THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC

THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐCTHAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC

Lời cảm ơn! Trong quá trình học tập và tìm hiểu thực tế , em vô cùng biết ơn sự giảng dạy và hướng dẫn nhiệt tình của các thầy cô đã giúp chúng em gắn kết và hình dung được phần nào giữa lý thuyết và thực tế Xin gửi tới các thầy giáo, cô giáo trong khoa Công nghệ sinh học – Viện Đại học Mở Hà Nội, lời chúc sức khỏe và công tác tốt! Sinh viên : 1 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC I MỞ ĐẦU Ngày nay Công nghệ sinh học đang được coi là một trong 5 ngành công nghệ tiên phong của nhân loại tiến vào thế kỷ 21 Trong đó , công nghệ vi sinh vật học sản xuất các kháng sinh, vacxin, vitamin và các hoạt chất ứng dụng trong y học, thực phẩm , nông nghiệp…đang có những bước tiến vượt bậc Ở các nước phát triển trên thế giới thì việc ứng dụng các tiến bộ di truyền học trong phân lập, sàng lọc, cải tạo giống cho phép tạo ra các chủng vi sinh vật có khả năng sinh tổng hợp các hoạt chất sinh học với hiệu suất ngày càng cao -2- THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC Trình độ tự động hóa, tin học hóa cao cho phép xây dựng được các hệ thống sản xuất ổn định với hiệu suất tối ưu Cùng với các giải pháp công nghệ mới giúp tiết kiệm mặt bằng và nhân công, bảo vệ môi trường sinh thái Ở Việt Nam, tuy chưa thể đưa công nghệ vi sinh vật ứng dụng trong lên men sản xuất kháng sinh do một phần khiêm tốn về vốn đầu tư bởi đây cũng là ngành có nhiều thách thức và mang tính cạnh tranh khốc liệt trên quy mô toàn cầu, nhưng cũng có nhiều công ty ( bao gồm cả Nhà nước và Tư nhân) sản xuất, hoàn thiện rất nhiều lọai thuốc, các dược phẩm, lên men sản xuất vacxin…v.v có uy tín nhiều năm nay Nhà máy Dược phẩm số 2 thuộc công ty CP Mediplantex , Xí nghiệp thuốc Thú y TW là hai trong số những thương hiệu nhiều năm đã được cả trong nước và nhiều nơi trên thế giới công nhận -3- THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC II PHẦN 2 Đại cương về kháng sinh , vacxin & công nghệ lên men sản xuất kháng sinh ,công nghệ sản xuất vacxin Đại cương về kháng sinh và công nghệ lên men sản xuất kháng sinh Định nghĩa kháng sinh: Dựa theo định nghĩa kinh điển của Walksmann (1942), thì ngày nay, các nhà khoa học đã cho ra khái niệm về kháng sinh có thể nói là khá chặt chẽ : “ kháng sinh là những sản phẩm trao đổi chất thứ cấp của vi sinh vật, hoặc có nguồn gốc thực vật, hoặc tổng hợp theo con đường hóa học ,có tác dụng ức chế hoặc tiêu diệt chọn lọc đối với các vi sinh vật khác Đơn vị kháng sinh: Để biểu thị độ lớn giá trị hoạt tính của kháng sinh trong 1 ml dung dịch (đv/ml) hay 1mg chế phẩm (đv/mg) thường dùng đơn vị kháng sinh Đó chính là một lượng kháng sinh tối thiểu hòa tan trong một thể tích môi trường xác định có tác dụng ức chế hay tiêu diệt vi sinh vật kiểm định Đơn vị quốc tế là IU VD: -4- THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC 1IU penicillin G = 0.6µg (1mg =1667IU), 1IU Streptomycin = 1µg ( 1mg = 1000IU), 1mg neomycin chứa 300 IU (1 IU = 3,3µg)… Phân loại kháng sinh: Danh sách các kháng sinh được phát hiện ngày càng nhiều, việc phân loại kháng sinh là cần thiết vì nó giúp các nhà nghiên cứu tốn ít thời gian khi nghiên cứu các kháng sinh mới về cấu trúc hóa học , cơ chế tác động, độc tính Có thể phân loại kháng sinh theo các cách: - Phân loại theo nguồn gốc kháng sinh: do xạ khuẩn, vi khuẩn, vi nấm (nấm mốc, nấm men) tạo ra - Phân loại theo cơ chế tác dụng : kháng sinh tác dụng lên thành tế bào , kháng sinh tác động lên quá trình tổng hợp protein, tổng hợp DNA, mRNA… - Phân loại theo cấu trúc hóa học: đây là cách phân loại khoa học nhất Theo đó , các chất kháng sinh được chia làm nhiều nhóm +) Các chất kháng sinh chứa hydratcacbon ( đường tinh khiết, aminoglycosid, N-glycosid, glycopeptid ): streptomycin, eveaninomicin, vancomycin,moenomicin… -5- THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC +) Các lactomacrocylic ( chất kháng sinh macrolid polien , macrotetrolit, azamycin) : rifamycin, tetranactinerythromycin, nystatin +) Các kháng sinh quinon và dẫn xuất: tetracylin, adriamycin, actinorodin… +) Các kháng sinh peptid và các acid amin : cycloloserin, penicillin, bacitracin, actinomycin, bleomycin +) Các kháng sinh dị vòng chứa nitơ: các kháng sinh nucleoside (polysome)… +) Các kháng sinh mạch vòng no : các chất ankan, kháng ainh steroid : cycloheximic, axit fuzidic +) Các kháng sinh chứa nhân thơm : chloramphenicol, gliseofulvin, novobiocin… +) Các kháng sinh mạch thẳng: phosphomycin Cơ chế tác dụng của kháng sinh: Các kháng sinh tác dụng cơ bản qua việc ức chế các phản ứng tổng hợp rất khác nhau của tế bào vi sinh vật gây bệnh Chúng liên kết vào các vị trí chính xác hoặc các phân tử đích của tế bào vi sinh vật mà tạo ra các phản ứng trao đổi chất Các đích tác dụng đặc trưng cho từng nhóm kháng sinh , tuy nhiên trong nhiều trường hợp người ta vẫn chưa biết hết chính xác Có 6 mức tác dụng khác nhau đối với tế bào vi khuẩn hoặc nấm: -6- THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC thành tế bào, màng tế bào, tổng gen( sao chép và phiên mã) tổng hợp protein, dịch mã mRNA , chao đổi chất hô hấp và trao đổi chất trung gian Một số ví dụ về cơ chế tác dụng của kháng sinh Mức tác dụng Tổng hợp thành tế bào: Ví dụ β-lactam (penicillin) Transpeptid hóa Vancomycin, Tổng hợp murein Màng nguyên sinh cycloserin,bacitracin Polymixin, amphotericin, Thay đổi cấu trúc polyen, Thay đổi chức năng DNA sideromycin valinomycin Actinomycin ,antracyclin, Phân chia rifamicin Dịch mã Tổng hợp protein Aminogucosid Ribosome macrolid( Liên kết t-RNA chlorocid, Kéo dài Trao đổi chất hô hấp Trao đổi chất folat fuzidic Antimycin , oligomycin Sulfamid … phosphomycin, gramicidin, , erythromycin) tetracycline, acid Tính kháng kháng sinh: Khái niệm “ tính kháng thuốc” lần đầu tiên được đề cập ở Nhật bản (1959-1960) Nguyên nhân chính của hiện tượng kháng -7- THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC thuốc ở các vi sinh vật vốn nhạy cảm là do chúng ta sử dụng thuốc bừa bãi Định nghĩa tính kháng thuốc : kháng thuốc là hiện tượng vi sinh vật mất đi tính nhạy ban đầu của nó trong một thời gian hay vĩnh viễn dưới tác dụng của kháng sinh hay hóa trị liệu Có hai kiểu kháng thuốc : Kháng thuốc tự nhiên: là một đặc trưng của một nòi vi sinh vật nhất định dối với một số kháng sinh nhất định nào đó, tính chất này có từ trước khi sử dụng kháng sinh.Điều này liên quan đến phổ tác dụng của kháng sinh Ví dụ: proteus kháng các tetracyclin, trực khuẩn G- kháng các penicillin G, streptococcus nhóm D kháng lincomycin Về mặt sinh hóa thì đó là do : tính thấm của tế bào và sự thiếu vắng phân tử đích Kháng thuốc mới nhận: Xuất hiện trong chọn lọc tự nhiên các chủng đề kháng của quần thể vi sinh vật nhạy cảm khi sử dụng kháng sinh Một vi sinh vật trở thành kháng thuốc khi phát triển được với hàm lương cao đáng kể của kháng sinh ấy so với quần thể vi sinh vật mà nó có nguồn gốc Về mặt cơ chế di truyền học có 2 nguyên nhân chính: - Do đột biến NST, kiểu này chiếm 10% vi sinh vật kháng thuốc Ví dụ : β-lactam, aminosid, cloramphenicol, rifamycin… - Do nhân tố di truyền Plasmid: kiểu kháng thuốc này rất phổ biến ( chiếm 90% vi sinh vật kháng thuốc) Plasmid có thể được -8- THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC lan truyền từ tế bào này sang tế bào khác qua các cơ chế : biến nạp, tải nạp, tiếp hợp… Về cơ chế sinh hóa của kháng thuốc mới nhận có 4 cơ chế chính: + Thay đổi tính thấm thành tế bào + Vô hiệu hóa các kháng sinh bằng enzyme, acetyl hóa, phosphoryl hóa khiến cho các aminosid bị biến đổi , làm chúng không qua được thành tế bào + Thay đổi phân tử đích ( đích tác dụng của kháng sinh) + Xây dựng con đường trao đổi chất mới mà kháng sinh không tác dụng Lên men sinh tổng hợp kháng sinh: 2.1.6.1 Khái quát hóa quá trình lên men tổng hợp kháng sinh: Các sản phẩm trao đổi chất bậc một gắn liền với quá trình sinh trưởng, xảy ra trong thời gian sinh trưởng và còn kéo dài sau khi sinh trưởng đã kết thúc Các sản phẩm trao đổi chất bậc hai (sản phẩm trao đổi chất thứ cấp) là các sản phẩm mà sự có nó không cần thiết cho sinh trưởng, chỉ xảy ra sau khi sinh trưởng kết thúc, tức là trong giai đọan cân bằng Do đó gọi là lên men hai pha : pha sinh trưởng - pha sản xuất ( trophosphase -idophase).Tại thời kỳ thứ hai, các sản phẩm trao đổi chất được tích tụ chủ yếu ở pha này Thời kỳ đầu pha hai ( pha log) vi sinh -9- THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC vật có khả năng sinh tổng hợp cao, cuối pha này, sinh khối giảm.do tế bào tích tụ sản phẩm chậm Hơn nữa một số sản phẩm có thể trở thành nguồn dinh dưỡng của vi sinh vật Do đó ta nên kết thúc lên men ở trước thời điểm cuối pha hai để tránh hiện tượng đồng hóa trở lại các sản phẩm làm giảm hiệu suất lên men và để tránh hiện tượng tế bào tự phân gây nhớt Đường cong sinh trưởng của vi sinh vật - 10 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC với tế bào bình thường rất thấp so với tế bào bị nhiễm virus - Chỉ định: Điều trị nhiễm herpes simplex ở da và niêm mạc , khởi phát hoặc tái phát Dự phòng ở bệnh nhân suy giảm miễn dịch • Tên thuốc: Lincomycin 500 mg , dạng tiêm hoặc viên nang - Thành phần: Lincomycin Đây là kháng sinh thuộc nhóm Lincosamid - Cơ chế tác dụng: chúng gắn vào tiểu phần 50S của ribosome gây ức chế quá tring sinh tổng hợp protein - Chỉ định: thuốc có tác dụng kìm khuẩn là chủ yếu Chống lại một số bệnh do vi khuẩn: staphylococcus, streptococcus, pneumococcus, ở người bệnh có dị ứng với penicillin như áp xe gan., nhiễm khuẩn xương, nhiễm khuẩn tan huyết, nhiễm khuẩn kháng penicillin… - 38 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC - Được chuyển hóa ở gan và thả trừ qua phân, thời gian bán thải: 5h • Tên thuốc: Mediclion - Thành phần: Metronidazole 250mg Là dẫn xuất của : 5-nitro-imidazol, có tác dụng lên động vật nguyên sinh( amip, giardia), vi khuẩn kỵ khí - Cơ chế tác dụng: Khi vào trong tế , dẫn xuất 5-nitơ sẽ gây độc cho tế bào, chúng gắn vào các phân tử DNA và làm phá vỡ nó, gây chết tế bào - Chỉ định: điều trị nhiễm khuẩn trichomonas ở bộ phận tiết niệu, nhiễm giardia lambia, lỵ amip, áp xe gan do lỵ amip… - 39 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC IV PHẦN 4 Khảo sát công nghệ sản xuất vacxin tại Xí nghiệp thuốc Thú y TW Giới thiệu : Xí nghiệp được thành lập năm 1956 và đi vào hoạt động năm 1962, đến nay đã cung ứng được nhiều loại vacxin phòng bệnh, dược phẩm và các chế phẩm có hoạt tính sinh học cho ngành chăn nuôi, thú y Xí nghiệp có riêng một phân xưởng ( khu nhà A) sản xuất vacxin, bao gồm cả vacxin có nguồn gốc từ vi khuẩn và virus, là một trong 3 cơ sở sản xuất vacxin trong cả nước Thành tựu của Xí nghiệp: o Từ năm 1962 – 1990: tạo ra được vacxin chống tụ dấu lợn - 40 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC - Vacxin tụ huyết trùng nhược độc ở lợn: A vP53 chủng được phát hiện và phân lập tại Việt Nam - Vacxin đóng dấu lợn : VR 2 chủng được phân lập ở Rumani (1913) - Tạo được các giống ổn định, và sản xuất thành công môi trường nuôi cấy vi trùng o Từ năm 1990 – 2000 : - Tạo được các vacxin liều nhỏ nhờ hệ thống công nghệ mới Từ chỗ 20 – 30 ml/liều giờ còn 2ml/liều - Tạo được thêm một số sản phẩm mới o Từ năm 2000 đến nay: Cho ra đời một số sản phẩm mới Một số khâu công nghệ trong việc sản xuất vacxin: Phân xưởng sản xuất vacxin virus đông khô: • Sản xuất vacxin virus đông khô trên môi trường thai trứng, phôi tế bào • Chia liều: vacxin thu được, chia liều , sau đó được đưa vào hệ thống đông khô Làm việc trong điều kiện vô trùng • Hai máy đông khô làm việc trong khoảng 2h – 13h cho ra 10 nghìn lọ vacxin, mỗi lọ khoảng 100 liều, hệ thống được điều khiển bằng máy tính - 41 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC • Hoàn thiện sản phẩm • Kiểm nghiệm chất lượng sản phẩm vacxin virus đông khô Kiểm nghiệm trên mô bào sống, phôi thai(trứng), động vật ,sau đó, đặt trong tủ ấm (37 0C) để tạo điều kiện cho tổ chức sống phát triển Phân xưởng sản xuất vacxin vi trùng : • Tổ môi trường: nhiệm vụ là sản xuất các loại môi trường nuôi cấy cho vi trùng Nguyên liệu ở đây là từ thịt bò (thịt bắp)  lọc bỏ gân, mỡ, mạch máu xay nhỏ đun chin (bằng hơi nước) Sau đó cho sản phẩm thịt đã được đun chín một lượng men tiêu hóa (tripsin tách từ tế bào lục giác của mô tụy tạng), đun trong 6h môi trường lên men ( nước + acid amin) • Một số loại môi trường nuôi cấy: - Môi trường thịt yếm khí: để nuôi cấy vi trùng yếm khí, vi trùng hô hấp tùy tiện (trong thành phần có bổ sung những phân tử glycogen) - 42 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC - Môi trường thạch nghiêng (thạch nấm): có thêm glucoza và bổ sung glycerin - 43 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC - Môi trường thạch thường: chỉ gồm nước thịch thường và agar - Môi tường có bổ sung formalin, muối chống nấm, để kiểm định vi trùng đã chết hoàn toàn hay chưa Nếu trên môi trường này vẫn phát triển được thì các môi trường khác phải nghi ngờ - Môi trường thạch máu: ngoài thạch có bổ sung hồng cầu của cừu Ngoài việc nuôi cấy vi khuẩn còn có thể xác định vi khuẩn thuần khiết và vi khuẩn dung huyết.( Giúp trong quá trình kiểm định độ vô khuẩn cuả vacxin, nếu có mặt của vi khuẩn gây dung huyết, khi tiêm cho gia súc sẽ gây tử vong tất nhanh) - 44 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC - Ngoài ra, huyết thanh cũng là một nguyên liệu trong nuôi cấy một số vi trùng • Hệ thống lên men vi trùng : nồi lên men Pecnito Sau khi đã sản xuất thành công môi trường, sẽ tiến hành quá trình lên men Hệ thống lên men vi trùng ở đây gồm 2 nồi lên men: một nồi to có dung tích là 180l, một nồi nhỏ có dung tích là 10l, được tự động hóa điều khiển mọi thông số trong môi trường nuôi cấy nhờ hệ thống máy tính điện tử Công nghệ lên men ở đây là lên men có sục khí.Năng suất của hệ thống : từ 6h-8h cho ra một mẻ (1 triệu liều vacxin) Ở đây luôn luôn duy trì một độ ẩm ( máy nén không khí  khô không khí đến độ ẩm W = 4%), và áp suất nhất định cho máy làm việc • Tổ tiêu độc dụng cụ thiết bị thí nghiệm: - 45 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC Tất cả dụng cụ, thiết bị sau khi làm xong, sẽ được cho vào lò hấp và hấp bằng hơi nước nóng Hệ thồng lò hấp hai vỏ, muốn tăng nhiệt độ hấp, chỉ cần tăng áp lực hơi nước đi vào Nhiệt độ quá cao, sẽ có hệ thống hút nhiệt Tìm hiểu về quy trình kiểm nghiệm vacxin phó thương hàn lợn nhược độc Đối tượng áp dụng: Quy trình này áp dụng cho việc kiểm nghiệm vacxin nhược độc chế từ chủng vi khuẩn Salmonella choleraesuis đông khô Quy định về kỹ thuật: • Lấy mẫu: Mẫu được lấy theo TCVN 160-2008 “ Quy trình lấy mẫu thuốc thú y và vacxin thú y để kiểm tra chất lượng” • Kiểm tra thuần khiết: Theo tiêu chuẩn 161-2008 “ Vacxin thú y- quy trình kiểm tra thuần khiết” bao gồm: o Kiểm tra sự tạp nhiễm vi khuẩn o Kiểm tra sự tạp nhiễm nấm mốc o Kiểm tra sự tạp nhiễm Mycoplasma - 46 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC o Vacxin được kiểm tra trên các môi trường đặc biệt như: o Môi trường MacConkey agar (màu đỏ) : đây là môi trường thích hợp cho sự phát triển của vi khuẩn Gr (-) và cho nó lên men lactose Thành phần : - Pepton - Lactose - Mật muối( hỗn hợp acid steroid với ion natri) - Nacl - Toluylene đỏ (thuốc nhuộm) - Agar - Nước o Môi trường KIA: màu đỏ Thành phần : peptone, lactose/glucose = 10/1,dẫn xuất cuả lưu huỳnh, chất chỉ thị đỏ phenol, sắt (2) amoni citrate o Ngoài ra vacxin còn được kiểm tra sự ngưng kết với acriflavin ( hoạt chất kháng khuẩn) 1/500 ( phản ứng lên bông) • Kiểm tra an toàn: dùng một trong những phương pháp sau đây: - 47 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC o Tiêm vào dưới da cho 3 con lợn cai sữa khỏe mạnh ( không có kháng thể chống Salmonella choleraesuis) ,(20-30kg /con), mỗi con 10 liều vacxin quy định Tất cả lợn phải sống khỏe mạnh và phát triển bình thường sau 7 – 10 ngày theo dõi o Tiêm vào dưới da cho ít nhất 5 con chuột lang ( mỗi con 300- 350g), mỗi con 2 liều vacxin quy định Tất cả các chuột phải sống khỏe mạnh và phát trển bình thường sau 7 – 10 ngày theo dõi • Kiểm tra hiệu lực: vacxin được kiểm tra hiệu lực bằng một trong hai cách sau: • Phương pháp đếm số vi khuẩn: Đếm số khuẩn lạc trên đĩa thạch ( Brain heart agar: BHA) Vacxin tiêu chuẩn khi có số khuẩn lạc không thấp hơn 2.5×109/1 liều vacxin • Phương pháp tiêm chuột: Cho 5 chuột lang, trọng lượng 300 – 350 kg/con, mỗi con tiêm 1/5 liều vacxin ghi trên nhãn ( 0.5× 109 CFU), 5 chuột sau khi tiêm trở thành 5 chuột chú chuột miễn dịch 21 ngày sau khi tiêm 5 chuột miễn dịch, ta tiêm một lượng chủng thương hàn lợn cường - 48 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC độc với liều MLD cho cả hai : 5 chuột miễn dịch và 2 chuột đối chứng Trong 3 tuần theo dõi, chuột đối chứng phải chết hết trong khi chuột miễn dịch phải sống ít nhất 3 con Ghi chú : MLD : liều nhỏ nhất gây chết hết động vật thí nghiệm.( Minimum Lethal Dose) CFU : đơn vị khuẩn lạc ( Colony Forming Unit) Một số vacxin đã thương mại hóa: Vacxin cúm gia cầm: • Vacxin Lasota: đây là loại vacxin nhược độc đông khô chủng Lasota dùng để phòng “bệnh toi gà” cho gà con dưới 2 tháng tuổi Thành phần: virus Newcastle nhược độ đông khô chủng Lasota, được sản suất trên phôi thai trứng gà Mỗi liều vacxin chứ tối thiểu là 106EID50 virus Newcastle, chất bổ trợ Cách dùng: hòa tan với nước muối sinh lý, dùng cho gà dưới hai tháng tuổi, cho uống hoặc nhỏ mắt - 49 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC • Vacxin Gumboro: Vacxin nhược độc đông khô chủng 2512, sản xuất trên môi trường tế bào xoư phôi gà một lớp Thành phần : một liều vacxin chứa 103TCID50 VR, chất bổ trợ Liều lượng và cách dùng: hòa tan với nước sinh lý, cho gà uống hoặc nhỏ mắt Nếu gà mẹ chưa tiêm phòng vacxin Gumboro, thì phòng cho gà con vào lúc 5-7 ngày tuổi Sau 2 tuần nhắc lại 2 lần Nếu gà mẹ đã tiêm, thì sử dụng vacxin cho gà con đạt lúc 2 tuần tuổi - 50 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC Vacxin phòng bệnh cho lợn: • Vacxin phó thương hàn lợn Thành phần : vi khuẩn Salmonella cholera suis, chất bổ trợ Một liều vacxin chứa 2-2,5 tỉ CFU Tiêm vào bắp thịt hoặc dưới da, tiêm cho các loại lơn ở mọi lứa tuổi 1ml/1con • Vacxin tụ huyết trùng lợn: vacxin vô hoạt, dạng nước để phòng bênh tụ huyết trùng cho lợn - 51 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC Thành phần: giống vi khuẩn tụ huyết trùng lợn Pasteurella suis eptia, túyp B, formaldehyde, keo phèn Cách dùng : tiêm dưới da cho lơn ở mọi lứa tuổi, mỗi con 1ml Sauk hi tiêm 3 tuần, con vật sẽ có miễn dịch và miễn dịch kéo dài 6 tháng Nơi mới có dịch tụ huyết trùng xảy ra nên tiêm phòng hai lần, cách nhau 3-4 tuần, tiêm cho toàm đàn Không tiêm cho lợn ốm, sắp đẻ hay mới đẻ non Vacxin nhiệt thán cho trâu, bò: vacxin vô độc nha bào dạng lỏng, phòng bệnh nhiệt thán cho trâu bò Thầnh phần : nha bào của vi khuẩn nhiệt thán vô độc, không giác mô, mỗi liều vacxin cho khoảng 25 triệu nha bào, chất bổ trợ là glyxerin Cách dùng: tiêm dưới da cho trâu, bò - 52 ... 42 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC - Mơi trường thạch nghiêng (thạch nấm): có thêm glucoza bổ sung glycerin - 43 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI... đồ quy trình sản xuất thuốc: Nguyên liệu đạt tiêu chuẩn - 26 Kho THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC Xay rây Cân chia Pha chế cốm Trộn bột kép Kiểm tra độ đồng bột Nhào... lần1( sau lần hai (sau 21 ngày) tháng) Và kiểm tra bệnh lý, tỷ lệ chết…) - 22 THAM QUAN QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC VÀ VACCINE TẠI NHÀ MÁY THUỐC Quy trình sản xuất số loại vacxin: Vacxin cổ điển(