Vỏ và hạt quả vải là một dược liệu đã được các tác giả nước ngoài nghiên cứu chứng minh có tác dụng ức chế u và hạ đường huyết trên thực nghiệm và trên người. Một số nghiên cứu mới đây cho thấy hạt vải có nhiều tác dụng như chống oxy hóa, hạ đường huyết, hạ lipid máu, chống đông máu, chống virus 3. Năm 2010, từ dịch chiết hạt quả vải Xinya Xu và cộng sự cũng đã phân lập được pumilasid A, một eudesmane sesquiterpen glucosid có tác dụng ức chế 4 dòng tế bào ung thư A549, LAC, Hela, HepG2 với IC50 từ 0,0126,29 µM; và funingensin A có hoạt tính ức chế dòng tế bào ung thư gan HepG2 với IC50 là 39,27 µM 15. Theo một tài liệu đã công bố từ lâu trong hạt của quả vải có chứa chất α(methylenecyclopropyl)glycin, một acid amin có tác dụng hạ đường huyết chuột
ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư và tiểu đường là một trong số các nguyên nhân hàng đầu dẫn đến cái chết, đặc biệt ở các nước phát triển. Theo thống kê của Tổ chức Y tế thế giới năm 1985 có 30 triệu người trên thế giới bị đái tháo đường, năm 1994 con số này tăng đến 110 triệu người 2000 đã có 157,3 triệu người và dự kiến vào năm 2025 có khoảng 300 triệu người bị đái tháo đường. Đối với ung thư: năm 2005 có 7,6 triệu người chết do ung thư trong số 58 triệu người chết trên toàn thế giới; theo dự báo số người chết do ung thư ước tính sẽ là 9 triệu người vào năm 2015 và 11,4 triệu người vào năm 2030. Ở Việt nam hiện nay, mỗi năm phát hiện thêm khoảng 200.000 bệnh nhân ung thư mới và khoảng 100.000 người chết do ung thư. Vỏ và hạt quả vải là một dược liệu đã được các tác giả nước ngoài nghiên cứu chứng minh có tác dụng ức chế u và hạ đường huyết trên thực nghiệm và trên người. Một số nghiên cứu mới đây cho thấy hạt vải có nhiều tác dụng như chống oxy hóa, hạ đường huyết, hạ lipid máu, chống đông máu, chống virus [3]. Năm 2010, từ dịch chiết hạt quả vải Xinya Xu và cộng sự cũng đã phân lập được pumilasid A, một eudesmane sesquiterpen glucosid có tác dụng ức chế 4 dòng tế bào ung thư A549, LAC, Hela, Hep-G2 với IC50 từ 0,012-6,29 µM; và funingensin A có hoạt tính ức chế dòng tế bào ung thư gan Hep-G2 với IC50 là 39,27 µM [15]. Theo một tài liệu đã công bố từ lâu trong hạt của quả vải có chứa chất α- (methylenecyclopropyl)glycin, một acid amin có tác dụng hạ đường huyết chuột [4]. Từ vỏ của quả vải cũng đã phân lập được các flavonoid có hoạt tính ức chế dòng tế bào ung thư vú MCF-7 như epicatechin, proanthocyanidin B2, B4 [11], [14]. Y học cổ truyền có sử dụng vỏ và hạt quả vải trong điều trị một số chứng như đau răng, đau tinh hoàn, đau bụng hành kinh hoặc sau đẻ… Ở Việt Nam chưa có công trình nghiên cứu đầy đủ nào về thành phần hóa học cũng như tác dụng dược lý của vỏ và hạt quả vải. Như vậy, việc tận thu vỏ và hạt của quả vải để làm thuốc và trị bệnh là 1 hết sức cần thiết. Mặc dù trên thế giới đã có các nghiên cứu về tác dụng dược lý cũng như thành phần hóa học của chúng nhưng ở Việt Nam chưa có một nghiên cứu đầy đủ nào về vấn đề này. Vì vậy, việc tìm hiểu thành phần hóa học và cao hơn nữa là chứng minh được thành phần hoạt chất cụ thể của vỏ và hạt quả vải là một việc làm cần thiết, tạo cơ sở cho việc tận thu, ứng dụng một nguồn nguyên liệu rất sẵn có ở Việt Nam này làm thuốc hỗ trợ điều trị ung thư, điều trị tiểu đường. Bước đầu, chúng tôi đề xuất nghiên cứu chiết xuất phân đoạn nhóm hoạt chất có tác dụng ức chế một số dòng tế bào ung thư (Hep-2, MCF-7, A549…); nghiên cứu chiết xuất phân đoạn nhóm hoạt chất có tác dụng hạ đường huyết. Kết quả nghiên cứu này sẽ là tiền đề cho những nghiên cứu sâu hơn về thành phần hoạt chất cụ thể và tạo ra chế phẩm thuốc hoặc thực phẩm chức năng hỗ trợ điều trị ung thư, tiểu đường từ nguồn nguyên liệu tận thu sẵn có này. Mục tiêu của đề tài: - Xác định được phân đoạn hoạt chất có tác dụng độc tế bào đối với một số dòng tế bào ung thư. - Xác định được phân đoạn hoạt chất có tác dụng hạ đường huyết in vivo từ vỏ và hạt quả vải. - Đào tạo cán bộ nghiên cứu mới Nội dung nghiên cứu: a, Nghiên cứu các phân đoạn chiết từ dược liệu về tác dụng độc tế bào trên một số dòng tế bào ung thư: + Điều chế cao chiết toàn phần và các phân đoạn chiết + Thử tác dụng độc tế bào của các mẫu cao chiết trên dòng 3 dòng tế bào ung thư Hep-G2, MCF-7, A549 b, Đánh giá tác dụng hạ đường huyết in vivo của dịch chiết hạt và vỏ quả vải. 2 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Thực vật học [1] Vải (Litchi chinensis Sonn.) thuộc họ Bồ hòn (Sapindaceae). Cây nhỡ hay cây to, cao 7-10m. Cành hình trụ, vỏ màu nâu sẫm, có những chấm nhỏ. Lá kép lông chim sẻ, mọc so le, gồm 7-9 lá chét cứng và dai, rất đa dạng, hình mác hoặc thuôn, gốc tròn, đầu nhọn, hai mặt nhẵn, mặt trên sẫm bóng, mặt dưới nhạt. Cụm hoa mọc ở đầu cành thành chùm có lông, màu nâu; hoa màu xanh vàng nhạt; đài hình đấu có lông; tràng 0; nhị 7-10, chỉ nhị có lông; bầu 2 thùy. Quả hình trứng, vỏ quả mỏng, sần sùi, màu đỏ nhạt; hạt có áo dày bao quanh, màu nâu. Mùa hoa: tháng 3-4; mùa quả: tháng 5-6. 1.2. Thành phần hóa học của quả vải Quả vải chiếm 8-15% vỏ, 70-86% cùi và 4-18% hạt Cùi vải chứa đường (chủ yếu là glucose và sacharose), đường khử, acid citric, acid ascorbic, protein, chất béo, acid nicotic riboflavin, caroten và các nguyên tố đa vi lượng như calci, phosphor, sắt. Hạt vải chứa Saponin, Tanin, Leucocyanidin (Flavonoid), Anthocyanin, proanthocyanidin, steroid và sesquiterpene [13], [5], [18]. Các cyclopropyl- fatty acid glycoside như litchioside C [16]. Ngoài ra hạt vải còn chứa 8% dầu bao gồm dihydrosterculic acid, oleic acid, linoleic acid, palmitic acid và stearic acid với hơn 40 % acid béo không bão hòa [6]. 1.3. Tác dụng sinh học 1.3.1. Tác dụng chống oxy hóa Bốn hợp chất 3,12-Dihydroxy-cis-3,4-methylenedodecanoic acid 3-O-β-D- glucopyranosid hay có tên gọi khác là litchiosid C (1), (2S)-1-O-(9Z,12Z 3 octadecadienoyl)-3-O-β-D-galactopyranosylglycerol (2), (2S)-1-O-hexadecanoyl-3-O- [α-Dgalactopyranosyl(1→6)-β-D-galactopyranosyl]glycerol (3) và gingerglycolipid C (4) được phân lập từ hạt vải đã được chứng minh tác dụng chống oxy hóa trong thử nghiệm FRAP với các giá trị FRAP tương ứng là 21.5±2.6, 104.9±3.2, 69.9±5.7 và 88.6±5.2 μmol Fe (II)/g.[16] Dịch chiết cồn nước 50% từ hạt vải thể hiện tác dụng chống oxy hóa mạnh quét gốc DPPH và ức chế sự peroxi hóa lipid, tác dụng chống oxy hóa này được so sánh với một hợp chất chống oxy hóa tổng hợp là butylated hydroxyl toluene, nó còn có tác dụng chống lại quá trình sản xuất hắc tố melanin thông qua ức chế enzym Tyrosinase. [7] Bốn hợp chất được phân lập từ dịch chiết cồn 95% hạt vải là protocatechuic acid, 2a,3a-epoxy-5,7,30,40-tetrahydroxyflavan-(4b-8-catechin, 2a,3a-epoxy-5,7,30,40 -tetrahydroxyflavan- (4b-8) -epicatechin, 2b, 3b-epoxy-5,7,30,40-tetrahydroxyflavan - (4a-8)- epicatechin cũng thể hiện tác dụng chống oxy hóa trong thử nghiệm quét gốc tự do DPPH và thử nghiệm Trolox [9]. Tác dụng này cũng được thể hiện ở polysacharid có trong dịch chiết nước hạt vải bằng phương pháp siêu âm [20] Không chỉ ở hạt vải, các hợp chất có trong vỏ quả vải cũng thể hiện khả năng chống oxy hóa thông qua cơ chế quét gốc tự do và giảm sự oxy hóa lipid như anthocyanidin [19] 1.3.2. Tác dụng chống ung thư Các sesquiterpene glucosides pumilaside A và funingensin A đã thể hiện tác dụng độc tế bào trên các dòng tế bào A549, LAC, Hela, Hep-G2 bởi thử nghiệm MTT, trong đó giá trị IC 50 của pumilaside A nằm trong khoảng 0,012-6,29 μM còn funingensin A chống lại các tế bào Hep-G2 với IC 50 = 39,27 Μm [15]. Dịch chiết cồn nước vỏ quả vải thể hiện tác dụng chông lại ung thư vú MCF-7 với IC 50 = 80 μg/ml) [17], các flavonoid được phân lập từ vỏ quả vải có hoạt tính ức 4 chế dòng tế bào ung thư vú MCF-7 như epicatechin, proanthocyanidin B2, B4. Ngoài ra các hợp chất epicatechin, proanthocyanidin B2, B4 và phần chiết ethyl acetat cũng đã được chứng minh tác dụng kích thích miễn dịch, epicatechin và phần chiết ethyl acetat thể hiện tác dụng này ở nồng độ lên tới 12.5 μg/ml (P<0.05) [11], [14]. 1.3.3. Hạ đường huyết Hai flavanon được phân lập từ hạt vải là (2R)-naringenin-7-O-(3-O-a-L -rhamnopyranosyl-b-D-glucopyranosid) và (2S)-pinocembrin-7-O-(6-O-a-L- rhamnopyranosyl-b-D-glucopyranosid) thể hiện hoạt động ức chế α-glucosidase ở các nồng độ 1, 0,1, 0,01 mg/ml [12]. Dịch chiết nước hạt vải có thể ngăn ngừa các biến chứng có thể xảy ra trong bệnh tiểu đường thông qua sự ức chế aldose reductase. Theo Kuang dịch chiết nước của hạt vải với liều (5 g/kg) có tác dụng giảm lượng đường trong máu của chuột bình thường và chuột mắc tiểu đường gây bởi alloxan, tác dụng hạ đường huyết này được so sánh gần bằng glibenclamid và phenformin [8]. Ở Trung Quốc hạt vải đã được phát triển thành thuốc để điều trị bệnh tiểu đường trên lâm sàng, đặc biệt là với người bệnh mang thai bị mắc tiểu đường [11]. Hợp chất α-(methylenecyclopropyl)glycin một acid amin có tác dụng hạ đường huyết chuột cũng đã được phân lập từ hạt vải [4]. 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Đối tượng nghiên cứu Hạt và vỏ quả vải thiều được thu mua tại Hưng Yên tháng 7/2011 2.2. Phương pháp nghiên cứu 2.2.1. Phương pháp điều chế các phân đoạn chiết. a, Nguyên vật liệu - Dược liệu: Vỏ và hạt quả vải được phơi sấy khô ở 50ºC. 5 -Dung môi và hóa chất: Các dung môi: n-hexan, dicloromethan, ethyl acetat, cồn, nước; và các hoá chất phục vụ cho việc định tính các lớp chất. b, Phương pháp -Dùng các kỹ thuật , phương pháp chiết, chưng cất, chiết tách bằng dung môi, lọc, sấy, làm khô… ở các điều kiện về nhiệt độ, áp suất… thích hợp để thu được các cặn chiết đạt tiêu chuẩn yêu cầu. -Khảo sát định tính các lớp chất có trong các phần cặn chiết được điều chế bằng sắc ký lớp mỏng với các hệ dung môi phù hợp, dùng UV hoặc thuốc thử thích hợp để quan sát các chất. 2.2.2. Phương pháp độc tế bào (MTT) a. Nguyên vật liệu thí nghiệm: • Mẫu thử: LCH, LCH1, LCH2, LCH3, LCH4, LCV, LCV1, LCV2, LCV3, LCV4 • Tế bào: gồm 3 dòng tế bào: - Dòng tế bào MCF-7 (tế bào ung thư vú) - Dòng tế bào Hep-G2 (tế bào ung thư gan) - Dòng tế bào A549 (tế bào ung thư phổi) • Hóa chất: - MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide) của hãng in vitrogen. - Ellepticine của hãng Sigma - DMSO của hãng sigma - Và các hóa chất khác 6 • Máy móc thiết bị: máy đọc ELISA của hãng Thermo Labsystems, kính hiển vi soi ngược, và các máy móc khác. b. Nguyên tắc: - Áp dụng phương pháp MTT được biên soạn bởi tác giả Mosmann (1983) để đánh giá độc tính trên tế bào [10]. Nguyên tắc của phương pháp như sau: MTT là thử nghiệm in vitro để đo sự tăng sinh và sống sót của tế bào. Tế bào được nuôi cấy trong một đĩa 96 giếng, đáy bằng. Hợp chất MTT 3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide, có màu vàng được thêm vào mỗi giếng và tế bào được ủ ở 37 o C, 5% CO 2 . Màu vàng này bị biến đổi thành formazan tím trong ty thể của những tế bào sống. Khả năng hấp thụ của dung dich có màu này có thể được định lượng bằng máy quang phổ kế ở bước song 540 – 600 nm. Sự biến đổi màu chỉ xảy ra khi enzyme reductase trong ty thể là hoạt động, và do đó sự chuyển đổi có thể liên quan trực tiếp đến số lượng tế bào sống sót. Chúng tôi sử dụng phương pháp này để nghiên cứu độc tính của thuốc đối với tế bào. 2.2.3. Phương pháp nghiên cứu thử tác dụng hạ đường huyết của hạt và vỏ quả vải trên chuột tăng đường huyết gây bởi alloxan a . Nguyên vật liệu thí nghiệm: - Động vật thí nghiệm: chuột nhắt trắng khoẻ mạnh, cả hai giống, trọng lượng từ 20-22 g do Viện Vệ sinh dịch tễ cung cấp. - Mẫu thử: + Hạt quả vải: 500 g dược liệu khô = 75 g cao khô + Vỏ quả vải: 500 g dược liệu khô = 120 g cao khô - Máy móc và trang thiết bị: Máy định lượng sinh hoá bán tự động SCOUT Máy li tâm lạnh HETICH 7 Ống eppendorf 1,5 ml Lồng chuột nhắt Hoá chất: Kít định lượng glucose hãng HUMAN, Alloxane tetrahydrate- SIGMA, Gliclazide (Sanofi-synthelabo b. Nguyên tắc: Gây tăng glucose huyết thực nghiệm bằng alloxan. Alloxan là tác nhân phá huỷ tế bào β đảo tuỵ, làm giảm lượng insulin trong máu và là nguyên nhân gây tăng glucose huyết. 3. THỰC NGHIỆM 3.1. Điều chế các cặn chiết 3.1.1. Xử lý mẫu Vỏ và hạt tươi được sấy khô rồi xay thành bột dùng để điều chế các mẫu thử tác dụng sinh học. 3.1.2. Điều chế các cặn chiết + Cao chiết cồn 50% hạt quả vải (LCH) : Bột hạt vải chiết 3 lần với cồn 50% (1kg dược liệu/ 3 lít cồn 50%) theo phương pháp ngâm chiết ở nhiệt độ phòng. Dịch chiết tập trung cô thành cao. Hiệu suất thu được cao khô (độ ẩm của cao là 1,7%) là 15,0% + Cao chiết cồn 50% vỏ quả vải( LCV): Bột vỏ quả vải chiết 3 lần với cồn 50% (1kg dược liệu/ 3 lít cồn 50%) theo phương pháp ngâm chiết ở nhiệt độ phòng. Dịch chiết tập trung cô thành cao. Hiệu suất thu được cao khô (độ ẩm của cao là 1,4%) là 24,0%. + Các phân đoạn chiết vỏ và hạt quả vải: Từ các cao chiết LCH và LCV đem phân bố lại trong các dung môi có độ phân cực tăng dần thu được các phân đoạn chiết tương ứng từ vỏ và hạt quả vải: Phân đoạn chiết n-hexan (LCH1, LCV1); phân đoạn chiết 8 dicloromethan (LCH2, LCV2); phân đoạn chiết ethylacetat (LCH3, LCV3); phân đoạn chiết cồn nước còn lại (LCH4, LCV4). 3.2. Thử độc tính của các cặn chiết từ vỏ và hạt quả vải trên 3 dòng tế bào ung thư vú MCF-7, ung thư gan Hep-G2 và ung thư phổi A549. Cách tiến hành: - Nuôi cấy tế bào: Các dòng tế bào được lưu giữ trong nitơ lỏng, đánh thức và duy trì trong môi trường DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) có bổ sung huyết thanh bê tươi 10%, dung dịch kháng sinh và kháng nấm 1% (penicillin 50,000 units/L và streptomycin 50 mg/L). Tế bào được nuôi cấy cho phát triển tới mức khoảng 70%, thay môi trường sạch, tế bào này được dùng làm thí nghiệm. - Mẫu thí nghiệm: Hòa mẫu thí nghiệm vào dung dịch DMSO 100% sao cho nồng độ gốc của các mẫu là 2 mg/ml. Tiếp theo pha thuốc nghiên cứu thành thang nồng độ gồm 5 nồng độ 100, 75, 50, 25, và 12,5 μg/ml. Nồng độ của thuốc thử được dùng theo tiêu chuẩn sàng lọc thuốc chống ung thư có nguồn gốc dược liệu của tác giả Teicher 1997 [2]. Ellepticine được sử dụng làm chứng dương, với nồng độ thử lần lượt là 50; 25; 12,5; 5,25; và 3,125 μM. Dung dịch DMSO 0,1% được sử dụng làm chứng âm. - Quy trình nuôi cấy: 1. Cho khoảng 2X104 tế bào/ml trong môi trường nuôi cấy. Để 2 giếng trống làm chứng trắng (blank control). 2. Các tế bào được nuôi trong môi trường ở 37oC và 5% CO2 cho phép tế bào gắn vào đáy mỗi giếng của đĩa nuôi cấy. Nuôi tế bào trong 24 giờ để tế bào ổn định. 3. Sau 24 giờ nuôi cấy, thêm 10 μl thuốc thử và thuốc chuẩn ở các nồng độ khác nhau vào mỗi giếng. Mỗi nồng độ được lặp lại ở 2 giếng. Lắc nhẹ đĩa nuôi cấy để thuốc được tan hoàn toàn trong môi trường. 4. Ủ đĩa nuôi cấy từ 72 giờ (37oC, 5% CO2) cho phép thuốc phát huy tác dụng. 9 Quan sát tế bào hàng ngày bằng kính hiển vi. 5. Chuẩn bị dung dịch MTT nồng độ 5mg/ml. 6. Thêm 20 μl dung dịch MTT vào mỗi giếng của đĩa nuôi cấy. Lắc nhẹ cho MTT khuếch tán đều trong môi trường nuôi cấy. 7. Ủ 37oC trong 3 giờ để MTT được chuyển hóa. 8. Loại bỏ môi trường trong các giếng của đĩa nuôi cấy. 9. Hoàn trả formazan (sản phẩm chuyển hóa MTT) bằng 100 μl DMSO. Lắc kỹ để formazan có thể tan hoàn toàn. 10. Đọc mật độ quang ở bước sóng 540 nm. Mật độ quang sẽ phản ánh số lượng tế bào sống sót. - % tế bào sống sau khi đã xử lý thuốc so với chứng trắng được tính theo công thức như sau: % tế bào sống = [OD540 của tế bào được xử lý] / [OD540 của tế bào không được xử lý thuốc] x 100% - Cách tính giá trị IC50: Giá trị IC50 được tính bằng phân tích hồi quy không tuyến tính của đường cong đáp ứng liều tương ứng, sử dụng phần mềm Exell. 3.3. Thử tác dụng hạ đường huyết của hạt và vỏ quả vải trên chuột tăng đường huyết gây bởi alloxan Cách tiến hành: - Chuột thí nghiệm được nuôi ổn định 5 ngày trước khi thí nghiệm. Ngày thứ 1: Chuột đã được nhịn đói 16 giờ, gây tăng glucose huyết bằng cách tiêm tĩnh mạch đuôi chuột dung dịch alloxan pha trong nước muối sinh lý với tỷ lệ thích hợp để đạt liều 65 mg/kg. Chuột sinh lý được tiêm nước muối sinh lý. 10 [...]... thấy có tác dụng giảm sự tăng glucose huyết có ý nghĩa thống kê, tác dụng lần lượt là 6,5% và 13,9% (P > 0,05) - Như vậy kết quả này hoàn toàn phù hợp với các tài liệu đã công bố về tác dụng hạ đường huyết của hạt vải Theo Kuang dịch chiết nước của hạt vải với liều (5 g/kg) có tác dụng giảm lượng đường trong máu của chuột bình thường và chuột đái tháo đường gây bởi alloxan, tác dụng hạ đường huyết này... 58,1 μg/ml + Đã thử tác dụng hạ đường huyết của 2 mẫu cao chiết LCH, LCV, trong đó mẫu cao chiết LCH cho tác dụng hạ đường huyết trên chuột gây đái tháo đường bởi alloxan Theo đó cao chiết cồn 50% hạt vải khi cho chuột uống liều 1,5 g và 3 g cao/ kg thể trọng chuột/ ngày (tương đương với 10 g và 20 g dược liệu khô), trong 8 ngày liên tục có tác dụng giảm rõ rệt sự tăng glucose huyết lần lượt là 22,0%... nghĩa thống kê (P < 0,05) so với lô chứng gây bệnh Tác dụng này cũng gần tương đương với tác dụng giảm sự tăng glucose huyết của gliclazid ở liều 200 mg/ kg trong cùng điều kiện thí nghiệm 19 3 Đã đăng 1 bài báo trên tạp chí Dược liệu: Tr 239-244, số 4, tập 17, năm 2012 Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết và hoạt tính độc tế bào của hạt và vỏ quả vải TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt 1 Đỗ Huy... hạ đường huyết của hạt và vỏ quả vải trên chuột tăng đường huyết gây bởi alloxan Cho chuột uống thuốc 8 ngày, đến ngày thứ 8, sau khi uống thuốc 1 giờ, lấy máu vào ống eppendorf 1,5 ml, ly tâm ở 3000 vòng/ phút, lấy huyết thanh định lượng glucose huyết Kết quả được trình bày ở bảng 5 và 6 Bảng 5 Nồng độ glucose huyết ở tất cả các lô thử trước và sau khi uống thuốc (mg %) TT Lô chứng gây Lô hạt quả vải. .. _ Bouchardat _ _ Qua bảng trên ta thấy trong hạt quả vải có chứa các nhóm chất Flavonoid, Phytosterol, Carotenoid, Chất béo, Acid amin, Đường khử, Tanin, Saponin 13 Trong hạt quả vải có chứa các nhóm chất Flavonoid, Phytosterol, Carotenoid, Chất béo, Đường khử, Tanin, Saponin 4.3 Kết quả thử tác dụng dược lý 4.3.1 Kết quả thử độc tính của hạt và vỏ quả vải trên 3 dòng tế bào ung thư vú MCF-7, ung thư... glibenclamid và phenformin [8] Ở Trung Quốc hạt vải đã được phát triển thành thuốc để điều trị bệnh đái tháo đường trên lâm sàng, đặc biệt là với người bệnh mang thai bị đái tháo đường [11] 5 KẾT LUẬN 1 Chúng tôi đã điều chế được các mẫu cao chiết từ hạt và vỏ quả vải: LCH, LCV, LCH1, LCV1, LCH2, LCV2, LCH3, LCV3, LCH4, LCV4 2 Thử tác dụng dược lý + Đã thử tác dụng độc tế bào của các mẫu cao chiết trên dòng 3... công thức mc (100 −χc ) md (100 −χd ) Với mc, χc là khối lượng, độ ẩm của cặn chiết với độ ẩm tương ứng md, χd là khối lượng, độ ẩm dược liệu khô ban đầu 4.2 Kết quả định tính thành phần hóa học của hạt và vỏ quả vải Bảng 2: Kết quả định tính thành phần hóa học của hạt và vỏ quả vải STT Nhóm chất Phản ứng định tính Kết quả Kết luận Hạt Coumarin ++ ++ +++ ++ ++ Phản ứng với FeCl3 5% 2 +++ Phản ứng với... ly tâm lấy huyết thanh để định lượng nồng độ glucose huyết Loại bỏ những chuột không đạt điều kiện thí nghiệm Chia đều các chuột đã được gây tăng glucose huyết thành các lô: + lô chứng sinh lý: uống nước cất + lô chứng bệnh lý: uống nước cất + lô uống cao khô hạt quả vải liều 1,5g cao/ kg thể trọng chuột + lô uống cao khô hạt quả vải liều 3 g cao/ kg thể trọng chuột + lô uống cao khô vỏ quả vải liều... có tác dụng gây độc tế bào trên ba dòng tế bào Hep-G2, MCF-7 và A549 đều được phân lập từ các phân đoạn phân cực như ethylacetat và n-butanol Tuy nhiên trong thử nghiệm này, các phân đoạn chiết phân cực như ethylacetat và nước lại hoàn toàn không thể hiện tác dụng này mà lại thể hiện ở phân đoạn kém phân cực hơn là nhexan Để làm sáng tỏ điều này cần có thêm các nghiên cứu sâu hơn 4.3.2 Thử tác dụng hạ. .. nồng độ glucose huyết trước và sau khi uống thuốc ở các lô TT Các lô thí nghiệm Glucose huyết % so với trước % giảm (mg%) Trước 1 Lô chứng sinh lý 2 Lô chứng gây bệnh 3 Sau 62,2 ±3,7 64,6 ± 5,3 202,8 ± 18,5 194,7 ± 17,3 96,7 ± 2,5 Lô hạt quả vải liều 1,5 g 204,1 ± 19,0 145,0 ± 16,0 75,4± 5,9 22,0 73,4 ± 7,0 24,1 90,4 ± 4,8 6,5 83,3 ± 6,6 13,9 71,0± 5,03 26,6 cao/kg 4 (< 0,05) Lô hạt quả vải liều 3 g 208,7 . Chúng tôi sử dụng phương pháp này để nghiên cứu độc tính của thuốc đối với tế bào. 2.2.3. Phương pháp nghiên cứu thử tác dụng hạ đường huyết của hạt và vỏ quả vải trên chuột tăng đường huyết gây. đường huyết của hạt vải. Theo Kuang dịch chiết nước của hạt vải với liều (5 g/kg) có tác dụng giảm lượng đường trong máu của chuột bình thường và chuột đái tháo đường gây bởi alloxan, tác dụng. hạt quả vải là một dược liệu đã được các tác giả nước ngoài nghiên cứu chứng minh có tác dụng ức chế u và hạ đường huyết trên thực nghiệm và trên người. Một số nghiên cứu mới đây cho thấy hạt