Hỗ trợ phôi thoát màng có thể làm tăng tỷ lệ có thai cho những bệnh nhân thụ tinh trong ống nghiệm pptx

Hỗ trợ phôi thoát màng có thể làm tăng tỷ lệ có thai cho những bệnh nhân thụ tinh trong ống nghiệm 1. Hiện tượng thoát màng của phôi: Trongmột chukỳ điều trị thụ tinh trong ốngnghiệm, bệnhnhânthường trải qua các bước: - kíchthích buồng trứng - chọchút trứng - nuôi cấy phôi - chuyển phôi - làm xétnghiệm thử thai và theo dõi thai cho đến ngày sinh. Có thể nói sự thànhcông củamột chu kỳ điều trị là một chuỗi liên kết chặtchẽ sự hoàn tất của các khâu trên. Do đó sau khi phôi đượcchuyển vàobuồng tử cung, để gọi là thànhcông thì phôi phải làm tổ đượctrong buồng tử cung vàphát triển thành thaicho đếnngày sinh. Có ba giả thuyết giải thích vì sao phôi khônglàm tổ được: - Doyếu tố nội tại của phôi, nghĩa là chínhbản thân phôi không có khả năng làmtổ - Dothiếu các thụ thể gắn kết với phôi tại nộimạc tử cung - Dophôi khôngthể thoát khỏi sự baobọc của màngzona(màngbao bọc quanh phôi). Nguyênnhânsau cùng nàychính nómang lại sự phát triển các kỹ thuật vi thao tácnhằmhỗ trợ phôi nuôi cấy trong môi trường ống nghiệm(Cohenvà cộng sự, 1990) Sự thụ tinhở người xảy raở đoạn eo bóng của vòi trứng. Sau đó trứng đã thụ tinh sẽ di chuyển vào buồng tử cung. Trong ốngnghiệm, sự xuất hiện 2tiền nhân trong thụ tinh bình thườngxuất hiện khoảng 18-19 giờ sau cấy tinhtrùng. Đến ngày2-3, phôi phát triểnđến giaiđoạn2-4 và 8 tế bào.Hiện tượng nén tế bào có thể xảy ra ở giai đoạn 8 tế bào khoảngngày 3. Biểu hiện bằng sự tăngtiếp xúc bằngcách hìnhthànhcác cầunối giữacácphôi bàokế cận, giảm các khoảnggian bào và đườngviền mờ đi. Ngày thứ 4 sau khithụ tinh, có sự hình thànhkhoang phôinang ở giữa. Ngaythờiđiểm bắtđầu quansát thấy khoang này là bắt đầu giai đoạn phôi nang. Hiện tượng thoát màngthường xảy ra vào ngày thứ 5 hay 6,lúc này phôi đã ở tại buồng tử cung. Ở người hiệntượng này xảy ra tại mộtvùngtrên bề mặt của phôinang. Phôi dần dần thoát ra khỏi màngtrong suốt bằngcách lồi quamột lỗ nhỏ. Hiện tượng thoát màng hoàn toàn làlúc phôi chui rakhỏi màngtrong suốt, thường xảy ravào ngày thứ 6 hay7. Phôi thoát khỏi màng bao xung quanh Mặcdù phôinang người dễ nở rộng trong ốngnghiệm,trong một số trường hợp nhữngphôi nangnày gặp trở ngại trongvấn đề giãn nở hay chỉ giãn rộng ở một vài chỗ hoặc không thể dãn nở hoàn toàn để thoát khỏi màngzona, cuối cùng nang xẹp xuống và thoái hóa. 2. Kỹ thuật Hỗ trợ phôi thoát màng: Hỗ trợ phôi thoát màng (Assisted hatching)đã được thực hiện từ những năm đầucủathập niên90. Đây là kỹ thuật làm mỏng hoặc tạo mộtlỗ thoát trên màng của phôinhằmcải thiện tỉ lệ có thai và tỉ lệ làm tổ của phôi. Có 4 cách để hỗ trợ phôi thoát màng:  Phương pháp cơ học  Phương pháp hóahọc (acidTyrod)  Phương pháp sinhhóa (menthủy phân protein)  Phương pháp laser Hỗ trợ thoát màngbằng acidTyrod Kỹ thuật này đượcáp dụng cho những trườnghợp phôitiên lượng kém từ năm 1990(Cohenvà cộng sự). Dùngpipette giữ phôi ở vị trí 9 giờ và mộtpipette 10 µmchứa dungdịch acid Tyrodđược đưavào vị trí 3 giờ cạnh vùngcó khoang quanh noãntrống. Mộtvùng khiếm khuyếttrênmàng zonađược tạora bằng cách thổi acidTyrodtrên bề mặt ngoài của màngzona. Phôi sauđó được rửa vài lầnđể loại bỏ lượng acidTyrod thừavà đượcđặt trong môi trườngnuôi cấy trở lại cho đến lúcchuyển phôi. Hỗ trợ thoát màngbằng phươngpháp cơ học Cieslak và cộng sự đã mô tả kỹ thuật nàyvào năm1999.Phôi được giữ nhẹ nhàng bằng một pipette giữ và mộtvi kim đâm xuyên qua màng zona ở vị trí khoảng trống quanhphôibàolớnnhất. Sauđó phôi đượcbuông rakhỏipipettegiữ, lúc này phôi được giữ bởi vi kim.Mang phôi đang bị vi kimxuyênqua cọ bêndưới pipette giữ cho đến khi tạo được mộtvết cắt trênmàng zona. Hỗ trợ thoát màngbằng phươngpháp sinhhóa Với phương pháp này, phôi được đặt trong môi trường cóchứa menthủy phân trongmột thời gian nhất định. Được mô tả bởi Fongvà cs vào năm 1998. Đầu tiên đặt phôi trong dung dịchpronasehòa tantrong 60 giây. Sauđó kiểmtra dưới kính hiển vi đảo ngượcđể xem màngzona cóbị dãn rộng, mờ đi và khoảng quanh noãn cótăng lên không. Nếu nhữngtiêu chuẩn này không đạt đượcthì phôiđược đặt tiếp tụctrong dungdịchpronasetừ 30-60 giây nữa. Tiếpđó phôi đượcđặt trở lại môi trường nuôi cấy cho đếnkhi chuyểnphôi. Kếtquả là màngzona được làm mỏng. Hỗ trợ thoát màngbằng laser Đây làkỹ thuật sử dụng tia lasercó bước sónghồngngoại để làm mỏng hoặc tạo một lỗ thoát trên màngzona. Sovới cáckỹ thuật kháckỹ thuật này được cholà nhanhnhấtvà thuận lợi nhất(Balaban và cộng sự, 2002). - Dụng cụ gồm: • Hệ thống laserquanghọc hồng ngoại • Màn hình vitính • Phần mềm vitính giúpđiềuchỉnh vị trí chiếutia vàmức năng lượnglaser phù hợp - Các bước thực hiện: • Điều chỉnh mức nănglượnglaserphù hợp • Phôi được đặttrong giọt môi trườngnuôi cấy, đặtdưới kínhhiển vi đảo ngượccó gắn hệ thống laserhồng ngoại • Chọn vị trí cần chiếu tia laservàtiến hành chiếu tia - Ứng dụng khác: • Lấyđi những phân mảnh trongquá trìnhphân cắtcủa phôi • Sinh thiếtphôi bào để làmchẩn đoánbấtthường ditruyền của phôi m vượttrội hơn ít nhất đối với phươngpháp hóa học (PTrong một nghiên cứu hồi cứu thực hiện với 794chu kỳ tiên lượng xấu, tỷ lệ thai lâmsàng trên chu kỳ chuyển phôi thay đổi giữa 46%(acidTyrod) và 49,3%(xé màng zona)nhưng khôngliên quanđến bất kỳ kỹ thuật thoát màng nào (tỷ lệ làm tổ cũngkhông). Nhưng cóbằngchứng từ một nghiêncứu tiền cứutrên những bệnhnhân lớn tuổi (Hsieh và cộngsự, 2002) cho thấy khixét về tỷ lệ làm tổ (8,2 với 3,8%)cũng như tỷ lệ thai(31,8với 16,1%)hỗ trợ thoát màngbằng laserbướcsóng 1,48<0,05). Hơn nữa,hỗ trợ thoát màng bằng laserđã được kết luận làlàm tăngtỷ lệ thai lâm sàng trong bài tổng quantừ thư viện Cochrane (OR=1,27; khoảng tin cậy 95% là 1,03-1,56)(Das Svà cộng sự, 2008). 3. Những đối tượng được áp dụng kỹ thuật này: Hiện nay hỗ trợ phôi thoátmàng thường đượccác trungtâm hỗ trợ sinh sản trên thế giới thực hiện trong các trườnghợp sau: - Phụ nữ lớn tuổi - Màng zona (màng phôi) dày - Chuyển phôi trữ lạnh - Không có thai sau 2-3lần chuyểnphôi - Nồng độ FSH cơ bảncao. - IVM(In Vitro Maturation-Trưởngthànhtrứng nontrong ống nghiệm) - Thường qui(một số quan điểm áp dụng kỹ thuật này chotất cả các đốitượng làm thụ tinh trong ống nghiệm) Như vậy, các chuyên giahỗ trợ sinhsản cũng như nhữngcặp vợ chồng mongcon đã có thêm mộtchọn lựamới để cải thiện khả năngcó thaitrong những chu kỳ thụ tinh trongống nghiệm. Hỗ trợ phôi thoát màngbằng laserlà một kỹ thuật có khả năng tănghiệuquả điều trị, kỹ thuật không quá phứctạpvà mang tính ứngdụng cao. . Hỗ trợ phôi thoát màng có thể làm tăng tỷ lệ có thai cho những bệnh nhân thụ tinh trong ống nghiệm 1. Hiện tượng thoát màng của phôi: Trongmột chukỳ điều trị thụ tinh trong ốngnghiệm, bệnhnhânthường. làm thụ tinh trong ống nghiệm) Như vậy, các chuyên giahỗ trợ sinhsản cũng như nhữngcặp vợ chồng mongcon đã có thêm mộtchọn lựamới để cải thiện khả năngcó thaitrong những chu kỳ thụ tinh trong ng. những bệnhnhân lớn tuổi (Hsieh và cộngsự, 2002) cho thấy khixét về tỷ lệ làm tổ (8,2 với 3,8%)cũng như tỷ lệ thai( 31,8với 16,1% )hỗ trợ thoát màngbằng laserbướcsóng 1,48<0,05). Hơn nữa ,hỗ trợ