SKKN Nghiên cứu tạo sản phẩm nước rửa chén từ việc tận dụng chất thải của quá trình sản xuất đậu phụ

SỞ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO HÀ NỘI TRƯỜNG THPT LÊ LỢI HÀ ĐÔNG NGHIÊN CỨU TẠO NƯỚC RỬA CHÉN BÁT TỪ VIỆC TẬN DỤNG PHẾ THẢI CỦA QUÁ TRÌNH SẢN XUẤT ĐẬU 1... Đề xuất quy trình tạo nước rửa chén bá

SỞ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO HÀ NỘI TRƯỜNG THPT LÊ LỢI HÀ ĐÔNG

NGHIÊN CỨU TẠO NƯỚC RỬA CHÉN BÁT TỪ VIỆC TẬN DỤNG

PHẾ THẢI CỦA QUÁ TRÌNH SẢN XUẤT ĐẬU

1 Hoàng Thanh Thuận Lớp: 10A7.Trường: THPT Lê Lợi

2 Nguyễn Ngọc Anh Lớp: 10A7.Trường: THPT Lê Lợi

Hà Nội, tháng 12 năm 2014

MỤC LỤC

CHƯƠNG I: LÍ DO CHỌN ĐỀ TÀI 4

CHƯƠNG II: TỔNG QUAN 5

1.1 Tổng quan vấn đề nghiên cứu 5

1.2 Điểm mới của đề tài 5

CHƯƠNG III: NỘI DUNG VÀ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU……… 6

3.1 CƠ SỞ LÍ LUẬN 6

3.1.1 Giới thiệu về cây đậu nành 6

3.1.2 Giá trị dinh dưỡng của đậu nành 6

3.1.3 Công dụng của nước chua từ quá trình làm đậu phụ 6

3.1.4 Lên men lactic 7

3.1.5 Chất hoạt động bề mặt 7

3.1.6 Tổng quan về phương pháp đánh giá cảm quan 7

3.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 8

3.3 NGUYÊN LIỆU 8

3.3.1 Đậu nành 8

3.3.2 Nước phế thải từ quá trình làm đậu phụ 8

3.4 HÓA CHẤT, THIẾT BỊ 8

3.4.1 Hóa chất 8

3.4.2 Thiết bị nghiên cứu 8

3.5 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 9

3.5.1 Xác định hàm lượng protein bằng phương pháp Lowry 9

3.5.2 Xác định hàm lượng gluxit bằng phương pháp Miller 10

3.5.3 Phương pháp chuẩn độ trung hòa axit 11

3.5.4 Bố trí thí nghiệm xây dựng quy trình làm nước rửa chén bát 12

3.5.5 Đánh giá cảm quan sản phẩm theo phương pháp cho điểm 12

3.6 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM 12

3.6.1 Tạo đậu phụ thu hồi nước phế thải 12

3.6.2 Xác định hàm lượng protein, gluxit, axit tổng, axit lacitc, axit axetic trong nước phế thải 12

3.6.3 Lựa chon phương pháp tạo nước rửa chén bát từ phế phẩm 14

3.6.3.1 Tạo nước rửa chén bát bằng phương pháp cô ở nhiệt độ 1000C 14

3.6.3.2 Tạo nước rửa chén bát bằng phương pháp cô chân không và lên men tự nhiên 16

3.6.3.3 Tạo nước rửa chén bát bằng phương pháp lên men lactic 17

3.6.4 Bổ sung các chất hoạt động bề mặt 19

6.6.5 Phân tích kết quả thực nghiệm 20

6.5.6 Đề xuất quy trình tạo nước rửa chén bát từ phế thải của quá trình làm đậu phụ………22

KẾT LUẬN 23

HƯỚNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO 24 TÀI LIỆU THAM KHẢO

CHƯƠNG I: LÍ DO CHỌN ĐỀ TÀI

Đậu phụ là một món ăn phổ biến, dễ làm tại Hà Nội Quan sát quá trìnhlàm đậu phụ chúng em nhận thấy, giai đoạn cuối ép khuôn đậu phụ tạo ra lượnglớn nước chắt đậu phụ còn gọi là nước chua.

Trong một lần em xin nước chua về rửa chén bát, do để quên sau 2 ngày

em nhận thấy nước chua vẩn đục, có mùi rất khó chịu và đem rửa chén bát thấykhông còn hiệu quả Em suy nghĩ rằng: Thứ nhất nếu nước chua này chưa qua

xử lí thải ra môi trường sẽ gây ô nhiễm môi trường; Thứ hai nước chua dùng đểrửa chén bát chỉ sử dụng trong ngày mới hiệu quả, phải dùng 1 lít nước mới rửasạch chén bát cho một gia đình có 6 người ăn gây bất tiện cho người sử dụng;Thứ 3, nước chua làm sạch chén bát, sau khi rửa lớp mỡ vẫn còn nổi trên mặtnước và bám vào da tay người sử dụng, với độ pH khoảng 4,2 nếu sử dụngthường xuyên sẽ gây hại da tay người sử dụng

Hiện nay không ít các sản phẩm tẩy rửa như nước rửa bát, nước xả vải,dung dịch tẩy rửa nhà vệ sinh, nước lau nhà Được các nhà sản xuất quảngcáo chiết xuất từ thiên nhiên, không hại da tay, không gây hại cho người sửdụng Tuy nhiên, các nhà khoa học lại cho rằng, các sản phẩm đó chủ yếuđược sản xuất từ hóa chất, nhiều loại gây nguy hiểm cho sức khỏe ngườitiêu dùng

Xuất phát từ những thực tế trên, chúng em mong muốn xử lí sơ bộ nhữngthành phần gây ô nhiễm môi trường trong nước thải đậu phụ Đồng thời, tậndụng nguồn phế thải này, tạo ra một loại nước rửa chén bát có nguồn gốc sinhhọc, an toàn, hiệu quả, thuận tiện cho người sử dụng và không gây ô nhiễm môitrường

Chương II: TỔNG QUAN

1.1 TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU

Từ những thông tin đã tìm hiểu được về đậu phụ và quá trình làm đậuphụ Chúng em tiến hành làm đậu phụ từ đậu nành, để xác định khối lượng chấtthải (nước chua) Tiến hành định lượng thành phần có trong nước chua chủ yếu

là protein, gluxit, axit tổng, axit lactic và axit axetic từ đó xác định chất có tácdụng làm sạch chén bát, và chất gây ô nhiễm môi trường, làm cho dịch nướcchua mau bị hư hỏng

Thực nghiệm tại Trung tâm Công nghệ sinh học và tế bào, chúng em xácđịnh các thành phần có trong nước chua như prôtêin, gluxit, axit Tiến hànhkhảo sát tạo nước rửa chén bát từ nước chua bằng các phương pháp: cô chân,không không qua lên men; cô chân không, tiến hành lên men tự nhiên; lên menlactic, không qua cô chân không

Phân tích các thành phần prôtêin, gluxit, axit trong nước chua đã lên men

tự nhiên, lên men lactic Khảo sát tỉ lệ các chất bổ sung để tăng hiệu quả nướcrửa chén bát Để đánh giá hiệu quả của nước rửa chén bát dựa trên phương phápđánh giá cảm quan nhờ các chuyên gia có hiểu biết về nước rửa chén bát Đưa raquy trình tạo nước rửa chén bát từ phế thải của quá trình làm đậu phụ

1.2 ĐIỂM MỚI CỦA ĐỀ TÀI

Lần đầu tiên, phần phế phẩm của quá trình sản xuất đậu phụ được nghiêncứu tận dụng để tạo ra nước rửa chén hiệu quả, an toàn, thuận tiện cho người sửdụng, thời gian bảo quản lâu, tiết kiệm chi phí và không gây ô nhiễm môitrường

Đề tài sử dụng phương pháp đơn giản, hiệu quả và thân thiện với môitrường

CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM

3.1 CƠ CỞ LÍ LUẬN

3 1.1 Giới thiệu về cây đậu nành

Phân loại khoa học: Giới (regnum) Plantae, Ngành (Phylum)

Magnoliophyta Lớp (Class) Magnoliopsida, Bộ (ordo) Fabales, Họ (familia)

Fabaceae, Chi (genus)Glycine, Loài (species) G max.

Đậu nành (Glycine max ) là một trong số cây trồng có lịch sử lâu đời nhất

của loài người Đây loại cây trồng ngắn ngày, có nhiều tác dụng như: cung cấpthực phẩm cho người, nguyên liệu cho công nghiệp, thức ăn cho gia súc, nôngsản xuất khẩu và cây xen canh gối vụ cải tạo đất

3.1.2 Giá trị dinh dưỡng của đậu nành [4]

Hạt đậu nành có ba bộ phận: vỏ hạt chiếm 8% trọng lượng hạt, phôi chiếm2%, tử diệp chiếm 90%

Thành phần hóa học của đậu nành thay đổi tùy loại, thời tiết, đất đai, điềukiện trồng trọt Có loại chứa hàm lượng protein lớn hơn 50%, lipid lớn hơn 22%

* Protein và thành phần acid amin :

Hàm lượng protein dao động trong hạt từ 29,6–50,5%, trung bình là 36–40%

* Lipid : Chất béo trong đậu nành dao động từ 13,5–24%, trung bình 18%.

Chất béo đặc trưng chứa khoảng 6,4–15,1% acid béo no và 80–93,6% acid béokhông no

Đậu nành chứa nhiều vitamin khác nhau, trừ vitamin C và vitamin D

* Một số enzyme trong đậu nành:

Urease: chống lại sự hấp thụ các chất đạm qua hàng ruột do đó không nên ănđậu nành sống

Lipase: thủy phân glyceric tạo thành glycerin và acid béo

Phospholipase: thủy phân ester của acid acetic

Amylase: thủy phân tinh bột, β-amylase trong đậu nành với số lượng khá lớn.Lipoxygenase: xúc tác phản ứng chuyển H2 trong acid béo

3.1.3 Công dụng của nước chua từ quá trình làm đậu phụ

Quá trình làm đậu phụ phải qua các công đoạn: lựa chọn nguyên liệu là hạtđậu tương (đậu nành nâu), ngâm, xay, lọc, đun dịch thu được hoa đậu, sau đó tiếnhành ép tạo khuôn đậu phụ đồng thời loại bỏ lượng nước có trong hoa đậu, ta thulượng phế thải này gọi là nước chua Sử dụng trực tiếp nước chua được sản xuất ratrong 24 giờ có thể làm sạch chén bát, tuy nhiên không làm tan được litpit.Ngoài ra,

nước chua còn để dùng để muối dưa muối cà, làm chất động tụ sữa đậu trong quátình làm đậu phụ.

Khảo sát trên địa bàn Quận Hà Đông, chúng em thấy có khoảng 40 cửa hàngsản xuất đậu phụ Mỗi cửa hàng sử dụng trung bình 50 kg đậu nành và sản xuất ra

500 bìa đậu phụ Lượng nước chua thải ra môi trường với một lượng rất lớn

3.1.4 Lên men lactic [2 ]

Lên men lactic là quá trình chuyển hóa kị khí đường (glucôzơ, lactôzơ)thành sản phẩm chủ yếu là axit lactic Vi khuẩn lên men lactic thuộc họLactobacterium hô hấp kị khí không bắt buộc Chúng có khả năng lên men nhiềuloại đường đơn hay đường đôi nhưng không có khả năng lên men gluxit phứctạp và tinh bột

Yếu tố ảnh hưởng đến quá trình lên men: pH môi trường, nhiệt độ, nguồncácbon và các axit amin

Có 2 loại lên men lactic là lên men đồng hình và lên men dị hình:

Glucôzơ + vi khuẩn lactic đồng hình  Axit lactic

Glucôzơ + vi khuẩn lactic dị hình  Axit lactic + CO2 + Eetanol + axitaxetic

3.1.5 Chất hoạt động bề mặt

Các chất hoạt động bề mặt là chất không thể thiếu được, chúng có tácdụng làm giảm sức căng bề mặt của nước, giúp nước thấm sâu vào sợi để hòatan vết bẩn Đối với vết bẩn không tan chúng sẽ bị các chất hoạt động bề mặt lấy

ra ngoài dưới dạng huyền phù Sau đó, chất hoạt động bề mặt tạo bọt để đẩy bụibẩn nổi lên trên, không cho chúng bám trở lại Nhìn chung, chúng ta có thểtưởng tượng là nếu không có chất hoạt động bề mặt trong các chất tẩy rửa thìquá trình tẩy bẩn sẽ không xảy ra được

Chất tạo bọt: làm cho chất bẩn không tan tập trung lên bề mặt bọt và bị

đẩy ra Một trong những hóa chất có khả năng tạo bọt bền, mịn và đều đó

là Sodium lauryl laurilsulfate (SLS) và linearalkylbenzenesulfonic acid

LAS Công thức ( SLS ) là một hợp chất hữu cơ với các công thức

CH 3 (CH 2 ) 11 OSO 3 Na ( SLS ) có nguồn gốc từ dầu cọ và dầu dừa

Chất tạo độ nhớt: Glycerol hay glyxerol, glycerin, glyxerin là một rượu

đa chức, C3H5(OH)3) Glycerol an toàn cho da tay người sử dụng, tạo độ sánhcao, tăng độ đậm đặc cho dung dịch

3.1.6 Tổng quan về phương pháp đánh giá cảm quan

Phương pháp cảm quan là phương pháp dựa trên việc sử dụng các thông tinthu được nhờ phân tích cảm giác của các cơ quan cảm giác ở người: thị giác, xúcgiác, thính giác, khứu khác và vị giác

Đánh giá hiệu quả đối với nước rửa chén bát ta tiến hành đánh giá trên 5tiêu chí: màu sắc, tạo bọt, mùi, làm sạch, an toàn Kiểm nghiệm viên sẽ phântích cảm quan đó để đưa ra các kết luận về chất lượng thực phẩm Tiêu chuẩn

Việt Nam sử dụng thang điểm 20 gồm 6 bậc từ 0-5, điểm cao nhất cho một tiêuchí là 5 và điểm thấp nhất cho 1 chỉ tiêu là 0.

3.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU

Giai đoạn 1: Lựa chọn phương pháp tạo nước rửa chén bát từ nước chua.

- Xác định thành phần protein, gluxit, axit lactic và axit axetic trong nước

chua

- Lựa chọn phương pháp tạo nước rửa chén bát từ nước chua

Giai đoạn 2: Xây dựng quy trình tạo nước rửa chén bát từ nước chua.

- Xác định thành phần có trong dịch nước được tạo ra từ quá trình lên menlactic

- Khảo sát thành phần của các chất hoạt động bề mặt bổ sung vào nướcrửa chén bát được tạo ra từ nước chua

- Đánh giá hiệu quả của nước chén bát được tạo ra bằng phương pháp cảmquan

- Xây dựng quy trình tạo nước rửa chén bát từ phế phẩm của quá trình làmđậu phụ

3.3 NGUYÊN LIỆU

3.3.1 Đậu nành

Chọn loại đậu nành có chất lượng tốt Hạt đậu tròn mẩy, chất lượng đồngđều, màu vàng sáng, loại bỏ hạt kém chất lượng như sâu mọt, hư hỏng, hạt lép,hạt nứt vỡ

3.3.2 Nước chua từ quá trình làm đậu phụ

Thu gom nước chua từ quá trình làm đậu phụ tại các cơ sở xản xuất đậuphụ trên địa bàn Quận Hà Đông – Hà Nội

3.4 HÓA CHẤT, THIẾT BỊ

3.4.1 Hóa chất nghiên cứu

Folin, Na2CO3 2%, NaOH, CuSO4.5H2O 0,5%, Natri citrat 1%, Axit axeticchuẩn, Axit lactic chuẩn, Nước cất, Sodium laureth sulfate,

linearalkylbenzenesulfonic acid LAS, Glyxerol, DNS, Axit dinitrosalisylic,

Dung dịch glucose mẫu

3.4.2 Thiết bị nghiên cứu

Máy móc:

- Máy sắc kì lỏng hiệu năng cao Shimadzu (Nhật Bản)

- Máy đo pH PHS – 25 (Nhật Bản)

- Máy xay sinh tố Philip (Nhật Bản)

- Máy đo quang phổ LD-6-72 (Đức)

- Máy siêu tốc PCN20 –Romani

- Máy cô chân không do Trung tâm công nghệ sinh học và tế bào tự chế

- Máy li tâm tách dầu PTB3 (Hàn Quốc)

- Máy lắc ổn nhiệt PCT3 (Trung Quốc)

- Tủ an toàn EFH- 4A1 (Singapo)

Dụng cụ:

- Cốc có mỏ, bình cầu, bình gạn, pipet, bình định mức, ống đong.

- Bếp đun, nồi innox, chum, bình chứa 2 lít

3.5 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.5.1 Xác định hàm lượng protein theo phương pháp Lowry

Nguyên tắc: Dựa trên cơ sở phản ứng tạo màu giữa protein và thuốc thử

folin Cường độ màu của hỗn hợp phản ứng tỷ lệ thuận với nồng độ proteintrong một phạm vi nhất định Biết được mật độ quang của dung dịch proteinnghiên cứu với thuốc thử folin, dựa theo đường chuẩn của protein tinh khiết vớithuốc thử, tính được hàm ượng protein của mẫu nghiên cứu

Hóa chất:

- Thuốc thử folin

- Dung dịch Na2CO3 2% pha trong NaOH 0,1 N ( dung dịch A)

- Dung dịch CuSO4.5H2O 0,5% pha trong natri xitrat 1%.( dung dịch B)

- Hỗn hợp C được pha theo tỷ lệ: dung dịch A/dung dịch B là 50/1

- Cho 2 ml dung dịch nghiên cứu vào ống nghiệm khô rồi thêm vào đó 1 mldung dịch C, lắc đều và để yên 10 phút, ở nhiệt độ thường Sau đó thêm vàohỗn hợp 0,1 ml thuốc thử folin, lắc đều Qua 30 phút màu vàng của hỗn hợpphản ứng chuyền màu xan thẫm Đo cường độ màu của hỗn hợp trên máy somàu quang điện ở 750nm

- Nồng độ protein mẫu nghiên cứu tính theo đường chuẩn của protein tinhkhiết Lấy 0,2 g BSA pha với 500 ml nước cất ta có dung dịch gốc nồng độ0.4 mg/ml

-Hình 1: Đường chuẩn OD 3.5.2 Xác định hàm lượng gluxit bằng phương pháp Miller

Nguyên tắc: Phương pháp dựa trên phản ứng tạo màu giữa đường khử với

thuốc thử 3,5-dinitrosalisylic (DNS) Cường độ màu của hỗn hợp phản ứng tỷ lệthuận với nồng độ đường khử Dựa theo đồ thị chuẩn của glucose tinh khiết vớithuốc thử axit dinitrosalisylic ta sẽ tính được hàm lượng đường khử của mẫunghiên cứu

Hóa chất:

- Thuốc thử DNS: cân 1g DNS pha trong 20ml dung dịch NaOH, them nào

50 ml nước cất và 30g muối sodium postassium tartrate Đun nhẹ cho tan rồiđịnh mức tới 100ml

- Dung dịch glucose mẫu: cân 0.5 g D-glucose pha trong nước cất thành 1lít

Bảng 2 Dựng đường chuẩn Glucôzơ

Lắc đều và đem đun cách thủy ở 100oC trong 3 phút, làm nguội và thêm5ml nước cất Đo độ hấp thụ ở bước sóng 530 nm trên máy quang phổ

y = 0.77x - 0.034

R 2 =0.9968

0 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40

Nồng độ glucose (mg/ml)

OD 530nm

Hình

2 Đường chuẩn của glucose

Tiến hành thì nghiệm: phản ứng của dung dịch đường cần phân tích vớithuốc thử DNS được tiến hành như trong phần xây dựng đồ thị chuẩn Nồng độđường trong mẫu được xác định nhờ vào đường chuẩn glucose đã dựng

3.5.3 Phương pháp định lượng axit lactic và axit axetic

Xác định hàm lượng axít lactic trong dịch phế phẩm và trong sản phẩmbằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)

Dung dịch chuẩn: Cân chính xác 25 mg axít lactic chuẩn vào bình định

mức 50 mL, thêm nước cất, lắc hòa tan hoàn toàn Thêm nước vừa đủ đến vạch.Hút chính xác 5 mL, cho vào bình định mức 25 mL, thêm nước đến vạch, lắcđều Lọc qua màng 0,45 µm, được dung dịch chuẩn có nồng độ axít lactic 100µg/mL

Dung dịch thử:

Mẫu thử là dung dịch axit lactic: Tiến hành pha tương tự dung dịch chuẩn Mẫu thử là dịch nước phế phẩm: Pha loãng dịch nước đến nồng độ axít

lactic trong khoảng 50 – 150 µg/mL, lọc qua màng 0,45 µm

Định lượng mỗi mẫu 3 lần theo điều kiện sắc ký đã xác định, lấy kết quảtrung bình

3.5.4 Phương pháp chuẩn độ trung hòa axit

Dùng NaOH khan để chuẩn độ dung dịch axit tổng trong nước chua, dùngmáy đo pH cắm trực tiếp vào dung dịch để xác định độ pH cần trung hòa.

3.5.5 Bố trí thí nghiệm xây dựng quy trình làm nước rửa bát

- Tiến hành cô ở 1000C, lọc nhưng không qua lên men lactic

- Tiến hành li tâm, cô ở 1000 lên men tự nhiên

- Tiến hành lên men lactic và li tâm

3.5.6 Đánh giả cảm quan sản phẩm theo phương pháp cho điểm

Tiến hành lập hội đồng cảm quan gồm 12 thành viên đã qua huấn luyện.Các thành viên đánh giá cảm quan dựa vào bảng mô tả thang điểm cảm quanđược xây dựng trên 5 tiêu chí: màu sắc, mùi, mức độ tạo bọt, hiệu quả rửa chénbát Mỗi thành viên tiến hành pha 1 gói mì tôm, bát đũa dùng pha mì được sửdụng nước rửa chén tạo thành để rửa

3.6 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM

3.6.1 Tạo đậu phụ thu hồi nước phế thải

Tiến hành làm đậu phụ từ 0,5kg đậu nành, theo sơ đồ hình H.2

Nhận xét: Sau 10 phút ép định hình ta thu được miếng đậu phụ, loại bỏ

lượng nước có trong hoa đậu ta thu phế thải gọi là nước chua Từ 0,5 kg đậu phụthu được 2 lít nước chua, có độ pH là 4,2

Qua thực nghiệm quy trình làm đậu phụ từ đậu nành chúng em nhậnthấy, từ 0,5 kg đậu nành thải ra 2 lít nước phế thải Như vậy, trên địa bàn Quận

Hà Đông có khoảng 40 cơ sở sản xuất đậu phụ, trung bình mỗi cơ sở sản xuấtkhoảng 50 kg đậu nành/ngày Số lượng nước phế thải ra môi trường khoảng50x40 x 4= 16 000 lít nước Đây là một lượng nước phế thải rất lớn, nếu chưaqua xử lí thải trực tiếp vào môi trường sẽ gây ô nhiễm môi trường nghiêm trọng

3.6.2 Xác định hàm lượng protein, gluxit, axit tổng, axit lacitc, axit axetic trong nước phế thải

Qua quá trình làm đậu phụ, chúng em nghĩ rằng sản phẩm chủ yếu còn lại

là protein, gluxit, vì sau một thời gian nước chua nổi váng, lên mùi khó chịu,vẩn đục Để tìm lời giải đáp này, chúng em tiến hành định lượng protein trong 1

ml nước phế thải bằng phương pháp Lowry như mục 3.5.1 và định lượng gluxitbằng phương pháp Miller như mục 3.5.3 Kết quả thu được là trong 1ml nướcchua có 0,58 mg/ml protein, gluxit 4,4 mg/ml

Khi tiến hành đo pH dịch nước chua, pH đạt 4,2 Trong quá trình nghiêncứu quy trình làm đậu phụ, chúng em được biết có xuất hiện nhiều vi khuẩnlactic là cơ sở để chúng em xác định axit tổng, axitlac và axit axetic bằngphương pháp HPLC như mục 3.5.3 Kết quả định lượng hàm lượng axit tổng là4.49g/lít, axit lactic là 1320mg/lít, không có axit axetic