Ảnh hưởng của một số yếu tố tới hiệu quả gây rụng trứng nhiều và gây động dục đồng pha để nhân giống bò sữa Holstei Friesian

i ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TRẦN HỮU HÙNG Tªn ®Ò tµi: ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ TỚI HIỆU QUẢ GÂY RỤNG TRỨNG NHIỀU VÀ GÂY ĐỘNG DỤC ĐỒNG PHA ĐỂ NHÂN GIỐNG BÒ SỮA HOLSTEIN FRIESIAN Chuyên ngành: Chăn nuôi Mã số: 60-62-01-05 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS. Hoàng Toàn Thắng Thái Nguyên - Năm 2012 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng những số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn này là trung thực và chƣa đƣợc sử dụng để bảo vệ một học vị nào. Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này đã đƣợc cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã đƣợc ghi rõ nguồn gốc. Thái Nguyên, ngày 30 tháng 9 năm 2012 Tác giả luận văn Trần Hữu Hùng Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ii LỜI CẢM ƠN Nhân dịp hoàn thành bản luận văn này, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới Ban Giám Hiệu, Phòng quản lý đào tạo Sau đại học, Ban chủ nhiệm khoa Chăn nuôi - Thú y Trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên nơi tôi đƣợc đào tạo để trƣởng thành cũng nhƣ tạo điều kiện thuận lợi tốt nhất cho tôi hoàn thành nhiệm vụ của mình. Tôi xin cảm ơn các đơn vị sau đây đã giúp đỡ tôi hoàn thành đề tài này. - Ban lãnh đạo Viện Chăn nuôi, cơ quan chủ trì đề tài,… đã tạo điều kiện cho cơ quan tôi và bản thân tôi tham gia đề tài nhánh. - Phòng thí nghiệm trọng điểm - Viện Chăn nuôi, đơn vị thực hiện đề tài đã giúp đỡ tôi từ những ngày đầu để xây dựng đề cƣơng và cùng tôi thực hiện các nội dung đề tài, đặc biệt là đội ngũ kỹ thuật viên không quản ngại do cách trở về giao thông, nhƣng vẫn mang đủ máy móc và trang thiết bị phục vụ đề tài. - Trung tâm phát triển bò Yên Sơn nơi tôi công tác, đã tạo điều kiện địa bàn thực hiện thí nghiệm. Để hoàn thành bản luận văn này tôi cũng xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS. Hoàng Toàn Thắng là ngƣời thầy hƣớng dẫn về khoa học, đã giúp đỡ tôi tận tình và có trách nhiệm trong quá trình nghiên cứu cũng nhƣ hoàn thiện bản luận văn này. Xin chân thành cảm ơn sự giúp đỡ của các bạn bè, đồng nghiệp: Th.S Tăng xuân Lƣu, Th.S Quản Xuân Hữu, KS Trần Sơn Hà trong quá trình xây dựng và thực hiện bản luận văn này. Nhân dịp này cho phép tôi đƣợc bày tỏ sự biết ơn sâu sắc tới gia đình đã tận tình giúp đỡ, động viên khích lệ để tôi vƣợt qua mọi khó khăn hoàn thành luận văn. Hà Nội, ngày 30 tháng 9 năm 2012 Tác giả luận văn Trần Hữu Hùng Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH ix MỞ ĐẦU 1 1.1. Đặt vấn đề 1 1.2. Mục tiêu của đề tài 3 1.3. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài 3 1.3.1. Ý nghĩa khoa học 3 1.3.2. Ý nghĩa thực tiễn 3 CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 1.1. Cơ sở khoa học của đề tài 4 1.1.1. Đặc điểm cấu tạo và chức năng cơ quan sinh dục cái 4 1.1.1.1. Các bộ phận sinh dục bên ngoài 4 1.1.1.2. Các bộ phận sinh dục bên trong 5 1.1.2. Hoạt động sinh lý, sinh dục của bò cái 8 1.1.2.1. Sự thành thục về tính và tuổi phối giống lần đầu 8 1.1.2.2. Chu kỳ động dục 9 1.1.2.3. Sự thụ tinh 12 1.1.2.4. Quá trình mang thai 13 1.1.2.5. Khoảng cách giữa hai lứa đẻ 13 1.1.2.6. Thời gian hồi phục tử cung sau đẻ 14 1.1.3. Sự điều tiết thần kinh, thể dịch đến hoạt động sinh sản 15 1.1.4. Cơ sở khoa học của công nghệ cấy truyền phôi bò 18 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iv 1.1.4.1. Kích thích noãn bào phát triển đồng loạt bằng sự tác động hormone để gây rụng trứng nhiều 18 1.1.4.2. Thu hoạch phôi và phân loại phôi 26 1.1.4.3. Gây động dục đồng pha 28 1.1.4.4. Cấy phôi cho bò nhận phôi 33 1.2. Các chế phẩm hormone hƣớng sinh dục sử dụng trong công nghệ CTP và tác dụng sinh lý 34 1.2.1. Chế phẩm có hoạt tính GnRH (Gonadotropin Releasing hormone) 34 1.2.2. Các chế phẩm có hoạt tính gonadotropin 35 1.2.2.1. Huyết thanh ngựa chửa (H.T.N.C) 35 1.2.2.2. HCG kích tố nhau thai người (Human Chorionic Gonadotropin) . 35 1.2.3. Các chế phẩm có hoạt tính oestrogen 36 1.2.4. Các chế phẩm có hoạt tính progesterone 36 1.2.5. Các chế phẩm có hoạt tính prosgtaglandineF 2α 37 1.3. Tình hình nghiên cứu trên thế giới và trong nƣớc 37 1.3.1. Tình hình nghiên cứu trên thế giới 37 1.3.1.1. Kết quả nghiên cứu gây rụng trứng nhiều 38 1.3.1.2. Kết quả nghiên cứu phân loại phôi 41 1.3.1.3. Kết quả nghiên cứu gây động dục đồng pha và cấy phôi 42 1.3.2. Nghiên cứu trong nước 44 1.3.2.1. Kết quả nghiên cứu gây rụng trứng nhiều 44 1.3.2.2. Kết quả nghiên cứu phân loại phôi và bảo quản phôi 46 1.3.2.3. Kết quả nghiên cứu gây động dục đồng pha và cấy phôi 47 CHƢƠNG 2. ĐỐI TƢỢNG - NỘI DUNG - PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 51 2.1. Đối tƣợng nghiên cứu 51 2.2. Địa điểm, thời gian nghiên cứu 51 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn v 2.2.1. Địa điểm nghiên cứu 51 2.2.2. Thời gian nghiên cứu 51 2.3. Vật liệu nghiên cứu 52 2.3.1. Dụng cụ và hóa chất dùng trong gây rụng trứng nhiều 52 2.3.1.1. Các loại hormone sử dụng 52 2.3.1.2. Tinh sử dụng cho phối giống tạo phôi 52 2.3.1.3. Dụng cụ và hóa chất dùng trong thu phôi 52 2.3.1.4. Vật liệu soi tìm và phân loại phôi 53 2.3.2. Dụng cụ và hóa chất dùng trong gây động dục đồng pha 53 2.3.2.1. Các loại hormone sử dụng cho gây động dục đồng pha 53 2.3.2.2. Dụng cụ cấy truyền phôi 53 2.4. Nội dung nghiên cứu 54 2.5. Phƣơng pháp nghiên cứu 54 2.5.1. Phương pháp nghiên cứu thí nghiệm 1 54 2.5.1.1. Chọn bò cho phôi, chọn tinh dịch để phối 54 2.5.1.2. Phương pháp sử dụng hormone 55 2.5.1.3. Phương pháp thu hoạch phôi, soi tìm và phân loại phôi 56 2.5.2. Phương pháp nghiên cứu thí nghiệm 2 58 2.5.2.1. Chọn bò nhận phôi, loại phôi để cấy 59 2.5.2.2. Phương pháp sử dụng hormone 59 2.5.2.3. Phương pháp cấy phôi cho bò nhận 60 2.6. Các chỉ tiêu theo dõi và Phƣơng pháp theo dõi các chỉ tiêu 61 2.6.1. Các chỉ tiêu theo dõi khi gây rụng trứng nhiều 61 2.6.2. các chỉ tiêu theo dõi khi gây động dục đồng pha cho bò làm con nhận phôi 62 2.7. Phƣơng pháp xử lý số liệu 62 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vi CHƢƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 63 3.1. Kết quả gây rụng trứng nhiều cho bò sữa cao sản (thí nghiệm 1) 63 3.1.1. Thời gian xuất hiện động dục và tỷ lệ bò có biểu hiện động dục 64 3.1.2. Số lượng nang trứng được huy động ở bò gây rụng trứng nhiều 66 3.1.3. Số lượng nang trứng rụng ở bò gây rụng trứng nhiều 69 3.1.4. Kết quả thu phôi và tỷ lệ thu hồi phôi 71 3.1.5. Phân loại phôi 73 3.2. Kết quả gây động dục đồng pha cho bò nhận phôi (thí nghiệm 2) 75 3.2.1. Tỷ lệ và thời gian bò xuất hiện động dục 76 3.2.2. Kết quả rụng trứng của bò được gây động dục đồng pha bằng các phương pháp khác nhau 79 3.2.3. Kết quả cấy truyền phôi cho bò nhận phôi 82 KẾT LUẬN, ĐỀ NGHỊ 85 1. Kết luận 85 1.1. Kết quả gây rụng trứng nhiều 85 1.2. Kết quả gây động dục đồng pha 86 2. Đề nghị 87 TÀI LIỆU THAM KHẢO 88 I. Tài liệu trong nƣớc 88 II. Tài liệu nƣớc ngoài 92 PHỤ LỤC: MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA CHO ĐỀ TÀI Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT STT Tên viết tắt Tên đầy đủ 1 CAP : Chlormadion Acetate Progesteron 2 CIDR : Controlled Intravaginnal Drug Releasing 3 Cs : Cộng sự 4 CTP : Cấy truyền phôi 5 Ctv : Cộng tác viên 6 ĐD : Động dục 7 ĐVT : Đơn vị tính 8 E : Estradiol-17 β 9 ECG : Equin Chorionic Gonadotropin 10 FRH : Folliculin Realising Hormone 11 FSH : Follicle Stimulating Hormone 12 GĐDĐP : Gây động dục đồng pha 13 GnRH : Gonadotrophin Releasing Hormone 14 GRTN : Gây rụng trứng nhiều 15 HCG : Human Chorionic Gonadotropin 16 HF : Holstein Friesian 17 HTNC : Huyết thanh ngựa chửa 18 LH : Luteinizing Hormone 19 LRH : Lutein Realeasing Hormone 20 PGF 2α : Prostaglandine - F2 anpha 21 PMSG : Pregnant Mare Serum Gonadotropin 22 PP1 : Phƣơng pháp 1 23 PP2 : Phƣơng pháp 2 24 PRH : Prolactin Realeasing Hormone 25 PRID : Progesterone Releasing Intravaginal Device 26 RTN : Rụng trứng nhiều 27 STT : Số thứ tự 28 TSH : Thyromin Stimulin Hormone 29 TTNT : Thụ tinh nhân tạo Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn viii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1: Sơ đồ nghiên cứu gây rụng trứng nhiều ở bò cho phôi 54 Bảng 2.2: Sơ đồ nghiên cứu gây động dục đồng pha ở bò nhận phôi 58 Bảng 3.1: Thời gian xuất hiện động dục của bò gây rụng trứng nhiều ở 2 phƣơng pháp 64 Bảng 3.2: Thời gian xuất hiện động dục của bò gây rụng trứng nhiều ở 2 phƣơng pháp với yếu tố mùa vụ 66 Bảng 3.3: Kết quả của 2 phƣơng pháp sử dụng hormone tới số lƣợng nang trứng đƣợc huy động ở bò gây rụng trứng nhiều 67 Bảng 3.4: Số nang trứng đƣợc huy động phát triển ở bò sữa đƣợc gây rụng trứng nhiều theo mùa vụ 68 Bảng 3.5: Số lƣợng nang trứng rụng và tỷ lệ rụng trứng ở bò gây rụng trứng nhiều 69 Bảng 3.6: Kết quả gây rụng trứng nhiều theo mùa vụ 70 Bảng 3.7: Số phôi thu đƣợc và tỷ lệ thu hồi phôi ở bò đƣợc gây rụng trứng nhiều 71 Bảng 3.8: Số phôi thu đƣợc và tỷ lệ thu hồi phôi ở bò đƣợc gây rụng trứng nhiều theo mùa vụ 72 Bảng 3.9: Chất lƣợng phôi thu đƣợc ở bò gây rụng trứng nhiều 73 Bảng 3.10: Chất lƣợng phôi thu đƣợc ở bò gây rụng trứng nhiều theo yếu tố mùa vụ 75 Bảng 3.11: Tỷ lệ bò có biểu hiện động dục khi gây động dục đồng pha 76 Bảng 3.12: Ảnh hƣởng của mùa vụ đến tỷ lệ bò có biểu hiện động dục khi gây động dục đồng pha 79 Bảng 3.13: Số con rụng trứng và tỷ lệ rụng trứng 80 Bảng 3.14: Số con rụng trứng và tỷ lệ rụng trứng theo mùa vụ 81 Bảng 3.15: Kết quả cấy truyền phôi cho bò nhận phôi 82 Bảng 3.16: Kết quả cấy truyền phôi cho bò nhận phôi theo mùa vụ 83 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ix DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1: Cơ quan sinh dục bò cái 4 Hình 1.2. Đồ thị sóng nang trong chu kỳ 10 Hình 1.3: Sơ đồ điều hoà thần kinh - nội tiết hoạt động sinh sản ở bò cái 17 Hình 2.1: Sơ đồ tóm tắt gây rụng trứng nhiều bằng FSH trên nền CIDR, PP1 55 Hình 2.2: Sơ đồ tóm tắt gây rụng trứng nhiều bằng PMSG trên nền CIDR, PP2 56 Hình 2.3: Sơ đồ tóm tắt GĐDĐP, PP1 59 Hình 2.4: Sơ đồ tóm tắt GĐDĐP, PP2 60 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn [...]... mất nhiều thời gian phát hiện động dục và tạo động dục đồng pha đối với bò cho phôi trong kỹ thuật cấy truyền phôi bò (Trích theo Tăng Xuân Lƣu, 1999) [16] Gây rụng trứng nhiều ở bò bằng Synchromate B và Estradiol, PMSG và PGF2 Kết quả bò đã động dục sau tiêm 96 h và có 17,6% số bò không động dục Số bò có thể vàng từ 2-4; 5-10; 11-15 và trên 15 tƣơng ứng là 3; 6; 2 và 4 con Sau khi gây rụng trứng nhiều. .. rụng trứng nhiều và quy trình gây động dục đồng pha để áp dụng có hiệu quả, trong nhân giống đàn bò sữa HF - Đánh giá đƣợc hiệu quả của việc áp dụng kỹ thuật nghiên cứu gây rụng trứng nhiều và gây động dục đồng pha trên bò sữa HF ở Tuyên Quang - Trong thời gian ngắn tạo ra đƣợc một lƣợng lớn phôi có chất lƣợng tốt - Kết quả nghiên cứu của đề tài là cơ sở cho việc đánh giá đúng kết quả của phƣơng pháp... đồng pha để nhân giống bò sữa Holstein Friesian" Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 3 1.2 Mục tiêu của đề tài - Xác định đƣợc ảnh hƣởng của các yếu tố: Loại hormone sử dụng, mùa vụ tới số lƣợng và chất lƣợng phôi thu đƣợc từ bò gây rụng trứng nhiều - Đánh giá đƣợc kết quả gây động dục đồng pha trên đàn bò nhận phôi - Đánh giá đƣợc kết quả thụ thai trên đàn bò. .. Bergfelt và cs (1994), đã thông báo nhƣ sau: bò tơ Simental từ 17 đến 22 tháng sau khi gây rụng trứng nhiều đã động dục 100%, số trứng rụng và phôi tƣơng ứng là 16,41,89 và 10,11,79, trong đó số phôi cấy đƣợc bình quân cho mỗi bò là 5,31,09 (Trích Tăng Xuân Lƣu, 1999) [16] Trạng thái buồng trứng của bò cho vào thời điểm gây rụng trứng nhiều là yếu tố ảnh hƣởng quan trọng đến kết quả gây rụng trứng nhiều. .. đàn bò sữa HF có nguồn gốc nhập ngoại, có năng suất sữa cao, đƣợc xác định là địa bàn triển khai nghiên cứu của đề tài trên do Viện Chăn nuôi chủ trì phối hợp với Viện Công nghệ sinh học Xuất phát từ các điều kiện trên và yêu cầu của công tác nhân giống bò sữa đặt ra tại Tuyên Quang, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài "Ảnh hưởng của một số yếu tố tới hiệu quả gây rụng trứng nhiều và gây động dục đồng. .. với bò có chu kỳ dài 15-27 ngày (Crister và cs, 1988) [48] Tuổi bò lúc xử lý gây rụng trứng nhiều cũng ảnh hƣởng quan trọng đến kết quả tạo phôi Phản ứng rụng trứng nhiều ở bò tơ chƣa đẻ và bò đẻ 1-5 lần thƣờng cao hơn so với bò đã đẻ trên 6 lần (Grevet, 1982) [67] Chất lƣợng phôi thu đƣợc sau gây rụng trứng nhiều ở bò sữa 12 tháng tuổi kém hơn bò sữa đã đẻ 1-2 lứa; trong trƣờng hợp bò tơ, số trứng rụng. .. bò Kết quả thí nghiệm của Foote và Onuma (1976) [60], cho thấy tuỳ thuộc theo trạng thái cá thể phản ứng rụng trứng ở bò có thể dao động từ 0-14 trứng rụng/ con Trong trƣờng hợp gây rụng trứng nhiều bằng cùng một quy trình, bò có trạng thái sinh sản bình thƣờng cho 10 trứng rụng trong đó có 6,4 trứng tốt, trong khi bò vô sinh chỉ cho 6 trứng rụng và 2,4 trứng dùng đƣợc Phản ứng rụng trứng ở bò có chu... ở bò Holstein Theo thông báo của Hasler và cs (1990) [69] phản ứng rụng trứng nhiều của bò Holstein nuôi trong điều kiện ôn đới là 11 thể vàng nếu đƣợc xử lý vào mùa đông - xuân, và 9,5 thể vàng nếu đƣợc xử lý vào mùa hè-thu Tƣơng tự, kết quả rụng trứng nhiều và thụ tinh ở bò Holstein nuôi tại điều kiện nhiệt đới Châu phi là 12 thể vàng, 73% phôi tốt, 95% trứng thụ tinh đối với bò đƣợc xử lý ECG vào... có ảnh hƣởng quan trọng lên kết quả gây rụng trứng nhiều Bổ sung 20mg estradiol-17 vào ngày thứ 1-2 sau khi xử lý ECG, làm tăng số nang phát triển và tăng số trứng thụ tinh Kết quả sử dụng estradiol-17 bổ sung vào FSH hoặc ECG để gây rụng trứng nhiều ở bò Simental đƣợc Broadbent và cs (1995) thông báo gần đây là 15 thể vàng với số bò đƣợc xử lý FSH, và 16 thể vàng với bò đƣợc xử lý ECG (Trích theo... sinh sản, nhiều các nhà khoa học đã tạo cho trứng rụng đồng loạt trong một chu kỳ và tạo đƣợc nhiều phôi có chất lƣợng vào thời điểm đƣợc xác định bằng kỹ thuật gây rụng trứng nhiều Kỹ thuật gây rụng trứng nhiều đƣợc tiến hành nghiên cứu khá sớm vào những năm đầu thế kỷ 20 gây rụng trứng nhiều (GRTN) lần đầu tiên đƣợc nghiên cứu trên chuột (Engle, 1927) [57]; trên bò và cừu (Cole và Miller Số hóa bởi . hành nghiên cứu đề tài " ;Ảnh hưởng của một số yếu tố tới hiệu quả gây rụng trứng nhiều và gây động dục đồng pha để nhân giống bò sữa Holstein Friesian& quot;. Số hóa bởi Trung tâm Học liệu. Tªn ®Ò tµi: ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ TỚI HIỆU QUẢ GÂY RỤNG TRỨNG NHIỀU VÀ GÂY ĐỘNG DỤC ĐỒNG PHA ĐỂ NHÂN GIỐNG BÒ SỮA HOLSTEIN FRIESIAN Chuyên ngành: Chăn nuôi Mã số: 60-62-01-05. Tỷ lệ bò có biểu hiện động dục khi gây động dục đồng pha 76 Bảng 3.12: Ảnh hƣởng của mùa vụ đến tỷ lệ bò có biểu hiện động dục khi gây động dục đồng pha 79 Bảng 3.13: Số con rụng trứng và tỷ