nuôi cấy mô cây phong lan

nuôi cấy mô cây phong lan

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI

KHOA SINH HỌC

BÀI TIỂU LUẬN MÔN CÔNG NGHỆ

TẾ BÀO THỰC VẬT

ĐỀ TÀI:

NUÔI CẤY MÔ CÂY PHONG LAN

SINH VIÊN THỰC HIỆN: TRỊNH HOÀNG ANH NGUYỄN THỊ NGUYÊN GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN: ĐÀO THỊ HẢI LÝ

A ĐẶT VẤN ĐỀ

Theo các chuyên gia về hoa của trường đại học nông nghiệp I, với khoảng hơn 755 loài hoa lan hiện có, Việt Nam có khả năng trở thành nước xuất khẩu phong lan lớn trong khu vực Tuy nhiên giá thành hoa lan còn khá cao do chủ yếu lan có nguồn gốc từ rừng hoặc nhập khẩu Vì thế, các nhà vườn trồng lan đang áp dụng các tiến bộ khoa học kỹ thuật vào quy trình sản xuất lan trong đó nuôi cấy mô được

áp dụng khá phổ biến

B NỘI DUNG

I Ý NGHĨA CỦA NUÔI CẤY MÔ PHONG

LAN

- Tạo ra hàng loạt cây con giống nhau về mặt di

truyền, đảm bảo sự đa dạng của nguồn lan trong tự nhiên

- Nhờ nuôi cấy mô có thể sán xuất nhanh lượng

phong lan lớn trên quy mô công nghiệp

- Nuôi cấy mô là công cụ hữu hiệu để tạo ra

nguồn phong lan sạch bệnh

II QUY TRÌNH NUÔI CẤY MÔ

PHONG LAN

Vật liệu nuôi cấy: mô phân sinh ngọn, mô phân

sinh bên, cuống hoa, đỉnh lá, hạt lan…

Thông thường người ta nuôi cấy hạt lan tạo ra

các chồi mới hoặc nuôi cấy trực tiếp các cơ quan của cây

1 Chọn mẫu và khử trùng mẫu cấy

1.1 Khử trùng trái lan

Rửa trái lan bằng xà phòng, rửa lại bằng nước

sạch

Cho trái lan vào bình hấp khử trùng và cho vào

tủ cấy vô trùng

Dùng cồn 70° lắc qua trong 30s, rửa lại bằng

nước cất vô trùng

Khử trùng trái lan lại bằng cồn 96º

Dùng dao xẻ dọc trái lan để lấy hạt, cho hạt vào môi trường nuôi cấy, quấn xung quanh miệng hộp nuôi cấy bằng parafin

Để hộp vào chỗ tối 2 tuần, sau đó đem ra để

ngoài sáng

1.2 Khử trùng mẫu cấy là các cơ quan

Tách các vảy hành ra từ cây, bóc các lá già cho đến khi xuất hiện các màm chồi bên mang

Mỗi mầm được đặt trong một đĩa peptri vô trùng, cẩn thận tách các lá non, sau mỗi lần tách phải nhúng mầm vào cồn 70º trong 1s và rửa với

nước cất vô trùng, chuyển sang một đĩa peptri

vô trùng khác

Tách các lá mầm bằng dao nhọn vô trùng , dùng kim nhọn tách các lớp lá, cắt đỉnh sinhtrưởng

ra khỏi mô và cấy vào môi trường nhân giống

Cắt và khử trùng mẫu cấy

2 MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY

2.1 Môi trường nuôi cấy hạt

Mỗi loại môi trường thích hợp cho từng nhóm lan khác nhau: Knudson’s đối với lan

Dendrobium, Cattleya; MS1/2 hoặc

Hyponex(20-20-20) đối với lan đơn thân như Vanda, Phalaenopsis Đường được bổ sung

vào moi trường nuôi cấy 30g/l và môi trường được làm đặc bằng agar Trước khi cấy môi trường được hấp khử trùng ướt ở 121ºC, 1atm trong thời gian 15 phút(tuỳ vào thể tích của môi trường nuôi cấy)

2.2 Môi trường nuôi cấy đỉnh sinh trưởng

Một số môi trường thường được dùng

là:Knudson’s, Heller, Knop, MS…

Được sử dụng phổ biến nhất là môi trường MS

có bổ sung các chất điều hoà sinh trưởng:

NAA với nồng độ phần triệu(ppm),hoặc 2,4D với nồng độ 1-2 ppm nồng độ các chất nên

giảm dần trong các lần cấy chuyển sau đó

Một số dich chiết trái cây cũng được bổ sungvào môi trường nuôi cấy

 Saccarose gây ra sự kích thích mô đối với một

số loài lan và ngược lạ cũng gây ức chế với

một số loài lan khác, cytokynin có hiệu quả

gây sự mọc chồi với đa số loài và với nhiều bộ phận của cây lan, đối với những loài hoặc

những bộ phận không chịu ảnh hưởng của

cytokynin thì được thay thế bằng axit

tranh-cinamic

 Nhiệt độ lý tưởng cho nuôi cấy mô phong lan

là 22ºC±1 đối với đa số các loài lan đa thân và 26ºC±3 đối với các loài lan đơn thân.Ánh sáng nhân tạo được cungcấp bởi 2 loại đèn huỳnh quang và đèn nóng sáng, ánh sáng phải được

sử dụng liên tục với quang kỳ 16 giờ,18 giờ

hoặc 24 giờ, cường độ ánh sáng thay đổi từ

1000 lux- 2000 lux tuỳ loài và tuỳ thuộc vào thời kỳ sinh trưởng, các đèn phải đặt cách môi trường 0,4-0,5m

 Trước khi nuôi cấy,môi trường cấy và nước

cất phải được tiệt trùng trong nồi ở áp suất

3 Cấy chuyển sang môi trường mới

3.1 Đối với hạt nảy mầm

 - Đối với hạt nảy mầm, sau một thời gian nuôi cấy sẽ thấy các điểm xanh xuất hiện trên bề

mặt môi trường, nếu cấy thưa thì vãn để cây

phát triển trong môi trường cũ, nếu cấy mau

thì phải cấy chuyển sang môi trường mới,môi trường mới như môi trường gieo hạt nhưng có

bổ sung thêm 10% nước dừa

 Khi chồi lớn lên có thể tiến hành nhân chồi

hoặc chuyển sang môi trường cơ bản nhưng có

bổ sung thêm 50g dịch chiết khoai tây hoặc

Hạt lan Mini Dendrobium nảy mầm sau 30 ngày bằng phương pháp nuôi cấy mô

.Cây con phát triển mạnh trong điều kiện vitro

in-3.2 Đối với đỉnh sinh trưởng

-Sau 4-8 tuần, đỉnh sinh trưởng chuyển sang màu xanh lục và tạo ra các khối tròn gọi là thể chồi, thể chồi được lấy ra khỏi môi trường cấy ban đầu, dùng dao nhọn cắt thanh 4-6 miếng tuỳ

theo kích thước của thể chồi, lát cắt sẽ được

chuyển vào trong môi trường phát triển chồi, mỗi đỉnh sinh trưởng sẽ tạo ra được một chồi nới sau khoảng 4 tuần, có thể cắt tiếp và

chuyển sang môi trường mới, tất cả việc cấy

chuyển phải được thực hiện trong điều kiện vô trùng

Thể chôì lan Hồ điệp phát triển sau 4 tuần nuôi cấy mô

Thể chồi lan Hồ Điệp phát triển sau 8 tuần

4 Tái sinh cây hoàn chỉnh

Khi đạt đén số cây giống cân thiết, ta chuyển thể chồi sang môi trường tạo rễ(môi trường có

nồng độ auxin tăng lên để kích thích ra rễ) Sau 4-5 tháng, các thể chồi sẽ phát triển thành cây con

Tạo rễ chuẩn bị đưa ra trồng ngoài tự nhiên

5 Chuyển cây ra vườn ươm

Khi cây con cao 5-7cm, có từ 3-4 lá, có thể

chuyển sang cấy vào bầu đất mùn vô trùng có

bổ sung các chất dinh dưỡng

Khi đem ra khỏi chai, dùng vòi rửa sạch hết môi trường nuôi cấy còn bám trên cây con, ngâm vào nước có pha thuốc trừ nắm trong khoảng 5 phút rồi xả sạch nới nước

Giá thể thường được sử dụng để ươm cây con

sau nuôi cấy là vỏ dừa

Gía thể để chuyển lan ra môi Vườn ươm trường tự nhiên

Lan nuôi cấy mô phát triển trong môi trường tự nhiên

III.NHỮNG THÀNH TỰU ĐÃ ĐẠT ĐƯỢC

VÀ HƯỚNG PHÁT TRIỂN NUÔI CẤY MÔ

PHONGLAN TẠI VIỆT NAM

Trên thực tế, tình hình sản xuất phong lan hiện nay ở

Việt Nam còn chưa tương xứng với tiềm năng Qua khảo sát, hiện mới chỉ có một số công ty lớn, trong đó

có những công ty nước ngoài trồng phong lan tại Đà Lạt, TP Hồ Chí Minh, Đồng Nai với diện tích khoảng 50-60 ha/doanh nghiệp Một vài địa phương khác

cũng tiến hành trồng phong lan nhưng mới dừng ở

quy mô gia đình, trên diện tích từ vài m2 đến vài

nghìn m2, cá biệt có vài hộ trồng trên 1-2 ha chứ

chưa có các vùng quy hoạch trồng lan tập trung ứng

 Tuy nhiên một số sở khoa học- công nghệ

cũng đã bắt đàu khảo sát và nghiên cứu

phương pháp,nhân giống, hoàn thiện quy trình sản xuất phong lan

 Trung tâm ứng dụng và Chuyển giao công

nghệ sở khoa học- công nghệ Phú Yên đang nuôi cấy 6 dòng Vanda, 5 dòng Cattleya, 4

dòng Mokara, 17 dòng Dendro, 23 dòng Hồ điệp và 2 dòng Vũ nữ

Vũ nữ Hồ điệp

Vandra Dendro

Cattleya Mokara

Trung tâm ứng dụng tiến bộ khoa học và công nghệ sở KH-CN tỉnh Bình Định đã tiến hành thực hiện đề

tài:”Nghiên cứu quy trình sản xuất hoa phong lan

công nghệ cao để xây dựng mô hình sản xuất theo

quy mô hộ gia đình”.Sau hơn 1 năm triển khai, đề tài

đã xây dựng mô hình sản xuất phong lan bằng công nghệ cao quy mô hộ gia đình với diện tích 600m2

chia làm 2 vườn khác nhau tại trạm thực nghiệm

KH-CN của trung tâm tại xã Phước An (Tuy Phước)

Trung tâm đã nhân giống bằng phương pháp nuôi cấy

mô và trồng thử nghiệm thành công hơn 20 dòng hoa thuộc 2 loại Dendrobium (hoàng lan) và Phalaenopsis

C KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

Như vậy, nuôi cấy mô là một phương pháp nhân giống

vô tính, đảm bảo cho cây con mang các đặc tính hoàn toàn giống cây mẹ, cây con không bị nhiễm bệnh và

có thể tạo được một số lượng lớn các cây con trong thời gian ngắn.Tuy nhiên, phương pháp này cần một

số vốn đàu tư tương đối lớn nên mới chỉ áp dụng đợc

ở các viện nghiên cứu, các sở khoa học, việc triển

khai trên quy mô hộ gia đình còn gặp nhiều khó khăn Trồng lan đang là hướng đi mới của nhiều địa phương, các địa phương nên có những nghiên cứu, tìm tòi

những loài lan phù hợp với điều kiện khí hậu của địa phươngmình, từ đó triển khai viêc nhân nhanh các

giống lan đó, đưa vào sản xuất sẽ thu được hiệu quả