Nghiên cứu sàng lọc thuốc điều trị bệnh viêm nhiễm phụ khoa có nguồn gôc cây cỏ

BỘ Y TẾ TROÌỈNG ĐẠI HỌC DUỢC HÀ NỘI ^|> ĐÀO KIỂU LINH NGHIÊN CỨU SÀNG LỌC THUỐC ĐlỂU TRỊ BỆNH VIÊM NHIỄM PHỤ KHOẠ^^ ^ CÓ NGUỔN GỐC CÂY cỏ f fíH>^ioị\í - Ị n:i; uỆN;* \ ịc ư a - n , KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược SỸ KHÓA 2 0 » i; 20ạj.; Người hướng dẫn: ThS. Vũ Vân Anh ThS. Nguyễn Vũ Thủy Noi thực hiện: Bộ môn Thực vật - Trường ĐH Dược Hà Nội Phòng vi sinh - Bệnh viện Phụ sản TW Thời gian thực hiện: 02/2007 - 05/2007 HÀ NỘI, THÁNG 05/2007 LÒI CẢM ƠN Để hoàn thành khoá luận này em đã nhận được sự giúp đỡ tận tình của các thầy cô và các bạn. Em xin bầy tỏ lời cảm ơn chân thành và sâu sắc tới: Ths. Vũ Vân Anh - Bộ môn Thực vật trường Đại học dược Hà Nội Ths. Nguyễn Vũ Thuỷ - Bệnh viện phụ sản TW Là những người đã trực tiếp hướng dẫn em trong quá trình thực hiện khoá luận. Em xin gửi lời cảm ơn tới toàn thể các thầy cô, các cán bộ kỹ thuật viên trong bộ môn Thực vật đã tạo điều kiện thuận lợi để em hoàn thành khoá luận tốt nghiệp. Cuối cùng cho phép em cảm ơn những người thân, gia đình và các bạn sinh viên cùng học tập nghiên cứu đã động viên và giúp đỡ để em hoàn thành khoá luận tốt nghiệp này. Hà Nội, ngày 16 tháng 5 năm 2007 Sinh viên Đào Kiều Linh DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TRONG KHÓA LUẬN c. albicans Candida albicans p. aeruginosa Pseudomonas aeruginosa s. aureus Staphylococcus aureus v sv Vi sinh vật TW Trung ương N Nystatin G Gentamycin SD Sinh dục VK Vi khuẩn MỤC LỤC T rang ĐẶT VẤN Đ Ể 1 PHẦN 1 - TỔNG QUAN 2 1.1. BỆNH VIÊM NHIỄM PHỤ KHOA 2 1.1.1. Hệ vi khuẩn âm đạo 3 1.1.2. Bệnh nhiễm khuẩn âm đạo 3 1.1.3. Bệnh nấm phụ khoa 4 1.2. CÁC TÁC NHÂN GÂY BỆNH VIÊM NHIỄM ph ụ k h o a 5 ] .2.1. Bệnh do vi khuẩn 5 1.2.2. Bệnh do nấm men 6 1.2.3. Bệnh do virus 6 1.2.4. Bệnh do đơn bào 6 1.3. PHÒNG TRÁNH BỆNH 8 1.4. MỘT SỐ THUỐC ĐlỀU TRỊ BỆNH VIÊM NHIỄM phụ k ho a TRÊN THỊ TRƯỜNG 8 PHẦN 2 - THỰC NGHIỆM VÀ KÊT QUẢ 10 2.1. NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP THựC NGHIỆM 10 2.1.1. Nguyên vật liệu 10 2.1.2. Phương pháp thực nghiệm 11 2.1.2.1. Phương pháp điều tra cộng đồng 11 2.1.2.2. Xác định tên khoa học của cây thuốc 11 2.1.2.3. Phương pháp thử tác dụng 12 2.2. KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ NHẬN XÉT 16 2.2.1. Điều tra, sàng lọc cây thuốc có tác dụng điều trị bệnh viêm nhiễm phụ khoa 16 2.2.2. Nghiên cứu về thực vật học 19 2.2.2.1. Cây Nhội 19 2.2.2.2. Cây Mò mâm xôi 20 2.2.2.3. Cây Sòi trắng 22 2.2.2.4. Cây Cúc bạc đầu 24 2.2.2.5.CâyCỏcứt lợn 25 2.2.3. Thử nghiệm trên các chủng vi sinh vật 27 2.2.3.1. Xác định nồng độ nhũ dịch của vi sinh vật chỉ th ị 27 2.2.3.2. Sàng lọc bước đầu trên các chủng vi sinh vật gây bệnh viêm nhiễm phụ khoa 28 2.2.3.3. Tác dụng kháng vi sinh vật trên hỗn hợp nước sắc 31 2.2.3.4. So sánh tác dụng với nước cất 32 2.2.3.5. So sánh tác dụng với chất đối chứng 33 KẾT LUẬN 36 1. VỀ DƯỢC DÂN TỘC HỌC 36 2. VỀ THỰC VẬT 36 3. THỬTÁC DỤNG KHÁNG VI SINH VẬT 37 3.1. Sàng lọc bước đầu trên các chủng vi sinh vật gây bệnh viêm nhiễm phụ khoa . 37 3.2. Tác dụng kháng vi sinh vật trên hỗn hợp nước sắc 37 3.3. Ảnh hưởng của nước cất 38 3.4. So sánh tác dụng với chất đối chứng 38 ĐỂ XUẤT 39 ĐẶT VẤN ĐÊ Nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, nóng ẩm quanh năm, Việt Nam có hệ thực vật vô cùng đa dạng và phong phú. Với điều kiện tự nhiên thuận lợi đó đã tạo cho đất nước chúng ta một nguồn tài nguyên cây cỏ dồi dào. Đồng thời, Việt Nam cũng là một 16 quốc gia trên Thế giới có mức độ đa dạng sinh học cao. Theo cuốn " Từ điển cây thuốc Việt Nam" của Võ Văn ơii (1997) thì có đến 3200 loài thực vật làm thuốc. Đó là sự ưu đãi đặc biệt của thiên nhiên với đất nước chúng ta và chứng tỏ tiềm năng cây thuốc nam của nước ta là rất lớn. Còn tri thức sử dụng nguồn tài nguyên này thì sao? Chúng ta có quyền tự hào rằng tri thức sử dụng nguồn tài nguyên này rất phong phú. Với cộng đồng 54 dân tộc khác nhau họ đã sử dụng cây thuốc trong chăm sóc sức khỏe, chữa trị bệnh và các nhu cầu kinh tế khác. Tuy nhiên, đó mới chỉ là những kinh nghiệm dân gian truyền miệng mà chưa đươc kiểm chứng nhiều. Bệnh viêm nhiễm nói chung, bệnh viêm nhiễm phụ khoa nói riêng là một bệnh khá phổ biến và hiện nay đang lan rộng. Đặc biệt, khí hậu nóng ẩm của nước ta rất thích hợp cho các vi sinh vật (VSV) phát triển và gây bệnh trong đó có các vsv gây bệnh phụ khoa. Hậu quả của bệnh này sẽ làm ảnh hưởng đến sức khoẻ cho cả nam và nữ cũng như cho thai nhi và trẻ em đặc biệt là nguy cơ chửa ngoài tử cung và gây vô sinh. Do đó, việc tìm thuốc để điều trị bệnh này là một vấn đề đáng được quan tâm. Trước thực tế đó, chúng tồi đã tiến hành thực hiện đề tài ’’Nghiên cứu sàng lọc thuốc điều trị bệnh viêm nhiễm phụ khoa có nguồn gốc cây cỏ" với nội dung: - Sàng lọc cây thuốc có tác dụng điều trị bệnh viêm nhiễm ph:j khoa tại cộng đồng. - Thử tác dụng trên một số chủng vsv gây bệnh phụ khoa PHẨN 1 - TỔNG QUAN 1.1. BỆNH VIÊM NHIỄM PHỤ KHOA Nỉúễm khuẩn đường sinh dục là một trong những nguyên nhân bệnh tật cao nhấl thế giới. Hiện có khoảng 20 vsv (Candida albicans, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Trichomonas, Bacilỉus cereus, ) có khả năng lây truyền qua đưòỉng tình dục cũng như các sinh vật khác có thể sinh trưởng trong đưòfng sinh dục cũng gây ra các vấn đề về sức khỏe sinh sản [1] Nhiểm khuẩn đường sinh dục gồm 3 loại: * Nhiễm khuẩn nội sinh là do sự phát triển quá mức của vsv có sẵn trong đường sinh dục của phụ nữ khoẻ mạnh như: viêm âm đạo do vi khuẩn, viêm cổ tử cung do tạp khuẩn [8] * Những bệnh nhiễm khuẩn do y tế: Viêm âm đạo, tử cung, phần phụ do vi khuẩn là biến chứng của sảy thai, đẻ, nạo hút thai không an loàn hoặc đặt dụng cụ tử cung. Mầm bệnh thường gặp là: Gardnella vaginalis, Mycoplasma hominis, vi khuẩn kỵ khí, các loại liên cầu, tụ cầu và vi khuẩn đường ruột [8]. * Do các bệnh lây truyền qua đường tình dục như chlammydia, lậu, giang mai, trichomonas (ký sinh trùng roi), hột xoài (hạ cam), mụn giộp sinh dục (herpes), sùi mào gà và nhiễm virus gây suy giảm miễn dịch ở người (HIV) [8], Tất cả các nhiêm khuẩn này đêu có thể khỏi được nếu phát hiện sớm và điều trị kịp thời. Song, hậu quả của các bệnh lây truyền qua đường tình dục (STD) trong những năm gần đây không ngừng tăng cao và có chiều hướng tiếp tục phát triển trong những năm tới nếu không có các biện pháp ngăn chặn. Không những thế, bệnh lây truyền qua đường tình dục phát triển song hành cùng với đại dịch HIV/AIDS. Theo ước tính của cơ quan phòng chống HIV/AIDS của Liên hiệp quốc (UNAIDS) hàng năm có khoảng 390 triệu người mắc các bệnh lây truyền qua đường tình dục. Tuy nhiên, bệnh chủ yếu tập trung ở các nước chậm hoặc đang phát triển như châu Phi, châu Á và châu Mỹ la tinh [4]. Bảng 1.1. Tình hình nhiễm bệnh phụ khoa trên thế giới [Năm 2003] CÁC LOẠI BỆNH SỐ NGƯỜI MẮC BỆNH (TRIỆU) - Tricomonas (Trùng roi) 170 - Chlamydia trachomatis 89 - Bệnh lậu 62 - Sùi mào gà (Papiloma) 30 - Herpes sinh dục 20 - Giang mai 12 - Hạ cam 07 Cộng 390 Tất cả các bênh lây truyền qua đường tình dục có thể phòng ngừa và hầu hết có thể điều trị khỏi được, nhưng điều quan trọng nhất là phòng bệnh, phát hiện sớm, điều trị kịp thời và được theo dõi quản lý. 1.1.1. Hệ vi khuẩn âm đạo Hệ vi khuẩn âm đạo thường được tạo thành bởi rất nhiều loại vi khuẩn sống trong hệ môi trường acid. Lactobacỉllus vagillaỉỉs là một loại vi khuẩn có ích, thường tiết ra acid lactic là chất chủ yếu tạo nên độ pH cho âm đạo. Khi thiếu hụt loại vi khuẩn này, môi trường pH sẽ tăng (pH kiềm). Đây là điều kiện thuận lợi cho vi khuẩn có hại phát triển, gây ra các hiện tượng nhiễm khuẩn và viêm [5 . 1.1.2. Bệnh nhiễm khuẩn âm đạo Bệnh nhiễm khuẩn âm đạo là các biểu hiện bất thường ở hệ vi khuẩn âm đạo đặc trưng bằng việc dịch tiết âm đạo. * Nguyên nhản: Là do sự tăng số lượng các vi khuẩn ở âm đạo. ỈChi sự mất cân bằng của các vsv này xảy ra, làm cho âm đạo bị tăng tiết dịch và dịch tiết có mùi. [5],[6], Những irường hợp bị nhiễm khuẩn âm đạo thường không gây nguy hiểm nhưng gây khó chịu cho người bệnh. Người ta không xếp các bệnh viêm nhiễm qua đường tình dục như : lậu, giang mai vào nhóm các bệnh nhiễm khuẩn âm đạo. * Triêu chứng : Nhiễm khuẩn âm đạo thường ít có biểu hiện rõ rệt ngoài việc tiết dịch âm đạo và có mùi hôi. Thông thường đa số phụ nữ thường cho rằng việc tiết dịch âm đạo là bình thường. Một nửa số phụ nữ bị nhiễm khuẩn âm đạo thường không có biểu hiện gì, số còn lại thường có dịch tiết nhiều, mùi tanh và có màu trắng xám [5]. Biến chứng [6 Nhiễm khuẩn âm đạo không lây qua hoạt động tình dục Nhiễm khuẩn âm đạo có thể khỏi hoàn toàn sau khi được điều trị Lưu ý: Nhiễm khuẩn âm đạo hay gây ra các phản ứng bất thường cho thai nhi như đẻ non hay nhiễm trùng tử cung sau đẻ Vì vậy, các sản phụ thường được khuyên nên xét nghiệm, chẩn đoán sớm để điều trị. 1.1.3. Bệnh nấm phụ khoa Bệnh nấm phụ khoa thường là viêm đường sinh dục do Candida aỉbicans. * Nguyên nhân: Do vệ sinh kém, do quần áo lót chật, do sức đề kháng giảm hoặc do viêm nhiễm qua đường sinh dục. Bệnh hay gặp ở người dùng kháng sinh, dùng corticoid lâu dài hoặc thuốc ức chế miễn dịch, làm mất cân bằng vi khuẩn chí ở đường ruột do thiếu sinh tố nhóm B [2,5]. Thông thường, Candida albicans có ở âm đạo phụ nữ khỏe mạnh nhưng không có biệu hiện gì. Tuy nhiên, khi cơ thể có những điều kiện thuận lợi cho nấm phát triển thì nấm này biến thành các yếu tố gây bệnh: 30- 50% sản phụ bị nhiễm nấm Candida âm đạo [5 . * Triệu chứng: Ngứa dữ dội, cảm giác rát bỏng âm hộ, phủ từng đám bờ rõ rệt. Môi lớn đỏ, rãnh giữa môi lớn và môi bé phủ chất nhày màu trắng đục. Lau chất nhày sẽ thấy niêm mạc đỏ sẫm, bóng bờ không đều, nham nhở, bên ngoài cùng có một viền vảy. Người bị nhiễm âm đạo thường bị tiểu buốt, giao hợp đau, âm đạo có chất nhày màu kem, khí hư nhiều có lẫn mủ, thành âm đạo màu đỏ tươi. Mở mỏ vịt thấy nhiều khí hư trắng đục, có khi lổn nhổn, ở cùng đồ sau khí hư đọng lại như những hạt sữa. cổ tử cung phù nề, không loét, phủ một lớp màng giả lấy ra dễ dàng, pH âm đạo < 4,5 [5'. * Biến chứng: Bệnh khỏi hoàn toàn sau khi đươc điều trị. 1.2. CÁC TÁC NHÂN GÂY BỆNH VIÊM NHIỄM p h ụ k h o a Bệnh viêm nhiễm phụ khoa là tên gọi chung của một nhóm bệnh gây ra các biểu hiện bất thường ở âm đạo và tác nhân bao gồm vi khuẩn, nấm, vi rus và một số v s v khác. 1.2.1. Bệnh do vi khuẩn [4] Bệnh lậu do lậu cầu khuẩn (Neisseria gorrhoeae) Bệnh do Chlamydia trachomatis Bệnh giang mai do xoắn khuẩn (Treponema Pallidum} Bệnh hạ cam do trực khuẩn {Haemophilus Ducrey) [...]... mẫu thử và mẫu chứng đan xen nhau 15 2.2 KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ NHẬN XÉT 2.2.1 Điều tra, sàng lọc cây thuốc có tác dụng điều trị bệnh viêm nhiễm phụ khoa ơìúng tồi đã tiến hành phỏng vấn 8 thầy lang đã có kinh nghiệm trong việc điều trị các bệnh phụ khoa tại xã Sủi Ngòi, thành phố Hoà Bình, tỉnh Hoà Bình Trong số 8 thầy lang có 5 người dân tộc Mường và 3 người dân tộc Kinh Danh sách các Ihầy lang được... lá cỏ cứt lợn trên các chủng vsv Hình 2.6 Ảnh chụp vòng vô khuẩn của 5 cây đã chọn trên chủng vsv 30 Nhân xét: Kết quả sàng lọc cho thấy, cá 5 cây đều có tác dụng trên ít nhất là một chủng vsv gây bệnh viêm nhiễm phụ khoa Trong đó, cây Sòi trắng và cây Mò mâm xôi có tác dụng trên nhiều chủng nhất (3/4 chủng thí nghiệm), tiếp đó cây Cúc bạc đầu có tác dụng trên 2/4 chủng thí nghiệm Cây cỏ cứt lợn và cây. .. {Streptococcus B) 1.2.2 Bệnh do nấm men [4] Candida albicans ký sinh ở âm đạo phụ nữ khoẻ mạnh Khi gặp điều kiện thuận lợi, c albicans trở thành tác nhân gây bệnh viêm nhiễm phụ khoa do nấm 1.2.3 Bệnh do virus [4] Bệnh viêm nhiễm phụ khoa gây ra bởi virus thường là bệnh sinh thứ phát sau khi cơ thể đã bị suy giảm miễn dịch như HIV/AIDS, viêm gan B Tuy nhiên, cũng có trưcmg hợp bệnh tiên phát do virus... dụng cây cỏ làm thuốc của các thầy lang ở xã Sủ Ngòi, tỉnh Hoà Bình khá tập trung Hay hiểu theo cách khác là các thầy lang có thể đã có sự trao đổi về chuyên môn với nhau trong việc điều trị bệnh Đây cũng là một nét đặc trưng, tiên tiến của dân lộc Mường Chính vì vậy, các cây thuốc được nhắc đến nhiều nhất (có hệ số FV lớn hơn 50%) trong việc chữa bệnh phụ khoa chính là các cây cần được 18 nghiên cứu. .. 1957) Số người có tuổi nghề cao nhất là 8 năm (Nguyễn Văn Lại), ít nhất là 2 năm (Tạ Duy Hiếu) Điều này cho thấy, các thầy lang đều là những người có kinh nghiệm lại vẫn còn khá dồi dào sức khoẻ, có khả năng đi xa để tìm kiếm các loại cây thuốc chữa bệnh Do đó, thông tin mà các thầy lang này đưa ra có sức thuyết phục Kết quả điều tra về các cây thuốc chữa bệnh phụ khoa (phiếu điều tra xem phụ lục) được... giá trị của mỗi cây thuốc trong việc chữa bệnh này Hầu hết các cây này đều chữa chứng viêm nhiễm thông thường với các triệu chứng chủ yếu là khí hư, bạch đới, ngứa và viêm Đây cũng chính là các chứng bệnh hay gặp nhất ở phụ nữ, đặc biệt là phụ nữ vùng nông thôn- nơi mà các điều kiện dành cho sinh hoạt cá nhân còn thiếu thốn Bộ phận dùng chủ yếu là lá (7/12 cây) Cách sử dụng cây thuốc như thế này là có. .. làm cho người bệnh khó chịu, đau đớn, phải nghỉ làm việc, tốn kém do chi phí điều trị, ảnh hưởng đến kinh tế và chất lượng đời sống gia đình Tất cả các yếu tố đó làm giảm chất lượng cuộc sống 1.4 MỘT SỐ THUỐC ĐlỂU TRỊ BỆNH VIÊM NHIỄM phụ khoa TRÊN THỊ TRƯỜNG Trên thị Irường có rất nhiều ihuốc chữa bệnh phụ khoa với nhiều hoạt chất và dạng dùng khác nhau Tuy nhiên, các thuốc này hầu hết là thuốc tân dược,... Chống rửa ngứa, chống viêm Từ đó, có thể thấy trên thị trường vẫn còn thiếu các sản phẩm chữa bệnh phụ khoa có nguồn gốc cây cỏ Trong khi kho tàng tri thức sử dụng cây thuốc ở nước ta lại rất phong phú ơiính vì thế, việc tiến hành nghiên cứu đề tài này là có giá trị PHẦN 2 - THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP THỰC NGHIỆM 2.1.1 Nguyên liệu - Nguyên liệu: Lá cây Nhội (Bischofia... sẽ có nồng độ thích hợp là 10^ tế bào/ml Đối với c albicans: nhũ dịch ở 10 ' sẽ có nồng độ thích hợp là 10^ tế bào/ml 2.23.2 Sàng lọc bước đầu trên các chủng vsv gáy bệnh viêm nhiễm phụ khoa Chủng vi sinh vật gây bệnh viêm nhiễm phụ khoa rất đa dạng bao gồm cả vi khuẩn hiếu khí (S.aureus, p.aeruginosa.), vi khuẩn kỵ khí {E coli, Klebsieìla sp.) và nấm âm đạo (C.albicans) Tuy nhiên, qua tình hình bệnh. .. Các bệnh hay gặp do C.albicans như : Tưa lưỡi ở trẻ sơ sinh, viêm âm đao - âm hộ, viêm móng và quanh móng, có khi chúng còn gây bệnh nội tạng như viêm nội mạc cơ tim, viêm màng não, màng phổi 1.3 PHÒNG TRÁNH BỆNH [8] Tăng cường công tác giáo dục truyền thông, giữ gìn vệ sinh Phát hiện sớm và điều trị tích cực các bệnh nhiễm khuẩn đường sinh sản Khám phụ khoa định kỳ hàng năm để phát hiện bênh Nhiễm . tìm thuốc để điều trị bệnh này là một vấn đề đáng được quan tâm. Trước thực tế đó, chúng tồi đã tiến hành thực hiện đề tài ’ Nghiên cứu sàng lọc thuốc điều trị bệnh viêm nhiễm phụ khoa có nguồn. khoa có nguồn gốc cây cỏ& quot; với nội dung: - Sàng lọc cây thuốc có tác dụng điều trị bệnh viêm nhiễm ph:j khoa tại cộng đồng. - Thử tác dụng trên một số chủng vsv gây bệnh phụ khoa PHẨN 1 - TỔNG. điều trị bệnh viêm nhiễm phụ khoa 16 2.2.2. Nghiên cứu về thực vật học 19 2.2.2.1. Cây Nhội 19 2.2.2.2. Cây Mò mâm xôi 20 2.2.2.3. Cây Sòi trắng 22 2.2.2.4. Cây Cúc bạc đầu 24 2.2.2.5.CâyCỏcứt