Vi nhân giống bằng nuôi cấy mô slide

Chương 4. Các phương pháp nhân giống thực vật bằng NCMTB Tạ Ngọc Ly www.themegallery.com NCMTV phôi hạt đỉnh sinh trưởng Protoplast tế bào mô sẹo chồi bên cơ quan (hạt phấn/noãn/đế hoa) www.themegallery.com Các giai đoạn trong quy trình nhân giống vô tính in vitro    • !" #$ • %&'$( )  • *&+,- ./ • 0-1.2 • ,"1 3-14 5 2 . [...]... Điều kiện nuôi cấy  Cách đặt mẫu vào môi trường www.themegallery.com Qui trình nhân giống invitro www.themegallery.com 1 Đối với các cây có chồi ngọn dài 2 Đối với các cây có chồi ngọn điểm hoa thị Nuôi cấy đỉnh sinh trưởng làm sạch virus 1 2 3 4 ~0.5 mm ~0.5 mm 5 7 6 Ghép đỉnh chồi hay vi ghép Vi ghép là nuôi cấy đỉnh sinh trưởng thông qua dinh dưỡng tự nhiên của gốc ghép • •Dùng để tạo giống sạch... lí nhiệt) nuôi cấy ĐST chồi kiểm tra nhân chồi ra rễ ra đất kiểm tra virus cây sạch bệnh www.themegallery.com  Kết quả nuôi cấy đỉnh sinh trưởng phụ thuộc vào vật liệu khởi đầu, nguồn gốc và kích thước của mẫu  Vào mẫu:  Môi trường nuôi cấy  Điều kiện nuôi cấy  Nguyên nhân gây chết www.themegallery.com Các phương pháp kết hợp để tăng hiệu quả diệt virus  Xử lý nhiệt +Nuôi cấy ĐST  Tạo... vi ghép khác nhau Các bước xử lý virus  Xác định loại virus  Loại trừ virus  Kiểm tra  Ngăn cản sự tái nhiễm www.themegallery.com Các phương pháp chuẩn đoán bệnh virus     Xét nghiệm bằng cây chỉ thị Phương pháp huyết thanh Xét nghiệm bằng kính hiển vi điện tử Xét nghiệm bằng phương pháp PCR www.themegallery.com Qui trình nuôi cấy ĐST tạo cây sạch bệnh  Cây nhiễm virus (xử lí nhiệt) nuôi. .. virus  Xử lý nhiệt +Nuôi cấy ĐST  Tạo chồi bất định nuôi cấy ĐST  Vi ghép Qui trình vi ghép? www.themegallery.com 4.2 Nhân giống thông qua giai đoạn mô sẹo Sự phát sinh mô sẹo - Giai đoạn phát sinh mô sẹo -Giai đoạn phân chia tế bào -Giai đoạn biệt hoá Mô sẹo (A) và tái sinh chồi từ mô sẹo (B) của chi Lilium - Loại tế bào xốp, có không bào to, nhân to và tế bào chất loãng Loại tế bào này rất khó... bào nhỏ, nhân to và tế bào chất đậm đặc Loại tế bào này dễ tái sinh thành cơ quan Sự tạo thành mô sẹo  In vivo: do vết thương, do vi khuẩn Agrobacterium  In vitro: do các phytohormon 1 auxin 2 cytokinin 3 auxin và cytokinin 4 các hợp chất thiên nhiên khác www.themegallery.com Sự hình thành chồi từ mô sẹo  Sự hình thành chồi từ mô sẹo được kích thích bởi: - Các chất sinh trưởng đưa vào môi trường... từ mô sẹo được kích thích bởi: - Các chất sinh trưởng đưa vào môi trường - Chất được sản sinh ra trong nuôi cấy mô sẹo - Các chất có chứa sẵn trong mẫu nuôi cấy - Tỷ lệ cytokinin/auxin từ 10÷100 - Carbonhydrate như sucrose và các chất hữu cơ như casein hydrolysate (casein thuỷ phân) - Điều kiện nuôi cấy # Auxins : 0.01 - 10 mg / L # Cytokinins : 0.01 - 10 mg / L hoạt tính IAA TDZ IBA BA (BAP) NAA Kinetin... 6.Whole plant 4.3 Kỹ thuật nhân giống qua tái sinh phôi soma Phôi soma  Phôi soma là các cá thể nhân giống có cực tính bắt nguồn từ các tế bào soma  3 nguồn phát sinh phôi soma: + tế bào sinh dưỡng của cây trưởng thành + mô tái sinh không phải là hợp tử + lá mầm và trụ dưới lá mầm của phôi và cây con  Con đường phát sinh phôi soma + Phát sinh trực tiếp không qua giai đoạn mô sẹo + Phát sinh từ tế...Phương pháp nhân chồi bên  Cytokinin  Ý nghĩa của phương pháp nhân chồi bên *các phương pháp phá vỡ trạng thái hưu miên *các phương pháp tái tạo sinh lý trẻ www.themegallery.com Nuôi cấy tạo chồi bất định từ các cơ quan khác nhau  Một số loại mẫu vật được dùng như sau: - Đoạn thân: thuốc lá, cam,... - ip 2,4,6 - T Zeatin Dicamba Picloram www.themegallery.com ảnh hưởng của auxin lên sự tạo mô sẹo www.themegallery.com  Màu sắc mô sẹo: - Vàng Trắng Xanh Đỏ www.themegallery.com Phát sinh cơ quan Auxin/cytokinin 10:1-100:1 phát sinh rễ Auxin/cytokinin 1:10-1:100 phát sinh chồi Auxin/cytokinin 1:1 phát sinh mô sẹo www.themegallery.com Ảnh hưởng kết hợp NAA và BA www.themegallery.com Ảnh hưởng kết... không phải là hợp tử + lá mầm và trụ dưới lá mầm của phôi và cây con  Con đường phát sinh phôi soma + Phát sinh trực tiếp không qua giai đoạn mô sẹo + Phát sinh từ tế các tế bào phôi hóa cảm ứng trong mô sẹo . 2. Đối với các cây có ch i ngọn điểm hoa thị