x 3.4.6.3. Tiến hành phản ứng 34 3.4.6.4. Đọc kết quả 34 3.5. Các chỉ tiêu theo dõi 35 3.6 Xử lý số liệu 36 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 37 4.1. Kết quả lựa chọn chủng E. coli làm auto-vaccine 37 4.2. Phƣơng pháp bố trí thí nghiệm 38 4.3. Hiệu giá kháng thể 39 4.3.1. Thí nghiệm 1 39 4.3.1.1. Lần rút máu thứ nhất 40 4.3.1.2. Lần rút máu thứ hai 40 4.3.1.3. Lần rút máu thứ ba 41 4.3.2. Thí nghiệm 2 43 4.3.2.1. Lần rút máu thứ nhất 43 4.3.2.2. Lần rút máu thứ hai 44 4.3.2.3. Lần rút máu thứ ba 44 4.3.3. Kết quả tổng kết hiệu giá kháng thể 46 4.4. Tỷ lệ heo tiêu chảy 47 4.4.1. Thí nghiệm 1 47 4.4.2. Thí nghiệm 2 48 xi 4.5. Tăng trọng tuyệt đối 50 4.5.1. Thí nghiệm 1 50 4.5.2. Thí nghiệm 2 51 4.5.3. Tổng kết tăng trọng trung bình tuyệt đối của các lô qua 2 thí nghiệm 52 4.6. Các chỉ số khác 52 4.7. Kết quả chung 52 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 54 5.1. Kết luận 54 5.2. Đề nghị 54 6. TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 7. PHỤ LỤC 57 xii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT E. coli: Escherichia coli EMB: Eosin Methylene Blue Lactose KIA: Kligler Iron Agar TSA: Tryptone Soya Agar TSB: Tryptone Soya Broth SCA: Simmons Citrate Agar TN: Thí Nghiệm KT: Kháng Thể IMViC: Indol – Methyl Red – Voges Proskauer – Citrate xiii DANH SÁCH CÁC HÌNH HÌNH TRANG Hình 3.1. Lấy mẫu phân tiêu chảy ở heo con 22 Hình 3.2. Phân lập E. coli trên môi trƣờng EMB 23 Hình 3.3. Vi khuẩn E. coli lên men lên men đƣờng sinh hơi trong môi trƣờng KIA 24 Hình 3.4. Vi khuẩn E. coli hình que, màu hồng Gram âm 24 Hình 3.5. Phản ứng Indol 25 Hình 3.6. Phản ứng Methyl Red 25 Hình 3.7. Phản ứng Voges Proskauer 26 Hình 3.8. Phản ứng Citrate 26 Hình 3.9. Rút máu heo con 33 xiv DANH SÁCH CÁC BẢNG BẢNG TRANG Bảng 2.1. Tỷ lệ các vi sinh vật gây tiêu chảy trên heo 8 Bảng 3.1. Phân lô và liều tiêm heo con 31 Bảng 4.1. Hiệu giá kháng thể của 3 lô qua 3 lần rút máu (thí nghiệm 1) 39 Bảng 4.2. Hiệu giá kháng thể của 3 lô qua 3 lần rút máu (thí nghiệm 2) 43 Bảng 4.3. Tổng kết hiệu giá kháng thể của 2 thí nghiệm 46 Bảng 4.4. Kết quả heo bị tiêu chảy ở thí nghiệm 1 47 Bảng 4.5. Kết quả heo bị tiêu chảy ở thí nghiệm 2 48 Bảng 4.6. Tỷ lệ tiêu chảy của heo toàn thí nghiệm 49 Bảng 4.7. Kết quả thống kê tăng trọng trung bình tuyệt đối của 3 lô (TN1) 50 Bảng 4.8. Kết quả thống kê tăng trọng trung bình tuyệt đối của 3 lô (TN2) 51 Bảng 4.9. Tăng trọng trung bình tuyệt đối của các lô qua cả 2 TN 52 xv DANH SÁCH CÁC BIỂU ĐỒ BIỂU ĐỒ TRANG Biểu đồ 4.1. Hiệu giá kháng thể trung bình của 3 lô ở lần rút máu thứ nhất (thí nghiệm 1) 40 Biểu đồ 4.2. Hiệu giá kháng thể trung bình của 3 lô ở lần rút máu thứ hai (thí nghiệm 1) 40 Biểu đồ 4.3. Hiệu giá kháng thể trung bình của 3 lô ở lần rút máu thứ ba (thí nghiệm 1) 41 Biểu đồ 4.4. Hiệu giá kháng thể trung bình của 3 lô qua 3 lần rút máu (TN1) 42 Biểu đồ 4.5. Hiệu giá kháng thể trung bình của 3 lô ở lần rút máu thứ nhất (thí nghiệm 2) 43 Biểu đồ 4.6. Hiệu giá kháng thể trung bình của 3 lô ở lần rút máu thứ hai (thí nghiệm 2) 44 Biểu đồ 4.7. Hiệu giá kháng thể trung bình của 3 lô ở lần rút máu thứ ba (thí nghiệm 2) 44 Biểu đồ 4.8. Hiệu giá kháng thể trung bình của 3 lô qua 3 lần rút máu (TN2) 45 Biểu đồ 4.9. Tỷ lệ heo bị tiêu chảy ở thí nghiệm 1 47 Biểu đồ 4.10. Tỷ lệ heo bị tiêu chảy ở thí nghiệm 2 48 Biểu đồ 4.11. Tăng trọng trung bình tuyệt đối của 3 lô (thí nghiệm 1) 50 Biểu đồ 4.12. Tăng trọng trung bình tuyệt đối của 3 lô (thí nghiệm 2) 51 xvi xvii DANH SÁCH CÁC SƠ ĐỒ SƠ ĐỒ TRANG Sơ đồ 3.1. Quy trình phân lập và định danh vi khuẩn E. coli 27 Sơ đồ 3.2. Quy trình tạo dịch huyền phù kháng nguyên E. coli 29 Sơ đồ 3.3. Tóm tắt bố trí thí nghiệm 31 Sơ đồ 3.4. Lịch trình thực hiện của 1 lần thí nghiệm 31 Sơ đồ 3.5. Quy trình tạo dịch huyền phù kháng nguyên E. coli 34 Sơ đồ 3.6. Cách tiến hành phản ứng ngƣng kết xác định hiệu giá kháng huyết thanh 35 1 Chƣơng 1 MỞ ĐẦU 1.1. Đặt vấn đề Trong chăn nuôi nói chung và chăn nuôi heo nói riêng, việc phòng chống dịch bệnh là vô cùng cần thiết đối với đàn vật nuôi. Và với mô hình chăn nuôi công nghiệp, nếu không chú ý kiểm soát thì dịch bệnh rất dễ xảy ra và dễ bùng phát thành đại dịch. Tiêu chảy là một trong số các bệnh xảy ra nhiều và rộng, gây tổn thất không nhỏ cho đàn heo. Và một trong những nguyên nhân của bệnh, đặc biệt ở heo con sau cai sữa, là vi khuẩn Escherichia coli, với đặc điểm xảy ra lẻ tẻ quanh năm và bùng phát mạnh lúc giao mùa, khi thời tiết không ổn định (Nguyễn Khả Ngự & ctv, 1998). Bệnh có tử số không cao nhƣng tăng trọng hằng ngày có thể giảm và gây thiệt hại đáng kể cho nhà chăn nuôi (Taylor, 1995). Trong thực tế hiện nay, việc phòng trị tiêu chảy do E. coli chủ yếu dựa vào thuốc kháng sinh, liệu pháp này đang bộc lộ những hạn chế nhƣ hiện tƣợng đề kháng kháng sinh và có thể ảnh hƣởng đến sức khỏe cộng đồng. Nghiên cứu tìm kiếm vaccine hiệu quả cho việc phòng tiêu chảy trên heo sau cai sữa do E. coli là hết sức cần thiết. Vi khuẩn E. coli có nhiều type kháng nguyên nên việc nghiên cứu điều chế một loại vaccine phù hợp với trại chăn nuôi luôn mang lại hiệu quả cao. . phân tiêu chảy ở heo con 22 Hình 3 .2. Phân lập E. coli trên môi trƣờng EMB 23 Hình 3.3. Vi khuẩn E. coli lên men lên men đƣờng sinh hơi trong môi trƣờng KIA 24 Hình 3.4. Vi khuẩn E. coli. Kết luận 54 5 .2. Đề nghị 54 6. TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 7. PHỤ LỤC 57 xii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT E. coli: Escherichia coli EMB: Eosin Methylene Blue Lactose KIA: Kligler Iron. vaccine hiệu quả cho việc phòng tiêu chảy trên heo sau cai sữa do E. coli là hết sức cần thiết. Vi khuẩn E. coli có nhiều type kháng nguyên nên việc nghiên cứu điều chế một loại vaccine phù