-Bệnh do một loại virus gây ra, với đặc điểm lây lan rất nhanh và tỷ lệ chết rất cao trong quần thể gia cầm bị bệnh trong vòng 24-48 giờ sau khi bị nhiễm virus, gây thiệt hại kinh tế rất
Trang 1I.Đặt vấn đề
• Bệnh cúm gia cầm là một bệnh truyền nhiễm cấp tính lây lan rất nhanh, gây chết hàng loạt, gây thiệt hại rất lớn cho ngành chăn nuôi gia cầm trên toàn thế giới trong thế kỉ 20
• WHO đã chia dịch cúm thành 6 giai đoan, từ mức độ chỉ là nguy cơ nhỏ cho đến khi đại dịch bùng phát và lan tràn Hầu hết các tổ chức y tế của các quốc gia đều tự đánh giá và cho rằng hiện nay (năm 2005) dịch gia cầm đang nằm ở giai đoạn 3 của dịch
Trang 2I.Đặt vấn đề
Ở nước ta từ tháng 12 năm 2003 đã xảy ra 5 đợt dịch cúm gia cầm và cúm A( H5N1) trên người, phải tiêu huỷ hàng chục triệu gia cầm và gần một trăm người mắc bệnh, hàng chục người tử vong Do tính chất nguy hiểm của dịch cúm tổ chức y tế thế giới (WHO), tổ chức dịch tễ thế giới (OIE) đã cảnh báo thế giới đang đứng trước nguy cơ xảy ra dịch cúm gia cầm và đại dịch cúm ở người
Trang 3
I.Đặt vấn đề
• Chính vì thế nhiệm vụ đặt ra cho chúng ta là làm sao có thể phát hiện một cách sớm nhất gia cầm mắc bệnh để ngăn chặn một cách kịp thời không cho dịch cúm xảy ra Từ lí do
đó mà chúng tôi thực hiện đề tài: “ Kiểm tra
và xử lý gia cầm bị mắc bệnh cúm”.
Trang 4II Giải quyết vấn đề
A.Những hiểu biết về bệnh cúm
gia cầm.
Trang 5
1.Khái niệm
Bệnh cúm gia cầm hay còn gọi là bệnh cúm gà là một bệnh truyền nhiễm cấp tính rất nguy hiểm đối với gà, vịt, ngan, ngỗng, gà tây, đà điểu, chim cút Các loài chim cảnh chim hoang dã nhất là vịt trời, diệc, ngỗng trời và đặc biệt là các thuỷ cầm nuôi ( vịt, ngan , ngỗng) trước đây coi là những vật mang trùng khoẻ mạnh.
Trang 61.Khái niệm -Người cũng có thể bị bệnh cúm gia
cầm và trong một số trường hợp đặc biệt, một số động vật có vú như hổ, mèo cũng
có thể bị bệnh.
-Bệnh do một loại virus gây ra, với đặc điểm lây lan rất nhanh và tỷ lệ chết rất cao trong quần thể gia cầm bị bệnh trong vòng 24-48 giờ sau khi bị nhiễm virus, gây thiệt hại kinh tế rất lớn do phải tiêu huỷ gia cầm trong vùng dịch và các chi phí chống dịch khác.
Trang 72 Căn nguyên gây bệnh
Bệnh gây ra bởi virus cúm thuộc họ
Orthomyxoviride, những virus cúm thuộc họ này được xếp thành các loại A, B, hoặc C dựa trên cơ sở đặc tính kháng nguyên nucleprotein lõi Cho tới nay chỉ có virus cúm A được phân lập từ các loài gia cầm Virus cúm A lại được chia thành các Type phụ đặc thù bởi các kháng nguyên gây ngưng kết hồng cầu (H), và kháng nguyên trung hoà (N) Hiện nay người ta đã phân lập được 15 type phụ H và 9 type phụ N, mỗi vius có 2 loại kháng nguyên H và N kết hợp với nhau
Trang 82.1.Hình thái cấu trúc
• Virus cúm có Nucleocapxit cấu tạo theo kiểu đối xứng xoắn,có hình cầu hoặc đa dạng với đường kính80-100nm, nhân là một ARN có đường kính sợi xoắn là 8-9nmvà bao gồm 8 mảnh rời nhau mang mật mã cho 10 loại protein khác nhau của virus Bao bọc quanh ARN là một vỏ capxit mang 2 KN chính là
H và N, ngoài ra còn một KN màng M1(matrix protein-protein đệm) và một KN kết hợp bổ thể hoà tan Ns
Trang 92.1.Hình thái cấu trúc
Trang 10- KN N (Neuraminidaza) là một enzim làm tách cầu nối axit neuraminic với polysaccarit để giải phóng axit Neuraminic và phá huỷ thụ thể mucôprtein của hồng cầu.Người ta cũng đã phân ra
9 loại KN N ghi từ N1- N9
- Đối với sự gây nhiễm , 2 KN H và N có vai trò rất lớn, giúp Virus gây bệnh H giúp Virus bám vào
tế bào , nhờ đó mà Virus xâm nhập vào bên trong
TB N giúp Virus ra khỏi TB đã nhiễm để lan sang TB lành khác
Trang 112.1.Hình thái cấu trúc
Trang 122.2 Sức đề kháng
- Virus không bền với nhiệt độ,đun 560C Virus chết sau vài phút, 1000C chết ngay, ở 40C trong nước niệu phôi gà Virus tồn tại 2 tháng, ở -700C, khi làm lạnh nhanh có thể bảo quản Virus lâu dài
- Trong tự nhiên Virus có sức đề kháng cao và tồn tại lâu, trong phôi gà ở 40C Virus tồn tại 35 ngày, thịt gà để lạnh 23 ngày Virus vẫn còn khả năng gây nhiễm
- Các chất sát trùng thông thường có thể tiêu diệt Virus nhanh chóng ( formol , virkon , vôi bột, crezin…)
Trang 132.3 Nuôi cấy
Các Virus cúm dễ dàng nuôi cấy trên phôi
gà, con đường gây nhiễm có hiệu quả là tiêm vào túi ối hoặc xoang niệu cho phôi gà ấp 10-11 ngày tuổi.Virus có thể gây chết phôi sau 24-48 giờ gây nhiễm với bệnh tích xuất huyết nặng toàn phôi
Trang 142.4 Khả năng gây bệnh
Trang 152.4 Khả năng gây bệnh
Chủng virus cúm gia cầm H5N1 có thể có khả năng gây ra dịch cúm ở người thông qua hai cơ chế
(a) Cơ chế đồng xâm nhiễm: virus cúm gia cầm
H5N1 và virus cúm ở người cùng xâm nhiễm vào tế bào người, từ đó cho phép chúng tái sắp xếp các gene tạo ra một dạng virus cúm gia cầm H5 mới và có thể lây nhiễm từ người sang người
(b) Cơ chế đột biến: virus cúm gia cầm H5N1 có
thể đột biến trực tiếp thành virus cúm có khả năng lây nhiễm từ người sang người Virus H5N1 đang lưu hành hiện thời được xem là chủng "mới" về mặt kháng nguyên, chúng có khả năng phát sinh bệnh với mức
độ cao ở người và có thể lây nhiễm một cách có hệ thống ở động vật
Trang 162.4 Khả năng gây bệnh
Chúng biểu hiện đặc tính phân cắt của protein hemaglutinin (HA) độc lập với trypsin và có sự mất đoạn trong gene phi cấu trúc, những đặc điểm này có liên quan đến khả năng tăng cường khả năng phát sinh bệnh Chỉ cần một hoặc hai đột biến trong protein HA và 10 đột biến trong phức hợp polymerase là có thể tạo nên một chủng virus cúm gia cầm mới hoàn toàn có khả năng
Trang 182.4 Khả năng gây bệnh
Trang 192.4 Khả năng gây bệnh
Tuy sự biến đổi này chưa được khẳng định chắc chắn nhưng đây là dự đoán rất có thể xảy ra Vì virus có khả năng thay đổi cấu trúc kháng nguyên rất nhanh.Và nếu điều này xảy ra thì nó sẽ là đại dịch đối với cả thế giới do bệnh do virus cúm mới này có thể truyền từ người sang người, từ gia súc khác sang người chứ không chỉ từ gia cầm như hiện nay
Trang 202.4 Khả năng gây bệnh
Có tất cả 16 loại protein H, đối với mỗi loại thì lại
có đến 9 phân nhóm protein N, như vậy tổ hợp lại thì có khả năng tạo ra 144 phân nhóm virus cúm gà khác nhau Ngoài ra, tất cả mỗi phân nhóm virus trên lại có thể chia làm 2 phân nhóm xâm nhiễm:
đặc tính xâm nhiễm thấp (LPAI) và cao (HPAI), điều này phụ thuộc vào độc tính của virus đối với các
quần thể gia cầm
Trang 222.4 Khả năng gây bệnh
Người ta đang lo ngại rằng các loài virus cúm gia cầm có thể tiến hành chuyển đổi tính kháng nguyên
để có khả năng vượt qua các rào cản khác loài (vd
từ chim có thể lây sang người) Nếu thực sự biến chủng này được tạo ra thì nó sẽ vừa mang tính đa hình cực cao (khó kiểm soát) và có độc tính mạnh (khó chữa trị) Một biến chủng như vậy có thể gây
Dịch cúm Tây Ban Nha đã làm tử vong 50 triệu người vào năm 1918
Trang 233 Dịch tễ
CÁC NƯỚC CÓ DỊCH CÚM GIA CẦM
Trang 243 Dịch tễ
- Động vật cảm nhiễm: Virus cúm gia cầm lây nhiễm cho hầu hết các loài gia cầm nuôi công nghiệp, chăn thả và hoang dã Đã có báo cáo về việc nhiễm bệnh ở khỉ, lợn, hổ, báo,
+ Gà, gà tây, gà lôi, gà gô… mẫn cảm với mầm bệnh và biểu hiện lâm sàng
+ Vịt, ngan, ngỗng mẫm cảm với mầm bệnh, với tất cả các chủng virus cúm nhưng chỉ có 1 vài chủng virus có độc lực rất cao gây bệnh có biểu hiện lâm sàng
+ Các loài chim hoang dã khác: Hiện đã phát hiện virus cúm gia cầm Từ chim bay tự do ở khắp nơi trên thế giới
Trang 253 Dịch tễ.
+ Các cuộc khảo sát thực địa cho thấy rằng nhiều loại thuỷ cầm, đặc biệt là vịt, ngỗng, thiên nga là những vật chủ tự nhiên của virus cúm gia cầm
-Tuổi mắc bệnh: Gia cầm ở mọi lứa tuổi đều
có thể cảm nhiễm và mắc bệnh
Trang 263 Dịch tễ.
- Mùa phát sinh và lây lan dịch: Bệnh lây nhiễm quanh năm, không phụ thuộc vào mùa vụ Nhưng người ta thường thấy các ổ dịch cúm gà xảy ra khi thời tiết chuyển từ ấm áp sang lạnh ẩm từ mùa thu sang mùa đông ở các nước Châu Á Các chuyên gia Nhật Bản còn cho biết các loài chim di cư (vịt trời, ngỗng trời, quạ) mang mầm bệnh từ phương Bắc trong mùa đông giá lạnh, truyền cho các loài gia cầm ở các nước Đông và Nam Á khi chúng đến trú đông
Trang 273 Dịch tễ
- Tỷ lệ ốm và tỷ lệ chết cao có khi tới 100%
Trang 28B Kiểm tra và xử lý gia cầm bị nhiễm bệnh cúm
Trang 294 Kiểm tra trước khi giết mổ
Kiểm tra trước khi giết mổ chủ yếu căn cứ vào triệu chứng lâm sàng
Trang 304 Kiểm tra trước khi giết mổ
Biểu hiện triệu chứng lâm sàng của bệnh cúm rất khác nhau, nó phụ thuộc vào nhiều yếu tố: Chủng virus xâm nhập, loài cảm nhiễm, tuổi , giới tính, chế độ dinh dưỡng, tình trạng miễn dịch của vật chủ trước khi nhiễm, môi trường (bẩn, bụi, quá thừa NH3,
…), sự cộng nhiễm cùng các virus, vi khuẩn khác như Mycoplasma Newcastle, Ecoli,… nhìn chung có thể phát hiện triệu chứng dưới dạng một trong hai thể sau:
Trang 314 Kiểm tra trước khi giết mổ
4.1.Thể nặng (nhiễm virus có độc lực cao- HPAI)
- Sưng phù đầu, mặt
Trang 324 Kiểm tra trước khi giết mổ
Trang 33- Xuất huyết dưới da, có những nốt tím tái ở mào, tích, sưng và xuất huyết cẳng chân.
Trang 344 Kiểm tra trước khi giết mổ
Trang 354 Kiểm tra trước khi giết mổ
- Hắt hơi, ho, khó thở, thở khò khè, chảy nước mắt nhiều
- Lông xù, giảm đẻ ( gà đang sản xuất trứng),
gà nhỏ thường đứng tụ lại thành từng đám
- Ỉa chảy, có những biểu hiện rối loạn thần kinh.-Trường hợp cấp tính gia cầm chết nhanh trong vòng 24h kể từ khi biểu hiên triệu chứng và thường chết trong vòng 48h Tỷ lệ chết xấp xỉ 100%
Trong các trường hợp khác có thể phát hiện triệu chứng khác nhau và gia cầm có thể chết sau 1 tuần
Trang 364 Kiểm tra trước khi giết mổ
4.2 Thể nhẹ (nhiễm virus độc lực thấp):
- Ở gà và gà tây có biểu hiện bệnh lý hô hấp
từ không rõ rệt đến nhẹ hoặc nặng có thể nhầm lẫn với bệnh viêm thanh – khí quản và các bệnh đường hô hấp khác
Sản lượng trứng ở gà đẻ giảm 45%
-Ở thuỷ cầm không biểu hiện triệu chứng
- Các loài chim hoang dã khi nhiễm virus cúm thường không biểu hiện triệu chứng lâm sàng
Virus cúm khu trú trong các tế bào đường ruột, đường hô hấp nên virus thường được thải
ra theo phân làm ô nhiễm môi trường
Trang 385 Kiểm tra sau khi giết mổ
• Việc kiểm tra sau khi giết mổ căn cứ chủ yếu vào bệnh tích của gia cầm khi mổ khám
Trang 395 Kiểm tra sau
khi giết mổ
Mào tích thâm tím
Mí mắt sưng mọng và đỏ tấy hoặc thâm tím.
Xuất huyết điểm hoặc lan tràn khắp cơ thể.
Phù nề nặng dưới
da
Trang 40Xuất huyết chi Xuất huyết cơ
Trang 415 Kiểm tra sau khi giết mổ
Diều có ít thức ăn
và không tiêu
Xuất huyết và hoại
tử tuyến tụy, tuyến tuỵ chuyển sang
màu vàng, có các vệt sẫm màu
Xuất huyết điểm ở
ruột, sưng hạch ruột
Xuất huyết dạ dày
cơ, đôi khi xuất
huyết dạ dày tuyến giống Newcastle
Trang 435 Kiểm tra sau khi giết mổ
Khí quản phù, chứa nhiều dịch nhầy, dịch nhầy có thể đông đặc như
(cheese).
Viêm cata và viêm tơ huyết niêm mạc khí quản.
Trang 445 Kiểm tra sau khi giết mổ
Gà mái đẻ viêm ống dẫn trứng, vỡ trứng non
Trang 45Dịch hoàn xuất huyết
Trang 465 Kiểm tra sau
Trang 476 Chẩn đoán gia cầm nghi mắc bệnh
cúm
• Ngoài ra nếu thấy nghi ngờ gia cầm mắc
bệnh cúm thì phải lấy máu và dịch ngoáy hầu họng để kiểm tra virus học
Trang 486 Chẩn đoán gia cầm nghi mắc bệnh
cúm
• Chẩn đoán VR học: bệnh phẩm( BP) bao gồm; dịch nhày họng, khí quản( dùng tăm bông ngoáy họng,
lỗ huyệt rồi cho vào ống nghiệm tiệt trùng có dung dịch bảo quản và KS liều cao để hạn chế tạp khuẩn
• Các bộ phận nội tạng
• Phân hoặc các chất chứa đường ruột
• Mẫu BP được giữ ở 4 độ C ,phải phân lập VR trong phạm vi 48h Cần bảo quản lâu dài nên giữ ở -70 độ c
Trang 496 Chẩn đoán gia cầm nghi mắc bệnh
cúm
Nghiền và pha BP với nước SL thành hỗn dịch ,ly tâm ,lấy nước trong,gây nhiễm cho phôi gà 11 ngày tuổi Thu hoạch phôi chết hoặc sống sau 72 h, mổ
trứng thu dịch xoang niệu , làm PƯ HA để xác định
sự hiện diện của VR
• Chẩn đoán huyết thanh học: sử dụng các PƯ
HI,ELISA, trung hoà để xác định các subtyp và phân biệt với VR newcastle Muốn vậy cần có nhiều chủng
KN và các KT đơn dòng chuẩn
Trang 506 Chẩn đoán gia cầm nghi mắc
bệnh cúm
Trang 51QUY TRÌNH PHÁT HIỆN VIRUS CÚM
H5N1 b ằng RT_PCR
(Theo WHO – 2007)
Virus cúm H5N1 đã gây ra nhiều thiệt hại về tài sản và tính mạng cho nông dân cũng như cho người tiêu dùng Vì vậy việc xây dựng quy trình phát hiện virus nhanh
và chính xác là 1 trong những ưu tiên hàng đầu của tổ chức Y Tế Thế Giới (WHO) Vừa qua, WHO đã ban hành quy trình phát hiện virus cúm H5N1 bằng RT- PCR vào tháng 08/2007
Trang 52QUY TRÌNH PHÁT HIỆN VIRUS CÚM H5N1 bằng
• · Gel loading buffer 6X
• · Thang DNA
Trang 53QUY TRÌNH PHÁT HIỆN VIRUS CÚM
H5N1 bằng RT_PCR
Primers:
• Cặp primer phát hiện gene H5 thuộc Clade 1, 2, 3 (sản
phẩm có kích thước mong muốn là 219 bp):
H5-1: GCC ATT CCA CAA CAT ACA CCC H5-3: CTC CCC TGC TCA TTG CTA TG
• Cặp primer phát hiện Gene M thuộc Clade 1, 2, 3 (sản
phẩm có kích thước mong muốn là 232 bp):
M30F: TTC TAA CCG AGG TCG AAA CG M264R2: ACA AAG CGT CTA CGC TGC AG
• Cặp primer phát hiện Gene N1 (sản phẩm có kích thước
mong muốn là 616 bp):
N1-1: TTG CTT GGT CGG CAA GTG C N1-2: CCA GTC CAC CCA TTT GGA TCC
Trang 54QUY TRÌNH PHÁT HIỆN VIRUS CÚM
Trang 55QUY TRÌNH PHÁT HIỆN VIRUS CÚM
H5N1 bằng RT_PCR
Đối với gene H5 hoặc N1:
Chuẩn bị master mix RT-PCR như sau:
• RNase inhibitor (20U/μl) 0.5 μl
• Water (Molecular grade) 9 μl
• RNA 5 μl
• Tổng cộng 50 μl
Trang 56QUY TRÌNH PHÁT HIỆN VIRUS CÚM
H5N1 bằng RT_PCR
Đối với gene M:
Chuẩn bị master mix RT-PCR như sau:
• RNase inhibitor (20U/μl) 0.5μl
• Water (Molecular grade) 19μl
• RNA 5 μl
• Tổng cộng 50μl
Trang 57QUY TRÌNH PHÁT HIỆN VIRUS CÚM
Trang 58QUY TRÌNH PHÁT HIỆN VIRUS CÚM
Trang 597 Xử lý gia cầm bị bệnh cúm
• Trường hợp kết quả dương tính, những biện pháp thường xuyên ngay lập tức sẽ được áp dụng( trong khoảng thời gian tối thiểu là 21 ngày) bao gồm:
• - Tiêu huỷ tất cả các loài lông vũ (chim) đang nuôi tại ổ dịch
• - Chôn xác gia cầm, phân, thức ăn, rơm cỏ và các
đồ vật không khử trùng được
• - Vệ sinh lau chùi rồi khử trùng( chuồng gà và khu xung quanh, cơ sở vật chất và trang thiết bị) tại
nông hộ có bệnh
Trang 607 Xử lý gia cầm bị bệnh cúm
Đốt xác gia cầm mắc bệnh Chôn gia cầm mắc bệnh
Trang 61bộ và đường thủy; ngăn chặn triệt để vận
chuyển gia cầm, sản phẩm gia cầm chưa chế biến chín không có giấy kiểm dịch, không rõ nguồn gốc
Trang 627 Xử lý gia cầm bị bệnh cúm
Trang 637 Xử lý gia cầm bị bệnh cúm
Thực hiện vệ sinh sát trùng nơi có dịch
Trang 647 Xử lý gia cầm bị bệnh cúm
LẤP GIA SÚC GIA CẦM MẮC BỆNH
1 Đối tượng cần tiêu huỷ khi có dịch
Xác gia cầm bị dịch hoặc nghi mắc bệnh có lệnh phải tiêu hủy; Phân, rác, thức ăn dư thừa trong chuồng; Vật dụng rẻ tiền mau hỏng sử dụng trong chăn nuôi
Trang 65MỘT SỐ ĐIỀU CẦN CHÚ Ý KHI CHÔN LẤP
hộ bằng nhựa PPE, kính, găng tay, ủng, mũ chùm đầu đủ đảm bảo để tránh nguy cơ bị lây nhiễm mầm bệnh; Sau khi làm việc phải tắm giặt, rửa mặt, rửa tay bằng xa phòng, thay quần áo; Không được phép ăn uống khi đang làm việc; Súc miệng bằng listerine sau khi làm việc;