Chuẩn hóa quy trình kiểm định vắc xin cúm ở việt nam

Bên cạnh đó, viện có 6 Khoa chuyờn môn Khoa kiểm định vắc xin virus, Khoa kiểm định vắc xin vi khuẩn, Khoa kiểm định Hoá-Lý‎ thức phòng bệnh, Khoa Sinh phẩm y tế, Khoa Môi trường thựcngh

BÀI LUẬN

1 Lí DO LỰA CHỌN LĨNH VỰC, ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU

1.1 Lựa chọn lĩnh vực nghiên cứu:

Đối phó với bệnh tật từ lâu đã là một trong những hoạt động mang tínhsinh tồn của con người Khoa học càng phát triển, con người càng có điều kiệnnâng cao khả năng đối phó với bệnh tật Cao hơn nữa, không chỉ đối phó thụđộng bằng điều trị mà con người đã chủ động phòng chống bệnh tật qua các biệnpháp y tế dự phòng mà tiêu biểu nhất là sự ra đời và phát triển của vắc xin

Vắc xin học được mở đầu bằng thành công vào cuối thế kỷ 18 của bác sĩthú y Jenner E (Anh) với vắc xin làm từ chủng đậu bũ tiờm cho cậu bé 13 tuổiPhillip J Hiện nay, Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) đã công nhận tiêm vắc xin làphương cách bảo vệ hiệu quả, giúp nhân loại tránh được nhiều bệnh truyềnnhiễm

Trong 2 thế kỷ qua, vắc xin là loại dược phẩm đặc biệt, đã góp phần rấtlớn đẩy lùi nhiều bệnh tật và giảm tỷ lệ tử vong cho con người Vắc xin đã được

sử dụng trên toàn thế giới, góp phần thanh toán một số bệnh truyền nhiễm và làmgiảm đáng kể số mắc, chết của nhiều loại bệnh tật khác, làm giảm đáng kể gánhnặng của công tác điều trị Tiêm chủng vắc xin trở thành phương tiện hiệu quảnhất cho công tác chủ động phòng chống bệnh

Việt Nam là một nước thuộc vùng nhiệt đới với mô hình bệnh tật chủ yếu

là các bệnh truyền nhiễm, dịch bệnh dễ xảy ra do thay đổi môi trường, lối sống,giao lưu quốc tế tăng Do đó, một trong những biện pháp cơ bản để phòng chốngcác dịch bệnh là sử dụng vắc xin đặc hiệu

Nhưng vấn đề an toàn của vắc xin, chất lượng của vắc xin đã, đang và sẽ

là thách thức rất lớn với các nhà khoa học Việt nam cũng như trên toàn thế giới.Lịch sử phát triển vắc xin đã phải ghi nhận một số “thảm họa” do vắc xin [3].Những phản ứng không mong muốn của vắc xin cho người đang là mặt trái, gõycản trở cho công tác vận động tiêm chủng

Ngày nay, cùng với sự phát triển không ngừng của khoa học và công táckiểm định đánh giá chất lượng vắc xin, mặc dù tỷ lệ xuất hiện những phản ứngphụ nghiêm trọng do vắc xin đã giảm đi rất nhiều, nhưng vấn đề xác định đúngnguyờn nhân và cách khắc phục vẫn là những khó khăn không nhỏ đối với mọiquốc gia Tuy vậy, trước sự phát triển nhanh chóng của đất nước trong xu thế hộinhập và hoà bình, nhu cầu phòng bệnh bằng vắc xin tăng lên đáng kể Ngoài cácvắc xin dùng trong chương trình tiêm chủng mở rộng, nhu cầu về các vắc xinkhác cũng hình thành và gia tăng nhanh chóng Người dân không chỉ đòi hỏi cóvắc xin để dùng mà phải là các vắc xin có chất lượng tốt, cách dùng thuận tiện vàđặc biệt là phải an toàn

Chớnh vì vậy tôi chọn lĩnh vực nghiên cứu này, với mong muốn sẽ cùngvới các Thày, Cụ, các nhà khoa học đi trước và đồng nghiệp tìm ra phương phápgóp phần giải quyết những khó khăn trên

1.2 Lý do lựa chọn đề tài

Bệnh cúm đã và đang đe doạ toàn cầu Trong ba thế kỷ qua, cứ khoảng 30đến 40 năm, thế giới lại chứng kiến một đại dịch cúm Trước khi có vắc xin, mỗiđợt dịch có hàng triệu người chết

Năm 1918 chứng kiến đại dịch cúm nghiêm trọng nhất lịch sử thế giới, thậm

chí còn được cho là đại dịch kinh hoàng nhất trong các loại bệnh dịch Tác nhân

gây dịch là virus cúm A/H1N1 đã gây tổn thất chưa từng thấy Chỉ trong thờigian ngắn, người bệnh nhanh chóng bị suy hô hấp và tử vong Người ta ước tính

khoảng 50 triệu người đã tử vong trên toàn thế giới Số tử vong cao nhất ở ngườitrẻ và khoẻ mạnh trong độ tuổi từ 25 đến 35 Khoảng 25% dân số của nước Mỹ

và Vương quốc Anh bị mắc bệnh

Năm 1957 đánh dấu “dịch cúm châu Á” Tác nhân gây dịch là virus cúm A/

H2N2 có độc tính thấp hơn vi rút gây đại dịch xảy ra năm 1918-1919 và thế giới

đã có chuẩn bị ứng phó tốt hơn Virus được phát hiện ở Singapore sau lan rakhắp thế giới Nhờ các tiến bộ khoa học, dịch bệnh nhanh chóng được xác định,các biện pháp y tế cần thiết được triển khai, trong đó có việc sử dụng vắc xin.Tuy vậy số lượng người chết vỡ cỳm vẫn ở mức 2 triệu

Năm 1976 tại New Jersey, Mỹ, xuất hiện dịch cúm khiến 1 người chết.Virus chủ yếu tồn tại ở lợn, và 45 triệu liều vắc xin cúm lợn đã được dùng.Không ai thiệt mạng thờm vỡ cỳm lợn, nhưng có 25 người đã chết do biến chứngcủa vắc xin Một ủy ban điều tra được thành lập và đã cho ngừng sử dụng vắcxin cúm này

Năm 2003, cúm gia cầm được phát hiện ở Hàn Quốc, chớnh phủ đã ra lệnhtiêu hủy gần 1 triệu con gà và vịt Cũng trong năm này, khoảng 400 ca nhiễmcúm gia cầm được phát hiện ở Việt Nam Năm sau đó, hầu hết trong 64 tỉnhthành đều xuất hiện cúm [16] Tính đến 12/2009 đã có 46 người tử vong do cúmA/H5N1 tại VN, trong đó có 12 thai phụ [2]

Tại Việt Nam: Hội chứng cúm thường xảy ra quanh năm trên khắp đất nước

với tỷ lệ mắc trung bình 5 năm cuối thập kỷ 90 được ghi nhận là 1.627,2/100.000 dân, xếp thứ nhất trong 10 bệnh truyÒn nhiễm có tỷ lệ mắc cao nhất ởViệt Nam Năm 2004, Việt Nam có 1.650.459 trường hợp mắc, tử vong 3 đuợcthông báo, cũng là đứng thứ nhất trong sè 10 bệnh có tỷ lệ mắc cao nhất

Có thể núi cỳm là bệnh truyền nhiễm gõy dịch nguy hiểm, từ mức đô nhẹđến nặng, đó gõy ảnh hưởng không nhỏ đến đời sống, sức khỏe của con người và

sự phát triển kinh tế xã hội của mỗi quốc gia trên toàn cầu [10] Theo một nghiêncứu của Marc J.Satorn Shahi, cố vấn y tế châu Á ở Singapore, chi phí cho bệnhcúm chỉ ở 5 nước Đông Nam Á đã mất khoảng 8,7 tỷ USD/ năm về khám chữabệnh [8] Ngoài ra, cộng thêm tổn thất giỏn tiếp rất lớn trong sản xuất - do phảitiêu hủy hàng triệu gia cầm; trong phát triển kinh tế xã hội - do người bệnh phảinghỉ việc điều trị

Như vậy, việc triển khai sử dụng vắc xin trên cộng đồng là rất cần thiết.Trong điều kiện xảy ra dịch cúm, việc sử dụng vắc xin và thuốc kháng virus làhai biện pháp hữu hiệu nhất, làm giảm tỷ lệ mắc và tỷ lệ chết Năm 2009, theoước lượng của WHO, trên toàn thế giới đó cú 150 triệu liều vắc xin ngừa cúm A/H1N1 được phân phối, 95 triệu liều đã được tiêm, trong đó 30% là loại vắc xin

có tá dược Các phản ứng quá mẫn được thông báo gồm nổi mề đay, phù mạch

và sốc phản vệ, dao động từ nhẹ đến nghiêm trọng Trong đó sốc phản vệ có thể

đe dọa tính mạng nếu không được chăm sóc y tế kịp thời [1]

Ở nước ta, bệnh cúm vẫn bị “xem thường”, nên chưa có ý‎ thức phòng bệnh thức phòng bệnhcao Vắc xin cỳm, vỡ vậy, lâu nay không được chú ý‎ thức phòng bệnh; công tác kiểm định cũng vìvậy chưa được quan tâm đúng mực

Việc kiểm soát chặt chẽ chất lượng vắc xin sẽ góp phần làm giảm thiểunhững tai biến khi tiêm vắc xin, đảm bảo tính an toàn và hiệu quả cho người sửdụng vắc xin Vắc xin cúm có nhiều loại, do vậy kiểm định chất lượng cũng khácnhau, không thống nhất; gõy khó khăn cho nhập khẩu, phân phối và sử dụng.Không những thế, quy trình kiểm định vắc xin cúm lại chưa được chuẩn hoá, phùhợp với điều kiện trong nước

Xuất phát từ những lý‎ thức phòng bệnh do trờn, tụi nhận thấy ở Việt nam thực sự cần thiếtphải có một quy trình đánh giá chất lượng vắc xin cúm đạt tiêu chuẩn, phù hợp,giảm thiểu tối đa rủi ro khi sử dụng Góp phần nâng cao chất lượng phòng bệnh -

chăm sóc sức khỏe ban đầu của y học trong tương lai, cũng chính là nâng caochất lượng cuộc sống cho nhân dân Do đó, tôi lựa chọn thực hiện đề tài:

“Chuẩn hóa quy trình kiểm định vắc xin cúm ở Việt nam”

2 MỤC TIÊU VÀ MONG MUỐN ĐẠT ĐƯỢC KHI ĐĂNG KÝ ĐI HỌC NGHIÊN CỨU SINH

Tôi mong muốn hoàn thành được 2 mục tiêu của đề tài:

1) Đánh giá quy trình kiểm định vắc xin cúm hiện tại

2) Đề xuất quy trình kiểm định chuẩn.

3 Lí DO LỰA CHỌN CƠ SỞ ĐÀO TẠO

Qua tìm hiểu tôi được biết: Viện kiểm định quốc gia vắc xin và sinh phẩm

y tế được Bộ Y tế, trên cơ sở quyết định của Chính phủ, giao trọng tâm côngviệc cho Viện là phát triển mạnh kiểm định trong phòng thí nghiệm Viện lại cónhiều cán bộ có kinh nghiệm, tâm huyết với nghề kiểm định Bên cạnh đó, viện

có 6 Khoa chuyờn môn (Khoa kiểm định vắc xin virus, Khoa kiểm định vắc xin

vi khuẩn, Khoa kiểm định Hoá-Lý‎ thức phòng bệnh, Khoa Sinh phẩm y tế, Khoa Môi trường thựcnghiệm và Khoa Động vật thực nghiệm), có thể giỳp tụi thực hiện được các nộidung, mục tiêu của đề tài

4 KINH NGHIỆM, KIẾN THỨC, SỰ CHUẨN BỊ TRONG VẤN ĐỀ DỰ ĐỊNH NGHIÊN CỨU

4.1 Bệnh cúm

Cúm là bệnh viêm đường hô hấp cấp tÝnh do vi rút cúm (influenza), lâylan nhanh Bệnh lây chủ yÕu từ người bệnh sang người lành qua tiếp xúc trựctiếp hoặc đường hô hấp, niêm mạc mắt Bệnh cúm có thể từ gia cầm lây sang

người (hay còn gọi là bệnh cúm gia cầm) có tỷ lệ tử vong cao Bệnh có biểu hiệnsốt, đau đầu, đau cơ, đau họng, ho…, có thể dẫn đến viêm phổi và gây tổnthương các phủ tạng khác với tỷ lệ tử vong cao nếu không được phát hiện sớm

để điều trị kịp thời Virus cúm thường gây tử vong ở những đối tượng bị suygiảm miễn dịch hoặc hệ miễn dịch không hoàn hảo như người già, trẻ em, người

bị nhiễm HIV hoặc những người đang hoặc có nguy cơ viêm phổi [17]

4.2 Virus cúm

4.2.1 Cấu trúc

Virus cúm được phân lập lần đầu năm 1933, là thành viên chính của nhóm

Orthomyxovirus, thuộc họ Orthomyxoviridae gồm có 3 tý‎ thức phòng bệnhp: Cóm A, B và C,

trong đó tý‎ thức phòng bệnhp A và B là gây bệnh cho người

Hạt virus cúm được bao bọc bởi một lớp lipid kộp cú nguồn gốc từ tế bàovật chủ khi nó bứt ra khỏi tế bào Trên lớp màng này nhô ra các glycoproteinthuộc hai nhúm chớnh là Hemagglutinin (HA) và Neuraminidase (NA) Vai tròcủa HA là giúp virus gắn vào thụ thể trên tế bào vật chủ để kích thích tế bào vậtchủ “nuốt” virus vào trong (endocytosis), còn vai trò của NA thì không rõ ràng,

cú lẽ nú giỳp virus bứt ra khỏi tế bào vật chủ bằng cách cắt sialic acid khỏi cácglycoprotein của virus và tế bào vật chủ Bên trong lớp vỏ lipid kép là lớpprotein nền bao quanh vỏ nhân (nucleocapsid), bên trong là lõi ARN gồm 8 đoạnkhác nhau Các loại cúm A, B và C khác nhau về số lượng các đoạn RNA cũngnhư cấu trúc của protein nền và protein nhõn Cỳm A là loại gõy ra các đại dịchcho con người và vật nuôi nhiều nhất [15]

Khả năng thay đổi cấu trúc kháng nguyờn: Cấu trúc hemagglutinin (H) có

thể thay đổi tạo thành các H mới, tạo thành một typ cúm mới, gõy nên dịch mới.Các KN (N) cũng có thể thay đổi, đăc biệt ở virus typ A và B Do vậy, virus cúm

A và B có nhiều thứ tý‎ thức phòng bệnhp (Subtype) Sự khác nhau giữa cấu trúc của HA và NA

của các chủng virus cúm khác nhau được sử dụng để phân loại chúng Các chủngvirus cúm từng gõy đại dịch cho người như A/H0N1, H1N1, H2N2, H7N7,H5N1 Điều đỏng chỳ ý‎ thức phòng bệnh là đại dịch cúm thường lặp lại có tính chu kỳ, nhiều khi

do cùng một chủng virus cỳm gõy ra

Hình 1: Cấu trúc của virus cóm

Hình 2: Mô hình cấu trúc của virút cúm H5N1

Phân tý‎ thức phòng bệnhp cóm A được đặt tên theo các protein bề mặt HA và NA củachúng Ví dô: H7N2 biểu thị HA 7 protein và NA 2 protein Tương tự như vậy,H5N1 có HA 5 protein và NA 1 protein

- Cóm B (Influenza týp B): Cóm B chỉ thường gặp ở người Không giống với

cúm A, cóm B không xếp loại theo phân tý‎ thức phòng bệnhp Mặc dù cúm B có thể gây thànhdịch ở người nhưng chưa bao giờ gây đại dịch như cúm A

ở người, kháng thể xuất hiện sau khi đã nhiễm virus hoặc đã tiêm vắc xin vớichủng cúm cũ có thể bảo vệ khi nhiễm chủng mới

4.2.4 Sự biến đổi của virus cúm

Virus cúm có thể biến đổi bằng nhiều cách Một tý‎ thức phòng bệnhp được gọi là trôi khángnguyên có nghĩa là sự biến đổi xảy ra Ýt một và liên tục trong thời gian dài Sảnphẩm của virus biến đổi có thể không nhận thấy bởi kháng thể tạo ra sớm hơnchủng virus cúm Quá trình này như sau: một người mắc cúm cơ thể sinh khángthể kháng virus đó, khi chủng virus mới xuất hiện, kháng thể kháng chủng cũ cóthể không nhận ra ngay virus mới và như vậy nhiễm chủng virút mới có thể xảy

ra Đó là một trong những lý‎ thức phòng bệnh do chÝnh giải thÝch vì sao người ta lại tái nhiễmvirus cóm, một hoặc hai trong ba chủng virus sử dụng để chế tạo vắc xin phảiluôn được cập nhật để kiểm tra lại sự biến đổi của virus cúm đang lưu hành Vìvậy, cần tiêm vắc xin cúm hàng năm [10], [12]

Mét tý‎ thức phòng bệnhp khác được gọi là trượt kháng nguyên hay đổi chỗ kháng nguyên(antigen shift) Hiện tượng trượt kháng nguyên đột ngột, biến đổi chủ yÕu ở cúm

A Kết quả là virút mới hình thành, gây bệnh cho người và có protein HA hoặc

cả HA và NA mà nhiều năm không tìm thấy ở người Nếu một phân tý‎ thức phòng bệnhp cúm mớiđược đưa vào quần thể dân cư, người có Ýt hoặc không có bảo vệ với virus này

và nếu virus có thể lây dễ dàng từ người sang người thì đại dịch sẽ xảy ra

Những biến đổi của virus cóm thường chỉ ở mức độ trôi kháng nguyên.Trong trường hợp khi có sự “trượt kháng nguyên” xảy ra thì virus cóm A phảitrải qua hai loại trôi và trượt kháng nguyên, virus cóm B chỉ biến đổi bởi quátrình ổn định dài hơn của sự trôi kháng nguyên

4.2.5 Cúm A lây từ động vật sang người

Hình 4 Các loài có thể nhiễm cúm A, các dưới nhóm HA và NA

Virus cóm A đã được tìm thấy ở nhiều động vật: gà, vịt, lợn, cá voi, ngựa,hải cẩu Tuy nhiên, mỗi phân tý‎ thức phòng bệnhp thÝch nghi với một loài động vật loại trừ giacầm và chim là vật chủ cho tất cả các phân tý‎ thức phòng bệnhp cóm A Các phân tý‎ thức phòng bệnhp gây dịchrộng khắp ở người trước kia và bây giờ là H3N2, H2N2, H1N1, H1N2 Phân tý‎ thức phòng bệnhpH1N1 và H3N2 đã gây dịch cúm ở lợn; H7N7 và H3N8 gõy dịch ở ngựa Chođến năm 1998 chỉ có virus cóm A/H1N1 lưu hành trong quần thể lợn ở Mỹ Tuy

nhiên năm 1998, virus cóm A/H3N2 từ người cũng nhiễm vào quần thể lợn vàgây ra dịch cúm lợn [7]

4.3 Vắc xin cúm

4.3.1 Vắc xin

Là chế phẩm có tính kháng nguyên dùng để tạo miễn dịch đặc hiệu, chủ động,nhằm tăng sức đề kháng của cơ thể đối với một (số) tác nhân gõy bệnh cụ thể[4], [20], [21]

4.3.1.1 Cơ chế hoạt động của vắc xin

Hệ miễn dịch nhận diện vắc xin là vật lạ nên hủy diệt chúng và "ghi nhớ"chúng Về sau, khi tác nhân gõy bệnh thực thụ xâm nhập cơ thể, hệ miễn dịch đã

ở tư thế sẵn sàng để tấn công tác nhân gõy bệnh một cách nhanh chóng hơn vàhiệu quả hơn (bằng cách huy động nhiều thành phần của hệ miễn dịch, đặc biệt

là đánh thức các tế bào lympho nhớ) Đõy chính là các ưu điểm của đáp ứngmiễn dịch đặc hiệu [13], [17]

4.3.1.2 Ba loại vắc xin kinh điển

 Vắc xin bất hoạt là các vi sinh vật độc hại bị giết bằng hóa chất hoặc bằng

nhiệt Ví dụ: các vắc xin chống cúm, tả, dịch hạch và viêm gan siêu vi A.Hầu hết các vắc-xin loại này chỉ gõy đáp ứng miễn dịch không hoàn toàn

và ngắn hạn, cần phải tiêm nhắc lại nhiều lần

 Vắc xin sống, giảm độc lực là các vi sinh vật được nuôi cấy dưới những

điều kiện đặc biệt nhằm làm giảm đặc tính độc hại của chúng Vắc xinđiển hình loại này thường gõy được đáp ứng miễn dịch dài hạn và là loạivắc xin được ưa chuộng dành cho người lớn khỏe mạnh Các vắc xin ngừabệnh sốt vàng, sởi và quai bị đều thuộc loại này

 Các "toxoid" là các hợp chất độc bị bất hoạt trích từ các vi sinh vật (trong

trường hợp chớnh cỏc độc chất này là phương tiện gõy bệnh của vi sinhvật) Ví dụ: các vắc xin ngừa uốn ván và bạch hầu

4.3.1.3 Một số loại vắc xin mới đang nghiên cứu

Các vắc xin này còn được xem là vắc xin của tương lai, có 6 hướng pháttriển chính hiện nay [21], [22], [23]:

 Sử dụng các phụ gia (adjuvant) mới, nhằm gõy ra loại đáp ứng miễn dịch

mong muốn Thí dụ, chất nhôm phosphate và các oligonucleotide chứaCpG demethyl hóa đưa vào vắc xin khiến đáp ứng miễn dịch phát triểntheo hướng dịch thể (tạo kháng thể) thay vì tế bào

 Vắc xin khảm: sử dụng một sinh thể quen biết để hạn chế hiện tượng

"phản tác dụng", thí dụ dùng virus vaccinia mang một số yếu tố của virusviêm gan B hay virus dại

 Vắc xin polypeptidique: tăng cường tính sinh miễn dịch nhờ liên kết tốthơn với các phân tử MHC: peptide nhân tạo 1/2 giống virus, 1/2 kia gắn

MHC; đoạn peptide mô phỏng 1 quyết định kháng nguyên (epitope).

 Anti-idiotyp: idiotyp là cấu trúc không gian của kháng thể tại vị trí gắnkháng nguyờn, đặc hiệu với kháng nguyờn tương ứng Anti-idiotyp là cáckháng thể đặc hiệu đối với idiotyp, do đó anti-idiotyp xét về mặt đặc hiệulại tương tự với kháng nguyờn Vậy, thay vỡ dựng khỏng nguyờn X làmvắc-xin, người ta dùng idiotyp anti-anti-X

 Vắc xin DNA: DNA của tác nhân gõy bệnh sẽ được biểu hiện bởi tế bàongười được chủng ngừa Lợi thế của DNA là rẻ, bền, dễ sản xuất ra sốlượng lớn nên thích hợp cho những chương trình tiờm chủng rộng rãi.Ngoài ra, vắc xin DNA cũn giỳp định hướng đáp ứng miễn dịch: tác nhângõy bệnh ngoại bào được trình diện qua MHC loại II, dẫn đến đáp ứng

CD4 (dịch thể và tế bào) Khi kháng nguyờn của tác nhân đó được chính

cơ thể người tổng hợp và biểu hiện (express), nó sẽ được trình diện quaMHC loại I, lúc này đáp ứng miễn dịch tế bào qua CD8 được kích thích.Tuy nhiên phương pháp này là con dao hai lưỡi bởi lẽ tế bào mang DNA

lạ có nguy cơ bị nhận diện là "không ta", sinh ra bệnh tự miễn

 Sử dụng vector tái tổ hợp - dựng các vi khuẩn thuần tính hoặc các tế bàotrình diện kháng nguyên như tế bào tua được chuyển gen để biểu hiệnkháng nguyờn mong muốn

4.3.1.4 Tai biến khi dùng vắc xin

Có hai loại tai biến: nhiễm bệnh và các bệnh miễn dịch

 Nguy cơ nhiễm các tác nhân gõy bệnh khác vào trong chế phẩm vắc xin.Điều này có thể hạn chế bằng các quy trình sản xuất, bảo quản và sử dụngchặt chẽ

Bệnh miễn dịch

 Thử nghiệm vắc xin phòng bệnh dại trên cừu cho thấy có xác suất gõy ramột bệnh tự miễn trên hệ thần kinh khoảng 1/3000-1/1000 Lý‎ thức phòng bệnh do có thể làvắc xin chiết xuất từ nóo động vật đã mang theo cả những mẩu protein của

tế bào thần kinh, khi tạo miễn dịch, cơ thể (được tiêm) đã tạo ra cả khángthể chống lại cấu trúc thần kinh của mình.

 Vắc xin ngừa ho gà có thể gõy sốc kèm di chứng thần kinh với xác suất

10-4 - 10-6 Việc tinh sạch vắc-xin này làm tăng mức an toàn nhưng một lầnnữa, giảm hiệu giá

4.3.2 Vắc xin cúm

Là dịch nổi vô trùng chứa một hay nhiều chủng virus cúm, loại A hoặc B,hoặc hỗn hợp của hai loại, đã được nuôi cấy riêng rẽ trong phôi trứng gà hoặc tếbào động vật có vú

4.3.2.1 Các loại vắc xin cúm:

Gồm 3 loại vắc xin cúm sau [19]:

- Toàn bộ các hạt virus bất hoạt bởi một phương pháp phù hợp (Whole particle)

- Các hạt virus đã được xử lý‎ thức phòng bệnh làm cho hạt virus bị phân rã một phần hoặc toàn bộbởi các phương pháp hóa lý‎ thức phòng bệnh (vắc xin phân đoạn nhỏ) (Split)

- Kháng nguyờn ngưng kết hồng cầu HA và emzym thuỷ phân NA (gọi là vắcxin tiểu phần tử) (Subunit)

Cũng như các virus khác, một người khi đã nhiễm virus cúm và hồi phục thì

sẽ miễn nhiễm đối với loại virus cỳm đú Tuy nhiên một trong những đặc điểmcủa virus cúm khiến cho việc sản xuất vắc xin cúm không bao giờ thành côngtriệt để là khả năng tích lũy các biến đổi nhỏ (antigenic drift) và hình thành cácbiến đổi lớn (antigenic shift) Tốc độ bị biến đổi của các đoạn RNA của viruscúm chỉ sau HIV, tuy nhiờn vì virus cỳm cú 8 đoạn RNA khác nhau nên quátrình đóng gói trở nên rất kém hiệu quả, nhưng chính điều này giúp cho viruscúm dễ dàng tạo nên các thể tái tổ hợp (reassorted virus) khi nhiều chủng viruscỳm cựng nhiễm vào một tế bào vật chủ Chớnh cỏc thể tái tổ hợp này, cộng vớikhả năng bị đột biến nhanh của cỏc khỏng nguyờn HA và NA giúp virus cúm

thoát khỏi sự kiểm soát của hệ miễn dịch kể cả những người từng bị bệnh Mộttrong những cơ chế virus cỳm gõy đại dịch ở người là sự tái tổ hợp của viruscúm gà (avian flu) và người ở lợn (có khả năng bị nhiễm cả hai loại virus này)tạo nên loại virus mới có khả năng nhiễm ở người, khiến cho nhiều người “bị bấtngờ” trước loại virus mới này Gần đõy loại virus H5N1 từ gà đã nhiễm thẳngsang người mà không thông qua lợn, gõy lo lắng cho các nhà khoa học bởi đõy

có thể là dấu hiệu của một đại dịch mới sắp xảy ra

4.3.2.2 Sản xuất vắc xin cúm:

Virus cỳm đó được sản xuất và lưu hành từ lâu ở nhiều nước phát triển như

Mỹ, Nga, châu Âu Vắc xin cúm được sản xuất bằng cách nuụi cỏc loại viruscúm có khả năng gõy bệnh trong năm đó trong trứng gà cú phụi rồi bất hoạt virus

và sử dụng làm vắc xin bất hoạt Thông thường người ta trộn 3 loại virus cúm cókhả năng xuất hiện trong năm đó lại với nhau để làm thành vắc xin Gần đõy,việc sản xuất vắc xin cỳm trên trứng đang gặp một số khó khăn bởi một số người

bị dị ứng với vắc xin này do còn sót lại một ít albumin từ trứng; một mặt kháccúm gà xảy ra với diện rộng trên thế giới khiến cho nguồn trứng có thể bị ảnhhưởng Chớnh vỡ vậy ở Mỹ và một số nước đang có xu hướng chuyển từ nuôivirus cỳm trờn trứng gà sang nuụi trờn tế bào Một số tế bào đã được khảo sát cókhả năng nhiễm virus cúm gồm tế bào thận chó, khỉ, gà…vv Tế bào thận khỉxanh đang được nhiều nhà khoa học chọn làm giá thể nuôi virus bởi nó có thểnuôi trong dịch huyền phù và cho sinh khối cao Tế bào thận chó cũng đượcWHO khuyến cáo sử dụng cho việc tách virus sơ cấp hoặc để sử dụng trongnghiờn cứu virus cúm

- Quy trình sản xuất trờn phụi gà: Trứng gà cú phụi 10 - 11 ngày tuổi được

tiêm, ủ và gặt dịch niệu nang; sau đó tinh sạch qua 2 giai đoạn bằng cách ly tâmloại bỏ các mảnh vụn tế bào (protein không đặc hiệu) trên máy ly tâm siêu tốc

Bước tiếp theo, hoàn nguyên và bất hoạt, hấp phụ Al(OH)3 và cấu tạo thành vắcxin, lọc vô trùng và pha loãng thành liều vắc xin thích hợp Sau đó tiến hànhkiểm định vắc xin thành phẩm [14].

- Quy trình sản xuất trên tế bào (nuôi cấy virus cỳm trờn tế bào): tế bào được

nhân lên để đạt số lượng mong muốn Sau đó gõy nhiễm với virus và ủ trong 3- 5ngày Sau đó, thu hoạch virus bằng cách loại bỏ cặn tế bào nuụi cấy, cô đặc bằnglọc thẩm tích và ly tâm Làm giảm thiểu ADN còn trong sản phẩm bằng sắc ký‎ thức phòng bệnhtrao đổi ion và thêm benzonase 9 (hoặc hóa chất tương tự) Các công đoạn phân

rã và bất hoạt virus tương tự như phương pháp sản xuất từ trứng [14]

Phương pháp tạo chủng sản xuất vắc xin bằng kỹ thuật di truyền ngược

Lịch sử sản xuất vắc xin cúm cho thấy đó có nhiều nỗ lực để tìm ra loạivắc xin đặc hiệu Các vắc xin đã từng được nghiờn cứu và thử nghiệm gồm vắcxin bất hoạt và vắc xin sống Các nghiên cứu từ trước tới nay cho thấy vắc xinbất hoạt không hiệu quả bằng vắc xin sống Vắc xin sống thường không chỉmang lại khả năng miễn nhiễm mà cũn giỳp bảo vệ cơ thể tốt hơn khi bị virus tấncông và thường chỉ cần vắc xin một lần Trong các loại vắc xin sống từng đượcthử nghiệm có một số loại như vắc xin góp KN từ nhiều vật chủ (host rangevaccine) trong đó các RNA mã hóa cho HA và NA ở người được tái tổ hợp vớiđoạn RNA còn lại của chim để tạo ra loại virus nhược độc không có khả năngnhân lên hiệu quả ở người Tuy nhiên, một ý‎ thức phòng bệnh tưởng sáng tạo đó giỳp tạo ra loạivắc xin sống tốt hơn, đú chớnh là vắc xin nhạy cảm với nhiệt và thích nghi điềukiện lạnh (temperature sensitive and cold adapted) Virus cúm thích nghi vớiđiều kiện lạnh chỉ có khả năng nhân lên ở họng của người (thích nghi lạnh) và sẽkhụng gõy các biến chứng khác bởi chúng nhân lên rất kém trong điều kiện nhiệt

độ cao (nhạy nhiệt) Để tạo ra loại vắc xin này người ta từng dùng virus chính(master virus), tức loại virus đã được nuôi nhiều đời trong điều kiện lạnh, cho