KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CÓ TRONG THÂN CÂY ĐING LĂNG POLYSCIAS FRUTICOSA VÀ TÁCH CHIẾT SAPONIN

KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CÓ TRONG THÂN CÂY ĐING LĂNG POLYSCIAS FRUTICOSA VÀ TÁCH CHIẾT SAPONIN

KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HOÁ HỌC CÓ TRONG THÂN CÂY ĐING LĂNG POLYSCIAS FRUTICOSA

VÀ TÁCH CHIẾT SAPONIN

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TPHCM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ KĨ THUẬT MÔI TRƯỜNG

GVHD: LÊ THỊ THUÝ

BÁO CÁO ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP

NỘI DUNG TRÌNH BÀY

PHẦN 1: TỔNG QUAN VỀ CÂY ĐINH LĂNG VÀ SAPONIN

I Tổng quan về cây đinh lăng

II Tổng quan về saponin

PHẦN 2: KHẢO SÁT THỰC VẬT HỌC

III Phương pháp

IV Kết quả

PHẦN 3: PHÂN TÍCH SƠ BỘ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC TRONG THÂN CÂY ĐINH LĂNG

V Phân tích sơ bộ thành phần hoá học

VI Định tính saponin

PHẦN 4: CHIẾT XUẤT VÀ ĐỊNH LƯỢNG SAPONIN THÔ

PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

Tài liệu tham khảo

I Tổng quan về cây đinh lăng:

1 Tên gọi

 Tên thường gọi: đinh lăng lá

nhỏ, nam dương lâm, cây gỏi

cá

 Cây được trồng làm cảnh hay

làm thuốc trong y học cổ

truyền.

2 Mô tả thực vật:

 Cây nhỏ, cao từ 1,5 - 2 mét

 Lá kép 3 lần, mọc so le, lá chét

có răng cưa nhọn

 Thân nhẵn, không có gai, ít phân nhánh.

 Hoa đinh lăng màu lục nhạt hoặc trắng xám, quả dẹt, màu trắng bạc.

2 Thành phần hoá học của cây đinh lăng:

 Gồm có các hợp chất như: glucosid, alkaloid, vitamin B1, tanin, 20 loại axit amin trong đó có các acid amin không thay thế (lysin, methionin, trytophan, cystein).

II TỔNG QUAN VỀ SAPONIN:

Saponin còn gọi là saponosid là một nhóm glycosid lớn, gặp rộng rãi trong thực vật Saponin cũng có trong một số động vật như hải sâm, cá sao

2 Phân loại:

Cấu trúc hóa học cơ bản của saponin (a: triterpenoid ; b: steroid)

Một số tác dụng của Saponin:

 Saponin có tác dụng long đờm, chữa ho.

 Saponin làm tăng sự thấm của tế bào; sự

có mặt của saponin sẽ làm cho các hoạt chất khác dễ hoà tan và hấp thu.

 Một số saponin có tác dụng chống

viêm Một số có tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm, ức chế virus

 ….

PHẦN 2 KHẢO SÁT THỰC VẬT HỌC CÂY

ĐINH LĂNG

 Cây đinh lăng được lấy tại

huyện Phú Giáo, tỉnh Bình

Dương, cây được 3 năm tuổi.

 Cây cao khoảng 1.3m, thân

nhẵn, không gai.

 Lá kép 3 tầng, thơm, dài 20

– 40 cm.

 Trái tròn hơi dẹp, màu trắng

bạc, dài và rộng 3 – 4 mm.

Đăc điểm hình thái

2 Kết quả

• Theo sách Cây Cỏ Việt

Nam, tập 2, trang 516 thì

cây đinh lăng được lấy

chính là cây đinh lăng

Polyscias fruticosa (L)

Harms

Đặc điểm bột dược liệu

Bột cây đinh lăng

PHẦN 3 PHÂN TÍCH SƠ BỘ THÀNH

PHẦN HOÁ HỌC

1 Phân tích sơ bộ thành phần hoá học

Mẫu thử

Ethanol

Bã dược liệu

Bã dược liệu Dịch chiết ether

Dịch chiết cồn

Dịch chiết nước

Nước

Xác định các chất trong dịch chiết

Nhóm hợp chất Thuốc thử Phản ứng dương tính

Chất béo Nhỏ dung dịch lên giấy Vết trong mờ

Carotenoid H2SO4 Xanh dương hay xanh

lục ngả sang xanh dương Tinh dầu Bốc hơi tới cắn Có mùi thơm

Triterpenoid tự do Liebeermann – Burchard Đỏ nâu – tím, lớp trên có

màu xanh lục Alkaloid Thuốc thử chung

Saponin Lắc mạnh dung dịch

nước Bền trong 30 phút

Nhóm hợp chất Thuốc thử Phản ứng

dương tính

Kết quả định tính trên dịch chiết

Dịch chiết ether Dịch chiết cồn

70 0

Dịch chiết nước

Chất béo Nhỏ dung dịch lên giấy Vết trong mờ ++ -

-Carotenoid H2 SO4 Xanh dương hay

xanh lục

-Alkaloid Thuốc thử chung alkaloid Kết tủa + ±

Anthocyanosid KOH 10% có màu hồng tới Dung dịch kiềm

-Acid hữu cơ Na2 CO3 Sủi bọt

-2 ĐỊNH TÍNH SAPONIN

Định tính tính tạo bọt

Định tính tính tạo bọt

Định tính phá huyết

Định tính phá huyết

Định tính saponin bằng phản ứng màu

Định tính saponin bằng phản ứng màu

ĐỊNH TÍNH SAPONIN

Tính tạo

bọt

Chỉ số tạobọt

Tính phá

huyết

Chỉ số phá

huyết

Định tính tạo bọt

Cột bọt hai ống nghiệm sau khi lắc Màu hai ống nghiệm sau khi cho hoá chất

Xác định chỉ số tạo bọt

Chiều cao cột bọt của 10 ống nghiệm

Tính phá huyết

2 1

Ống bị phá huyết (1) so với ống chưa phá huyết

(2).

Xác định chỉ số phá huyết

1 2

3 4

5 6

7 8

9 10

Định tính bằng phản ứng màu

Phản ứng dương tính với thuốc thử

PHẦN 4 CHIẾT XUẤT VÀ ĐỊNH LƯỢNG SAPONIN

THÔ TOÀN PHẦN

1 PHƯƠNG PHÁP CHIẾT XUẤT

Phương pháp soxlet

Thân cây

Bột cây khô

Dung dịch chiết

Ngâm với dung môi etanol, nước Dung dịch chiết

Tủa

Saponin thô toàn phần

Chiết với dung

môi etanol, nước.

Đuổi dung môi

ngâm acetone, lọc

Bột cây tươi

2 PHƯƠNG PHÁP BỐ TRÍ THÍ NGHIỆM

Thí nghiệm được bố trí theo kiểu thí nghiệm hai nhân tố, mô hình bố trí thí nghiệm hoàn toàn ngẫu nhiên Trong đề tài này, chúng em khảo sát về ảnh hưởng của dung môi và thời gian, nguyên liệu và phương pháp chiết lên

hiệu quả chiết suất saponin Thí nghiệm được chia làm bốn thí nghiệm.

Thí nghiệm 1: Lượng saponin toàn phần thu được từ

mẫu khô với phương pháp soxhlet.

Biểu đồ biểu diễn khối lượng saponin thu được thí

nghiệm 1

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25

2giờ 3giờ 4 giờ 2giờ 3giờ 4 giờ 2giờ 3giờ 4giờ

Lượng saponin thu được từ mẫu khô với phương pháp soxhlet

sau khi xử lý số liệu

Thí nghiêm 2 ̣m 2 : Lượng saponin toàn phần thu được từ

mẫu khô với phương pháp ngâm

Biểu đồ biểu diễn khối lượng saponin thu được

thí nghiệm 2

0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14

2giờ 3giờ 4 giờ 2giờ 3giờ 4 giờ 2giờ 3giờ 4giờ

Lượng saponin thu được từ mẫu khô với phương pháp

ngâm sau khi xử lý số liệu.

Thí nghiệm 3: Lượng saponin toàn phần thu được từ

mẫu tươi với phương pháp soxhlet.

Biểu đồ biểu diễn khối lượng saponin thu được

thí nghiệm 3

0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14

2giờ 3giờ 4 giờ 2giờ 3giờ 4 giờ 2giờ 3giờ 4giờ

Lượng saponin thu được từ mẫu tươi với phương pháp

soxhlet sau khi xử lý số liệu

Thí nghiệm 4: Lượng saponin toàn phần thu được từ

mẫu tươi với phương pháp ngâm.

Biểu đồ biểu diễn khối lượng saponin thu được

thí nghiệm 4

0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12

2giờ 3giờ 4 giờ 2giờ 3giờ 4 giờ 2giờ 3giờ 4giờ

Lượng saponin thu được từ mẫu tươi với phương pháp

ngâm sau khi xử lý số liệu

CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ

• Trong cây đinh lăng có chứa saponin steroid.

• Khả năng chiết suất của các dung môi khác nhau, trong đó etanol là dung môi thích hợp nhất để tách chiết saponin trong cây đinh lăng.

• Thời gian chiết suất ảnh hưởng có ý nghĩa tới năng suất chiết suất Và 4 giờ là thời gian thích hợp để chiết suất.

• Trong hai loại mẫu tươi và khô với cùng khối

lượng thì mẫu khô chứa nhiều hàm lượng saponin hơn tươi.

Kết luận

Quy trình tách chiết hoàn chỉnh

Chiết theo phương pháp Soxhlet với dung môi cồn

Đuổi dung môi

Tủa lạnh với aceton

Thu tủa

sấy

Saponin thô toàn phần

saponin như: dung môi, tỷ lệ dung môi,

nhiệt độ, các phương pháp chiết xuất

khác.

Tài liệu tham khảo

• Giáo trình phương pháp nghiên cứu dược liêu Trường Đại Học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh, môn dược liệu, xuất bản năm 2004

• Dược Điển Việt Nam IV, 2004

• Cây Cỏ Việt Nam, quyển II, Phạm Hoàng Hộ, nhà xuất bản trẻ, 2003

• Phương pháp cô lập, Nguyễn Kim Phi Phụng, nhà xuất bản Đại Học

Quốc Gia Thành Phố Hồ Chí Minh

• Nghiên cứu khả năng tạo rễ từ nuôi cấy in vitro và nuôi trồng thuỷ canh để thu nhận saponin trên cây đinh lăng, Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên, TP Hồ Chí Minh, 2007

Cám ơn quý thầy cô và

các bạn đã theo dõi