cảm nhận? Và đà làm cho ng-ời ta khacs biƯt nhau? Chóng ta cã nhiỊu gen chung với chuột giun nhiều ta t-ởng! Bất chấp ngoại hình khác biệt, có số gen chung với loài khác cách đáng ngạc nhiên (xem bảng trên) Mặc dù gen có chung nucleotid trình tự xếp nh- nhau, nh-ng chức chúng có độ t-ơng đồng đủ để so sánh với Chắc chúng bắt nguồn từ tổ tiên chung sống cách khoảng 3,5 tỷ năm Các nhà khoa học cho qua trình tiến hóa hệ gen tổ tiên trở thành sở cho loài mà quan sát thấy Chính vậy, thành phần nhiều gen giống Hình bảng bên trái cung cấp thí dụ gen béo obesity (ob) động vật khác nhau, trình tù cđa chóng rÊt gièng Bøc tranh phÝa d-íi chí cho thấy trình tự giống hệt sinh vật khác nhau, từ nấm men ®Õn ng-êi TS Michael Wigler ngiªn cøu gen ung th- 21 Các gen đ-ợc cắt, ghép, sưa ®ỉi Sù tiÕn bé bÊt kú lÜnh vùc khoa học phụ thuộc vào kỹ thuật ph-ơng pháp có có khả mở rộng phạm vi đạt độ xác cao thí nghiệm cần thực Trong 40 năm qua điều đà đ-ợc minh chứng cách ngoạn mục làm bật lên lĩnh vực di truyền học phân tử - nòng cốt Công nghệ sinh học đại Lĩnh vực phát triển nhanh chóng đạt tới điểm mà ngày nhiều phòng thí nghiệm toàn giới việc nghiên cứu gen đà trở thành thực tế sôi sục hàng ngày, bao gồm tách chiết đoạn ADN đặc thù từ hệ gen sinh vật, xác định trình tự bazơ đánh giá chức Điều đặc biệt ấn t-ợng công nghệ dễ dàng sử dụng cá nhân nhà khoa học mà không cần đến thiết bị qui mô nh- nguồn tài lớn tầm với phòng nghiên cứu đ-ợc trang bị vừa phải Mặc dù có nhiều kỹ thuật phức tạp đa dạng liên quan, nh-ng nguyên lý thao tác di truyền lại đơn giản Quan điểm chung mà công nghệ dựa vào thông tin di truyền đ-ợc mà hóa ADN đ-ợc bố trí dạng gen, nguyên liệu nguồn đ-ợc thao tác theo nhiều cách khác nhằm đạt tới mục tiêu cụ thể Những ph-ơng pháp công nghệ chủ yếu dùng hàng ngày phòng công nghệ sinh học đại: Tách chiết ADN B-ớc cần thực để có đ-ợc ADN mong muốn phù hợp với mục tiêu thí nghiệm Nguyên lý chung gièng nhau, cã kh¸c biƯt nhá ë loại đối t-ợng khác nhau: động vật, thực vật tế bào nhân sơ nh- vi khuẩn Các ph-ơng pháp lai phân tử Dựa tính chất bổ trợ sợi ADN mạch kép sợi ADN ARN có ph-ơng pháp Southern blotting, Northern blotting lai chỗ (including fluorescent in situ hybridization - FISH) C¸c kü thuËt lai cho phÐp tách biệt gen quan tâm từ hỗn hợp gồm nhiều đoạn ADN, ARN hai loại Sửa đổi ADN enzym Dựa vào đặc tính hoạt động đặc hiệu enzym lên ADN ng-ời ta cắt ADN điểm mong muốn (enzym giới hạn), sau nói đoạn ADN lại với enzym 22 ADN ligase, tạo nên đoạn ADN có thành phần nguồn gốc khác nhau, thuật ngữ chuyên môn gọi ADN tái tổ hợp Ngoài ra, nhiều loại enzym khác có đặc thù hoạt động khác ADN nh- phân hủy ADN từ đầu định, hay từ sợi ADN Nói chung, ngày tay nhà khoa học có công cụ phong phú để tạo đoạn ADN mang chức cần thiết cho nhu cầu đa dạng ng-ời Gắn vào vector Để chuyển ADN đ-ợc tạo ph-ơng pháp trên, th-ờng cần gắn ADN vào cấu trúc ADN mạch vòng nhỏ gọi plasmid, cosmid hay loại virut, tựa nh- đ-a hàng lên xe để chuyển Sau nhân số l-ợng vector lên để sẵn sàng cho thí nghiệm chuyển gen ®Õn csc vËt chđ thÝch hỵp Do vËy kü tht th-ờng gọi tách dòng gen Tách dòng gen đ-ợc sử dụng lĩnh vực sau: nhận dạng gen đặc hiệu, lập đồ hệ gen, sản xuất protein tái tổ hợp, tạo sinh vật chuyển gen (GMO) Phản ứng chuỗi trùng hợp (PCR) kỹ thuật thiếu phòng thí nghiệm công nghệ sinh học đại Bản chất ph-ơng pháp cho phép nhân lên hàng triệu lần đoạn ADN quan tâm vòng ®ång hå GS James Watson, ng-êi cïng Francis Crick t×m cấu trúc không gian chuỗi xoắn kép ADN đà nhận xét: Kỹ thuật PCR đà cách mạng hóa công nghệ sinh học Đặc biệt n-ớc nghèo nhn-ớc ta, kỹ thuật đà tạo hội ngàn năm có để r-ợt đuổi n-ớc tiên tiến, không cần đầu t- lớn mà làm đ-ợc khoa học công nghệ mức độ cao Phương pháp Kary Mullis phát minh vào năm 1980s, dựa nguyên lý tổng hợp ADN tự nhiên tế bào gồm b-ớc sau: 1) Tách sợi ADN mạch kép thành sợi đơn nhiệt độ cao, để sợi đơn làm khuôn để tổng hợp sợi mới; 2) Gắn đoạn mồi (các đoạn ADN ngắn có chiều dài từ 18 30 nucleotid) vào sợi ADN khuôn nhiệt độ thích hợp; 3) Tổng hợp sợi ADN vị trí mồi đà gắn vào nhiệt độ khác Các b-ớc đ-ợc lặp lại 20-40 lần đoạn ADN nằm mồi đ-ợc tổng hợp ứng dụng PCR Chẩn đoán bệnh di truyền y häc, vi sinh vËt y häc vµ y häc phân tử Định typ HLA ghép tạng Phân tích ADN vật liệu cổ sinh Xác định đặc tr-ng cá hình xét nghiệm huyết thống Chuẩn bị mẫu dò axit nucleic Sàng lọc dòng xây dựng đồ 23 Nghiên cứu đa dạng di truyền loài Giải trình tự ADN Một công nghệ cho phép giải trình tự trực tiếp đoạn ADN thay cố gắng tìm trình tự gen, trình tự đột biến ADN gen ph-ơng pháp truyền thống nh- phân tích RFLP, nhiễm sắc thể di chuyển hay chí thí nghiệm tải nạp, tiếp hợp vi khuẩn Ngày giải trình tự ADN đà đạt đến giai đoạn tự động hóa đ-ợc sử dụng hàng ngày nhiều phòng thí nghiệm cho nhiều mục đích khác Ngoại di truyền (Epigenetics) cách điều khiển hoạt động gen hiệu Ngoại di truyền lĩnh vực nghiên cứu thay đổi di truyền biểu gen mà không thay đổi trình tự ADN Các nghiên cứu đà cho thấy chế ngoại di truyền cung cấp thêm tầng kiểm soát phiên mà cho phép điều hòa cách thức mà gen biểu Các chế hợp phần then chốt phát triển sinh tr-ởng bình th-ờng tế bào Các bất th-ờng ngoại di truyền đà phát thấy nhân tố gây ung th-, rối loạn di truyên hội chứng nhi khoa Chúng nhân tố góp phần vào bệnh tự miễn dịch lÃo hóa Bài giới thiệu nguyên lý chế ngoại di truyền góp phần chóng cho søc kháe ng-êi cịng nh- nh÷ng hËu lâm sàng sai lệch ngoại di truyền Bài đề cập việc sử dụng đ-ờng ngoại di truyền cách tiếp cận chẩn đoán điều trị có định h-ớng thông qua phổ lâm sàng 24 Lĩnh vực có ảnh h-ởng rộng lớn đến y học, đặc biệt việc nghiên cứu biến đổi di truyền chức gen mà không biến đổi trình tự ADN Lĩnh vực phát triển nhanh tạo hội hấp dẫn cho chẩn đoán điều trị rối loạn lâm sàng phức tạp Các nguyên lý ngoại di truyền t-ợng methyl hóa ADN việc sửa đổi histon (A) Sơ đồ sửa đổi ngoại di truyền Các sợi ADN cuộn gói xung quanh khối bát phân histon, tạo thể nhân (nucleosome), cấu trúc đ-ợc tổ chức thành chromatin - đơn vị vật liệu cấu thành nhiễm sắc thể Quá trình sửa đổi histon đặc hiệu điểm thuận nghịch diễn nhiều điểm thông qua acetyl hóa, methyl hóa phosphoryl hóa Methyl hóa ADN xảy vị trí gốc cytosin phản ứng đ-ợc xúc tác enzym ADN methyltransferases (DNMTs) Đồng thời, sửa đổi cung cấp dấu hiệu (signature) ngoại di truyền riêng biệt có tác dụng điều hòa cấu trúc chromatin biểu gen (B) Sơ đồ thay đổi thuận nghịch cấu trúc chromatin ảnh h-ởng đến biểu gen: gen đ-ợc biểu (bật) chromatin mở (hoạt động), chúng bị bất hoạt (đóng) chromatin bị cô đặc (câm) Các vòng trắng = cytosin không bị methyl hóa; vòng đỏ = cytosin bị methyl hóa Hậu lâm sàng sai lệch ngoại di truyền chế điều hòa chịu ảnh h-ởng ADN qua suốt thêi gian sèng cña ng-êi Ngay lËp tøc sau thơ tinh, hƯ gen cđa ng-êi bè nhanh chãng bÞ demethyl hóa ADN sửa đổi histon Hệ gen mẹ demethyl hóa từ từ, tất nhiên sóng methyl hóa phôi đ-ợc khởi đầu tạo dựng kế hoạch chi tiết cho mô phôi phát triển Kêt tế bào có mẫu hình ngoại di truyền riêng đ-ợc trì nghiêm ngặt để điều hòa biểu gen cần thiết Những dao động mẫu hình đ-ợc bố trí nghiêm ngặt trình methyl hóa ADN sửa đổi histon dẫn đến rối loạn bẩm sinh hội chứng thai nhi đa hệ thống ng-ời tiềm ẩn trạng thái bệnh tật nh- ung th- rải rác rối loạn suy thoái thần kinh LÃo hóa Cả việc tăng c-ờng thuyên giảm trình methyl hóa ADN liên quan tới trình lÃo hóa Các chứng tích lũy cho thấy thay đổi methyl hóa phụ thuộc tuổi tham gia vào phát triển rối loạn thần kinh, tính tự miễn dịch ung th- ng-ời già Những biến đổi methyl hóa diễn theo tuổi bao gồm việc bất hoạt gen liên quan ung th- số mô mức độ cytosin bị methyl hóa tăng cao tế bào lÃo hóa trình demethyl hóa kích thích tính bất ổn định nhiễm sắc thể gây tái cấu trúc làm tăng nguy ung th- Trong mô khác nh- ruột, việc tăng cao methyl hóa kiện tiềm ẩn mắc ung th- ruột kêt tuổi cao Ung th- liệu pháp ngoại di truyền Ung th- trình bao gồm nhiều b-ớc mà sai lệch di truyền ngoại di truyền tích lũy 25 lại và chuyển tế bào bình th-ờng thành tế bào ung th- xâm lấn di Các mẫu hình methyl hóa ADN bị biến đổi làm thay đổi biểu gen liên quan đến ung th- Quá trình methyl hóa ADN giảm hoạt hóa gen ung th- khởi đầu bất ổn định nhiễm sắc thể, trình tăng methyl hóa ADN lại khởi đầu cho câm lặng gen ức chế ung th- Tỷ lệ mắc phải t-ợng tăng siêu methyl hóa, đặc biệt ung th- rời rạc, dao động tùy thuộc gen liên quan loại ung th- mà cố xảy Cho đến nay, liệu pháp ngoại di truyền số l-ợng nh-ng số đ-ợc nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng đà đ-ợc chấp nhận cho áp dụng điều trị kiểu ung th- đặc thù Một số chất đồng đẳng nh- azacitidin đ-ợc gắn vào ADN chép, ức chế methyl hóa tái hoạt hóa gen đà bị câm tr-ớc Azacitidin có hiệu thử nghiệm lâm sàng pha I điều trị hội chứng myelodysplast bệnh bạch cầu siêu methyl hóa gây Các oligonucleotid đối nghĩa cho kêt hứa hẹn thử nghiệm lâm sàng pha I khối u rắn ung th- thận T-ơng tự, phân tử nhỏ nh- axit valproic đ-ợc sử dụng dể làm chết tế bào ung th- Sự phối hợp liệu pháp ngoại di truyền với liệu pháp hóa học truyền thống đ-a lại hiệu cao chúng tái kích hoạt gen câm có gen ức chế ung th-, đồng thời làm cho tế bào nhờn thuốc nhạy cảm trở lại với liệu pháp chuẩn bình th-ờng Con đ-ờng phía tr-ớc Kiến thức chế ngoại di truyền đà tăng lên 10 năm qua đà bắt đầu chuyển hóa thành cách tiếp cận chẩn đoán phân tử điều trị nhằm đích thông qua phổ lâm sàng Với hoàn thành Dự ¸n hƯ gen ng-êi, Dù ¸n ngo¹i hƯ gen ng-êi đà đ-ợc đề xuất tạo đồ methyl hóa cho hệ gen Bằng cách nghiên cứu mô khỏe mô bệnh vùng hệ gen đặc thù đ-ợc nhận dạng, chúng tham gia vào trình phát triển, vào biểu đặc thù mô, vào tính nhạy cảm với môi tr-ờng vào phát sinh bệnh Việc sử dụng đồ ngoại di truyền dẫn đến liệu pháp ngoại di truyền điều trị rối loạn phức tạp xuyên suốt phổ lâm sàng Cơ sở khoa học vấn đề tranh luận ứng dụng công nghệ sinh học đại Nhân vô tính ng-ời: nhân sinh sản nhân chữa bÖnh Cloning is the process of asexually producing a group of cells (clones), all genetically identical to the original ancestor The word is also used in recombinant DNA manipulation procedures to produce multiple 26 copies of a single gene or segment of DNA It is more commonly known as the production of a cell or an organism from a somatic cell of an organism with the same nuclear genomic (genetic) characters - without fertilization A clone is a collection of cells or organisms that are genetically identical Some vegetables are made this way, like asparagus, or flowers like orchids Human reproductive cloning is the production of a human fetus from a single cell by asexual reproduction In 2001 a cloned embryo was reported made by nuclear transfer, though in 1993 cloned embryos were made by splitting human embryos In the late 1990s reproductive cloning was used to produce clones of the adults of a number of mammalian species, including sheep, mice and pigs The most famous of these was Dolly, the sheep Many countries rushed to outlaw the possibility of reproductive cloning in humans Most mammalian embryos can only be split into 2-4 clones, after that the cells lack the ability to start development into a human being Therapeutic cloning is the cloning of embryos containing DNA from an individual's own cell to generate a source of embryonic stem (ES) cellprogenitor cells that can differentiate into the different cell types of the body ES cells are capable of generating all cell types, unlike multipotent adultderived stem cells which generate many but not all cell types The aim is to produce healthy replacement tissue that would be readily available Since it is from the same body it is immunocompatible so that the recipients would not have to take immunosuppressant drugs for the rest of their lives, as they if they receive an organ from another person Dù ¸n hƯ gen ng-êi Begun formally in 1990, the U.S Human Genome Project was a 13year effort coordinated by the U.S Department of Energy and the National Institutes of Health The project originally was planned to last 15 years, but rapid technological advances accelerated the completion date to 2003 Project goals were to –identify all the approximately 20,000-25,000 genes in human DNA, – determine the sequences of the billion chemical base pairs that make up human DNA, –store this information in databases, –improve tools for data analysis, –transfer related technologies to the private sector, and – address the ethical, legal, and social issues (ELSI) that may arise from the project 27 To help achieve these goals, researchers also studied the genetic makeup of several nonhuman organisms These include the common human gut bacterium Escherichia coli, the fruit fly, and the laboratory mouse A unique aspect of the U.S Human Genome Project is that it was the first large scientific undertaking to address potential ELSI implications arising from project data Another important feature of the project was the federal government's longstanding dedication to the transfer of technology to the private sector By licensing technologies to private companies and awarding grants for innovative research, the project catalyzed the multibillion-dollar U.S biotechnology industry and fostered the development of new medical applications Sequence and analysis of the human genome working draft was published in February 2001 and April 2003 issues of Nature and Science See an index of these papers and learn more about the insights gained from them Liệu pháp gen: Liệu pháp tế bào soma liệu pháp tế bào mầm Liệu pháp tế bµo soma Many genetic diseases may be able to be treated by correcting the defective genes, by gene therapy Gene therapy is a therapeutic technique in which a functioning gene is inserted into the cells of a patient to correct an inborn genetic error or to provide a new function to the cell It means the genetic modification of DNA in the body cells of an individual patient, directed to alleviating disease in that patient There have been several hundred human gene therapy clinical trials in many countries (including USA, EU, Canada, China, Japan, New Zealand ), involving over 6000 patients world-wide, for several different diseases including several cancers Somatic cell gene therapy involves injection of 'healthy genes' into somatic (body) cells of a patient The DNA change is not inherited to children The first human gene therapy protocol began in September 1990 that successfully treated adenosine deaminase deficiency (ADA) disease From 1989 until September 1999 there were thousands of patients in trials and no one died because of the experiments 18 year-old Jesse Gelsinger died at the University of Pennsylvania (USA) on 17 September 1999, four days after receiving a relatively high dose of an experimental gene therapy His death was the result of a large immune reaction to the genetically engineered adenovirus that researchers had infused into his liver There was much review of the procedures for safety following that case Gene therapy is still an experimental therapy, but if it is safe and effective, it 28 may prove to be a better approach to therapy than many current therapies, because gene therapy cures the cause of the disease rather than merely treating the symptoms of a disease Also, many diseases are still incurable by other means, so the potential benefit is saving life Liệu pháp tế bào mÇm At the present gene therapy is not inheritable Germ cells are cells connected with reproduction, found in the testis (males) and ovary (females), i.e Egg and sperm cells and the cells that give rise to them Germ-line gene therapy targets the germ cells This type of therapy may also mean injecting DNA to correct, modify or add DNA into the pronucleus of a fertilized egg The latter technology would require that fertilization would occur in vitro using the usual IVF procedures of superovulation and fertilization of a number of egg cells prior to micromanipulation for DNA transfer and then embryo transfer to a mother after checking the embryo's chromosomes T- vấn di truyền học chẩn đoán tr-ớc sinh Present-day medicine recognizes that genetic diseases are inherited based on the nature of DNA, genes, and chromosomes Now that the human genome has been completely sequenced, scientists are better able to study how changes in DNA cause human disease This will ultimately help in diagnosing and treating genetic disorders However, until science has the knowledge to treat some of the more serious, sometimes fatal genetic disorders, the best option is prevention Prevention of genetically transmitted diseases can consist of major choices: abstinence from pregnancy, egg or sperm donation, preimplantation or prenatal diagnosis and termination, or early treatment of affected pregnancies Prenatal diagnosis involves testing fetal cells, amniotic fluid, or amniotic membranes to detect fetal abnormalities Preimplantation diagnosis is a new technique only available in specialized centers It involves in vitro fertilization and genetic testing of the resulting embryos prior to implanting only those embryos found not to have the abnormal gene Genetic counseling and prenatal diagnosis provides parents with the knowledge to make intelligent, informed decisions regarding possible pregnancy and its outcome Based on genetic counseling, some parents (in the face of possibly lethal genetic disease) have forgone pregnancy and adopted children while others have opted for egg or sperm donation from an anonymous donor who is not likely to be a carrier of the specific disease Many diseases transmitted as a single gene defect can now be diagnosed very early in pregnancy Because of this some parents choose to become pregnant and have the disease status of the fetus determined early in the pregnancy The pregnancy is continued if the fetus is disease-free Parents who decide to continue the pregnancy with a defective fetus may be able to better prepare to care for the infant by being informed about the 29 disease in advance For example, genetic diseases that have a diet intolerance component may be treated with specialized diets for the mother and newborn baby XÐt nghiÖm di truyÒn Genetic tests, also called Gene tests or DNA-based tests, the newest andmost sophisticated of the techniques used to test for genetic disorders, involve direct examination of the DNA molecule itself Other genetic tests include biochemical tests for such gene products as enzymes and other proteins and for microscopic examination of stained or fluorescent chromosomes Genetic tests are used for several reasons, including: – carrier screening, which involves identifying unaffected individuals who carry one copy of a gene for a disease that requires two copies for the disease to be expressed –preimplantation genetic diagnosis –prenatal diagnostic testing –newborn screening –presymptomatic testing for predicting adult-onset disorders such as Huntington's disease –presymptomatic testing for estimating the risk of developing adult-onset cancers and Alzheimer's disease –confirmational diagnosis of a symptomatic individual –forensic/identity testing In gene tests, scientists scan a patient's DNA sample for mutated sequences A DNA sample can be obtained from any tissue, including blood For some types of gene tests, researchers design short pieces of DNA called probes, whose sequences are complementary to the mutated sequences These probes will seek their complement among the three billion base pairs of an individual's genome If the mutated sequence is present in the patient's genome, the probe will bind to it and flag the mutation Another type of DNA testing involves comparing the sequence of DNA bases in a patient's gene to a normal version of the gene Cost of testing can range from hundreds to thousands of dollars, depending on the sizes of the genes and the numbers of mutations tested Gene testing already has dramatically improved lives Some tests are used to clarify a diagnosis and direct a physician toward appropriate treatments, while others allow families to avoid having children with 30 devastating diseases or identify people at high risk for conditions that may be preventable Aggressive monitoring for and removal of colon growths in those inheriting a gene for familial adenomatous polyposis, for example, has saved many lives On the horizon is a gene test that will provide doctors with a simple diagnostic test for a common iron-storage disease, transforming it from a usually fatal condition to a treatable one Genetic DNA testing to evaluate paternity/parentage or forensic/identity testing is possible because our biological characteristics are passed from generation to generation following the basic rules of inheritance These rules have been known for more than a century Deoxyribonucleic acid (DNA), which is a very stable and strictly inherited molecule, encodes all genetic information and determines our biological characteristics Modern DNA paternity testing relies on the fact that we can detect and study "DNA markers" at specific structural regions of the DNA Many different DNA markers exist in the general population However, only two such DNA markers exist in any one individual A child inherits one DNA marker from the mother and one from the father A DNA test begins by learning which DNA markers are present in the child and the mother It is then possible to determine which of the child's DNA markers was inherited from the mother and which was inherited from the biological father To evaluate paternity and complete a paternity test, a series of DNA tests is performed on the biological specimens provided by the mother, child, and alleged father When the DNA Profiles– of this trio are compared to each other, the paternity test will provide two possible results; the alleged father will be either included or excluded as the biological father of the child HÖ gen d-ỵc häc Pharmacogenomics is the study of how an individual's genetic inheritance affects the body's response to drugs The term comes from the words pharmacology and genomics and is thus the intersection of pharmaceuticals and genetics Pharmacogenomics holds the promise that drugs might one day be tailor-made for individuals and adapted to each person's own genetic makeup Environment, diet, age, lifestyle, and state of health all can influence a person's response to medicines, but understanding an individual's genetic makeup is thought to be the key to creating personalized drugs with greater efficacy and safety Pharmacogenomics combines traditional pharmaceutical sciences such as biochemistry with annotated knowledge of genes, proteins, and single nucleotide polymorphisms One can anticipate the benefits of Pharmacogenomics, which are as follows: –NhiỊu thc tèt h¬n Pharmaceutical companies will be able to create drugs based on the proteins, enzymes, and RNA molecules associated with genes and 31 diseases This will facilitate drug discovery and allow drug makers to produce a therapy more targeted to specific diseases This accuracy not only will maximize therapeutic effects but also decrease damage to nearby healthy cells Thuốc tốt hơn, an toàn lần đầu sử dụng Instead of the standard trial-and-error method of matching patients with the right drugs, doctors will be able to analyze a patient's genetic profile and prescribe the best available drug therapy from the beginning Not only will this take the guesswork out of finding the right drug, it will speed recovery time and increase safety as the likelihood of adverse reactions is eliminated Pharmacogenomics has the potential to dramatically reduce the estimated 100,000 deaths and million hospitalizations that occur each year in the United States as the result of adverse drug response (1) –C¸c ph-ơng pháp xác để xác định liều thuốc phï hỵp Current methods of basing dosages on weight and age will be replaced with dosages based on a person's genetics how well the body processes the medicine and the time it takes to metabolize it This will maximize the therapy's value and decrease the likelihood of overdose –PhÐp sàng lọc đại bệnh tật Knowing one's genetic code will allow a person to make adequate lifestyle and environmental changes at an early age so as to avoid or lessen the severity of a genetic disease Likewise, advance knowledge of particular disease susceptibility will allow careful monitoring, and treatments can be introduced at the most appropriate stage to maximize their therapy –Vacxin tèt h¬n Vaccines made of genetic material, either DNA or RNA, promise all the benefits of existing vaccines without all the risks They will activate the immune system but will be unable to cause infections They will be inexpensive, stable, easy to store, and capable of being engineered to carry several strains of a pathogen at once Cải tiến phát minh thuốc trình phê duyệt Pharmaceutical companies will be able to discover potential therapies more easily using genome targets Previously failed drug candidates may be revived as they are matched with the niche population they serve The drug approval process should be facilitated as trials are targeted for specific genetic population groups - providing greater degrees of success The cost and risk of clinical trials will be reduced by targeting only those persons capable of responding to a drug 32 –H¹ thÊp tổng giá thành cho chăm sóc y tế Decreases in the number of adverse drug reactions, the number of failed drug trials, the time it takes to get a drug approved, the length of time patients are on medication, the number of medications patients must take to find an effective therapy, the effects of a disease on the body (through early detection), and an increase in the range of possible drug targets will promote a net decrease in the cost of health care Kü tht di trun vµ thùc phÈm Genetic engineering or genetic modification is to alter the genetic constitution of organisms by mixing the DNA of different genes and species together The living organisms with altered DNA are called Genetically Modified Organisms (GMOs) Genetic engineering is considered special because often the techniques involves manipulating genes in a way that is not expected to occur ordinarily in nature, that characters can be changed between the species Many kinds of GMOs have been developed for environmental purposes and for health and medicine Genetic engineering has been particularly successfully used and applied in food and agriculture to produce genetically modified (GM) foods Such as transgenic plants that carry several enhanced characteristics by inserting genes from various organisms, for example, plants with increased yield, disease resistance, and pest resistance with inserted Bt genes kill selectively pests that eat crops There have also been fruits and vegetables modified for long term storage or delayed ripening that remain fresh for a long time, which is useful also during transportation to the market Over 15 countries of the world use GM crops for the general food production already The second wave of GM plants are those with high nutritional content and improved food quality like golden rice, plants that can tolerate high salt levels in the land or those modified so that they can grow in harsh conditions like drought 33 ... sinh học đại đ-ợc biên soạn nhằm cung cấp kiến thức công nghệ sinh học, giúp bạn đọc có trình độ phổ thông trung học trở lên có ý định tìm hiểu sở khoa học công nghệ sinh học Trung tâm CNSH đại. .. Những ph-ơng pháp công nghệ chủ yếu dùng hàng ngày phòng công nghệ sinh học đại: Tách chiết ADN B-ớc cần thực để có đ-ợc ADN mong muốn phù hợp với mục tiêu thí nghiệm Nguyên lý chung giống nhau,... quy chế hành n-ớc sử dụng công nghệ sinh học đại Chẳng hạn, CHLB Nga dïng kü thuËt gen (gene engineering), Trung quèc dïng c«ng học di truyền, nhiều n-ớc khác dùng công nghệ gen (gene technology),