Tổng hợp dẫn xuất flavonoit và xác định các hoạt tính kháng oxi hóa, kháng nấm và khả năng gây độc cho tế bào ung thư

1 Mở Mở Mở Mở Đ ĐĐ ĐầU ầUầU ầU Xã hội hiện đại ngày nay cùng với yêu cầu về tuổi thọ phải ngày càng cao đã đặt ra cho các nhà khoa học nhiều bài toán mới nhằm tìm kiếm các chất có hoạt tính sinh học đặc biệt là các chất có nguồn gốc từ thiên nhiên do khả năng gây độc của chúng thấp, độ an toàn cao trong sử dụng để ứng dụng trong điều trị bệnh nhất là các loại bệnh nan y. Hiện nay nhóm flavonoit nhận đợc sự quan tâm của nhiều nhà khoa học trên thế giới do chúng luôn có mặt trong các loại thực phẩm hàng ngày của con ngời. Các nghiên cứu cho thấy các chất thuộc họ này không gây độc cho cơ thể dù dùng ở liều cao và khi sử dụng kết hợp với các loại thuốc khác nh thuốc trị ung th thì giúp làm giảm tác dụng phụ của các loại thuốc này. Rất nhiều các hợp chất đợc chiết tách đã đợc nghiên cứu và thử nghiệm, hàng loạt các hợp chất tổng hợp và bán tổng hợp vẫn đang liên tục đợc tạo ra tại nhiều phòng thí nghiệm trên thế giới nhằm tìm kiếm các loại thuốc trị bệnh có tác dụng mạnh hơn và ít độc hại hơn đối với cơ thể ngời bệnh. Với xu thế quay trở lại nghiên cứu các hợp chất thiên nhiên đang phát triển mạnh mẽ nhằm tìm kiếm các loại thuốc chữa bệnh, các phụ gia dùng trong thực phẩm, mỹ phẩm, các nhà khoa học Việt Nam cũng đã có nhiều nghiên cứu về nhiều khía cạnh của các hợp chất thiên nhiên nớc ta để tận dụng u thế của một nớc nhiệt đới, nơi có một hệ động thực vật đa dạng, phong phú, có nhiều loại cây cỏ có tác dụng sinh dợc học mạnh. Các nghiên cứu này cũng đã đạt đợc nhiều thành quả trong việc nghiên cứu và ứng dụng các hợp chất chiết xuất đợc vào một số lĩnh vực. Trên cơ sở đó, hớng nghiên cứu đề ra cho đề tài là tiến hành tổng hợp dẫn xuất của một vài hợp chất tách chiết từ nguồn nguyên liệu thiên nhiên có sẵn, tơng đối nhiều ở Việt Nam, từ đó thử nghiệm hoạt tính sinh học của chúng nhằm có đợc những nghiên cứu bớc đầu cho việc tổng hợp các dẫn xuất khác sau này đồng thời hy vọng có thể tìm thêm đợc những hợp chất mới có khả năng ứng dụng cao trong nhiều lĩnh vực, đặc biệt là trong y dợc. 2 Mục tiêu của luận án: Mục tiêu của luận án:Mục tiêu của luận án: Mục tiêu của luận án: Mục tiêu của luận án là tổng hợp các dẫn xuất từ một vài flavonoit có nhiều trong thiên nhiên và xác định các hoạt tính kháng oxi hóa, kháng nấm, kháng khuẩn và khả năng gây độc tế bào ung th của các hợp chất này để từ đó làm cơ sở khoa học cho các nghiên cứu tiếp theo nhằm đa vào sử dụng các flavonoit và dẫn xuất của chúng cho các ngành y tế, thực phẩm. Dựa trên các kết quả thu đợc hy vọng có thể đa ra nhận xét bớc đầu về mối quan hệ giữa cấu trúc và hoạt tính sinh học, từ đó làm cơ sở khoa học cho các nghiên cứu sâu hơn về mối quan hệ giữa cấu trúc và hoạt tính sinh học của các flavonoit nói chung và các dẫn xuất của chúng. Để đạt đợc các mục đích trên luận án đã thực hiện các nội dung sau: Để đạt đợc các mục đích trên luận án đã thực hiện các nội dung sau:Để đạt đợc các mục đích trên luận án đã thực hiện các nội dung sau: Để đạt đợc các mục đích trên luận án đã thực hiện các nội dung sau: 1- Tách chiết rutin từ hoa hòe và hesperidin từ vỏ quýt và tiến hành thủy phân hai hợp chất này thành quercetin và hesperetin để làm nguồn nguyên liệu cho các phản ứng tổng hợp tiếp theo. 2- Từ bốn hợp chất trên bằng các phơng pháp este hóa, ete hóa, halogen hóa để tạo ra các dẫn xuất của flavonoit, xác định cấu trúc của sản phẩm và các điều kiện phản ứng. 3- Khảo sát hoạt tính sinh học của các flavonoit và dẫn xuất gồm có hoạt tính kháng nấm, kháng khuẩn, hoạt tính kháng oxi hóa, khả năng gây độc tế bào ung th trên 3 dòng tế bào: HeLa tế bào ung th cổ tử cung, MCF-7 tế bào ung th vú, NCI-H460 tế bào ung th phổi. 4- Trên cơ sở những kết quả có đợc đa ra mối quan hệ giữa cấu trúc với từng hoạt tính thử nghiệm. 5- Thiết lập phơng trình QSAR (quan hệ định lợng cấu trúc hoạt tính) để có thể dự đoán tính gây độc tế bào của các dẫn xuất quercetin và hesperetin. 3 ý ýý ý nghĩa khoa học và thực tiễn nghĩa khoa học và thực tiễn nghĩa khoa học và thực tiễn nghĩa khoa học và thực tiễn - ý nghĩa khoa học Đề tài là cơ sở cho các nghiên cứu phản ứng este hóa, ete hóa, halogen hóa các flavonoit có các nhóm -OH linh động để từ đó tổng hợp đợc những dẫn xuất mới của flavonoit. Các khảo sát mối quan hệ giữa cấu trúc với hoạt tính kháng oxi hóa của flavonoit cho thấy các mối liên quan giữa độ âm điện của các nhóm -OH ở vòng B và nhóm -OH ở vị trí C-3 với khả năng kháng oxi hóa của các flavonoit và dẫn xuất. Kết quả khảo sát mối quan hệ giữa cấu trúc và hoạt tính gây độc tế bào cũng đã tiếp tục khẳng định mối liên quan giữa chỉ số logP, trọng lợng phân tử của hợp chất với khả năng thẩm thấu qua màng tế bào. - ý nghĩa thực tiễn Việc tổng hợp ra các dẫn xuất flavonoit từ nguồn nguyên liệu thiên nhiên Việt Nam sẽ giúp cho các nhà nghiên cứu ứng dụng tìm tòi phát hiện ra những hợp chất mới với những hoạt tính sinh học mới để có thể ứng dụng trong y dợc và nâng cao vai trò của cây thuốc Việt Nam. Phần khảo sát mối liên quan giữa cấu trúc và hoạt tính sinh học giúp các nhà tổng hợp hóa dợc rút ngắn hơn thời gian của quá trình nghiên cứu, dự đoán đợc hoạt tính sinh học của hợp chất flavonoit dựa trên cấu trúc của chúng. 4 CHƯƠNG 1: TổNG QUAN CHƯƠNG 1: TổNG QUANCHƯƠNG 1: TổNG QUAN CHƯƠNG 1: TổNG QUAN Flavonoit là một nhóm bao gồm khoảng 4000 hợp chất tự nhiên hiện diện trong nhiều thành phần của cây cối cũng nh trong các loại rau quả: [36][69] - Hoa: có nhiều màu sắc, bao gồm nhiều thành phần nh antoxianidin, flavon, flavonol, flavanon, chalcon và auron. Antoxianin làm cho hoa có màu đậm và tơi, polihydroxyflavon và flavonol thì làm cho hoa có ánh vàng. Những bông hoa có màu sắc rực rỡ lại do sự có mặt của chalcon và auron Hoa là thành phần thích hợp nhất để chiết flavonoit do hàm lợng nhiều và ít tạp chất. - Vỏ quả: do có nhiều màu sắc nên cũng là thành phần đợc nghiên cứu nhiều. Chúng có thể chứa tangeretin, naringin, rhoifolin, hesperidin, nobiletin từ các vỏ quả họ Cam. - Hạt: chứa hydroxyflavon, các metyl ete của chúng, glycozit, furanoflavonoit, các dẫn xuất rotenoit và leucoantoxianidin. - Lá, gỗ, rễ và vỏ cây. Ngoài ra một số loại nớc uống nh rợu vang đỏ, trà, cà phê, bia hay cả trong các bài thuốc dân gian cũng đợc tìm thấy có chứa một lợng lớn flavonoit. Ngời ta dự đoán con ngời tiêu thụ tổng lợng flavonoit trong thực phẩm vào khoảng vài trăm miligam mỗi ngày. [97] Với sự đa dạng nh vậy, flavonoit là một hợp chất quan trọng không những đối với cây cỏ mà còn đối với các loài động vật bao gồm cả con ngời. 1.1 1.11.1 1.1- - CấU TRúC Và PH CấU TRúC Và PHCấU TRúC Và PH CấU TRúC Và PHÂ ÂÂ ÂN LOạI CáC N LOạI CáC N LOạI CáC N LOạI CáC FLAVONOIT FLAVONOITFLAVONOIT FLAVONOIT Flavonoit là những chất màu thực vật, có cấu trúc cơ bản gồm 2 vòng benzen A và B nối với nhau qua một mạch 3 cacbon. Cấu trúc là một vòng kín hoặc hở. Cách đánh số tùy theo mạch cacbon kín hay hở. Nếu mạch cacbon kín, cách đánh số bắt đầu từ nguyên tố dị vòng oxi mang số 1 rồi đánh tiếp đến vòng A, còn vòng B đợc đánh số phụ. Nếu mạch cacbon hở, thì cách đánh số chính bắt đầu trên vòng B và đánh số phụ trên vòng A. 5 Sự phân loại các flavonoit dựa vào vị trí gốc aryl (vòng B) và các mức độ oxi hóa của mạch cacbon (hình 1.1). - Flavon FlavonFlavon Flavon: :: : Flavon có cấu trúc chung bao gồm 2 vòng benzen A và B. Vòng B gắn vào vòng C (pyran) tại vị trí C 2 . - Flavanon FlavanonFlavanon Flavanon: :: : Flavanon khác với flavon ở chỗ không có nối đôi ở vị trí C 2 và C 3 . Tất cả các flavanon đợc phát hiện cho đến nay đều có nhóm OH ở vòng A hoặc B. - Flavonol FlavonolFlavonol Flavonol: :: : Khác với flavon, flavonol có thêm nhóm OH ở C 3 . Flavonol rất phổ biến trong tự nhiên. Thống kê trên 1000 loài thuộc thực vật hạt kín thì thấy 48% loài có kaempferol, 26% loài có quercetin và myricetin chiếm 10% trong tổng số loài có flavonol. - Dihydroflavonol DihydroflavonolDihydroflavonol Dihydroflavonol: :: : 3-hydroxyflavanol hoặc flavanol có cấu trúc cơ bản giống flavonol nhng không có nối đôi C 2 -C 3 . - Chalcon ChalconChalcon Chalcon: :: : Chalcon có 2 vòng A và B nối với nhau bởi 1 mạch hở 3 cacbon, không có dị vòng nh các flavonoit khác và số thứ tự cacbon bắt đầu từ vòng B. - Dihydro DihydroDihydro Dihydrochalcon chalconchalcon chalcon : : : : Là chalcon mất dây nối đôi , . Loại này ít gặp trong tự nhiên. - Auron AuronAuron Auron : : : : Là nhóm flavonoit có màu vàng sáng. Khung của auron cũng có 12 cacbon nh các flavonoit khác, nhng dị vòng C chỉ có 5 cạnh. Số lợng cũng nh sự phân bố trong cây cũng hạn chế. - Ant AntAnt Antoxi oxioxi oxianidin anidinanidin anidin: : : : Về cấu trúc, nhóm này khác các flavonoit khác ở chỗ không có nhóm cacbonyl ở C 4 . - Leuco LeucoLeuco Leucoant antant antoxi oxioxi oxianidin anidinanidin anidin: :: : Là 3,4-dihydroxyflavan, không màu, nhng gặp axit biến thành antoxianidin có màu hồng hoặc đỏ, rất phổ biến trong cây, nhất là trong vỏ cây và gỗ. - Iso IsoIso Isoflavon flavonflavon flavon : : : : Là nhóm isoflavonoit phổ biến nhất. Vòng B trong nhóm isoflavon nối với vòng C tại vị trí C 3 trong khi vòng B ở nhóm flavon nối với vòng C ở vị trí C 2 . 6 - Rotenoi RotenoiRotenoi Rotenoit tt t: : : : Ngời ta đã biết khoảng 15 chất rotenoit, chất điển hình nhất là rotenon có trong cây thuốc cá Derris elliptica . Tác dụng quan trọng của nhóm hợp chất này là diệt sâu bọ, do hạn chế khả năng thu nhận oxi của sâu bọ. - Neo NeoNeo Neoflavonoit flavonoitflavonoit flavonoit : : : : Không có nhóm cacbonyl ở vị trí C 4 thay vào đó là vòng B. Chất đầu tiên phân lập là calophylolid chiết từ hạt cây Mù u Calophyllum inophyllum và một số loài Calophyllum khác, họ Bứa (Guttifereae). Hình 1.1: Hình 1.1:Hình 1.1: Hình 1.1: Cấu trúc của một số dạng flavonoit 7 Bảng 1.1: Bảng 1.1:Bảng 1.1: Bảng 1.1: Phân loại và một số nguồn thực phẩm chứa flavonoit [97] Nhóm flavonoit Các flavonoit tiêu biểu Nguồn thực phẩm chính cung cấp Flavonol Flavon Isoflavon Flavanol Flavanon Kaempferol, myricetin, rutin, quercetin Apigenin, chrysin, luteolin Daidzein, genistein, glycitein, formononetin Catechin, gallocatechin Eriodictyol, hesperetin, naringenin Hành, anh đào, táo, bông cải xanh, cải xoăn, cà chua, trà, rợu vang đỏ, Mùi, cỏ xạ hơng Đậu nành, các loại đậu Táo, trà Cam, nho 1.2 1.21.2 1.2- - HOạT TíNH SINH HọC CủA Cá HOạT TíNH SINH HọC CủA CáHOạT TíNH SINH HọC CủA Cá HOạT TíNH SINH HọC CủA CáC C C C FLAVONOIT FLAVONOITFLAVONOIT FLAVONOIT 1.2.1 1.2.11.2.1 1.2.1- - Vai trò của Vai trò của Vai trò của Vai trò của fla flafla flavonoit vonoitvonoit vonoit đối với cây cỏ đối với cây cỏ đối với cây cỏ đối với cây cỏ [70][73] Các flavonoit đóng một vai trò quan trọng trong quá trình sinh trởng, phát triển và tự vệ của cây. - Trong các phản ứng sinh hóa: Một số flavonoit có tác dụng nh một chất chống oxi hóa, bảo vệ axit ascorbic, một thành phần quan trọng trong tế bào thực vật. Một số có tác dụng ức chế các enzim và các chất độc của cây. - Vai trò ức chế và kích thích sinh trởng: Nhiều công trình nghiên cứu về tác dụng ức chế và kích thích sinh trởng cây của flavonoit. Nhóm chức hiđroxi có vai trò quyết định về tác dụng này. - Vai trò tạo màu sắc: Flavonoit đóng vai trò tạo màu sắc hấp dẫn cho cây, góp phần thúc đẩy sự sinh tồn của cây và phát triển hoa, quả. - Vai trò một chất bảo vệ cây: Một số flavonoit không màu trong lá đóng vai trò một chất bảo vệ cây. Vị đắng và khó chịu của flavonoit làm cho động vật khi ăn phải mất cảm giác ngon và không thích ăn các loại cây cỏ này. Ngoài ra, do khả năng hấp thụ mạnh tia UV mà các flavonoit giúp bảo vệ cây chống lại các tác hại của tia UV, nhiệt độ. Chúng còn giúp cây chống lại một số vi khuẩn, nấm. 8 1.2.2 1.2.21.2.2 1.2.2- - Tính chất dợc lý của Tính chất dợc lý của Tính chất dợc lý của Tính chất dợc lý của flavonoit flavonoitflavonoit flavonoit Flavonoit có nhiều hoạt tính sinh học nh khả năng kháng oxi hóa, kháng khối u, kháng viêm, chống dị ứng và là tác nhân bảo vệ gan. Vì vậy, nghiên cứu về hoạt tính của các flavonoit luôn nhận đợc nhiều sự quan tâm của các nhà khoa học đặc biệt là nghiên cứu về khả năng kháng khối u của flavonoit. 1.2.2.1 1.2.2.11.2.2.1 1.2.2.1- - Khả năng kháng Khả năng kháng Khả năng kháng Khả năng kháng oxi oxioxi oxi hóa của hóa của hóa của hóa của flavonoit flavonoitflavonoit flavonoit [20][21][41][42][49][62] Các flavonoit là các chất kháng oxi hóa tự nhiên đợc thể hiện thông qua khả năng bắt gốc tự do, tạo phức với ion kim loại và ức chế hệ thống enzim. 1.2.2.2 1.2.2.21.2.2.2 1.2.2.2- - Tác nhân chống ung th Tác nhân chống ung th Tác nhân chống ung th Tác nhân chống ung th Trong những năm gần đây đã có nhiều nghiên cứu ở mức độ in vitro và in vivo cũng nh các nghiên cứu về dịch tễ học đề cập đến vai trò của flavonoit ở khẩu phần ăn hàng ngày trong việc ngăn ngừa ung th [56], một số sự kết hợp trong điều trị đợc thực hiện với thực phẩm giàu flavonoit nh sử dụng đậu nành và ung th vú thời kỳ tiền mãn kinh, trà xanh và ung th bao tử, hành và ung th phổi[97]. Vì vậy, hiểu biết thêm về khả năng chống ung th của các loại thực phẩm này sẽ giúp cải thiện thói quen trong ăn uống của chúng ta. Ngoài ra, bên cạnh các flavonoit tự nhiên thì các flavonoit tổng hợp là những ứng cử viên cho các loại thuốc chống ung th trong tơng lai, một số các hợp chất này đang ở trong giai đoạn thăm dò lâm sàng nh flavopiridol, 5,6- dimetylxanthenon-4-axetic axit, phenoxodiol hay silybin, [100] Cơ chế kháng ung th của flavonoit: - Flavonoit là tác nhân ngăn ngừa về mặt hóa học: Năm 1996, Calomme M. và đồng nghiệp phát hiện flavonoit họ Cam có khả năng ức chế sự đột biến của vi khuẩn. Các thí nghiệm cho thấy tangeretin kháng lại tất cả các thử nghiệm trên các chất gây đột biến gián tiếp, còn nobiletin lại kháng sự đột biến do benzo[]pyren và 2-aminofluoren gây ra. Do tính chất này mà các flavonoit họ Cam (đặc biệt là tangeretin và nobiletin) đóng vai trò quan trọng trong việc ngăn ngừa ung th về mặt hóa học.[100] 9 - Flavonoit ức chế sự phát triển hoặc sự tăng sinh của tế bào ung th: Lee và đồng nghiệp [54] đã thử khả năng gây độc tế bào của 6 isoflavonoit, trong đó tectorigenin và genistein đã thể hiện khả năng gây độc tế bào trên các tế bào ung th ở ngời và genistein gây chết tế bào theo chơng trình bằng cách biến đổi ADN. Năm 2002, Manthey và Guthyie [59] nghiên cứu tác động của flavonoit họ Cam lên 6 dòng tế bào ung th ở ngời. Họ thấy rằng các hợp chất tổng hợp có khả năng ức chế sự tăng sinh mạnh của tế bào ung th tơng tự nh các hợp chất trong tự nhiên (nhiều hợp chất có IC 50 < 10àM). Năm 2005, Zheng và đồng nghiệp [74] đã có báo cáo đầu tiên về khả năng gây cảm ứng apoptosis của apigenin - Flavonoit là tác nhân chống lại sự xâm nhập, sự bám dính và sự phát triển mạch: Vào năm 2001, Rooprai [80] đã phát hiện ra ảnh hởng của 4 tác nhân chống lại sự xâm nhập của các tế bào ung th vào não, trong đó dựa trên các thông số về sự xâm nhập qua khối u não thì nobiletin có hiệu quả ức chế tốt nhất đối với sự xâm nhập, di chuyển và bám dính trên cả 4 dòng tế bào thử nghiệm (IPMA-E, IPSH- OA2, IPAB-AO3, IPLC-GM). Năm 2003, Tan W.F. [97] đã cho thấy quercetin có khả năng chống lại sự phát triển mạch, sau đó Ma cũng đã tìm thấy tamoxifen có khả năng ức chế khối u tuyến tiền liệt CWR22 bằng cách phân hóa sự phát triển mạch và chống lại các mô ung th mới khi sử dụng kết hợp với quercetin. - Các dẫn xuất flavonoit có tác dụng ngăn ngừa tác dụng phụ của doxorubicin: Năm 2000, Van Acker [33] đã tìm ra rằng khi uống 7- monohydroxyetylrutozit với liều 500mg/kg một giờ trớc khi dùng doxorubicin sẽ bảo vệ cơ thể của bệnh nhân ung th chống lại tác hại gây độc cho tim. Năm 2001, họ đã tìm ra đợc một số dẫn xuất flavon khi sử dụng kết hợp với phơng pháp điều trị ung th bằng doxorubicin cho kết quả bảo vệ tim tốt hơn [34][35]. 1.2.2 1.2.21.2.2 1.2.2.3 .3.3 .3- - Khả năng kháng viêm Khả năng kháng viêm Khả năng kháng viêm Khả năng kháng viêm Do khả năng của flavonoit ức chế lại sự tạo thành các chất trung gian của quá trình viêm nh prostaglandin, leukotrien hoặc nitric oxit [43][49] 10 1.2.2.4 1.2.2.41.2.2.4 1.2.2.4- - Vai trò trong phòng ngừa và điều t Vai trò trong phòng ngừa và điều t Vai trò trong phòng ngừa và điều t Vai trò trong phòng ngừa và điều trị bệnh tim rị bệnh timrị bệnh tim rị bệnh tim Các flavonoit kháng oxi hóa có mặt trong các loại quả, rau, trà và rợu vang đều có khả năng ức chế sự oxi hóa của LDL (low-density lipoprotein) do khi bị ảnh hởng tác động LDL sẽ gây ra bệnh tim. Các nghiên cứu cho thấy rợu vang đỏ và các loại thực phẩm giàu flavonoit làm giảm nguy cơ bệnh tim động mạch vành. [49] 1.2.2. 1.2.2.1.2.2. 1.2.2.5 55 5- - Flavonoit FlavonoitFlavonoit Flavonoit ức chế các ức chế các ức chế các ức chế các enzim enzimenzim enzim Một số flavonoit thử nghiệm cho thấy khả năng ức chế các enzim là chìa khóa cho sự hô hấp của các ty thể, ức chế NADH (Nicotinamit adenin dinucleotit coenzim trong cơ thể có mặt ở các phản ứng oxi hóa khử). Một số flavonoit còn có khả năng ức chế enzim oxi hóa xanthin, là enzim xúc tác cho quá trình oxi hóa xanthin và hypoxanthin thành axit uric. [49] 1.2.2.6 1.2.2.61.2.2.6 1.2.2.6- - Các hoạt tính khá Các hoạt tính khá Các hoạt tính khá Các hoạt tính khác của c của c của c của flavonoit flavonoitflavonoit flavonoit Flavonoit có khả năng kháng khuẩn, kháng nấm [103], chống dị ứng, chống loét, và là tác nhân bảo vệ gan. [49] 1.3 1.31.3 1.3- - NH NH NH NHữ ữữ ữNG NGHI NG NGHING NGHI NG NGHIÊ ÊÊ ÊN C N CN C N Cứ ứứ ứU TR U TRU TR U TRÊ ÊÊ ÊN TH N THN TH N THế ếế ế GI GI GI GIớ ớớ ớI II I 1.3.1 1.3.11.3.1 1.3.1- - Tình hình nghiên cứu tổng hợp các Tình hình nghiên cứu tổng hợp các Tình hình nghiên cứu tổng hợp các Tình hình nghiên cứu tổng hợp các flavonoit flavonoitflavonoit flavonoit Từ khi vai trò quan trọng của các flavonoit trong thực phẩm (đặc biệt trong việc ngăn ngừa ung th) đợc phát hiện thì mặc dù có hàng ngàn hợp chất thiên nhiên đã đợc khám phá, hàng loạt nghiên cứu trên thế giới vẫn đang đợc thực hiện để tổng hợp hoặc bán tổng hợp (tổng hợp từ cấu trúc ban đầu của flavonoit) các dẫn xuất của flavonoit (đặc biệt là các nhóm flavon, isoflavon, flavonol, flavanon) bằng nhiều con đờng khác nhau (hóa học, sinh học [64][71]) cho nhiều mục đích: tăng khả năng kháng viêm, làm bền thành mạch máu, giảm các yếu tố tác động lên nguy cơ bị bệnh tim, bị ung th, dỡng da và bảo vệ da chống lại các tác hại của tia UV. 1.3.1.1 1.3.1.11.3.1.1 1.3.1.1- - Các phản ứng tổng hợp dựa trên Các phản ứng tổng hợp dựa trên Các phản ứng tổng hợp dựa trên Các phản ứng tổng hợp dựa trên cấu trúc ban đầu của cấu trúc ban đầu của cấu trúc ban đầu của cấu trúc ban đầu của flavonoit flavonoitflavonoit flavonoit Các phản ứng thay đổi nhóm thế trực tiếp trên vòng flavonoit tự nhiên hầu nh bị giới hạn bởi các phản ứng ankyl hóa hoặc axyl hóa [27][38][39][96][101], halogen hóa. [...]... học Tự nhiên TP.HCM) và thử khả năng gây độc tế bào trên dòng MCF-7 theo phơng pháp MTT cho thấy các dẫn xuất này có hoạt tính gây độc tế bào rất thấp [15]: Các nghiên cứu này vẫn cha cho thấy đợc mối quan hệ giữa cấu trúc và hoạt tính của các hợp chất 1.3.1.3có 1.3.1.3- Một số hợp chất tổng hợp có khả năng kháng tế bào ung th Ngoài các flavonoit tự nhiên có khả năng kháng tế bào ung th (tangeretin,... Sigma - Các dung môi sử dụng đạt tiêu chuẩn dùng trong tổng hợp hữu cơ và phân tích Vật liệu sinh học và hóa chất dùng trong các thử nghiệm hoạt tính Sử dụng ba dòng tế bào ung th ngời là MCF-7 (ung th vú), HeLa (ung th cổ tử cung), NCI-H460 (ung th phổi) trong sàng lọc tính gây độc tế bào (hình 2.1) do Viện Ung Th Quốc Gia Hoa Kỳ (NCI Frederick, MD, USA) cung cấp Đây là những dòng tế bào đợc Viện Ung. .. Con đờng tổng hợp các flavon và flavanon bằng các aryl alđehyt Các nhà khoa học đã nghiên cứu khả năng chống ung th của các flavonoit cùng dẫn xuất tổng hợp đợc và thấy rằng nhiều chất trong số đó có khả năng chống ung th cao không chỉ trong thử nghiệm in vitro mà còn trên loài vật thử nghiệm Đã có vài hợp chất tổng hợp đang vào giai đoạn thử nghiệm lâm sàng nh là một loại thuốc điều trị ung th: flavopiridol,... này sẽ tiến hành tính toán bằng một số phơng pháp định lợng liên quan hoạt tính và cấu trúc hóa học (QSAR) bằng các phần mềm mô hình hóa trên máy tính 1.3.2.21.3.2.2- Các nghiên cứu về mối quan hệ giữa các flavonoit và các dẫn xuất với hoạt tính sinh học [57] Nhiều nghiên cứu đợc tiến hành để tìm mối tơng quan giữa cấu trúc và hoạt tính của các flavonoit để phục vụ cho việc phát hiện các loại thuốc mới... làm thay đổi hoạt tính của hợp chất - Loại và số lợng các nhóm chức: việc làm tăng khả năng tan trong nớc của các nhóm chức sẽ gây khó khăn cho quá trình đi vào tế bào, đôi khi sẽ làm giảm hiệu quả của hợp chất, tuy nhiên trong một số trờng hợp điều này lại cần thiết cho quá trình tơng tác giữa flavonoit và đích cần đến Vì vậy tùy thuộc vào cơ chế của hoạt động mà ta thay đổi các dạng và số lợng nhóm... tổng hợp các flavon, thioflavon và iminoflavon Năm 1999, Traxler [75] tổng hợp các dẫn xuất của isoflavon và quinolon với mục đích thử nghiệm khả năng ức chế các enzim: Sơ đồ 1.5: Quy trình tổng hợp các isoflavon và quinolon và năm 2004, bằng phơng pháp tơng tự Kim [105] và Su năm 2005 [18] cũng đã tổng hợp một số thioisoflavon có khả năng ức chế enzim aromataza 16 Ngời ta cũng có thể sử dụng các aryl... pháp xác định khả năng kháng nấm, kháng khuẩn Các mẫu đợc thử hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm tại phòng Sinh học thực nghiệm Viện Hóa học các Hợp chất thiên nhiên Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam bằng phơng pháp của Vanden Bergher và Vlietlinck [94] trên phiến 96 giếng theo hai bớc: 33 Bớc 1: Sàng lọc sơ bộ tìm chất có hoạt tính, Bớc 2: Tìm nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) của chất có hoạt tính. .. xuất este của quercetin 12 Sơ đồ 1.1: Quy trình tổng hợp một số dẫn xuất este của quercetin Cũng trong năm 2007, Bin Ye [19] bằng con đờng este hóa qua quá trình bảo vệ nhóm chức đã tổng hợp dẫn xuất phenylisoxyanat của quercetin, kết quả thử nghiệm gây độc tế bào và gây apoptosis cho thấy dẫn xuất này có hoạt tính ức chế dòng CT26 cao hơn 308 lần và K562 cao hơn 73 lần so với quercetin OH OH HO O... đổi tính chất lý hóa, là nguyên nhân làm thay đổi hoạt tính sinh học của chất, từ đó có thể tạo ra các hợp chất có hoạt tính tốt hơn, phù hợp để làm các sản phẩm phục vụ cho các ngành dợc phẩm, mỹ phẩm, thực phẩm Theo các tổng kết của Ioan Simiti và Ioan Schwartz [6], các nhóm chức có thể ảnh hởng tới hoạt tính sinh học của một hợp chất khi thay đổi cấu trúc của phân tử là các nhóm hiđroxil, thiol, halogen,... để tổng hợp các dẫn xuất khác nhau từ các flavonoit đã có 30 - Tổng hợp các dẫn xuất este Thực hiện phản ứng este hóa nhóm hiđroxil của quercetin, hesperidin và hesperetin bằng tác nhân anhiđrit axetic hoặc các axyl clorua trong môi trờng piridin, nhiệt độ phòng (phản ứng thế ái nhân trên C của nhóm cacbonyl) - Tổng hợp các dẫn xuất ete Phản ứng ete hóa đợc thực hiện bằng phơng pháp tổng hợp Williamson: . có khả năng kháng tế bào ung th ó khả năng kháng tế bào ung thó khả năng kháng tế bào ung th ó khả năng kháng tế bào ung th Ngoài các flavonoit tự nhiên có khả năng kháng tế bào ung th (tangeretin,. Khảo sát hoạt tính sinh học của các flavonoit và dẫn xuất gồm có hoạt tính kháng nấm, kháng khuẩn, hoạt tính kháng oxi hóa, khả năng gây độc tế bào ung th trên 3 dòng tế bào: HeLa tế bào ung. án là tổng hợp các dẫn xuất từ một vài flavonoit có nhiều trong thiên nhiên và xác định các hoạt tính kháng oxi hóa, kháng nấm, kháng khuẩn và khả năng gây độc tế bào ung th của các hợp chất