Bài giảng Đại cương về HPLC

ĐẠI CƯƠNG VỀ SẮC KÝ LỎNG TS. NGUYỄN BÁ HOÀI ANH SẮC KÝ (CHROMATOGRAPHY)  LÀ PHƯƠNG PHÁP TÁCH  DỰA TRÊN 2 QUÁ TRÌNH * HẤP PHỤ * GIẢI HẤP PHỤ  XẢY RA LIÊN TỤC GIỮA 2 PHA: * PHA TĨNH : THƯỜNG LÀ RẮN HOẶC LỎNG * PHA ĐỘNG : CHẤT LỎNG (MỘT CHẤT HOẶC HỖN HP NHIỀU CHẤT)  ĐỊNH TÍNH : DỰA VÀO THỜI GIAN LƯU  ĐỊNH LƯNG : DỰA VÀO CHIỀU CAO HOẶC DIỆN TÍCH PEAK KHI NỐI VỚI CÁC ĐẦU DÒ (DETECTOR) PHƯƠNG PHÁP CHO PHÉP Start t M tR1 tR2 tR3 tR4 INJECTOR DETECTOR CHROMATOGRAPHY M OB I L E P H A S E STATIONARY PHASE SƠ ĐỒ KHỐI CỦA MỘT MÁY SẮC KÝ LỎNG ĐƠN GIẢN HỆ ISOCRATIC : THÀNH PHẦN DUNG MÔI KHÔNG ĐỔI SƠ ĐỒ KHỐI CỦA MỘT MÁY SẮC KÝ LỎNG (tt) CÁC BỘ PHẬN CƠ BẢN BAO GỒM : NGUO NGUO À À N CUNG CA N CUNG CA Á Á P PHA P PHA Đ Đ O O Ä Ä NG NG (MOBILE PHASE) : LA (MOBILE PHASE) : LA Ø Ø BÌNH BÌNH ĐỰ ĐỰ NG NG PHA PHA Đ Đ O O Ä Ä NG HOA NG HOA Ë Ë C DUNG MÔI C DUNG MÔI CHA CHA Ï Ï Y MA Y MA Ù Ù Y. Y. SƠ ĐỒ KHỐI CỦA MỘT MÁY SẮC KÝ LỎNG (tt) HE HE Ä Ä THO THO Á Á NG NG Đ Đ IE IE À À U KHIE U KHIE Å Å N A N A Ù Ù P SUA P SUA Á Á T T HOA HOA Ë Ë C TO C TO Á Á C C Đ Đ O O Ä Ä DO DO Ø Ø NG PHA NG PHA Đ Đ O O Ä Ä NG, NG, CO CO Ø Ø N GO N GO Ï Ï I LA I LA Ø Ø HE HE Ä Ä THO THO Á Á NG CUNG CA NG CUNG CA Á Á P P DUNG MÔI : LC PUMP. DUNG MÔI : LC PUMP. BAO GO BAO GO À À M HE M HE Ä Ä ISOCRATIC ( ISOCRATIC ( Đ Đ A A Ú Ú NG NG THA THA Ø Ø NH PHA NH PHA À À N) N) VA VA Ø Ø HE HE Ä Ä GRADIENT (THA GRADIENT (THA Ø Ø NH PHA NH PHA À À N N PHA PHA Đ Đ O O Ä Ä NG THAY NG THAY Đ Đ O O Å Å I TRONG QUA I TRONG QUA Ù Ù TRÌNH CHA TRÌNH CHA Ï Ï Y) Y) SƠ ĐỒ KHỐI CỦA MỘT MÁY SẮC KÝ LỎNG (tt) VAN BƠM MẪU (INJECTION VAN BƠM MẪU (INJECTION VALVE): GO VALVE): GO À À M LOA M LOA Ï Ï I BƠM TAY I BƠM TAY VA VA Ø Ø HE HE Ä Ä THO THO Á Á NG BƠM MẪU T NG BƠM MẪU T Ự Ự Đ Đ O O Ä Ä NG NG SƠ ĐỒ KHỐI CỦA MỘT MÁY SẮC KÝ LỎNG (tt) LO LO Ø Ø CO CO Ä Ä T (COLUMN OVEN) : DU T (COLUMN OVEN) : DU Ø Ø NG NG Đ Đ E E Å Å Đ Đ IE IE À À U KHIE U KHIE Å Å N NHIE N NHIE Ä Ä T T Đ Đ O O Ä Ä CO CO Ä Ä T T TA TA Ù Ù CH CH CO CO Ä Ä T TA T TA Ù Ù CH : LA CH : LA Ø Ø NƠI XA NƠI XA Û Û Y RA CA Y RA CA Ù Ù C QUA C QUA Ù Ù TRÌNH TA TRÌNH TA Ù Ù CH CHA CH CHA Á Á T. GO T. GO À À M CO M CO Ä Ä T PHÂN T PHÂN T T Í Í CH VA CH VA Ø Ø CO CO Ä Ä T BA T BA Û Û O VE O VE Ä Ä SƠ ĐỒ KHỐI CỦA MỘT MÁY SẮC KÝ LỎNG (tt) ĐẦU DÒ (DETECTOR): CÓ NHIỀU LOẠI KHÁC NHAU TÙY THEO MỤC ĐÍCH PHÂN TÍCH. DÙNG ĐỂ PHÁT HIỆN CHẤT VÀ ĐỊNH LƯNG : UV-VIS, HUỲNH QUANG, ĐỘ DẪN, ĐIỆN HÓA, KHỐI PHỔ … [...]... MẪU VÀO VÒNG CHỨA MẪU Ở VỊ TRÍ LOAD BỘ TIÊM MẪU (tt) Ở VỊ TRÍ LOAD, THỂ TÍCH MẪU CẦN THIẾT SẼ GIỮ TRONG LOOP, PHẦN DƯ SẼ THẢI RA NGOÀI ĐIỀU NÀY GIÚP THỂ TÍCH MẪU TIÊM VÀO MÁY LUÔN GIỐNG NHAU KHI CHUYỂN VỀ VỊ TRÍ INJECT, MẪU TỪ LOOP SẼ ĐƯC BƠM VÀO HỆ THỐNG ĐỂ VÀO CỘT TÁCH ĐẦU DÒ (DETECTOR) -QUAN TRỌNG NHẦT LÀ ĐẦU DÒ UV – VIS -NGUYÊN TẮC GIỐNG NHƯ MÁY ĐO UV-VIS THÔNG THƯỜNG -TUY NHIÊN CELL ĐO PHẢI CÓ THỂ... YẾU LÀ : CỘT PHA ĐẢO RP C18 (ODS) CỘT PHA THƯỜNG C8 CÁC LOẠI CỘT CHUYÊN DỤNG CHO TỪNG NHÓM CHẤT CỘT C18 VÀ C8 ĐƯC SỬ DỤNG CHO PHẦN LỚN CÁC HP CHẤT THÔNG THƯỜNG PHÂN TÍCH CÁC AXIT TRONG BIA VỚI HỆ THỐNG HPLC CHUYÊN DỤNG PHÂN TÍC AXIT BÉO TRONG THỰC PHẨM VỚI ĐẦU DÒ UV-VIS VÀ HUỲNG QUANG (RF) . ĐẠI CƯƠNG VỀ SẮC KÝ LỎNG TS. NGUYỄN BÁ HOÀI ANH SẮC KÝ (CHROMATOGRAPHY)  LÀ PHƯƠNG PHÁP TÁCH  DỰA. LOOP, PHẦN DƯ SẼ THẢI RA NGOÀI. ĐIỀU NÀY GIÚP THỂ TÍCH MẪU TIÊM VÀO MÁY LUÔN GIỐNG NHAU KHI CHUYỂN VỀ VỊ TRÍ INJECT, MẪU TỪ LOOP SẼ ĐƯC BƠM VÀO HỆ THỐNG ĐỂ VÀO CỘT TÁCH ĐẦU DÒ (DETECTOR) -QUAN