công nghệ lai tế bào soma

1.Khái niệm Tế bào soma là loại tế bào sinh dưỡng đã biệt hóa cao đảm nhiệm 1 chức năng nhất định của cơ thể  Sự kết hợp của 2 tế bào soma mang những đặc tính của 2 loài lai gọi là

Lai tế bào soma

1.Khái niệm

 Tế bào soma là loại tế bào sinh dưỡng

đã biệt hóa cao đảm nhiệm 1 chức

năng nhất định của cơ thể

 Sự kết hợp của 2 tế bào soma mang

những đặc tính của 2 loài lai gọi là lai tế bào soma.

- Lai khác loài chi, họ ,bộ,

- Áp dụng đồng thời công nghệ nuôi cấy

tế bào và dung hợp tế bào trần.

2.Đặc điểm:

 Lai tế bào soma

 Nhanh, tiết kiệm thời gian

 Chất lượng cao

 Tạo ra được nhiều giống mới

4.Nội dung

Khái quát chung:

- Vì tế bào thực vật có thành tế bào cellulo nên phải tách bỏ thành tế bào để có thể lai tế bào soma(lai tế bào trần) một cách dễ dàng

- Nhờ công nghệ nuôi cấy tế bào và lai tế bào

trần đã cho phép các nhà tạo giống tạo nên

những tế bào lai khác loài,chi,họ,bô, những

tế bào lai này được gọi là tế bào soma Từ tế bào lai tạo này tạo nên mô sẹo và sẽ tái sinh nên cây lai soma mang đặc điểm di truyền của

cả bố và mẹ chẳng khác gì lai hữu tính

Tạo tế bào trần

Quy trình Dung hợp tế bào trần

Nuôi cấy tế bào trần

Tái sinh cây từ tế bào trần

Quá trình lai soma

Tế bào trần

Tế bào lai

Mô sẹo Cây trưởng thành

- Kim nhọn,dao phẩu tích để cắt các mô cùng lớp vỏ.

- Ngâm vào môi trường nuôi cấy pha loãng, tế bào sẽ phồng to và tách khỏi vỏ cellulose ra ngoài tạo thành các protoplast tự do

- Năng suất thấp

- xử lý bằng PEG:

Xử lý PEG cùng với pH/Ca2+ có hiệu quả tăng tần số dung hợp và khả năng sống sót của protoplast PEG có 2 tác dụng:

- cung cấp cầu nối để Ca2+ có thể liên kết các bề mặt màng vơi nhau

- dẫn đến sự rối loạn diện tích bề mặt

màng

Lá được cắt từ cây

X lí enzim đ hòa ử ể tan màng t bào ế

protoplast Kích thích b ng đi n hay hóa ch tấằ ệ

Dung h p t bào ợ ế

Dung h p nhân ợ

5.3) Nuôi cấy tế bào

trần( protoplast )

a) môi trường nuôi cấy

 Thành phần dinh dưỡng: B5,MS,Ca, sucrose(3-5%)

 Áp lực thẩm thấu của môi trường

 Mật độ dàn trải protoplast: tối ưu là 1.104 – 1.105/mL.

5.4) Tái sinh cây từ tế bào

tế bào cũng rất kém.

b) Phát triển cây hoàn chỉnh (callus)

- Sau khi tạo vách tế bào chung quanh, các tế bào được tái cấu trúc đã tăng kích thước và sau 1 tuần xuất hiện sự phân chia đầu tiên

- Sau 2 – 3 tuần , các khuẩn lạc tế bào có kích thước lớn được tạo thành và có thể cấy

chuyển chúng lên môi trường không có sự

điều chỉnh áp lực thẩm thấu để phát triển

thành cây hoàn chỉnh, các cây hoàn chỉnh

này được cảm ứng để phân hóa cơ quan,

hoặc tái sinh thành cây hoàn chỉnh

6) Chọn lọc các tế bào lai

a) Chọn lọc các thể lai soma

- Phương pháp mẫn với dược phẩm

- Các đột biến khuyết dưỡng

- Chọn lọc bổ sung di truyền

- Sử dụng các đột biến bạch tạng có các gene không allele cho chọn lọc bộc bổ sung di truyền

b) Chọn lọc tế bào lai

c) Con lai do sự dung hợp nhân

d) Con lai do sự dung hợp tế bào chất

S n ph m c a quá trình dung h p ả ẩ ủ ợ

Cây hoàn chỉnh

Quá trình lai tế bào soma

7) Một số thành tựu của kỹ thuật

này trên thế giới và ở Việt Nam

- Từ những năm 70 của thế kỷ XX,

người ta đã tạo ra được tế bào lai

soma từ 2 loài thuốc lá và tái sinh

được cây thuốc lá lai toàn vẹn.

- sau đây là một số thành tựu:

a)Dùng kỹ thuật lai soma để lai tế bào khoai tây với tế bào

cà chua, đã tạo nên cây lai, mang đặc

tính của khoai tây và

cà chua, có tính

kháng bệnh cao.

+

loài B oleracea loài B Campestris

+

loài Brassica napus

bất thụ, nhưng con lai soma giữa chúng lại hữu thụ và có khẳ năng

kháng lại những bệnh

trên

loài Nicotiana tabacum loài N Rustica

+

+

- e ) cây lúa, trong

chương trình hợp

tác giữa IRIR với

trướng đại học

Nottingham, nhờ sử dụng kỹ thuật

protoplast, người ta

đã tạo ra một số

giống lúa có tính bất dục tế bào chất

nhưng có khả năng