Tổng quan về Enzym Lipase
Đề tài: TỔNG QUAN VỀ ENZYM LIPASE TỪ CÁ GVHD: Cô Trần Bích Lam SVTH : Đinh Thò Hải Yến Đònh nghóa Lipase Lipase (triacylglycerol acylhydrolase) • - Là enzym xúc tác cho phản ứng thủy phân triacylglycerol ( dầu thực vật, mỡ động vật ) tạo thành glixerin và axit béo tương ứng. • - Có hoạt tính mạnh đối với cơ chất không tan trong nước, thể hiện hoạt tính bề mặt. • - Hoạt động mạnh trong hệ nhũ hóa, đặc biệt là hệ nhũ đảo (nước trong dầu). Phân loại Theo nguồn gốc: - Lipase từ động vật - Lipase từ thực vật - Lipase từ vi sinh vật. • Theo tính chất: - Lipase có tính đặc hiệu vò trí - Lipase có tính đặc hiệu cơ chất Cấu trúc của lipase • Lipase từ động vật Cấu tạo lipase tuyến tụy từ người gồm hai tiểu phần, phần lớn h n ch a ù đuôi N, phần nhỏ hơn ch a đuôi C.ơ ứ ứ Nhân của tiểu phần đuôi N hình thành bởi 9 sợi xếp song song trên mặt phẳng gấp nếp β Tiểu phần C hình thành bởi hai lớp mặt phẳng không song song Tiểu phần N chứa trung tâm hoạt động, liên kết với nhóm glycosyl, liên kết với Ca2+ và có thể liên kết với heparin Trung tâm hoạt động bò che dưới các vòng xoắn α mạch ngắn gọi là các nắp hay nút đậy Tính chất của Lipase • Lipase có ho t tính b m t phân pha ạ ề ặ ở n c/lipit và ch thu phân ch t béo ướ ỉ ỷ ấ đã nhũ hố. • Lipase có nhi u trong s a, các h t có ề ữ ạ d u (đ u nành, đ u ph ng), ngũ c c ầ ậ ậ ộ ố (lúa m ch, y n m ch), trong trái cây ạ ế ạ và rau, trong h th ng tiêu hố c a ệ ố ủ đ ng v t và nhi u lo i vi sinh v t.ộ ậ ề ạ ậ • Lipase có th thu phân c 3 liên k t ể ỷ ả ế ester trong TAG ho c ch thu phân ặ ỉ ỷ m t s liên k t ester nh t đ nh gi a ộ ố ế ấ ị ữ g c –OH và các g c acyl trong phân t ố ố ử acyl lipit. Liên kết bị thuỷ phân Nguồn lipase Các gốc acyl ở vị trí 1,3 Tuyến tuỵ, sữa, Pseudomonas fragi, Penicillium roqueforti Các gốc acyl ở vị trí 1, 2 và 3 yến mạch, hạt thầu dầu, Aspergillus flavus Axit oleic và linoleic ở vị trí 1,2 và 3 Geotrichum candidum Kích thước của giọt dầu trong hệ nhũ tương càng nhỏ thì tổng diện tích bề mặt phân pha dầu/nước càng lớn dẩn đến hoạt tính của lipase càng cao. Có đầu kỵ nước gắn với giọt dầu nhờ các tương tác kỵ nước. Còn tâm hoạt động của enzym thì gắn với phân tử cơ chất, tại tâm hoạt động có các axit amin Ser, His, và Asp có vai trò tham gia vào việc cắt các kiên kết ester. Cơ chế tác dụng của Lipase • - Tâm ái nhân của lipase sẽ tương tác với 1 trong 2 nguyên tử tích điện dương của liên kết bò thuỷ phân. • - Một cơ chế khác liên hệ tính tác dụng của enzym với sự khuyết electron của liên kết bò thuỷ phân : AB + H 2 O AOH + BH Các yếu tố ảnh hưởng đến tính chất của lipase • - Cơ chất • - pH: Romija chiết xuất trong dòch gan và t tạng của lớp đầu túc như mực (Sepiaofficinalis), bạch tuộc ( Eledne cierbosa ) được enzym lipase xúc tác phản ứng thuỷ phân thấy pH thích hợp nhất của lipase dòch gan là 6.0, còn của dòch t tạng là 6.4 Các nhà khoa học Nhật đã dùng dòch t tạng của tôm càng ( Squil-laoratoria ) thuỷ phân methylacetat th y chúng hoạt động mạnh ở 38ấ o C, pH = 7.2 với thời gian là 15h. - Nhieọt ủoọ: [...]... β-lactone… Nước: tỷ lệ dầu-nước 10/5 là tối ưu cho lipase cố đònh trên hạt chitosan thì cho hiệu suất phản ứng thủy phân dầu nành là cao nhất p suất: áp suất tối ưu của Lipozym là 17Mpa trong phản ứng nội chuyển hóa tổng hợp bơ cacao từ mỡ heo và tristearin Lipase cố đònh và lipase tự do Tỷ lệ dầunước (w/w) 10:1 Biến dổi nhờ lipase tự do (%) 33.10 Biến đổi nhờ lipase cố định (%) 38.58 10:3 37.71 45.31 10:5... phomat: 2 Ứng dụng của lipase trong các ngành công nghiệp Ứng dụng lipase trong công nghiệp dệt Ứng dụng lipase trong công nghiệp các chất tẩy rửa: • Nguyên lý • Dùng lipase thủy phân chất béo và các chất bẩn có cấu tạo ester Thường người ta bổ sung lipase vào chất tẩy rửa thông thường để tăng sức mạnh tẩy rửa Ứng dụng trong công nghiệp sản xuất bột gỗ và giấy: • Nguyên lý: Dùng lipase thủy phân các... thuộc da • Các lipase ưa kiềm trộn với protease ứng dụng trong quá trình ngâm da trong nước vôi • Lipase ưa axit ứng dụng trong quá trình ngâm da, len và lông thú • Ngoài ra, lipase còn được ứng dụng trong xử lí rác, nước sông và nước thải… 3 Ứng d ụng Lipase trong Y h ọc: Lipase thủy phân sáp một loài bướm đêm (Galeria mellonele) tạo sản phẩm tác động lên vi khuẩn lao Mycobacterium H37Rv Lipase hỗ... phân các chất béo gây khó tiêu Lipase Candida lovastatin là thuốc rugosa dùng tổng hợp làm giảm cholesterol trong máu … 4 Ứng dụng Lipase trong ngành mỹ phẩm : • Nguyên lý • Dùng lipase làm chất xúc tác cho phản ứng ester hóa các axit béo từ các nguồn nguyên liệu tổng hợp các ester làm mềm da như một số sản phẩm chăm sóc cá nhân như dầu tắm ,kem chống quăn tóc • Lipase Rhizomucor miehei trong phản... lipase: Về nguyên tắc, có thể chia ra 3 nhóm phương pháp sau: Nhóm Các thơng số cố định Các thơng số thay đổi 1 Thời gian Nồng độ enzym Biến thiên của S hay P 2 Lượng cơ chất mất đi (hay lượng sản phẩm tạo thành) Nồng độ [E] Thời gian 3 Thời gian Lượng S mất đi (hay P tạo thành) Nồng độ E Những phương pháp để đo hoạt tính thuỷ phân của E .lipase: Phương pháp chuẩn độ (Titrimatry) Phương pháp quang... nhận E .lipase Nguồn nguyên liệu: - Vì enzym là những xúc tác sinh học phổ biến trong thiêên nhiên nên người ta thường thu chúng từ các vật liệu sinh học - Trong tay con người có 3 nguồn nguyên liệu sinh học cơ bản : các mô và cơ quan động vật, mô và cơ quan thực vật, tế bào vi sinh vật - Tuyến t, màng nhầy, dạ dày, tim của đđộng vật … những phế liệu của công nghiệp thòt và thuỷ sản dùng để tách enzym. .. như lactose, glucose, hay tinh bột là các chất phụ gia có tính chất ổn đònh enzym - Thường sấy ở nhiệt độ chân không t 0 = 45oC CÁC ỨNG DỤNG CỦA LIPASE 1 Ứng dụng Lipase trong công nghiệp thực phẩm Trong công nghiệp chất béo và bơ thực vật: Tổng hợp nên các chất béo có giá trò cao từ các chất béo có giá trò thấp hơn như tổng hợp chất thay thế bơ cacao từ dầu cọ phân đoạn bằng phàn ứng nội chuyển... sản phẩm Lipase thô 4 Phương pháp thu nhận lipase thô bằng phương pháp sấy: Lấy t tươi đã được bảo quản, cân trọng lương và trộn với tinh bột 1 lượng bằng 10% so với trọng lương t tươi, tiếp theo sấy ở những nhiệt độ 50oC, 60oC, 70oC Sau đó đemxay nhuyễn được chế phẩm lipase thô Chú ý: - Trong quá trình kết tủa bằng dung môi hữu cơ tạo ra 1 nhiệt lượng lớn có thể làm mất hoạt tính của enzym - Trong...Chất hoạt hóa và ức chế: • Canxi ( Ca ) hoạt hóa lipase trong phản ứng thủy phân theo ba cơ chế : • - Kết hợp với enzym làm thay đổi cấu trúc • - Giúp lipase dễ dàng hấp thụ lên bề mặt cơ chất-nước • - Khử các axit béo sản phẩm của phản ứng thủy phân giảm khả năng ức chế của axit với enzym • • • • • Một vài cơ chất ức chế như : Các hợp chất bề mặt có chứa anion Protein... dầu kém chất lượng thành các triacylglycerol có giá trò dinh dưỡng như tổng hợp chất thay thế bơ cacao Lipase được thêm vào thực phẩm nhằm biến đổi hương bằng phản ứng ester hóa tạo ra các ester tạo hương và mùi thơm Lipase thủy phân loại bỏ mỡ trong quá trinh chế biến các sản phẩm thòt nạc như - Trong chế biến chè: Nguyên lý: Lipase thủy phân phân hủy lớp màng béo trong quá trình chế biến chè đen . Đề tài: TỔNG QUAN VỀ ENZYM LIPASE TỪ CÁ GVHD: Cô Trần Bích Lam SVTH : Đinh Thò Hải Yến Đònh nghóa Lipase Lipase (triacylglycerol. Theo nguồn gốc: - Lipase từ động vật - Lipase từ thực vật - Lipase từ vi sinh vật. • Theo tính chất: - Lipase có tính đặc hiệu vò trí - Lipase có tính đặc