Bên cạnh đó lan là một trong những loại hoa được ưa chuộng nhất vì hình dáng, màu sắc, kích thước phong phú và đa dạng nên chúng được sản xuất khá phổ biến.. Việt Nam là một quốc gia thu
Trang 1DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT
BA 6-benzylaminopurine NAA - naphthaleneacetic acid
MS Murashige và Skoog (1962) TDZ 1 - phenyl 1 - 3 - (1,2,3 - thiadiazol - 5 - yl) - urea ABA Acid Abscisic
DNA Deoxyribonucleotide acid RNA Ribonucleotide acid
GA3 Gibberellin
Trang 2PHẦN 1: MỞ ĐẦU
1.1 Đặt vấn đề
Ngày nay hoa kiểng không những đóng vai trò quan trọng trong đời sống tinh thần mà còn ảnh hưởng sâu xa đến tâm hồn con người và làm đẹp cho cảnh quan môi trường, do đó quan tâm phát triển hoa kiểng là vấn đề cần thiết Bên cạnh đó lan là một trong những loại hoa được ưa chuộng nhất vì hình dáng, màu sắc, kích thước phong phú và đa dạng nên chúng được sản xuất khá phổ biến
Hiện nay nhu cầu về hoa lan trên thị trường thế giới rất lớn, ngày càng tăng Các nước có truyền thống sản xuất hoa lan như Anh, Pháp, Mỹ, Thái Lan, Đài Loan , hàng năm thu được hàng chục triệu đô la Mỹ từ nguồn xuất khẩu hoa lan Ở Việt Nam hoa lan là một nghề cho tỷ suất lợi nhuận cao
Việt Nam là một quốc gia thuộc vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, có đủ điều kiện thuận lợi cho cây lan phát triển như: ẩm độ, nhiệt độ, cường độ ánh sáng…., đặc
biệt là thích hợp đối với các nhóm lan: Dendrobium, Cymbidium, Oncidium,… .Nên
vừa qua sở Nông nghiệp-Phát triển Nông thôn Thành phố Hồ Chí Minh đã tổ chức hội thảo về hiện trạng và hướng phát triển hoa lan trên địa bàn, nhằm đưa cây hoa lan thành cây chủ lực trong cơ cấu nông nghiệp của thành phố (ĐCSVN, 27/6/2005)
Việc sản xuất hoa lan ở nước ta hiện nay chỉ mới đáp ứng được nhu cầu thấp chủ yếu phải nhập từ các nước khác như: Thái Lan, Đài Loan….Trước tình hình trên
và cũng nhằm đưa tiến bộ của kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào vào công tác giống, góp
phần phát triển nghề trồng lan trên qui mô rộng, việc ứng dụng nhân giống in vitro
trên cây lan là điều cần thiết hiện nay ở nước ta Do đó chúng tôi thực hiện đề tài:
"Ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng đến quá trình nuôi cấy in vitro của hai
giống lan Dendrobium và Cymbidium"
Trang 31.2 Mục đích nghiên cứu
Mục đích của đề tài là xác định môi trường nuôi cấy thích hợp để đạt được kết
quả nhân giống in vitro cao nhất trên 2 giống lan Cymbidium và Dendrobium
1.3 Yêu cầu
Quan sát sự phát sinh phôi soma, protocorm và chồi của 2 giống lan
Dendrobium và Cymbidium
Quan sát sự sinh trưởng và phát triển của chồi lan in vitro
Trang 4PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.1 Giới thiệu chung về cây hoa lan
2.1.1 Tình hình sản xuất lan trên thế giới và ở Việt Nam
2.1.1.1 Tình hình sản xuất lan trên thế giới
Hiện nay nhu cầu về hoa lan trên thị trường thế giới rất lớn, ngày càng tăng và
đã mang lại lợi nhuận kinh tế cao:
*Ở Châu Âu:
- Năm 1994, Mỹ nhập từ Thái Lan 16,4 triệu cành, từ Singapore 289.000 cành
lan Dendrobium
- Holland là một quốc gia duy nhất ở Châu Âu có công nghiệp trồng lan xuất khẩu, do trồng trong nhà kính nên Holland có thể xuất khẩu hoa quanh năm nhất là
Cymbidium
- Italia là quốc gia nhập khẩu hoa lan lớn nhất Châu Âu Năm 1993, nhập 75,3 triệu cành, chủ yếu từ các nước: Thái Lan, Holland , Singapore …
- Đức và Pháp là hai quốc gia nhập khẩu lan đứng thứ 2 và thứ 3 Châu Âu
*Ở Châu Á:
- Nhật là quốc gia nhập khẩu đứng đầu thế giới Theo thống kê, tại Thái Lan, Singapore, Malaysia dành 600 ha đất trồng lan để xuất khẩu sang Nhật, chủ yếu là
Dendrobium, Oncidium, Cymbidium, Phalaenopsis,…
- Thái Lan là nước xuất khẩu lan đứng đầu thế giới, chủ yếu là lan
Dendrobium, xuất khẩu hơn 50 quốc gia trên thế giới với giá 1 - 3 USD / cành, có khi
8 - 10 USD / cành, những giống quý có thể lên đến hàng trăm USD
Ngày nay, bằng nhiều kỹ thuật khác nhau người ta đã tạo ra được nhiều giống
lan mới như: Dendrobium ayaka, Dendrobium edians beauty, Dendrobium sungould
(Trích Nguyễn Thị Hồng Nhật, 2004)
2.1.1.2 Tình hình sản xuất lan ở Việt Nam
- Tại Việt Nam ngành sản xuất kinh doanh hoa kiểng nói chung và lan nói riêng trong vòng 10 năm trở lại đây rất phát triển, với nhiều chủng loại Tham gia sản xuất gồm nhiều thành phần kinh tế (cá thể, tập thể, nhà nước, liên doanh hoặc100% vốn đầu tư nước ngoài) Tuy nhiên sản xuất còn chưa được áp dụng khoa học kỹ thuật
Trang 5nên mặc dù đa dạng nhưng không đạt về tiêu chuẩn, số lượng và chất lượng do đó tính
cạnh tranh còn thấp
*Tại TP.HCM:
- Trong các chủng loại sản phẩm hoa kiểng, hoa lan xem là nhóm hoa có giá
trị kinh tế cao, trong đó lan cắt cành đem lại lợi nhuận khá cao (có thể đạt 500 triệu – 1 tỉ đồng / ha / năm) nhưng vốn đầu tư ban đầu vẫn còn cao
(600 – 800 triệu đồng / ha), chủ yếu là phần vốn đầu tư cho cây giống Trong đó nhóm
Mokara và Dendrobium được trồng nhiều nhất
- Theo Trung tâm Nghiên cứu khoa học kỹ thuật và khuyến nông TP.HCM,
trong thời gian qua diện tích trồng hoa lan trong thành phố tăng nhanh, từ 20 ha năm
2003 lên 50 ha năm 2004 và khoảng 80 ha năm 2005
- Để đưa hoa lan trở thành một trong những cây chủ lực trong cơ cấu kinh tế
nông nghiệp trong những năm tới, TP.HCM đề ra mục tiêu phát triển diện tích trồng
hoa lan lên 200 ha vào năm 2010 và một số giải pháp chính về giống, khoa học kỹ
thuật, thị trường tiêu thụ, đào tạo nguồn nhân lực, chính sách hỗ trợ
(ĐCSVN, 27/6/2005)
*Tại Đà Lạt:
- Cây lan Cymbidium đã được nuôi trồng tại Đà Lạt từ rất lâu, chủ yếu để tiêu
khiển Tại đây, ngoài những loài tự nhiên, các biến chủng, còn có nhiều giống nhập
nội nuôi trồng
- Từ năm 1977, sau khi thành lập tổ Hoa Lan Xuất Khẩu, phong trào trồng lan
đã được phát triển mạnh
- Đến năm 1985, đã xuất khẩu được trên 15.000 cành hoa Cymbidium
- Hiện nay nhu cầu hoa lan đang tăng nhanh, trong khi đó mức độ phát triển
còn hạn chế Đó là do chưa có những đầu tư nghiên cứu về đối tượng này như: vấn đề
khoa học, chọn tạo giống và kỹ thuật nuôi trồng…do đó không thể hiểu rõ và đánh giá
đúng đắn tiềm năng và triển vọng nguồn lợi này
- Xu hướng hiện nay đang tập trung vào các giống nhập nội, còn lại các loại
lan nội địa ít được chú ý Mặc dù các loài biến chủng nội địa có giá trị rất cao, có thể
đáp ứng được nhu cầu xuất khẩu Như vậy cơ sở để phát triển nghề trồng lan xuất
khẩu vẫn phải chú trọng vào cây lan nội địa, nhất là chọn tạo giống mới từ cây lan nội
(Trích Dương Ngọc Bích Quyên, 2002)
Trang 62.1.2 Giới thiệu chung về giống lan Cymbidium
2.1.2.1 Phân loại
Trong hệ thống phân loại thực vật của thế giới ngày nay, người ta đã xếp riêng
Cymbidium vào một chi (Otto Swartz, 1799) Trong khóa phân loại của
Lindley - Bentham - Brieger năm 1983, chi Cymbidium thuộc tông phụ Cymbidinae,
tông Dendreae, phân họ Orchidoideae
Theo tài liệu về thực vật ở Đông Dương, từ năm 1932, Henri Lecompte cho
rằng chi này có 120 loài Gần đây, năm 1978 Jean Carmard sắp xếp lại và xác định có
khoảng 60 loài
Theo những nhà phân loại học Việt Nam như Phạm Hoàng Hộ, Võ Văn Chi
đã giới thiệu ở nước ta có khoảng 12 loài:
- Cymbidium aloifolium Swartz (lan lô hội)
- Cymbidium cyperifolium (thanh lan)
- Cymbidium dayanum Reichb f (xích ngọc)
- Cymbidium devonianum Paxt (gấm ngũ hồ)
- Cymbidium eburneum Reichb (bạch lan)
- Cymbidium ensifolium Swartz (mặc lan)
- Cymbidium erythrostylum Lindl (bạch hồng)
- Cymbidium giganteum Wall (hoàng lan)
- Cymbidium insigne Rolfe (hồng lan)
- Cymbidium lancifolium Hook f
- Cymbidium polanei Gagn (tử cán)
- Cymbidium munronianum King et plant
2.1.2.2 Đặc điểm hình thái
- Lan Cymbidium là loài thân thảo, đa niên, đẻ nhánh hàng năm tạo thành
những bụi nhỏ
- Rễ: mọc bám trên vỏ cây, mặt đất hoặc ăn sâu trong bọng cây, trong đất mùn
Rễ mới thường chỉ mọc ở cây con, cây mẹ khó ra rễ mới mà chỉ thấy phân nhánh từ củ
rễ
- Thân (căn hành): thường ngắn, nối những củ lan với nhau Các củ lan thực
chất là những cành ngắn của căn hành Củ già, khi bị tách khỏi căn hành cũ, có thể
Trang 7mọc ra đoạn căn hành mới, từ đó mọc lên những cây con Do đó người ta xếp
Cymbidium vào nhóm lan đa thân (sympodial)
- Củ lan (giả hành): thường có dạng con quay hay dạng hột xoài, đường kính từ
1 cm đến 15 cm, củ thường tươi và được bọc trong các bẹ lá
- Lá: thường có hai dạng: dạng vảy đính theo một đoạn căn hành và dạng thực đính trên giả hành
- Chồi hoa: thường xuất hiện bên dưới giả hành, trong các nách lá, tách các bẹ già, đâm ra bên ngoài Thông thường, mỗi giả hành chỉ cho hoa một lần
- Cọng phát hoa: không phân nhánh, dựng đứng hay buông thõng Chiều dài của phát hoa từ 10 đến hơn 100 cm Cành hoa mang từ vài đến vài chục búp hoa xếp luôn phiên theo đường xoắn ốc
- Hoa Cymbidium lưỡng tính, nhị đực và nhụy cái cùng gắn chung trên một trụ
gọi là trục hợp nhụy, hình bán trụ hơi cong về phía trước Nhị ở trên cùng, mang
2 khối phấn màu vàng, có gót dính như keo Khối phấn được đậy bởi một nắp màu
trắng ngà dễ mở rời, cấu trúc này bắt buộc trong tự nhiên do hoa Cymbidium chỉ thụ
phấn được nhờ côn trùng
- Sau khi thụ phấn, hoa xoay dần về vị trí cũ, bầu noãn phình lên tạo thành quả Quả lan là một nang có 3 góc, bên trong có chứa hàng trăm ngàn hạt Khi chín, quả
mở theo 3 đường góc và gieo vào không khí những hạt như bụi phấn màu vàng lụa Khi rơi vào nơi có điều kiện ẩm độ, ánh sáng thích hợp và có nấm cộng sinh tham gia, hạt sẽ nẩy mầm phát triển thành cây mới
2.1.2.3 Điều kiện sinh thái
Cymbidium có những tính chất rất đặc biệt: thời gian ra hoa dài (trung bình 12
tháng), khả năng phát triển rất mạnh, có hình dáng, màu sắc, kích thước phong phú và
đa dạng
Các loài Cymbidium sống trong môi trường mát cây cần nhiều ánh sáng trong
suốt thời gian trong năm, nhưng cây không chịu được ánh sáng trực xạ nên phải che bóng để giữ độ chiếu sáng thích hợp
Cymbidium cần nhiều nước trong mùa sinh trưởng, cần tưới nước nhẹ nhàng và
thường xuyên bón phân đầy đủ, từ lúc cây phát triển cũng như lúc ra hoa và phân chia các khóm giả hành
Trang 8Về nhiệt độ: loài lan này sống trong môi trường lạnh nên có chế độ nhiệt rất đặc biệt: 150C vào mùa đông và 200C vào mùa hè, biên độ ngày và đêm từ 6 - 70C cần cho ra hoa Khi các giả hành phát triển, nhiệt độ về đêm phải từ 6 - 120C liên tục từ
3 - 4 tuần
Về ẩm độ: bộ rễ của Cymbidium khác xa bộ rễ của các loài lan ký sinh
(epiphyte) Chúng đòi hỏi rễ luôn luôn ẩm nên phải tưới trong mọi thời gian trong năm, chỉ cho giá thể vừa kịp khô giữa hai lần tưới Ẩm độ thích hợp từ 60-70% (Trích Phan Thị Tuyết Hằng, 2005)
2.1.3 Giới thiệu chung về giống lan Dendrobium
2.1.3.1 Phân loại
Phong lan có vùng phân bố rộng lớn, trải dài từ đường xích đạo cho đến Bắc
cực, từ đồng bằng cho đến các vùng núi băng tuyết Họ phong lan (Orchidaceae) với
750 chi và hơn 25000 loài là họ lớn thứ hai sau họ cúc (Asteraceae) trong ngành hạt kín (Angiospermae) và cũng là họ lớn nhất trong lớp một lá mầm
Việc phân loại phong lan khá phức tạp Theo truyền thống cổ điển các nhà
khoa học trước đây phân loại Dendrobium thuộc tông Epidendreae, họ phụ Epiden droideae, phân họ Orchidaceae (Trích Nguyễn Thị Hồng Nhật, 2004)
Theo Nguyễn Xuân Linh (1998) phân loại lan Dendrobium như sau:
- Dendrobium crassinode (Hoàng thảo u lồi)
- Dendrobium draconis (Hoàng thảo nhất điểm hồng)
- Dendrobium farmeri (Hoàng thảo thủy tiên)
- Dendrobium hercoglossum (Hoàng thảo tím huế)
- Dendrobium heterocrrpun (Hoàng thảo nhất điểm hoàng)
- Dendrobium (Hoàng thảo dẹt)
- Dendrobium parciflorum (Hoàng thảo xương cá)
- Dendrobium parisshii (Hoàng thảo tím hồng)
- Dendrobium parishii (Hoàng thảo hạc vĩ)
- Dendrobium primulim (Hoàng thảo long tu)
- Dendrobium pumilum (Hoàng thảo phù dung)
2.1.3.2 Đặc điểm hình thái
- Rễ: thuộc loại rễ bì sinh, chung quanh rễ thật được bao bọc bởi một lớp mô xốp (màng) giúp cây dễ dàng hút nước, muối khoáng và ngăn chặn ánh sáng mặt trời
Trang 9gay gắt Chóp rễ có màu xanh lá cây, ở phần rễ có các sắc lạp không bị ngăn bởi mô xốp nên có thể giúp cây quang hợp
- Thân: lan Dendrobium thuộc loài đa thân có giả hành rất dài, hình trụ, hình
múi hay hình dẹt, có nhiều đốt thân Thân có dạng mọc thẳng hoặc rũ xuống
- Lá: xếp thành hai dãy đối nhau trên thân (lá đối), lá có hình xoang và các gân
lá chính chạy song song các khe lõm xuống, lá lan có thể sống dai hay dễ rụng
- Các cụm hoa: mọc từ thân thành từng chùm, trên một cành hoa có những chiếc hoa đơn xếp theo hình xoắn ốc, các hoa đơn liền cành nhờ cuống Cuống kéo dài cho tới bầu hoa tạo ra ba lá noãn (bầu hoa được tạo thành bởi 3 lá đài, 3 cánh hoa và 1 trụ hoa) Cột nhị nhụy ngắn
2.1.3.3 Điều kiện sinh thái
Cây lan Dendrobium có biên độ nhiệt độ rất rộng, người ta chia làm 2 hai nhóm
chính:
- Nhóm ưa lạnh: nhiệt độ lý tưởng là 150C sống chủ yếu ở vùng cao nguyên trên 1000m Những loài lan này có thể ra hoa ở nhiệt độ cao
- Nhóm lan ưa nóng: nhiệt độ thích hợp nhất là 250C Ngoài ra còn có giống lan thích hợp ở nhiệt độ 200C có thể ra hoa ở vùng nóng và vùng lạnh
- Ẩm độ: thích hợp ở ẩm độ 50 - 70%
- Ánh sáng: có thể nói Dendrobium là loài ưa sáng (60 - 70%), có những loài
yêu cầu ánh sáng tới 80 - 90%
Hình 2.1: Hai giống lan Cymbidium và Dendrobium thực hiện trong đề tài
Trang 10
Hình 2.2: Một số loại hoa lan Dendrobium
