Nghiên cứu ứng dụng Alginate bọc vỏ hạt nhân tạo (tạo hạt nhân tạo) cây địa lan Cymbidium spp

Phương pháp nghiên cứuChế tạo và khảo sát đặt trưng hạt chế tạo được  Khảo sát ảnh hưởng của nồng độ alginate đến khả năng tạo hạt nhân tạo Tiến hành với dung dịch alginate ở các nồng đ

Trang 1

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG

Đề Tài:

“Nghiên cứu ứng dụng alginate bọc vỏ hạt nhân tạo

(tạo hạt nhân tạo) cây Địa Lan Cymbidium spp.”

ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC

GVHD : Th.S KHÚC THỊ AN SVTH : NGÔ THỊ LỆ THẢO MSSV : 4913044061

Nha Trang, tháng 07 năm 2011

Trang 2

NỘI DUNG

NGHIÊN CỨU

Trang 4

ĐẶT VẤN ĐỀ

 Địa Lan (Cymbidium spp.) là sản phẩm trồng trọt

mang lại hiệu quả kinh tế cao.

 Đầu tiên nó được trồng bằng cách gieo hạt Nhược điểm của phương pháp này là cây giống thường dễ bị nhiễm bệnh, thời gian nhân giống lâu, có hệ số nhân giống thấp, không đủ số lượng cây giống đáp ứng

nhu cầu trồng theo qui mô công nghiệp.

 Ngày nay, loài hoa này được nhân giống thành công bằng nuôi cấy mô tế bào thực vật Tuy nhiên vẫn

chưa đáp ứng kịp thời nhu cầu của thị trường

 Do đó, việc tạo hạt nhân tạo cung cấp số lượng lớn giống cây trồng và nhanh đáp ứng nhu cầu của thị trường.

Trang 5

Hình 1: Địa Lan hoa vàng ba râu

(Cymbidium sayonara Raritan)

Phân loại Địa Lan hoa vàng ba râu

Trang 6

Đặc điểm của Địa Lan hoa vàng ba râu

(Cymbidium sayonara Raritan)

Địa Lan hoa vàng ba râu là một trong những

giống lan đẹp được nhập nội nhưng đã sớm thích nghi với điều kiện thổ nhưỡng của nước ta và

được rất nhiều người ưa chuộng vì không những nhiều hoa, hoa đẹp, to, lâu tàn mà còn cho năng suất cao.

Trang 8

Vật liệu nghiên cứu

• Mẫu protocorm lấy từ cây

Địa Lan nuôi cấy trong chai

thủy tinh khi cây cụm được

khoảng 35-40 protocorm

Cụm protocorm được tách

ra thành từng protocorm để

tiến hành tạo hạt nhân tạo

Hình 2: Protocorm like body cây

Địa Lan

Trang 9

Phương pháp nghiên cứu

Chế tạo và khảo sát đặt trưng hạt chế tạo được

 Khảo sát ảnh hưởng của nồng độ alginate đến khả năng tạo hạt nhân tạo

Tiến hành với dung dịch alginate ở các nồng độ 6%, 7%, 8% và 9% từ

đó xác định nồng độ alginate tối ưu.

 Khảo sát ảnh hưởng của nồng độ CaCl2 đến khả năng tạo hạt nhân tạo

Tiến hành với dung dịch CaCl2 ở các nồng độ 25mM, 50mM, 75mM

và 100mM Từ đó xác định nồng độ CaCl2 tối ưu

 Khảo sát thời gian lưu của dung dịch alginate trong dung dịch CaCl2

Tiến hành với các khoảng thời gian 10 phút, 20 phút, 30 phút và 40 phút Từ đó xác định thời gian lưu tối ưu của dung dịch alginate trong dung dịch CaCl2

Trang 10

Sản xuất hạt nhân tạo cây Địa Lan và thử

nghiệm cho hạt nhân tạo nảy mầm

Phương pháp xử lí số liệu

Các thí nghiệm được bố trí lặp lại 3 lần và các

số liệu sau khi thu nhập được xử lí bằng các hàm tính toán trong Microsoft Excel.

Trang 11

Dung dịch vỏ bao alginate(2)

PLB (protocorm like body)

Dung dịch CaCl2

Alginate

Trang 13

Chế tạo và khảo sát đặc trưng của hạt chế tạo được từ alginate

Kết quả khảo sát ảnh hưởng của nồng độ alginate đến

khả năng tạo hạt nhân tạo

5.81±0.04 5.84±0.04

Hạt không tròn, đục, khó

bể.

9

5.34±0.02 5.52±0.03

Hạt hình cầu, hơi đục, tròn, khó bể.

8

5.04±0.02 5.26±0.02

5.66±0.02

Hạt teo, nhỏ, đục, khó bể hơn ban đầu.

Hạt vẫn giữ nguyên hình dạng ban đầu không teo tóp, tuy nhiên hạt mất nước khá nhanh.

Hạt hình cầu, trong, tròn, dễ

bể.

7

4.72±0.03 4.99±0.03

5.58±0.03

Hạt teo lại, nhỏ, đục, móp méo nhiều chỗ.

Hạt teo và mất nước nhanh.

Hạt hình cầu, trong, tròn, mềm, dễ bể.

6

Sau 24 giờ Sau 5 giờ

Ban đầu Sau 24 giờ

Sau 5 giờ Ban đầu

Kích thước hạt trung bình (mm) Cấu trúc hạt

Nồng độ

alginate

(%)

Trang 14

Biểu đồ 1: Ảnh hưởng của nồng độ alginate đến

kích thước hạt nhân tạo

Như vậy nghiệm thức 8% tỏ ra ưu thế hơn và được lựa chọn cho các thí nghiệm khảo sát ở các bước tiếp theo.

Trang 15

Hình 3: Hạt nhân tạo lúc đầu Hình 4: Hạt nhân tạo sau 2 tuần

bảo quản ở nhiệt độ phòng

Trang 16

Kết quả khảo sát ảnh hưởng của nồng độ CaCl2 đến khả năng tạo hạt nhân tạo

5.9±0.03 5.93±0.02

6.06±0.02

Hạt mất nước rất ít.

Không thay đổi nhiều so với hình dạng ban đầu.

Hạt hình cầu, hơi đục, khó bể.

100

5.78±0.03 5.91±0.03

Hạt hình cầu, hơi đục, khó bể.

75

5.57±0.04 5.76±0.05

6.13±0.04

Hạt teo, nhỏ, đục, khó bể hơn ban đầu.

Hạt vẫn giữ nguyên hình dạng ban đầu không teo tóp, tuy nhiên hạt mất nước khá

nhanh.

Hạt hình cầu, hơi đục, dễ bể.

50

5.37±0.04 5.61±0.04

5.97±0.04

Hạt teo lại, nhỏ, đục, móp méo nhiều chỗ.

Hạt teo và mất nước nhanh.

Hạt hình cầu, hơi đục, dễ bể.

25

Sau 24 giờ Sau 5 giờ

Ban đầu Sau 24 giờ

Sau 5 giờ Ban đầu

Kích thước hạt trung bình (mm) Cấu trúc hạt

Nồng

độ

CaCl2

(mM)

Trang 17

Ở nồng độ CaCl 2 100mM thì kích thước và hình dạng hạt thay đổi rất ít, ưu thế hơn so với các nghiệm thức trên vì vậy được lựa chọn cho các thí nghiệm tiếp theo.

Trang 18

Kết quả khảo sát thời gian lưu của hạt alginate trong dung dịch CaCl2

5.02±0.04 5.23±0.04

5.43±0.04 5.79±0.04

Kích thước hạt trung bình (mm)

Hạt vẫn giữ nguyên hình cầu nhưng kích thước nhỏ hơn.

Hạt vẫn giữ nguyên hình cầu nhưng kích thước nhỏ hơn

Hạt hình cầu, đục,

độ đàn hồi cao.

Cấu trúc hạt 40

5.22±0.04 5.48 ±0.04

5.67±0.04 6.03±0.04

Hạt hình cầu, đục,

độ đàn hồi khá cao.

5±0.05 5.24±0.04

5.49±0.06 5.85±0.06

Hạt hình cầu, hơi đục, độ đàn hồi thấp.

5.03±0.04 5.31±0.04

5.56±0.05 5.89±0.05

Hạt hình cầu, hơi đục, độ đàn hồi thấp.

Sau 72 giờ Sau 48 giờ

Sau 24 giờ Ban đầu

Tốc độ bay hơi nước Các thông số

Thời

gian lưu

(phút)

Trang 19

Kết quả thử nghiệm hạt nhân tạo cây Địa Lan

và quy trình sản xuất hạt nhân tạo

Kết quả: Sau 6 tuần nuôi cấy hạt nhân tạo cây Địa

20 3

90 18

20 2

85 17

20 1

Tỷ lệ nảy mầm (%)

Số hạt nảy mầm (hạt)

Số hạt gieo (hạt)

Lần thí

nghiệm

Hình 5: Hạt nhân tạo nảy mầm sau 6

tuần nuôi cấy

Trang 20

PLB (protocorm like body)

Alginate 8%

Trang 21

Hình 6: Hạt nhân tạo cây Địa Lan ở nồng độ

Trang 24

ĐỀ XUẤT Ý KIẾN

nhân tạo cây hoa lan đặc biệt là Địa Lan cũng như các loại cây trồng có giá trị kinh tế khác.

tạo cây Địa Lan.

Định dạng
Số trang	25
Dung lượng	4,76 MB