nghiên cứu biện pháp tăng sinh khối rễ tơ cây đan sâm phục vụ ngành công nghiệp dược.

SỞ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO HÀ NỘI TRƯỜNG THPT CHUYÊN HÀ NỘI - AMSTERDAM QUẬN CẦU GIẤY – THÀNH PHỐ HÀ NỘI ************** ĐỀ TÀI DỰ THI KHOA HỌC, KỸ THUẬT DÀNH CHO HỌC SINH TRUNG HỌC CẤP THÀNH PHỐ LẦN THỨ TƯ (NĂM HỌC 2014 - 2015). Tên đề tài: NGHIÊN CỨU BIỆN PHÁP TĂNG SINH KHỐI RỄ TƠ CÂY ĐAN SÂM (SALVIA MILTIORRHIZA BUNGE) PHỤC VỤ NGÀNH CÔNG NGHIỆP DƯỢC. Lĩnh vực: Công nghệ sinh học NGƯỜI HƯỚNG DẪN GV. Trần Thu Hương Trường THPT Chuyên HN – Amsterdam. PGS.TS Nguyễn Thị Phương Thảo Học viện Nông nghiệp Việt Nam TÁC GIẢ: 1. Đinh Thục Anh (Nhóm trưởng) - Lớp 11 Sinh – THPT Chuyên HN – Amsterdam. 2. Nguyễn Minh Châu – Lớp 11 Sinh – THPT Chuyên HN – Amsterdam. Hà Nội, tháng 12 năm 2014 MỤC LỤC MỤC LỤC 2 PHẦN 1. LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀI 3 PHẦN 2. TỔNG QUAN 3 I.TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 II.ĐIỂM MỚI CỦA ĐỀ TÀI 4 PHẦN 3. NGHIÊN CỨU VÀ KẾT QUẢ 4 I. PHƯƠNG PHÁP VÀ NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 5 Thí nghiệm 1. Ảnh hưởng của thành phần môi trường đến sinh khối rễ tơ đan sâm dòng A5.14 5 Thí nghiệm 4. Ảnh hưởng của dạng bình nuôi cấy đến sự tăng sinh khối rễ tơ 7 II. KẾT QUẢ 7 1. Ảnh hưởng của thành phần môi trường đến sinh khối rễ tơ đan sâm dòng A5.14 7 2. Ảnh hưởng của trạng thái môi trường đến sự tăng sinh khối rễ tơ đan sâm 8 1.Ảnh hưởng của một số yếu tố elicitor đến sự tăng sinh khối rễ tơ và sự tổng hợp hoạt chất mục tiêu 9 4. Ảnh hưởng của dạng bình nuôi cấy đến sự tăng sinh khối rễ tơ 11 III.HưỚNg phát triỂn 12 PHẦN 4. KẾT LUẬN 13 I.KẾT LUẬN 13 II.Ý NGHĨ CỦA ĐỀ TÀI 13 TÀI LIỆU THAM KHẢO 14 2 PHẦN 1. LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀI Cùng song song với sự phát triển của đời sống hiện đại là sự xói mòn và ô nhiễm môi trường do con người, đi kèm là sự xuất hiện của nhiều loại bệnh, trong đó đáng quan ngại nhất là các căn bệnh nan y liên quan đến tim mạch. Xưa có câu “Nhất vị đan sâm, cộng đồng tứ vật thang “. Nghĩa là một vị đan bằng bốn vị: đơn quy, địa hoàng, xuyên khung, bạc thược – vốn là bài thuốc huyết kinh điển của Đông y. Bên cạnh đó, các nghiên cứu dược lý hiện đại cũng cho thấy Đan Sâm đặc biệt tốt cho tim mạch. Ở Việt Nam, cây Đan Sâm vẫn phải nhập gần như 100% từ Trung Quốc nên giá trị của loài cây này trở nên lớn hơn và kèm theo rủi ro, sai phạm trong quá trình sản xuất và vận chuyển như không kiểm soát được chất lượng sản phẩm, sự nhiễm kim loại nặng, dư lượng thuốc trừ sâu, bị thay thế bằng các loại thảo mộc khác trong thuốc thảo dược Trung Quốc. Nhưng để nuôi trồng và khai thác trong tự nhiên phải mất tới hai, thêm vào đó còn chịu ảnh hưởng của thời tiết, các loại dịch bệnh, sự ô nhiễm môi trường và việc quỹ đất dành cho việc phát triển cây dược liệu ngày càng bị thi hẹp, cạnh tranh từ các ngành cây trồng khác dẫn đến số lượng thành phẩm thu được không đáp ứng đủ nhu cầu. Với nhiều khó khăn như đã nêu trên, việc đưa kĩ thuật công nghệ sinh học như nuôi cấy rễ bất định, rễ tơ… vào sản xuất, thu nhận các hợp chất có hoạt tính cao đã và đang được nghiên cứu, thử nghiệm rộng rãi trên thế Các nhà khoa học Việt Nam nghiên cứu và hoàn thiện quy trình nhân giống vô tính cây sâm Ngọc Linh, rút ngắn thời gian trồng mà vẫn có đầy đủ lượng hoạt chất saponin ở thân, củ, rễ… như cây thu hoạch trong tự nhiên.Vậy tại sao chúng ta không thay cho các phương pháp truyền thống nhiều rủi ro bằng cácg áp dụng kỹ thuật công nghệ sinh học vào sản xuất các hợp chất thứ cấp chất lượng cao? Dù đòi hỏi chi phí ban đầu và đội ngũ kỹ thuật viên trình độ cao nhưng đây chính là chìa khóa mở ra cánh cửa của nền công nghiệp dược liệu sạch trong tương lai. Phương pháp nuôi cấy rễ tơ với những ưu điểm vượt bậc hứa hẹn là một hướng đi đầy triển vọng. Vậy làm thế nào để tăng sinh khối rễ tơ đan sâm trong nuôi cấy intro để thu được những hợp chất có hoạt tính dược liệu cao ? Với những lý do trên, chúng em đã tiến hành đề tài: “Nghiên cứu biện pháp tăng sinh khối rễ tơ cây đan sâm (Salvia miltiorrhiza Bunge) phục vụ ngành công nghiệp dược.” PHẦN 2. TỔNG QUAN I. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1. Đan Sâm Đan sâm (Salvia miltiorrhiza Bunge) là một cây thuốc quý trong y học cổ truyền. Hơn 80 hợp chất khác nhau đã được xác định trong đan sâm, 50 trong số đó là chất hòa tan trong nước, 30 chất còn lại là chất tan trong lipit. Các thành phần tan trong lipit là các hợp chất diterpene thuộc nhóm “tanshinones”, trong đó hai hợp chất quan trọng là tanshinone IIA và cryptotanshinone. Các thành phần hòa tan trong nước gồm nhiều axit polyphenolic bao gồm axit salvianolic, aldehyde và protocatechuic acid, và danshensu (axit salvianic A). Hợp chất đáng chú ý khác là beta- sitosterol, axit ursolic, baicalin, Vitamin E. Hoạt tính dược lý của cây đan sâm gồm có: hoạt động chống vi khuẩn hoạt động hỗ trợ, bảo vệ tim mạch, hoạt tính kháng viêm, cảm ứng quá trình apoptosis và hoạt động chống ung thư, hoạt tính bảo vệ thần kinh, hoạt động chống oxi hóa, bảo vệ chống lại chứng thiếu máu cục bộ ở não và tim và sự tưới máu lại. Nhu cầu dược liệu đan sâm trong hai thập kỷ gần đây gia tăng nhanh chóng, từ 4.500 tấn/ năm vào năm 1998 thì nay con số đã lên tới 15.000 tấn/năm. Tại Việt Nam, dược liệu cây đan sâm phải nhập 100% từ Trung Quốc. 2. Cơ sở lý thuyết Agrobacterium rhizogenes (tên cũ Phytomonas rhizogenes) được định danh lần đầu tiên cách đâu hơn 70 năm, là vi khuẩn đất, hỉnh que gram âm, thuộc chi Agrobacterium, tác nhân gây bệnh ở thực vật – hội chứng tạo rễ tơ . Rễ tơ được tạo ra do sự chuyển gen sử dụng hệ thống vector tự nhiên từ tác nhân bệnh - Agrobacterium rhizogenes vào tế bào thực vật. Rễ tơ đặc trưng bởi sự phát triển nhanh, không hướng đất, không phụ thuộc vào chất điều hòa tăng trưởng ngoại sinh, và bền vững về mặt di truyền. Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình tạo rễ tơ: độ tuổi cây, loại mô, loại cây, chủng vi sinh vật, thời gian đồng nuôi cấy, thời gian ngâm mẫu. II. ĐIỂM MỚI CỦA ĐỀ TÀI - Phát hiện các nhân tố ảnh hưởng đến sự tăng sinh khối rễ tơ cây đan sâm. - Tạo cơ sở khoa học đánh giá tính dược liệu của rễ cây đan sâm - Sử dụng nguyên vật liệu dễ kiếm, giá thành không cao để phục vụ mục đích nghiên cứu và làm thí nghiệm. PHẦN 3. NGHIÊN CỨU VÀ KẾT QUẢ I. PHƯƠNG PHÁP VÀ NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 1. Phương pháp nghiên cứu  Phương pháp nhân nuôi rễ tơ Rễ tơ được nuôi cấy trên các nền môi trường (MS, B5) với các trạng thái môi trường khác nhau (đặc, lỏng, bán lỏng và phân lớp) có bổ sung chất điều tiết sinh trưởng hoặc các yếu tố elicitor khác nhau để khảo sát khả năng tăng trưởng và sự tích lũy hoạt chất mục tiêu trong rễ tơ đan sâm. Môi trường đặc là môi trường chứa 0,7 % agar, môi trường bán lỏng chứa 0,35 % agar. Môi trường phân lớp là môi trường có pha đặc (25 ml) ở dưới và pha lỏng (25 ml) ở trên. Môi trường nuôi cấy được điểu chỉnh pH = 5,8 trước khi hấp khử trùng ở nhiệt độ 121 0 C trong 20 phút, 1,1 atm. Điều kiện nuôi cấy in vitro: 14h sáng, cường độ ánh sáng 2000-2500 lux, nhiệt độ 25 ± 2 0 C  Phương pháp xác định khối lượng rễ khô Rễ tơ sau khi thu sinh khối được sấy ở nhiệt độ 45 0 C đến khối lượng không đổi để xác khối lượng rễ khô (Ge và cs., 2005).  Phương pháp phân tích hoạt chất mục tiêu Các hoạt chất mục tiêu (Crytotanshinone, Tanshinone I, Tanshinone IIA) được phân tích bằng phương pháp sắc ký lỏng cao áp (HPLC).  Phương pháp bố trí thí nghiệm và xử lý số liệu Các thí nghiệm nhân được bố trí nhắc lại 3 lần mỗi công thức, mồi lần 10-20 mẫu tùy từng thí nghiệm. Các chỉ tiêu được theo dõi và đo đếm sau 4 tuần. Số liệu được xử lý thống kê theo chương trình Excel và IRRISTAT 5.0. 2. Nội dung nghiên cứu Nôi dụng 1. Nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố môi trường nuôi cấy đến sự tăng sinh khối và hàm lượng hoạt chất mục tiêu. Thí nghiệm 1. Ảnh hưởng của thành phần môi trường đến sinh khối rễ tơ đan sâm dòng A5.14 CTTN Môi trường nền CT1 MS CT2 B5 Thành phần của môi trường MS và B5 theo như bảng sau: Bảng 1. Thành phần môi trường MS và B5 Thành phần Môi trường Murashige và Skoog (MS) Gamborg (B5) Khoáng đa lượng NH 4 NO 3 1650 - NH 4 SO 4 - 134 CaCl 2 .2H 2 O 332,2 150 MgSO 4 .7H 2 O 370 250 KNO 3 1900 2500 KH 2 PO 4 170 - NaH 2 PO 4 - 130,5 Khoáng vi lượng H 3 PO 3 6,2 3,0 CoCl 2 .6H 2 O 0,025 0,025 CuSO 4 .5H 2 O 0,025 0,025 Na 2 EDTA 37,3 37,3 FeSO 4 .7H 2 O 27,8 27,8 MnSO 4 .H 2 O 16,9 10,0 KI 0,83 0,75 Na 2 MoO 4 .2H 2 O 0,25 0,25 ZnSO 4 .7H 2 O 8,6 2,0 Chất hữu cơ Myo-inositol 100 100 Glycine 2,0 - Acid nicotinic 0,5 1,0 B1 0,5 0,1 B6 0,1 10,0 Nội dung 2. Nghiên cứu sản xuất sinh khối rễ tơ trong một số hệ thống nuôi cấy khác nhau Thí nghiệm 2. Ảnh hưởng của trạng thái môi trường đến sự tăng sinh khối rễ tơ đan sâm CTTN Trạng thái môi trường CT1 Đặc CT2 Bán Lỏng CT3 Lỏng, tĩnh CT4 Phân lớp Thí nghiệm 3. Ảnh hưởng của một số yếu tố elicitor đến sự tăng sinh khối rễ tơ và sự tổng hợp hoạt chất mục tiêu Công thức Elicitor CT1 Đối chứng (B5) CT2 B5 + 100 mg/l YE + 50 g/l Sorbitol CT3 B5 + 100 mg/l YE + 0.1 mM Salicylic acid CT4 B5 + 100 mg/l YE + 0.1 mM Methyl Jasmonate CT5 B5 + 100 mg/l YE + 0.1 mM ABA Thí nghiệm 4. Ảnh hưởng của dạng bình nuôi cấy đến sự tăng sinh khối rễ tơ Công thức Dạng bình nuôi cấy CT1 Bình trụ CT2 Bình tam giác CT3 Bình chữ nhật CT4 Túi nilon II. KẾT QUẢ 1. Ảnh hưởng của thành phần môi trường đến sinh khối rễ tơ đan sâm dòng A5.14 Trong số các dòng rễ tơ đã được cảm ứng thành công, dòng rễ tơ A5.14 có sự tăng sinh khối nhanh, ổn định trong môi trường nuôi cấy không bổ sung chất điều tiết sinh trưởng nên được sử dụng làm vật liệu nuôi cấy trên hai môi trường MS và B5 đặc. Tốc độ tăng trưởng của rễ tơ trên môi trường B5 cao hơn so với trên môi trường MS (Hình 1A, B). Từ 0,57 gram rễ nuôi cấy trên môi trường B5, sau 4 tuần, khối lượng rễ tăng 7,67 lần, đạt 4,34 gram khối lượng rễ tươi và 0,373 gram khối lượng rễ khô. Trong khi đó, khối lượng rễ tăng trên môi trường MS là 5,96 lần, đạt 3,25 gram khối lượng tươi và 0,297 gram khối lượng khô từ 0,55 gram rễ ban đầu (Bảng 2). Bảng 2. Ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến sinh khối rễ tơ đan sâm dòng A5.14 sau 4 tuần nuôi cấy Môi trường Khối lượng rễ ban đầu (gram) Khối lượng rễ tươi sau 4 tuần (gram) Khối lượng rễ tăng (lần) Khối lượng rễ khô (gram) MS 0,55 3,25 5,96 0,297 B5 0,57 4,34 7,67 0,373 2. Ảnh hưởng của trạng thái môi trường đến sự tăng sinh khối rễ tơ đan sâm Trong bốn trạng thái môi trường thử nghiệm gồm đặc; bán lỏng; lỏng và nuôi cấy phân lớp với 25 ml môi trường đặc ở dưới, 25 ml môi trường lỏng ở trên, rễ tơ trên môi trường đặc cho tốc độ tăng trưởng cao nhất, theo sau là môi trường bán lỏng; lỏng, tĩnh và phân lớp với khối lượng rễ tăng lần lượt là 7,67; 3,67; 3,08 và 2,83 lần so với khối lượng rễ ban đầu sau 4 tuần nuôi cấy (Bảng 3). Về mặt hình thái, rễ đan sâm trên môi trường đặc có màu vàng, trắng nhưng lại có xu hướng hóa đen trên môi trường bán lỏng, lỏng và phân lớp (Hình 1B, C, D, E). Bảng 3. Ảnh hưởng của trạng thái môi trường đến sinh khối rễ tơ đan sâm dòng A5.14 sau 4 tuần nuôi cấy Trạng thái môi trường Khối lượng rễ ban đầu (gram) Khối lượng rễ tươi sau 4 tuần (gram) Khối lượng rễ tăng (lần) Khối lượng rễ khô (gram) Đặc 0,57 4,34 7,67 0,373 Bán lỏng 0,69 2,53 3,67 0,14 Lỏng, tĩnh 0,73 2,25 3,08 0,11 Phân lớp 0,77 2,18 2,83 0,11 Hsia và cs. (2007) khảo sát ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đặc và lỏng, lắc 100 vòng/phút đến sự tăng sinh khối rễ tơ đan sâm và nhận thấy rễ tơ nuôi cấy trên môi trường lỏng, lắc cho khối lượng tươi cao gấp 3 lần và khối lượng khô cao gấp 6 lần so với rễ tơ nuôi cấy trên môi trường đặc. Tuy nhiên trong nghiên cứu này, môi trường đặc cho hiệu quả nuôi cấy rễ tơ đan sâm cao hơn so với ba phương thức nuôi cấy còn lại có thể do nuôi cấy trong môi trường bán lỏng; lỏng, tĩnh; rễ tơ đan sâm ngập chìm trong môi trường, kết quả tạo ra sự nghèo thoáng khí, làm mẫu rễ bị chết, hoặc xảy ra hiện tượng trương nước làm ảnh hưởng đến tốc độ tăng trưởng của rễ tơ đan sâm. Môi trường đặc là thích hợp cho nhân nuôi sinh khối rễ tơ trong điều kiện hạn chế về trang thiết bị mà vẫn đảm bảo sự tăng sinh khối rễ cao. Hình 1. Rễ tơ đan sâm sau 4 tuần nuôi cấy trên môi trường MS đặc (A), B5 đặc (B), B5 bán lỏng (C), B5 lỏng (D), B5 phân lớp (E) 1. Ảnh hưởng của một số yếu tố elicitor đến sự tăng sinh khối rễ tơ và sự tổng hợp hoạt chất mục tiêu Thí nghiệm tiến hành trên các điều kiện tốt nhất thu được từ các thí nghiệm 1 và thí nghiệm 2 và được bổ sung các elicitor vào môi trường nuôi cấy sau 5 tuần nuôi cấy. Sau 4 ngày bổ sung các elicitor thì thu được kết quả như trong bảng 4 và bảng 5. Bảng 4. Ảnh hưởng của yếu tố elicitor đến sinh khối của rễ tơ đan sâm Công thức Khối lượng rễ ban đầu (g) Khối lượng rễ tươi sau 5 tuần + 4 ngày bổ sung elicitor (g) Khối rễ lượng tăng (lần) Khối lượng rễ khô (g) Đối chứng (B5) 0.68 4.85 7.13 0.35 B5 + 100 mg/l 0.67 4.94 7.37 0.36 YE + 50 g/l Sorbitol B5 + 100 mg/l YE + 0.1 mM Salicylic acid 0.70 6,03 8,61 0.37 B5 + 100 mg/l YE + 0.1 mM Methyl Jasmonate 0.62 5.22 8.42 0.36 B5 + 100 mg/l YE + 0.1 mM ABA 0.64 5.54 8.66 0.38 Từ bảng kết quả cho thấy rễ trong môi trường có bổ sung elicitor cho sinh khối lớn hơn so với rễ trong mẫu đối chứng. Tỉ lệ tăng sinh khối rễ tốt nhất thu được ở công thức có bổ sung YE và ABA. Bảng 5. Ảnh hưởng của yếu tố elicitor đến sự tích lũy hoạt chất mục tiêu trong rễ tơ đan sâm Công thức Cryptotanshinone (mg/g) Tanshinone I (mg/g) Tanshinone IIA (mg/g) Đối chứng (B5) 0.12596 0.08199 0.11310 B5 + 100 mg/l YE + 50 g/l Sorbitol 0.22694 0.10596 0.14128 B5 + 100 mg/l YE + 0.1 mM Salicylic acid 0.16149 0.09814 0.10849 B5 + 100 mg/l YE + 0.1 mM Methyl Jasmonate 0.54866 0.23020 0.21253 B5 + 100 mg/l YE + 0.1 mM ABA 0.22100 0.09353 0.10303 [...]... Phân tích hoạt chất thứ cấp trong rễ thu được - Hoàn thiện quy trình nhân nuôi sinh khối rễ tơ cây đan sâm (Salvia miltiorrhiza Bunge) - Phát triển các sản phẩm thực phẩm chức năng có nguồn gốc từ rễ tơ cây đan sâm (Chè nhúng, chè tan, nước tăng lực, viên nén, viên nang…) PHẦN 4 KẾT LUẬN I KẾT LUẬN Môi trường thích hợp sử dụng nhân nuôi sinh khối rễ tơ in vitro đan sâm là môi trường B5 bổ sung 3% sucrose... phương thức nuôi cấy phù hợp cho việc nhân nuôi sinh khối rễ tơ in vitro đan sâm là phương thức nuôi cấy trên môi trường rắn Elicitor phù hợp nhất cho sự tăng sinh khối rễ tơ in vitro đan sâm là dịch chiết nấm men (YE) bổ sung ABA Elicitor phù hợp nhất cho sự tích lũy hoạt chất là dịch chiết nấm men (YE) bổ sung Methyl Jasmonate - Loại bình nhân nuôi sinh khối thích hợp là bình tam giác II Ý NGHĨ CỦA... tiến hành nuôi cấy rễ tươi trên các loại bình nuôi cấy khác nhau nhằm nghiên cứu đánh giá sự ảnh hưởng của dạng bình, diện tích bề mặt tiếp xúc và thể tích khí trong bình nuôi có ảnh hưởng như thế nào đến sự tăng sinh khối và tổng hợp các hoạt chất mục tiêu Kết quả được trình bày trong bảng 6 Bảng 6 Ảnh hưởng của dạng bình nuôi đến sự tăng sinh khối rễ tơ Loại bình Khối lượng Khối lượng rễ tươi sau 10... môi trường B5 sử dụng là 100ml sau 10 tuần nuôi cấy khối lượng rễ tươi tăng gần 16 lần so với khối lượng ban đầu Sự khác nhau này có thể được giải thích do khả năng thu nhận ánh sáng của rễ trong bình tam giác là lớn nhất và diện tích bề mặt rễ tiếp xúc với môi trường ở bình tam giác là thích hợp cho sự phát triển sinh khối của rễ tơ Hình 3 Rễ tơ đan sâm sau 10 tuần nuôi cấy trong bình trụ (A), bình... Về mặt nghiên cứu khoa học: Làm tiền ðề cho quy trình sản xuất các hoạt chất thứ cấp phục vụ công nghiệp dýợc liệu ở Việt Nam TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài Liệu Tiếng Việt : 1 Lê Xuân Thao (2012) Nghiên cứu tạo rễ tơ khoai lang chuyển gen cry3 kháng sâu non bọ hà (cylas formicarius) 2 Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý Anh, Phạm Kim Ngọc, Trần Vãn Minh, Nguyễn Thị Phương Thảo (2009) Cõ sở công nghệ sinh học... rễ tăng lên lần lượt là 4,3; 2,8 và 1,9 lần so với mẫu đối chứng A B C D E Hình 2 Rễ tơ đan sâm sau 5 tuần nuôi cấy và 4 ngày bổ sung các yếu tố elicitor: (A): B5, (B): B5 + 100 mg/l YE + 50 g/l Sorbitol; (C): B5 + 100 mg/l YE + 0.1 mM Salicylic acid; (D): B5 + 100 mg/l YE + 0.1 mM Methyl Jasmonate; (E): B5 + 100 mg/l YE + 0.1 mM ABA A B 4 Ảnh hưởng của dạng bình nuôi cấy đến sự tăng sinh khối rễ tơ. .. lượng rễ tươi sau 10 ban đầu (g) tuần nuôi cấy (g) Khối lượng rễ Khối lượng rễ tăng (lần) khô (g) Bình trụ 0.80 11.40 14.25 0.647 Bình tam giác 0.83 13.12 15.90 0.757 Bình chữ nhật 1.55 15.05 9.70 0.837 Túi nilon 12.95 14.7 0.703 0.85 Kết quả từ bảng số liệu cho thấy với các loại bình nuôi khác nhau (cùng thể tích) thì sự phát triển tăng sinh khối rễ tơ là khác nhau Biểu hiện tốt nhất là nuôi trong dạng... lýợng cao phục vụ cho việc phòng và ðiều trị một số bệnh tim mạch hoặc bệnh ung thý - Về mặt kinh tế: Khắc phục khó khãn khi nhân nuôi bằng phýõng pháp truyền thống; biện pháp này cho nãng suất cao, thu nhận sản phẩm dễ dàng, rút ngắn thời gian nuôi trồng, giảm chi phí sản xuất - Về môi trýờng: Chủ ðộng tạo ra nguồn ðan sâm sạch, chất lýợng cao, qua ðó làm giảm nguy cõ khai thác quá mức nguồn ðan sâm trong...Có thể thấy sự thay đổi rõ rệt về màu sắc rễ sau 4 ngày được bổ sung elicitor, đây có thể là biểu hiện của động thái tích lũy hoạt chất mục tiêu trong rễ tơ Theo nghiên cứu của một số nhà khoa học trên thế giới, việc sử dụng một số elicitor sẽ làm tăng cường sự tích lũy các hoạt chất mục tiêu trong rễ tơ Bảng trên đã cho thấy rằng, khi sử dụng dịch chiết nấm men và Methyl . HỌC SINH TRUNG HỌC CẤP THÀNH PHỐ LẦN THỨ TƯ (NĂM HỌC 2014 - 2015). Tên đề tài: NGHIÊN CỨU BIỆN PHÁP TĂNG SINH KHỐI RỄ TƠ CÂY ĐAN SÂM (SALVIA MILTIORRHIZA BUNGE) PHỤC VỤ NGÀNH CÔNG NGHIỆP DƯỢC. Lĩnh. tính dược liệu cao ? Với những lý do trên, chúng em đã tiến hành đề tài: Nghiên cứu biện pháp tăng sinh khối rễ tơ cây đan sâm (Salvia miltiorrhiza Bunge) phục vụ ngành công nghiệp dược. ” PHẦN. sự tăng sinh khối rễ tơ 7 II. KẾT QUẢ 7 1. Ảnh hưởng của thành phần môi trường đến sinh khối rễ tơ đan sâm dòng A5.14 7 2. Ảnh hưởng của trạng thái môi trường đến sự tăng sinh khối rễ tơ đan sâm