1.1 Đặt vấn đề Ngành thủy sản hằng năm đóng góp không nhỏ vào cán cân xuất khẩu của cả nước. Năm 2011,tổng giá trị xuất khẩu tôm đạt 2.396 USD tỉ trong đó tôm sú là 1.43 tỉ USD chiếm 60% tổng sản lượng. Tuy vậy trong năm 2011, dịch bệnh lan tràn nghiêm trọng làm thiệt hại không nhỏ cho ngành tôm. Bệnh đầu vàng là một bệnh gây thiệt hại không nhỏ Vì những lí do trên chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài này 1.PHẦN MỞ ĐẦU
4/20/12 Báo cáo đề tài: XÂY DỰNG QUY TRÌNH RT-PCR NHẰM PHÁT HIỆN VIRUS GÂY BỆNH ĐẦU VÀNG TRÊN TÔM Ngành: CÔNG NGH SINH H CỆ Ọ Giáo viên h ng d n:ướ ẫ Sinh viên th c hi n:ự ệ HU NH THANH TRÚC 10126194Ỳ D NG M NH HÙNG ƯƠ Ạ 10126229 LÊ HOÀNG ĐỘ 10126034 NG TI N D NGĐẶ Ế Ũ 10126232 PH M TH HUẠ Ị Ệ 10126054 Tháng 3/2012 B GIÁO D C VÀ ÀO T OỘ Ụ Đ Ạ TR NG I H C NÔNG LÂM ƯỜ ĐẠ Ọ TP.HCM 4/20/12 Phần mở đầu Tổng quan Nội dung và phương pháp tiến hành Kết quả và thảo luận Nội dung 4/20/12 1.1 Đặt vấn đề Ngành thủy sản hằng năm đóng góp không nhỏ vào cán cân xuất khẩu của cả nước. Năm 2011,tổng giá trị xuất khẩu tôm đạt 2.396 USD tỉ trong đó tôm sú là 1.43 tỉ USD chiếm 60% tổng sản lượng. Tuy vậy trong năm 2011, dịch bệnh lan tràn nghiêm trọng làm thiệt hại không nhỏ cho ngành tôm. Bệnh đầu vàng là một bệnh gây thiệt hại không nhỏ Vì những lí do trên chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài này 1.PHẦN MỞ ĐẦU 4/20/12 1.2 Mục đích- mục tiêu Mục đích Phát hiện sự hiện diện của virus YHV trong tôm có biểu hiện nghi ngờ bệnh tại những trang trại tôm , nhằm nghiên cứu sâu hơn các đặc điểm của virus , góp phần làm tiền đề cho các nghiên cứu sau này. Mục tiêu Dùng kĩ thuật RT-PCR phát hiện virus trên các mẫu bệnh phẩm. 4/20/12 1.3 Nội dung nghiên cứu Thu thập và bảo quản mẫu. Tiến hành ly trích tinh sạch RNA. Dựa vào phản ứng reverse trancriptase tạo cDNA. Khuyếch đại và chọn lọc những dòng cDNA cần cho thí nghiệm. Thực hiện phản ứng PCR Đọc và ghi nhận kết quả. 4/20/12 2.1 Tôm sú 2.1.1 Phân loại học Tên khoa học: Penaeus monodon Ngành: Arthropoda Lớp: Crustacea Bộ: Decapoda Họ chung: Penaeidea Giống: Penaeus Loài: Monodon 2.T NG QUANỔ 4/20/12 2.1.2 Đặc điểm hình thái Nhìn từ bên ngoài, tôm gồm các bộ phận sau: chủy: dạng như lưỡi kiếm, cứng, có răng cưa. Với tôm sú, phía trên chủy có 7-8 răng và dưới chủy có 3 răng. mũi khứu giác và râu: cơ quan nhận biết và giữ thăng bằng cho tôm 3 cặp chân hàm: lấy thức ăn và bơi lội 5 cặp chân ngực: lấy thức ăn và bò cặp chân bụng: bơi đuôi: có 1 cặp chân đuôi để tôm có thể nhảy xa, điều chỉnh bơi lên cao hay xuống thấp. bộ phận sinh dục (nằm dưới bụng) 4/20/12 2.1.3 Phân bố Phạm vi phân bố của tôm sú khá rộng, từ ấn Độ Dương qua hướng Nhật Bản, Đài Loan, phía Đông Tahiti, phía Nam châu Úc và phía Tây châu Phi (Racek - 1955, Holthuis và Rosa - 1965, Motoh - 1981, 1985) Nhìn chung, tôm sú phân bố từ kinh độ 30E đến 155E từ vĩ độ 35N tới 35S xung quanh các nước vùng xích đạo, đặc biệt là Indonesia, Malaixia, Philippines và Việt Nam. Tôm bột (PL.), tôm giống (Juvenile) và tôm gần trưởng thành có tập tính sống gần bờ biển và rừng ngập mặn ven bờ. Khi tôm trưởng thành di chuyển xa bờ vì chúng thích sống vùng nước sâu hơn. 4/20/12 2.1.4 Vòng đời tôm sú 4/20/12 2.2 Virus YHV 2.2.1 Phân loại học Nhóm: IV ((+)ssRNA) Bộ : Nidovirales Họ: Roniviridae Chi : Okavirus Loài: Yellowhead virus [...]... duorarum Loài tôm he có khả năng đề kháng cao với YHV: P merguiensis 4/20/12 2.3.4 Bệnh đầu vàng và tuổi của tôm Báo ◦ ◦ cáo năm 2000: Tôm bị bệnh vàng đầu có độ tuổi từ 25 ngày đến 70 ngày tuổi Nếu là tôm nhỏ từ 25-35 ngày bị nhiễm bệnh càng nặng và sẽ chết hết trong thời gian 2-3 ngày 4/20/12 Các con đường lan truyền Virus này cũng có thể lây nhiễm theo 2 trục: ◦ Trục ngang: + Nguồn nước ◦ + Hiện tượng... Click to edit Master subtitle style Progeny virus 4/20/12 2.2.4 Cơ chế xâm nhiễm Xâm nhập Tổng hợp Thành thục Hấp phụ Phóng thích 4/20/12 2.3 Bệnh đầu vàng 2.3.1 Tác nhân gây bệnh Do virus YHV gây ra.Nếu môi trường ao nuôi khơ06ng thích hơp thì bệnh sẽ lây lan nhanh đặc biệt trong khu vực ven biển có độ mặn cao 4/20/12 2.3.2 Dấu hiệu của bệnh Tôm ăn nhiều khác thường trong vài ngày,... ngày bơi lờ đờ trên mặt nước hoặc ven bờ Bơi không định hướng Lác đác tôm chết trong vó Chết với mức độ tăng dần 4/20/12 • • • • Phần đầu ngực, gan tụy chuyển màu vàng, gan có thể có màu trắng nhạt, vàng nhạt hoặc nâu Thân có màu nhạt Tôm chết rất nhanh trong vòng 2-3 ngày (có thể gần 100%) Có khi dấu hiệu đầu vàng lẫn đốm trắng 4/20/12 2.3.3 Đặc điểm dịch tể học Nhiễm tự nhiên: Tôm sú (Penaeus... thể lây nhiễm theo 2 trục: ◦ Trục ngang: + Nguồn nước ◦ + Hiện tượng ăn nhau ◦ +Sinh vật trung gian ◦ Trục dọc: Tôm bố mẹ bị bệnh di truyền cho thế hệ sau Thực tế cho thấy, bệnh này thường xuất hiện trong hệ thống nuôi tôm thâm canh 4/20/12 Điều kiện bùng phát dịch Ø Tôm đã bị nhiễm virus YHV Ø Thường xảy ra ở tháng nuôi 1-2 Ø Xảy ra trong các ao nuôi có mật độ cao (thâm canh) Ø Xảy ra trong ao... 3.1.2 Địa điểm Địa điểm thu mẫu :Ở một số ao tôm nghi ngờ bị nhiễm YHV Địa điểm thí nghiệm :Viện nghiên cứu công nghệ sinh học và môi trường 4/20/12 3.2 Đối tượng và số lượng mẫu\ 3.2.1 Đối tượng Tôm sú có biểu hiện nghi ngờ bệnh 3.2.2 Số lượng và loại mẫu 4/20/12 3.2 Đối tượng và số lượng mẫu\ 3.2.1 Đối tượng Tôm sú có biểu hiện nghi ngờ bệnh 3.2.2 Số lượng và loại mẫu 4/20/12 4/20/12... 2.2.2 Cấu trúc của virus: Hình que, kích thước khoảng 44 ± 6 nm x 173 ± 13nm Nucleocapsid có dạng đối xứng xoắn ốc được bao bởi vỏ ngoài (envelope).Nó được cấu tạo từ một loại protein (p20) liên kết với genome RNA sợi đơn dương của virus Bề mặt vỏ ngoài có hai glycoprotein là Gp64 và Gp116 4/20/12 2.2.3 Cơ chế sao chép của virus Virus RNA(+) polyprotein Protein cleavage . 4/20/12 Báo cáo đề tài: XÂY DỰNG QUY TRÌNH RT-PCR NHẰM PHÁT HIỆN VIRUS GÂY BỆNH ĐẦU VÀNG TRÊN TÔM Ngành: CÔNG NGH SINH H CỆ Ọ Giáo viên h ng d n:ướ ẫ Sinh. một bệnh gây thiệt hại không nhỏ Vì những lí do trên chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài này 1.PHẦN MỞ ĐẦU 4/20/12 1.2 Mục đích- mục tiêu Mục đích Phát hiện sự hiện diện của virus. duorarum Loài tôm he có khả năng đề kháng cao với YHV: P. merguiensis. 2.3.3 Đặc điểm dịch tể học 4/20/12 2.3.4 Bệnh đầu vàng và tuổi của tôm Báo cáo năm 2000: ◦ Tôm bị bệnh vàng đầu có độ