Bài giảng Đại Cương về Sắc ký

L p C KiÓm NghiÖm ATVSTPớ Đ H K thu t Y T H i D ngĐ ỹ ậ ế ả ươ Bài 6 Đại Cương về Sắc ký Bài 7 Sắc ký lỏng HPLC PGS Ph¹m gia HuÖ Hµ Néi 24-02-2009 1. Đại c ơng về Sắc ký 1. Một số khái niệm mở đầu 2. Cơ sở lý thuyết (sơ l ợc) 3. Ưng dụng Sắc Kí trong Phân tích Một số khái niệm mở đầu Định nghĩa Quá trình Sắc Ký Phân loại các ph ơng pháp sắc ký 1.1 Một số khái niệm mở đầu Định nghĩa - PP tách - dựa vào tốc độ di chuyển khác nhau - d ới tác động 2 pha Tĩnh và Động không hoà lẫn vào nhau (trong SK lng, pha ng = cht lng) Chất PT Phân bố giữa 2 pha A S M A = chất Phân tích S = Pha tĩnh M = Pha động 1.2 Qu¸ tr×nh s¾c ký Pha tĩnh 1.3. Ph©n lo¹i s c ký l ngắ ỏ • Theo bản chất của phương pháp Hấp phụ, Phân bố, Trao đổi ion, SK theo cỡ, SK ái lực, SK điện • Theo bản chất của các pha pha thuận, pha đảo • Theo cách tiến hành: SK khai triển, SK rửa giải • Theo phương tiện: SK trên cột, SK trên mặt phẳng (giấy, lớp mỏng) Cơ sở Lý thuyết Tốc độ di chuyển các chất Sự mở rộng dải Thuyết về Đĩa Thuyết động học Ph ơng trình Van Deemter Độ phân giải Tèc ®é di chuyÓn w Thời gian lưu , phút w = chiều rộng pic tiêm mẫu t o Tín hiệu đến detector t R 0 Thời gian chết [...]... Phơng pháp chuẩn nội Phơng pháp chuẩn hoá S K điều chế Sắc Ký Khối Phổ ng chun thờm Sắc ký lỏng Hi ệu năng cao HPLC Các tên gọi khác S K lỏng cổ điển S K lỏng hiện đại: HPLC, các đặc điểm Máy HPLC 4 Bm Tiờm móu 5 Ct SK 2 Lc 1 Dung mụi 6 Detector 7 Mỏy ghi 8 Các bộ phận chính Dung môi và bình dung môi Bơm cao áp Bộ tiêm mẫu Cột sắc ký Các loại detector Đo quang, PDA Huỳnh Quang, RI Điện hoá,... cao áp Bộ tiêm mẫu Cột sắc ký Các loại detector Đo quang, PDA Huỳnh Quang, RI Điện hoá, MS Bộ bơm mẫu, bơm mẫu tự động Bơm tiêm, Van tiêm Các phơng pháp HPLC Sắc ký Phân bố: Săc ký lỏng lỏng BPC S K pha thuận : pha tĩnh phân cực NH2, CN SắC Kí pha đảo: pha tĩnh ít phân cực C2, C8, C18, Phenyl hay dùng nhất Pha tĩnh của BPC CH3 CH3 | CH3 CH3 | | | - Si - OH + | Cl - Si R - Si O Si R | CH3 Nhóm... Nhóm silanol của silicagel | CH3 CH3 Dẫn chất Clorosilan | CH3 Dẫn chất Siloxan Pha thun : R = NH2, CN (phõn cc) Pha o: R = C8, C18, C6H5 (khụng phõn cc) C8 PT thuốc trừ sâu MeOH-H2O gradient 67-80% Sắc ký Hấp Phụ Pha tĩnh Đặc tính bột mịn, xốp, dt bm lớn, độ ẩm Các loại Silicagel, Alumina, Pha động Sc dung môi, độ phân cực kiezelguhr ...Các đại lợng đặc trng Thi gian lu Thời gian lu hiu chớnh Hệ số dung lợng Hệ số chọn lọc tR tR = tR t0 k = tR / t0 = tR,B / tR,A S bt i xng ca pic H s bt i: AF = b/a Ct tt : AF = 0,9 n 1,1 Dc in VN v . ả ươ Bài 6 Đại Cương về Sắc ký Bài 7 Sắc ký lỏng HPLC PGS Ph¹m gia HuÖ Hµ Néi 24-02-2009 1. Đại c ơng về Sắc ký 1. Một số khái niệm mở đầu 2. Cơ sở lý thuyết (sơ l ợc) 3. Ưng dụng Sắc Kí. dụng Sắc Kí trong Phân tích Một số khái niệm mở đầu Định nghĩa Quá trình Sắc Ký Phân loại các ph ơng pháp sắc ký 1.1 Một số khái niệm mở đầu Định nghĩa - PP tách - dựa vào tốc độ di chuyển. 2 pha A S M A = chất Phân tích S = Pha tĩnh M = Pha động 1.2 Qu¸ tr×nh s¾c ký Pha tĩnh 1.3. Ph©n lo¹i s c ký l ngắ ỏ • Theo bản chất của phương pháp Hấp phụ, Phân bố, Trao đổi ion,