TÌM HIỂU sự KHÁC NHAU của các MARKER HBV ở BỆNH NHÂN VIÊM GAN mạn HOẠT ĐỘNG và NGƯỜI MANG HBSAG KHÔNG TRIỆU CHỨNG

Y học thực hành (8 6 4 ) - số 3/2013 129 Tìm hiểu sự khác nhau của các marker HBV ở bệnh nhân viêm gan mạn hoạt động và ngời mang HBsag không triệu chứng Nguyễn Khuyến - Bệnh viện đa khoa Đức Giang Đỗ Tuấn Anh - Bệnh viện 103 Tóm tắt Nghiên cứu trên 60 bệnh nhân đợc chia thành hai nhóm viêm gan mạn hoạt động (VGMHĐ) và ngời mang HBsAg không triệu chứng (NMHKTC) bằng phơng pháp tiến cứu cắt ngang với mục tiêu tìm hiểu sự khác nhau của các marker HBV ở bệnh nhân viêm gan mạn hoạt động và ngời mang HBsAg không triệu chứng, chúng tôi nhận thấy: ở nhóm tuổi 16-30, NMHKTC có tỷ lệ HBsAg (+) cao hơn có ý nghĩa so với nhóm VGMHĐ (53,33% và 16,67%). Không có sự khác biệt về tỷ lệ HBsAg (+) giữa hai giới tính. Bệnh nhân VGMTHĐ có hàm lợng HBsAg cao, nồng độ HBV- DNA > 10 5 copies/ ml và HBeAg(+) trong khi NMHKTC có hàm lợng HBsAg thấp, nồng độ HBV- DNA < 10 5 copies/ ml và Anti- HBe(+). Từ khóa: viêm gan mạn hoạt động. summary Study on 60 patients who were divided into two groups of chronic active hepatitis patients and asymptomatic carriers of HbsAg by the cross- sectional prospective study with the aim to understand the differences of markers of HBV in chronic active hepatitis patients and asymptomatic carriers of HBsAg, we found that: in group age 16-30, rate of HBsAg (+) of the asymptomatic carriers of HBsAg was significantly higher than group of the chronic active hepatitis (53.33% and 16.7%). There was no difference in the rate of HBsAg (+) between the sexes. The chronic active hepatitis patients had high levels of HBsAg, HBV-DNA levels> 10 5 copies/ml and HBeAg (+) while the asymptomatic carriers of HBsAg had low levels of HBsAg, HBV- DNA levels <10 5 copies/ml and anti-HBe (+). Keywords: chronic active hepatitis. Đặt vấn đề Viêm gan virút B là bệnh truyền nhiễm phổ biến ở hầu hết các nớc trên thế giới với tỷ lệ mắc khác nhau. Việt Nam là quốc gia nằm trong vùng dịch lu hành có tỷ lệ nhiễm HBV cao trên thế giới. Theo số liệu điều tra của Bộ Y tế, có khoảng 12 - 16 triệu ngời mang HBV, tơng ứng với tỷ lệ ngời có HBsAg(+) trong cộng đồng từ 14 - 26%, số ngời nhiễm HBV mạn tính trên dới 10 triệu ngời. HBsAg(+) ở 58% số BN XG, ở ung th gan nguyên phát tỷ lệ HBsAg(+) là 84%. Ung th gan nguyên phát chiếm 3,6% và đứng hàng thứ 3 trong các bệnh lý ác tính, là nguyên nhân tử vong hàng thứ 3 cho nam giới, hàng thứ 5 cho nữ giới. Bệnh VGVR B có nhiều thể khác nhau. VGVR B mạn tính hoạt động là một trong những thể hay gặp. Tiến triển của bệnh thờng âm thầm xen lẫn những đợt bùng phát. Hậu quả thờng dẫn tới XG, ung th tế bào gan. Do vậy, việc phát hiện và điều trị sớm thực sự có ý nghĩa. Ngời mang HBsAg không triệu chứng (carrier) và VGVR B mạn tính hoạt động là hai thể bệnh hay gặp và trong thực tế đôi khi khó xác định. Song, việc tiên lợng hai thể bệnh này lại hoàn toàn khác nhau. Từ lâu, nhiều tác giả đã quan tâm, phân tích sự có mặt của các marker HBV và đây có thể là một căn cứ quan trọng để phân biệt hai thể bệnh trên. Do vậy chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài này nhằm mục tiêu: Tìm hiểu sự khác nhau của các marker HBV ở bệnh nhân viêm gan mạn hoạt động và ngời mang HBsAg không triệu chứng Đối tợng và phơng pháp nghiên cứu 1. Đối tợng nghiên cứu - Nhóm 1: (ngời mang HBsAg không triệu chứng): Là những ngời có HBsAg (+) nhng không có triệu chứng (lâm sàng, sinh hoá đều bình thờng), tuổi từ 16 đến 60, gồm nhiều ngành nghề khác nhau và ở nhiều địa phơng. - Nhóm 2: (BN VGVR B mạn tính hoạt động): Là những BN đợc chẩn đoán là VGVR B mạn tính hoạt động điều trị nội trú tại bệnh viện quân y 103 và Bệnh viện TƯQĐ 108. Cỡ mẫu nghiên cứu - Nhóm 1: 30 ngời mang HBsAg (+) không triệu chứng - Nhóm 2: 30 BN VGVR B mạn tính hoạt động. 2. Tiêu chuẩn loại trừ Loại trừ những BN có những đặc điểm sau: Bệnh có kết hợp các nguyên nhân khác nh: VG do thuốc, do hoá chất, do rợu, tự miễn BN đồng nhiễm HCV, HDV, HIV. BN đang mắc bệnh kết hợp nh: sốt rét, tiểu đờng, viêm đờng mật HBsAg (+) ở BN XG, ung th gan 3. Phơng pháp nghiên cứu Nghiên cứu tiến cứu trên cơ sở theo dõi cắt ngang Tất cả BN nhiên cứu đợc đăng ký theo một mẫu thống nhất 3.1. Phơng pháp nghiên cứu lâm sàng Tất cả BN nghiên cứu đợc khám bệnh tỷ mỷ ngay sau khi vào viện và hàng ngày cho đến khi ra viện. Các triệu chứng xét nghiệm thu thập đợc, đợc ghi chép đầy đủ. Khai thác Tiền sử bệnh: . Có vàng da, niêm mạc trớc khi vào viện 6 tháng. Y học thực hành (8 64 ) - số 3 /201 3 130 . Xét nghiệm HBsAg (+) trớc khi vào viện 6 tháng. 3.2. Xét nghiệm Xét nghiệm HBsAg định tính đợc làm tại Khoa huyết học, bệnh viện quân y 103 và 108. Xét nghiệm: HBsAg định lợng, HBeAg, Anti- HBe, Anti- HBc đợc làm tại Khoa miễn dịch bệnh viện quân y 108 và labo vi sinh vật - Viện vệ sinh dịch tễ quân đội. Xét nghiệm HBV-DNA đợc làm tại labo sinh học phân tử Viện vệ sinh dịch tễ quân đội. * HBsAg định tính đợc phát hiện bằng kỹ thuật ELISA, sử dụng KIT của hãng Sanofi trên nguyên lý bánh kẹp. Huyết thanh BN đợc coi là có HBsAg(+) khi có chỉ số mật độ quang OD giá trị ngỡng. * HBsAg định lợng: Xác định bằng kỹ thuật miễn dịch phóng xạ pha rắn (SP RIA) sử dụng KIT IMK- 413 của Trung Quốc sản xuất. * Anti- HBc: MONOLISA HBc là thử nghiệm miễn dịch gắn men để xác định sự có mặt của KT kháng KN lõi của virút VG B. Kết quả đợc đọc ở bớc sóng 492/620 nm. Mẫu (+) khi OD > giá trị ngỡng, mẫu (-) khi OD < giá trị ngỡng. * HBeAg và Anti- HBe: MONOLISA HBe là thử nghiệm miễn dịch gắn men nhằm phát hiện HBeAg hoặc Anti - HBe trong huyết thanh hoặc trong huyết tơng ngời. Sự phát hiện KT nhờ sử dụng hỗn hợp KT đơn dòng đánh dấu bằng peroxidaza. - HBV - DNA: Xác định bằng phơng pháp Real time PCR 4. Xử lý số liệu Các số liệu đợc xử lý theo các phơng pháp thuật toán thống kê: Tỷ lệ %, tính số trung bình (X), độ lệch chuẩn (SD) So sánh 2 số trung bình bằng thuật toán T- student. So sánh 2 tỷ lệ bằng 2 Tính hệ số tơng quan (r) Các kết quả đợc phân tích và xử lý trên máy tính theo phần mềm EPI INFO 2002. Kết quả nghiên cứu và bàn luận 1. Phân bố theo tuổi, giới của hai nhóm nghiên cứu. 30 ngời trong nhóm NMHKTC có tuổi từ 16 đến 60, nhóm tuổi có tỷ lệ nhiều nhất là nhóm 1 (16 - 29 tuổi) chiếm 53,33%, rồi đến nhóm 2 chiếm tỷ lệ 26,67%, nhóm 3 và nhóm 4 cùng chiếm 10,00%. Trong nhóm NMHKTC, nam giới chiếm đa số (73,33%), nữ giới chỉ chiếm 26,67%. Sự khác nhau có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Tỷ lệ VGBMTHĐ cao nhất ở nhóm tuổi 30-49 chiếm 70% sở dĩ nh vậy vì số liệu lấy ở hai bệnh viện quân đội do vậy đối tợng vào điều trị chủ yếu là quân nhân. Nhóm tuổi từ 50 tuổi trở lên chiếm 13,33%, nhóm tuổi dới 30 tuổi chiếm 16,67%. Nhóm đối tợng nghiên cứu của chúng tôi có tỷ lệ nam là 86,67%, tỷ lệ nữ là 13,37%. Sự khác biệt về giới trong nhóm VGBMTHĐ qua kết quả nghiên cứu có ý nghĩa thống kê với p < 0,05. Bảng 1: So sánh sự phân bố của BN theo tuổi ở hai nhóm. Nhóm Tuổi NMHKTC (n = 30) VGBMTHĐ (n = 30) p 16-30 16 (53,33%) 5 (16,67%) < 0,01 30 - 39 8 (26,67%) 13 (43,33%) > 0,05 40-49 3 (10,00%) 8 (56,67%) > 0,05 50 - 60 3 (10,00%) 4 (13,33%) > 0.05 Tổng 30 (100%) 30 (100%) Kết quả bảng 1 cho thấy: Sự phân bố theo tuổi ở hai nhóm BN nghiên cứu có sự khác biệt rõ ở lứa tuổi 16 - 30 (p < 0,01). Trong khi đó, sự phân bố theo tuổi ở các lứa tuổi khác của 2 nhóm nghiên cứu không thấy sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p > 0,05). Bảng 2: So sánh sự phân bố của BN ở hai nhóm theo giới. Nhóm Giới tính NMHKTC (n = 30) VGBMTHĐ (n = 30) p Nam 22 (73,33%) 26 (86,67%) > 0,05 Nữ 8 (26,67%) 4 (13,33%) > 0,05 Tổng 30 (100%) 30 (100%) Bảng 2 cho thấy: So sánh sự phân bố của BN ở hai nhóm nghiên cứu theo giới là không có sự khác biệt với p > 0,05. 2. So sánh sự hiện diện của các Marker HBV Bảng 3: So sánh sự hiện diện của các marker HBV ở hai nhóm. Nhóm Marker NMHKTC (n = 30) VGBMTHĐ (n = 30) p HBsAg 528,409 988,67 4038,79 6840,89 < 0,05 HbeAg(+) 8 (26,67%) 19 (63,33%) < 0,01 Anti-HBe(+) 23 (76,67%) 9 (30,00%) < 0,001 HBeAg(+)/Anti-HBe(-) 5 (16,67%) 18 (60,00%) < 0,01 HBeAg(-)/Anti-HBe(+) 20 (66,67%) 8 (26,67%) < 0,01 HBeAg(+)/Anti-HBe(+) 3 (10,00%) 1 (3,33%) > 0,05 HBeAg( - )/Anti - HBe( - ) 2 (6,67%) 3 (10,00%) > 0,05 Anti-HBc IgG(+) 30 (100%) 30 (100%) Kết quả nghiên cứu trình bày ở bảng 3 cho thấy: Hàm lợng trung bình của HBsAg, tỷ lệ HBeAg(+), tỷ lệ Anti-HBe (+) ở hai nhóm nghiên cứu là có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (tơng ứng p<0,05, p<0,01, p<0,001). Tỷ lệ BN có HBeAg(+) mà Anti-HBe(-) và tỷ lệ BN có HBeAg(-) mà Anti-HBe(+) ở hai nhóm nghiên cứu có sự khác biệt (p < 0,01). Bảng 4: So sánh nồng độ HBV- DNA ở hai nhóm. Nhóm HBV-DNA NMHKTC (n = 30) VGBMTHĐ (n = 30) P < 10 5 copies/ml 23(76,66%) 9(30,00%) < 0,001 10 5 copies/ml 7 (23,33%) 21 (70%) <0,01 Y học thực hành (8 6 4 ) - số 3/2013 131 Kết quả bảng 4 cho thấy: Nồng độ HBV-DNA ở mức < 10 5 copies ở hai nhóm nghiên cứu có sự khác biệt với p < 0,001. Nồng độ HBV-DNA ở mức 10 5 copies ở hai nhóm nghiên cứu có sự khác biệt với p < 0,01. Trong đó, so sánh nồng độ HBV-DNA > 10 5 copies ở hai nhóm nghiên cứu có sự khác biệt (p < 0,01) còn nồng độ HBV-DNA ở mức 10 5 -10 7 copies ở hai nhóm là không có sự khác biệt (p > 0,05). Bảng 5: So sánh mối liên quan giữa HBV- DNA với HBsAg ở hai nhóm. Nhóm HBV- DNA NMHKTC HBsAg VGBMTHĐ HBsAg p < 10 5 copies/ml 183,47 329,39 959,16 2483,71 < 0,05 10 5 -10 7 copies/ml 1227,59892,34 1318,161450,62 > 0,05 > 10 7 copies/ml 2747,23 2783,49 7845,08 8944,92 > 0,05 Kết quả nghiên cứu ở bảng 5 cho thấy: Hàm lợng trung bình của HBsAg ở nồng độ HBV- DNA < 10 5 copies/ ml ở hai nhóm nghiên cứu là có sự khác biệt nhau (p < 0,05). Trong khi đó, ở nồng độ HBV-DNA 10 5 copies/ml thì sự khác nhau về hàm lợng HBsAg không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Bảng 6: So sánh mối liên quan giữa HBV- DNA với HBeAg ở hai nhóm. Nhóm HBV-DNA NMHKTC HBeAg VGBMTHĐ HBeAg p 10 5 / HBeAg(+) 5 (16,67%) 14 (46,67%) < 0,05 < 10 5 / HBeAg(-) 20 (66,66%) 4 (13,33%) < 0,001 10 5 / HBeAg( - ) 2 (6,67%) 7 (23,33%) > 0,05 < 10 5 / HBeAg(+) 3 (10,00%) 5 (16,67%) > 0,05 Nhận xét: tỷ lệ HBeAg(-) ở nồng độ HBV-DNA < 10 5 copies/ml ở hai nhóm nghiên cứu có sự khác biệt rõ rệt (p < 0,001) và tỷ lệ HBeAg(+) ở nồng độ HBV- DNA 10 5 copies/ml ở hai nhóm nghiên cứu cũng có sự khác biệt (p < 0,05). Bảng 7: So sánh mối liên quan giữa HBV-DNA với Anti-HBe ở hai nhóm Nhóm HBV-DNA NMHKTC Anti-HBe VGBMTHĐ Anti-HBe p 10 5 /Anti - HBe (+) 3 (10,00%) 7 (23,33%) > 0,05 < 10 5 / Anti-HBe(-) 3 (10,00%) 7 (23,33%) > 0,05 10 5 / Anti - HBe( - ) 4 (13 ,33%) 14 (46,67%) < 0,01 <10 5 /Anti-HBe (+) 20 (66,67%) 2 (6,67%) < 0,001 Kết quả bảng 7 cho thấy: tỷ lệ Anti-HBe(+) ở nồng độ HBV-DNA <10 5 copies/ml và tỷ lệ Anti-HBe(-) ở nồng độ HBV-DNA 10 5 copies/ml ở hai nhóm nghiên cứu là có sự khác biệt nhau (p tơng ứng là < 0,001; < 0,01). Kết luận Qua nghiên cứu tìm hiểu sự hiện diện marker HBV và mối liên quan giữa nồng độ HBV-DNA với các dấu ấn khác của HBV ở hai nhóm nghiên cứu NMHKTC và VGBMTHĐ, chúng tôi rút ra một số kết luận nh sau: ở nhóm tuổi 16-30, NMHKTC có tỷ lệ HBsAg(+) cao hơn có ý nghĩa so với nhóm VGMHĐ (53,33% và 16,67%). Không có sự khác biệt về tỷ lệ HBsAg(+) giữa hai giới tính. Bệnh nhân VGMTHĐ có hàm lợng HBsAg cao, nồng độ HBV-DNA > 10 5 copies/ ml và HBeAg(+) trong khi NMHKTC có hàm lợng HBsAg thấp, nồng độ HBV-DNA < 10 5 copies/ ml và Anti-HBe(+). Tài liệu tham khảo 1. Bộ môn Truyền nhiễm-Học viện quân y (2002). Viêm gan virút. Bệnh học Truyền nhiễm NXB y học. 2. Bộ môn Vi sinh-Học viện quân y (1997). Vi sinh vật y học (Sách dùng để dạy và học bậc sau đại học) Các virút gây bệnh viêm gan. Nhà in Học viện quân y. Tr 151- 168 3. Trần Thị Chính, Phan Thị Phi Phi, Trơng Mộng Trang (1993), Một số nghiên cứu về ngời lành mang HBsAg. Hội nội khoa Việt Nam. Nội khoa 2- 1993. Tr 40. 4. Trần Kim Chi (1998), Đặc điểm lâm sàng, biến đổi sinh hoá và dấu ấn virut ở bệnh nhân viêm gan B mạn. Luận văn thạc sỹ y học. 5. Lê Thu Hà (2002), áp dụng kỹ thuật PCR phát hiện HBV-DNA trong huyết thanh bệnh nhân viêm gan B mạn tính hoạt động và ngời mang HBsAg không triệu chứng. Luận văn thạc sỹ y học. 6. Hoàng Tiến Tuyên (2004), Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, hoá sinh, marker và tổn thơng mô bệnh học ở bệnh nhân viêm gan B mạn hoạt động, Luận văn thạc sỹ y học. 7. Dienstag. JL, Isselbacher. K (1998). Chronic viral hepatitis. Harrison s Volume 2, 14 th edition 1998. pp 1696- 1704. Principles and pratice of gastroenterology and hepatology. 1994. pp 997- 1002. 8. Kendai yalcin (2003), Determinatin of serum hepatitis B virus DNA in chronic HBsAg carriers: Clinical significance and correlation with serological markers, Turk J Gastroenterol 2003 U (3), pp. 157- 163 . 129 Tìm hiểu sự khác nhau của các marker HBV ở bệnh nhân viêm gan mạn hoạt động và ngời mang HBsag không triệu chứng Nguyễn Khuyến - Bệnh viện đa khoa Đức Giang Đỗ Tuấn Anh - Bệnh viện. nghiên cứu đề tài này nhằm mục tiêu: Tìm hiểu sự khác nhau của các marker HBV ở bệnh nhân viêm gan mạn hoạt động và ngời mang HBsAg không triệu chứng Đối tợng và phơng pháp nghiên cứu 1. Đối. 60 bệnh nhân đợc chia thành hai nhóm viêm gan mạn hoạt động (VGMHĐ) và ngời mang HBsAg không triệu chứng (NMHKTC) bằng phơng pháp tiến cứu cắt ngang với mục tiêu tìm hiểu sự khác nhau của các