Bài thuyết trình Các tiêu chí kiểm nghiệm Salmonella

Quy trình phân tích định tính Salmonella trong nước... Phân loại • Các loài điển hình: – Salmonella typhi: gây bệnh thương hàn – Salmonella choleraesuis: gây bệnh nhiễm trùng máu – Salm

ĐỀ TÀI: CÁC TIÊU CHÍ KIỂM NGHIỆM SALMONELLA

I Khái quát chung về

Salmonella

II Môi trường và hóa chất

IV Quy trình phân tích định tính III Quy trình phân tích định tính Salmonella trong nước

I Khái quát chung

1 Định nghĩa:

• Salmonella là những trực khuẩn Gram (-), hiếu khí và kị khí tuỳ ý, không tạo bào tử, di động, lên men glucose sinh acid

• Không sinh indole, không phân giải ure, không

có khả năng tách nhóm amine từ tryptophan

• Thuộc họ Enterobacteriaceae nên sinh H2S

I Khái quát chung

2 Phân loại

• Các loài điển hình:

– Salmonella typhi: gây bệnh thương hàn

– Salmonella choleraesuis: gây bệnh nhiễm

trùng máu

– Salmonella enteritidis: gây rối loạn tiêu hoá

I Khái quát chung

• Salmonella typhi: gây bệnh thương hàn

I Khái quát chung

• Salmonella choleraesuis: gây bệnh nhiễm trùng máu

I Khái quát chung

• Salmonella enteritidis: gây rối loạn tiêu hoá

I Khái quát chung

3 Nguồn chứa Salmonella:

• Salmonella có ở bất kỳ thực phẩm tươi có

nguồn gốc động vật như thịt lợn, thịt gia cầm, sữa và các sản phẩm sữa, trứng, hải sản cùng với một số rau, quả

• Động vật nuôi trong nhà cũng có thể mang vi khuẩn salmonella

I Khái quát chung

4 Các đặc điểm:

• Tính chất nuôi cấy:

– Salmonella là vi khuẩn hiếu khí tùy nghi

nhưng phát triển tốt trong điều kiện hiếu khí – Sống ở nhiệt độ từ 5 – 46oC và pH từ 3,7 - 9,5 – Trên môi trường thạch thường, vi khuẩn tạo khuẩn lạc dạng S, tròn, lồi, trơn láng, bờ đều, thường không màu hay màu trắng xám Kích thước khuẩn lạc khoảng 2 – 4 mm

I Khái quát chung

4 Các đặc điểm:

• Sức đề kháng:

– Salmonella bị tiêu diệt ở nhiệt độ 50oC trong 1 giờ, 70oC trong 15 phút, 100oC trong 5 phút

– Sống sót trong môi trường thạch ở nhiệt độ

-10oC trong 115 ngày

I Khái quát chung

4 Các đặc điểm:

• Đặc tính sinh hóa:

I Khái quát chung

• Các chỉ tiêu về Salmonella trong thực phẩm:

• Tình hình nhiễm Salmonella

• Theo tiêu chuẩn cho phép vi sinh vật hiện diện trong thực phẩm của Bộ Y tế 4/1998, quy định không chấp nhận sự hiện diện của Salmonella trong 25 g hay 25 ml đối với tất cả các loại

thực phẩm

II Môi trường và hóa chất

• Môi trường canh RV (Rappaport Vassiliadis Soya Pepton)

• Môi trường pha loãng mẫu BPW (Buffered

Pepton Water)

• Môi trường XLD ( Xylose Lysine Deoxycholate Agar)

• Môi trường TSA (Trypton Soya Agar)

• Môi trường TSI (Triple Sugar Iron Agar)

• Môi trường TT (Tetrethionate Muller –

II Môi trường và hóa chất

• Môi trường HE (Hektoen Entric Agar)

• Môi trường BS (Bismuth Sulphite Agar)

• BPLS (Brillian Green Phenol Red Lactose Sucrose)

• Canh LDC (Lysine Decarboxylase)

• Ornithine Decarboxylase

• Môi trường MR – VP Broth

II Môi trường và hóa chất

• Sucrose

• Sorbitol

• Canh Trypton

• Thuốc thử Kovac’s

• Thuốc thử Barritt

• Kháng huyết thanh Salmonella đa giá

• Cồn 70% và 96%

• Nước cất

III Quy trình phân tích định tính trong thực

phẩm

1 Tăng sinh

2 Tăng sinh chọn lọc

3 Phân lập và nhận diện

4 Khẳng định

Quy trình kiểm tra

Đồng nhất

mẫu, ủ

Cấy dịch tăng sinh sang môi trường tăng sinh chọn lọc,

đơn, ủ

Cấy các khuẩn lạc Salmonell

a, sang BHI hay TSA, ủ qua đêm

Thử

nghiệm

sinh hóa

cho kết

KIA/TSI:

đỏ/vàng, có/không

hơi/không

Indol (-); VP (-); LDC (+); ODC (+); Manitol (+); Sorbitol

Thử nghiệm ngưng kết kháng huyết thanh: Poly:

O, Poly: H

IV Quy trình phân tích định tính Salmonella

trong nước

• Salmonella trong nước cần phải qua bước lọc thu gộp tế bào qua màng lọc, làm giàu trong môi trường tăng sinh để phục hồi các tế bào bị tổn thương Quy trình phát hiện gồm 4 bước tương tự như trường hợp thực phẩm

• Các lưu ý:

– Thể tích mẫu lấy

• Nhóm:

– Đặng Thị Thanh Kiều 61203297 – Võ Trúc Linh 61203312

– Châu Kim Hùng 61203273

– Phạm Thị Nga 61203342

– Trương Tú Linh 61203309

– Trần Thuỵ Thái Thanh 61203423 – Nguyễn Ngọc Thảo 61203434 – Võ Thị Ngọc Diệp 61203218

Cảm ơn các bạn đã chú ý theo dõi